pSos-MAFB酵母表达载体

pPIC9k-His酵母表达载体说明

其他酵母表达载体：
p416GFD p53blue pACT2-AD pAD-GAL4-2.1 pADH2 pAUR123 pBridge pCL1 pDEST32 pDisplay pDR195 pESC-His pESC-Leu pESC-TRP pESC-URA pFA6a-FGP(S65T)-kanMX6 pFLD pFLD/CAT pFLDα pGADT7-T pGAG424 pGAPZA pGAPZB pGAPZαB pGAPZαC pGBKT7 pGBKT7-53 pGBKT7-Lam pHIC-PI pHIL-D2 pHIL-S1 pHis2 pHisSi-1 pPIC9 pPIC9K pPIC9k-His pPICZA pPICZB pPICZC pPICZαA pPICZαB pPICZαC pPICZαD pPICZαFC pPICZαGB pPink-HC pPink-LC pPinkα-HC pRS316 pRS403 pRS405 pRS406 pRS414 pRS415 pRS416 pRS41H pRS426 pRS426gal pSEP1 pSEP2 pSEP3 pSos pSos-MAFB pUG66 pYC2/CT pYC2/NTA
载体名称
pPIC9k-‐His
Invitrogen pPIC9k-‐His 酵母表达载体 -‐-‐ -‐-‐ 多克隆位点，限制性内切酶 -‐-‐ -‐-‐ -‐-‐ -‐-‐ Ampicillin -‐-‐ -‐-‐ -‐-‐ -‐-‐ -‐-‐ -‐-‐
pMETA pMETB pMETC pMETαA pMETαB pMETαC pMyr pPIC3.5 pPIC3.5K pPIC6B pPIC6C pPIC6αA pPIC6αB pPIC6αC pYX212 SUMOprotease Ycp22lac-EGFP

外源基因在酵母体系中表达

C.albicans hyphal n.r cell wall Ag
Spinach
2
phosphoribulokinase
S/Mut+ Halaas, et al (1995)
Shiba, et al (1995)
S/Mut+
S/Mut+, S/MutS( 30,000 copies/c ell) S/MutS
fragment C
Pertusis
3
antigen P69
Mouse EGF 0.45
Aprotinin 0.8
Kunitz
1
protease
inhibitor (A-
beta-PP)
Human
4
serum
albumin(HS
A)
HIV-1
1.25
gp120
and
0.02
I/Mut+ and Muts I/Muts S/Muts S/Mut+/Muts S/Mut+
第一代酵母基因工程表达系统是以酿酒酵母表达系统为典型代表。
第二代酵母基因工程表达系统的典型代表就是近年来倍受关注的毕赤酵母表达系统等为代表的甲醇酵母表达系统：
1987年Cregg等首次报道甲醇营养型毕赤酵母(Methy1otrophic Pichia pastoris)表达外源蛋白以来，由于它具有表达效率高，遗传稳定，产物可分泌表达等优点，己成为近年来极受青睐的真核基因表达系统。
S:284
ds Fv (di-sulfide-bonded n.r S/n.r Luo, et al (1995), J.
single chain antibodies) n.r

毕赤酵母常用表达载体

毕赤酵母常用培养基与载体一、毕赤酵母表达常用载体：典型的巴斯德毕赤酵母表达载体载体包含醇氧化酶－1（AOX1）基因的启动子和转录终止子（5'AOX1和3'AOX1），它们被多克隆位点（MCS）分开，外源基因可以在此插入。

此载体还包含组氨醇脱氢酶基因（HIS4）选择标记及3'AOX1区。

当整合型载体转化受体时，它的5'AOX1和3'AOX1能与染色体上的同源基因重组，从而使整个载体连同外源基因插入到受体染色体上，外源基因在5'AOX1启动子控制下表达。

毕赤酵母本身不分泌内源蛋白，而外源蛋白的分泌需要具有引导分泌的信号序列。

而由89个氨基酸组成的酿酒酵母的分泌信号—α交配因子(α-factor)引导序列已经成功地引导了几种外源蛋白的分泌。

分泌表达载体主要有：pPIC9，pPIC9K，pHIL-S1，pPICZα A，pYAM75P等。

胞内表达载体主要有：pHIL-D2，pA0815，pPIC3K，pPICZ，pHWO10，pGAPZ，pGAPZa(Invitrogen)，pPIC3.5K等。

工程菌株Y11430，MG1003，GS115 （AOX1），KM71，SMD1168。

毕赤酵母宿主菌常用的有GS115和KM71两种，都具有HIS4营养缺陷标记。

其中，GS115茵株具有AOX1基因，是Mut＋，即甲醇利用正常型；而KM71菌株的AOX1位点彼ARG4基因插入，表型为Muts，即甲醇利用缓慢型，两种菌株都适用于一般的酵母转化方法。

多拷贝表达菌株的获得方式：与自主复制的质粒型表达载体不同，整合型表达载体的拷贝数可以有很大的变化。

含多拷贝外源基因的表达菌株合成蛋白的量也较多。

体内整合可通过高遗传霉素抗性，筛选可能的多拷贝插入；而体外整合可通过连接产生外源基因的串联插入。

多拷贝表达菌株的获得方式有两种：一种是利用SDS-PAGE电泳、免疫杂交或菌落点杂交方法在大量的转化子中进行自然筛选。

pDR195酵母表达载体说明

pDR195编号载体名称北京华越洋生物VECT2970 pDR195载体基本信息出品公司: Addgene载体名称: pDR195质粒类型: 酵母菌表达载体高拷贝/低拷贝: 高拷贝启动子: PMA1克隆方法: 多克隆位点，限制性内切酶载体大小: 6318bp5' 测序引物及序列: -‐-‐3' 测序引物及序列: -‐-‐载体标签: -‐-‐载体抗性: Ampicillin筛选标记: URA3备注: -‐-‐产品目录号: 36028稳定性: -‐-‐组成型: -‐-‐病毒/非病毒: 非病毒载体质粒图谱和多克隆位点信息载体序列ORIGIN1 cccagcctcg agcggccgcg cggatccagc tttggacttc ttcgccagag gtttggtcaa 61 gtctccaatc aaggttgtcg gcttgtctac cttgccagaa atttacgaaa agatggaaaa 121 gggtcaaatc gttggtagat acgttgttga cacttctaaa taagcgaatt tcttatgatt 181 tatgattttt attattaaat aagttataaa aaaaataagt gtatacaaat tttaaagtga 241 ctcttaggtt ttaaaacgar aattcttatt cttgagtaac tctttcctgt aggtcaggtt 301 gctttctcag gtatagcatg aggtcgctct tattgaccac acctctaccg gcatgccaat 361 tcactggccg tcgttttaca acgtcgtgac tgggaaaacc ctggcgttac ccaacttaat 421 cgccttgcag cacatccccc tttcgccagc tggcgtaata gcgaagaggc ccgcaccgat 481 cgcccttccc aacagttgcg cagcctgaat ggcgaatggc gcctgatgcg gtattttctc 541 cttacgcatc tgtgcggtat ttcacaccgc ataatcggat cgtacttgtt acccatcatt 601 gaattttgaa catccgaacc tgggagtttt ccctgaaaca gatagtatat ttgaacctgt 661 ataataatat atagtctagc gctttacgga agacaatgta tgtatttcgg ttcctggaga 721 aactattgca tctattgcat aggtaatctt gcacgtcgca tccccggttc attttctgcg 781 tttccatctt gcacttcaat agcatatctt tgttaacgaa gcatctgtgc ttcattttgt 841 agaacaaaaa tgcaacgcga gagcgctaat ttttcaaaca aagaatctga gctgcatttt 901 tacagaacag aaatgcaacg cgaaagcgct attttaccaa cgaagaatct gtgcttcatt 961 tttgtaaaac aaaaatgcaa cgcgagagcg ctaatttttc aaacaaagaa tctgagctgc 1021 atttttacag aacagaaatg caacgcgaga gcgctatttt accaacaaag aatctatact 1081 tcttttttgt tctacaaaaa tgcatcccga gagcgctatt tttctaacaa agcatcttag 1141 attacttttt ttctcctttg tgcgctctat aatgcagtct cttgataact ttttgcactg 1201 taggtccgtt aaggttagaa gaaggctact ttggtgtcta ttttctcttc cataaaaaaa 1261 gcctgactcc acttcccgcg tttactgatt actagcgaag ctgcgggtgc attttttcaa 1321 gataaaggca tccccgatta tattctatac cgatgtggat tgcgcatact ttgtgaacag 1381 aaagtgatag cgttgatgat tcttcattgg tcagaaaatt atgaacggtt tcttctattt 1441 tgtctctata tactacgtat aggaaatgtt tacattttcg tattgttttc gattcactct 1501 atgaatagtt cttactacaa tttttttgtc taaagagtaa tactagagat aaacataaaa 1561 aatgtagagg tcgagtttag atgcaagttc aaggagcgaa aggtggatgg gtaggttata 1621 tagggatata gcacagagat atatagcaaa gagatacttt tgagcaatgt ttgtggaagc 1681 ggtattcgca atattttagt agctcgttac agtccggtgc gtttttggtt ttttgaaagt 1741 gcgtcttcag agcgcttttg gttttcaaaa gcgctctgaa gttcctatac tttctagcta 1801 gagaatagga acttcggaat aggaacttca aagcgtttcc gaaaacgagc gcttccgaaa 1861 atgcaacgcg agctgcgcac atacagctca ctgttcacgt cgcacctata tctgcgtgtt1921 gcctgtatat atatatacat gagaagaacg gcatagtgcg tgtttatgct taaatgcgta 1981 cttatatgcg tctatttatg taggatgaaa ggtagtctag tacctcctgt gatattatcc 2041 cattccatgc ggggtatcgt atgcttcctt cagcactacc ctttagctgt tctatatgct 2101 gccactcctc aattggatta gtctcatcct tcaatgctat catttccttt gatattggat 2161 cgatccgatg ataagctgtc aaacatgaga attgggtaat aactgatata attaaattga 2221 agctctaatt tgtgagttta gtatacatgc atttacttat aatacagttt tttagttttg 2281 ctggccgcat cttctcaaat atgcttccca gcctgctttt ctgtaacgtt caccctctac 2341 cttagcatcc cttccctttg caaatagtcc tcttccaaca ataataatgt cagatcctgt 2401 agagaccaca tcatccacgg ttctatactg ttgacccaat gcgtctccct tgtcatctaa 2461 acccacaccg ggtgtcataa tcaaccaatc gtaaccttca tctcttccac ccatgtctct 2521 ttgagcaata aagccgataa caaaatcttt gtcgctcttc gcaatgtcaa cagtaccctt 2581 agtatattct ccagtagata gggagccctt gcatgacaat tctgctaaca tcaaaaggcc 2641 tctaggttcc tttgttactt cttctgccgc ctgcttcaaa ccgctaacaa tacctgggcc 2701 caccacaccg tgtgcattcg taatgtctgc ccattctgct attctgtata cacccgcaga 2761 gtactgcaat ttgactgtat taccaatgtc agcaaatttt ctgtcttcga agagtaaaaa 2821 attgtacttg gcggataatg cctttagcgg cttaactgtg ccctccatgg aaaaatcagt 2881 caagatatcc acatgtgttt ttagtaaaca aattttggga cctaatgctt caactaactc 2941 cagtaattcc ttggtggtac gaacatccaa tgaagcacac aagtttgttt gcttttcgtg 3001 catgatatta aatagcttgg cagcaacagg actaggatga gtagcagcac gttccttata 3061 tgtagctttc gacatgattt atcttcgttt cctgcatgtt tttgttctgt gcagttgggt 3121 taagaatact gggcaatttc atgtttcttc aacactacat atgcgtatat ataccaatct 3181 aagtctgtgc tccttccttc gttcttcctt ctgttcggag attaccgaat caaaaaaatt 3241 tcaaggaaac cgaaatcaaa aaaaagaata aaaaaaaaat gatgaattga aaagctaatt 3301 cttgaagacg aaagggcctc gtgatacgcc tatttttata ggttaatgtc atgataataa 3361 tggtttctta gacgtcaggt ggcacttttc ggggaaatgt gcgcggaacc cctatttgtt 3421 tatttttcta aatacattca aatatgtatc cgctcatgag acaataaccc tgataaatgc 3481 ttcaataata ttgaaaaagg aagagtatga gtattcaaca tttccgtgtc gcccttattc 3541 ccttttttgc ggcattttgc cttcctgttt ttgctcaccc agaaacgctg gtgaaagtaa 3601 aagatgctga agatcagttg ggtgcacgag tgggttacat cgaactggat ctcaacagcg 3661 gtaagatcct tgagagtttt cgccccgaag aacgttttcc aatgatgagc acttttaaag 3721 ttctgctatg tggcgcggta ttatcccgta ttgacgccgg gcaagagcaa ctcggtcgcc 3781 gcatacacta ttctcagaat gacttggttg agtactcacc agtcacagaa aagcatctta 3841 cggatggcat gacagtaaga gaattatgca gtgctgccat aaccatgagt gataacactg 3901 cggccaactt acttctgaca acgatcggag gaccgaagga gctaaccgct tttttgcaca 3961 acatggggga tcatgtaact cgccttgatc gttgggaacc ggagctgaat gaagccatac 4021 caaacgacga gcgtgacacc acgatgcctg tagcaatggc aacaacgttg cgcaaactat 4081 taactggcga actacttact ctagcttccc ggcaacaatt aatagactgg atggaggcgg 4141 ataaagttgc aggaccactt ctgcgctcgg cccttccggc tggctggttt attgctgata 4201 aatctggagc cggtgagcgt gggtctcgcg gtatcattgc agcactgggg ccagatggta 4261 agccctcccg tatcgtagtt atctacacga cggggagtca ggcaactatg gatgaacgaa 4321 atagacagat cgctgagata ggtgcctcac tgattaagca ttggtaactg tcagaccaag 4381 tttactcata tatactttag attgatttaa aacttcattt ttaatttaaa aggatctagg 4441 tgaagatcct ttttgataat ctcatgacca aaatccctta acgtgagttt tcgttccact 4501 gagcgtcaga ccccgtagaa aagatcaaag gatcttcttg agatcctttt tttctgcgcg4561 taatctgctg cttgcaaaca aaaaaaccac cgctaccagc ggtggtttgt ttgccggatc 4621 aagagctacc aactcttttt ccgaaggtaa ctggcttcag cagagcgcag ataccaaata 4681 ctgttcttct agtgtagccg tagttaggcc accacttcaa gaactctgta gcaccgccta 4741 catacctcgc tctgctaatc ctgttaccag tggctgctgc cagtggcgat aagtcgtgtc 4801 ttaccgggtt ggactcaaga cgatagttac cggataaggc gcagcggtcg ggctgaacgg 4861 ggggttcgtg cacacagccc agcttggagc gaacgaccta caccgaactg agatacctac 4921 agcgtgagct atgagaaagc gccacgcttc ccgaagggag aaaggcggac aggtatccgg 4981 taagcggcag ggtcggaaca ggagagcgca cgagggagct tccaggggga aacgcctggt 5041 atctttatag tcctgtcggg tttcgccacc tctgacttga gcgtcgattt ttgtgatgct 5101 cgtcaggggg gcggagccta tggaaaaacg ccagcaacgc ggccttttta cggttcctgg 5161 ccttttgctg gccttttgct cacatgttct ttcctgcgtt atcccctgat tctgtggata 5221 accgtattac cgcctttgag tgagctgata ccgctcgccg cagccgaacg accgagcgca 5281 gcgagtcagt gagcgaggaa gcggaagagc gcccaatacg caaaccgcct ctccccgcgc 5341 gttggccgat tcattaatgc agctggcacg acaggtttcc cgactggaaa gcgggcagtg 5401 agcgcaacgc aattaatgtg agttagctca ctcattaggc accccaggct ttacacttta 5461 tgcttccggc tcgtatgttg tgtggaattg tgagcggata acaatttcac acaggaaaca 5521 gctatgacca tgattacgcc aagcttcctg aaacggagaa acataaacag gcattgctgg 5581 gatcacccat acatcactct gttttgcctg accttttccg gtaatttgaa aacaaacccg 5641 gtctcgaagc ggagatccgg cgataattac cgcagaaata aacccataca cgagacgtag 5701 aaccagccgc acatggccgg agaaactcct gcgagaattt cgtaaactcg cgcgcattgc 5761 atctgtattt cctaatgcgg cacttccagg cctcgatcga gaccgtttat ccattgcttt 5821 tttgttgtct ttttccctcg ttcacagaaa gtctgaagaa gctatagtag aactatgagc 5881 tttttttgtt tctgttttcc tttttttttt ttttacctct gtggaaattg ttactctcac 5941 actctttagt tcgtttgttt gttttgttta ttccaattat gaccggtgac gaaacgtggt 6001 cgatggtggg taccgcttat gctcccctcc attagtttcg attatataaa aaggccaaat 6061 attgtattat tttcaaatgt cctatcatta tcgtctaaca tctaatttct cttaaatttt 6121 ttctctttct ttcctataac accaatagtg aaaatctttt tttcttctat atctacaaaa 6181 actttttttt tctatcaacc tcgttgataa attttttctt taacaatcgt taataattaa 6241 ttaattggaa aataaccatt ttttctctct tttatacaca cattcaaaag aaagaaaaaa 6301 aatatacccc agcctcga//其他酵母表达载体：p416GFD pPIC9p53blue pPIC9KpACT2-AD pPIC9k-HispAD-GAL4-2.1 pPICZApADH2 pPICZBpAUR123 pPICZCpBridge pPICZαApCL1 pPICZαBpDEST32 pPICZαCpDisplay pPICZαDpDR195 pPICZαFCpESC-His pPICZαGB pESC-Leu pPink-HC pESC-TRP pPink-LC pESC-URA pPinkα-HC pFA6a-FGP(S65T)-kanMX6 pRS316 pFLD pRS403 pFLD/CAT pRS405 pFLDαpRS406 pGADT7-T pRS414 pGAG424 pRS415 pGAPZA pRS416 pGAPZB pRS41H pGAPZαB pRS426 pGAPZαC pRS426gal pGBKT7 pSEP1 pGBKT7-53 pSEP2 pGBKT7-Lam pSEP3pHIC-PI pSospHIL-D2 pSos-MAFB pHIL-S1 pUG66pHis2 pYC2/CT pHisSi-1 pYC2/NTA pMETA pYC2/NTB pMETB pYCP211 pMETC pYEPlac112 pMETαA pYEPlac195 pMETαB pYES2pMETαC pYES2-EGFP pMyr pYES2-kan pPIC3.5 pYES2-NTA pPIC3.5K pYES2-NTB pPIC6B pYES2-NTC pPIC6C pYES3/CT pPIC6αA pYES6/CT pPIC6αB pYES-DEST52 pPIC6αC pYIP211 pYX212 pYIP5 SUMOprotease pYRP7Ycp22lac-EGFP Ycplac33。

所有质粒载体汇总

pEZZ18 pkk232-8,pkk 233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK（+）,pBlueScript SK（-） pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒： pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒：pACYCduet1,pETduet-1,pCDFduet-1，pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣： pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞： DH5a JM101 JM103 JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21（DE3） HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21（AI） BL21（DE3）plysS TG1 TB1 DH5a（pir） Tuner（DE3） Bl21 codonplusRIPL Novablue（DE3） Rosetta Rosetta（DE3） Rosetta（DE3）plys Rosetta-gami（DE3） RosettagamiB（DE3）, Rosetta-gamiB（DE3）plysS Orgami（DE3） OrgamiB（DE3） HMS174（DE3）植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301, pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIA super1300GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2, T-DNA插入载体（随机突变体库）pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1 枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43, pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK, pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641, pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01，配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700, WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33

真核细胞表达系统

真核细胞表达系统常用的真核表达系统有酵母、杆状病毒／昆虫细胞和哺乳动物细胞表达系统。

简而言之，酵母和昆虫细胞表达系统蛋白表达水平高，生产成本低，但加工修饰体系与哺乳动物细胞不完全相同；哺乳动物细胞产生的蛋白质更接近于天然蛋白质，但其表达量低、操作烦琐。

1.酵母表达系统最早应用于蛋白表达的酵母是酿酒酵母，后来相继出现其他种类酵母，其中甲醇酵母表达系统应用最广泛。

甲醇酵母的表达载体含有大肠杆菌复制起点和筛选标志，可在大肠杆菌大量扩增。

甲醇酵母表达载体中含有与酵母染色体中同源的序列，容易整合入酵母染色体中。

大部分甲醇酵母的表达载体中都含有醇氧化酶基因-1(AOX1)，在强启动子作用下，以甲醇为唯一碳源的条件下诱导外源基因表达。

甲醇酵母表达蛋白一般需很长时问才能达到峰值水平，实验操作过程中有甲醇毒性和一定安全风险。

2.昆虫细胞表达系统杆状病毒载体广泛应用于培养的昆虫细胞中指导外源基因的表达，其中大多含有苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(AcNPV)中的多角体启动子。

杆状病毒系统蛋白表达量很高，而且大部分蛋白质能保持可溶性。

杆状病毒基因组较大(130kb)，可容纳大的外源DNA片段；杆状病毒启动子在哺乳动物细胞中没有活性，安全性较高。

目前常用的是以位点特异性转位至大肠杆菌中增殖的杆状病毒穿梭载体，能快速有效地产生重组杆状病毒。

与通过外源基因重组在昆虫细胞中产生杆状病毒重组体相比，大大简化了操作步骤，缩短了鉴定重组病毒的时间，适于表达蛋白突变体以进行结构或功能的研究。

3.哺乳动物细胞表达系统哺乳动物细胞能够指导蛋白质的正确折叠，它所表达的真核蛋白通常能被正确修饰，在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质，几乎都能在细胞内准确定位，在医学研究中得到广泛应用。

虽然哺乳动物细胞表达比大肠杆菌表达难度大，更耗时，成本更高，但是对于熟悉细胞培养的研究人员表达小到中等量的蛋白非常实用。

哺乳动物细胞表达载体包含原核序列、启动子、增强子、选择标记基因、终止子和多聚核苷酸信号等。

pGBKT7-Lam酵母表达载体

pGBKT7-Lam编号载体名称北京华越洋生物VECT2660 pGBKT7-‐Lam载体基本信息出品公司: Clontech载体名称: pGBKT7-‐Lam质粒类型: 酵母双杂交载体高拷贝/低拷贝: 高拷贝启动子: ADH1克隆方法: 多克隆位点，限制性内切酶载体大小: 7.9kb5' 测序引物及序列: T7 F orward3' 测序引物及序列: -‐-‐载体标签: c-‐Myc载体抗性: 卡纳霉素筛选标记: -‐-‐备注: -‐-‐产品目录号: -‐-‐稳定性: -‐-‐组成型: -‐-‐病毒/非病毒: -‐-‐载体质粒图谱和多克隆位点信息其他酵母表达载体：p416GFD pPIC9p53blue pPIC9K pACT2-AD pPIC9k-His pAD-GAL4-2.1 pPICZA pADH2 pPICZB pAUR123 pPICZC pBridge pPICZαA pCL1 pPICZαB pDEST32 pPICZαC pDisplay pPICZαD pDR195 pPICZαFC pESC-His pPICZαGB pESC-Leu pPink-HC pESC-TRP pPink-LC pESC-URA pPinkα-HC pFA6a-FGP(S65T)-kanMX6 pRS316 pFLD pRS403 pFLD/CAT pRS405 pFLDαpRS406 pGADT7-T pRS414 pGAG424 pRS415 pGAPZA pRS416 pGAPZB pRS41H pGAPZαB pRS426 pGAPZαC pRS426gal pGBKT7 pSEP1 pGBKT7-53 pSEP2 pGBKT7-Lam pSEP3pHIC-PI pSospHIL-D2 pSos-MAFB pHIL-S1 pUG66pHis2 pYC2/CT pHisSi-1 pYC2/NTA pMETA pYC2/NTB pMETB pYCP211 pMETC pYEPlac112 pMETαA pYEPlac195 pMETαB pYES2 pMETαC pYES2-EGFP pMyr pYES2-kan pPIC3.5 pYES2-NTA pPIC3.5K pYES2-NTBpPIC6B pYES2-NTC pPIC6C pYES3/CT pPIC6αA pYES6/CT pPIC6αB pYES-DEST52 pPIC6αC pYIP211 pYX212 pYIP5 SUMOprotease pYRP7Ycp22lac-EGFP Ycplac33。

载体图谱

一、pGADT7(Amp)酵母表达载体(AD-Amp)AD forward primer: 5'-TAATACGACTCACTATAGGGC-3'AD reverse primer: 5'-AGATGGTGCACGATGCACAG-3'F：GC AT CGA TAC ATG GC T TG T GCTACTCTGAR：GGCC GGATCC TTAAGAGAGGTAGCTGGGAGAD forward primer: 5'-TAATACGACTCACTATAGGGC-3'AD reverse primer: 5'-AGATGGTGCACGATGCACAG-3'二、pGBKT7(Kan0酵母表达载体(BD-Kan)三、BIFC(Kan)验证互做蛋白表达载体（德国）四、pGR107(Kan)表达载体（PVX-10kb）吴建国MCS:ClaI/SmaI/SalI(pgR107)MCS:ClaI/AscI/NotI/SalI(pgR106) 五、BIFC(Amp)载体（美国）3075（nEYFP-329bp）3076 (cEYFP-218bp)F：GGC GAATTC ATG GCTTGTGCTACTCTGA R：GGC CCTAGG AGAGAGGTAGCTGGGAG TAA TAG TGA六、RNAI(Kan)载体-pFGC5941（王宗华）七、pGEX-4T-1(Amp)原核表达载体八：pET-29a(Kan)原核表达载体九、. pEGAD(Kan)植物表达载体*XbaⅠ cleavage blocked by overlapping dam methylation. Must grow in dam-strain to cut. Note, XhoⅠ is not unique.pTRV2(a) Genome organization of TRV. The TRV-RNA1 open reading frames (ORFs) correspond to 134 and 194 kDa replicase, movement protein (MP) and a 16-kDa cysteine-rich protein. The TRV-RNA2 ORFs corresponds to coat protein (CP), and the 29.4 and 32.8 kDa proteins. gRNA, genomic RNA; sgRNA, subgenomic RNA. Asterisks (*) indicate the readthrough of 134 kDa protein.(b) TRV based VIGS vectors. TRV cDNA clones were placed in betweenthe duplicated CaMV 35S promoter (2×35S) and the nopaline synthase terminator (NOSt) in a T-DNA vector. LB and RB refer to left and right borders of T-DNA. Rz, self-cleaving ribozyme. MCS, multiple cloning sites.十、十一、1103-YFP十二：pBINPLUS十三、pBin438。

pPICZ A酵母表达载体说明

pPICZ A编号载体名称北京华越洋生物VECT2440 pPICZ ApPICZA载体基本信息出品公司: Invitrogen载体名称: pPICZA, p PICZ A质粒类型: 毕赤酵母蛋白表达载体表达水平: 高拷贝启动子: AOX1克隆方法: 多克隆位点，限制性内切酶载体大小: 3329 b p5' 测序引物及序列: 5´ A OX1:5´-‐GACTGGTTCCAATTGACAAGC-‐3´ 3' 测序引物及序列: 3´ A OX1:5´-‐GCAAATGGCATTCTGACATCC-‐3´ 载体标签: C-‐Myc, C-‐His载体抗性: Zeocin 博来霉素筛选标记: HIS4备注: 插入基因是必需包含起始密码子ATG。

产品目录号: -‐-‐稳定性: 稳定 Stable组成型: 组成型 Constitutive病毒/非病毒: 非病毒pPICZA载体质粒图谱和多克隆位点信息pPICZA多克隆位点pPICZA载体简介pPICZ A，B和C是3.3 k b的毕赤酵母蛋白载体。

表达的重组蛋白是融合蛋白，含有一个C-‐端多肽，多太重含c-‐myc和C-‐His标签。

载体能够在毕赤酵母中利用甲醇诱导的高水平的表达目的蛋白，并且可以用在任何毕赤酵母中，包括X33，GS115菌株，SMD1168H，KM71H。

pPICZ系列载体包含以下元素：•5'片段含有AOX1启动子的严格调控，利用甲醇诱导表达任何感兴趣的基因（Ellis等，1985; Koutz等人，1989;tschopp等人，1987A）。

•Zeocin抗性基因在大肠杆菌和毕赤酵母都能用于筛选（Baron等人,1992; D rocourt等人，1990）。

所有质粒载体汇总

酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF，pY15TEF，pY16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109；质粒pGADT7,pGBKT7；对照质粒pGBKT7-53，pGBKT7-lam，pGADT7-T，PCL1，酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190,毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZαA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc，配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33，KM71，KM71H，GS115，原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列，pET-GST，pGEX系列（含GST标签），pMAL系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列，pQE系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB系列，pLLP-ompA,pIN-III-ompA （分泌型表达系列）,pQBI63（原核表达带荧光）pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF（+）, pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK （+）,pBlueScript SK（-）pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒： pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1，pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣： pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞： DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21（DE3）HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21（AI）BL21（DE3）plysS TG1 TB1 DH5a（pir）Tuner（DE3）Bl21 codonplusRIPL Novablue （DE3）Rosetta Rosetta（DE3）Rosetta（DE3）plys Rosetta-gami（DE3）Rosetta-gamiB（DE3）, Rosetta-gamiB（DE3）plysS Orgami（DE3）OrgamiB（DE3）HMS174（DE3）植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIAsuper1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2,T-DNA插入载体（随机突变体库）pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01，配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0，pSilencer 2.1-U6 hygro， pSilencer 3.1-H1 hygro，pSilencer 3.1-H1 neo， pSilencer 4.1-CMV neo， pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体（oligoengine）pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体（clontech）: RNAi-Ready pSIREN-Retro Q， RNAi-ReadypSIREN-RetroQ-ZsGreen（Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide）RNAi慢病毒载体（addgene）: pLKO.1哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B，pSecTag2 A，pVAX1，pBudCE4.1,pTracer CMV2，pcDNA3.1（-）/myc-His A ，pcDNA6-Myc/His B，pCEP4， pIRES，pIRESneo，pIRES hyg3，pCMV-myc，pCMV-HA，pIRES-puro3，pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT，pBIND，pACT-MyoD，pBIND-Id，pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-Hybrid System:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II哺乳动物诱导表达系统:pOPRSVI ，pOPI3CAT，pCMVLacI,GeneSwitch System:pSwitch哺乳动物表面展示系统:pDisplay, 四环素调控系统（Invitrogen）：pcDNA4/TO/Myc-His A，pcDNA4/TO/Myc-His B，pcDNA4/TO/Myc-His C，pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ，pcDNA6/TR四环素调控系统（Clontech）：pTet-On，pTet-Off，pTRE2,pRevTRE，pRevTet-On，pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc，pIκB-EGFP，pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-sensor，pAP1（PMA）-Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro]，pGL4.75;p53-Luc，pAP-1-Luc， pNF-κB-Luc，pSRE-Luc，pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc,Gateway系统（invitrogen）pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR，乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株，pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY3 00PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523，pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.plantarum,L.rhamnosusGG,B.coagulans,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infantis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos载体pLAFR3,pMP2444（GFP）, pHY300PLK,pRT102,pRL1063a, 转座子载体pUT-miniTn5,pMGS100, pWHM10,pKC1139,pSET152,pOJ260,pPG611.1,pPG612.1，腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统（Stratagene）: pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ,pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cellline 腺相关病毒系统（Stratagene）： pAAV-MCS，pAAV-RC，pHelper，pAAV-LacZ，pAAV-IRES-hrGFP，pCMV-MCS，慢病毒载体:pLVX-DsRed-Monomer-N1,pLVX-IRES-ZsGreen1,pLVX-AcGFP1-N1,Lenti6/v 5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLentilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGreen,pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV-neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry质粒载体。

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酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF，pY15TEF，pY16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109；质粒pGADT7,pGBKT7；对照质粒pGBKT7-53，pGBKT7-lam，pGADT7-T，PCL1，酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190,毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZαA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc，配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33，KM71，KM71H，GS115，原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列，pET-GST，pGEX系列（含GST标签），pMAL系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列，pQE系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB系列，pLLP-ompA,pIN-III-ompA （分泌型表达系列）,pQBI63（原核表达带荧光）pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF（+）, pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK （+）,pBlueScript SK（-）pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒： pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1，pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣： pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞： DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21（DE3）HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21（AI）BL21（DE3）plysS TG1 TB1 DH5a（pir）Tuner（DE3）Bl21 codonplusRIPL Novablue （DE3）Rosetta Rosetta（DE3）Rosetta（DE3）plys Rosetta-gami（DE3）Rosetta-gamiB（DE3）, Rosetta-gamiB（DE3）plysS Orgami（DE3）OrgamiB（DE3）HMS174（DE3）植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIAsuper1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2,T-DNA插入载体（随机突变体库）pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01，配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0，pSilencer 2.1-U6 hygro， pSilencer 3.1-H1 hygro，pSilencer 3.1-H1 neo， pSilencer 4.1-CMV neo， pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体（oligoengine）pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体（clontech）: RNAi-Ready pSIREN-Retro Q， RNAi-ReadypSIREN-RetroQ-ZsGreen（Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide）RNAi慢病毒载体（addgene）: pLKO.1哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B，pSecTag2 A，pVAX1，pBudCE4.1,pTracer CMV2，pcDNA3.1（-）/myc-His A ，pcDNA6-Myc/His B，pCEP4， pIRES，pIRESneo，pIRES hyg3，pCMV-myc，pCMV-HA，pIRES-puro3，pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT，pBIND，pACT-MyoD，pBIND-Id，pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-Hybrid System:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II哺乳动物诱导表达系统:pOPRSVI ，pOPI3CAT，pCMVLacI,GeneSwitch System:pSwitch哺乳动物表面展示系统:pDisplay, 四环素调控系统（Invitrogen）：pcDNA4/TO/Myc-His A，pcDNA4/TO/Myc-His B，pcDNA4/TO/Myc-His C，pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ，pcDNA6/TR四环素调控系统（Clontech）：pTet-On，pTet-Off，pTRE2,pRevTRE，pRevTet-On，pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc，pIκB-EGFP，pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-sensor，pAP1（PMA）-Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro]，pGL4.75;p53-Luc，pAP-1-Luc， pNF-κB-Luc，pSRE-Luc，pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc,Gateway系统（invitrogen）pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR，乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株，pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY3 00PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523，pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.plantarum,L.rhamnosusGG,B.coagulans,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infantis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos载体pLAFR3,pMP2444（GFP）, pHY300PLK,pRT102,pRL1063a, 转座子载体pUT-miniTn5,pMGS100, pWHM10,pKC1139,pSET152,pOJ260,pPG611.1,pPG612.1，腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统（Stratagene）: pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ,pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cellline 腺相关病毒系统（Stratagene）： pAAV-MCS，pAAV-RC，pHelper，pAAV-LacZ，pAAV-IRES-hrGFP，pCMV-MCS，慢病毒载体:pLVX-DsRed-Monomer-N1,pLVX-IRES-ZsGreen1,pLVX-AcGFP1-N1,Lenti6/v 5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLentilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGreen,pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV-neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry质粒载体。

酵母微囊作为口服药物递送载体的研究进展

·综述·酵母微囊作为口服药物递送载体的研究进展Δ刘瑛琪1，2＊，李静如2，孟繁2，邢昊楠2，郑爱萍2 #（1.华北理工大学药学院，河北唐山　063210；2.军事医学研究院毒物药物研究所，北京　100850）中图分类号 R94文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2023）16-2022-06DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2023.16.20摘要酵母微囊是一种表面粗糙多孔、核心中空的天然药物递送载体，具有良好的安全性和高靶向性、高稳定性，在口服药物递送系统中具有极佳的应用前景。

酵母细胞经过酸碱和有机溶剂处理、洗涤后可获得疏松多孔的酵母微囊，后者可借助静电相互作用、被动扩散、疏水作用等方式包载药物。

酵母微囊表面主要由β-葡聚糖组成，可在胃肠环境中保持稳定，可被免疫细胞表面相关受体识别，从而激活免疫反应，并可在被摄取后随淋巴细胞的运动将所载药物运送至病变部位。

酵母微囊安全性高，非常适合递送疫苗、抗炎药物及抗肿瘤药物，其不仅可实现上述药物的口服递送，而且能增强药物效果，提高药物的靶向性。

今后可开展更多全身转运机制的相关研究或开发更加高效的联合给药系统，以充分发挥酵母微囊的临床价值。

关键词酵母微囊；β-葡聚糖；药物递送载体；口服药物Research progress of yeast microcapsules as oral drug delivery carrierLIU　Yingqi1，2，LI　Jingru2，MENG　Fan2，XING　Haonan2，ZHENG　Aiping2（1. College of Pharmacy，North China University of Science and Technology，Hebei Tangshan 063210，China；2. Institute of Pharmacology and Toxicology， Academy of Military Medical Sciences， Beijing 100850， China）ABSTRACT As a natural drug delivery carrier with rough and porous surface and hollow core，yeast microcapsules have good safety，high targeting and high stability，and have excellent application prospects in oral drug delivery systems. Yeast cells can be treated and washed with acid-base and organic solvents to obtain loose and porous yeast microcapsules. Yeast microcapsules can encapsulate drugs through electrostatic interactions，passive diffusion，hydrophobic interaction and other methods. The surface of yeast microcapsules is mainly composed of β-glucan，which can maintain stability in the gastrointestinal environment；it can be recognized by the surface-related receptors of immune cells，thus activating the immune response，and can be transported to the lesion site with the movement of lymphocytes after being ingested. Yeast microcapsules are safe and very suitable for delivering vaccines，anti-inflammatory drugs，and anti-tumor drugs. They can not only achieve oral delivery of the aforementioned drugs，but also enhance drug efficacy and improve drug targeting. In the future，more research on systemic transport mechanisms or the development of more efficient combination drug delivery systems can be carried out to fully exhibit the clinical value of yeast microcapsules.KEYWORDS yeast microcapsules；β-glucan； drug delivery carrier； oral drug药物递送载体的主要作用是提高药物稳定性、增加溶解度、增强靶向性等，对于口服制剂的递送载体还需具备克服胃液破坏和肠道消化酶降解等能力。

质粒图谱查询方法

0036--pET22b(+)--Novagene-原核表达--令令冲
0037--pQE9--Qiagen--原核表达--jpsgf
0038--pCANTAB5E--Phamcia--噬菌体抗库--yanBaggio
0039--pET-24a--Novagene--原核表达--yanBaggio
0006--pQEx--Qiagen--原核表达--wangjun2002274
0007--pIVEX2.3--Roche--体外转录翻译--wangjun2002274
0008--pIRES-EGFP--/--/--luoqingli2003
0009--pET-28a（+）--Novagen--原核表达--wangjun2002274
0014--pcDNA3--invitrogen--真核表达--kras
0015--pfastbac1--invitrogene--昆虫表达--cox2wj
0016--pEGFP-C3--clontech--真核表达--smilely
0017--pSecTag2--invitrogen--真核表达--kenmed
0018--PYX212--/--真核表达--Gmail
0019--pET20b--Novagen--原核表达--Gmail
0020--pEGFP-1--BD BIO--转录调控--wyh
0021--pEGFP/U6 --/--siRNA--songbinn
0022--pThioHisA--invitrogen--原核表达--xuezhishui
0081--pcDNA5/FRT/CAT—INVITROGEN--真核表达--renke3333

毕赤酵母常用培养基与载体