实验室环境灭菌的方案设计ppt课件
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实验室消毒灭菌ppt课件
7
(二)湿热灭菌 原理:使微生物的蛋白质及核酸变形导致其死亡。
高压蒸汽灭菌器
脉动真空灭菌器
实验室消毒灭菌
卡式灭菌器
8
•(二)湿热灭菌
仪器设备
灭菌过程
应用
不适用灭菌物品
高压蒸汽 灭菌器
准备-加压升温—灭 菌—排气—干燥—
结束
适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、 玻璃容器及注射器、敷料等耐高温、高压及 不怕潮湿的物品。是目前应用最广泛、灭菌
最佳杀菌波长在265-266nm。用于空气消毒与物品表面的消毒。微生物实验室、无菌 室(紫外线灯),手术室、产房、婴儿室、早产儿室、供应室无菌区、烧伤病房、
重症监护病房、一般病房等(空气消毒机)。
红外线灭菌 红外线灭菌器
应用于接种环、接种针等小型物品的高温灭菌消毒。
微波灭菌
微波杀菌机
常用于食物及餐具的消毒、医疗药品及耐热的非金属材料器械的消毒灭菌。
物品的灭菌。
灭菌。
卡式灭菌 器
置换—预热—升 温—灭菌—排汽-干
燥—结束
牙科器械(手机、镊子、牙科钻头等)、眼 科器械、妇科器械(腹腔镜、宫腔镜)、口
腔科等手术医疗器械的灭菌
不适用于纺织品、液体或 生物医疗废弃物的灭菌。
实验室消毒灭菌
9
辐射灭菌法
相关设备
应用
紫外线灭菌
紫外线灯,循环风 紫外线空气消毒机
机
液室、生化室、实验室等,以及生物制药、食品生产、公共场所,会议室等。
过氧化氢等离子体 灭菌器
主要应用于临床的医疗材质和几何形状都符合要求的器材。
实验室消毒灭菌
10
空气消毒机
红
外
线
灭
菌
(二)湿热灭菌 原理:使微生物的蛋白质及核酸变形导致其死亡。
高压蒸汽灭菌器
脉动真空灭菌器
实验室消毒灭菌
卡式灭菌器
8
•(二)湿热灭菌
仪器设备
灭菌过程
应用
不适用灭菌物品
高压蒸汽 灭菌器
准备-加压升温—灭 菌—排气—干燥—
结束
适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、 玻璃容器及注射器、敷料等耐高温、高压及 不怕潮湿的物品。是目前应用最广泛、灭菌
最佳杀菌波长在265-266nm。用于空气消毒与物品表面的消毒。微生物实验室、无菌 室(紫外线灯),手术室、产房、婴儿室、早产儿室、供应室无菌区、烧伤病房、
重症监护病房、一般病房等(空气消毒机)。
红外线灭菌 红外线灭菌器
应用于接种环、接种针等小型物品的高温灭菌消毒。
微波灭菌
微波杀菌机
常用于食物及餐具的消毒、医疗药品及耐热的非金属材料器械的消毒灭菌。
物品的灭菌。
灭菌。
卡式灭菌 器
置换—预热—升 温—灭菌—排汽-干
燥—结束
牙科器械(手机、镊子、牙科钻头等)、眼 科器械、妇科器械(腹腔镜、宫腔镜)、口
腔科等手术医疗器械的灭菌
不适用于纺织品、液体或 生物医疗废弃物的灭菌。
实验室消毒灭菌
9
辐射灭菌法
相关设备
应用
紫外线灭菌
紫外线灯,循环风 紫外线空气消毒机
机
液室、生化室、实验室等,以及生物制药、食品生产、公共场所,会议室等。
过氧化氢等离子体 灭菌器
主要应用于临床的医疗材质和几何形状都符合要求的器材。
实验室消毒灭菌
10
空气消毒机
红
外
线
灭
菌
实验室常用灭菌法详细版.ppt
效均一
最新.
10
灭菌容器操作注意
• 使用前认真检查设备的完好性
• 灭菌时须先将灭菌器中冷空气排出,以保
证最佳灭菌效果
• 灭菌时间应从待灭菌物品到达预定温度时
算起
• 灭菌完毕后停止加热,待压力表降至0,放
汽、开启灭菌器,物品温度降至80℃ 以下 时才能将灭菌器门全部开启
最新.
11
影响湿热灭菌的因素
• 辐射灭菌:短小芽孢杆菌孢子(ATCC27142等,活孢子数为5×107~
5×108个/片 )
• 气体灭菌:
环氧乙烷灭菌:枯草芽孢杆菌孢子(ATCC9372等,活孢子数为 5×105~5×106菌孢子(ATCC7953等,活孢子 数为1×106~5×106个/片 )
不挥发,不易燃
无色醚样臭味气体,沸点 10.8 扩散穿透能力强,属广谱杀菌
环氧乙烷
℃,沸点以下为无色透明液 剂;用于对热敏感的药物等的
体,比重 0.882,溶于水。 灭菌;时间长,费用贵。
苯酚(石炭酸)
3~5%
地面、墙壁喷撒
甲酚皂溶液(来苏尔)
5~100%
• 效果可靠、操作简便 • 应用广泛:容器、培养基、无菌衣、胶塞等 • 包括
– 热压灭菌 – 流通蒸汽灭菌 – 煮沸灭菌 – 低温间歇灭菌
最新.
9
湿热灭菌条件
• 121℃× 15min、 121℃× 30min 、116 ×
40min 或其他可以保证灭菌效果的程序条 件。
×
• 过度杀灭法 • 灭菌过程有适当的装载方式,保证灭菌有
• 微生物种类和数量
• 灭菌物品特性
• 蒸汽的性质
饱和蒸汽 热含量高 潜热大 穿透力强
湿饱和蒸汽
最新.
10
灭菌容器操作注意
• 使用前认真检查设备的完好性
• 灭菌时须先将灭菌器中冷空气排出,以保
证最佳灭菌效果
• 灭菌时间应从待灭菌物品到达预定温度时
算起
• 灭菌完毕后停止加热,待压力表降至0,放
汽、开启灭菌器,物品温度降至80℃ 以下 时才能将灭菌器门全部开启
最新.
11
影响湿热灭菌的因素
• 辐射灭菌:短小芽孢杆菌孢子(ATCC27142等,活孢子数为5×107~
5×108个/片 )
• 气体灭菌:
环氧乙烷灭菌:枯草芽孢杆菌孢子(ATCC9372等,活孢子数为 5×105~5×106菌孢子(ATCC7953等,活孢子 数为1×106~5×106个/片 )
不挥发,不易燃
无色醚样臭味气体,沸点 10.8 扩散穿透能力强,属广谱杀菌
环氧乙烷
℃,沸点以下为无色透明液 剂;用于对热敏感的药物等的
体,比重 0.882,溶于水。 灭菌;时间长,费用贵。
苯酚(石炭酸)
3~5%
地面、墙壁喷撒
甲酚皂溶液(来苏尔)
5~100%
• 效果可靠、操作简便 • 应用广泛:容器、培养基、无菌衣、胶塞等 • 包括
– 热压灭菌 – 流通蒸汽灭菌 – 煮沸灭菌 – 低温间歇灭菌
最新.
9
湿热灭菌条件
• 121℃× 15min、 121℃× 30min 、116 ×
40min 或其他可以保证灭菌效果的程序条 件。
×
• 过度杀灭法 • 灭菌过程有适当的装载方式,保证灭菌有
• 微生物种类和数量
• 灭菌物品特性
• 蒸汽的性质
饱和蒸汽 热含量高 潜热大 穿透力强
湿饱和蒸汽
消毒、灭菌 PPT课件
油剂、粉剂、玻璃器皿、金属制品等各类物品。 灭菌条件为:160℃持续2h ,或165℃持续1h 或
180℃持续30min 注意事项:不适于纤维织物、塑料制品等的消毒灭菌
烤箱
对物品的要求: 高温下不变质, 不损坏、不蒸发 的物品,如油剂、 金属制品、玻璃 器具等。
1、热力消毒灭菌法-----湿热法
由空气和水蒸气导热,传热快,穿透力强。
1、热力消毒灭菌法-----干热法
1)燃烧法 定义:是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法。 特点:简单、迅速、彻底 适用:1)无保留价值的污染物品,如废弃物、病
理标本、带脓性分泌物的敷料和纸张等 2)某些金属器械或搪瓷类物品急用时也可
用燃烧法(锐利刀剪禁用此法以免锋刃 变钝)。
第二节 消毒、灭菌
教学目标
1、掌握清洁、消毒、灭菌的概念 2、掌握消毒灭菌的方法 3、熟悉常见的清洁、消毒、灭菌工作
一、概念:
(一)清洁(cleaning):是指用物理方法清除物体 表面的污垢、尘埃和有机物.
目的: 去除和减少微生物,但并非杀灭微生物。
(二)消毒(disinfection): 用物理或化学的方法清除或杀灭除芽胞以外的所
灭菌灯内装有臭氧发生管,在电场作用下,可 将空气中的氧气转换成高纯臭氧。主要用于空气、 物品表面等的消毒。
(2)紫外线灯管消毒法
2)使用方法
1、空气消毒:消毒前做好室内清洁卫生工作(紫外线
易被灰尘微粒吸收而影响效果),关闭门窗,人员停止走动, 每10m2安装30W紫外线灯管一支,有效距离不超过2m,照射 时间为30~60分钟;
2、物品消毒:消毒时应将物品摊开或挂起以减少遮挡
(紫外线穿透力差),有效距离为25㎝~60cm,照射时间为 20~30分钟。
180℃持续30min 注意事项:不适于纤维织物、塑料制品等的消毒灭菌
烤箱
对物品的要求: 高温下不变质, 不损坏、不蒸发 的物品,如油剂、 金属制品、玻璃 器具等。
1、热力消毒灭菌法-----湿热法
由空气和水蒸气导热,传热快,穿透力强。
1、热力消毒灭菌法-----干热法
1)燃烧法 定义:是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法。 特点:简单、迅速、彻底 适用:1)无保留价值的污染物品,如废弃物、病
理标本、带脓性分泌物的敷料和纸张等 2)某些金属器械或搪瓷类物品急用时也可
用燃烧法(锐利刀剪禁用此法以免锋刃 变钝)。
第二节 消毒、灭菌
教学目标
1、掌握清洁、消毒、灭菌的概念 2、掌握消毒灭菌的方法 3、熟悉常见的清洁、消毒、灭菌工作
一、概念:
(一)清洁(cleaning):是指用物理方法清除物体 表面的污垢、尘埃和有机物.
目的: 去除和减少微生物,但并非杀灭微生物。
(二)消毒(disinfection): 用物理或化学的方法清除或杀灭除芽胞以外的所
灭菌灯内装有臭氧发生管,在电场作用下,可 将空气中的氧气转换成高纯臭氧。主要用于空气、 物品表面等的消毒。
(2)紫外线灯管消毒法
2)使用方法
1、空气消毒:消毒前做好室内清洁卫生工作(紫外线
易被灰尘微粒吸收而影响效果),关闭门窗,人员停止走动, 每10m2安装30W紫外线灯管一支,有效距离不超过2m,照射 时间为30~60分钟;
2、物品消毒:消毒时应将物品摊开或挂起以减少遮挡
(紫外线穿透力差),有效距离为25㎝~60cm,照射时间为 20~30分钟。
实验室消毒灭菌共66页PPT
谢谢!
51、 天 下 之 事பைடு நூலகம்常成 于困约 ,而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸,生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业,需 要决心 ,能力 ,组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
实验室消毒灭菌
26、机遇对于有准备的头脑有特别的 亲和力 。 27、自信是人格的核心。
28、目标的坚定是性格中最必要的力 量泉源 之一, 也是成 功的利 器之一 。没有 它,天 才也会 在矛盾 无定的 迷径中 ,徒劳 无功。- -查士 德斐尔 爵士。 29、困难就是机遇。--温斯顿.丘吉 尔。 30、我奋斗,所以我快乐。--格林斯 潘。
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
消毒与灭菌技术PPT课件
煮沸消毒法(boiling sterilization)
要求 适用 方法 注意
❖殖❖配可强防❖物❖橡▪▪▪▪经应 有 空 物煮将 的体成提杀锈取 将适如❖浸沸❖❖第品胶轴将腔品消间从间后轴碗应 置5前将消如出,1高菌。▪, , 当碳用金没二根玻橡~节物导不类及冷为放节、毒用 于%物毒中海 水 延水据璃胶达沸作酸的管品宜于属在次消水入1或盆1时等无 无~0器制物拔 长0器须刷放的品时途毒或,盖不到点用氢~的耐、水水间菌 菌分2皿品品械洗先置高时温时沸打能1刷间加沸消达,钠煮%湿搪;中沸器 容5应用性钟或在干过间水间开重的点m点洗从入毒还1海加时的用纱质、瓷械 器,后带腔净多中为叠再i可地n受0也纱布决干水物拔内盖,将 内效可入浓放5,放耐 、5然重区杀气~低布 包定℃灌的大每入要入物净沸品果去水度高玻后新气1压灭包 好放水容小,,保水,增0品,后,。污中时温璃m压加计裹 ,入影煮器相繁需消证中高增及i全计则n好 待水、低,,应同响的和热时毒物后适时后 水的部算在时煮, 沸时
特点:紫外线穿透力较弱
紫外线可杀灭多种微生物,包括杆菌、 病毒、真菌、细菌繁殖体等。杀灭繁殖 体需3~5s;杀灭芽孢需10min以上。
杀菌机制
使菌体DNA失去转换能力而死亡; 破坏菌体蛋白质中的氨基酸,使菌体蛋白光解 变性; 降低菌体内氧化酶的活性,使氧化能力丧失; 使空气中的氧电离产生具有极强杀菌作用的臭 氧。
第三章 清洁、消毒与灭菌技术
一、基本概念 二、物品清洁法 三、物理方法 四、化学方法
一 基本概念
洁清消 毒灭菌防 腐
是切清 上清上污抑 与清除 的除的迹制 繁除或 一脂物病,微 殖如或杀 切品等原生尘杀灭 微上微物埃灭物生的生的,物品物油一物生品, 长 以杀灭芽孢为准
病原实验室消毒灭菌ppt课件
注意事项: 甲醛对人体有毒性和刺激性,应做好 对操作人员的防护.熏蒸时应严格控制温 度和相对湿度,以保证消毒效果.消毒后应 通风,使甲醛气体散尽.
化学消毒灭菌方法
2、戊二醛 适用范围:适用于不耐热的医疗器械和精密仪 器等消毒与灭菌 使用方法:使用前要活化,一般可以连续使 用,2%7-14 天,3.4%28天.常用浸泡法,即 将清洗、晾干待灭菌处理的物品浸没于装 有戊二醛的容器中,加盖灭菌处理,应浸泡 10h,消毒处理,一般20-45min,用无菌水 冲洗干净,并无菌擦干后使用
2)擦拭法:对大件物品或其他不能用浸泡法消毒的 物品用擦拭法消毒。 3)喷洒法:对一般污染的表面,1000mg/L的消毒 液均匀喷洒,作用30min以上;对细菌芽孢污染物 品的消毒用,用含有效氯5000mg/L消毒液均匀 喷洒,作用60min以上 4)干粉消毒法:对排泄物的消毒,用含氯消毒剂干 粉加入排泄物中,使含有效氯10000mg/L,略加 搅拌后作用2-6h;对医院污水的消毒,用干粉按 有效氯50mg/L用量加入污水,并搅拌均匀,作用 2h后,测定余氯大于6.5mg/L即可排放
3)擦拭法:对大件物品或其他不能用浸泡 法消毒的物品用0.2%-0.5%过氧乙酸擦 拭,作用30min 4)喷洒法:对一般污染表面的消毒用0.2 %-0.5%过氧乙酸喷洒,作用30- 60min 注意事项 1)过氧乙酸不稳定,应贮存于通风阴凉处, 用前应测定有效含量,原液浓度低于12% 时禁止使用 2)稀释液临用前配置,配置溶液时忌与碱 或有机物相混合
选择消毒灭菌方法的原则
• 耐高温、湿度的物品和器材,应首选压力 蒸汽灭菌,耐高温的玻璃器材、油剂类和 干粉类等可选用干热灭菌 • 不耐热、不耐湿,以及贵重物品,可选用环 氧乙烷或低温蒸汽甲醛气体消毒、灭菌 • 器械的 浸泡灭菌,应选择对金属基本无腐 蚀的消毒剂 • 选择表面消毒的方法,应考虑表面性质,光 滑表面可选择紫外线消毒器近距离照射, 或液体消毒剂擦拭;多孔材料表面可采用 喷雾消毒法
消毒与灭菌PPT课件
有机物(蛋白质) 开口容器(无盖) 工作液的初始浓度(储藏高浓度或使用浓度) 使用频率和特性 室内条件(高温时能释放氯气)
一般情况: 一天多次浸泡、含高浓度有机物的材料,应每天至少更换 一次; 使用频率较低的漂白剂溶液,则可以维持一周时间。
-
20
2)有效氯浓度
• 常规实验室用于消毒的有效氯浓度应为1 g/L。
注意!!!
• 预清洁时必须谨慎,以避免暴露于感染性物质; • 必须使用与以后使用的杀菌剂化学上相容的物质; • 通常采用相同的化学杀菌剂进行预清洁和消毒;
• 是否进行预清洁应根据工作性质和需要来决定
-
11
清洁
-
12
化学消毒方法
消毒剂与灭菌剂:
用于杀死病原微生物的化学品或化学混合物
抗菌剂与防腐剂
气体消毒剂与烟雾灭菌剂
消毒剂的浓度(浓度越高, 消毒效果越好? ) 消毒剂的作用时间 注意消毒剂有效期!-消毒剂的有效期
消毒剂使用的有效期限
-
14
耐受 敏感
Prions
细菌芽孢
Cryptosporidium parvum
分枝杆菌(如 TB,M.terrae ) 非脂类或小病毒(如脊 髓灰质炎病毒 , 柯萨奇病毒,HBV) 真菌(如,念珠菌属,曲霉属) 细菌繁殖体(如:金葡,绿脓)
(不一定杀灭其孢子)
2. 灭菌(sterilization): 杀灭和/或去除所有微生物及其孢子的过程
-
6
基本概念
3.抗菌剂(antimicrobial) 能够杀灭或去除微生物或抑制其生长和繁殖的制剂
4.消毒剂(disinfectant)
用于杀灭微生物的化学品或化学混合物,但不一定杀 灭孢子,消毒剂常用于非生命物体或其表面
一般情况: 一天多次浸泡、含高浓度有机物的材料,应每天至少更换 一次; 使用频率较低的漂白剂溶液,则可以维持一周时间。
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2)有效氯浓度
• 常规实验室用于消毒的有效氯浓度应为1 g/L。
注意!!!
• 预清洁时必须谨慎,以避免暴露于感染性物质; • 必须使用与以后使用的杀菌剂化学上相容的物质; • 通常采用相同的化学杀菌剂进行预清洁和消毒;
• 是否进行预清洁应根据工作性质和需要来决定
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清洁
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化学消毒方法
消毒剂与灭菌剂:
用于杀死病原微生物的化学品或化学混合物
抗菌剂与防腐剂
气体消毒剂与烟雾灭菌剂
消毒剂的浓度(浓度越高, 消毒效果越好? ) 消毒剂的作用时间 注意消毒剂有效期!-消毒剂的有效期
消毒剂使用的有效期限
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耐受 敏感
Prions
细菌芽孢
Cryptosporidium parvum
分枝杆菌(如 TB,M.terrae ) 非脂类或小病毒(如脊 髓灰质炎病毒 , 柯萨奇病毒,HBV) 真菌(如,念珠菌属,曲霉属) 细菌繁殖体(如:金葡,绿脓)
(不一定杀灭其孢子)
2. 灭菌(sterilization): 杀灭和/或去除所有微生物及其孢子的过程
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基本概念
3.抗菌剂(antimicrobial) 能够杀灭或去除微生物或抑制其生长和繁殖的制剂
4.消毒剂(disinfectant)
用于杀灭微生物的化学品或化学混合物,但不一定杀 灭孢子,消毒剂常用于非生命物体或其表面
灭菌与灭菌技术PPT课件(模板)
此法在较高温下可以杀死细菌繁殖体但不能杀死芽胞,所以在较低温度下杀死细菌繁殖体的同时让芽胞发育变为繁殖体,这样下一次 加热时可以将其杀死,反复操作至芽胞全部灭绝 饱和蒸汽:即蒸汽的温度与水的沸点相当,当蒸汽的压力达到平衡时,蒸汽中不含有微细的水滴。 热力灭菌或直接用钴-60辐射灭菌 氧化分解细菌内部葡萄糖所需的酶
▪ 热力灭菌法分为干热灭菌法和湿热灭菌法。在同 一温度下,湿热灭菌的效力比干热灭菌大
▪ 细菌在湿热下,菌体吸收水分,蛋白质较 易凝固。这点可以从鸡蛋白含水量与凝固 温度之间的关系看出来,凝固蛋白质所需 要的温度与蛋白质的含水量有关
▪ 湿热的穿透力比干热大
▪ 湿热灭菌时,水蒸气与物品接触而凝结成 水,因而发出潜热(汽化热),加速细菌 的死亡
无菌操作法(Aseptic technique):是指在整个 操作过程中利用和控制一定条件,尽量使产品 避免微生物污染的一种操作方法
细菌的耐受性
➢ 致死温度:是指在一定的时间内,杀死 某种细菌所需要的最低温度
➢ 致死时间:是指在某一温度下,杀死某 种细菌所需要的最短时间,又称热死时 间
灭菌和除菌对制剂的影响
▪ 其叫中 染N菌t为度灭概菌率后,预一期般达取到N的t为微10生-6 物残存数,又 ▪ 生杀物 死F容0值器可中认全为部是微以生相物当所于需1要21的℃时热间压灭菌时
➢ 例如,将含有200个嗜热脂肪芽胞杆菌的5%葡 萄糖水溶液以121℃热压灭菌时,其D值为2.4 分,则F0=2.4×(lg200-lg10-6)=19.92min
(一)干热灭菌法
火焰灭菌法
▪ 灼烧是最迅速、可靠、简便、紧急的灭菌方法 ▪ 金属品如铂丝、铁或镍制。不锈钢制的刮刀、镊
子等,瓷制品如研钵等,玻璃制器皿如玻棒、载 玻片、试管等的灭菌都可用此 ▪ 采用该法灭菌时,最少须在火焰中加热20秒,通 常是要将灭菌的物品迅速通过火焰3~4次。对研 钵的简便灭菌方法是在其中加入少量乙醇点火燃 烧;对于玻璃、瓷制品,操作前应充分干燥,以 免烧灼时炸裂损坏
▪ 热力灭菌法分为干热灭菌法和湿热灭菌法。在同 一温度下,湿热灭菌的效力比干热灭菌大
▪ 细菌在湿热下,菌体吸收水分,蛋白质较 易凝固。这点可以从鸡蛋白含水量与凝固 温度之间的关系看出来,凝固蛋白质所需 要的温度与蛋白质的含水量有关
▪ 湿热的穿透力比干热大
▪ 湿热灭菌时,水蒸气与物品接触而凝结成 水,因而发出潜热(汽化热),加速细菌 的死亡
无菌操作法(Aseptic technique):是指在整个 操作过程中利用和控制一定条件,尽量使产品 避免微生物污染的一种操作方法
细菌的耐受性
➢ 致死温度:是指在一定的时间内,杀死 某种细菌所需要的最低温度
➢ 致死时间:是指在某一温度下,杀死某 种细菌所需要的最短时间,又称热死时 间
灭菌和除菌对制剂的影响
▪ 其叫中 染N菌t为度灭概菌率后,预一期般达取到N的t为微10生-6 物残存数,又 ▪ 生杀物 死F容0值器可中认全为部是微以生相物当所于需1要21的℃时热间压灭菌时
➢ 例如,将含有200个嗜热脂肪芽胞杆菌的5%葡 萄糖水溶液以121℃热压灭菌时,其D值为2.4 分,则F0=2.4×(lg200-lg10-6)=19.92min
(一)干热灭菌法
火焰灭菌法
▪ 灼烧是最迅速、可靠、简便、紧急的灭菌方法 ▪ 金属品如铂丝、铁或镍制。不锈钢制的刮刀、镊
子等,瓷制品如研钵等,玻璃制器皿如玻棒、载 玻片、试管等的灭菌都可用此 ▪ 采用该法灭菌时,最少须在火焰中加热20秒,通 常是要将灭菌的物品迅速通过火焰3~4次。对研 钵的简便灭菌方法是在其中加入少量乙醇点火燃 烧;对于玻璃、瓷制品,操作前应充分干燥,以 免烧灼时炸裂损坏
消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全(ppt)
杀细菌繁殖体,真菌和大部分病毒
含碘消毒剂: 碘伏、碘酊 氧化作用,但有刺激性
醇类消毒剂 乙醇、异丙醇 脱细胞膜的脂类,并使菌体蛋白变性 70-75%乙醇作用最强
(三)低效消毒剂:
杀多数细菌繁殖体,不能杀芽孢和结核杆菌以及 一些真菌和病毒
新洁尔灭
皮肤、粘膜、地面、物品表面(不与阴离子表面活性剂合用)
洗必泰
皮肤、粘膜、地面、物品表面(不与阴离子表面活性剂合用)
高锰酸钾
氧化作用 皮肤、粘膜、蔬菜、水果的消毒
第二节 消毒灭菌的运用
(一)、医疗器械物品的消毒灭菌
1、高危器械物品 用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品 都应该灭菌。
2、中危器械物品 用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采 用消毒即可。
煮沸法
煮沸温度为100℃,一般细菌繁殖体5分钟就 杀死了,芽胞需要1-2小时才可被杀灭。
流动蒸气消毒法
利用一个大气压下100℃的水蒸气进行消毒, 细菌繁殖体15-30分钟杀灭。蒸笼具有类似的原 理。
间歇蒸气灭菌法
利用反复多次的流动蒸气间歇加热以达到灭菌 消毒的目的。
高压蒸气灭菌法
一种最有效的灭菌方法。灭菌的温度取决于 蒸气的压力。在103.4kPa蒸气下,温度达到 121.3℃,维持15-20分钟,可杀灭包括细菌芽 胞在内的所有微生物。
紫外线灯管
2. 电离辐射 常用γ射线(钴-60)和β射线。
原理:
干扰代谢和DNA合成,破坏细胞膜、酶,产生 H2O2、游离羟基杀菌。
特点: 具有较高的能量与穿透力,可在常温下对
不耐热的物品灭菌,故又称“冷灭菌”。
运用: 可用于消毒不耐热的塑料注射器和导管等,
亦能用于食品、药品、生物制品等的消毒灭 菌。
含碘消毒剂: 碘伏、碘酊 氧化作用,但有刺激性
醇类消毒剂 乙醇、异丙醇 脱细胞膜的脂类,并使菌体蛋白变性 70-75%乙醇作用最强
(三)低效消毒剂:
杀多数细菌繁殖体,不能杀芽孢和结核杆菌以及 一些真菌和病毒
新洁尔灭
皮肤、粘膜、地面、物品表面(不与阴离子表面活性剂合用)
洗必泰
皮肤、粘膜、地面、物品表面(不与阴离子表面活性剂合用)
高锰酸钾
氧化作用 皮肤、粘膜、蔬菜、水果的消毒
第二节 消毒灭菌的运用
(一)、医疗器械物品的消毒灭菌
1、高危器械物品 用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品 都应该灭菌。
2、中危器械物品 用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采 用消毒即可。
煮沸法
煮沸温度为100℃,一般细菌繁殖体5分钟就 杀死了,芽胞需要1-2小时才可被杀灭。
流动蒸气消毒法
利用一个大气压下100℃的水蒸气进行消毒, 细菌繁殖体15-30分钟杀灭。蒸笼具有类似的原 理。
间歇蒸气灭菌法
利用反复多次的流动蒸气间歇加热以达到灭菌 消毒的目的。
高压蒸气灭菌法
一种最有效的灭菌方法。灭菌的温度取决于 蒸气的压力。在103.4kPa蒸气下,温度达到 121.3℃,维持15-20分钟,可杀灭包括细菌芽 胞在内的所有微生物。
紫外线灯管
2. 电离辐射 常用γ射线(钴-60)和β射线。
原理:
干扰代谢和DNA合成,破坏细胞膜、酶,产生 H2O2、游离羟基杀菌。
特点: 具有较高的能量与穿透力,可在常温下对
不耐热的物品灭菌,故又称“冷灭菌”。
运用: 可用于消毒不耐热的塑料注射器和导管等,
亦能用于食品、药品、生物制品等的消毒灭 菌。
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实验室空间的灭菌
1.实验室空间的灭菌可采用化学药剂灭菌法,常用的化学灭 菌有甲醛等挥发性药剂的熏蒸与新洁尔灭等液体消毒剂的 喷淋灭菌 2.无菌室、培养间等空间的灭菌也可采用电磁波、射线灭菌 法,可采用Co60辐照、紫外线照射等方式进行 要求:保证实验样品不受污染 对人体安全不构成危害
灭菌效果的测定
实验室环境灭菌的方案设计
待灭菌物品的分类
实验室待灭菌物品可根据其大小、用途、表 面的规则程度……的不同对其进行分类 这里大体可分为以下三类: 操作器具、培养基等小型物品 培养箱、超净工作台等 实验室空间
操作器具、培养基等小型物品的灭菌
1.对一些要求保持干燥的实验器具和材料可以采用干热灭菌 法。 2.接种针、玻璃棒、三角瓶口等的灭菌可以采用火焰灭菌法 。 3.培养皿(基)、试管、三角瓶等的灭菌可以采用湿热灭菌 法
物体表面采样方法
1、采样时间:消毒处理后 4h 内进行采样。 2、采样面积:被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面 ≥100cm2,取 100cm2。 3、采样方法: 用 5cm×5cm 的标准灭菌规格板,放在被检物体表面,用浸 有无菌生理盐水采样液的棉拭子 1 支,在规格板内横、竖 往返均匀涂抹各 5 次,并随之转动棉拭子,连续采样 4 个 规格板面积,剪去手接触部分,将棉拭子投入含无菌洗脱 液10ml试管中并注明消毒剂名称立即送检。由细菌室加相 应的中和剂。 门把手等小型不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样全部。
结果计算:
平皿上菌落的平均数×采样液稀倍数 物体表面细菌菌落总数= ———————————— (cfu/ cm2) 采样面积(cm2)
小型物体表面的报告结果,用 cfu/ 件表示。
采样的原则 在采样过程,采样时要有一定的数量和固定的部位。 采样后6h内尽快送检,若样品保存于0~4度条件下,时间 不宜超过24h.
培养箱、超净工作台等物品内壁或表面的灭 菌
1.由于培养箱、超净工作台等物品内壁或表面相对平整、面 积较大,因此可采用电磁波、射线灭菌法,考虑到经济与 便捷性其中以紫外线灭菌最为常用 2.由于化学药剂较易产生残留、对这些器具有一定腐蚀性、 易产生灭菌死角等原因故很少采用(超净工作台台面可用 酒精擦拭)
结果计算:
50000×平均菌落数 空气细菌菌落总数= ———————————— (cfu/m3) 平板面积(cm2)×5min
空气净化效果监测(平板暴露法)
平板暴露法是利用微生物在空气中的自然沉降进行 采样的,也是最简便,最常用的一种方法 时间:消毒处理后与进行医疗活动之前进行 采样高度:与地面垂直高度 1.5m,距墙 1m。 布点方法:室内面积≤30m2,设内、中、外对角线3 点,即中心一点,内、外点布点部位距墙壁1m处; 室内面积>30m2,设 4 角及中央 5 点,4 角的布点 部位距墙 1m。 采样方法:用从化验室取回的普通营养琼脂平板在 采样点暴露5min后收回送验