食品中苯甲酸山梨酸和糖精钠的测定-标准文本(食品安全国家标准)
食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定
食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定1 范围本方法适用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量的测定。
2 依据GB/T 23495-2009《食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定 高效液相色谱法》。
3 原理不同样品经提取后，将提取液过滤，经反相高效液相色谱分离测定，根据保留时间定性，外标峰面积定量。
.4 试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T 6682要求。
甲醇，乙酸铵等。
苯甲酸标准储备液：称取0.0638g 苯甲酸，用少量乙醇溶解并用水定容至100mL 。
山梨酸标准储备液：称取0.0766g 山梨酸，用少量乙醇溶解并用水定容至100mL 。
糖精钠标准储备液：称取0.0766g 糖精钠，用水溶解并定容至100mL 。
混合标准使用液：分别吸取不同体积苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准储备溶液，将其稀释成适当浓度，见附后标准曲线图谱。
5 分析步骤 5.1 样品处理称取适量样品（雪菜）于小烧杯中，用50mL 水分数次将样品移入100mL 容量瓶中，80℃水浴提取30min ，冷却后定容、过滤，滤液待上机分析。
5.2 色谱条件a) Agilent 高效液相色谱仪；b) 色谱柱：C 18柱，250mm ×4.6mm ，5μm ；c) 流动相：0.02mol/L 乙酸铵溶液+甲醇（90+10）； d) 流速：1mL/min ； e) 检测波长：230nm ； f) 进样量：20μL ； g) 柱温：25℃。
5.3 测定取处理液和混合标准使用液各20μL 注入高效液相色谱仪进行分离，以其标准溶液峰的保留时间为依据定性，以其峰面积求出样液中被测物质含量。
6 结果计算样品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的含量按下式计算： X =式中：X ——样品中待测组分含量，g/kg ；c ×Vm ×1000c ——由标准曲线得出的样液中待测物的浓度，μg /mL ； V ——样品定容体积，mL ； m ——样品质量，g 。
检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解
检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解(转自仪器信息网色谱论坛)苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/T5009.29-1996，糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-1996，即可开展实验。
苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。
笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。
2 样品前处理的注意事项GB/T5009.28-1996和GB/T5009.29-1996 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。
食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。
这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。
GB/T5009.29-1996使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。
如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。
具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1m ol/L)1.0 ml，加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液， 9.50mL 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。
高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的方法验证
066苯甲酸、山梨酸、糖精钠是常用的食品添加剂，也是衡量食品卫生质量的重要指标。
苯甲酸、山梨酸具有防腐保鲜的作用，糖精钠是合成甜味剂，甜度比蔗糖甜300－500倍。
GB2760－2016《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》对这三者的添加范围和限量都有明确的规定，超范围或者超限量使用都是违法的。
GB5009.28－2016《食品安全国家标准 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》对其检测方法做了规定，有高效液相色谱法和高效气相色谱法，其中高效液相色谱法为第一法仲裁法被广泛应用。
国标方法在使用前要进行方法验证，核查实验室能否满足检测方法的要求。
本研究针对高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的适用性、线性、检出限、定量限、加标回收率等进行了一一验证，均能够满足检测方法的要求。
一、仪器与试剂1.仪器。
高效液相色谱仪（紫外检测器，Y001），岛津LC－20AT；电子分析天平（Y033），BSA623S－CW，d ＝0.001g。
2.试剂。
苯甲酸钠标准品（唯一性标识3422003，纯度100.0％），北京坛墨质检科技有限公司；山梨酸标准品（唯一性标识3192003，纯度99.9％），北京坛墨质检科技有限公司；糖精钠标准品（唯一性标识3212005，纯度99.5％），北京坛墨质检科技有限公司；甲醇（色谱级），Aigma－Aldrich；乙酸铵（色谱级），aladdin；亚铁氰化钾、乙酸锌（分析纯），天津市天力化学试剂有限公司；实验室用水为自制超纯水。
二、实验与方法1.色谱条件。
（1）色谱柱：Diamonsil Plus 5um C 18，250×4.6mm；检测波长230nm；进样量10uL。
（2）流动相：甲醇＋乙酸铵溶液（0.02mol/L）＝5＋95；流速1mL/min。
高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的方法验证2.样品前处理。
准确称取约2g（精确到0.001g）试样于50mL具塞离心管中，加水约25mL，涡旋混匀，于50℃水浴超声20min。
新版食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定
一、编制目的为规范食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定方法，编制本指导书。
二、适用范围本指导书适用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定。
三、编制依据GB 5009.28-2016《食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》四、实验原理样品经水提取，高脂肪样品经正己烷脱脂、高蛋白样品经蛋白沉淀剂沉淀蛋白，采用液相色谱分离、紫外检测器检测，外标法定量。
五、试剂和材料除非另有说明,所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
5.1 试剂5.1.1 氨水（NH3˙H2O）。
5.1.2 亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6˙3H2O]。
5.1.3 乙酸锌[Zn(CH3COON)2˙2H2O]。
5.1.4 无水乙醇（CH3CH2OH）。
5.1.5 正已烷（C6H14）。
5.1.6 甲醇（CH3OH）。
5.1.7 乙酸铵（CH3 C00NH4）：色谱纯。
5.1.8 甲酸（HCOOH）：色谱纯。
5.2 试剂配制5.2.1 氨水溶液（1+99）：取氨水1ml，加到99ml水中，混匀。
5.2.2 亚铁氰化钾溶液（92g/L）：称取106g亚铁氰化钾，加入适量水溶解，用水定容至1000ml。
5.2.3 乙酸锌溶液（183g/L）：称取220g乙酸锌溶于少量水中，加入30ml 冰乙酸，用水定容至1000ml。
5.2.4 乙酸锌溶液（20mmol/L）：称取1.54g乙酸锌，加入适量水溶解，用水定容至1000ml，经0.22um水相微孔滤膜过滤后备用。
5.2.5 甲酸-乙酸铵溶液（2mmol/L甲酸+20mmol/L乙酸铵）：称取1.54g 乙酸铵，加入适量水溶解，再加入75.2ul甲酸，用水定容至1000ml，经0.22um水相微孔过滤后备用。
5.3 标准品5.3.1 苯甲酸钠（C6H5COONa，CAS号：532-32-1），纯度≥99.0%；苯甲酸（C6H5COOH,CAS号：65-85-0），纯度≥99.0%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
食品中苯甲酸山梨酸和糖精钠的测定-标准文本(食品安全国家标准)
食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定1 范围本标准规定了食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量的测定方法。
本标准第一法适用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定；第二法适用于酱油、水果汁、果酱中苯甲酸、山梨酸的测定。
第一法液相色谱法2原理样品经处理后，用液相色谱分离，紫外检测器检测，外标法定量。
3试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1氨水（NH3•H2O）。
3.1.2氢氧化钠（NaOH）。
3.1.3硫酸（H2SO4）。
3.1.4亚铁氰化钾（K4Fe(CN)6•3H2O）。
3.1.5乙酸锌（Zn(CH3COO)2•2H2O）。
3.1.6氯化钠（NaCl）。
3.1.7酒石酸（C4H6O6）。
3.1.8硅酮树脂。
3.1.9磷酸二氢钠（NaH2PO4•12H2O）。
3.1.10磷酸二氢钾（KH2PO4）。
3.1.11中性氧化铝。
3.1.12甲醇（CH3OH）：色谱纯。
3.1.13乙酸铵（CH3COONH4）。
3.2 试剂配制3.2.1 氨水（1+1）：氨水与水等体积混合，经微孔滤膜过滤后备用。
3.2.2 氢氧化钠溶液（4 g/L）：称取4 g氢氧化钠，溶于水并稀释至1000 mL。
3.2.3硫酸溶液（0.5 mol/L）：移取30 mL浓硫酸（约70%）边搅拌边慢慢加入至500 mL水中，冷却至室温后，转移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。
3.2.4亚铁氰化钾溶液（92 g/L）：称取106 g亚铁氰化钾加水至1000 mL。
3.2.5 乙酸锌溶液（183 g/L）：称取220 g乙酸锌溶于少量水中，加入30 mL冰乙酸，加水稀释至1000 mL。
3.2.6 酒石酸溶液（15%）：称取15 g酒石酸，用水定容100 mL。
3.2.7的磷酸盐缓冲液（pH 7.2）：分别称取16.72 g磷酸二氢钠和2.72 g磷酸二氢钾，用水溶解后定容至1000 mL，经微孔滤膜过滤后备用。
食品中的山梨酸、苯甲酸、糖精钠、脱氢乙酸的测定
食品中的山梨酸、苯甲酸、糖精钠、脱氢乙酸的测定【摘要】目的：同时对食品中的山梨酸、苯甲酸、糖精钠、脱氢乙酸进行测定，缩短检测时间，提高检测效率。
方法：使用高效色谱仪，紫外检测器，同时检测食品中脱氢乙酸、山梨酸、苯甲酸、糖精钠的含量。
结果：精密度在1%-8%之间，回收率在91%-110%之间。
结论:该方法前处理简单，检测结果稳定性好，准确度高，能同时检测食品中的4种添加剂，提高检测效率。
【关键词】高效液相色谱仪; 安赛蜜; 苯甲酸; 山梨酸; 糖精钠; 脱氢乙酸在食品加工中，为了提高食品的风味，延长保持期等原因，食品中会加入各种的添加剂，而比较常用的包括山梨酸、苯甲酸、糖精钠、脱氢乙酸等。
在国标中，山梨酸、苯甲酸、糖精钠是使用国家标准GB 5009.28-2016进行检测，脱氢乙酸是使用国家标准GB 5009.121-2016进行检测，但在市场的抽检中，有很多的食品均需要检测这4种添加剂，在大量的检测工作中，如果能把这4种添加剂同时进行检测，可以大大缩短检测时间，提高检测效率。
本实验通过对流动相、检测波长的调整探索了一种能同时检测山梨酸、苯甲酸、糖精钠、脱氢乙酸的方法。
1 实验部分1 试剂与仪器岛津液相色谱仪，配紫外检测器，C18色谱柱苯甲酸钠标准品（CAS号:532 32-1)，山梨酸钾标准品（CAS号:590-00-1)，糖精钠标准品（CAS号:128-11-9)氨水、亚铁氰化钾、乙酸锌、无水乙醇、正已烷、甲醇: 色谱纯1.2 试样提取准确称取约2 g试样于50 ml具塞离心管中,加水约25 m，涡旋混匀，于50℃水浴超声20 min，冷却至室温后加亚铁氰化钾溶液（92g/L)2 ml和乙酸锌溶液(183g/L)2 mL，用氢氧化钠溶液(20g/L)调pH至7.5，混匀于8 000r/ min离心5 min,将水相转移至50 ml容量瓶中，于残渣中加水20 mL，涡旋混匀后超声5 min，于8 000 r/min离心5 min将水相转移到同一50 ml容量瓶中并用水定容至刻度，混匀。
高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠
将 上 述 混 合 标 准 溶 液 进 行 测 定，
根据待测物质峰面积和浓度关系绘图，
得到标准曲线回归方程。苯甲酸、山
梨酸和糖精钠在 0.2 ～ 200 mg/L 范围
内线性关系良好，苯甲酸在 0.25 mg/L
时，线性方式 y=31 991.7x，相关系数
r=0.999 7，检出限为 0.006 g/kg；山
1.2.1 配制混合标准溶液 精密称取苯甲酸、山梨酸和糖精钠 标准物质各 4.0 mL 于 20 mL 容量瓶中，
用水配制成 200 μg/mL 的标准混合储备 液，再用水稀释成 100 μg/mL、50 μg/ mL、25 μg/mL、12.5 μg/mL、2.5 μg/ mL、0.5 μg/mL、0.2 μg/mL 的 系 列 标 准工作液，由低浓度到高浓度依次进样。
梨酸在 0.20 mg/L 时，线性方式 y=60
861.2x，相关系数 r=0.999 8，检出限
为 0.005 g/kg； 糖 精 钠 在 0.50 mg/L
时，线性方式 y=21521.4x，相关系数
r=0.999 7，检出限为 0.012 5 g/kg。
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1.2.2 样品处理 称 取 2.0 g 果 酱 样 品 于 50 mL 比 色 管 中， 加 30 mL 水 和 0.5 mol/L 的 氢氧化钠溶液 1.0 mL，摇匀后置于超 声清洗器中提取 15 ～ 20 min，直至 被测组分完全溶解。然后再添加 0.42 mol/L 的硫酸锌溶液和 0.5 mol/L 的氢 氧化铵溶液各 1.5 mL，加水定容到 50 mL 后摇匀，静置，然后用双层滤纸过 滤上层清液，将最初过滤的 5 mL 液体 丢弃，并采用 0.45 μm 的滤膜对滤液 再次过滤，进样 5 μL 开展色谱分析。 如果液体样品不包含蛋白质，则不需 要蛋白质沉淀过程，直接取样后用水 定容，超声提取后过滤进样即可；如 果是固体样品，则需要将固体样品研 磨粉碎，然后进行样品处理 [2]。 1.2.3 检测 精确称取处理液和混合标准溶液 各 20 μL 放置于高效液相色谱仪中进 行分离，以标准溶液的固定峰值为依 据，根据峰面积计算样液中的被测物 质含量，计算公式为：，其中 X 表示 样 品 中 待 测 组 分 的 含 量， 单 位 为 g/ kg；C 表示由标准曲线得出的样液中 待测物质的量浓度，单位为 mg/mL， V 表示样品定容的体积，单位 mL；m 表示样品的质量，单位为 g。
食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的测定
食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的测定食品安全检验手册26~27页1．试剂和溶液方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为重蒸水。
（1） 甲醇 色谱纯（2） 稀氨水（1+1）氨水加水等体积混匀。
（3） 0.02mol/L 乙酸铵溶液 称取1.54g 乙酸铵，加水溶解并定容至1000mL，溶液经滤膜（0.45μm）过滤。
（4） 亚铁氰化钾溶液： 称取10g 亚铁氰化钾，用水溶解，并稀释至100 mL。
（5） 硫酸锌溶液：称取15g 硫酸锌，用水溶解，并稀释至100 mL。
（6） 苯甲酸标准储备溶液 准确称取10.0mg 苯甲酸，加少量乙醇溶解，移入10mL容量瓶中，加水定容至10mL。
此溶液苯甲酸含量为1mg/mL，作为储备液。
（7） 山梨酸标准储备溶液 准确称取10.0mg 山梨酸，加少量乙醇溶解，移入10mL容量瓶中，加水定容至10mL。
此溶液山梨酸含量为1mg/mL，作为储备液。
（8） 糖精钠标准储备溶液 准确称取10.0mg 糖精钠，加少量水溶解，移入10mL容量瓶中，加水定容至10mL。
此溶液糖精钠含量为1mg/mL，作为储备液。
（9） 苯甲酸、山梨酸、糖精钠混合标准使用液 取苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准储备溶液各1.0mL，放入100 mL 容量瓶中，加水至刻度。
此溶液含苯甲酸、山梨酸、糖精钠各10μg/mL，将此溶液用水稀释成2.0，4.0，6.0，8.0，10.0μg/mL 标准系列。
溶液通过滤膜（0.45μm）过滤后进样。
2.测定方法（1） 样品处理①汽水饮料果汁类：（汽水需温搅拌除去二氧化碳）吸取2.0 mL 样品， 加入已装有中性氧化铝（3.5cmⅹ1.5 cm）的小柱中，过滤，弃去初滤液，然后用流动相洗脱苯甲酸、山梨酸、糖精钠，接收于25mL 带塞量筒中，洗脱至刻度，摇匀。
此溶液通过0.45μm 微孔滤膜后进样。
②配制酒类：称取10.0g 样品，放入小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水（1+1）调节pH 约7，加水定容至适当体积，经滤膜（0.45μm）过滤。
%80测食品中的苯甲酸、山梨酸、糖精钠
第１８卷第３期２００６年８月宁德师专学报（自然科学版）ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｉｎｇｄｅＴｅａｃｈｅｒｓＣｏｌｌｅｇｅ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ）ＶｏＬ１８Ｎｏ．３Ａｕｇ．２００６液相色谱法同时检测食品中的苯甲酸、山梨酸、糖精钠刘君琼（宁德市产品质量检验所，福建宁德３５２１００）摘要：采用气相色谱仪及液相色谱仪，用液相色谱法同时检测食品中的苯甲酸、山梨酸、糖精钠，特别是对固体食品及高蛋白、高油脂食品的测定，目的是拓宽检测食品的范围，优化实验条件，从样品的前处理，检测仪器的选择，超标时的判断等几个方面，论证了该方法的适用性及可靠性。
关键词：色谱法；食品；苯甲酸；山梨酸；糖精钠中图分类号：Ｇ６５７．７＋２文献标识码：Ａ文章编号：１００４—２９１ｌ（２００６）０３－０２３４—０３添加剂苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，它直接关系到人们的身体健康，要从食品中测得一个准确可靠的结果有一定的难度，同时标准方法也存在一定的缺陷，用仪器测定时，只说明了前处理液体食品的，以及未涉及固体食品及蛋白质、脂肪含量高的食品的含量，而前处理不干净往往会污染色谱柱，影响添加剂的检测结果．笔者根据多年从事气相、液相分析的实际经验，对样品前处理、检测仪器的选择、超标时判断几个易出现的问题的方面进行详细的阐述．１实验部分１．１基本原理试样溶液在弱碱性条件下，用亚铁氰化钾及乙酸锌作为沉淀剂除去试样中脂肪、蛋白质，过滤后脱气经过滤膜进高效液相色谱，反相分离后，保留时间和峰面积定性、定量．】．２主要试剂方法中所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水，（除另有规定外）．甲醇：色谱纯；氢氧化钠：１ｍｏｌ・Ｌ～；亚铁氰化钾：１０％；乙酸锌：２０％；乙酸铵（ｏ．０２ｍｏｌ・Ｌ。
１）：称取１．５４９乙酸铵溶于１０００ｍｌ水中，脱气，过０．４５ｐ，ｍ滤膜；苯甲酸标准储备液（１．０ｍｇ／ｍ１）：准确称取０．１０００９苯甲酸于１００ｍｌ容量瓶中，用甲醇定容，于冰箱保存；山梨酸标准储备液（１．０ｍｇ／ｍ１）：准确称取０．１０００９山梨酸于１００ｍｌ容量瓶中，用甲醇定容，于冰箱保存；糖精钠标准储备液（１．０ｍｇ／ｍ１）：准确称取０．０８５１９经１２０。
国家预制菜中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的标准-概念解析以及定义
国家预制菜中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的标准-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述国家预制菜是一种方便快捷的食品，广泛应用于各种场合，如家庭、餐厅和快餐店等。
然而，近年来，一些国家预制菜中的苯甲酸、山梨酸和糖精钠等物质引起了人们的关注和担忧。
苯甲酸是一种常见的食品防腐剂，被广泛应用于食品加工过程中。
然而，长期摄入过多的苯甲酸可能对人体健康造成不良影响，如引发过敏反应、肠胃不适等。
山梨酸是一种常见的食品酸味剂，用于增加食品的口感和保鲜效果。
尽管山梨酸通常被认为是相对安全的食品添加剂，但其过量摄入可能导致胃肠道不适和口腔炎症等问题。
糖精钠是一种人工甜味剂，常用于无糖或低糖食品中。
然而，糖精钠的含量超过标准限制可能对肾脏和神经系统造成损害。
因此，制定国家预制菜中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的标准变得至关重要。
这些标准将确保国家预制菜的质量和安全性，减少对消费者健康的潜在风险。
此外，标准的制定还可以促进食品行业的合规性和规范化发展。
本文将详细介绍国家预制菜的定义和背景，以及苯甲酸、山梨酸和糖精钠的标准，目的在于提高人们对国家预制菜中这些物质的认识和理解，并为制定相关标准提供一些建议和改进措施。
通过建立科学合理的标准体系，我们可以确保国家预制菜的质量和安全，为消费者提供健康、安全的食品选择。
总之，国家预制菜中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的标准对于保障公众健康至关重要。
本文将深入探讨这些标准的重要性，并提出一些建议和改进措施，以期推动食品行业的可持续发展。
1.2文章结构1.2 文章结构本文将按照以下结构进行阐述：首先，会对国家预制菜的定义和背景进行介绍，以便读者对该领域有一个全面的了解。
其次，会详细探讨国家对苯甲酸、山梨酸和糖精钠在预制菜中的标准制定情况，包括各项标准的依据、限定值以及相关的监测方法。
然后，会总结这些标准在国家预制菜行业中的重要性，并进一步提出对标准的建议和改进措施，以期达到更好的食品安全保障和质量控制。
食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的不确定度评估试验
食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的不确定度评估试验作者：暂无来源：《中国食品》 2019年第12期文杨蒙衡利辰张刚磊刘梅陈明慧邳州市市场监督综合检验检测中心测量不确定度一般简称为不确定度，是标准不确定度、合成标准不确定度、A类标准不确定度等各种不确定度的一个总称，也是测量结果可疑程度的一种表述。
本文对GB 5009.28－2016（第一法）测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠方法的测量不确定度进行评定，分析并找出影响该检测项目结果的各种因素，并计算合成不确定度和扩展不确定度，为该项检测方法的研究与检测结果的评估提供依据。
一、测量方法根据GB 5009.28－2016（第一法）高效液相色法规定，进行苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定。
环境条件。
温度（20±5）℃，相对湿度50－70％。
仪器设备。
高效液相色谱：Agilent1260，色谱柱Eclipse Plus C－18柱，柱长100mm，内径4.6mm，粒径3.5μm。
测试对象：柠檬水饮料。
不确定度被测变量评定公式。
被测变量＝样品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的浓度不确定度来源。
根据GB 5009.28－2016（第一法）高效液相色法测试流程，下列参数为不确定度的来源。
不确定度的量化评估。
为了评估不同分量的不确定度，进行精密度研究和真值研究两组实验，尽量覆盖条款4中需评估的不确定度来源，未能完全覆盖的其它分量将分别评估。
①精密度研究：精密度研究是在规定测试条件下，对同一测试样品，经过多次独立试验得到的结果之间的接近程度。
选择三个不同浓度添加样（10ug/ml、40ug/ml、60ug/ml）作为测试样品，测定苯甲酸、山梨酸和糖精钠的含量。
每一浓度由不同人员在不同日期进行四次独立测试。
每次测试需重新配置标准曲线。
结果汇总如下：②真值研究：通过回收率评估真值。
回收率的评估可从分析有证标准物质(CRMs)或添加样来得到。
把60ug/mL苯甲酸、山梨酸和糖精钠添加到一个已知不含苯甲酸、山梨酸和糖精钠的样品中，重复分析十次。
液相色谱法测定食品中的糖精钠、安赛蜜、苯甲酸、山梨酸
食 品 很 容 易 因 为 温 湿 度、 环 境 等 出现变质，给企业带来巨大经济损失， 也会制约食品行业发展。防腐剂的添 加很好地延长了食品的保质期，因此 被广泛添加到食品中。目前常添加的 有苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、 丙酸及其盐、脱氢乙酸等。甜味剂能 够改善口感进而增加食欲，常用的甜 味剂有糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜、 纽甜与阿力甜等 [1]。近些年的研究表 明食品添加剂超量使用也会危害人体 健康，食品安全国家标准对防腐剂和 甜味剂的添加量作出明确规定，以保 证食品安全 [2]。本文采用液相色谱法 同时测定食品中所添加的苯甲酸及其 钠盐、山梨酸及其钾盐、糖精钠和安 赛蜜。 1 试验部分 1.1 仪器与试剂
件为：甲醇 + 乙酸铵溶液 =8+92。
次， 结 果 表 明 样 品 的 平 均 回 收 率 在
2.2 标准曲线的建立与分析
78.3% ～ 117.4%， 相 对 标 准 偏 差
准确称取标准品（精确到 0.000 1 g）， （RSD）在 1.6% ～ 4.1%。
0.60
自动标尺色谱图
AU 安赛蜜-10.680 苯甲酸-12.412
管中，加入 25 mL 水涡旋振荡，加入 以空白样品为基质制备基质空白标准
2 mL 10.6% 的 亚 铁 氰 化 钾 溶 液 涡 旋 溶液，用空白标准基质配制成梯度为 1、
20 s 混匀，再加入 2 mL 22% 的乙酸 5、10、25、50、100 mg/L 与 200 mg/L
锌溶液涡旋 1 min 后定容至刻度线， 的 混 合 系 列 标 准 工 作 液 , 使 用 前 配
0 -1×106
校正曲线图
0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 0.12 0.14 0.16 0.18 0.20 含量
高效液相色谱法测定食品中的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精钠
高效液相色谱法测定食品中的安赛蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精钠作者：冯民贤来源：《现代食品》 2018年第2期摘要：建立了同时检测食品中4 种添加剂的高效液相色谱法。
选用岛津C18 色谱柱，以甲醇和0.2 mol/L乙酸铵为流动相，体积比为8 ∶ 92，检测波长230 nm，流速为1.0 mL/min，进样量10 μL，通过二极管阵列检测器进行检测。
该方法在0.01 ～ 0.10 mg/mL 线性良好，相关系数r ≥ 0.999，检出限（S/N=3）分别为0.004、0.001 8、0.001 2、0.003 g/kg，相对标准偏差（n=6）为1.13% ～ 2.13%，回收率为86.7% ～ 100.0%。
该方法精密度和准确度较好，样品处理简单，适用于食品中多种添加剂的测定。
关键词：高效液相法；食品；安赛蜜；苯甲酸；山梨酸；糖精钠Abstract：A high performance liquid chromatography (HPLC) method for the simultaneous detection of4 additives in food in this paper. Selection of SHIMADZUC18 column, with methanol and 0.2 mol/L ammoniumacetate as mobile phase, the volume ratio is 8 ∶ 92, detection wavelength 230 nm, the flow rate is 1.0 mL/min,sample size 10 μL, detection by diode array detector. This method is well linear in the range of 0.01 ～ 0.10 mg/mLcon centration, the correlation coefficient of r ≥ 0.999, the detection limits (S/N=3) were 0.004, 0.001 8, 0.001 2,0.003 g/kg, respectively, The relative standard deviation (n=6) is 1.13% ～2.13%, the recovery rate is86.7% ～ 100.0%. The precision and accuracy of this method are better, the sample treatment is simple andsuitable for the determination of a variety of additives in food.Key words：High performance liquid phase method; Food; Acesulfame; Benzoic Acid; Sorbic acid;Saccharin sodium中图分类号：TS262.3食品是人类赖以生存和发展的物质基础，食品安全则是影响人体健康和国计民生的重大问题。
高效液相色谱法测定食品中山梨酸_苯甲酸_糖精钠样品前处理方法(精)
【实验室检测】高效液相色谱法测定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精钠样品前处理方法张宗辉[摘要 ]目的探讨高效液相色谱法测定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精钠的样品前处理方法。
方法不同样品用不同前处理方法 , 用二极管阵列管检测品 (HPLC －DAD 分析测定 , 外标法定量。
结果该前处理方法线性关系良好 , 相对标准偏差分别为山梨酸 3. 18%、苯甲酸 2. 74%、糖精钠 2. 15%, 加标回收率均在 90% 100%之间。
结论该方法稳定性好、准确可靠、简单快速 , 适用于食品添加剂的测定。
[关键词 ]高效液相色谱法 ; 食品 ; 山梨酸 ; 苯甲酸 ; 糖精钠 [中图分类号 ]O657. 7[文献标识码 ]A[文章编号 ]1006－4028(2011 06－0480－03作者单位 :南充市疾病预防控制中心 (四川南充 637000作者简介 :张宗辉 , 男 , 副主任技师 , 医学检验Pretreatment Methods for Simultaneous Determination of Sorbic Acid , Benzoic Acid and Saccharin Sodium in Different Foods by HighPerformance Liquid ChromatographyZHANG Zong －huiNanchong Municipal Center for Disease Control and Prevention ,Nanchong 637000, Sichuan Province , China．Abstract Objective To establish pre －treatment methods for the simultaneous determination of sorbic acid , benzoic acid and saccharin sodium in different foods by high performance liquid chromatography (HPLC with DAD detection．Methods Different samples were pre －treated with different methods and detected by HPLC with the external standard quantification．Results There was a good linear relationship , the relative standard de-viations were 3. 18%for sorbic acid , 2. 74%for benzoic acid and 2. 15%for saccharin sodium．The recoveries ranged from 90%to 100%for the targeted components．Conclusion The method is simple , rapid , reliable and accurate , which is suitable for the determination of food additives．Key wordshigh performance liquid chromatography ; food ; sorbic acid ; benzoic acid ; saccharin sodium高效液相色谱法可以同时测定山梨酸、苯甲酸、糖精钠 , 方便简单快捷。
食品安全国家标准食品中苯甲酸山梨酸和糖精钠的测定编制说明
《食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》（征求意见稿）编制说明一、标准起草的基本情况（包括简要的起草过程、主要起草单位、起草人等）一）简要起草过程1. 标准任务下达后，天津科技大学针对制定“食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定”国家标准的具体工作进行了认真研究，确定了总体工作方案，并于2014年6月，成立了标准起草工作小组。
2. 起草工作组收集和查阅了相关标准及编制说明，在参考和借鉴国内、国际苯甲酸、山梨酸和糖精钠的检测标准的基础上，结合标准的清理结论，编制了《食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》标准初稿。
并由起草人撰写标准文本和编制说明。
3.从2014.9起，标准起草工作组在北京多次召开会议征求专家意见，认真学习研究了反馈的意见和建议，对标准文本及编制说明进行了修改和完善，形成了标准征求意见稿。
于2014年10月，上报食品安全国家标准审评委员会秘书处。
4. 该标准“公示征求意见稿”在卫生部网上向各相关部门及社会公开征求意见后，起草单位将根据反馈的意见对标准文本及编制说明进行进一步的修改和完善，形成标准“送审稿”。
二）主要起草单位、起草人标准负责起草单位：天津科技大学；标准参加起草单位：江西出入境检验检疫局；主要起草人：天津科技大学张颖；其他起草人：天津科技大学张健，江西出入境检验检疫局郭平。
起草人负责标准技术资料查询、收集、整理、标准文本及编制说明的编辑、撰写，行业内征求意见，组织专家对标准预审，标准送审等。
二、标准的重要内容及主要修改情况1.检测食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠现行的标准方法有GB/T 5009.29-2003、GB/T 5009.28-2003、GB/T 23495-2009、GB 21703-2010、SB/T 10389-2004、SN/T 2012-2007，这六项标准在试样处理和检测技术方面条件相似，因此，可以整合形成一项标准，同时，充分考虑GB 2760-2011规定的使用范围及限量，整合后的标准可以替代上述六项标准方法。
SOP-苯山糖-内容
食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的测定1目的为规范食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的测定及测量结果的准确度，特制定本作业指导书。
2适用范围本法适用于食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的测定3 岗位要求和职责检验员经培训后持证上岗，能熟练操作该仪器。
4 依据文件GB/T 5009.28-2016 第一法液相色谱法5 方法概述称取2g样品于50mL具塞比色管中，加25mL水混匀后，50℃水浴超声20min，冷却至室温后加蛋白沉淀剂混匀，4000r/min离心10min，取上清液过水系0.45μm滤膜，上机。
通过具有紫外检测器的高效液相色谱仪进行测定。
以保留时间定性，外标法定量。
注：碳酸饮料、果酒、果汁、蒸馏酒等不加蛋白沉淀剂。
6 检测程序6.1方法原理样品经水提取，高蛋白样品经沉淀剂沉淀蛋白后，采用液相色谱分离，紫外检测器检测，外标法定量。
6.2 仪器和设备、试剂和材料、试样制备与保存6.2.1 仪器：高效液相色谱仪带可调波长紫外检测器。
（校准周期2年，校准周期内做期间核查）色谱柱：C18 250mm×4.6mm 粒径5μm离心机：转速＞8000r/min恒温水浴锅：水温≤100℃数控超声波清洗器：温度、功率及时间可调6.2.2所需化学试剂甲醇：HPLC级乙酸铵：分析纯乙酸锌：分析纯亚铁氰化钾：分析纯苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准物质：市售有证标准溶液，避光4℃储存6.2.3玻璃器皿：250mL分液漏斗、旋转蒸发瓶及一般常用仪器清洗：首先用自来水冲洗玻璃器皿残留的溶剂。
然后用低泡洗涤剂洗刷玻璃器皿，用自来水冲洗三遍。
最后用纯水冲洗三遍、超纯水冲洗三遍。
（冲洗规则遵循少量多次）6.2.4环境条件：实验前对实验室通风6.2.5试样制备：液体：取多个预包装饮料直接混匀，试样于4℃保存。
非均匀的液态，半固态：组织均浆机均浆，-18℃保存。
固态：研磨机充分粉碎并搅拌均匀，-18℃保存。
6.2.6仪器所配备计算机需满足仪器对软件/硬件的要求6.2.7结果计算6.2.7.1按以下公式计算试样中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的含量X=ρ×V m×1000式中：X——试样中待测组分含量(g/kg)ρ——试样中待测组分的质量浓度 (mg/L)V——试样定容体积(mL)m——试样质量(g)1000——换算因子6.2.7.2检测过程中及时填写使用记录及维护保养记录。
高效液相色谱同时测定食品中苯甲酸_山梨酸和糖精钠方法的探讨
[作者简介] 吴燕(1976-),女,大学本科,主管技师,主要从事食品理化检验研究。
【化学测定方法】高效液相色谱同时测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠方法的探讨吴 燕(上海市疾病预防控制中心,上海 200336)[摘要] 目的:探讨高效液相色谱同时测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的方法。
方法:样品经去蛋白、调节酸碱度、超声提取、过滤等处理,采用HP LC测定。
结果:方法的检出限均为110mg/kg;相对标准偏差为0184%～1120%;平均回收率为9211%～9719%。
结论:方法准确可靠、简便快速、易于掌握、便于推广。
[关键词] 高效液相色谱;食品;苯甲酸;山梨酸;糖精钠[中图分类号] O65717+2 [文献标识码] A [文章编号] 1004-8685(2007)03-0465-03S i m ult aneous determ i n a ti on of benzo i c ac i d,sorb i c ac i d and s acchar i n sod i u m s a lt i n foodsW u Yan(ShanghaiMunici pal Center f or D isease Contr ol and Preventi on,Shanghai200336,China)[Abstract] O bjecti ve:To discuss a method of detecti on for benzoic acid,s orbic acid and saccharin s odiu m salt in f oods by HP LC1M ethods:food sa mp les were dep r oteinized,adjusted pH,ultras onic extracted,filtered and analyzed by HP LC1Results: The detecti on li m its were110mg/kg1The relative standard deviati on range of sa mp les added standard substance was0184%～1120%1The average recovery rate was9211%～9719%1Conclusi on:The method is si m p le,rap id,reliable and accurate1So that, it is suitable for wide-range app licati on1[Key words] H igh perf or mance liquid chr o mat ography;Food;Benzoic acid;Sorbic acid;Saccharin s odiu m salt 目前,我国批准使用的食品添加剂中,苯甲酸和山梨酸作为防腐剂,糖精钠作为甜味剂被广泛使用于食品中。
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食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定1 范围本标准规定了食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量的测定方法。
本标准第一法适用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定；第二法适用于酱油、水果汁、果酱中苯甲酸、山梨酸的测定。
第一法液相色谱法2原理样品经处理后，用液相色谱分离，紫外检测器检测，外标法定量。
3试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1氨水（NH3•H2O）。
3.1.2氢氧化钠（NaOH）。
3.1.3硫酸（H2SO4）。
3.1.4亚铁氰化钾（K4Fe(CN)6•3H2O）。
3.1.5乙酸锌（Zn(CH3COO)2•2H2O）。
3.1.6氯化钠（NaCl）。
3.1.7酒石酸（C4H6O6）。
3.1.8硅酮树脂。
3.1.9磷酸二氢钠（NaH2PO4•12H2O）。
3.1.10磷酸二氢钾（KH2PO4）。
3.1.11中性氧化铝。
3.1.12甲醇（CH3OH）：色谱纯。
3.1.13乙酸铵（CH3COONH4）。
3.2 试剂配制3.2.1 氨水（1+1）：氨水与水等体积混合，经微孔滤膜过滤后备用。
3.2.2 氢氧化钠溶液（4 g/L）：称取4 g氢氧化钠，溶于水并稀释至1000 mL。
3.2.3硫酸溶液（0.5 mol/L）：移取30 mL浓硫酸（约70%）边搅拌边慢慢加入至500 mL水中，冷却至室温后，转移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。
3.2.4亚铁氰化钾溶液（92 g/L）：称取106 g亚铁氰化钾加水至1000 mL。
3.2.5 乙酸锌溶液（183 g/L）：称取220 g乙酸锌溶于少量水中，加入30 mL冰乙酸，加水稀释至1000 mL。
3.2.6 酒石酸溶液（15%）：称取15 g酒石酸，用水定容100 mL。
3.2.7的磷酸盐缓冲液（pH 7.2）：分别称取16.72 g磷酸二氢钠和2.72 g磷酸二氢钾，用水溶解后定容至1000 mL，经微孔滤膜过滤后备用。
3.2.8中性氧化铝：层析用，100目~200目。
105℃干燥2 h，于干燥器中冷却至室温，每100 g中加入2 mL水降活，混匀后密封，放置12 h后使用；或按照使用量的不同，选择合适的活化温度及时间。
3.2.9乙酸铵溶液（1.54 g/L）：称取1.54 g乙酸铵，加水溶解并稀释至1000 mL，经微孔滤膜过滤后备用。
3.3 标准品3.3.1 苯甲酸钠（C6H5COONa）：CAS：532-32-1，纯度≥99%。
3.3.2 山梨酸钾（C6H7KO2）：CAS：590-00-1，纯度≥99%。
3.3.3 糖精钠（C6H4CONNaSO2）：CAS：128-44-9，纯度≥99%。
3.4 标准溶液配制3.4.1苯甲酸钠标准储备液：准确称取0.2360 g苯甲酸钠，加水溶解并定容至200 mL。
此溶液每毫升相当于含苯甲酸1.00 mg。
3.4.2山梨酸钾标准储备液：准确称取0.2680 g山梨酸钾，加水溶解并定容至200 mL。
此溶液每毫升相当于含山梨酸1.00 mg。
3.4.3糖精钠标准储备液：准确称取0.2340 g糖精钠（120℃烘4 h），加水溶解并定容至200 mL。
此溶液中糖精钠的含量为1.00 mg/mL。
3.4.4 混合标准系列使用液：分别准确吸取不同体积苯甲酸钠、山梨酸钾和糖精钠标准储备溶液，将其稀释成苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量分别为0.000 mg/mL、0.020 mg/mL、0.040 mg/mL、0.080 mg/mL、0.160 mg/mL、0.320 mg/mL的混合标准系列使用液。
4仪器和设备4.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器。
4.2天平：感量为0.001 g和0.0001 g。
5 分析步骤5.1 试样制备5.1.1 液体样品5.1.1.1汽水等含气类样品：称取5 g~10 g（精确至0.001g）样品于小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水（1+1）调节pH至近中性，用水定容至适当体积，经微孔滤膜过滤，滤液为试样溶液。
5.1.1.2预调酒等含醇类样品：称取10 g（精确至0.001g）样品于小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水（1+1）调节pH至近中性，用水定容至适当体积，经微孔滤膜过滤，滤液为试样溶液。
5.1.1.3 高蛋白类样品：贮藏在冰箱中的乳与乳制品，应在试验前预先取出，并达室温，称量20 g （精确至0.001g）样品于100 mL容量瓶中。
向容量瓶中加入25mL氢氧化钠溶液，混合后置于超声波水浴或70℃水浴中处理15 min。
冷却后，用硫酸溶液将pH调节到8（用pH计或pH试纸均可），然后加入2 mL亚铁氰化钾溶液和2 mL乙酸锌溶液。
剧烈振摇，静置15 min，混合后冷却到室温，再用水定容，静置15 min，上清液经微孔滤膜过滤，滤液为试样溶液。
5.1.1.4食醋样品：称取50.0 mL，加入40 g氯化钠，5 mL 15%酒石酸溶液，1滴硅酮树脂（作为消泡剂），加水至约200 mL，混匀后，进行蒸馏（蒸馏速度约为2.5 mL/min），收集约90 mL馏出液，用水定容至100 mL。
清液经微孔滤膜过滤，滤液为试样溶液。
5.1.1.5 其他液体样品：称取5 g~10 g （精确至0.001g ）样品，用氨水（1+1）调节pH 至近中性，用水定容至适当体积，经微孔滤膜过滤，滤液为试样溶液。
5.1.2 半固体、固体样品5.1.2.1 高油脂类样品：称取2 g~3 g （精确至0.001g ）样品于50mL 具塞离心管中，加入10 mL 磷酸盐缓冲液（pH 7.2），用旋涡混合器充分混合，然后于4,000 r/min 离心5 min ，小心吸出水层转移到25 mL 容量瓶中，再加入10 mL 磷酸盐缓冲液（pH 7.2）于具塞离心管中，重复上述步骤，合并两次水层液，用磷酸盐缓冲液（pH 7.2）定容至刻度，混匀，用微孔滤膜过滤，滤液为试样溶液。
5.1.2.2 高蛋白类样品：称取粉碎均匀的2 g~3 g （精确至0.001g ）样品于小烧杯中，用20 mL 水分数次清洗小烧杯，将样品移入25 mL 容量瓶中，超声振荡提取5 min ，取出后加2 mL 亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入2 mL 乙酸锌溶液，摇匀，用水定容至刻度。
移入离心管中，4,000 r/min 离心5 min 。
取上清液，用微孔滤膜过滤，滤液为试样溶液。
5.1.2.3 固态乳制品：称取3 g （精确至0.001g ）样品于100 mL 容量瓶中，加10 mL 水，用玻璃棒搅拌至完全溶解。
再按“5.1.1.3高蛋白类样品”处理。
5.1.2.4 其他固体样品：称取2 g~3 g （精确至0.001g ）样品，加水适量，转移至25 mL 容量瓶中，再加水至约20 mL ，置60℃~70℃水浴中加热片刻，加塞，剧烈振摇使其分散均匀后，加氨水（1+1）调节pH 至近中性，加塞，剧烈振摇，使样品在水中分散均匀，置60℃~70℃水浴锅中加热30 min ，取出后趁热超声5 min ，冷却后用水定容至刻度，用微孔滤膜过滤，滤液为试样溶液。
5.2 色谱参考条件5.2.1 色谱柱：C 18柱，柱长250 mm ，内径4.6 mm ，粒径5 µm 或同等性能的色谱柱。
5.2.2 检测器：紫外检测器。
5.2.3 流动相：甲醇+乙酸铵溶液=5+95或相当性能的流动相。
5.2.4 流速：1 mL/min 。
5.2.5 检测波长：230 nm 。
5.2.6 进样量：10 µL 。
5.3 标准曲线的制作将混合标准系列使用液分别注入液相色谱仪中，以浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
5.4 试样溶液的测定将试样溶液注入液相色谱仪中，得到峰面积，根据标准曲线得到待测液中苯甲酸钠、山梨酸钾和糖精钠的浓度，平行测定次数不少于两次。
6 结果计算试样中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的含量A 1按公式（1）计算： 100010001111⨯⨯⨯=m V c A ……………………………………（1） 式中：A 1 ——样品中待测组分含量，单位为克每千克（g/kg ）；c 1 ——由标准曲线得出的样液中待测物的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL ）；V 1——样品定容体积，单位为毫升（mL ）；m 1——样品质量，单位为克（g ）。
试验结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。
7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15 %。
8 其他取样量为2.5 g时，样品检出限：苯甲酸、山梨酸、糖精钠的检出限分别为2 mg/kg、2 mg/kg、3 mg/kg；样品定量限：苯甲酸、山梨酸、糖精钠的检出限分别为6 mg/kg、6 mg/kg、9 mg/kg。
第二法气相色谱法8 原理试样酸化后，用乙醚提取出苯甲酸、山梨酸，用附氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，与标准系列比较，外标法定量。
9 试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
9.1 试剂9.1.1乙醚（C2H5OC2H5）：不含过氧化物。
9.1.2石油醚：沸程30℃~60℃。
9.1.3盐酸（HCl）。
9.1.4氯化钠（NaCl）。
9.1.5无水硫酸钠（Na2SO4）。
9.2 试剂配制9.2.1 盐酸溶液（1+1）：取100 mL盐酸，边搅拌边慢慢加入至50 mL水中，冷却至室温后，加水稀释至200mL。
9.2.2氯化钠酸性溶液（40 g/L）：于氯化钠溶液（40 g/L）中加少量盐酸（1+1）酸化。
9.2.3石油醚-乙醚（3+1）混合溶剂：取150 mL石油醚和50 mL乙醚，混合。
9.3 标准品9.3.1 苯甲酸（C6H5COOH）：CAS：65-85-0，纯度≥99%。
9.3.2 山梨酸（C6H8O2）：CAS：110-44-1，纯度≥99%。
9.4 标准溶液配制9.4.1 苯甲酸、山梨酸标准储备液准确称取苯甲酸、山梨酸各0.2 g（精确至0.0001g），置于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解后并稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于2.0 mg苯甲酸或山梨酸。
9.4.2 苯甲酸、山梨酸标准系列工作液吸取适量的苯甲酸、山梨酸标准储备液，以石油醚-乙醚（3+1）混合溶剂稀释至每毫升相当于50 µg、100 µg、150 µg、200 µg、250 µg苯甲酸或山梨酸。
10 仪器和设备。