雄黄灌胃给药对雄性大鼠精子质量的影响
雄性大鼠生殖毒性评价服务
雄性大鼠生殖毒性评价服务
概述
对于男性科用药或某些药物有可能对男性生殖系统具有潜在毒性的药物需要进行雄性大鼠生殖毒性研究,雄性大鼠生殖毒性试验所获得的信息对长期毒性试验剂量的设计和某些药物Ⅰ期临床试验起始剂量的选择具有重要参考价值,并能提供一些与人类药物过量急性中毒相关的信息。
服务项目:
雄性SD 大鼠连续给药3-6个月,评价受试药物对雄性大鼠生殖系统有无毒性作用。
服务内容:
检测雄性大鼠长期给药后的体重增长及睾丸、附睾、心、肝、脾、肺、肾、胸腺脏器系数、精子畸形率;大鼠睾丸的每日精子生成量;病理组织学研究,使用睾丸的连续切片,并进行TUNEL 检测,观察到药物引起的生精细胞凋亡。
客户提供:受试样品
我们提交:详细实验报告
服务周期:6-8个月
服务收费:根据实验方案确定,请咨询 服务特点:
1.专门针对雄性大鼠生殖系统进行安全性评价,更具有针对性;
2.多指标检测受试药物对大鼠生殖毒性的影响,结果准确可靠。
正常对照组 睾丸(×100)
正常对照组 附睾(×100)
受试药物高剂量组 附睾(×100)
受试药物高剂量组 睾丸(×100)
大鼠生精细胞阴性对照,TUNEL 细胞凋亡原位检测(×400)
大鼠生精细胞阳性对照,TUNEL 细胞凋亡原位检测(×400)
正常对照组大鼠生精细胞,TUNEL 细胞凋亡原位检测(×400)
受试药物高剂量组大鼠生精细胞,TUNEL 细胞凋亡原位检测(×400)。
雄黄灌胃给药对雄性大鼠精子质量的影响
da l o e . l r t r a rf e n e 42 a d o e e i i y i e f o a h r twa a e t i f r 6 we ks Al a swe e s c i c d o t nd d y a n p d d m d r m e c a s t k n o y i h n
大 鼠进行精 子质 量分析 。将 s 雄性 大鼠 5 只 随机分 为阴性对照组 、阳性对照 雷公藤 多苷组 (Om / g 及雄黄低 、 D 0 1 g k) 中、 高剂量组 (0 2 、2 0m / g 。各给 药组连续灌 胃给 予相应 药物 6周, 日 1次。给药结束后 , 大鼠一侧附 5 、15 5 g k ) 每 取
睾用计算机辅 助精 子分析 系统 (AA做精 子的数 量 、 力、 CS) 活 运动 能力检查, 并取 睾丸、附睾做 H 染 色, E 观察组织病理
学变化 。结果 阳性对 照雷公藤 多苷组精 子活率、 子活 力、 精 有效精子数 、 精子 密度及各项运动参数 ( 除鞭打频率外) 均明显低 于阴性对 照组 , 差异有统计学意义 ( P<0 0) . 1 。雄黄各剂量组精子活率 、活力、有效精子数 、精子 密度及各 项运 动参数与 阴性对照组比较差异无统计 学意 义 ( P>00 ) 且各剂量组 间差异 亦无统计 学意义 ( .5, P>0 0) . 5 。组织病
it h e a v o to o p t ep st ec n o r tr s m y o ie ru 1 / g a d rag r n ot en g t ec nr l u , o iv o t l i e i Glc s sgo p(0mg k ) i g h i r Tp y u d n e a l
SAHA临床研究者手册
研究者手册1.序言SAHA(Zolinza ®)为美国Merck 公司开发的第一个用于治疗持续、恶化或在用其他药治疗期间或之后复发的皮肤T 细胞淋巴瘤(CTCL)药物,于2006年10月6日获得FDA 上市批准,商品名为Zolinza ®。
SAHA 药理分类属于组蛋白去乙酰酶抑制剂(HDAC inhibitor ),可非特异性结合组蛋白去乙酰酶(HDAC1, HDAC2, HDAC3, HDAC6)以促使乙酰化组蛋白增加,造成癌细胞转录过程异常,进而诱导癌细胞周期停止、分化,甚至死亡,但确切的抗肿瘤机制目前尚未完全明了。
根据我国现行《药品注册管理办法》(试行)的有关规定属化学药品第 3.1类。
本手册介绍了SAHA 相关理化性质、动物药理毒理药代及人临床试验相关资料,同时提供了药物使用信息和注意事项以供临床研究者参考。
2.SAHA(Zolinza ®)研究简述SAHA 化学名为N-羟基-N ’-苯基-辛二酰胺,分子式C 14H 20N 2O 3,分子量264.32。
结构式见下图:SAHA 为白色到灰白色粉末,极微溶于水(0.1mg/ml),微溶于乙醇、异丙醇和丙酮,略溶于0.1N NaOH 、0.1N HCl 、0.1N 磷酸钠盐缓冲盐溶液(pH7),易溶于二甲基亚砜(DMSO),不溶于二氯甲烷(Product Monograph Pr ZOLINZA™ SAHA capsules 100mg)。
无手性中心,不易吸潮,差示扫描热量介于161.7℃至163.9℃,其饱和水溶液pH6.6,测得pKa=9.2,正辛醇和水中分配系数为9.6。
表观分配系数为1.7×10-6 cm/sec ,相同测试系统下普萘洛尔(高渗)和阿替洛尔(低渗)表观分配系数分别为1.6×10-5 cm/sec 和1.9×10-7 cm/sec ,表明SAHA 为中等渗透性药物。
纳米TiO_(2)对大鼠精子运动功能的影响
江苏预防医学 2021 年1月第32 卷第1期Jiangsu J Prev M ed,Jan.,2021,V〇1. 32,No. 1• 23 ••论著.纳米Ti02对大鼠精子运动功能的影响凌敏,吕中明,梁婕,张薇,卞倩江苏省疾病预防控制中心毒理与功能评价所,江苏南京210009摘要:目的探讨纳米二氧化钛(Nan〇~Ti02)对大鼠精子运动功能的影响。
方法实验分为Nan〇~T i02组和对照组,每 组10只雄性S D大鼠。
N arw T iO d fl每天灌胃给予250 m g/kg b.wt•的Nano~T i02混悬液,对照组每天灌胃给予生理盐水。
大鼠灌胃10周后处死,应用计算机辅助精子分析技术研究N a rw T iO d f大鼠精子活率、精子运动方式及能力等运动参数的 影响。
结果与对照组相比,>^11〇~丁丨02组大鼠精子活率、运动型精子构成百分比、精子运动方式等指标值差异均无统计学意 义(P值均>0.05);反映大鼠精子运动能力参数的平均路径速度(V A P)[(186.6士 7.0) Hm/s]和直线运动速度(VSL) [(139. 7士3.8) /nm/s]分别低于对照组[(197.8±5.8)fx m/s和(147. 1士7.3) pm/s],差异均有统计学意义G值分别为 3.910和2. 816, P值均<0. 05);精子曲线运动速度(V C L)值与对照组相比差异无统计学意义(;=0. 020, P>0. 05)。
结论在本试验条件下Nan〇~Ti02可能会影响精子的运动能力,对雄性大鼠生殖系统产生一定的损伤作用。
关键词:纳米二氧化钛、精子运动功能、生殖毒性中图分类号:R114 文献标识码:A 文章编号:1006-9070(2021)01-0023-03The effect of Nano-Ti02on rat sperm motilityLING M in.LV Zhong-ming, LIANG Jie,ZH A NG W ei.BIAN QianJ iangsu Provincial Center for Disease Control and Prevention,Institute o fToxicology and Functional Evaluation y J iangsu N anjing 210009, ChinaAbstract:Objective To explore the effect of Nano-Ti〇2〇n rat sperm motility. Methods Male SD rats were divided into Nan〇-Ti〇2and control group, with 10 rats in each group.The rats were respectively given by intragastric administration with 250 m g/kg b. wt.Nano-Ti〇2or saline for 10 weeks. After 10 weeks, the rats were sacrificed and the motility rate and sperm motility were evaluated by computer assisted sperm analysis system. Results The motility rate, percentages of movement sperm and motility mode in N ano-Ti02group did not showed significant difference compared with control groupCall P^>0. 05). The velocity of average pathway(VA P)[(186. 6±7. 0 p m/s) ]and velocity straight line (V SL)[(139. 7±3. 8 p m/s)] in Nano~Ti〇2group significantly decreased compared with control group[(197. 8+5. 8)/Ltm/s and (147. 1 + 7. 3)/im/s] (^ = 3. 910 and 2. 816,all P<C.0. 05) ; while velocity of curvilinearCVCL) showed no statistical difference between N ano-Ti02group and control group (艺=0• 020, P〉0• 05). Conclusion Under the experimental conditions, Nano-Ti〇2may affect sperm motility and damage the reproductive system of male rats.Keywords:Nano-Ti〇2;Sperm m otility;Reproductive toxicity纳米材料可能会对人体健康造成潜在的影响[1]。
染砷大鼠睾丸生精细胞凋亡的变化
Study of As2 O3 on Apoptosis of Spermatogenic Cells of Rat Testis L U X i an g , C H E N w ei , S H U X i ao2l i n , L I J i2ron g
lead to t he rep roductio n to xicit y. 【 KeyWords】 A s2 O3 ;Apop to sis ; Spermato genic cell s ; Rat
砷作为环境毒物 ,其生殖毒性是其重要危害之 一[1 ,2] ,关于砷致生精细胞凋亡及其对雄 (男) 性生殖 系统的毒性作用机制尚不清楚 。为研究砷及砷化物 的生殖毒性及其与生精细胞凋亡之间的关系 ,本实验 通过慢性砷中毒大鼠模型 ,观察不同剂量砷对大鼠睾
3 结果
31 1 睾丸组织病理学观察 :对照组睾丸组织生精小 管密集 ,基膜完整 ,细胞层次清楚 ,各级生精细胞正 常 ,管腔中可见密集的精子 ;间质无充血 、水肿 。较对 照组比 ,低剂量组无明显变化 ;中剂量组睾丸生精上 皮结构较疏松 ,管腔中精子数量减少 ,小管间隙增宽 , 细胞体积缩小 ;高剂量组部分生精小管部分出现基膜 溶解 ,生精上皮细胞层次紊乱 ,细胞间隙增大 、体积缩 小 ,管腔中有脱落的精子和细胞 ,成熟精子数量明显 减少 ,间质出现水肿 、渗出 。(图 1)
SD 大鼠随机分成 4 组 ,分别为 01 375 mg/ kg 、01 75 mg/ kg 、11 5 mg/ kg 3 个染毒组和对照组 ,灌胃法连续给药 16 周后 对各组大鼠进行睾丸脏器系数 、精子头计数 ,并计算每日精子生成量 (DSP) 。采用甲基绿 —派诺宁染色法和 TUN EL 原位细胞杂交方法检测大鼠生精细胞凋亡情况 。结果 ①中剂量组 (01 75 mg/ kg) 和高剂量组 (11 5 mg/ kg) 睾丸精子 头计数和 DSP 均低于对照组 ( P < 01 05) ; ②与对照组相比 ,中剂量组和高剂量组生精细胞凋亡指数 ( A I) 均显著升高 ( P < 01 01) ; ③生精细胞凋亡指数与每日精子生成量呈负相关 (r = - 01 563 , P < 01 01) 。结论 一定剂量的 As2 O3 可通 过促进生精细胞凋亡而导致精子生成量的减少 ,产生生殖毒性 。
雄黄肾脏毒性的病理形态学特征_高双荣
*
Tel: 01064288601 , Email: liangaihua@ sina. com 梁爱华, 博士, 研究员, 从事药理学工作,
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶 2010 , 7 ( 7 ) : 385. 进一步的研究。 [ 参考文献]
第 19 卷第 18 期 2013 年 9 月
中国实验方剂学杂志 Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 19 , No. 18 Sep. , 2013
雄黄肾脏毒性的病理形态学特征
1 1* 1 1 1 1 1 1 1 高双荣 , 梁爱华 , 戴宝强 , 王丽芳 , 李桂琴 , 曹春雨 , 刘婷 , 李春英 , 易艳 , 1 1 1 1 2 2 2 2 王海林 , 郝然 , 赵雍 , 回连强 , 夏晶 , 曹帅 , syfj2013180297 [
Morphological Characteristics of Kidney Toxicity in Realgar
雄黄灌胃给药后砷在孕大鼠脏器内的分布及排泄途径研究
雄黄灌胃给药后砷在孕大鼠脏器内的分布及排泄途径研究目的研究口服雄黄后砷在孕大鼠体内的分布和排泄途径。
方法结合生殖毒性Ⅱ段试验,雌性SD大鼠交配后随机分成高、中、低(550、250、125 mg/kg)剂量组和阴性对照组(0.5%羧甲基纤维素钠)4组,妊娠第6-15日每日1次用雄黄悬浊液连续灌胃10 d,于妊娠第20日处死。
每组10只,取孕大鼠各主要脏器(心、肝、脾、肺、肾、脑、子宫)和全血、胎盘、胎仔及不同给药时间点的尿液和粪便,运用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)、电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)分别测定砷含量,分析砷在各脏器的分布情况以及排泄途径。
结果各脏器中砷含量均显著高于阴性对照组,全血砷含量最高,并随剂量的增加而增加;与其他脏器比较,脑和胎仔组织内各剂量组的砷含量最低。
给药第2日粪便中即出现大量砷,日排泄量折合成雄黄约占摄入量的69.5%~80.2%;而给药第10日排泄量上升到85.2%~96.2%;停药第4日粪便中雄黄排泄量急剧下降。
尿液中排泄的砷微量,并有剂量依赖性,停药第4日排泄量仍在较高水平。
结论砷在不同脏器内蓄积与给药剂量有关,其中以全血、脾、胎盘、肺内砷含量较高;口服雄黄主要经肠道排泄,而组织内蓄积的砷可能经肾脏排泄。
标签:雄黄;孕大鼠;砷含量;电感耦合等离子体质谱法;电感耦合等离子体发射光谱法;体内分布;排泄雄黄(Realgar)是一味常用的矿物类中药,具有燥湿、祛风、杀虫、解毒等功效。
雄黄临床应用广泛,2010年版《中华人民共和国药典》(以下简称“药典”)收载的含雄黄的中成药有33种,占全部中成药的6.3%。
雄黄有毒,被列为72种有毒中药之一,药典记载“内服宜慎,不可久用,孕妇禁用”[1]。
了解雄黄在体内的吸收、分布、代谢以及排泄等情况对于理解其毒性机制具有重要意义。
本研究结合雄黄灌胃给药生殖毒性Ⅱ段试验,测定各剂量组妊娠不同时间点24 h粪尿样品和解剖时孕大鼠的全血、心、肺、肝、脾、肾、子宫、胎盘以胎仔的砷含量,分析砷在各脏器的分布和蓄积情况以及排泄途径,并探讨其与生殖毒性、血液生化及病理指标的关系。
雄激素对大鼠前列腺和精囊腺AQP3和AQP4表达的影响
中华 临床 医 师 杂志( 电子版) 2 0 1 4年 7月第 8卷 第 1 3期
C h i nJ C l ni i c i a n s ( E l e c a ' o n i e E d i t i o n ) . J u l y1 . 2 0 1 4 . V o 1 . 8 . No . 1 3
s e i n m a l v e s i c l e s l f u i d wa s c o l l e c t e d u s i n g a mi c r o p u n c t u r e p i p e t t e i n s e r t e d i n o t t h e s e mi n a l v e s i c l e d u c t s . T he wa t e r v o l u me s i n p r o s t a t e nd a s e i n m a l v e s i c l e s l f u i d s we r e e s t i ma t e d r e s p e c t i v e l y . T h e e x p r e s s i o n s o f
r e s e c i t o n p l u s t e s t o s t e r o n e r e p l a c e me n t g r o u p ( n = l o ) . T h e s e r u I n l e v e l o f t e s t o s t e r o n e wa s me a s u r e d b y
沙苑子总黄酮对雄性生殖功能障碍模型大鼠的改善作用及机制研究
沙苑子总黄酮对雄性生殖功能障碍模型大鼠的改善作用及机制研究作者:刘雯侯晨辉李江来源:《中国药房》2020年第15期摘要目的:研究沙苑子总黄酮(TFA)对腺嘌呤诱导的雄性生殖功能障碍模型大鼠的改善作用及机制。
方法:将雄性SD大鼠分为空白组、模型组、阳性组(五子衍宗丸,2 g/kg)和TFA低、中、高剂量组(0.05、0.1、0.2 g/kg),每组12只。
各组雄性大鼠每日早上9:00灌胃相应药物,并于同日下午3:00灌胃腺嘌呤混悬液以复制生殖功能障碍模型(空白组除外),连续给药35 d。
给药结束后,将各组雄性大鼠与雌性大鼠按1 ∶ 1合笼交配7 d后取出,检测致雌鼠受孕率;采用酶联免疫吸附法检测雄性大鼠血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、促黄体激素(LH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平;摘取雄性大鼠睾丸、附睾、精囊腺、胸腺、肾,并计算其脏器指数;采用苏木精-伊红(HE)染色法观察雄性大鼠睾丸、附睾及肾组织的病理学变化;采用免疫组织化学染色检测雄性大鼠肾组织中B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)、Caspase-9的蛋白表达水平。
结果:与空白组比较,模型组雄性大鼠致雌鼠受孕率,睾丸、附睾、精囊腺、胸腺指数,血清中T、E2、SOD、GSH-Px水平,肾组织中Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P关键词沙苑子总黄酮;生殖功能障碍;性激素;氧化应激;机制;大鼠ABSTRACT OBJECTIVE: To study the improvement effects of Astragalus complanatus total flavonoids (TFA) on adenine-induced reproductive dysfunction model male rats and its mechanism. METHODS: Male SD rats were divided into blank group, model group, positive group (Wuzhi yanzong pill, 2 g/kg), TFA high-dose, medium-dose and low-dose groups (0.05, 0.1, 0.2 g/kg), with 12 rats in each group. Male rats in each group were given the corresponding drugs intragastrically at 9:00 a.m. every day, while the model of reproductive dysfunction was reproduced by intragastric administration of adenine suspension (except for blank group) at 3:00 p.m. on the same day, for consecutive 35 days. After medication, male rats in each group were mated with female rats by ratio of 1 ∶ 1 in cages; 7 days later, inducing-pregnancy rate of male rats were measured. ELISA assay was used to detect the serum levels of T, E2, FSH, LH, GSH-Px, SOD, MDA, Scr and BUN in male rats; the testis, epididymis, seminal vesicle, thymus and kidney of male rats were extracted and the organ index was calculated; HE staining was used to observe the pathological changes of testis, epididymis and kidney; the protein expression of Bcl-2,Bax, Caspase-3 and Caspase-9 in the renal tissue of male rats were detected by immunohistochemistry. RESULTS: Compared with blank group, the inducing-pregnancy rate of male rats, the testis, epididymis, seminal vesicle gland, thymus indexes, the serum levels of T, E2, SOD and GSH-Px, the protein expression levels of Bcl-2 in renal tissue were reduced significantly in model group (PKEYWORDS Astragalus complanatus total flavonoids; Reproductive dysfunction; Horone; Oxidant stress; Mechanism; Rat近年来,随着环境污染加剧、生活节奏加快及生育年龄延迟,不育症患者数量急剧增加,发病率逐年上升,对人类生殖繁衍造成巨大影响[1]。
雄性不育剂灭鼠的原理
雄性不育剂灭鼠的原理
雄性不育剂是一种用于控制鼠类数量的化学物质,其原理是通过影响雄鼠的生育能力,使其无法繁殖后代。
具体原理如下:
1. 雄性不育剂可以干扰雄鼠生殖系统的正常功能。
它们可能干扰睾丸的激素合成、精子的形成和功能、睾丸与生殖道的连接等过程,从而使雄鼠无法正常产生精子或精子无法有效受精。
2. 雄性不育剂可以影响雄鼠性激素的正常分泌。
雄性激素是控制生殖系统发育和功能的重要物质,其中睾酮是最主要的雄性激素。
雄性不育剂可能通过抑制睾酮的合成或阻断睾酮与其受体的结合,从而调节雄鼠的性激素水平,影响其生殖功能。
3. 雄性不育剂可能干扰雄鼠的生殖行为。
一些雄性不育剂具有类似性激素的作用,可能使雄鼠的性欲和交配行为受到影响,无法进行正常的交配,从而降低繁殖能力。
需要注意的是,雄性不育剂对于其他动物和人类的副作用和安全性仍然存在争议和研究。
因此,在使用雄性不育剂进行灭鼠行动时,需要谨慎评估其对环境和其他生物的影响,并遵循相关的安全使用指南。
他达拉非单次灌胃对大鼠精子活力的影响
他达拉非单次灌胃对大鼠精子活力的影响马洪水;刘保兴【期刊名称】《中国生育健康杂志》【年(卷),期】2013(024)004【摘要】目的评价他达拉非单次灌胃对大鼠精子活力和运动精子百分率的影响.方法雄性SD大鼠80只,随机分为4组,每组20只.对照组给予0.5%CMC-Na,其余3组分别给予他达拉非3.6、1.8和0.9 mg/kg.分别于给药后第2、12、24、48 h,采用计算机辅助精子分析系统测定精子活力和运动精子百分率. 结果对照组精子活力和运动精子百分率分别为(74.50±14.58)%、(71.50±8.55)%,他达拉非高、中、低各剂量组精子活力和运动精子百分率分别为(78.28±13.87)%、(79.30±11.67)%;(75.92±12.08)%、(74.85±12.69)%;(77.74±13.05)%、(78.20±11.36)%.他达拉非各剂量组精子活力,中、低剂量组运动精子百分率与对照组比较,差异均无统计学意义,而他达拉非高剂量组运动精子百分率高于对照组.他达拉非中剂量组24h精子活力低于对照组及其他各时间点精子活力,差异有统计学意义. 结论他达拉非低剂量单次灌胃后对大鼠精子活力及运动精子百分率无不良影响.【总页数】2页(P343-344)【作者】马洪水;刘保兴【作者单位】河北省保定市易县中医院;100029 中日友好医院男科【正文语种】中文【相关文献】1.雄黄灌胃给药对雄性大鼠精子质量的影响 [J], 刘炯;李咏梅;姜昕;吴文斌;汤家铭2.9-硝基喜树碱单次灌胃给药后大鼠体内的分布与排泄 [J], 张春燕;殷琦;李玉珍;李长龄3.单次上游单闪离心高活力精子分离与宫腔内授精 [J], 黄元华;吴玮琳4.乙醇灌胃对大鼠精浆生化指标及精子动态参数的影响 [J], 陈杰翔;李利5.附睾和睾丸精子活力对卵胞浆内单精子注射结局的影响 [J], 冯双苗;苏迎春;孙莹璞;郭艺红因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
雷公藤多甙对雄性黄毛鼠、小白鼠抗生育试验初报
雷公藤多甙对雄性黄毛鼠、小白鼠抗生育试验初报邱良妙;彭文富;陈玉妹;林坚贞【期刊名称】《福建农业学报》【年(卷),期】2001(016)004【摘要】用雷公藤多甙按30 mg·kg-1 剂量对雄性黄毛鼠进行灌胃染毒,以药后14 d效果最好,对精子数、A级精子及精子存活率的抑制率分别为44.3%、57.9%、46.4%;第42 d效果减弱,分别是10.8%、12.0%、26 .1%;第84 d基本丧失抗生育作用.说明雷公藤多甙对黄毛鼠精子发生有显著的抑制作用.睾丸组织切片表明,雷公藤多甙能破坏睾丸组织,使生精细胞数量及活力下降,抑制精子的形成及成熟.用雷公藤多甙按30 mg·kg-1和50 mg·kg-1两种剂量对雄性小白鼠进行灌胃染毒,以药后14 d抗生育效果最佳,小白鼠产仔率均下降32.6%;两种剂量处理差异不显著,均与对照处理存在极显著差异.适口性测定结果表明,黄毛鼠对雷公藤多甙混合剂摄食系数为0.26.【总页数】3页(P18-20)【作者】邱良妙;彭文富;陈玉妹;林坚贞【作者单位】福建省农业科学院植物保护研究所,;福建省农业科学院植物保护研究所,;福建省农业科学院植物保护研究所,;福建省农业科学院植物保护研究所,【正文语种】中文【中图分类】S443.5【相关文献】1.猕猴输精管注射高分子聚合物HFMC的抗生育试验初报 [J], 白寿昌;邹淑荃;罗自强2.氯鼠酮钠盐毒杀家栖鼠试验初报 [J], 杨再学;周绍南3.化学除草驱鼠及堆垛诱鼠试验初报 [J], 张金钟;黄再顺4.逗斑青步甲捕食黄毛鼠仔鼠研究初报 [J], 刘浩官;林坚贞;彭文富;陈玉妹;肖缤5.氯鼠酮、敌鼠钠盐混合毒饵灭鼠试验初报 [J], 沈兆昌;阮治安;尹兴琪因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
HG-FAAS 法测定雄黄染毒小鼠肝及肾脏中的砷含量
HG-FAAS 法测定雄黄染毒小鼠肝及肾脏中的砷含量苑洁;霍韬光;王艳蕾;郭婧潭;焦雪鑫;张颖花;袁媛;高岚岳;姜泓【摘要】A novel hydride generation‐flame atomic absorption spectrometry (HG‐FAAS ) method was established for the determination of arsenic in liver and kidney of mice after realgar exposure .The results showed that the method was accurate ,sensitive ,reliable and low detec‐tion limit .The distribution levels of arsenic in liver ,kidney of realgar infected mice were fairly with the liver and kidney content .Meanwhile hydride generation conditions were optimized .%建立了氢化物发生‐火焰原子吸收法(HG‐FAAS)测定雄黄染毒小鼠肝及肾脏中砷含量的方法。
结果表明,该方法准确、灵敏、可靠、检出限低。
雄黄染毒小鼠肝、肾脏中砷的分布水平相当。
同时对氢化物发生条件进行了优化。
【期刊名称】《化学研究》【年(卷),期】2015(000)001【总页数】3页(P61-63)【关键词】氢化物发生-火焰原子吸收法;雄黄;砷【作者】苑洁;霍韬光;王艳蕾;郭婧潭;焦雪鑫;张颖花;袁媛;高岚岳;姜泓【作者单位】中国医科大学公共卫生学院,辽宁沈阳 110013;中国医科大学公共卫生学院,辽宁沈阳 110013;中国医科大学公共卫生学院,辽宁沈阳 110013;中国医科大学公共卫生学院,辽宁沈阳 110013;中国医科大学公共卫生学院,辽宁沈阳 110013;中国医科大学公共卫生学院,辽宁沈阳 110013;中国医科大学公共卫生学院,辽宁沈阳 110013;中国医科大学公共卫生学院,辽宁沈阳 110013;中国医科大学公共卫生学院,辽宁沈阳 110013【正文语种】中文【中图分类】O657.7雄黄作为含砷中药,被《医疗用药毒性药品管理办法》归入28种毒性中药之一,因其具有解毒杀虫、燥湿祛痰和截疟的功效[1],因此在很多中成药制剂包括一些名方(如安宫牛黄丸、牛黄解毒片、小儿至宝丸等)中含有雄黄. 临床上因不规范(超量或长时间)服用含雄黄中成药而发生的中毒事件时有报道,其临床表现为全身多系统损害,以肝脏和肾脏损害为主[2-3]. 雄黄及其复方的安全性问题受到了国内外医学界的质疑,影响了含雄黄中成药的国际声誉,由此引发的雄黄对人体健康的影响已成为人们关注的焦点.目前,测定生物样品中总砷含量的方法主要有电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)、电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)和原子荧光法(AFS)[4-5],氢化物发生-火焰原子吸收法(HG-FAAS)测定生物样品内总砷的含量则鲜有报道. 本文作者建立了HG-FAAS测定雄黄染毒后的小鼠的肝及肾脏中砷水平的方法,同时考察了氢化物发生条件,并运用此法对雄黄中砷在小鼠肝及肾脏中的分布进行了初步研究.1.1 仪器与试剂氢化物发生-火焰原子吸收分光光度计(日本日立公司)、超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技股份有限公司)、XW-80A旋涡混合器(上海精科实业有限公司)、Easypure纯水系统(美国Barnstead公司). 雄黄、亚砷酸钠、羧甲基纤维素钠盐、氢氧化钠、硼氢化钠、碘化钾、无水乙醚、硫酸,均为市售优级纯或分析纯试剂. 1.2 实验动物分组及染毒SPF级雄性昆明小鼠30只(中国医科大学实验动物部提供),体重(20±2) g. 饲料环境条件:室温保持(24±1)℃,相对湿度控制在(50±5)%,室内人工照明(12 h光/暗循环,光照时间为6:00~18:00). 小鼠采用标准饲料喂养,自由摄食及饮水,在实验前适应性饲养1周. 按照体重分层随机分为3组,每组10只. 以0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)水溶液为混悬介质,第1组为对照组(0.5% CMC-Na水溶液),第2~3组分别为低、高剂量雄黄染毒组,分别灌胃给予雄黄混悬液0.05和0.5g/kg. 灌胃每日1次,每隔3天称量体重1次. 调节灌胃剂量,共染毒8周.1.3 样品采集及处理于末次给药2 h后,使用无水乙醚麻醉,断头,冰浴条件下取肝及肾脏组织,用0.9%生理盐水冲洗干净,待用.1.4 方法学考察1.4.1 标准曲线与检测限取对照组平行样混合组织消化液(X液)350 μL,加入350 μL 砷标准对照液,得相当于浓度为0、5、10、15、25、50和100 μg/L的砷组织样品,按样品处理项处理后,进入HG-FAAS分析. 以组织样品中砷浓度为横坐标,相应的原子吸收吸光度值为纵坐标,用最小二乘法进行回归计算,求得直线的回归方程,即为标准曲线.1.4.2 精密度与准确度取X 液350 μL,加入350 μL 砷标准溶液,得浓度为10、35和70 μg/L的砷质控(QC)样品,每个浓度制备6个模拟样品,以标准曲线计算QC样品的测得浓度,与配制的浓度对照,求得本方法的准确度与精密度.1.4.3 回收率取 QC样品,每一浓度制备6个模拟样品. 另取X液350 μL,加入350 μL去离子水,得空白样品,同法测定. 方法的回收率=(测得的质控样品浓度-测得的空白样品浓度)/加入的砷标准溶液浓度.1.5 肝及肾脏中砷含量的测定分别准确称取小鼠的肝及肾脏组织100 mg,加入1 mL去离子水,超声破碎2 min;再加入1 mL 3 mol/L硫酸,混匀,微波消解10 min,室温放置过夜;第二天加入1 mL去离子水,3 000 rpm离心15 min,取上清液为组织消化液. 取干净试管加入1.4 mL 1%硫酸,再加入0.7 mL 0.2 mg/L碘化钾溶液,混匀后加入700 μL组织消化液,最后加入4.2 mL去离子水,混匀,待测.将上述制备的溶液注入HG-FAAS中检测砷含量,检测波长为193.3 nm.1.6 统计分析所得数据以平均值±标准差表示,用SPSS17.0软件单因素方差分析方法(ANOVA)进行各指标组间差异的显著性检验,以P<0.05作为检验的显著性差异.2.1 方法学考察2.1.1 标准曲线及检测限由表1可见,在10~100 μg/L浓度范围内r>0.99,表明线性关系良好. 采用逐级稀释法稀释砷标准溶液,在10 μg/L时信噪比(S/N)大于3,因此确定砷的检出限为10 μg/L.2.1.2 精密度、准确度及回收率由表2可见,我们建立的HG-FAAS砷分析系统的灵敏度高、准确性好、回收率高. 两种脏器中砷的加标回收率在93.5%~98.5%之间,RSD<5%,RE在2.3%~-6.6%之间.2.2 肝及肾脏中砷含量的测定由表3可知,随雄黄染毒剂量的增加肝及肾脏中砷水平逐渐升高,与对照组比较有显著性差异(P<0.01).2.3 氢化物发生条件的优化硼氢化钠在酸性溶液(硫酸)中产生新生态的氢,它能将样品中的砷还原成砷化氢气体,所生成的砷化氢在载气(氩气)的带动下进入原子化器;而样品中的其他成份基本不发生反应,被留在废液中,由此造成砷与其他基质的分离. 无机砷以三价和五价两种价态存在,而五价砷不易形成砷化氢,直接用硼氢化钠还原不完全,会造成测试结果偏低. 故在测定砷时选择0.2 mg/L碘化钾溶液为预还原剂.H2SO4载流的流速和酸度均影响样品的载带速度、氢化物发生效率以及原子化火焰状态. 本文作者考察了不同酸度和流速的H2SO4对砷分析的影响,实验中采用10 mL/min的载流流速和1%的H2SO4载流酸度,结果表明检测具有较高的灵敏度.NaBH4的浓度和流速可影响被测元素的氢化物发生效率,进而影响测定的灵敏度,因此本文考察了不同浓度和流速的NaBH4对原子化的火焰状态和分析测定的精密度和稳定性的影响. 实验选用10 g/L的NaBH4溶液和8 mL/min的流速,结果表明,火焰状态稳定,基线平稳,信噪比较好.2.4 雄黄与药源性砷中毒雄黄最早收载于《神农本草经》中,是传统中医的常用药,为很多成方所采用, 亦可单独采用. 现代医学研究表明,含雄黄的复方制剂或单方在治疗白血病和癌症等恶性疾病方面也有不错的疗效[6]. 此外,有研究表明, 雄黄有望用于治疗胶质瘤[7] . 由于此类药物的临床应用广泛、疗效确切, 成为许多家庭的常备药物. 甚至与西药相比,人们通常认为中药无毒/副作用,可以强身健体,因此往往未在医生严格指导下服用,而是随意增加药量、延长用药时间等,导致长期、大量使用含雄黄制剂,由此可能造成药源性慢性砷中毒. 动物实验进一步证明雄黄的毒性大小与体内砷的蓄积量密切相关,砷摄入剂量稍大或长期少量摄入,致使体内蓄积到一定程度均可引起中毒[8]. 因此,建立准确、灵敏的生物样品中砷含量的检测方法是研究雄黄及其复方制剂引起的药源性砷中毒机制的前提,本研究所建方法为深入研究雄黄及其复方制剂的“时间-剂量-毒/药效-机制”关系提供帮助.建立的HG-FAAS方法适用于小鼠肝及肾脏中砷含量的测定. 该方法准确、灵敏、可靠、检出限低.【相关文献】[1] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典(一部)[S]. 北京:中国医药科技出版社, 2010: 316.[2] 马斌,李彤,姜泓. 我国雄黄及其复方的毒副作用研究进展[J]. 中华中医药学刊, 2013,31(8): 1623-1625.[3] 夏薇,方芳,赵余庆. 长期超量应用雄黄及其制剂引起的药源性慢性砷中毒探析[J]. 亚太传统医药, 2009, 5(4): 143-146.[4] 汤家铭,谷颖敏,李咏梅,等. 雄黄灌胃给药后砷在孕大鼠脏器内的分布及排泄途径研究[J]. 中国中医药信息杂志, 2012, 19(8): 34-37.[5] 李春英,梁爱华,王金华,等. 雄黄砷的蓄积性研究[J]. 中国中药杂志, 2011, 36(14): 1895-1899.[6] 王晓波,张治然,袭荣刚. 雄黄等砷剂治疗白血病的机理及临床应用[J]. 解放军药学学报,2003, 19(2): 129-132.[7] 庞琦,王文斌,葛明旭,等. 雄黄治疗胶质瘤的初步试验研究[J]. 山东大学学报: 医学版,2006, 44(4): 376-379.[8] 梁爱华,李春英,王金华,等. 雄黄的毒性研究[J]. 中国中药杂志, 2011, 36(14): 1889-1894.。
满药淫羊藿对大鼠精子质量的影响
满药淫羊藿对大鼠精子质量的影响发布时间:2022-06-07T07:43:46.639Z 来源:《医师在线》2022年2月3期作者:张惠惠宇孙熙屿陈驰张媛慧刘新通讯作者[导读]满药淫羊藿对大鼠精子质量的影响张惠惠宇孙熙屿陈驰张媛慧刘新通讯作者(辽东学院医学院;辽宁丹东118000)摘要: 目的研究淫羊藿对大鼠精子质量的影响。
方法选取 24只雄性大鼠,随机分为空白对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组共 4 组。
高剂量组灌胃20ml /kg,中剂量组每日灌胃10ml/kg,低剂量组每日灌胃5 ml/kg,对照组每日自由饮水,连续灌胃30d。
取附睾制作精子悬液,显微镜下观察精子活力;伊红溶液染色观察精子畸形;称取睾丸重量,计算睾丸脏器系数,检测精子数、精子活动百分数等指标。
结论:淫羊藿高剂量组明显提高大鼠精子活力。
关键词: 淫羊藿、精子数、精子活动、畸形率淫羊藿又称为仙灵脾,最早记载于《神农本草经》,入药历史距今已有两千多年,其在中医上属于补肾壮阳药,可发挥强筋骨、补肝肾、活气血等功效 [1]。
现代药理学研究发现,淫羊藿表现出一定的降脂作用[2],还有兴奋性机能、提升机体免疫能力、调节心脏供血、改善脑缺血、防治骨质疏松等作用 [3]。
淫羊藿现在在临床上常用于治疗男子阳痿不举、滑精早泄、小便不禁以及女子不孕等症。
但是有关淫羊藿对大鼠生殖功能的影响较少,本研究仙灵脾颗粒是以淫羊藿的全药入药,以大鼠睾丸为研究对象,观察不同剂量淫羊藿对大鼠生殖功能的影响,为淫羊藿应用提供新的实验证据,以利于进一步开发淫羊藿的医学价值。
1 材料与方法1.1材料雄性 SD 大鼠,18月龄 24只,体质量(180±30)g,均为 SPF 级,由辽宁长生实验动物技术有限中心提供,动物许可证号SCXK (京)2012-0001。
动物房温度(23±3)℃,相对湿度(60±5)%,12 h明暗交替,自由摄食饮水。
雄黄中砷对大鼠肝肾功能的影响
雄黄中砷对大鼠肝肾功能的影响1. 研究背景在传统中医中,雄黄被广泛使用于疾病的治疗,但其主要成分砒霜对人体有一定的毒性。
砷是一种毒性很强的有害物质,长期或高浓度暴露会导致慢性中毒。
砷对肝肾功能影响尤其严重,在砷化物暴露的群体中,肝肾功能紊乱的发生率较高。
本次实验旨在探讨雄黄中砷对大鼠肝肾功能的影响。
2. 实验方法2.1 实验动物实验动物为雄性SD大鼠,体重250~300g,共计24只。
2.2 实验组实验动物将随机分为2组,每组12只。
实验组动物每天口服雄黄煮水,剂量为每千克体重25毫克砷,7天为1个周期,连续口服3个周期。
对照组每天口服等量的蒸馏水,同样服用3个周期。
2.3 实验方法每个周期结束后,收集动物血液样本和肝脏、肾脏组织,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平,以及肝脏、肾脏总体重和器官系数,观察病理学改变。
2.4 数据分析采用SPSS 22.0统计软件进行数据分析,使用t检验和方差分析比较实验组和对照组之间的差异。
P值<0.05为差异有统计学意义。
3. 实验结果3.1 血清指标实验组和对照组比较,实验组ALT和AST水平显著高于对照组(P<0.05);实验组Scr和BUN水平显著高于对照组(P<0.05)。
3.2 器官指标实验组和对照组比较,实验组肝脏总重和肾脏总重较对照组显著降低(P<0.05);肝脏系数和肾脏系数均显著升高(P<0.05)。
3.3 病理学改变实验组大鼠肝脏有严重的肝细胞变性、坏死和中性粒细胞浸润,以及肾小球肾小管损伤。
对照组动物器官均未发现异常。
4. 实验结论本实验结果表明,雄黄中砷对大鼠肝肾功能有明显的损害作用,能够导致肝肾功能的紊乱和病理学改变。
建议在临床实践中使用雄黄前必须慎重考虑其潜在的砷中毒风险。
赶黄草对雄性大鼠正常性功能的影响
赶黄草对雄性大鼠正常性功能的影响刘明华;黄群莲;刘中飞;税丕先【期刊名称】《泸州医学院学报》【年(卷),期】2016(039)006【摘要】目的::研究赶黄草(Penthorum Chinense Pursh)对雄性大鼠正常性功能的影响。
方法:将大鼠随机分为空白对照组、阳性对照万艾可(枸橼酸西地那非片,15 mg/kg)组和赶黄草三个剂量组(0.5g生药/kg、1.0 g生药/kg、2.0 g生药/kg),连续灌胃28 d,测定赶黄草对大鼠交配能力、性器官重量、阴茎勃起功能、正常雄性大鼠精子的影响。
结果:赶黄草各剂量组对大鼠交配能力、性器官指数、阴茎勃起功能、精子存活率等无明显影响,与空白对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。
结论:赶黄草对雄性大鼠正常性功能无明显影响,作为新食品原料应用是安全的。
%Objective: To study the effect of pursh on sexual function of male rats. Methods: The rats were randomly divided into no treatment control group, Viagra (sildenafil citrate tablets, 15 mg/Kg) positive control group, and three dosage groups of pursh of (0.5 g crude drug /Kg, 1 g crude drug/Kg, and 2 g crude drug /Kg). All treatment had lasted for a consecutive 28 days, and the mating ability, the weight of sexual organs, penile erectile function and the quality of sperms were compared among groups. Results: Each dosage group of pursh had no significant effect on the mating ability, organ index, penile erectile function, and sperm survival rate compared to the control group(P>0.05).Conclusion:Pursh has no obvious effect on the sexual function in male rats and therefore is safe for long-term use.【总页数】4页(P547-550)【作者】刘明华;黄群莲;刘中飞;税丕先【作者单位】西南医科大学药学院生药教研室四川泸州 646000;西南医科大学附属医院药剂科;西南医科大学药学院生药教研室四川泸州 646000;西南医科大学药学院生药教研室四川泸州 646000【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.新鲜洋葱汁对帕罗西汀所致雄性大鼠性功能障碍的影响及其机制研究 [J], 徐桃桃;王熙;张莹莹;王丽;陈雄2.黑木耳多糖对青春期雄性大鼠性功能影响的研究 [J], 张洁;陈立勇3.雪芙蓉胶囊对去势雄性大鼠性激素水平及性功能的影响 [J], 崔建梅;汪晓阳;张磊;宋晓霞;刘鸿宇4.抗抑郁药蒲郁胶囊对雄性大鼠性功能的影响及其机制初探 [J], 贾铷; 邵岩飞; 蒋文翔; 陈喆鸣; 郑嘉文; 苏诗政; 王玉露5.十宝汤对老年雄性大鼠性功能及阴茎勃起NO-cGMP路径的影响 [J], 路艺;马平;石东;史振滏;陈健茂因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
雄黄的毒性研究_梁爱华
第 36 卷第 14 期 2011 年 7 月
Vol. 36,Issue 14 July,2011
40% ~ 60% ,人工光照,12 h 明暗周期。 1. 3 试剂 所用的生化检测试剂盒 包 括 尿 素 氮 ( BUN,二乙酰-肟法) 、葡萄糖( GLU,氧化酶法) 、总 胆固醇( CHOL,氧化酶法) 、肌苷( Cr,苦味酸法) 、总 胆红素( TBIL,化学比色法) 、白蛋白( ALB,溴甲酚 绿法) 、总蛋白( TP,双缩脲法) 、丙氨酸氨基转换酶 ( ALT,赖氏法) 、天门冬氨酸氨基转换酶( AST) 、碱 性磷酸酶( ALP,金氏法) 均由北京康泰临床试剂有 限公司生产。尿蛋白试剂盒为美国 Radox 公司产 品; 尿糖测定采用己糖激酶法,为北京康泰临床试剂 有限公司产品。 2 方法 2. 1 雄黄的 As2 S2 、可溶性砷含量测定 滴定法测 定雄黄中总砷含量: 取雄黄粉末 0. 1 g,精密称定,置 250 mL 锥形瓶中,加入硫酸 8 mL 直火加热 15 min, 溶液澄明,放冷,缓缓 加 水 50 mL,加 热 微 沸 3 ~ 5 min,放冷至 25 ~ 27 ℃ ,加酚酞指示液 2 滴,用氢氧 化钠中和至显微红色,放冷,用 0. 25 mol ·mL - 1 硫 酸溶液中和至褪色,加碳酸氢钠 4 g,摇匀后,加淀粉 指示液 2 mL,用碘滴定液( 0. 05 mol·L - 1 ) 滴定,滴 定至溶液显紫蓝色。每 1 mL 碘滴定液( 0. 05 mol· L - 1 ) 相当于 5. 348 mg As2 S2 。
[稿件编号] 20101115001 [基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项 ( 2009ZX09301005) ; 国家科技部科研院所基础研究专项基金( 2002DEB20067 ) ; 国 家“十一五”科技支撑计划项目( 2006BAI55B02-03) [通信作者] * 梁 爱 华,Tel : ( 010 ) 84252805-2207,E-mail: liangaihua@ sina. com
朱砂对雄性大鼠精子质量影响的研究
朱砂对雄性大鼠精子质量影响的研究顾祖曦;刘炯;谷颖敏;姜昕;吴文斌;米金霞;汤家铭【期刊名称】《上海中医药杂志》【年(卷),期】2012(46)9【摘要】目的观察朱砂灌胃给药对雄性大鼠精子活力及相关运动参数的影响。
方法利用生殖毒性Ⅰ段雄性大鼠,按体质量随机分为阴性对照组(0.5%CMC-Na)、朱砂低剂量组(100μg/g)、朱砂中剂量组(300μg/g)、朱砂高剂量组(1 000μg/g)、阳性对照组(雷公藤多苷10μg/g),分别给予相应的干预措施,共6周。
给药结束后,取大鼠一侧附睾制备精子悬液,吸取10μl精子悬液至大鼠专用精子计数池,用计算机辅助精子分析系统(CASA)进行精子数量、活力、运动能力检查,并取睾丸、附睾HE染色观察病理情况。
结果与阴性对照组比较,朱砂各剂量组的精子活率、精子活力、有效精子数和精子密度均有所下降,其中朱砂中剂量组的精子活率、精子活力和精子密度、低剂量组的有效精子数的差异有统计学意义(P<0.01),朱砂低剂量组的精子活力、中高剂量组的有效精子数的差异有统计学意义(P<0.05)。
雷公藤多苷组的精子活率、精子活力、有效精子数、精子密度均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。
与阴性对照组比较,雷公藤多苷组除精子的鞭打频率升高外,其余各运动参数均降低,差异均有统计学意义(P<0.01);朱砂低中剂量组精子的直线运动速度、曲线运动速度、平均路径速度、侧摆幅度降低,鞭打频率升高,差异有统计学意义(P<0.01);朱砂低剂量组精子的平均移动角度、前向性降低,差异有统计学意义(P<0.05)。
但朱砂高剂量组的各个运动参数与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
结论朱砂对大鼠精子的活力、活率、精子密度、运动能力等方面均有一定的影响;提示朱砂长期给药对雄性生育力有潜在的损害作用。
【总页数】4页(P88-91)【作者】顾祖曦;刘炯;谷颖敏;姜昕;吴文斌;米金霞;汤家铭【作者单位】上海中医药大学实验动物中心;上海中医药大学药物安全评价研究中心【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.肝气郁结对雄性大鼠精子质量影响的研究2.有氧运动对雄性SD大鼠精子质量参数的影响3.盐酸青藤碱对雄性大鼠精子质量及睾丸组织的影响4.手机电磁辐射对雄性大鼠精浆生化及精子质量的影响5.左卡尼汀对高原低压低氧雄性大鼠精子质量及性激素水平的影响因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
大鼠口服雄黄的药物动力学研究的开题报告
大鼠口服雄黄的药物动力学研究的开题报告一、选题背景雄黄是一种传统的中药材,自古以来就被广泛应用在中医领域中。
它的主要成分是硫化物,对人体具有多种保健功效。
随着现代化技术的不断进步,越来越多的生物医学研究表明,雄黄可以用于治疗多种疾病,例如咳嗽、哮喘、支气管炎等。
虽然雄黄具有良好的药理作用,但这种中草药在人体内的药代动力学和药效动力学机制还不是很清晰。
为了更好地了解雄黄在人体内的代谢和作用机制,本研究将进一步研究大鼠口服雄黄的药物动力学,以期探究其吸收、分布、代谢和排泄情况,更好地了解雄黄的药效作用和药理学特性。
二、研究目的本研究的目的是通过大鼠口服雄黄的药物动力学研究,探究雄黄的药代动力学和药效学机制,为雄黄在临床和医学上的进一步应用提供理论支持。
三、研究内容和方法研究内容:1. 大鼠口服雄黄后的药物吸收情况;2. 大鼠口服雄黄后的药物分布情况;3. 大鼠口服雄黄后的药物代谢情况;4. 大鼠口服雄黄后的药物排泄情况。
研究方法:1. 对雄黄进行初步的质量控制检测;2. 确定大鼠的药物用量和给药方式;3. 通过采集大鼠血液、尿液、粪便等样本,利用高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)分析样本中的雄黄和代谢产物;4. 对分析结果进行统计分析和回归分析。
四、研究意义本研究旨在通过大鼠口服雄黄的药物动力学研究,探究雄黄的药代动力学和药效学机制,为雄黄在临床和医学上的进一步应用提供理论支持。
研究结果有助于更好地了解雄黄的药理学特性,为雄黄的开发和制备提供理论依据,同时也对中药材的药物代谢和药效学机制研究提供了有益的参考。
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雄黄灌胃给药对雄性大鼠精子质量的影响作者:刘炯李咏梅等来源:《中国中医药信息》2012年第07期摘要:目的观察雄黄对雄性成年大鼠精子质量的影响。
方法利用部分雄黄灌胃给药生殖毒性Ⅰ段试验雄性大鼠进行精子质量分析。
将SD雄性大鼠50只随机分为阴性对照组、阳性对照雷公藤多苷组(10 mg/kg)及雄黄低、中、高剂量组(50、125、250 mg/kg)。
各给药组连续灌胃给予相应药物6周,每日1次。
给药结束后,取大鼠一侧附睾用计算机辅助精子分析系统(CASA)做精子的数量、活力、运动能力检查,并取睾丸、附睾做HE染色,观察组织病理学变化。
结果阳性对照雷公藤多苷组精子活率、精子活力、有效精子数、精子密度及各项运动参数(除鞭打频率外)均明显低于阴性对照组,差异有统计学意义(P0.05),且各剂量组间差异亦无统计学意义(P>0.05)。
组织病理学观察显示,阳性对照雷公藤多苷组的睾丸局部生精小管萎缩,生精细胞减少,附睾管腔内可见大量降解的生精细胞及细胞碎片,精子细胞减少,静纤毛缩短。
雄黄高剂量组附睾、睾丸未见明显组织学病理改变。
结论雄黄对雄性大鼠的精子没有明显的毒性作用。
关键词:雄黄;生殖毒性;计算机辅助精子分析;精子质量;运动参数;精子活力;雄性大鼠中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2012)07-0037-03精子的活力和运动特性是反映精子质量的重要参数,是雄性生殖毒性研究的观察指标之一。
对精子的运动、密度、活力等进行客观、定量、准确的测定在雄性生殖毒理研究中具有十分重要的意义。
在人用药物注册技术要求国际协调会准则(ICH)和我国的《药物生殖毒性研究技术指导原则》[1-2]中均将精子数和精子活力检查列为生育力与早期胚胎发育毒性试验(即生殖毒性Ⅰ段)的检测指标。
计算机辅助精子分析仪(computer assisted sperm analysis,CASA)是一种建立在显微摄像基础上的计算机精子运动图像处理自动分析系统,可自动得到精子密度、活力、活率,并能对精子的运动轨迹特征进行分析和分类统计,主要应用在医学上男性精子质量分析中[3]。
雄黄是卫生部颁布的28种毒性药材之一,其主要成分为四硫化四砷[4]。
我国含雄黄的复方制剂较多,这些复方在治疗某些病症方面具有独特的效果,然而,作为含砷矿物类中药,雄黄及其复方的安全性问题近年来倍受关注[5]。
因此,为了安全、合理使用雄黄及其复方制剂,尽可能减少毒性反应的发生,本研究利用雄黄灌胃给药生殖毒性Ⅰ段试验,采用CASA系统定量分析精子质量,并结合组织病理学检查来观察雄黄对雄性大鼠生育力的影响。
1 实验材料1.1 动物清洁级SD雄性大鼠,体质量(189±8.0)g,为进行生殖毒性Ⅰ段试验的雄性大鼠,购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司,许可证号:SCXK(沪)2008-0016。
1.2 药物雄黄饮片,产地湖南石门雄黄矿业,上海封浜中药饮片厂加工炮制成饮片,批号H2007052401,上海市食品药品检定所提供,经测定二硫化二砷含量为95.5%。
灌胃前雄黄用0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)稀释助溶助悬。
雷公藤多苷片,批号Z32021007,江苏美通制药有限公司生产,研成粉末溶于生理盐水中,配制成1.0 mg/mL的混悬液。
1.3 主要仪器与试剂CASA,型号:WLJY-9000,北京伟力新世纪科技发展有限公司生产。
大鼠专用精子计数池,恒温水浴锅,精子获能培养液。
2 实验方法2.1 动物饲养动物饲养在上海中医药大学实验中心屏障环境,使用许可证号:SYXK(沪) 2009-0069。
动物自由摄食、饮水,1~2 d换水1次,每周换2次垫料。
饲养期间实际温度控制在20~25 ℃,湿度控制在40%~70%,明暗周期12 h/12 h。
2.2 分组与给药2.3 制备精子悬液采用Klinefelter扩散法[6]收集精子,分离一侧附睾尾,用眼科剪在附睾尾部近输精管端剪十字切口,放入37 ℃预温的盛有4 mL获能培养液的5 mL离心管中15 min,让精子自由游出,检测前用尖头镊子移出残余组织及未充分扩散的精子块。
2.4 精子质量分析吸取10 µL精子悬液至大鼠专用精子计数池,将计数板置于37 ℃预温好的显微镜载物台上,采用WLJY-9000型CASA测定精子质量。
于10×物镜下通过摄像机和录像机记录精子运动图像,分析精子的运动轨迹。
每个样品分析5个视野,每个视野10~15 s。
测定参数包括精子活率、精子活力、有效精子数、精子密度、直线运动速度(VSL)、曲线运动速度(VCL)、平均路径速度(VAP)、精子头侧摆幅度(ALH)、平均移动角度(MAD)、鞭打频率(BCF)、直线性(LIN)、摆动性(WOB)和前向性(STR)等13项指标。
2.5 组织病理学检查分离大鼠一侧睾丸、附睾,10%甲醛溶液固定,做HE染色。
2.6 统计学方法采用SPSS13.0统计软件进行分析,所有计量数据均以—x±s表示,采用方差分析进行比较。
P3.2 大鼠睾丸和附睾组织病理学观察4 讨论药物的生殖毒性包括其对生殖细胞、交配、受孕等亲代生殖机能及子代胚胎-胎仔发育等不良影响,其中精子质量直接影响雄性的生育力,可以反映药物对雄性生育力的影响,因此精子质量检测是判断雄性生育力的一个比较重要指标。
以往精子质量分析采用人工计数和肉眼观察精子形态和活力的方法,检测结果差异较大、重复性差。
随着计算机技术的发展,CASA因其客观真实、检测速度快、检测指标多等优点,逐渐替代了人工方法。
CASA不仅能够测定精子的活率、活力、密度和有效精子数,还可以测定9个运动参数,分析精子的运动轨迹,从而更加详细地了解精子的动力学状态。
从生殖生理学角度来看,贮存在附睾尾的精子通过射精进入阴道、子宫,最后到达输卵管并完成和卵子的结合,这期间都需要精子具有运动能力,特别是快速直线向前运动的能力[8]。
其中VCL、VSL、VAP和BCF反映了精子的运动速度,与精子的活力相关[9],LIN、WOB、MAD、ALH和STR等参数与精子的运动方式相关,反映了精子运动的直线性和前向性[10]。
通过分析精子动(静)态图像,为临床提供有关精子质量各项指标的准确数据[11]。
本实验应用CASA对雄黄灌胃给药生殖毒性Ⅰ段试验的雄性大鼠进行精子质量分析,结合大鼠睾丸、附睾的组织病理学及生殖毒性Ⅰ段试验的结果等方面来探讨雄黄对雄性大鼠精子质量的影响。
雷公藤多苷具有抗炎及抑制细胞和体液免疫等作用,临床上用于风湿热瘀、毒邪阻滞所致的类风湿性关节炎、肾病综合征等,但其具有抗雄性生育活性[12]的不良反应,在本试验中用作阳性对照。
我们发现,雷公藤多苷10 mg/(kg·d)灌胃6周后,用CASA分析的大鼠精子各项指标(除BCF外)均显著降低,与阴性对照组比较差异有统计学意义。
为了进一步验证雄黄对雄性大鼠精子生长、成熟的影响,我们对各组大鼠做了睾丸和附睾的组织病理学检查,发现雄黄高剂量组大鼠睾丸、附睾未见明显的病理改变,提示雄黄对大鼠精子的生长、成熟没有影响。
而雷公藤多苷组的大鼠睾丸、附睾有不同程度的病理改变,睾丸局部的生精小管萎缩,生精细胞减少,附睾管腔内脱落细胞及细胞碎片增多,精子细胞减少,说明雷公藤多苷明显影响大鼠精子的生长、成熟及运动,这与CASA分析的精子活力、运动参数等检测数据是基本吻合的,表明CASA可以准确、客观地了解精子质量的真实情况,作为药物对雄性生殖毒性影响评价的客观依据。
参考文献:[1] Detection of toxicity to reproduction for medicinal products & toxicity to male fertility S5(R2)[S]. ICH harmonized tripartite guideline,2005:11.[2] 国家食品药品监督管理局.药物生殖毒性研究技术指导原则[S].2006:11.[3] 韦凌娅,吕中明,王民生.计算机辅助精子分析系统在大鼠精子运动能力测定中的应用[J].环境与职业医学,2007,24(6):596-598.[4] 张志杰,周群,尉京志,等.我国药用雄黄的晶体结构鉴定[J].光谱学与光谱分析,2011,31(2):291-296.[5] 周超凡,林育华.传统中药雄黄应用概况及其安全性[J].药物不良反应杂志,2008,10(2):104-109.[6] Zhou YC, Zheng M, Shi QX, et al. An epididymis-specific secretory protein hongrES1 critically regulates sperm capacitation and male fertility[J]. PLoS ONE,2008,3(12):1-12.[7] Klinefelter GR, Gray LE Jr, Suarez JD. The method of sperm collection significantly influences sperm motion parameters following ethane dimethane sulphonate administration in therat[J]. Reprod Toxicol,1991,5:39-44.[8] Donnelly ET, Lewis SE, Mc Nally JA, et al. In vitro fertilization and pregnancy rates:the influence of sperm motility and morphology on IV Foutcome[J]. Fertil,1998,70(2):305.[9] 吴齐飞,邢俊平,薛炜,等.计算机辅助精液分析男性不育患者精子运动参数与精子活力的相关性[J].现代泌尿外科杂志,2007,12(3):182-184.[10] 王红旗,郭远瑜,雷和月,等.杭州市萧山区不育患者精液质量及动态参数分析[J].中国男科学杂志,2010,24(5):33-36.[11] Takashi Kawaguchi, Mamoru kawachi, Makoto Morikawa, et al. Key parameters of sperm motion in relation to male fertility in rats given α-chlorohydrin or nitrobenzene[J]. The Journal of Toxicological Sciences,2004,29(3):217-231.[10] 王诗鸿.雷公藤抗雄性生育作用研究进展[J].时珍国医国药,2005, 16(11):1165-1167.[12] 王诗鸿.雷公藤抗雄性生育作用研究进展[J].时珍国医国药,2005, 16(11):1165-1167.(收稿日期:2011-12-30,编辑:华强)。