沾化冬枣过氧化氢酶(CAT)活性的研究

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抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性测定方法

抗氧化酶（SOD、POD、CAT）活性测定方法一、超氧化物歧化酶（SOD）活性测定（氮蓝四唑光化还原法）1、试剂的配制（1）0.05mol/L磷酸缓冲液(PBS，pH7.8)：A母液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液: 取Na2HPO4·12H2O（分子量358.14）71.7g；B母液：0.2mol/L磷酸二氢钠溶液：取NaH2PO4·2H2O（分子量156.01）31.2g。

分别用蒸馏水定容到1000ml。

0.05mol/L PBS（pH7.8）的配制：分别取A母液(Na2HPO4) 228.75ml，B母液(NaH2PO4) 21.25ml，用蒸馏水定容至1000ml。

加入10gPVP（聚乙烯吡咯烷酮）参考文献：李合生主编：植物生理生化实验原理和技术.高等教育出版社，2000：267～268。

（2）130mmol/L甲硫氨酸溶液：取1.399g Met用磷酸缓冲液（pH7.8）定容至100ml。

网上说定容到100ML我也不懂。

拜托（3）100μmol/L EDTA-Na2溶液：取0.03721g EDTA-Na2用磷酸缓冲液定容至1000ml；（4）100μM核黄素溶液：取0.0075g核黄素用蒸馏水定容至100ml，避光保存，随用随配，并稀释10倍（5）750μmol/L氮蓝四唑（NBT）溶液：称取0.06133g NBT用磷酸缓冲液定容至100ml 避光保存；酶液制备：取一定部位的植物叶片（视需要定，去叶脉）0.5g于预冷的研钵中，加2ml 磷酸缓冲液在冰浴下研磨成浆，加缓冲液使终体积为10ml。

取5ml于10000r/min下离心10min，上清液即为SOD粗提液。

提取酶液时如何保存;如果没有测完的需要放在4℃的冰箱里。

2、酶活性测定2．显色反应取试管（要求透明度好）5支，3支为样品测定管，1支为对照管，另外1支作为空白，按表39-1加入各溶液。

混匀后将空白管置暗处，其它各管于4000lx日光灯下反应20min（要求各管受光情况一致，反应室的温度高时时间可适当缩短，温度低时时间可适当延长）。

沾化冬枣过氧化氢酶(CAT)活性的研究

沾化冬枣过氧化氢酶(CAT)活性的研究
陈印平
【期刊名称】《滨州学院学报》
【年(卷),期】2007(023)003
【摘要】通过对沾化县3个样地冬枣过氧化氢酶(CAT)活性的研究发现,同株冬枣中部CAT活性高,冬枣研究所的冬枣酶活性较高,表明冬枣研究所的冬枣比马武与古城的更能适应不良环境,冬枣叶CAT活性比果实的高,分别高22.4%、38.8%、28.6%.
【总页数】3页(P51-53)
【作者】陈印平
【作者单位】滨州学院,黄河三角洲生态环境研究中心,山东滨州,256603
【正文语种】中文
【中图分类】Q946
【相关文献】
1.低温条件下柞蚕血淋巴过氧化氢酶(CAT)活性的变化 [J], 夏润玺;李健男;曹慧颖;岳冬梅
2.柞蚕血液过氧化氢酶(CAT)活性的研究 [J], 李健男;夏润玺;刘勤;曹慧颖
3.脱氧核糖核酸(DNA)对过氧化氢酶(CAT)活性的影响研究 [J], 刘润芝;印大中
4.重金属污染对黄瓜种子过氧化氢酶(CAT)活性的影响 [J], 于锡宏;陈友;马凤鸣
5.低浓度阿特拉津对鲫鱼过氧化氢酶(CAT)活性的影响 [J], 陈家长;孟顺龙;胡庚东;瞿建宏;吴伟
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cat过氧化氢酶

CAT 过氧化氢酶简介：过氧化物酶是由微生物或植物所产生的一类氧化还原酶，是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶。

它们能催化很多反应，主要存在于细胞的过氧化物酶体中，以铁卟啉为辅基，可催化过氧化氢氧化酚类和胺化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。

其最早由J. Rhodin于1954年在鼠肾小管上皮细胞中发现。

本文章主要介绍一些外界因素对CAT的酶活性影响，下面分别介绍一下从几篇论文中找到的信息。

一：硅对水稻叶片抗氧化酶活性的影响:以感白叶枯病的水稻品种日本晴(Oryza sativa L.cv .Nipponbare)为材料, 研究了硅对接种白叶枯病菌后的水稻病情指数、叶片丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量以及超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、脂氧合酶(LOX)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的影响。

结果表明, 施硅能显著降低水稻白叶枯病的病情指数, 防治效果达62.86%。

接种白叶枯病菌后48 h 内, 施硅处理的水稻植株, 叶片中丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量显著升高;显著提高感病植株叶片中脂氧合酶(LOX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性; 降低过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性;促进过氧化氢(H2O2)在植物体内积累, 加强膜脂过氧化作用。

因此, 硅可通过参与植株体内代谢, 调节抗氧化系统酶活性。

二，紫外光对几种水生植物过氧化氢酶（CAT）活性的影响通过测定被照射植物分解过氧化氢后放出氧气的体积，确定植物过氧化氢酶（CAT）的活性。

结果表明，满江红，浮萍和水花生3种植物受过量紫外光不同时间照射，CAT活性都明显升高。

但活性峰值因植物不同而异，即满江红的CAT峰值出现在被照射72h后；浮萍的CAT峰值出现在被照射24h后；水花生则出现在被照射8h后。

撤除过紫外光照射后，3种植物的CAT活性逐渐降低。

过氧化氢酶活性测定实验报告

过氧化氢酶活性测定实验报告实验目的，通过测定过氧化氢酶活性，探究不同条件下过氧化氢酶的活性变化规律，为进一步研究过氧化氢酶的功能和应用提供实验数据支持。

实验原理，过氧化氢酶是一种重要的酶类，在生物体内起着重要的氧化还原作用。

本实验采用比色法测定过氧化氢酶活性，其原理是过氧化氢酶催化过氧化氢分解成水和氧气，过氧化氢酶活性与生成的氧气量成正比。

实验材料与方法，实验中所需材料包括过氧化氢酶、过氧化氢、磷酸盐缓冲液、吡啶甲酸钠盐等。

首先，按照一定比例将过氧化氢酶和过氧化氢混合，然后加入磷酸盐缓冲液和吡啶甲酸钠盐，使混合液在一定温度下进行反应。

接着，通过比色法测定生成的氧气量，进而计算出过氧化氢酶的活性。

实验结果与分析，在不同温度、pH值、底物浓度等条件下，测得过氧化氢酶的活性数据。

通过对比分析不同条件下的活性数据，发现过氧化氢酶在不同条件下呈现出不同的活性变化规律。

在温度较低时，过氧化氢酶活性较低；在酸性环境下，过氧化氢酶活性受到抑制；随着底物浓度的增加，过氧化氢酶活性呈现出逐渐增加的趋势。

结论与讨论，通过本实验，我们得出了过氧化氢酶活性与温度、pH值、底物浓度等因素之间的关系。

这些结果对于深入研究过氧化氢酶的功能机制，以及在生物医学、生物工程等领域的应用具有一定的指导意义。

同时，我们也发现过氧化氢酶在不同条件下表现出不同的活性变化规律，这为进一步探究过氧化氢酶的调控机制提供了重要的实验数据支持。

综上所述，本实验通过测定过氧化氢酶活性，揭示了过氧化氢酶在不同条件下的活性变化规律，为进一步研究过氧化氢酶的功能和应用提供了实验数据支持。

希望本实验结果能够为相关领域的研究工作提供一定的参考价值。

滨州市沾化冬枣核中活性多糖的提取

滨州市沾化冬枣核中活性多糖的提取作者：朱华刘香红赵娜王滕方菁菁来源：《绿色科技》2016年第20期摘要：利用沾化冬枣核为试验材料，进行了冬枣核多糖的提取分离研究。

通过单因素试验确定冬枣核中多糖的含量，进一步通过正交试验确定了多糖的较优提取条件。

结果表明：各因素对枣核多糖提取效果的影响程度从高到低依次为浸提温度>浸提时间>料液比。

综合考虑提取效果与生产成本，对提取条件进行优化，确定了适宜的提取条件：料液比1∶20、浸提温度90 ℃、浸提时间4 h。

以期为冬枣的综合加工利用、为从废弃植物材料中提取生物活性成分提供参考。

关键词：冬枣核；活性物质；提取中图分类号：TS255.4文献标识码：A 文章编号：1674-9944（2016）20-0117-031 引言沾化冬枣（Zyzyhpus jujuha dates）是鼠李科枣属的植物，是一种晚熟、鲜食、优质枣类种质资源[1]。

冬枣富含19种人体所需的氨基酸和多种维生素，有很高的食疗价值和多种保健功效[2]。

目前，多糖广泛分布于自然界中，有研究显示具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、降血糖等多种功效[3]。

常见的多糖的提取方法有浸提法、超声提取法、微波法、超高压等方法[4]，而浸提法又是一种最常见的提取方法。

超声提取法[5，6]和微波提取法[7，8]是近年来发展起来的提取方法，具有选择性高、能耗低、效率高等优点，已被广泛应用于多糖的提取。

对沾化冬枣的开发利用研究主要集中在冬枣果肉果皮中活性物质的提取，但是对冬枣核活性物质的提取没有进行深入探讨。

冬枣采后不仅可以鲜食，而且可以用于加工各种饮料，营养保健品。

但加工过程中枣核往往被废弃掉，因此，对冬枣核中活性物质提取的探究，将有助于枣核的开发利用。

2 材料与方法2.1 材料的来源从市场上采购滨州沾化冬枣，取出枣核，烘干至恒重后用微型试样粉碎机粉粹，过筛，置于棕色瓶中并低温保存，备用。

2.2 实验仪器与药品试剂2.2.1 实验仪器所用实验仪器如表1所示。

过氧化氢酶活性的测定

A 空 10 5 白
B 反 10 应
55 - 1
分钟
5
51
医学课件ppt
3
5 VA(空白)
=
VB(反应
35
液)
=
8
五、实验结果与计算：
1、被分解的H2O2量（mg） = （空白滴定值-样品滴定值）×Na2S2O3摩尔浓度×17
2、CAT活性（mg.g-1.min-1）= 被分解的H2O2量（mg）×(总体积÷测定取液量) 样品重（g）×时间（min）
H2O2（余）+2KI+H2SO4----→I2+K2SO4+2H2O
I2 +2Na2S2O3 --→2NaI+Na2S4O6（连二硫酸钠）
用硫代硫酸钠分别滴定空白液(可求出总的H2O2量)和反应
液(可求出未分解的H2O2量)，再根据二者滴定值之差求出分
解的H2O2量。
医学课件ppt
5
三、实验材料、仪器和试剂：
医学课件ppt
6
四、实验步骤：
1、酶液提取：
称取0.5g三叶草，加少量石英砂，CaCO3，2ml水，研成匀浆，移入50ml容量瓶，冲洗研钵数次，定容，静置，过滤。
2、酶促反应：
（1）取锥形瓶2个，编号A，B，各加入10ml酶液，之后立即向A瓶中加入1.8mol/L H2SO45ml，终止酶活性，作空白滴定。
医学课件ppt
9
六、思考题：
1、本实验中影响CAT活性测定的因素有哪些？
医学课件ppt
10
记录两次消耗Na2S2O3的体积医VA学(课空件白p)p，t VB(反应液)。
7
酶活性测定
管号
酶液

过氧化氢酶（CAT）具有哪些特异功能

过氧化氢酶（CAT）具有哪些特异功能过氧化氢酶(CAT)，顾名思义是可以催化过氧化氢分解成氧和水的酶。

然而，你要是认为它只能催化过氧化氢分解那就大错特错了，人家还有特异功能呢。

接下来让德晟小编给大家详细说说这种神奇的酶。

首先，作为一种物质，过氧化氢酶是在1811年被过氧化氢(H2O2)的发现者泰纳尔(Louis Jacques Thénard)首次发现。

1900年，Oscar Loew将这种能够降解过氧化氢的酶命名为“catalase”，即过氧化氢酶，并发现这种酶存在于许多植物和动物中。

1937年，詹姆斯·B·萨姆纳将来自牛肝中的过氧化氢酶结晶，并在次年获得了该酶的分子量。

1969年，牛的过氧化氢酶的氨基酸序列得以解出。

而后1981年，其三维结构得以解析。

几乎所有的生物机体都存在过氧化氢酶。

其普遍存在于能呼吸的生物体内，主要存在于植物的叶绿体、线粒体、内质网、动物的肝和红细胞中，其酶促活性为机体提供了抗氧化防御机理。

CAT是红血素酶，不同的来源有不同的结构。

在不同的组织中其活性水平高低不同。

过氧化氢在肝脏中分解速度比在脑或心脏等器官快，就是因为肝中的CAT含量水平高。

CAT存在于细胞的过氧化物酶体内。

过氧化氢酶是过氧化物酶体的标志酶, 约占过氧化物酶体酶总量的40%。

过氧化氢酶存在于所有已知的动物的各个组织中，特别在肝脏中以高浓度存在。

过氧化氢酶在食品工业中被用于除去用于制造奶酪的牛奶中的过氧化氢。

过氧化氢酶也被用于食品包装，防止食物被氧化。

在纺织工业中，过氧化氢酶被用于除去纺织物上的过氧化氢，以保证成品是不含过氧化物的。

它还被用在隐形眼镜的清洁上:眼镜在含有过氧化氢的清洁剂中浸泡后，使用前再用过氧化氢酶除去残留的过氧化氢。

过氧化氢酶在美容业中的使用:一些面部护理中加入了该酶和过氧化氢，目的是增加表皮上层的细胞氧量。

过氧化氢酶在实验室中还常常被用作了解酶对反应速率影响的工具。

cat 过氧化氢酶

cat 过氧化氢酶简介：过氧化物酶是由微生物或植物所产生的一类氧化还原酶，是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶。

其最早由J. Rhodin于1954年在鼠肾小管上皮细胞中发现。

本文章主要介绍一些外界因素对CAT的酶活性影响，下面分别介绍一下从几篇论文中找到的信息。

一：硅对水稻叶片抗氧化酶活性的影响:以感白叶枯病的水稻品种日本晴(Oryza sativa L.cv .Nipponbare)为材料 ,研究了硅对接种白叶枯病菌后的水稻病情指数、叶片丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量以及超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶。

(CAT)、脂氧合酶(LOX)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的影响。

结果表明,施硅能显著降低水稻白叶枯病的病情指数,防治效果达62.86%。

接种白叶枯病菌后48h内,施硅处理的水稻植株,叶片中丙二醛。

(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量显著升高;显著提高感病植株叶片中脂氧合酶(LOX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;降低过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性;促进过氧化氢(H2O2)在植物体内积累,加强膜脂过氧化作用。

因此,硅可通过参与植株体内代谢,调节抗氧化系统酶活性。

二，紫外光对几种水生植物过氧化氢酶（CAT）活性的影响通过测定被照射植物分解过氧化氢后放出氧气的体积，确定植物过氧化氢酶（CAT）的活性。

结果表明，满江红，浮萍和水花生3种植物受过量紫外光不同时间照射，CAT活性都明显升高。

但活性峰值因植物不同而异，即满江红的CAT峰值出现在被照射72h后；浮萍的CAT峰值出现在被照射24h后；水花生则出现在被照射8h后。

撤除过紫外光照射后，3种植物的CAT活性逐渐降低。

枣树叶片衰老过程中丙二醛含量和抗氧化酶活性的变化

枣树叶片衰老过程中丙二醛含量和抗氧化酶活性的变化摘要：以冬枣、迎白露和中华大枣为试材，研究了枣叶片衰老过程中脂类过氧化产物丙二醛(MDA)含量的变化及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)3种抗氧化酶的变化规律。

结果表明，由MDA含量的变化趋势和3种酶的响应情况看，对MDA含量的调节，不同品种枣树对3种酶的依赖程度不同，冬枣和中华大枣叶片内MDA含量的调节比较依赖于CAT，迎白露则更依靠3种酶的共同作用。

中华大枣的自由基清除能力最强，迎白露叶片自然衰老的时间最迟。

关键词：枣；叶片衰老；MDA；抗氧化酶活性近年来，衰老的自由基损伤学说受到学者重视，该学说认为衰老过程是细胞和组织中不断进行着的自由基损伤反应的总和体现。

正常情况下，植物体内存在着超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)等保护酶，使细胞内促进细胞衰老的活性氧水平很低。

叶片衰老伴随抗氧化酶活性的减低。

丙二醛(MDA)是膜脂过氧化作用的主要产物之一，其积累量多少反映了膜脂过氧化程度的高低，含量增加，说明膜脂发生过氧化。

目前，衰老研究报道大多集中在小麦等农作物上，对枣树衰老过程中MDA含量和抗氧化酶活性变化的研究比较少见。

本试验以冬枣、迎白露和中华大枣3个枣树品种为试材，研究其自然衰老过程中MDA及抗氧化酶活性的变化和内在关系，为揭示枣树衰老机理提供理论依据。

1材料与方法试验于2010年9月初在山东农业大学园艺科学与工程学院试验基地内进行，试材为露地栽培的4年生冬枣、迎白露和中华大枣。

每品种选择大小一致和长势健壮的植株3株，挂牌设为试验株。

2010年5月在每株树上选择新生枝条20枝挂牌标记，观察记录其新生叶片的时间，并于9月份分别取枝条上部叶龄30～40天的完全展开叶(简称嫩叶)、中部叶龄60～70天的成熟叶(简称成叶)和基部叶龄100天以上的衰老叶(简称老叶)，测定相关生理指标，SOD测定参照赵世杰等主编的《植物生理学实验指导》，用NBT比色法测定；POD、CAT和MDA测定参照李合生的方法。

(完整word版)过氧化氢酶(CAT)活性的测定.doc

过氧化氢酶（ CAT ）活性的测定：紫外吸收法一、目的与要求过氧化氢酶普遍存在于植物的所有组织中，其活性与植物的代谢强度及抗寒、抗病能力有一定关系，故常加以测定。

二、原理过氧化氢酶（ catalase）属于血红蛋白酶，含有铁，它能催化过氧化氢分解为水和分子氧，在此过程中起传递电子的作用，过氧化氢则既是氧化剂又是还原剂。

可根据 H2O2的消耗量或 O2的生成量测定该酶活力大小。

过氧化氢在 240nm波长下有强烈吸收，过氧化氢酶能分解过氧化氢，使反应溶液的吸光度（ A 240）随反应时间而降低。

根据测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶的活性。

三、材料、仪器设备及试剂（一）材料：小麦或其它叶片（二）仪器设备： 1. 研钵； 2.紫外分光光度计； 3. 离心机； 4. 恒温水浴；5.容量瓶。

（三）试剂：1. 0.2 mol/L pH7.8 磷酸缓冲液（ pH7.8: 0.2mol/L Na 2HP04 91.5 ml; 0.2mol/LNaH2P04 8.5 ml ）；2． 0.1 mol/LH2 O (30%的 H O 溶液 5.68ml 稀释至 1000ml) 2 2 2二、实验步骤：1、酶液提取称取新鲜植物叶片或其它组织0.5g，置于研钵中，加入2～ 3ml 4℃下预冷的 pH7.0 磷酸缓冲液和少量石英砂研磨匀浆后，转入 25ml 容量瓶中，并用缓冲液冲研钵数次，合并冲洗液，并定容到刻度。

混合均匀，将容量瓶置 5℃冰箱中静置 10min ，取上清液在 4000r/min 下离心 15min，上清液即为过氧化氢粗提液， 5℃下保存备用。

2、测定 10ml 试管 3 支，其中 2 支为样品测定管， 1 支为空白管，按表 1-1 顺序加入试剂。

25℃预热后，逐管加入 0.6ml0.1mol/l 的 H2O2,每加完 1 管立即记时，并迅速倒入石英比色杯中， 260nm 下测定吸光度，每隔 1min 读数 1 次，共测 4min，待 3 支管全部测完后，按式（ 1-1）计算酶活性。

过氧化氢酶活性测定

过氧化氢酶活性测定引言过氧化氢酶是一种广泛存在于生物体中的重要酶类。

它能够催化过氧化氢（H2O2）与还原物质反应，将H2O2分解成水和氧气。

过氧化氢酶在细胞中起着调节氧化应激及清除有害过氧化氢的作用。

因此，测定过氧化氢酶活性对于研究生物体的氧化应激反应以及评估细胞状态具有重要意义。

原理过氧化氢酶的活性可以通过测定其催化过氧化氢分解反应速率来确定。

本实验以庚酮过氧化物（DPI）为底物，通过酶反应将庚酮过氧化物氧化为二氧化碳和乙酰乙醛。

乙酰乙醛的生成量与过氧化氢酶的活性成正比。

实验中，首先准备一定浓度的庚酮过氧化物溶液，并将待测酶样品与庚酮过氧化物混合。

在特定条件下，观察反应体系中庚酮过氧化物的消耗程度。

通过测定庚酮过氧化物消耗量的变化，可以计算出过氧化氢酶的活性。

实验步骤1.准备实验所需试剂和仪器：庚酮过氧化物溶液、酶样品、缓冲溶液、试管、分光光度计等。

2.设置实验条件：温度、pH值等。

3.分别取适量的庚酮过氧化物溶液和酶样品，加入相应的缓冲溶液，混合均匀。

4.在一组对照实验中，将庚酮过氧化物溶液替换为缓冲溶液，以消除庚酮过氧化物自身的分解。

5.在指定的时间间隔内，从不同实验体系中取出一定量的反应液，用分光光度计测定庚酮过氧化物的吸光度。

6.计算不同时间点庚酮过氧化物消耗量的变化，并绘制庚酮过氧化物消耗曲线。

7.根据庚酮过氧化物的消耗速率计算过氧化氢酶的活性。

数据处理根据庚酮过氧化物的消耗曲线，可以确定反应速率。

通过比较对照组与实验组的反应速率，计算过氧化氢酶的活性。

过氧化氢酶的活性计算公式如下：活性（μmol/min/mg）= (△A/min * Vt) / (ε * d * Venz * t * Venz)其中，△A/min为每分钟庚酮过氧化物的吸光度变化量，Vt为总体系体积，ε为庚酮过氧化物的摩尔吸光系数，d为光程，Venz为酶样品的体积，t为反应时间。

结论通过测定过氧化氢酶的活性，可以评估生物体内的氧化应激程度以及细胞的状态。

冬枣果实过氧化物酶酶学特性

食品科技
2012年第 37卷第 4期 FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食品开发
冬枣果实过氧化物酶酶学特性分析
丁薪源，周娜娜*，赵玉梅，曹建康 (中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京 100083)
摘要：以冬枣(Zizyphus jujuba Mill.)果实为材料，研究了枣果实过氧化物酶(Peroxidase，POD)的酶学特性，并探讨了不同抑制剂和激活剂对POD活性的影响，为冬枣的加工与贮藏等过程中防止酶促褐变提供参考和理论依据。结果表明：冬枣枣皮POD活性是枣肉POD活性的10倍，枣果实POD的最适反应温度为40 ℃，最佳反应底物(愈创木酚)浓度为0.0002 mol/L，最大反应速度为Vmax=2.86 U/min，米氏常数Km=0.2516 mol/L。在0~2.0 mmol/L浓度范围内，抑制剂对POD抑制作用为：抗坏血酸＞L-半胱氨酸＞柠檬酸＞EDTA。在0~20.0 mmol/L浓度范围内，激活剂对 POD激活作用为：FeCl3＞CuCl2＞吐温-20。关键词：冬枣；酶学特性；过氧化物酶中图分类号： TS 201.2+5 文献标志码： A 文章编号：1005-9989(2012)04-0031-04
是，冬枣果实在采收、采后运输、贮藏和流通过程中极易受到机械损伤，或者其他不良环境的影响而发生果皮及果肉组织的褐变，严重影响果实的外观品质及商品价值。
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食品开发ห้องสมุดไป่ตู้
食品科技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 2012年第 37卷第 4期
过氧化物酶(Peroxidase，POD)是植物组织中普遍存在的一种氧化还原酶。POD是引起果蔬褐变的关键酶之一。在过氧化氢及供氢体存在的条件下，POD能催化IAA、叶绿素等物质的分解，氧化愈创木酚、绿原酸、儿茶素等酚类复合物及类黄酮物质，并产生各种自由基产物，导致果蔬组织褐变，品质变劣 [1-2]。有些水果如板栗 [3]、荔枝 [4]、香蕉 [5]等中的POD酶学特性，已经进行了相关研究，然而目前关于枣果实POD的酶学特性的研究尚未见报道。本实验拟研究冬枣果实POD酶学特性，分析常用抑制剂和激活剂对POD酶活性的影响，为冬枣的加工与贮藏等过程中防止酶促褐变提供参考和理论依据。 1 材料与方法 1.1 材料与试剂冬枣采于北京市海淀区唐家岭枣园，采后立即运回实验室，于0 ℃冷藏。人工将枣皮、枣肉分离，分别放入-80 ℃冰箱中保存待用。 L-半胱氨酸、乙二胺四乙酸、柠檬酸、抗坏血酸、三氯化铁、氯化铜、吐温-20、愈创木酚、乙酸、乙酸钠等：分析纯试剂；30%H 2O 2(v/ v)溶液。 1.2 仪器与设备 GL-20G-Ⅱ高速冷冻离心机：上海安亭科学仪器厂；T6新世纪紫外可见分光光度计：北京普析通用仪器制造有限公司；HH-6数显恒温水浴锅：江苏省金坊市荣华仪器制造有限公司。 1.3 实验方法 1.3.1 酶的提取与活性测定称取2.0 g冬枣样品, 加入4 mL经4 ℃预冷的0.1 mol/L pH 5.5的乙酸-乙酸钠缓冲液，含2%(w/v)聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)，冰浴研磨匀浆后，于4 ℃、12000×g条件下离心20 min，收集上清液用于酶活性分析。 POD酶活测定方法参照文献[6]，于470 nm处测定吸光度值，酶活性以U表示，1 U=0.01△OD470 mg/pro·min。以混合液在30 ℃的酶促反应时间为横坐标、吸光度值为纵坐标制作反应进程曲线，确定最佳反应时间。可溶性蛋白质含量测定方法参照 Br a d f o r d [7] 法，以牛血清蛋白质制作标准曲线。 1.3.2 温度对冬枣POD酶促反应的影响 1.3.2.1 冬枣POD的抗热性研究将酶提取液分成8 组，分别于20、30、40、50、60、70、80、90 ℃

过氧化氢酶活性的测定

三、试验材料、仪器和试剂：
1、试验材料：三叶草
2、仪器： (1) 滴定管 (2)研钵 (3) 容量瓶
(4)移液管 (5)三角瓶(100ml)
3、试剂：
（1）0.05M H2O2 （3）1.8M H2SO4 （5）10%（NH4)6Mo7O24 （7）CaCO3，石英砂
（2）0.2M Na2S2O3 （4）1.5%淀粉溶液
二、试验原理:
➢ CAT活性大小以一定时间内分解旳H2O2量来表达：在一定条件下，CAT能把H2O2分解为H2O和O2。当CAT与
H2O2反应一定时间(t)后，再用碘量法测定未分解旳H2O2，以钼酸铵作催化剂，H2O2与KI反应，放出游离碘，然后用硫代硫酸钠滴定碘，反应式为：
H2O2（余）+2KI+H2SO4----→I2+K2SO4+2H2O I2 +2Na2S2O3 --→2NaI+Na2S4O6（连二硫酸钠）用硫代硫酸钠分别滴定空白液(可求出总旳H2O2量)和反应液(可求出未分解旳H2O2量)，再根据两者滴定值之差求出分解旳H2O2量。
➢ 氢氧自由基（OH˙）是化学性质最活泼旳活性氧，能够直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，而且有非常高旳速度常数，破坏性极强，可使细胞膜遭受损害，加速细胞旳衰老和解体。
➢ 过氧化氢酶(catalase；CAT)能够清除H2O2、分解氢氧自由基，保护机体细胞稳定旳内环境及细胞旳正常生活，所以 CAT是植物体内主要旳酶促防御系统之一，其活性高下与植物旳抗逆性亲密有关。
（6）20% KI
四、试验环节：
1、酶液提取：
称取0.5g三叶草，加少许石英砂，CaCO3，2ml水，研成匀浆，移入50ml容量瓶，冲洗研钵多次，定容，静置，过滤。

过氧化氢酶(CAT)的应用

过氧化氢酶（CAT）的应用过氧化氢酶专一分解过氧化氢（H2O2）。

商品过氧化氢酶是一种高效、安全、无毒的生物催化剂。

近年来过氧化氢酶得到广泛应用,主要有以下几个方面。

在牛奶保存和奶酪制造前用H2O2对牛乳和干酪原料乳进行杀菌消毒, 然后再用CAT去除残余H2O2。

与加热杀菌不同, 这种杀菌消毒可以在低温下进行,不仅不会杀灭有用的乳酸菌, 而且不会影响到脂肪酶、蛋白酶及磷酸酶的作用。

另外,利用CAT分解H2O2放出O2的性质, 可以在烘烤食品过程中同时添加H2O2和CAT用作疏松剂。

在纸浆和造纸工业上, 由于发现传统的含氯漂白剂与浆中残余木素反应产生氯酚类化合物等毒性污染物质后, 世界各国相继采取措施, 禁止在纸浆和造纸工业上采用含氯漂白剂, 因此近年世界造纸行业相继以H2O2漂白来代替传统漂白方法。

在棉针织物漂染色工艺中, 采用过氧化氢酶生物除氧, 比传统的高温水洗工艺去除残留H2O2具有节省水、电、气、人工的优点, 又大幅度降低了成本, 提高了生产效率, 并减少了对环境的污染。

利用CAT与H2O2同时使用放出氧气的机理, 还可用于橡胶成型, 塑料及多泡性黏合剂。

过氧化氢酶可以使细胞免于遭受H2O2的毒害。

几乎所有的生物机体都存在过氧化氢酶, 其酶促活性为机体提供了抗氧化防御机理。

鉴于含有过氧化物歧化酶的抗氧化复合物可用于治疗, 故认为过氧化氢酶也可用于治疗氧化损伤疾病。

过氧化氢酶活力的测定

过氧化氢酶活力的测定（张一顺 p138）一、实验原理植物体内的黄素氧化酶类代谢物常含有过氧化氢。

植物在逆境下或衰老时，体内活性氧代谢加强，也会是过氧化氢发生积累。

过氧化氢的积累不但可导致破坏性的氧化作用，也会直接或间接的氧化细胞内的核酸、蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭到损坏，从而加速细胞的衰老和解体。

过氧化氢酶是清除过氧化氢的重要保护酶，是植物中重要的酶促防御系统之一，能将过氧化氢分解为O2和H2O2,使植物有机体免受H2O2的毒害作用。

其活力与植物的抗逆性密切相关。

过氧化氢酶活力的测定原理：H2O2在240nm波长下有强烈吸收，过氧化氢酶能分解H2O2，是反应溶液吸光度随反应时间而降低，根据测定吸光度的变化速度即可测出CA T活力。

二、材料、仪器设备及试剂新鲜的子叶或茎段、研钵2个、冰浴槽两个、研锤2个、1ml注射器2个、石英砂1瓶、药勺1把、吸水纸若干、试剂瓶1个、冰块若干、大瓷缸1个、移液枪若干把、风光光度计一台、蒸馏水两瓶、干燥的试管若干个、试管架、离心机一台、离心管若干个、记号笔1个、标签纸若干、水笔1个、水浴箱1台。

Ph=7.8 0.2mol/L的磷酸缓冲液；0.1mol/L H2O2溶液：取30%的H2O2溶液5.65ml，用蒸馏水稀释至1000ml。

Ph=7.8 0.2mol/l配置：A液：91.5ml B液：8.5ml 混合后即可，总体积100ml三、试验方法与步骤1、粗酶液的提取准备工作：离心管14个，分别标号0~6和0Y~6Y（标有Y的装子叶研磨液,带0的表示实验组），冰浴槽2个，从冰箱中刚拿出的研钵2个（带研锤）放在冰浴槽中。

取1个棕色试剂瓶放入高瓷缸中，再向里面放一冰袋（目的磷酸缓冲液保持在较低温度下），从并行中拿出磷酸缓冲液倒入棕色试剂瓶中适量。

再拿出准备好的2个1ml注射器备用，取出石英砂和药勺（去石英砂用，用最小的那个）。

取出准备好的吸水纸若干放在适当位置（用于擦拭研钵中的水珠），干毛巾一个（在向离心管中到液体前用于擦拭研钵底部的水珠）。

沾化冬枣核中多糖的体外抗氧化活性研究

沾化冬枣核中多糖的体外抗氧化活性研究
朱华;赵娜;刘香红;王滕;方菁菁
【期刊名称】《绿色科技》
【年(卷),期】2016(000)022
【摘要】利用滨州沾化冬枣枣核为试验材料,进行了冬枣核多糖体外抗氧化活性的试验研究,结果表明:沾化冬枣核对ABTS自由基、羟基自由基、DPPH自由基均有良好的清除作用,对几种自由基的抑制能力为ABTS+自由基清除率＞DPPH自由基＞羟基自由基,为沾化枣核的应用提供了依据.
【总页数】2页(P149-150)
【作者】朱华;赵娜;刘香红;王滕;方菁菁
【作者单位】滨州学院,山东滨州256600;滨州学院,山东滨州256600;滨州学院,山东滨州256600;滨州学院,山东滨州256600;滨州学院,山东滨州256600
【正文语种】中文
【中图分类】TS255.4
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过氧化氢酶活力的测定实验报告doc

过氧化氢酶活力的测定实验报告篇一：过氧化氢酶活性测定实验29 过氧化氢酶活性测定（高锰酸钾滴定法）过氧化氢酶普遍存在于植物的所有组织中，其活性与植物的代谢强度及抗寒、抗病能力有一定关系，故常加以测定。

一、原理过氧化氢酶（catalase）属于血红蛋白酶，含有铁，它能催化过氧化氢分解为水和分子氧，在此过程中起传递电子的作用，过氧化氢则既是氧化剂又是还原剂。

可根据H2O2的消耗量或O2的生成量测定该酶活力大小。

在反应系统中加入一定量（反应过量）的过氧化氢溶液，经酶促反应后，用标准高锰酸钾溶液（在酸性条件下）滴定多余的过氧化氢。

即可求出消耗的H2O2的量。

二、材料、仪器设备及试剂（一）材料：小麦叶片（二）仪器设备：1. 研钵；2. 三角瓶；3. 酸式滴定管；4. 恒温水浴；5. 容量瓶。

（三）试剂：1. 10%H2SO4；2. 0.2 mol/L pH7.8磷酸缓冲液；3. 0.1mol/L 高锰酸钾标准液称：取KMnO4（AR）3.1605g，用新煮沸冷却蒸馏水配制成1000ml，再用0.1mol/L 草酸溶液标定；4. 0.1mol/L H2O2市售30%H2O2大约等于17.6mol/L，取30%H2O2溶液5.68ml，稀释至1000ml，用标准0.1mol/L KMnO4溶液（在酸性条件下）进行标定；5.0.1mol/L 草酸：称取优级纯H2C2O4.2H2O 12.607g，用蒸馏水溶解后，定容至1000ml。

三、实验步骤（一）酶液提取：取小麦叶片2.5g加入pH7.8的磷酸缓冲溶液少量，研磨成匀浆，转移至25ml容量瓶中，用该缓冲液冲洗研钵，并将冲洗液转至容量瓶中，用同一缓冲液定容，4000rpm离心15min，上清液即为过氧化氢酶的粗提液。

（二）取50ml三角瓶4个（两个测定，另两个为对照），测定瓶加入酶液2.5ml，对照加煮死酶液2.5ml，再加入2.5ml 0.1mol/L H2O2，同时计时，于30℃恒温水浴中保温10min，立即加入10%H2SO42.5ml。

过氧化氢酶（CAT）的神奇功能，你get了吗？

过氧化氢酶（CAT）的神奇功能，你get了吗？众所周知，CAT能分解过氧化氢。

不过，它还有一项神奇的功能，你或许还不太不了解，别着急，下面我将为大家揭开它神秘的“面纱”。

CAT是什么？1811年，泰纳尔(Louis Jacques Thénard)首次发现了过氧化氢酶，过氧化氢酶能降解过氧化氢。

1900年，Oscar Loew将过氧化氢酶命名为"catalase"，并发现其存在于大量的植物和动物中。

1937年，过氧化氢酶被詹姆斯·B·萨姆纳发现可以在牛肝中结晶，次年后获得了该酶的分子量。

1969年，牛的过氧化氢酶的氨基酸序列被解出。

1981年，过氧化氢酶的结构得以解析。

凡所见与不可见，只要是能呼吸的生物机体，几乎都含有过氧化氢，其主要存在于植物的叶绿体、线粒体、内质网，以及动物的肝和红细胞中，它的酶促活性是为机体提供抗氧化防御的作用。

CAT是红血素酶，它存在于细胞的过氧化氢酶体内，其结构根据其来源的不同而变化，在不同的组织中，其活性水平也不相同。

比如过氧化氢在肝脏中的分解速度在肝中的CAT含量水平较高，所以比在脑或者心脏等其他器官的要快。

过氧化氢酶是过氧化物酶体的标志酶，占过氧化物酶体酶总量大约40%，它存在于已知的动物各个组织中，在肝脏中的浓度尤其高。

过氧化氢酶的意义既然过氧化氢酶如此“无所不在”，那么它的存在有哪些意义呢？（可多啦！）在食品工业中，过氧化氢酶被用于除去制造奶酪的牛奶中的过氧化氢，也可用于食品包装，防止食物被氧化；在纺织工业中，过氧化氢酶能除去纺织物上的过氧化氢，保证成品不含过氧化物；在美容业中，通过把过氧化氢酶和过氧化氢加入到面部护理液中，来增加表皮上层的细胞氧量；在实验室中，过氧化氢酶被用作了解酶对反应速率影响的工具；过氧化氢还可以清洁隐形眼镜哦，过氧化氢酶能除去眼镜在过氧化氢的清洁剂中浸泡过后的残留物。

CAT的反应机制CAT作用于过氧化氢的机理在于H2O2的歧化，即要想发生反应，必须有两个H2O2先后与CAT相遇并碰撞在活性中心上，且H2O2浓度越高，反应越激烈。