氨基酸(amino acid, AA)含量测定试剂盒使用说明

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氨基酸(amino acid, AA)含量测定试剂盒使用说明

氨基酸(amino acid,AA)含量测定试剂盒使用说明分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC1570规格:50T/48S产品内容：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体×1瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1瓶（棕色），4℃避光保存。

临用前加入2mL无水乙醇，盖紧后充分混匀，再加入28mL蒸馏水混匀，避光保存。

试剂四：粉剂×1管，4℃避光保存。

临用前加10mL蒸馏水，充分溶解。

标准品：液体×1支，1μmol/mL标准液，4℃避光保存。

产品说明：动物肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官，故尿中氨基酸的变化最能反应肝、肾的生理状态。

另外，氨基酸还能反应灼伤、伤寒等方面情况。

植物体内氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。

氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应，产生蓝紫色化合物，在570nm有特征吸收峰；通过测定570nm吸光度，来计算氨基酸含量。

自备仪器及用品：台式离心机、水浴锅、紫外分光光度计、1ml玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、无水乙醇、冰和蒸馏水。

操作步骤:一、样品中AA提取：1.按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行室温匀浆，然后转移到1.5mL EP管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取15min；自来水冷却后，8000g，，4℃离心10min，上清液置冰上待测。

2.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

总氨基酸含量的测定方法

总氨基酸含量的测定方法测定总氨基酸含量，听上去是不是有点高大上？其实啊，这个过程就像做一道简单的家常菜，虽然听起来复杂，做起来却很有趣。

氨基酸是蛋白质的基本构件，想想看，咱们身体里那一堆营养物质，都是要靠它们搭建起来的。

很多时候，我们吃的食物，里头的氨基酸含量就能告诉我们，这东西到底能不能补充能量，能不能让我们更强壮。

咱们就来聊聊，怎么测定这些小家伙的含量。

准备工作很重要。

你得有样本，可能是牛肉、豆腐或者鸡蛋，反正都是能吃的东西。

咱们就需要一些试剂。

这些试剂呢，像是厨房里的调料，少了可不行。

常见的有氢氧化钠、盐酸，还有一些专门用来显色的试剂，像那种喝了会变色的饮料，嘿嘿，效果可是杠杠的。

要是没这些东西，那就像做菜没盐，味道就不对了。

然后，就是要进行提取。

简单来说，就是把氨基酸从食物里“榨”出来。

这个步骤得小心翼翼，像煮汤时要控制火候，太大了会糊，太小了则不够味。

把样品放进溶液里，加热搅拌，让氨基酸慢慢溶解。

就像在调和一杯鸡尾酒，直到所有的成分都融合在一起。

提取出来的液体就是你的“氨基酸汤”，记得把它过滤掉杂质，留好清汤。

咱们得进入显色阶段。

这个环节可神奇了，氨基酸遇到试剂，颜色会变得好看得很。

不同的氨基酸有不同的显色反应，就像不同的花朵在阳光下各自盛开。

我们可以用分光光度计来测量这些颜色的深浅，深色就代表氨基酸含量高，浅色那就是少得可怜。

这个过程就像在给食物上色，看着渐渐变得绚丽，心里也是美滋滋的。

不过，数据出来后可别急着欢呼。

我们需要做一些计算，把颜色的强度换算成氨基酸的浓度。

这就像在餐馆里结账，得把每样菜的价格加在一起，才能知道最终要花多少银子。

根据标准曲线，把测得的值代入，最终就能得到你食物里的氨基酸总含量。

简简单单，经过一番“烹饪”，就能得到一份“营养报告”。

记得记录结果，像在做日记一样。

无论你测得的结果是高还是低，都代表着不同的营养价值。

要是高，那可得好好利用，加入日常饮食；要是低，也别气馁，可以考虑多吃些高蛋白的食物，像是肉类、鱼类、豆类，保证你身体里的氨基酸不缺。

：饲料添加剂安全使用规范(2021修订版)

附件：饲料添加剂平安使用标准注1：由于测定方法存在精密度和准确度的问题，局部维生素类饲料添加剂的含量规格是范围值，假设测量误差为正，那么检测值可能超过100%，故局部维生素类饲料添加剂含量规格出现超过100%的情况。

钴：来自以下化合物硫酸钴Cobalt sulfateCoSO4CoSO4·H2OCoSO4·7H2O化学制备≥≥≥≥≥≥养殖动物牛、羊0.1~0.3鱼类0~12—氯化钴CobaltchlorideCoCl2·H2OCoCl2·6H2O化学制备≥≥≥≥—乙酸钴Cobalt acetateCo(CH3COO)2Co(CH3COO)2·4H2O化学制备≥≥≥≥牛、羊0.1~0.4鱼类—碳酸钴CobaltcarbonateCoCO3化学制备≥≥反刍动物牛、羊—硒：来自以下化合物亚硒酸钠SodiumseleniteNa2SeO3化学制备≥〔以干基计〕〔以干基计〕养殖动物畜禽0.1~0.3鱼类使用时应先制成预混剂，且产品标签上应标示最大硒含量酵母硒Seleniumyeast complex酵母在含无机硒的培养基中发酵培养，将无机态硒转化生成有机硒发酵生产—有机形态硒含量≥产品需标示最大硒含量和有机硒含量,无机硒含量不得超过总硒的2.0%铬：来自以下化合物烟酸铬Chromiumnicotinate化学制备≥≥生长肥育猪饲料中铬的最高限量是指有机形态铬的添加限量吡啶甲酸铬Chromiumtripicolinate化学制备≥常量元素化合物通用名称化合物英文名称化学式或描述来源含量规格,%适用动物在配合饲料或全混合日粮中的推荐添加量,%在配合饲料或全混合日粮中的最高限量,%其他要求以化合物计以元素计。

氨基酸使用说明书LC98-AAA()

北京温分公司LC98-I AAA 氨基酸分析系统北京温分分析仪器技术开发有限公司第1章简介1.1 LC98-I AAA氨基酸分析系统氨基酸是构成蛋白质的基本单位，是生物、医药、卫生、农牧业、食品、饮料及饲料等行业生产和科研中必须的分析测试项目，氨基酸的定性和定量分析必将成为企业的必备检测项目。

由于氨基酸种类较多，结构接近，大部分没有紫外或荧光响应，使得氨基酸分析一直是高效液相色谱领域较难解决的问题之一。

LC98-I AAA氨基酸分析系统采用二元梯度高效液相色谱系统及专用C18色谱柱使18种氨基酸得到很好的分离，采用紫外检测器完成氨基酸的检测。

1.2 原理反相色谱具有分离效率高、应用范围广、性能稳定等特点，是HPLC中应用最为广泛的分离模式，但是由于氨基酸带电荷，在反相色谱柱上保留弱。

用离子对试剂虽然能够在一定程度上增加保留，但是选择性差异小，分离比较困难；同时氨基酸的检测也是难点。

目前最为常用的氨基酸分析方法是在分离之前使氨基酸与带疏水性基团的衍生试剂反应生成利于在反相柱上保留、分离的化合物，经柱分离后，通过相应的检测器定性、定量。

氨基酸与苯异硫氰酸（PITC）的反应LC98-I AAA氨基酸分析系统采用苯异硫氰酸（PITC）作为柱前衍生的衍生试剂，在弱碱性条件下，氨基酸的α-氨基可与苯异硫氰酸（phenylisothiocyanate, PITC）反应生成相应的苯氨基硫甲酰氨基酸（简称PTC-氨基酸）。

在酸性条件下，PTC-氨基酸环化形成在酸中稳定的苯乙内酰硫脲氨基酸（phenylthiohydantoin，简称PTH）。

蛋白质多肽链N-末端氨基酸的α-氨基也可有此反应，生成PTC-肽，在酸性溶液中释放出末端的PTH-氨基酸和比原来少一个氨基酸残基的多肽链（图1）。

PTH-氨基酸在酸性条件下极稳定并可溶于乙酸乙酯，用乙酸乙酯抽提后，经高压液相就可以确定肽链N-末端氨基酸的种类。

该法的优点是可连续分析出N端的十几个氨基酸。

复方氨基酸注射液（14AA）8.5%中控测定操作规程

复方氨基酸注射液（14AA）8.5%半成品检验操作规程1.目的：建立复方氨基酸注射液（14AA）8.5%半成品检验操作规程，便于检验人员规范操作。

2.范围：适用于复方氨基酸注射液（14AA）8.5%半成品的检验。

3.责任：车间中控检验员对实施本规程负责。

4.程序：4.1 pH值测定4.1.1测定范围：5.5～5.84.1.2测定方法依法对仪器进行校正后，用纯化水冲洗电极，用滤纸吸干，将电极插入被测溶液中，待电极反应平衡，即为供试液的pH值，应反复测定两次，取平均值。

4.2 α-氨基氮含量测定4.2.1测定范围：应为标示量的96.0%～101.0%4.2.2仪器、试剂和试液4.2.2.1氢氧化钠液（0.1mol/L）：称4g氢氧化钠，加水使溶解成1000ml，即得。

4.2.2.2盐酸液（0.1mol/L）：量取9ml浓盐酸，加水稀释成1000ml，即得。

4.2.2.3甲醛：AR级4.2.2.4氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）：由质检科提供4.2.2.5 pH酸度计、搅拌器、搅拌子4.2.3操作方法4.2.3.1先取甲醛溶液10ml，置于50ml烧杯中，内放搅拌子，放在搅拌器上，开动搅拌器，将pH电极置于烧杯中，用0.1mol/L氢氧化钠液和0.1mol/L盐酸液调节甲醛pH 到9.0。

4.2.3.2精密量取本品3ml，加水25ml，摇匀；内放搅拌子，开动搅拌器，将pH电极置于烧杯中，用0.1mol/l氢氧化钠液和0.1mol/L盐酸液调节pH至7.0。

4.2.3.3将已调节好的甲醛（pH=9.0）溶液倒入上述烧杯内，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液pH为9.0，即得。

4.2.4计算公式：α-氨基氮为标示量%= F×V×1.401×100% 3×9.88式中：F-氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）校正因子，V-消耗氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）毫升数，1.401-每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于α-氨基氮的毫克数，3×9.88-3ml复方氨基酸注射液（14AA）8.5%中含α-氨基氮的理论毫克数。

AMM氨测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法)产品说明书

AMM氨测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法)产品说明书AMM氨测定试剂盒（谷氨酸脱氢酶法）一、产品概述AMM氨测定试剂盒是一种基于谷氨酸脱氢酶法的高精度、高灵敏度氨测定试剂盒，用于测量生物体内氨浓度。

本试剂盒可广泛应用于医学、生物科学研究以及临床实验室等领域。

其准确度和可靠性得到了专业机构的认可。

二、试剂组成1. 测定液：包含谷氨酸脱氢酶、NADH（二磷酸腺苷二核苷酸）、缓冲液等。

2. 校准液：含有已知浓度的氨溶液，用于校准仪器。

3. 样本提取液：用于提取样本中的氨，使其能够反应产生信号。

三、试剂储存和稳定性1. 试剂的储存温度应为2-8摄氏度，避免阳光直接照射。

2. 开封后的试剂应储存在2-8摄氏度，并尽快使用。

3. 严禁冷冻试剂，以免造成试剂失效。

4. 正确存放条件下，试剂的稳定期为12个月。

四、仪器要求本试剂盒适用于多种型号的分光光度计，要求光敏器件工作稳定、精密度高，峰值吸光度范围在340-380nm之间。

五、操作步骤1. 准备工作a. 取出试剂，放置于室温下30分钟，使其回温到室温。

b. 将待检样本从冰箱取出后，回温至室温。

c. 开机并调整光源和光敏器件，确保仪器正常工作。

2. 样本制备a. 取适量样本加入样本提取液中，按照规定的比例稀释，混匀待用。

3. 样本测定a. 取适量测定液加入试管或微孔板中，作为反应底物。

b. 加入适量样本提取液，搅拌均匀。

c. 读取反应开始后一段时间内的吸光度值。

d. 将读数输入分光光度计或计算机，根据标准曲线计算样品中氨的浓度。

4. 结果判定a. 根据标准曲线上的吸光度值和已知浓度的校准液所对应的吸光度值，计算样品中氨的浓度。

b. 根据实验需求，判断测量结果的可靠性和准确性。

六、注意事项1. 操作前请阅读使用说明书。

2. 所有操作都必须在规定的温度下进行，以保证试剂和样本的稳定性。

3. 使用量杯、试管和微孔板等器具时，应保证其清洁干燥，以免发生干扰现象。

4. 实验过程中应避免直接接触皮肤和吸入试剂，如有意外接触，请立即清洗。

氨基酸总量的测定

氨基酸总量的测定(茚三酮比色法)一、方法原理：氨基酸的游离氨基与水合茚三酮作用后，可产生二酮茚一二酮茚胺的取代盐等蓝紫色化合物，其颜色深浅与氨基酸含量成正比，据此可以比色测定氨基酸含量。

二、试剂：1．2％茚三酮溶液：1g茚三酮(C9H403·2H2O)溶于25ml热水中，加入40mg氯化亚锡；(SnCl2·2H2O)，搅拌溶解，滤去残渣，滹液放在冷暗处过夜，用水定容为50ml，保存声冷暗处。

如茚三酮有微红色，配成的溶液也带红色，将影响比色测定，需将茚三酮重结晶后再用方法是：取5g茚三酮溶于20ml热水中，加入0.2g活性炭，轻轻摇动，放三十分钟后过滤，滤液置冰箱中过夜，次日过滤，用1ml冷水淋洗结晶，然后放在干燥器中干燥，装瓶保存。

2。

磷酸盐缓冲液(pH8.0)：①1／15mol/l磷酸二氢钾溶液：取KH2P04 0.9070g溶于lOOml水中。

②1／15mol/l磷酸氢二钠溶液：取磷酸氢二钠(Na2HP04·12H20)23.876g溶于水，加水至1000ml。

取①50ml与②95ml混匀即得。

3．10％醋酸：取lOml冰醋酸加水至lOOml。

4，氨基酸标准溶液(200ppm)：称取干燥的氨基酸(白氨酸，或其它的氨基酸)0.2000g溶解于水，定容为1000ml。

三、仪器：水浴，721分光光度计。

四、操作步骤：(一)标准曲线绘制：分别吸取氨基酸标准溶液(200ppm)0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml各置于25ml容量瓶中,加水补充至4.0ml，各加入缓冲液lml，加入茚三酮lml，摇匀。

置沸水浴中加热15分钟，取出迅速冷却至室温，—用水定容。

放置15分钟，在570nm波长下测定，绘制标准曲线。

氨基酸浓度分别为0，4.0，8.0，12.0，16.0，20.Oppm。

(二)样品测定：l提取样品：称取1.0 ~2.0g植物样品(新鲜样或干样)，加5m1 10％醋酸，在研钵中研碎，用水洗移入lOOml容量瓶，水定容，过滤到三角瓶中，取滤液测定。

氨基酸检测试剂盒（茚三酮比色法）

氨基酸检测试剂盒（茚三酮比色法）氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮比色法)简介：氨基酸(Amino acid ，AA)是组成蛋白质的基本单位，也是蛋白质的分解产物。

动物肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官，氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮比色法)(Amino Acid Assay kit)检测原理是在弱酸条件下，氨基酸与茚三酮共热情况下，能定量的产生蓝紫色的二酮茚胺(又称Ruhemans 紫)，其吸收峰在波长570nm 处，在一定范围内颜色深浅(即吸光度)与氨基酸浓度成正比。

该试剂盒主要用于检测血清、尿液、植物组织、食品、药品等中的总游离氨基酸含量。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、准备样品：①植物样品：取新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取，按植物组织：AA Lysis buffer=的比例加入AA Lysis buffer 匀浆或研磨，用去离子水稀释至，混匀，用滤纸过滤，滤液即为氨基酸粗提液，4℃保存备用。

②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存，用于氨基酸的检测。

③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要用AA Lysis buffer 进行适当匀浆，离心5min ，留取上清即为氨基酸粗提液，4℃保存备用，用于氨基酸的检测。

④高活性样品：如果样品中含有较高浓度的氨基酸，可以使用AA Lysis buffer 进行恰当的稀释。

2、配制茚三酮工作液: 取适量的茚三酮显色液、AAAssaybuffer ，按茚三酮显色液：AAAssaybuffer=的比例混合，即为茚三酮工作液。

4℃避光密闭保存，2周有效。

3、配制维生素C 工作液: 取出1支维生素C ，准确溶解于10ml 去离子水，混匀。

4℃预冷备用。

-20℃保存1周有效。

注意：该试剂盒提供的维生素C 及其配制的工作液为过编号名称TC2153 100T Storage试剂(A): 氨基酸标准(50μg/ml) 1ml 4℃ 试剂(B): AALysisbuffer 250ml RT 试剂(C): 茚三酮显色液120ml RT 避光试剂(D):AAAssaybuffer 10.5ml RT 试剂(E): 维生素C 2支RT 使用说明书1份量。

氨基酸测定方法

氨基酸测定方法一、引言氨基酸是构成蛋白质的基本单位，因此对于蛋白质的研究和分析，氨基酸的测定是非常重要的。

目前，常用的氨基酸测定方法主要有色氨酸法、二硫化物法、硫酸铜法、乙醇胺法、二甲基乙二胺法等。

本文将从样品处理、试剂配制、实验步骤和数据处理等方面详细介绍氨基酸测定方法。

二、样品处理1. 样品收集：选择适当的组织或液体样品进行采集，如血清、尿液等。

2. 样品预处理：根据不同样品特点进行预处理，如尿液中可加入少量硝酸使其变为无色透明状态。

3. 样品保存：在低温条件下保存样品以避免其蛋白质降解。

三、试剂配制1. 氢氧化钠溶液：取固体氢氧化钠加入去离子水中搅拌至完全溶解。

2. 硫代乙酰胺溶液：取固体硫代乙酰胺加入去离子水中搅拌至完全溶解。

3. 氨基酸标准溶液：将各种氨基酸按照一定比例加入去离子水中，调节pH值至7.0左右。

4. 还原剂：取固体羟肟酸钠加入去离子水中搅拌至完全溶解。

四、实验步骤1. 样品处理：取适量的样品加入硫代乙酰胺溶液中，混合均匀后放置于60℃恒温水浴中反应20分钟。

2. 加入还原剂：将还原剂加入反应体系中，混合均匀后再次放置于60℃恒温水浴中反应20分钟。

3. 加入氢氧化钠溶液：将氢氧化钠溶液加入反应体系中，混合均匀后放置于60℃恒温水浴中反应30分钟。

4. 加入试剂：取适量的氨基酸标准溶液和待测样品分别加入反应体系中，混合均匀后放置于室温下静置10分钟。

5. 测定吸光度：使用分光光度计在570nm波长下测定反应体系的吸光度值。

五、数据处理1. 绘制标准曲线：将不同浓度的氨基酸标准溶液分别测定吸光度值，绘制标准曲线。

2. 计算待测样品中氨基酸含量：根据待测样品的吸光度值和标准曲线计算其中氨基酸含量。

3. 数据统计分析：对实验数据进行统计分析，如平均值、方差等。

六、注意事项1. 实验过程中要注意卫生和安全，避免试剂进入眼睛和口腔。

2. 样品处理时要避免过度稀释或过度浓缩，以保证实验结果的准确性。

AMM氨测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法)产品说明书

氨测定试剂盒（谷氨酸脱氢酶法）说明书【产品名称】通用名称：氨测定试剂盒（谷氨酸脱氢酶法）英文名称：Blood ammonia Assay Kit（AMM）【包装规格】R1：2⨯60ml 、R2：2⨯15ml ；R1：2⨯40ml 、R2：2⨯10ml；R1：1⨯40ml 、R2：1⨯10ml；R1：2⨯20ml、R2：2⨯5ml；校准品(选配):2⨯2ml(水平1:1⨯2ml;水平2:1⨯2ml)。

【预期用途】用于体外定量测定人血浆中氨的含量。

临床上主要用于肝性脑病的辅助诊断。

【检验原理】过量的α-酮戊二酸、NADH 和足量谷氨酸脱氢酶（GLDH)存在的条件下，NADH 转变成NAD+,在340nm 监测吸光度下降速率与样本中氨的含量成正比。

GLDHNH 4++α-酮戊二酸+NADH→谷氨酸+NAD ++H2O【主要组成成分】由试剂R1、R2和校准品组成。

试剂R1：谷氨酸脱氢酶(GLDH)3.5KU/L、α-酮戊二酸（C 5H 6O 5）6.55mmol/L、氯化钠（NaCl）140mmol/L；试剂R2：叠氮钠（NaN 3)0.1%、还原型辅酶（NADH)1.1mmol/L；校准品：含醋酸铵的水溶液。

校准品可溯源至贝克曼血氨参考品439770，注：浓度见每批瓶标示。

不同批号试剂盒中各组分不可以互换。

【储存条件及有效期】试剂和校准品在2℃～8℃无腐蚀性气体中避光储存，若无污染，可稳定至失效期。

有效期365天。

试剂和校准品开瓶后2℃～8℃可稳定7天。

备注：生产日期及失效日期见外盒或瓶标签。

【适用仪器】日立7180、奥林巴斯AU680、贝克曼LX-20/DXC800、迈瑞BS-380、朕江T900全自动生化分析仪。

【样本要求】1、静脉采血，EDTA 抗凝血浆样本。

2、样本采集后需尽快分离，如不能做到这一点，应该将收集来的血样立即放在冰块上或放置冰箱内，并且在30分钟内离心，分离后的血浆请置于2℃～8℃并在2小时内进行测定。

AccQ-Tag法测氨基酸含量SOP

AccQ-Tag法测氨基酸含量1.所需设备及试剂1.1.设备：a.天平（精度0.1mg）；b.pH计（精度0.01级）；c.单标线吸管（50ml）；d.容量瓶（500ml）；e.溶剂过滤器及滤膜（0.45µm）；f.试管（1.5×15cm，1.5×10cm）；g.样品管（6×50mm）；h.微量进样器（10µl）；i.微量可调移液器（20µl，100µl，1000µl）及吸头；j.旋涡混匀器；k.烘箱（55℃）；l.HPLC系统及AccQ-Tag柱。

1.2.试剂：a.超纯水（≥18MΩ∙cm）；b.乙腈（HPLC级）；c.Waters AccQ-Tag流动相A浓液d.Waters氨基酸水解液标准（H）；e.Waters AccQ-Fluor试剂盒（包括硼酸缓冲液1、衍生剂粉2A、稀释液2B）。

2.流动相A制备：吸取50ml Waters AccQ-Tag流动相A浓液，放至500ml容量瓶中，加超纯水至刻度，用0.45µm滤膜过滤后备用。

3.衍生3.1.标定标准制备3.1.1.1mmol/L色氨酸标准液：称取色氨酸（生化试剂）20.4mg，加超纯水溶解至100ml。

3.1.2.含色氨酸的标定标准：取1支Waters氨基酸水解液标准，打开后吸取1ml，放至一支干净的1.5×15cm试管中，加2.5ml色氨酸标准液，6.5ml超纯水，旋涡混匀，每支Eppendorf 管分装1ml备用。

（此标准含有的色氨酸的浓度与其它氨基酸一样，为0.25mmol/L。

）3.1.3.10倍稀释后的标准可在–20℃保存1个月。

剩余的氨基酸水解液标准可在–20℃保存3个月。

未启封的氨基酸水解液标准可在4℃保存1年。

使用–20℃保存的标准应充分解冻并混匀。

3.2.衍生试剂制备3.2.1.将烘箱预热至55±1℃；3.2.2.取一瓶衍生剂粉2A，轻轻敲动以确保打开前所有粉末落在瓶底；3.2.3.吸取1ml稀释液2B并弃去以冲洗一个干净的微量移液吸头；（警告：稀释液2B为乙腈，可燃且有毒，参考安全数据表。

6.氨测定试剂盒说明书

氨测定试剂盒（谷氨酸脱氢酶法）说明书【产品名称】通用名称：氨测定试剂盒（谷氨酸脱氢酶法）英文名称：AMM Determination Kit【包装规格】试剂1a/试剂1b/试剂2：80ml×3/16ml×3/16ml×3、80ml×1/16ml×1/16ml×1、60ml×2/12ml×2/12ml×2、60ml×1/12ml×1/12ml×1、45ml×4/9ml×4/18ml×2、45ml×1/9ml×1/9ml×1、20ml×1/4ml×1/4ml×1【预期用途】本试剂用于体外定量测定人血清中氨的含量，临床上主要用于肝性脑病的辅助诊断。

【检验原理】在LDH的作用下，血清中干扰氨（AMM）测定的丙酮酸在预反应中被除去。

AMM在GLDH的作用下与α-KG和NADH反应，与同样处理的校准液比较，可计算出血清中AMM的含量。

【主要组成成分】试剂1a Tris缓冲液50mmol/L pH 8.0、乳酸脱氢酶（LDH）2KU/L试剂1b α-酮戊二酸（α-KG）18mmol/L、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）0.18mmol/L试剂2 谷氨酸脱氢酶（GLDH）25KU/L【储存条件及有效期】1.试剂在2~8℃密封避光保存，有效期12个月。

2.已开瓶试剂注意避免污染，试剂1a与试剂1b以5:1比例混合，形成应用试剂1，2~8℃可稳定4天。

【适用仪器】本产品适用于所有开放式的半自动或全自动生化分析仪。

【样本要求】新鲜血清样本：用真空采血管静脉采血，采集后尽快（2h内）分离，避免溶血，送检应及时，注意密封，将样本置于冰屑或冰水混合物中并须保证样本与制冷物充分接触；不能及时检测应于2~8℃冰箱保存，在2h内不能完成或者需贮存2h以上，应于-20℃保存，可保存24h；保持密封，避免反复冻融。

测定氨基酸的方法以及试剂

一采用氨基酸自动分析仪测定氨基酸1.氨基酸测定原理：食物蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸，经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后，与茚三酮溶液产生颜色反应，再通过分光光度计比色测定氨基酸含量。

2.测定氨基酸所用仪器:真空泵;恒温干燥箱;水解管：耐压螺盖玻璃管或硬质玻璃管，体积20～30mL。

用去离子水冲洗干净并烘干;真空干燥器(温度可调节);氨基酸自动分析仪。

3.测定氨基酸所用试剂及其配制方法:3.1试剂：全部试剂除注明外均为分析纯，实验用水为去离子水。

浓盐酸(优级纯);苯酚(须重蒸馏); 混合氨基酸标准液(仪器制造公司出售)：0.00250mol/L; 不同pH值柠檬酸钠缓冲液；氢氧化锂(LiOH·H2O)；冰乙酸(优级纯)；二甲基亚砜(C2H6OS)；水合茚三酮(C9H4O3·H2O)；还原茚三酮(C18H10O6·2H2O);NaOH；高纯氮气（纯度99.99%）；冷冻剂：市售食盐与冰按1∶3混合。

3.2试剂配制方法：3.2.1. 6mol/L盐酸∶浓盐酸(3.1)与水1∶1混合而成。

3.2.2. pH2.2的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠(Na3C6H5O7·2H2O)和16.5mL浓盐酸加水稀释到1000mL，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至2.2。

pH3.3的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和12mL浓盐酸加水稀释到1000mL，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至3.3。

pH4.0的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和9mL浓盐酸加水稀释到1000mL，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至4.0。

pH6.4的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和46.8g氯化钠(优级纯)加水稀释到1000mL，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至6.4。

3.2.3. 茚三酮溶液pH5.2的乙酸锂溶液：称取氢氧化锂(LiOH·H2O)168g，加入冰乙酸(优级纯)279mL，加水稀释到1000mL，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至5.2。

氨基酸测定仪测定操作规程

氨基酸测定仪测定操作规程1. 引言本操作规程旨在指导使用氨基酸测定仪进行氨基酸测定的操作流程，并确保准确、可靠地测定样品中氨基酸的含量。

2. 仪器和试剂准备•氨基酸测定仪•相应的试剂盒和标准品•电子天平•移液器和移液枪•显微镜和玻璃片3. 样品处理1.准备样品：选择需要测定氨基酸含量的样品，并记录每个样品的相关信息，如样品编号、来源等。

2.样品预处理：根据样品的特性，选择合适的预处理方法，如样品酶解、样品脱蛋白等，以保证测定结果的准确性。

3.样品稀释：根据测定方法的要求，将样品适当稀释，以确保在仪器检测范围内。

4. 仪器设置1.开启仪器：按照仪器的使用说明，正确开启氨基酸测定仪，并进行初始化操作。

2.设置参数：根据测定方法的要求，设置仪器的相应参数，如测定波长、积分时间等。

3.校准仪器：使用标准品进行仪器的校准，确保仪器的准确性和精确度。

5. 操作步骤1.取样和试剂加入：使用移液器或移液枪，取出预处理好的样品，加入试剂，并记录试剂的加入量。

2.反应和测定：将样品和试剂混合均匀，然后放入氨基酸测定仪中进行反应和测定。

确保每次测定都按照相同的时间进行，以保证结果的可比性。

3.数据记录与分析：根据仪器的测定结果，记录每个样品的氨基酸含量，并进行数据分析，如平均值、标准差等。

6. 结果计算与报告1.结果计算：根据仪器的测定结果和标准品的浓度，计算出样品中每种氨基酸的含量。

这部分可以使用计算软件或者自行编写程序进行计算。

2.报告撰写：根据实验结果，撰写相应的实验报告，并进行结果解释和结论汇总。

7. 安全注意事项•在操作过程中，严格遵守实验室的安全操作规程，佩戴实验室必要的防护用品。

•注意试剂的储存和使用方法，避免接触皮肤和吸入。

•避免样品交叉污染和仪器污染，每次操作后清洗仪器和工作台面。

8. 管理和维护1.仪器管理：定期对仪器进行维护和保养，保持仪器的良好状态。

如清洁仪器外壳、调试仪器等。

2.试剂管理：根据试剂的要求进行存储和保管，防止试剂过期或受污染。

Agilent 5063-6588 氨基酸试剂盒 SDS说明书

Amino Acids Kit, Part Number 5063-6588*************(24小时)化学品安全技术说明书GHS product identifier 应急咨询电话（带值班时间）::供应商/ 制造商:安捷伦科技贸易（上海）有限公司中国（上海）外高桥自由贸易试验区英伦路412号（邮编:200131)电话号码： 800-820-3278传真号码: 0086 (21) 5048 2818Amino Acids Kit, Part Number 5063-6588化学品的推荐用途和限制用途无资料。

无资料。

L-Norvaline 无资料。

L-Glutamine 无资料。

L-Asparagine无资料。

L-4-Hydroxyproline无资料。

3,3′-Dithiodipropionic Acid5062-2479FMOC reagent 10 ampoules 1ml ea for AAA5061-3337OPA reagent, 10 mg/ml, 6 ampoules 5061-3335AA, std 10pmol 10/PK 5061-3334AA, std 25pmol 10/PK5061-3333AA, standard 100PMOL 10/PK 5061-3332td 1nmol 10/PK5061-3330AA, standard 250PMOL 10/PK5061-3331部件号:部件号（化学品试剂盒）:5063-6588安全技术说明书根据 GB/ T 16483-2008 和 GB/ T 17519-2013GHS化学品标识:氨基酸试剂盒，部件号 5063-6588推荐用途Sarcosine1 g L-Trytophan1 g -L-Norvaline1 g -L-Glutamine1 g -L-Asparagine1 g -L-4-Hydroxyproline1 g5062-24793,3′-DithiodipropionicAcid1 x 5 g 5061-3337FMOC reagent 10 ampoules1ml ea for AAA10 x 1 ml 5061-3335OPA reagent, 10 mg/ml, 6ampoules6 x 1 ml 5061-3334AA, std 10pmol 10/PK 10 x 1 ml 5061-3333AA, std 25pmol 10/PK 10 x 1 ml 5061-3332AA, standard 100PMOL10/PK10 x 1 ml 5061-3330td 1nmol 10/PK10 x 1 ml 5061-3331AA, standard 250PMOL10/PK 10 x 1 ml:物质或混合物的分类根据 GB13690-2009 和 GB30000-2013紧急情况概述固体。

总氨基酸测定试剂盒说明书

总氨基酸测定试剂盒说明书一、测定原理：铜离子（Cu 2+）能与各种氨基酸络合产生蓝绿色络合物，在一定波长下颜色的深浅与总氨基酸的含量成正比，故可以用可见光分光光度计测其吸光度，通过换算得到总氨基酸含量。

二、试剂的组成与配制：（80T/78样）试剂一：粉剂×1支，4℃保存6个月。

试剂二：液体5ml×1瓶，4℃保存6个月。

氨基酸反应液的配制：将试剂一加双蒸水至160ml，充分混匀成蓝色混悬液，再缓慢滴加试剂二，边滴边搅至混悬液全部转换成淡蓝色透明溶液为止，4℃保存（粉剂较难溶解，试剂二滴加完后还需室温搅拌混匀半小时以上才能溶解完全）。

试剂三：粉剂×1支，4℃保存6个月。

氨基酸显色剂配制：将试剂三加水至80ml 充分混匀。

（注意：有腐蚀性，配制时勿碰皮肤。

）试剂四：甘氨酸标准品75.07mg/支×6支，4℃保存6个月。

50mmol/L 甘氨酸标准溶液的配制：将75.07mg 的甘氨酸标准品溶于20ml 双蒸水中，充分混匀，现用现配。

试剂五：液体100ml×1瓶，4℃保存6个月。

三、操作步骤：（一）、尿液的测定：1、操作表：空白管标准管测定管双蒸水（ml）1 50μmol/ml 氨基酸标准液（ml）1 尿液（ml） 1 氨基酸反应液（ml）2 22旋涡混匀氨基酸显色剂（ml）111混匀，3500转/分离心10分钟，取上清液于650nm 处，1㎝光径，双蒸水调零比色。

2、计算公式： (/)(50/)OD OD OD OD mol ml mol ml μμ−=××−尿中T-AA含量样本测试前标准品浓度测定值空白值标准值空白值稀释倍数3、计算举例：取1ml 尿液按操作表进行检测，测得空白管吸光度为0.008，标准管吸光度为0.310，测定管吸光度为0.189，则计算结果为：0.1890.00850129.967/0.3100.008(/)mol ml mol ml μμ−=××=−尿中T-AA含量（二）、血清（浆）的测定：1、操作表：空白管标准管测定管双蒸水（ml）0.3 50μmol/ml 氨基酸标准液（ml）0.3 血清（浆）（ml） 0.3 试剂五（ml） 1.2 1.2 1.2 充分混匀，3500转/分离心10分钟取1ml 上清待测。

氨基酸的含量测定方法

氨基酸的含量测定方法
氨基酸的含量可以用不同的方法进行测定，以下是其中几种常用的方法：
1. 紫外吸收法（UV法）：氨基酸分子中存在芳香族环和烯烃键，可以吸收紫外光，根据吸收的强度来确定氨基酸的浓度。

2. 高效液相色谱法（HPLC法）：这是一种常用的测定氨基酸含量的方法，通过将样品中的氨基酸溶解后注入液相色谱仪中，利用氨基酸在不同条件下的保留时间和峰面积来测定其含量。

3. 伯里特法：伯里特试剂能与氨基酸发生比色反应，该方法适用于测定含有酪蛋白、皮质素等色泽较重的氨基酸的含量。

4. 显色法：该方法将氨基酸和特定试剂反应，生成显色产物，根据产物的颜色深浅来测定氨基酸含量。

常用的显色试剂有二。

氨基酸含量计算公式(氨基酸占鲜样、干样、蛋白、蛋白氮的比例计算公式)

氨基酸含量计算公式
——氨基酸占鲜样、干样、蛋白、蛋白氮的比例计算公式
说明
• 必须知道样品水分含量； • 粗蛋白在鲜样中含量、粗蛋白在干样中含量，二者必须知道其一； • 某种氨基酸占鲜样的比例、某种氨基酸占干样的比例、某种氨基酸占蛋白的比例、某种氨基酸占蛋白氮的比例，四者必须知道其一。
氨基酸含量计算公式——小表格Ⅰ
项目样品水分含量yz1x100zy1x100氨基酸aminoacidsaa异亮氨酸ile80105010180100亮氨酸leu80105018010050赖氨酸lys苏氨酸thr75156015175100缬氨酸val75156017510060色氨酸trp蛋氨酸胱氨酸metcys苯丙氨酸酪氨酸phetyr小表格续接上表项目某种氨基酸占鲜样的比例a或ag100g某种氨基酸占干样的比例b或bg100g某种氨基酸占蛋白的比例c或cg100g某种氨基酸占蛋白氮的比例dmgg计算公式ab1x100ba1x100cbz100dc625day6251000dbz6251000氨基酸aminoacidsaa异亮氨酸ile0630618010063501003756625亮氨酸leu06318010063501003756625赖氨酸lys苏氨酸thr041604175100831660100166783625缬氨酸val041617510016831660100166783625色氨酸trp蛋氨酸胱氨酸metcys苯丙氨酸酪氨酸phetyr某种氨基酸占鲜样的比例a或ag100gab1x100ba1x100
项目计算公式氨基酸Amino acids AA 异亮氨酸(Ile) 亮氨酸(Leu) 赖氨酸(Lys) 苏氨酸(Thr) 缬氨酸(Val) 75 75 15 60＝15/(1－75/100) 15＝60×(1－75/100) 60 80 80 10 50＝10/(1－80/100) 10＝50×(1－80/100) 50 样品水分含量 (Ｘ％) Ｘ粗蛋白在鲜样中含量 (Ｙ％) 粗蛋白在干样中含量 (Ｚ％) Ｙ＝Ｚ×(1－Ｘ/100) Ｚ＝Ｙ÷(1－Ｘ/100)

氨基酸检测与加标实验方法

氨基酸检测方法及加标回收实验一、试剂：1、6mol/L盐酸溶液：500ml盐酸（浓度≥36%，优级纯）加水稀释至1000ml混匀。

2、ph=2.2柠檬酸钠缓冲液：取19.6g柠檬酸钠加入500ml水溶解，加入16.5ml盐酸，用水稀释至1000ml混匀，用6mol/L盐酸溶液或500g/L氢氧化钠溶液调节PH至2.2。

注：PH=2.2柠檬酸钠缓冲液可以用0.02mol/L盐酸代替。

二、样品处理1、称样：称样前应先测样品中的蛋白质含量，取试样使其蛋白质含量在10mg-20mg。

2、水解：试样中加入6mol/L的盐酸溶液10ml，封口放入恒温干燥箱110℃水解22-24小时后取出放凉。

注:1、一般水解过程需要先抽真空，因为蛋氨酸和半胱氨基酸会被氧化，测出来的值会偏小，其他氨基酸没有明显变化。

2、水解需要22-24小时，花费大量的时间，也可以用微波消解法快速完成：将备好的试样放入微波消解炉中，选择功率为（700-800）W，在150℃条件下，20分钟进行消解后，冷却。

3、烘干：过滤放凉的试样溶液到50ml容量瓶中，用蒸馏水少量多次冲洗水解管，最后定容至刻度，取1ml定容的试样放入干净的水解管中（也可以是其它容器），放入真空干燥箱中60℃真空抽干，加入1ml蒸馏水60℃真空抽干，重复1-2次。

注：抽真空烘干目的是赶酸，这一步可以在氮吹仪上60℃氮吹吹干，重复1-2次，可以节省大量时间。

4、检测：烘干后向试样中加入1-2ml配好的柠檬酸钠或0.02mol/L 的盐酸缓冲液，用注射器经过0.22um过滤头过滤到进样瓶中，上机检测。

三、加标回收实验在测定样品的同时，于同一样品的子样中加入一定量的标准物质进行测定，将其测定结果扣除样品的测定值，以计算回收率。

在这里我以检测小麦粉中各氨基酸的含量为例来说明。

1.计算蛋白质含量，由于在检测氨基酸前测定了小麦粉的蛋白质含量在12-13之间，所以取试样0.15g左右（精确到0.0001g）。

氨基酸总量(氨态氮)的测定

氨基酸总量(氨态氮)的测定一、目的与原理：1、了解掌握单指示剂与双指示剂甲醛滴定法测氨基酸总量的方法与原理：二、单指示剂甲醛滴定法：(一)原理：氨基酸具有酸、碱两重性质，因为氨基酸含有-COOH基显示酸性，又含有-NH2基显示碱性。

由于这二个基的相互作用，使氨基酸成为中性的内盐。

当加入甲醛溶液时，-NH2与甲醛结合，其碱性消失，破坏内盐的存在，就可用碱来滴定-COOH基，以间接方法测定氨基酸的量，反应式可能以下面三种形式存在。

（二）试剂(1)40％中性甲醛溶液，以麝香草酚酞为指示剂，用1N NaOH溶液中和。

(2)0.1％麝香草酚酞乙醇溶液。

(3)0.100N氢氧化钠标准溶液。

(三)操作步骤：称取一定量样品(约含20毫克左右的氨基酸)于烧杯中(如为固体加水50毫升)，加2-3滴指示剂，用0.1OON NaOH溶液滴定至淡蓝色。

加入中性甲醛20毫升，摇匀，静置1分钟，此时蓝色应消失。

再用0.1OON NaOH 溶液滴定至淡蓝色。

记录两次滴定所消耗的碱液毫升数，用下述公式计算计算：氨基酸态氮(％)=( N V×0.014×100)/W式中：N：NaOH标准溶液当量浓渡。

V：NaOH标准溶液消耗的总量(m1)W：样品溶液相当样品重量(克)。

0.014：氮的毫克当量。

三、双指示剂甲醛滴定法：(一)原理：与单色法相同，只是在此法中使用了两种指示剂。

从分析结果看，双指示剂甲醛滴定法与亚硝酸氮气容量法(此法操作复杂，不作介绍)相近单色滴定法稍偏低，主要因为单指示剂甲醛滴定法是以氨基酸溶液PH值作为麝香草酚酞的终点。

PH值在9.2，而双指示剂是以氨基酸溶液的PH 值作为中性红的终点，PH值为7.0，从理论计算看，双色滴定法较为准确。

(二)试剂：(1)三种试剂同单指示剂法(2)0.1％中性红(50％乙醇溶液)(三)操作步骤：取相同的两份样品，分别注入100毫升三角烧瓶中，一份加入中性红指示剂2-3滴，用0.100N NaOH溶液滴定终点(由红变琥珀色)，记录用量，另一份加入麝香草酚酞3滴和中性甲醛20毫升，摇匀，以0.100NNaOH 准溶液滴定至淡蓝色。