小鼠尿肌酐Cr酶联免疫分析ELISA试剂盒使用说明书

合集下载

小鼠血肌酐(S-Cr)ELISA检测试剂盒使用说明书

小鼠血肌酐(S-Cr)ELISA检测试剂盒使用说明书

小鼠血肌酐(S—Cr)ELISA检测试剂盒使用说明书小鼠血肌酐(SCr)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采纳双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

往预先包被血肌酐(SCr)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻di洗涤。

用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最后的黄色。

颜色的深浅和样品中的血肌酐(SCr)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避开任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。

2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存:假如样本收集后不适时检测,请按一次用量分装,冻存于20℃,避开反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃,使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。

试验中不用的板条应立刻放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对比或者空白;依照说明书操作时样本已经稀释5倍,最结束果乘以5才是样本实际浓度。

严格依照说明书中标明的时间、加液量及次序进行温育操作。

全部液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒构成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无停止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0S5)浓度依次为:0、7.5、15、30、60、120μmol/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

小鼠抗利尿激素(ADH) ELISA 试剂盒使用说明书

小鼠抗利尿激素(ADH) ELISA 试剂盒使用说明书

小鼠抗利尿激素(ADH) ELISA试剂盒使用说明书产品编号:E1139m盒的检测范围。

1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。

空白孔加样品稀释液100ul,余孔分别加标准品或待测样品100ul,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。

为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体,甩干,不用洗涤。

每孔加检测溶液A工作液100ul(取1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。

3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干。

4.每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液)100ul,37℃,60分钟。

5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干。

6.依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色(30分钟以内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.依序每孔加终止溶液50ul,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。

为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

在加终止液后15分钟以内进行检测。

注:1.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。

测量时先用此孔调OD值至零。

2.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。

3. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。

标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用。

请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。

4. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。

小鼠elisa检测试剂盒说明书

小鼠elisa检测试剂盒说明书

小鼠elisa检测试剂盒说明书
小鼠elisa检测试剂盒使用说明书
 小鼠elisa检测试剂盒价格
 本试剂盒仅供研究使用。

 检测范围:
 2.5ng/L80ng/L
 96T
 本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白介素1β (IL1β)含量。

 实验原理
 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白介素1β (IL1β)水平。

用纯化的小鼠白介
 素1β (IL1β)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白介素1β
 (IL1β),再与HRP 标记的白介素1β (IL1β)抗体结合,形成抗体抗原酶标抗体复合物,经
 过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转
 化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的白介素1β (IL1β)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波
 长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠白介素1β (IL1β)浓度。

 试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液。

elisa试剂盒实验说明书

elisa试剂盒实验说明书

PRRSV N蛋白抗体检测间接ELISA方法的建立1 材料:1.1 蛋白、血清、酶标二抗原核表达PRRSV N蛋白;标准阳性血清和阴性血清,待检血清;自制HRP标记兔抗猪IgG;1.2 主要试剂和溶液包被液(50 mmol/L pH9.6的碳酸盐缓冲液)Na2CO3 1.59 gNaHCO3 2.93 g准确称取后,溶于950 mL的蒸馏水中,调pH值为9.6,定容到1 L;PBS-T洗涤液1000 mL 10 mmol/L pH7.4的PBS中加入0.5 mL Tween-20;封闭液和血清稀释液含10%小牛血清的PBS-T缓冲液,10%马血清的PBS-T缓冲液,含5%BSA的PBS-T缓冲液,含10%BSA的PBS-T缓冲液,含5%脱脂奶的PBS-T缓冲液;底物溶液100 mmol/L的柠檬酸溶液(21 g柠檬酸C6H6O7•H2O溶于去离子水,定容至1 L)24.3 mL,200 mmol/L Na2HPO4•12H2O(71.6 g Na2HPO4•12H2O溶于去离子水,定容至1 L)25.7 mL混匀,加入50 mg的四甲基联苯胺(TMB),临用前加入50 μL的30% H2O2;终止液(2 mol/L H2SO4)每200 mL终止液,由蒸馏水177.8 mL和浓硫酸22.2 mL 混和而成。

1.3 主要仪器设备电热恒温培养箱;4℃冰箱;酶标仪。

2 步骤:2.1抗原包被浓度和二抗稀释度的确定将原核表达的N蛋白分别作2.0 μg/mL,1.0 μg/mL,0.5 μg/mL,0.25 μg/mL,0.1μg/mL,0.05 μg/mL连续稀释6个稀释度,每个稀释度重复两孔,100 μL/孔,4℃包被酶标反应板过夜。

将自制HRP标记的兔抗猪二抗分别做1:50、1:100、1:200和1:400一系列倍比稀释,南京金益柏生物技术有限公司Tel:025-********Fax*************每个稀释度重复两孔,100 μL/孔,组成方阵确定重组蛋白的最佳包被浓度和二抗稀释度。

小鼠NLRP3ELISA试剂盒操作说明书

小鼠NLRP3ELISA试剂盒操作说明书

小鼠NLRP3ELISA试剂盒操作说明书我司ELISA试剂盒现货供应,质量保证,价格优惠,试剂盒首选森贝伽。

本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中小鼠NLRP3含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠NLRP3水平。

用纯化的小鼠NLRP3抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入小鼠NLRP3,再与HRP标记的NLRP3抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的NLRP3呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠NLRP3浓度。

试剂盒组成:样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5.组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

小鼠抗核抗体(ANA)ELISA试剂盒操作说明

小鼠抗核抗体(ANA)ELISA试剂盒操作说明

小鼠抗核抗体(ANA)ELISA试剂盒操作说明小鼠抗核抗体(ANA)ELISA试剂盒操作说明小鼠抗核抗体(ANA)ELISA试剂盒实验原理小鼠抗核抗体(ANA)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

往预先包被小鼠抗核抗体(ANA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻di洗涤。

用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的小鼠抗核抗体(ANA)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

样本处理及要求1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。

将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。

推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。

为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。

最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

需要而未提供的试剂盒器材1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱4.蒸馏水或去离子水1、标准品浓度依次为:详见说明书;2、经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。

大鼠肌酐酸酶联免疫分析

大鼠肌酐酸酶联免疫分析

大鼠肌酐酸酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T30pg/ml-800pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中肌酐酸含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠肌酐酸水平。

用纯化的大鼠肌酐酸抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肌酐酸,再与HRP标记的肌酐酸抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的肌酐酸呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠肌酐酸浓度。

试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

小鼠C-jun酶联免疫分析ELISA试剂盒注意事项

小鼠C-jun酶联免疫分析ELISA试剂盒注意事项

小鼠C-jun酶联免疫分析ELISA试剂盒注意事项1.人C-jun试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

小鼠C-jun酶联免疫分析ELISA试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠C-jun水平。

用纯化的小鼠C-jun抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入C-jun,再与HRP标记的C-jun抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的C-jun呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠C-jun浓度。

4-溴-2,6-二氟苯酚CAS号:104197-13-9 进口、组装1-溴-2-甲基丁烷CAS号:10422-35-2 进口、组装苯基琥珀酸CAS号:10424-29-0 进口、组装4-十二烷基苯胺C AS号:104-42-7 进口、组装4-氯甲基吡啶CAS号:10445-91-7 进口、组装肉桂醛CAS号:104-55-2 进口、组装N-苄基乙醇胺CAS号:104-63-2 进口、组装2-氧代环戊烷羧酸甲酯CAS号:10472-24-9 进口、组装3-二乙胺基丙胺C AS号:104-78-9 进口、组装2-氟-5-羟基苯甲腈CAS号:104798-53-0 进口、组装4-甲基氯苄CAS号:104-82-5 进口、组装2-氨基-3-碘吡啶CAS号:104830-06-0 进口、组装对甲苯甲醚CAS号:104-93-8 进口、组装3-环戊基丙酰氯C AS号:104-97-2 进口、组装5,6,7,8-四氢喹啉CAS号:10500-57-9 进口、组装2-溴-5-甲氧基吡啶CAS号:105170-27-2 进口、组装四丁基醋酸铵CAS号:10534-59-5 进口、组装2-甲氧基-4-吡啶甲酸CAS号:105596-63-2 进口、组装小鼠C-jun酶联免疫分析ELISA试剂盒。

小鼠总蛋白(TP)ELISA试剂盒说明书

小鼠总蛋白(TP)ELISA试剂盒说明书

小鼠总蛋白(TP)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中总蛋白(TP)含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠总蛋白(TP)水平。

用纯化的小鼠总蛋白(TP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入小鼠总蛋白(TP),再与HRP标记的总蛋白(TP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的总蛋白(TP)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠总蛋白(TP)浓度。

样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5.组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。

小鼠肌酐酶联免疫分析解读

小鼠肌酐酶联免疫分析解读

小鼠肌酐酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号:CSB-E12745m检测范围:3.12 μmol/L - 200 μmol/L最低检测限:0.78 μmol/L特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠肌酐,且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中肌酐含量。

说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。

2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。

4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗肌酐抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗肌酐抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的肌酐呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。

2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。

3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

小鼠牛血清白蛋白(BSA)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书

小鼠牛血清白蛋白(BSA)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书

小鼠牛血清白蛋白(BSA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆、组织等样本中牛血清白蛋白(BSA)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠牛血清白蛋白(BSA)水平。

用纯化的小鼠牛血清白蛋白(BSA)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入小鼠牛血清白蛋白(BSA),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的小鼠牛血清白蛋白(BSA)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠牛血清白蛋白(BSA)含量。

试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

酶联免疫吸附法检测试剂盒(Mouse CD30 TNFRSF8 ELISA Kit)说明书

酶联免疫吸附法检测试剂盒(Mouse CD30 TNFRSF8 ELISA Kit)说明书

Catalog Number EK2311-48EK2311-96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的小鼠CD30浓度。

本产品仅用于科学研究,非诊断试剂,不能用于临床诊断。

一、产品介绍1.背景介绍CD30,也被称为肿瘤坏死因子受体超家族成员8,是由基因Tnfrsf8编码的细胞膜受体。

CD30最初通过单克隆抗体Ki-1被鉴定,是存在于霍奇金氏和里德-斯泰伯格氏细胞表面的抗原。

CD30被激活后,还可以在非霍奇金淋巴瘤细胞、病毒感染的T 细胞和B 细胞以及正常T 细胞和B 细胞上表达。

在T 细胞中,CD30主要表达于分泌Th2类细胞因子的T 细胞和共表达CD45RO 与IL-4受体的CD4+/CD8+胸腺细胞。

CD30与其配体结合可介导多种生理功能,包括细胞增殖、活化、分化和凋亡引起的细胞死亡。

CD30可以在胸腺阴性选择中充当共刺激分子,并且在霍奇金病和其他CD30+淋巴瘤的病理中发挥关键作用。

2.检测原理本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。

特异性抗小鼠CD30抗体预包被在高亲和力的酶标板上。

酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的CD30与固相抗体和检测抗体结合。

洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。

洗涤后,加入显色底物TMB ,避光显色。

颜色反应的深浅与样本中CD30的浓度成正比。

加入终止液终止反应,在450nm 波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。

3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。

2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。

3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变,都将影响结合反应。

4)本试剂盒在设计上去除或降低了生物学样本中的一些内源性干扰因素,并非所有可能的影响因素都已经去除。

Mouse CD30/TNFRSF8ELISA Kit 检测试剂盒(酶联免疫吸附法)EK2311-01二、基本信息1.试剂盒提供的材料2.未提供的材料设备1)能够检测450nm吸光度的酶标仪,参考波长570nm或630nm2)移液器及枪头、加样槽3)准备试剂用的试管、离心管、量筒等4)蒸馏水或去离子水5)涡旋振荡器、微孔板振荡器3.贮存试剂盒保存于2-8℃,有效期标注于标签上。

小鼠C反应蛋白 (CRP)-ELISA试剂盒说明书

小鼠C反应蛋白 (CRP)-ELISA试剂盒说明书

小鼠C反应蛋白 (CRP)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号:E-EL-M0053(本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!)声明:尊敬的客户,感谢您选用本公司的产品。

本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业ELISA kit生产技术制造。

适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组CRP浓度。

使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分!如有疑问,请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。

*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。

用抗小鼠CRP抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的CRP会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。

依次加入生物素化的抗小鼠CRP抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。

抗小鼠CRP抗体与结合在包被抗体上的小鼠CRP结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。

加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。

用酶标仪在450nm波长处测OD值,CRP浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中CRP的浓度。

标本收集:1.血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。

2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA.Na2,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。

避免使用溶血,高血脂标本。

3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。

将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。

推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。

小鼠 B 因子(BF)酶联免疫分析试剂盒 说明书

小鼠 B 因子(BF)酶联免疫分析试剂盒 说明书

小鼠B因子(BF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠BF,且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中BF含量。

说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。

2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。

4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗BF抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗BF抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的BF呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。

2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。

3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent)1×10ml/瓶。

6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)。

7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)。

8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

生物sharp mouse IgE ELISA试剂盒使用说明书

生物sharp mouse IgE ELISA试剂盒使用说明书

一、产品简介 ������������������� ���������二、检测原理 ������������������� ���������三、试剂盒组分 ������������������� ���������四、储存条件 ������������������ ����������五、注意事项 ������������������ ����������六、其它实验材料 ������������������� ��������七、使用说明 �������������������� �������1、样品收集、处理及保存方法 �������������������� ��2、试剂准备 �������������������� �������3、操作步骤 �������������������� �������4、操作流程图 �������������������� �������5、操作要点提示 �������������������� �������6、结果判断 �������������������� �������八、常见问题分析及解决 ���������� ������������� 2 2 3 3 3 4 4 4 4 5 6 6 6 8目 录全国统一热线:400-600-4213 ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒用于定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本中天然和重组IgE浓度。

使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分,如有任何疑问请与合肥兰杰柯科技有限公司联系,公司将为您提供强有力的技术支持。

仅供研究,不用于临床诊断。

二、检测原理本实验采用双抗体夹心ELISA。

用抗小鼠IgE单克隆抗体预包被酶标板,加入适度稀释的样本和标准品,其中的IgE会与其单抗结合,洗去游离成分;加入生物素化的抗小鼠IgE抗体,抗小鼠IgE抗体与结合在单抗上的小鼠IgE结合而形成免疫复合物,洗去游离的成分;加入辣根过氧化物酶标记的亲合素,生物素与亲合素特异性结合,洗去未结合的酶结合物;加入显色剂,若反应孔中有IgE,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色;加终止液变黄。

小鼠活性氧ROS酶联免疫分析ELISA

小鼠活性氧ROS酶联免疫分析ELISA

小鼠活性氧(ROS)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中活性氧(ROS)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠活性氧(ROS)水平。

用纯化的小鼠活性氧(ROS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入活性氧(ROS),再与HRP标记的活性氧(ROS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的活性氧(ROS)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠活性氧(ROS)含量。

样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

小鼠尿肌酐(Cr)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠尿及相关液体样本中尿肌酐(Cr)的含量。

实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠尿肌酐(Cr)水平。

用纯化的小鼠尿肌酐(Cr)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入尿肌酐(Cr),再与HRP标记的尿肌酐(Cr)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的尿肌酐(Cr)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠尿肌酐(Cr)浓度。

试剂盒组成:
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心
20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/
分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞
浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备
用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上
进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标
准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。

(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为48μmol/L,32μmol/L ,16μmol/L,8μmol/L,4μmol/L)。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样
品孔。

在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。

测定应在加终止
液后15分钟以内进行。

注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

计算:Array以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。

(此图仅供参考)试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。

2.批内与批见应分别小于9%和15%
检测范围:
1μmol/L -55μmol/L
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月。

相关文档
最新文档