鸡白痢沙门氏菌O12特异性噬菌体的分离及生物学特性研究
鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验
１ ． ２ ． ７ 动物试验
将纯 培养的细菌接种 一 ｆＳ ｍｌ 营 养肉汤。
置 于３ ７ ℃培养２ ４ ｈ 。取２ ０ 只小 白 鼠，雌雄各 半 随机 分为
２ Ｎ ，试 验组 小 白鼠为１ ４ 只 ，腹腔 注射菌 液０ ． １ ｍｌ ／ 只 ；对 照组小 自鼠６ 只 ，注 射Ｄ Ｈ值为７ ． ６ 的生理盐水０ ． １ ｍｌ ／ 只 ，４ ｈ
关键词 鸡 白痢 沙 门氏 分离 鉴定 药敏 试验
中图分类号 ：￥ ８ ５ ２ ． ６ １
文 献标识码 ：Ａ
文章编号：１ ０ ０ ７ ． １ ７ ３ ３ （ ２ ０ １ ４ ） ０ １ － ０ ０ ｔ ２ ． ０ ３
酵管和 其他 生化反 应管 中 ，置 于３ ７ ＂ Ｃ温箱培养 ，每 曰观 察 ；采 用 沙 门 氏菌 诊 断 ｍ清 对 分 离 菌株 进 行ｊ ｆ 【 Ｌ 清 型鉴
取肺 组织进 行真 菌分 离培养 来分 离到任何 真菌 ；于
盲肠 内榆查到异刺线虫７ 条 ，ｆ肠道榆 查到绦虫ｌ 条 ，除此 之外 ，末见其他寄生虫和虫卵。 ３ ． ３ 分离菌株培养特性
特 征 。将细 菌 纯 培 养物 接 种 于 ｊ 糖 铁 琼 脂 ，３ ７ ＂ Ｃ培 养
２ ４ ｈ。
所。
养物分别用灭菌生理盐水冲洗 ，稀释 成浓度 为３ ｘ ｌ Ｏｔ ｅ ｆ ｕ ／ ｍｌ
的荫 液 ，吸取稀释 菌液 均匀涂 布 于普通平板 。室温 放置
５ ａｉ ｒ ｎ 后 ，分别 贴上 符 种药 敏 纸片 ，３ ７ ＂ Ｃ条件 下培 养 １ ６ ～
１ ８ ｈ ，观 察 并 测 量 抑 菌 环 大 小 。
鸡白痢杆菌的分离培养与致病性试验
鸡白痢杆菌的分离培养与致病性试验作者：谈明禄等来源：《当代畜禽养殖业》 2017年第5期谈明禄马芝祥青海省湟源县畜牧兽医站 812199摘要：鸡白痢是由鸡白痢沙门氏菌引起的雏鸡和火鸡的一种败血性传染病，雏鸡死亡率高[1]。
患病小鸡表现衰弱，发病急，死亡快。
病理变化特征是肝脏表面有“雪花样”坏死灶，肺脏形成灰白至灰黄色坏死性结节[2]。
关键词：鸡白痢沙门氏杆菌；鉴别诊断；分离培养；致病性试验1 材料与方法（1）试验材料。
病料选用湟源县东峡乡卢某所养的10只7日龄病死雏鸡和10只7日龄患病活雏鸡。
实验鸡选用10日龄海兰褐健康雏鸡,购自于湟源县种鸡场。
培养基为普通营养琼脂、营养肉汤、麦康凯琼脂、S.S.琼脂和鲜血琼脂培养基，均按常规方法配制。
（2）发病鸡群情况。
湟源县东峡乡卢某鸡场500只海兰褐雏鸡出现无症状急性死亡，1周内共死亡71只,死亡率约达14.2%。
病程稍长者精神沉郁，绒毛松乱，怕冷扎堆，食欲下降甚至废绝。
特征性表现是拉白色糊状稀粪，沾污肛门周围的绒毛，有的因粪便干燥封住肛门而影响排粪，并时常发出尖锐的叫声。
有些病鸡还会出现眼盲或关节肿胀、跛行等症状。
病死鸡剖检有败血症变化。
肝肿大、充血、表面有灰白色坏死灶。
泄殖腔内充满白色尿酸盐。
（3）细菌的分离培养。
无菌取肝、脾组织,接种于营养肉汤、普通营养琼脂、血液琼脂、麦康凯琼脂和S.S.琼脂培养基，37℃恒温培养24小时,观察细菌生长情况及菌落特征。
将细菌纯培养物接种于三糖铁(TSI)琼脂,37℃下培养24小时。
（4）细菌染色镜检。
挑取平板上单个可疑菌落制成涂片,革兰氏染色,油镜下观察细菌的形态。
（5）选择鉴别培养。
把平板上的细菌接种到营养琼脂、营养肉汤、麦康凯琼脂和S.S.琼脂培养基上,37℃下培养24小时。
（6）致病性试验。
取细菌培养物接种于肉汤培养基，37℃恒温培养24小时，皮下注射试验组5日龄健康雏鸡10只，每只0.5mL；对照组10只皮下注射营养肉汤。
药物对鸡白痢沙门氏菌病的临床疗效试验
６２ １ｇ ．９ｏ ２，４ 日龄 为 ８５ １ｇ ６ ．４ｏ ２，６ 日龄 ０
４ｏ２次 ，ＨＩ 体 主 要 集 中 在 ４ １１ ２ １ｇ 抗 － ０ ｇ ｏ
之 间 ，平 均 为 ６７ １ｇ ．９ｏ２，２ ０ 日龄 以 上 ０
鸡 白痢 病 是 由 沙 门 氏 菌 引 起 的 鸡
察 ． 以 期 为 该 复 方 制 剂 应 用 于 家 禽 鸡
最 常 见 的 传 染 病 之 一 ，可 发 生 于 任 何
日龄 的 鸡 ，但 以 ２周 龄 以 内 的 雏 鸡 最
白 痢病 的治 疗 提供 依 据 。
１ 材 料 和方 法
感 染 的保 护 力 有 明 显 的 相 关 性 ． 因此 Ｈ 抗体产 生动态在很大程 度上反映 了 Ｉ 机 体 对 病 毒 感 染 的 抵 抗 力 。 但 疫 苗 免
疫 后 产 生 的 保 护 性 抗 体 效 价 与 抗 病 毒 感 染 保 护 力 之 间 的 关 系 有 待 进 一 步 的 试验 。
体 也不 会 达 到 １１ｇ 以上 。 ２ｏ２
从 表 ３可 看 ， １日龄 雏 鸡 Ｈ Ｎ ，
Ｒ一 ｅ ４母 源 抗 体 为 ５０ １ ２ ． ｏ 。６ 日龄 为 ９ｇ
５４ｏ ２ 然 后 随 着 日龄 的 增 长 ． 母 源 ． ｇ． １
说 明我 地 区 大 多 数 鸡 群 对 ＨＮ 已具 备
于 １ 日龄 注 射 Ｈ Ｎ ，Ｒ 一 ５ ｅ ４株 疫
表 ３直 观 的 反 映 了 雏 鸡 母 源 抗 体 衰 减 规 律 ，表 ４雏 鸡 在 ３ ６日龄 （ 疫 免 ２ 天 后 ）产 生 了 坚 强 的免 疫力 。到 ６ １ ０
鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验
鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验刘洋，王占新，严专强，覃健萍，鲁俊鹏（广东温氏食品集团股份有限公司，广东云浮527439）摘要：本试验从一群糊肛严重、死淘率和跛脚鸡高达2%的鸡群中，随机挑精神状态差、瘦小、糊肛严重、跛脚的鸡若干，采集其肝脏和关节进行沙门氏菌的分离与鉴定。
成功分到10株鸡白痢沙门氏菌，其中6株源自肝脏，4株源自关节；药敏试验结果表明，10株鸡白痢沙门氏菌对头孢噻呋钠、卡那霉素、庆大霉素、硫酸新霉素、复方磺胺氯达嗪和氧氟沙星可溶性粉均表现出高度敏感，但对阿莫西林、氨苄西林可溶性粉、盐酸林可霉素、酒石酸泰乐菌素、盐酸土霉素可溶性粉等呈多重耐药。
因此，对鸡白痢沙门菌的治疗应根据药敏试验结果筛选敏感药物指导临床科学合理用药。
关键词：鸡白痢沙门氏菌；分离鉴定；耐药性中图分类号：S852.61文献标识码：A文章编码：1005⁃8567（2020）02⁃0050⁃03收稿日期：2019⁃11⁃18作者简介：刘洋，女，湖南长沙人，硕士研究生，主要从事禽病诊断与分子生物学研究。
E⁃mail ：********************通讯作者：鲁俊鹏，男，博士研究生，主要从事禽病诊断与分子生物学研究。
E⁃mail ：*****************鸡白痢沙门氏菌具有宿主高度适应专一性的特点，引起雏鸡精神萎靡、下痢甚至死亡，发病率和死亡率都很高；成年鸡亦可被感染，常导致产蛋率、孵化率和出雏率下降，是严重危害养鸡生产的重要疾病之一［1⁃2］。
我国自20世纪80年代便开始实行大规模鸡白痢净化方案，但因各鸡场规模、品种、基础设施和人员素质参差不齐，导致白痢阳性率居高不下［3］。
此外，我国地方品种鸡和黄羽肉鸡白痢抗体水平显著高于引种鸡和培育蛋鸡品种，由于抗体阳性率与病原阳性率并不一致，即使种鸡场采用淘汰抗体阳性鸡的措施来防控鸡白痢，效果也并不显著，而药物治疗极易产生耐药性［4⁃5］，因此，鸡白痢沙门氏菌给鸡场健康养殖造成极大困扰。
鸡白痢的病原特点介绍
鸡白痢的病原特点介绍作者：朱文峰来源：《现代畜牧科技》2016年第07期摘要：鸡白痢沙门氏杆菌属于肠道菌科不分解乳糖的肠内细菌，有高度适应专一寄主的特点，鸡最易感、火鸡次之。
在沙门氏杆菌属中是少有的一种不能运动、无鞭毛菌种。
传统的诊断方法主要是根据沙门氏菌的形态学特征、培养特征、生理生化特征、抗原特征、噬菌体特征等进行诊断。
关键词：鸡；白痢；培养基；菌株；特性中图分类号：S858.31 文献标识码：B 文章编号：2095-9737（2016）07-0166-011 流行情况鸡白痢是由鸡白痢沙门氏杆菌引起的传染病，初生的雏鸡和雏火鸡最易感，普遍表现为白色下痢，并常呈急性全身性感染，在发病群体中死亡率很高，通常在出壳后2星期内死亡最多。
成年后如再感染，无明显特征，常局限在生殖系统呈隐形感染，少数呈短暂而有限的症状者为慢性感染。
虽死亡率较雏鸡低，但危害依然很大，因其可通过生殖系统传染给雏鸡，经卵传染也是本病最常见的传播方式。
鸡白痢可使养禽业受到很大经济损失，属于阻碍养禽业发展的重要疫病之一。
鸡白痢分布在世界各地，几乎所有养鸡地区都有本病。
我国兽医工作者曾采用鲜血玻板凝集实验法对国内一些地区的肉用种鸡、蛋用种鸡以及地方良种鸡进行鸡白痢检查，阳性反应率较高，并分离到鸡白痢沙门氏杆菌。
根据种鸡场多年来的饲养经验，必须经常检查和淘汰白痢病鸡，持久的执行综合性卫生防疫措施，建立无白痢病种鸡群，做好病原检测，以控制和消灭此病。
2 形态特征本菌为两端稍圆的细长杆菌。
对一般苯胺染料着色良好，革兰氏阴性。
菌体单个存在，极少见到两个以上成链的。
在抹片中偶然可见长丝状或较大的菌体。
本菌无芽孢、无荚膜、不液化，为好氧及兼性厌气菌。
3 培养特性本菌可在肉汤琼脂或肉汤一般培养基上生长，也能在一些特殊培养基上生长。
从肠道内分离本菌时，以用去氧胆脂酸、枸橼酸、次亚硝酸铋和SS琼脂最满意。
作为增菌培养基，四磺酸钠肉汤比亚硒酸M或F更好。
沙门氏菌病——鸡白痢研究概述
类 传染 病 ，是 我 国农 业 部要 求 重点 监测 的十 四种 动 物疫 病 之一 。 由于本 病 具有 垂 直传 播 的特 点 ，所 以由于 鸡场 的净 化措 施不 够 严 格 ，从 而 导致 雏鸡 发 病 。所 以雏 鸡 白痢 是 育雏 期 最 先遇 到 的传 染 疾病 ，３ 周龄 以 内雏鸡 发病 死亡 率较 高 ，其传 播途 径广 、污染 面积 大 ；对 育 成鸡 则造 成 贫 血 、消瘦 ，有 时也 发 生急 性败 血 症 。鸡 白 痢对 养鸡 造成 巨大 的危 害 。
１ 病原学
鸡 白痢 的病 原 菌 为 鸡 白痢 沙 门 氏菌 ，属 肠 杆 菌科 ，具 有 高 度 的专 一 宿 主适应 性 ，为两 端钝 圆的 细长 杆 菌 ，对 一般 碱性 的苯 胺染 料 着 色 良好 ，革 兰 氏 阴性 。菌 体单 独 ，极 少 见 两菌 以上 的长 链 。在 抹 片 中偶然 可 见 长丝 状 或大 型菌 体 。不 能 运 动 ，不液 化 明 胶 ，并 且 没有 色 素产 生 ，为 没 有芽 孢 的兼 性厌 氧 菌 。本 菌抵 抗力 强 ，室 温 下本 菌 至少 可 生存 ７ ｄ 之久 ，在 被 污染 的土 壤 内毒力 可 保 持１ ４ 个 月 ，鸡 粪 悬 液 中可 存 活 ３ 月 以上 。本 菌 的抗 原结 构 不 同 ， ４ 致病机理 抗 原 型 上存 在 变异 。其 抗 原 型 的变 异主 要表 现 在抗 原 型 １ ２ ２ 与１ ２ ３ 在 正 常 的情 况 下 ，肠 黏 膜 的 梭形 细 菌 可 产 生 挥 发 性 有 机 酸 上。 而 抑 制沙 门氏菌 的生 长 ，并 且 肠道 内正 常菌 群 的蠕 动 ，也 不 利 于 沙 门 氏菌 的Ｈ 抗 原 对热 不稳 定 ，而 ０ 抗 原对 热稳 定 ，一个 菌体 沙 门 氏菌 的 附着 。 当机 体处 于 应激 状 态 时 ，肠 道菌 群失 调 ，从 而 具有 多 个 不 同的０ 抗 原鸡 白痢 沙 门氏 菌０ 抗 原和 肠 炎沙 门氏菌 ０ 抗 导 致 沙 门氏菌 的大量 滋 生 。侵 入细 菌 进入 绒 毛顶 端 ，从 而 进 入上 原是 完 全一 致 的 。抗原 结 构 为 １ 、９ 、１ ２ ，因此 ，可用 提 纯 的多糖 皮 细胞 ，在其 中繁殖 ，并感 染 临近 细 胞或 进 入 固有 层 。机 体受 病 抗 原 进 行 敏感 的Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 试 验 ，从 而 可快 速 准确 的提 供一 种 血 清学 菌侵害，刺激前列腺分泌 ，从而激活腺苷酸环化酶 ，使血管内水 诊 断 方法 。 分 、Ｈ Ｃ Ｏ 和ｃ ｌ 一 向肠 道 外 渗而 弓 Ｉ 起肠 炎 ，即 白痢 。 在沙 门氏 菌 引 起 的败 血 症 时 ，是 由于 沙 门 氏菌细 胞 壁里 的脂 多糖 由低 聚 糖 芯 和 ２ 流行病学 脂 质Ａ 所组 成 ，脂 质Ａ 成分 具 有 内毒素 活性 ，可使 机体 发 热 ，黏膜 ２ ． １ 传 染 来 源 由于本病能够垂直传播 ，所 以经种蛋传递是本病传播 的主 出血 ，白细 胞减 少继 而增 多 ，血 小板 减 少 ，最后 因休 克 而死亡 。 要 途 径 。感 染 鸡常 为永 久 带 菌者 ，产 出被感 染 了 的受 精 蛋 ，孵 出 ５ 鸡 白痢诊断检疫方法 的研究 患 白痢 的雏 鸡 。患 病幸 存 的雏 鸡 及 同群 无 临床 症状 的雏鸡 ，长大 ５ ． １ 临 床 诊 断 后 有 高 比率 的带 菌者 可 达８ ５ ％以上 。病 鸡 排 除 粪便 ，污染 周 围水 观 察 雏 鸡 、育 成 鸡 及 成 年 鸡 中 的 发 病 情 况 ，考 查 病 群 发 病 源 、饲料 及 用 具 ，从 而造 成环 境 的 污染 ，即使 健康 的雏鸡 在 污染 史 。历史 上 １ ～ ３ 周龄雏 鸡 常发病 死亡 ，３ 周龄 以上 的鸡 很 少发 病 。 的环 境 中也可感 染 本病 。 病 雏肝 肿 大充 血 或 出血 ，多 处 脏器 常 有灰 白色结 节 等 即可 做 出假 ２ ． ２ 易感 日龄 定诊 断 。 ３ 周龄 以 内的雏 鸡极 易发 病 ，从 １ ０ 周龄 开始 ，机 体对 本病 的抵 ５ ． ２ 病 菌 的 分 离 鉴 定 ． ２ ． １ 光镜 下鸡 白痢沙 门氏 菌的形 态特 征检 查 抗 力 逐渐 上 升 。育 成鸡 阶段 ，由于环 境 、气 候 、营养 等应 激 因素 ５ 的存 在 ，发 病年 龄 以５ ０ —８ ０ 日龄 多发 ，这样 的鸡群 往 往是 发 生过 本病 的病原 菌 为鸡 白痢 沙 门 氏杆 菌 （ Ｓ ａ ｌ ｍ ｏ ｎ ｅ ｌ ｌ ａ Ｐ ｕ ｌ ｌ ｏ ｒ ｕ ｍ ）， 鸡 白痢 而被 控制 的病 史 ，由于应激 ，而再 次发病 。 为 革 兰氏 阴性 短 杆菌 ，有 时呈 多形 性 ，无 鞭 毛 ，故 不能 运 动 ，不 ２ ． ３ 传 播 方 式 和 感 染 途 径 形 成荚 膜 和芽 孢 ，所 以抵 抗 力较 弱 ，对热 的抵 抗 力 不强 ，７ ０ ℃、 传 播 方式 主要 是 通 过种 蛋 传播 ，但环 境 及 饲料 饮水 的污染 可 ２ ０ ｍ ｉ ｎ 死 亡 ，高锰 酸钾 ，来 苏儿 ，升 汞 ，福尔 马林 ，石 碳 酸溶 液在 以通 过消 化道 黏 膜 而感 染 ，并 且 可 以通 过破 损 的伤 口传 染 ，特别 短短 的几 分钟 内可将其 杀死 （ 图布丹 扎 布等 ，１ ９ ９ ３ ）。 是 在 断 喙时 ，由于 断喙 工 具 的污染 及 环境 的污 染 ，从 而可 以使 健 ５ ． ２ ． ２ 培养 特性检 查 康 的鸡 群得 病 。 鸡 白 痢 沙 门 氏 杆 菌 为 需 氧 或 兼 性 厌 氧 菌 ， 在 普 通 琼 脂 上 不 生 长 ，在伊 红 亚 甲蓝 琼脂 平 板 （ ＥＭＢ ）上 菌 落 针 尖 大 ３ 临床 症 状 雏 鸡 发 生 白痢 常 见 的 临 床 病 症 有 三 型 ：急 性 败 血 型 、关 节 （ ０ － ３ — ０ ． ５ ｍ ｍ ），乳 糖不 发 酵 ，菌 落 圆形 ，半 透 明 ，稍 微 隆起 ， 炎 型 和神 经 型 。病 雏表 现 为嗜 睡 、虚 弱 与食 欲 丧失 或继 之 以突然 淡 黄 白色 ，光 滑 ，表 面湿 润 ，边 缘整 齐 ：在 含 ０ ． ５ ％酵母 浸 膏 的胰 死 亡 ，有 的出壳 后７～１ ５ ｄ 才开 始 发病 。发病 率 和死 亡 率受 年 龄 、 化 大豆 陈 肉 中 中度混 浊 ，底 部有 绒 条 状少 量沉 淀 物 ，能 形 成菌 环 易 感 性 、饲 养管 理 等 因素 的影 响 而变 化 很大 。死亡 最 高峰 发 生在 （ 湛 南辉 等 １ ９ ９ ５）。 第２ 周 龄 ，至第 ３ 、４周 龄 时死 亡 迅 速减 少 。 急性 败 血 型又 可 表现 ５ ． ２ ． ３ 生化 特性检 查
鸡源沙门氏菌的分离鉴定、致病性分析及其对雏鸡肠道水通道蛋白影响
摘要沙门氏菌是常见的食源性人畜共患病病原菌之一，能够引起人类和禽畜产生腹泻等炎症反应，严重感染会导致败血症甚至危及生命。
此种危害，给人类安全和养殖业的经济都带来了严重威胁。
肠道是机体重要的水盐代谢器官之一。
研究表明，AQPs在肠道异常表达会使肠道对水分的吸收产生不同程度的影响。
因此水通道蛋白的表达变化对肠道水转运影响一直是研究重点，但是目前报道主要集中在人类、大鼠和小鼠这类哺乳动物中，对于沙门氏菌侵袭后，雏鸡肠道内水通道蛋白表达的研究还是盲点。
本研究首先通过沙门氏菌PCR鉴定、生化鉴定、血清型检测及毒力基因检测等方法对吉林省内部分地区养鸡场沙门氏菌进行了分离鉴定。
而后通过口服攻毒实验、观察临床变化、及HE染色等方法，验证分离出的沙门氏菌分离株及沙门氏菌标准株对雏鸡致病性的影响。
最后对雏鸡肠道存在的水通道蛋白基因进行检测，口服攻毒1日、3日、5日、7日后，用荧光定量PCR方法对雏鸡肠道水通道蛋白基因水平变化进行检测。
实验结果如下：1、成功分离出7株沙门氏菌，健康鸡、病死鸡分离率分别为7%、4%；符合沙门氏菌生化特征；血清型鉴定显示，7株分离菌属于沙门氏菌D群；7株沙门氏菌SPI-2缺失。
2、沙门氏菌侵染对雏鸡产生致病性，具体表现为精神萎靡、食欲不振、饮水量增加，体重增长缓慢等症状；肝脏有针尖大小出血点，心脏脾脏肿大，颜色暗红，肠道有散在出血点，盲肠肿大；病鸡肠道绒毛断裂严重，产生空泡化结构，心肌细胞坏死，肝细胞损伤。
3、雏鸡十二指肠有AQP1、AQP3、AQP5、AQP7、AQP11基因表达，口服攻毒后，AQP1、AQP3、AQP5、AQP11基因表达降低，差异极显著。
因此我们得出结论，沙门氏菌侵染雏鸡后，除了造成一定病理伤害的同时，还会影响雏鸡肠道中水通道蛋白的表达。
关键词：沙门氏菌，分离鉴定，腹泻，水通道蛋白AbstractSalmonella is one of the common pathogenic bacteria of human and animal zoonosis. It can cause inflammatory reactions such as diarrhea in sick humans and livestock. Severe cases can lead to sepsis and even endanger life. Such harm poses a serious threat to human security and the economy of aquaculture.The intestine is one of the important organs of water and salt metabolism. Studies have shown that the abnormal expression of AQPs in the intestine will have different effects on the absorption of water in the intestine. Therefore, the effect of aquaporin expression on intestinal water transport has been the focus of research, but the current reports are mainly concentrated in mammals such as humans, rats and mice. After the invasion of Salmonella, the expression of aquaporin in the intestines of chicks is still a blind spot.In this study, Salmonella was isolated and identified in some chicken farms in Jilin province by means of PCR identification, biochemical identification, serotype detection and virulence gene detection. Then, the effects of isolated Salmonella wild strain and Salmonella standard strain on the pathogenicity of chicks were verified by oral antivirus experiments and HE staining. Finally, the aquaporin of chicks was detected, and the changes of aquaporin gene were detected by fluorescence quantitative PCR method after 1, 3, 5 and 7 days of poisoning. The experimental results are as follows:1, successfully isolated 7 strains of Salmonella, healthy chickens, sick and dead chickens separation rate of 7 %, 4 %; In line with the biochemical characteristics of Salmonella; Serotype identification showed that 7 wild bacteria belong to Salmonella D group; Seven strains of Salmonella SPI-2 were missing.2, Salmonella infection on chicks pathogenic, the specific manifestations of malaise, loss of appetite, increase in drinking water, slow weight growth and other symptoms; The liver has a needle tip size bleeding point, the heart spleen is swollen, the color is dark red, the intestine is scattered in the bleeding point, and the cecum is swollen; The broiler's intestinal Villi breaks seriously, produces the cavitation structure, the3, chicks duodenal AQP1, AQP3,AQP5,AQP7, AQP11 gene expression. After oral poisoning, AQP1, AQP3,AQP5, AQP11 gene expression decreased, the difference was very significant.Therefore, we conclude that Salmonella can affect the expression of aquaporin in the intestines of chicks after infecting them.Key words: Salmonella,Isolation and Identification,Diarrhea,Aquaporin目录摘要 (I)Abstract (II)前言 (1)第一篇文献综述 (2)第一章沙门氏菌研究进展 (2)1.1沙门氏菌的概述 (2)1.2 沙门氏菌的分类 (2)1.3沙门氏菌的抗原特征 (2)1.4 沙门氏菌的毒力研究 (3)1.5 沙门氏菌的流行病学及感染症状 (4)1.6 沙门氏菌的致病机制 (5)1.7沙门氏菌的预防 (5)第二章鸡水通道蛋白研究进展 (6)2.1水通道蛋白概述 (6)2.2 鸡不同部位的AQPs研究进展 (6)2.2.1 鸡泌尿系统的AQPs及其功能 (7)2.2.2 鸡消化系统的AQPs及其功能 (7)2.2.3 生殖系统的AQPs及其功能 (7)2.2.4 其他部位的AQPs及其功能 (8)2.3 展望 (9)第二篇研究内容 (10)第一章沙门氏菌分离鉴定及毒力基因检测 (10)1.1材料（菌株、仪器、试剂、试剂配制） (10)1.1.3 试剂 (11)1.1.4 试剂配方 (11)1.2方法 (12)1.2.1样本采集 (12)1.2.2沙门氏菌的分离纯化 (12)1.2.3 沙门氏菌PCR鉴定 (13)1.2.4 沙门氏菌生化鉴定 (13)1.2.5 沙门氏菌血清型鉴定 (14)1.2.6 沙门氏菌毒力基因鉴定 (14)1.3结果与分析 (15)1.3.1沙门氏菌分离结果 (15)1.3.2 沙门氏菌生化鉴定结果 (16)1.3.3沙门氏菌血清型鉴定结果 (17)1.1.4 毒力基因检测结果 (18)1.4讨论 (20)1.5小结 (21)第二章沙门氏菌对雏鸡致病性研究 (21)2.1材料 (21)2.1.1 菌株及雏鸡 (21)2.1.2 仪器 (21)2.1.3 试剂 (21)2.1.4试剂配方 (21)2.2方法 (21)2.2.1 菌种培养细菌平板计数 (21)2.2.2 腹腔及口服接种 (22)2.2.3 沙门氏菌致死率统计 (22)2.2.4 沙门氏菌对雏鸡体重的影响 (22)2.2.5 临床症状及剖检变化观察 (22)2.3.1 平板计数结果 (23)2.3.2 腹腔接种致死率结果 (23)2.3.3体重增长曲线 (23)2.3.4 临床症状及剖检变化结果 (24)2.3.5 HE染色结果 (25)2.4 讨论 (27)2.5 小结 (27)第三章水通道蛋白在雏鸡肠道中的表达检测 (28)3.1材料（菌株、仪器、试剂、试剂配制） (28)3.1.1内脏样本 (28)3.1.2仪器 (28)3.2方法 (28)3.2.1 RNA提取 (28)3.2.2 RNA反转录成cDNA (29)3.2.3荧光定量PCR检测雏鸡水通道蛋白基因的表达 (30)3.2.4沙门氏菌感染后雏鸡肠道水通道蛋白变化 (31)3.3结果与分析 (31)3.3.1 RNA浓度及纯度结果 (31)3.3.2雏鸡十二指肠AQPs基因表达检测结果 (32)3.3.3沙门氏菌感染后雏鸡十二指肠AQPs基因变化结果 (34)3.4讨论 (35)3.5小结 (36)结论 (37)参考文献 (38)作者简介 (43)致 谢 (44)前言沙门氏菌是常见的食源性人畜共患病病原菌之一，能够引起人类和禽畜产生腹泻，严重会导致败血症甚至危及生命。
鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析
麦康 凯琼 脂 平 板 上 为 灰 白、 半透 明、 圆 形 光 滑 的 细
小 菌落 ， 在 显色 培养 基上 呈紫 色小 菌落 。
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材 料
１ ． １ ＿ １ 病 料来 源 ： 从本 镇 ２个发 病鸡 场 采集疑 似 鸡 白痢 病鸡 的泄殖 腔棉 拭子 ６份 。
箱２ ４ ｈ后查 看耐 药情 况 。
２ 结 果
２ ． １ 细 菌 分 离情 况
从 ２个规 模养 鸡 场 各 分 离 到 １例疑 似 菌 株 ， 在
原分 离鉴 定 确 诊 为 鸡 白痢 ， 并 开 展 了耐 药 性 分 析 ， 为 规模 场鸡 白痢 的 防治 提供 了方 案 。
化鉴 定 。
１ ． ２ ． ２ 生物 化 学鉴 定 ： 挑 取 显 色 培 养 基 上 的紫 色
疑 似菌 落 ， 按 照 生 化 管 使 用 说 明书 ， 将 细 菌 接 种 到
生化 鉴定 管 ， 置 ３ ７℃ 培养 ２ ４ ｈ后 观察 试验结 果 。
带菌 的鸡 或禽 ， 将 体 内 的鸡 白痢 沙 门氏 菌 随粪 便 排 出， 污染 水 源 和 饲 料 等 ， 经 消 化 道 感 染 健 康 鸡 。鸡
白痢 沙 门 氏菌主要 危 害 ３周 龄 以 内雏 鸡 ， 造 成 高死 亡率 ， 偶尔会导致成年鸡 死亡 ， 给 养 鸡 业 带 来 了较
１ ． ２ ． ３ 耐药 性 分 析 ： 将 鸡 白痢 沙 门 氏菌 分 离 株 接
种于 营养 肉汤 ， 置 ３ ７ ＇ ℃培养 ２ ４ ｈ ， 然 后 吸取 １ ０ ０ ｐ ， Ｌ
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《 上 海 畜牧兽 医通 讯 》 ２ ０ １ ５年 第 ３期
鸡白痢、鸡伤寒沙门菌分子分型方法的验证
·研究论文·Chinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报摘 要：为验证鸡白痢、鸡伤寒沙门菌分子分型方法的准确性，本研究以3株鸡白痢、鸡伤寒沙门菌国际参考菌株和306株国内分离株为研究对象，采用5种已知的分子分型方法开展验证性实验。
结果发现，基于特定基因可变区的2种分型方法具有良好的特异性，其检测结果与生化分型结果一致，而3种基于特定基因单核苷酸多态性的分型方法则出现假阳性或假阴性的结果。
上述结果表明，鸡白痢、鸡伤寒沙门菌分子分型方法的准确性仍需进一步验证。
关键词：鸡白痢沙门菌；鸡伤寒沙门菌；单核苷酸多态性；生化鉴定；分子分型中图分类号： S852.612 文献标志码：A 文章编号：1674-6422（2022）01-0166-07Verifi cation of Molecular Typing Methods for Salmonella Pullorum and SalmonellaGallinarumGONG Jiansen 1, XU Jingxiao 1, ZHANG Di 1, QI Kezong 2, XU Bu 1, DOU Xinhong 1, DONG Yongyi 3(1. Jiangsu Institute of Poultry Sciences, Yangzhou 225125, China; 2. Key Laboratory of Veterinary Pathology and Disease Control and Prevention of Anhui Province, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China; 3. Jiangsu Animal Disease Prevention and ControlCenter, Nanjing 210036, China)收稿日期：2020-11-27基金项目：国家自然科学基金（31402200，31772758）；江苏现代农业产业技术体系建设项目（JATS〔2021〕357、JATS〔2021〕398）作者简介：龚建森，男，副研究员，博士，主要从事禽病防治研究通信作者：董永毅，研究员，E-mail：**************鸡白痢、鸡伤寒沙门菌分子分型方法的验证龚建森1，徐敬潇1，张 笛1，祁克宗2，徐 步1，窦新红1，董永毅3（1.江苏省家禽科学研究所，扬州225125；2.安徽农业大学 兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室，合肥230036； 3.江苏省动物疫病预防控制中心，南京210036）2022,30(1): 166-172Abstract: The aim of this study was to verify the accuracy of molecular typing methods for Salmonella Pullorum and SalmonellaGallinarum . In this study, three international reference strains and 306 Chinese isolates of Salmonella Pullorum and Salmonella Gallinarum were used for verifying fi ve known molecular typing methods. The results showed that two genotyping methods based on variable regions of specifi c genes had good specifi city and their detection results were consistent with biochemical typing results while the other three genotyping methods based on single nucleotide polymorphism of specifi c genes produced false positive or false negative results. Therefore, the molecular typing methods for Salmonella Pullorum and Salmonella Gallinarum still needs to be further verifi ed for their accuracy.Key words: Salmonella Pullorum ; Salmonella Gallinarum ; single nucleotide polymorphisms; biochemical identification; molecular typing· 167 ·龚建森等：鸡白痢、鸡伤寒沙门菌分子分型方法的验证第30卷第1期鸡白痢和禽伤寒可导致家禽败血性疾病，是兽医学界较早发现的两种烈性传染病，其病原分别是鸡白痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌，分别由Rettger （1900年）和Klein（1889年）发现并报道[1]。
1例鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析
7!8=áÄÅá¹¾Â`44@è²p Ú ¥ G Ï 0 ë H 0 A!j Û ¥ h h * H £ º ú 8!T ø ù "Goê²p0´@![!p£¤¥ÏÄ'cdRn÷ø'uU;'^D: úqiØjk¯*! j k 0 A R  U;!opJ¼½¶·0^q"=!> q#[[\Gi%2rss t u v H I J n( Ó!T U ; E [ \ > ¨_£¤¥¦n§FG!t[\Gh@#%Ú¥ G H c d R n O u R n&^D: E 0 j#$?& !a b 3 ?@->A-.T^i[¯ht`G=@#%Ú¥G&p[\`G_Ï 8^6 @Õç¥j3Ã.Ϩ M H 0 ë!Ï@#%Ú¥G)ÕETd@è´@M0HÂ@0A&[\_ÈÐ H M 0 n O ± 8 I J n!i k '|vwv'vwvIJ!içÂ'xvwv'}~}~þJ,!- t u v p Ö B C £ º | ( h®!TøùÒjt0H¸4£67!]>È¢H|!=@#% Ú ¥ G H [ \ l h m 4 £ Ò ¨ > © ª !i @ # % Ú ¥º 8 @ B C ~ ( 9 : ; @ # % Ú ¥ G &[ \ l h &J U ; < = - > ? 8130'(%! ! ! ! @ A B C D <! ! ! ! @ E F ? %(/%!/0*("0&%1#&2!0(*/!&1
G H I J 0&%1!&%!%/ K L M N 0&%( W Ä Å á ø ù u î ï $ z 7 "î ø )0&%(*%&(* ï #&Ä Å á 6 7 - å æ ¹ ` 6 ê ì í "%3M:X8X\;# O P Q R W H H "%22&!#!ó !Ä Å W z · !ô õ u !ø ù ú û $1 4 % & ) !G!HA$I$0))&%1%30%#WW',#H % n O P ñ ò "%21)!#! !Ä Å ( ( · !_ õ !ö î ÷ !ø ù ú û $+ , 0 A 3 ¹ % J !G!HA$I$JA#YV]*(3#WW',#H
鸡白痢杆菌的分离培养与致病性试验
细小 、 无 色 透 明 的菌 落 ： 伊 红 美 兰 上 形 成无 色 透 明 的
小 菌落 ； 麦 康凯 和伊 红 美 兰上 的菌落 形 态 无太 大 的区 别 。分 别涂 片镜 检， 均见 革 兰 氏阴性短 小 杆菌 。
（ ２ ） 致病 性 试 验 。试 验 组雏 鸡 ， 接种 ２ ０小 时 后 出
（ ４ ） 细菌 染 色镜 检 。挑 取 平板 上 单个 可 疑 菌落 制 成涂 片， 革 兰 氏染 色 。 油 镜下 观察 细菌 的形 态 。
（ ５ ） 选择 鉴 别 培养 。把平 板上 的细 菌接 种 到 营养 叶 子重新 生 长时 （ ８月 ） 再 割 一次 。在 长江 沿岸 每 年能
脂， ３ ７ ℃下培养 ２ ４小 时。
现， 绒 毛松 乱 ， 怕 冷扎 堆 ， 食 欲下 降 甚 至废 绝 。拉 白色 糊 状稀 粪 ， 沾污 肛 门周 围的绒 毛 ， 呼 吸困难 。 ２ ９小 时后 死 亡 ３只 ． ４ ８小 时死 亡 ７只 。对 死亡 雏鸡 立 即进行 剖 检。 均 表 现为 急性 败 血症 。从发 病 死 亡雏 鸡 的脏 器 中 分离 到 细菌 ， 经 过纯 化培 养 和 分 离 鉴 定 ， 与 接 种 菌 株 好， 发芽 率一 般 在 ８ ０ ％以上 ， 种 子寿命 为 １ — ２年 。 板 蓝 根 正 常 生长 发 育 过 程 必 须 经 过冬 季低 温 阶段 方 能
那霉 素 、 卡那 霉 素 、 庆大 霉 素 、 甲氧 苄 氨霉 素 、 四环 素 、
复合 磺胺 、 磺 胺 异 恶 唑 和链 霉 素 （ 北 京 天坛 药 物 生 物 技术 开 发公 司生产 批号： ２ ０ １ ６ ０ ３ １ ４ ） 。
２ 结 果
（ １ ） 型态 及 染 色特 征 。初 次 分离 到 的细菌 在 血平 板 上形 成 圆形 、 光滑 、 半透 明的小 菌 落 ； 麦 康凯 上 形成
鸡大肠杆菌和沙门氏菌感染的噬菌体疗法研究进展
鸡大肠杆菌和沙门氏菌感染的噬菌体疗法研究进展目录一、内容描述 (2)1. 研究背景与意义 (3)2. 噬菌体疗法的发展历程 (4)二、噬菌体疗法的基本原理与优势 (5)1. 噬菌体疗法的定义 (6)2. 噬菌体疗法的工作原理 (7)3. 噬菌体疗法的优势 (8)三、鸡大肠杆菌感染的研究进展 (9)1. 鸡大肠杆菌感染的病原学特点 (11)2. 噬菌体疗法在鸡大肠杆菌感染治疗中的应用 (11)3. 噬菌体疗法的局限性及改进措施 (13)四、沙门氏菌感染的研究进展 (14)1. 沙门氏菌感染的病原学特点 (15)2. 噬菌体疗法在沙门氏菌感染治疗中的应用 (16)3. 噬菌体疗法的局限性及改进措施 (17)五、噬菌体疗法与其他治疗策略的比较 (18)1. 噬菌体疗法与其他抗菌药物的比较 (19)2. 噬菌体疗法与疫苗研发的比较 (20)六、结论与展望 (21)1. 研究成果总结 (23)2. 存在问题与挑战 (23)3. 未来研究方向与展望 (24)一、内容描述噬菌体疗法，作为一种新兴的微生物治疗方法，近年来在对抗鸡大肠杆菌和沙门氏菌感染方面展现出了显著的研究进展。
这两种病原菌是常见的食源性疾病致病因子，对公共卫生安全构成严重威胁。
传统的抗生素治疗虽然在一定程度上能够控制感染，但长期使用可能导致耐药性的产生，使得抗生素治疗失效。
噬菌体疗法则通过利用噬菌体对特定细菌的裂解作用来消除感染。
噬菌体是一种能够感染并裂解细菌的病毒，其独特的生物学特性使其成为治疗细菌感染的潜在有效工具。
在本研究中，我们重点关注了噬菌体疗法在鸡大肠杆菌和沙门氏菌感染治疗中的研究进展。
在鸡大肠杆菌感染的治疗方面，研究者们发现了一些具有抗菌活性的噬菌体，这些噬菌体能够有效地裂解鸡大肠杆菌，从而降低感染动物的死亡率。
通过对噬菌体的分离和筛选，还可以进一步优化噬菌体的抗菌谱和治疗效果。
在沙门氏菌感染的治疗中，噬菌体疗法同样显示出巨大的潜力。
鸡源粪肠球菌噬菌体的分离及生物学特性初步分析
·研究论文·Chinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报摘 要：为将噬菌体应用于防控与治疗鸡源粪肠球菌感染提供依据，本研究从养殖场污水中分离鸡源粪肠球菌噬菌体，利用双层平板培养法纯化分离噬菌体，10倍倍比稀释噬菌体滤液，观察噬斑测定其效价和最佳感染复数，绘制其一步生长曲线，点斑法测定其宿主谱；检测温度、紫外线照射、pH 等对噬菌体活性影响；负染法透射电镜观察噬菌体形态。
结果显示，从污水中分离出3株（EFC1、EFC2、EFC3）裂解粪肠球菌噬菌体，效价分别为6×108、6×109、2×1010 PFU/mL ，最佳MOI 分别为1、0.01、0.001，噬菌体感染潜伏期为80~120 min ，暴发期为10~20 min ，裂解量为3~71 PFU 。
3株噬菌体能裂解多株鸡源粪肠球菌，热稳定性较好，不耐受高于50℃的环境温度，对紫外线敏感，适应pH 宽（4~12）；电镜观察噬菌体为蝌蚪形，属于有尾噬菌体目长尾噬菌体科。
噬菌体对鸡源粪肠球菌的生长均具有一定抑杀作用，有望成为防控耐药粪肠球菌的抗生素替代产品。
关键词：鸡源粪肠球菌；噬菌体；生物学特性中图分类号： S852.61文献标志码：A文章编号：1674-6422（2023）06-0053-08Isolation and Preliminary Analysis of Biological Characteristics of Chicken-DerivedEnterococcus faecalis Phages收稿日期：2021-05-25基金项目：河北省科技厅农业高质量发展关键共性技术攻关专项（19226609D）作者简介：王琦，女，硕士，主要从事畜禽安全生产与控制通信作者：刘娜，E-mail：****************鸡源粪肠球菌噬菌体的分离及生物学特性初步分析王 琦1，刘彦威1,2,3，刘 娜1,2,3，刘利强1,2,3，崔国林1,2,3，邓云贵1，刘东海1，李 想1（1.河北工程大学生命科学与食品工程学院，邯郸056038；2.河北省禽病工程技术研究中心，邯郸056038；3.邯郸市动物医学重点实验室，邯郸056038）2023,31(6):53-60Abstract: To provide a basis for the application of bacteriophages in the prevention, control and treatment of chicken-derived Enterococcusfaecalis infection, chicken-derived E. faecalis phages were isolated from farm sewage. The isolated bacteriophages were then purified and separated using a double-layer plate culture method, The phage fi ltrates were 10-fold serially diluted for titration and MOI determination as well as one-step growth curve and host spectrum by spot method. The effects of temperature, UV irradiation, pH on phage activity were also examined in the study. Phage morphology was observed under transmission electron microscopy (TEM) with negative staining. The results showed that three phages (EFC1, EFC2, EFC3) isolated from sewage lysed E. faecalis with titers of 6×108, 6×109, 2×1010 PFU/mL and the optimal MOI at 1, 0.01, 0.001. Moreover, this experiment also determined the incubation period at 80-120 min for phage infection, the burst period for 10-20 min, and the amount of lysis at 3-71 PFU. Three phages were capable of lysing multiple strains of E. faecalis of chicken origin and heat stable but did not tolerate ambient temperatures above 50℃. These phages were sensitive to UV light and adapted to a wide pH4-pH12). Morphological examination under electron microscopy showed that the phages were tadpole shaped, which belonged to the family ofCaudovirales , Siphoviridae. In addition, these bacteriophages had a certain inhibitory effect on the growth of chicken-derived E. faecalis , which might serve as an alternative antibiotic product for the prevention and control of drug-resistant strains.Key words: Chicken-derived Enterococcus faecalis ; Phage; Biological characteristics W ANG Qi 1, LIU Yanwei 1,2,3, LIU Na 1,2,3, LIU Liqiang 1,2,3, CUI Guolin 1,2,3, DENG Y ungui 1,LIU Donghai 1, LI Xiang 1(1. College of Life Science and Food Engineering, Hebei University of Engineering, Handan 056038, China; 2. Hebei Engineering ResearchCenter for Poultry Diseases, Handan 056038, China; 3. Handan Key Laboratory of Veterinary Medicine, Handan 056038, China)· 54 ·中国动物传染病学报2023年12月粪肠球菌是存在于人与动物肠道中的正常菌群，也是重要的机会致病菌。
鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定及耐药性分析
鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定及耐药性分析
温海燕
【期刊名称】《河南农业科学》
【年(卷),期】2014(043)008
【摘要】采集菏泽地区发病鸡场疑似鸡白痢病鸡的泄殖腔棉拭子,进行细菌分离,并对分离细菌进行生化鉴定、血清型鉴定和药敏试验.结果显示,分离得到32株鸡白痢沙门氏菌,其中16株O9、10株O1、6株O12,分别占50％、31.25％、18.75％;分离株对头孢噻肟、丁胺卡那霉素、多黏菌素B表现出高敏感性,敏感菌株的比率分别为93.8％、90.6％、84.4％,对四环素、磺胺嘧啶、诺氟沙星表现出高的耐受性,耐受菌株的比率分别为100％、78.1％、71.9％.可见,头孢噻肟、丁胺卡那霉素、多黏菌素B可作为菏泽地区养鸡场防治鸡白痢沙门氏菌病的首选药物,其他药物须减少或暂停使用.
【总页数】3页(P130-132)
【作者】温海燕
【作者单位】菏泽学院药物科学与技术系,山东菏泽274015
【正文语种】中文
【中图分类】S855.1
【相关文献】
1.鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定及耐药性分析 [J], 梁惠
2.鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析 [J], 康剑军;王惠东;严东清
3.鸡白痢沙门氏菌病原的分离鉴定及耐药性分析 [J], 刘志科;陈创夫;杨宁宁;徐锦凤;徐明国;荆明龙;吴文星;曹旭东;任艳;石峰
4.69株鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定及耐药性分析 [J], 刘洋;严专强;王占新;潘海萍;陈伦锋;严丽端;覃健萍;鲁俊鹏
5.1例鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析 [J], 董萌萌;王晓斐;徐彦召;王青;孙亚伟;杭柏林;胡建和
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鸡白痢沙门氏菌临床分离株的耐药性分析
鸡白痢沙门氏菌临床分离株的耐药性分析严晓玲;邵红【期刊名称】《黑龙江八一农垦大学学报》【年(卷),期】2012(024)002【摘要】旨在了解鸡白痢沙门氏菌临床分离株的耐药性情况。
对疑似雏鸡白痢的33份病料进行病原菌的分离鉴定、形态学观察和生化试验，鉴定出26株鸡白痢沙门氏菌。
采用Kindy-Bauer法检测分离菌株对14种抗菌药敏感性。
试验结果表明，分离菌株对庆大霉素、阿米卡星、新霉素、多粘菌素B、复方新诺明和氯霉素较为敏感，耐药率分别为11．54％、0、7．69％、0、19．23％和15．38％；对阿莫西林、氨苄西林、链霉素、四环素、多西环素、恩诺沙星、诺氟沙星和环丙沙星耐药性较强，耐药率分别为53．85％、65．38％、57．69％、100％、69．23％、61．54％、76．92％和53．85％。
且所有鸡白痢沙门氏菌分离株均为多重耐药性，其中以6耐和7耐的菌株为主，分别占42．31％和30．77％。
鸡白痢沙门氏菌分离株对多数抗菌药物具有不同程度的耐药性，加强对临床分离株的耐药监测，对于指导临床合理用药及控制疾病流行具有重要的现实意义。
【总页数】4页(P23-26)【作者】严晓玲;邵红【作者单位】黑龙江农垦职业学院,哈尔滨150025;黑龙江八一农垦大学动物科技学院【正文语种】中文【中图分类】S482【相关文献】1.265株肺炎链球菌临床分离株的临床特点、血清分型及耐药性分析 [J], 黄连江;袁玉涛;王燕凤;张建梅;张晶;黄建炜2.69株鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定及耐药性分析 [J], 刘洋;严专强;王占新;潘海萍;陈伦锋;严丽端;覃健萍;鲁俊鹏3.339株非结核分枝杆菌临床分离株菌种鉴定及耐药性分析 [J], 秦中华;景晔;杜岩青;宋晓梅;张丽霞4.青海省南部地区154株结核分枝杆菌临床分离株耐药性检测结果分析 [J], 蒋明霞;李咏雪;张琪;晁秀珍;王兆芬;马斌忠;马永成;王蓉;王朝才;李尔琛;魏於家5.1株高毒力型肺炎克雷伯菌临床分离株毒力及耐药性分析 [J], 王灿;高明明;李璞媛;苑鑫;牛文凯;刘慧莹;方云;米志强;柏长青因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
某鸡场沙门氏菌病病原的分离、鉴定及药敏试验
某鸡场沙门氏菌病病原的分离、鉴定及药敏试验作者：王望宝，刘素曼，占志鹏，等来源：《江西畜牧兽医杂志》 2015年第2期王望宝，刘素曼，占志鹏，罗明华（修水县畜牧水产局,江西九江 332400）文章编号：1004-2342（2015）02-0042-02 中图分类号： S855.1+2文献标识码：B摘要：江西省修水县某鸡场于2014年10月9日送检6羽12日龄自然发病的雏鸡，经病理剖检，初步诊断为鸡白痢沙门氏菌病。
剖检后从其大脑、肝脏中分离出1株沙门氏菌，经生化试验鉴定为鸡白痢沙门氏菌。
药物敏感性试验结果表明：细菌对卡那霉素、环丙沙星、氯霉素、氟哌酸、呋喃妥因、头孢唑啉、氧氟沙星等药物敏感；对青霉素、四环素、林可霉素、强力霉素、杆菌肽、多粘菌素、苯唑西林、阿莫西林、万古霉素、克林霉素等药物耐药；对头孢曲松表现为中度敏感。
关键词：鸡；沙门氏菌；生化试验；药敏试验鸡沙门氏菌病是由某些特定血清型的沙门氏菌所引起的一类传染病的总称，对养鸡生产及食品卫生具有较大危害。
该病在雏鸡和成年鸡中所表现的症状和经过有显著的差异。
出壳后感染的雏鸡,多在孵出后几天才表现出明显症状，病雏精神萎靡,绒毛松乱,两翼下垂,缩颈闭眼昏睡,不愿走动,拥挤在一起，拉白色稀粪,肛门周围绒毛被粪便污染。
1 发病情况修水县某鸡场雏鸡7日龄左右开始陆续发病，病鸡表现为精神沉郁、拉白痢，发病死亡高峰为9～15日龄，死淘率为20%。
剖检6羽病（死）雏鸡，病理变化主要表现为肝脏肿大，肾脏有多量白色尿酸盐沉积，部分病死雏鸡心肌有细小白色结节。
为确诊，我们对送检样进行了病原分离、鉴定及药敏试验，现报告如下。
2 材料与方法2.1 材料2.1.1 送检材料。
6羽12日龄的病（死）雏鸡。
2.1.2 培养基。
营养肉汤、普通营养琼脂、煌绿琼脂平板、半固体培养基、血液琼脂平板、麦糠凯琼脂平板、伊红美蓝平板、SS琼脂、MR、V-P、三糖铁琼脂、三糖铁琼脂斜面等常用培养基均按常规方法配制和保存。
鸡源沙门氏菌的分离鉴定、耐药性检测及耐药基因定位的开题报告
鸡源沙门氏菌的分离鉴定、耐药性检测及耐药基因定位的开题报告一、研究背景沙门氏菌是一种常见的细菌，常常引起人畜流行病及食物中毒。
其中，鸡源沙门氏菌是引起家禽沙门氏菌病的主要病原体。
随着家禽养殖业的发展，鸡源沙门氏菌的感染数量也逐渐增加，给养殖业和食品安全带来了隐患。
在临床上，沙门氏菌也是一种令人头疼的致病菌，特别是在免疫力低下的人群中，其致病力更强。
因此，对鸡源沙门氏菌的分离鉴定、耐药性检测及耐药基因定位等方面的研究有着十分重要的意义。
二、研究目的本研究旨在对鸡源沙门氏菌进行分离鉴定、耐药性检测及耐药基因定位，为鸡源沙门氏菌的防治和控制提供科学依据。
三、研究内容1.鸡源沙门氏菌的分离鉴定从鸡源样品中分离出鸡源沙门氏菌，并通过生化和分子生物学技术对其进行鉴定；2.沙门氏菌的耐药性检测对分离出的鸡源沙门氏菌进行耐药性检测，包括常见抗生素的敏感性测试及耐药性谱分析；3.耐药基因定位对耐药鸡源沙门氏菌进行PCR扩增并测序，分析其携带的耐药基因类型、多样性和分布情况。
四、研究意义1.丰富鸡源沙门氏菌的分类鉴定；2.深入了解鸡源沙门氏菌的耐药性分布和多样性；3.为鸡源沙门氏菌防治和控制提供可靠的科学数据支持；4.对类似细菌的耐药性研究提供参考。
五、研究方法1.样品采集：从鸡样、禽粪及其它环境样品中采集样品；2.细菌培养：通过对样品的处理及细菌培养，分离出鸡源沙门氏菌；3.分子鉴定：通过16S rRNA及其他基因序列分析，鉴定鸡源沙门氏菌；4.耐药性检测：采用药敏试验、MIC测定等方法，对鸡源沙门氏菌的耐药性进行检测，建立耐药性谱；5.耐药基因测序：通过PCR扩增、测序等方法，测序和分析鸡源沙门氏菌耐药基因。
六、研究难点1.收集鸡源沙门氏菌及相关实验样品；2.对鸡源沙门氏菌的分离鉴定方法进行优化；3.耐药基因及多样性分析方法的确定；4.耐药性谱的分析和解读。
七、预期结果1.通过分子技术对鸡源沙门氏菌进行准确的分子检测；2.得到一份鸡源沙门氏菌的耐药性谱，即耐药类型、扩散率等；3.鸡源沙门氏菌的耐药性基因分布及多样性分析；4.选用并优化鸡源沙门氏菌的分离及耐药性检测方法，为研究和诊断奠定基础。
河南省部分地区鸡沙门氏菌的分离鉴定和耐药性研究的开题报告
河南省部分地区鸡沙门氏菌的分离鉴定和耐药性研究的开题报告一、研究背景和意义鸡沙门氏菌是一种常见的细菌，常常引起人和动物的肠道感染。
近年来，随着养殖业的发展以及消费生态的变化，鸡沙门氏菌的感染情况越来越严重，已经成为一个亟待研究的问题。
河南省是中国重要的畜牧业区域之一，因此对河南省部分地区鸡沙门氏菌的研究具有重要的意义。
本研究旨在通过对河南省部分地区鸡沙门氏菌的分离鉴定和耐药性研究，掌握该地区鸡沙门氏菌的流行状况和耐药情况，为该地区动物疾病防控提供科学依据。
二、研究内容和方法（一）研究内容1.采集样品：选择河南省部分地区的养殖场和市场，采集鸡粪、鸡肉等样品。
2.分离鉴定：采用细菌培养、生化鉴定、分子生物学等方法对样品中的鸡沙门氏菌进行分离、鉴定。
3.药敏试验：对分离出的鸡沙门氏菌进行药敏试验，掌握该地区鸡沙门氏菌的耐药情况。
4.数据分析：对试验结果进行统计分析，并进行相关图表的绘制。
（二）研究方法1.样品采集：采用随机抽样的方法，采集养殖场和市场中的鸡粪、鸡肉等样品。
2.细菌分离鉴定：采用营养琼脂培养基、MacConkey琼脂培养基、API酶试剂盒等方法进行分离，然后采用PCR等方法进行鉴定。
3.药敏试验：采用纸片扩散法等方法进行药敏试验。
4.数据分析：采用SPSS软件等统计分析软件进行数据处理和分析。
三、研究预期成果（一）本研究将掌握河南省部分地区鸡沙门氏菌的分布和菌株的特点和流行状况，为该地区动物疾病防控提供科学依据。
（二）本研究将明确河南省部分地区鸡沙门氏菌的耐药性情况，为该地区动物疾病防控提供参考。
（三）本研究将提供一定的科学依据和理论基础，为鸡沙门氏菌的治疗和控制提供有力支持。
四、研究计划及预算（一）研究计划1.时间安排：本研究拟于2022年3月至2022年11月开展，其中样品采集和实验操作预计用时6个月，数据处理和结果分析预计用时2个月。
2.调查范围：本研究将选择河南省某些养殖场和市场作为研究对象，共计采样300份样品。
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２ ． ２ 噬菌体的分离与鉴定 ３ ０份 养鸡场 污 水样 ， 每 份取 ５ ｍｌ ， ５ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ离 心 １ ０ ｍｉ ｎ ，吸取 上 清经 ０ ． ２ ２ ｇ ｍ微 孔 滤膜 过滤 除 去杂菌 后接 种 于加 入 有 ２ ０ ｍｌ Ｌ Ｂ液 体培 养基 的灭 菌三 角瓶 中，再按 体积 比 ｌ ： １ ． ５加入 对数 生长 期 的宿 主 菌（ 沙 门 氏菌 ０Ｉ ２ ） 悬液 ， ３ ７ ￣ Ｃ ， ８ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ ， 振荡培养 ８ ｈ ， 再次经 Ｏ ． ２ ２ ｇ ｍ 微孑 Ｌ 滤膜过滤去除宿主茵得到噬菌体原液． 然后， 采用双层琼脂平 板法进行噬菌体鉴定． 具体方法如下： 下层培养基倒板后 ４ ℃冷藏， 上层培养基倒板后 ５ ０ ￣ Ｃ 保温备用． 取菌悬液
第４ ０卷 第 ２期
１ 西南民族 大学学报 ・ 自然 学版 Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ １ ｏ ｆＳ ｏ ｕ ｔ ｈ ｗｅ ｓ ｔ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙｆ ｏ ｒ Ｎａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ ｉ ｔ ｉ ｅ ｓ Ｎａ ｔ ｕ ｒ ａ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅＥ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ
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鸡 白痢沙 门氏菌 Ｏ１ ２ 特 异性 噬菌体 的分离及 生 物 学特 性研 究
李 涵依 ，车晨 ， 耿 亚 ，刘福 音，郝葆 青
（ 西南民族 大学生命科 学与技 术学院， 成都 ６ １ ０ ０ ４ １ ） 摘 要 ：采用双层平板培 养法从成都 某养鸡场 的污水样 本中分 离得到一株鸡 白痢 沙门氏菌 ０１ １ （ 宿主菌） 的噬菌体（ Ｐ ｈ ． １ ） ，
用导致该病菌出现越来越多的耐药菌株， 使众多的治疗沙门氏茵感染病症的抗生素失效． 据报道 】 ， 中国沙门氏 菌对磺胺类抗生素的耐药性 已经接近 １ ０ ０ ％， 人们不得不寻求别的、能有效对抗该病菌感染的防治方法． 噬 菌体 是 一 类专 性 寄 生 或感 染细 菌 的病 毒 ，它们 广 泛 存在 于 自然 界 中．一般 而 言，存 在 某 种病 原 细 菌 的场 所 中往 往 也 可能 存 在能 对 其 裂解 的特 异 性 噬菌 体 Ｊ ．烈性 噬 茵体 可 以在 敏 感 宿主 茵 胞 内增 殖 ，最 后裂 解 宿主 菌
２ 实验 方法
２ ． １ 宿 主 菌 的复苏 与准 备 取斜 面保 存 的沙 门 氏菌 ｏ ２ ，将其放 入 无菌 Ｅ Ｐ管 中，用蒸馏 水稀 释 ． 稀 释 后，接种 于 ｓ ｓ琼 脂培养 基 ，恒温 水浴 培养 箱 中倒置 ３ ７ ￣ Ｃ培 养 １ ６ ｈ ． 观 察并 挑取 中等 大小 ，中央呈 灰褐 色 的典 型沙 门氏菌 菌落 接种 于 Ｌ Ｂ 液 体培 养基 ，空气 浴振 荡 １ ８ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ ， ３ ７℃，培养 ８ ｈ得到宿 主菌 悬 液，备 用．
培养基 ＋ １ ． ５ ％琼 脂 ） ．
收稿 日期 ：２ ０ １ ４ ０ １ ． １ ０ 通 讯作者 ：郝葆青（ １ ９ ５ ６ ． ） ，男，教授，研究方向：药物载体， Ｅ ｍａ ｉ ｌ ： ｌ ２ ９ ６ ７ １ ４ ３ ８ ９ ＠ｑ ｑ ． ｃ ｏ ｎ ｒ 基金项 目：西南民族大学研究 生创新项 目．
释 放 出子代 噬菌 体 ， 从 而达 到 破坏宿 主茵 的 作用 ．早在 １ ９ ３ ４年 ， 美 国科 学家 就报 道 了用噬 菌体 进行 肠球 菌 感 染
的治愈 率可 达 ９ ０ ％ ．
本次 实验 随机采 取 成都 郊 区某养 鸡场 地面 污水 的 ３ ０份 试样 ，从 中分离 得到 了一 株 鸡 自痢 沙门 氏菌 Ｏ１ ２ 特 异
并对 菌斑形 态及理化特性进行 了初步研 究． 试验结 果显 示，纯化后该噬 菌体 的噬 菌斑直径约 ３ ａｍ；经高于 ６ ｒ ０ ￣ Ｃ 温度 处 理 １ ｈ 后噬 菌体 失活：Ｐ Ｈ ５ ． ７ 时该噬 菌体 可保持较 高效价和较 强的 紫外线耐受性 ：该噬 菌体 的最佳 感染 复数（ ＭＯＩ ） 为
第 ２期
李涵依 等： 鸡白痢沙门氏菌 Ｏ ｌ ２ 特异性噬菌体的分离及生物学特性研究
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以上培养 基 配制 完成 后调 Ｐ Ｈ至 ７ ． ２ — ７ ． ５ ， １ ２ １ ℃高 压灭 菌 ２ ０ ｍｉ ｎ ．
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
１ ． ３ 主要仪器 恒温水浴锅； 离心机； ７ ２ １ 分光光度计； ０ ． ２ ２ ￣ ｔ ｍ无菌过滤器；自动 Ｐ Ｈ计等
０ ． ０ １ ． ０ ． ０ ０ ｌ ： 一 步生长曲线显 示该噬 菌体 的潜伏期为 ４ ０ ａｉ ｒ ｎ ，裂解 期持 续 ６ ０ ｍｉ ｎ ．
关键 词 ：鸡 白 痢 ：噬 菌 体 ；沙 门 氏菌
中图分类号： ￥ ８ ５ ２ ． ６ ｌ
文献标识Ｌ ｑ ： Ａ
文章编号： ｌ ０ ０ ３ － ４ ２ ７ ｌ （ ２ ０ １ ４ ） ０ ２ ． ０ ｌ ８ ６ ． ０ ６
鸡 自痢在 我 国大 部分地 区频 繁 发 生，为养鸡 场 中一种 常见 的细 菌性 传 染病 ， 其 雏 鸡致死 率 可高 达 ８ ０ ％…．鸡 白痢 的病原 菌 是 鸡 自痢 沙 门 氏菌 ，分类 上属 于 肠 科 沙 门氏菌 ．沙 门 氏菌 定殖 在 动物 肠 道 内， 在 胴 体 加工 中若 处 理 不 当，极易 污 染 食 品， 造 成 食 品安 全 隐患 ， 危 害人类 健 康 Ｊ ． 近 些 年来 ，随 着养 殖 户和 饲 料 生产 商抗 生 素 的滥
性噬茵体， 并对其进行纯化， 增殖和一系列理化特性 的研究，以期为噬茵体 防治鸡自痢新途径 的探索提供参考
数据．
１ 实验材料
１ ． １ 实验 菌株 鸡源 沙门 氏菌 Ｏｌ ２ （ 保 藏于 本实 验室 ） ； ３ ０份地 面污 水样 本采 集于 成 都郊 区某 养鸡场 ． １ ． ２ 培养 基 ． Ｓ ｓ琼 脂 培养 基 （ 成都 科 龙化工 试 剂厂） ． Ｌ Ｂ液 体 培养 基 ： ｌ Ｏ ｇ蛋 白胨 ， ５ ｇ氯 化钠 ， ５ ｇ酵 母提取 物 ，蒸馏水 定 容至 １ ０ ０ ０ ｍ１ ． Ｌ Ｂ琼 脂 培养 基 ： Ｌ Ｂ液 体培养 基＋ １ ％琼脂 ； 双层 琼脂 平 板培 养 基 ：上层— — 半 固体 培养 基（ Ｌ Ｂ 液体 培养 基＋ ０ ． ７ ％琼脂 ） ，下 层— — 固体 培 养基 （ Ｌ Ｂ 液 体