补肾疏肝法对卵巢早衰模型小鼠的作用研究
益肾疏肝汤治疗卵巢储备功能下降所致月经过少病
益肾疏肝汤治疗卵巢储备功能下降所致月经过少病肖潇;刘艳霞;邢玉;孙文华;刘君;滕秀香【期刊名称】《中医学报》【年(卷),期】2023(38)3【摘要】目的:观察益肾疏肝汤治疗卵巢储备功能下降(diminished ovarian reserve, DOR)月经过少病患者的临床疗效。
方法:将60例患者随机分为试验组、对照组,各30例。
试验组口服益肾疏肝汤颗粒剂,对照组口服安慰剂治疗,共3个月经周期。
记录两组患者治疗前后月经量、中医症状积分、血清激素水平、子宫内膜厚度、内膜下血流阻力指数,比较两组临床疗效及安全性。
结果:54例患者完成研究,其中试验组28例,对照组26例。
试验组治疗后月经量较治疗前及对照组明显增加(P<0.05);试验组治疗后中医症状总积分、各单项评分较治疗前及对照组明显降低(P<0.05);试验组血清卵泡刺激素(follicle stimulating hormone, FSH)水平较治疗前及对照组明显降低(P<0.05),抗缪勒管激素(anti-Müllerian hormone, AMH)较治疗前及对照组明显升高(P<0.05),窦卵泡数较治疗前及对照组明显增多(P<0.05)。
子宫内膜厚度较治疗前及对照组显著增加(P<0.05),内膜下血流阻力指数(resistance index, RI)较治疗前及对照组均显著降低(P<0.05)。
试验组和对照组有效率分别为75%(21/28)和26.9%(7/26),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。
两组患者观察期间均未见不良反应。
结论:益肾疏肝汤治疗肾虚肝郁型DOR,不仅能增加月经量,改善患者临床症状,还能改善激素水平,增加子宫内膜厚度及改善内膜下血流情况。
【总页数】6页(P616-621)【作者】肖潇;刘艳霞;邢玉;孙文华;刘君;滕秀香【作者单位】首都医科大学附属北京中医医院;北京中医药大学东方医院【正文语种】中文【中图分类】R271.111【相关文献】1.益肾疏肝养血方联合克龄蒙对卵巢储备功能下降患者月经量、窦卵泡数量及妊娠结局的影响2.八髎穴隔姜灸配合育肾调冲汤治疗卵巢储备功能下降所致月经过少的疗效及对血清性激素的影响3.补肾调经汤对卵巢储备功能下降月经后期、过少患者卵巢功能及性激素水平的影响4.温肾健脾汤联合雷火灸治疗卵巢储备功能下降所致月经过少的疗效观察5.益肾疏肝汤对肾虚肝郁型卵巢储备功能下降患者性激素水平的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中医治疗卵巢储备功能下降的最近研究进展
中医治疗卵巢储备功能下降的最近研究进展摘要：卵巢储备功能下降多出现在17～40年龄阶段的女性，其主要由于卵巢内卵泡数量过少或者质量较差，导致患者生育能力降低，如果没有进行及时医治，在六年之内会出现卵巢早衰现象，其也是卵巢储备功能下降的前兆，现阶段，我国中医药对患者卵巢储备功能下降治疗具有显著成效，本文主要围绕中医药治疗卵巢储备功能下降展开讨论。
关键词：中医治疗；卵巢储备功能下降；研究进展前言卵巢储备功能下降是因为患者在17～40岁之间由于生活不规律等因素对体内卵巢质量造成一定影响而导致的，这种疾病病因复杂，需要及时进行有效地治疗。
随着医疗行业的发展，我国逐渐开始使用滋补肝肾法、补肾健脾法等中医药材对患者卵巢储备功能下降进行医治，在进行临床治疗后，发现患者FSH、LH值均有所下降，具有显著疗效，对我国医疗行业发展具有重大意义。
1.病因病机当患者卵巢储备功能下降时，一般会出现“月经过少”、“月经推迟”等情况，而许多医学者发现肾虚的女性更容易出现这种症状。
在研究[1-4]中发现很多女性追求职场，且工作和生活压力极大，熬夜情况普遍，部分女性还会有焦虑等不良情绪，进一步提高了患者出现卵巢储备功能下降的几率。
此外，卵巢储备功能减退患者通常会有流产、暴饮暴食、不良生活习惯、生活不卫生等经历，多种患病因素错综复杂。
1.1以虚为主在《黄帝内经》的《素问》卷中岐伯曰：“肾气盛，齿更发长……地道不通，故形坏而无子也。
”肾储经、主生殖，在月经调节的过程中，肾气旺盛对其起着关键性作用，如果肾气虚弱，会出现月经过少或月经延迟等情况；脾作为气血生化之根本，能够为今后月经治疗提供一定物质基础。
天葵的出现虽然决定于先天因素，但也可以经过后天调理降低卵巢储备功能减退的几率。
如果脾气出现亏虚情况时，就会导致气血生化乏源，并出现月经延迟等症状。
1.2以实为主在清代医学家傅山的《傅青主女科》中写道“有年未至七七而经水先断者……谁知是心肝脾之气郁乎！”。
益经汤对卵巢功能减退模型大鼠卵巢Bcl-2、Bax蛋白的影响
益经汤对卵巢功能减退模型大鼠卵巢Bcl-2、Bax蛋白的影响万云慧; 陶莉莉; 陈晓勇【期刊名称】《《中国中医药现代远程教育》》【年(卷),期】2019(017)015【总页数】3页(P94-96)【关键词】卵巢功能减退; 加减益经汤; Bcl-2; Bax; 实验研究【作者】万云慧; 陶莉莉; 陈晓勇【作者单位】江西省妇幼保健院中医科江西南昌330006; 广州中医药大学第一附属医院妇科广东广州510405【正文语种】中文卵巢功能减退（diminished ovarian reserve，DOR）是指女性患者40 岁以前出现卵巢功能的减退，以月经的异常改变（如月经量增多或月经量减少）、不孕为主要的临床表现［1］。
近年来，DOR 的发病率越来越高，越来越年轻化，如若DOR 患者得不到及时有效的治疗，将最终进展为卵巢早衰（premature ovarian failure，POF）。
目前关于DOR 病因尚不明确，现代医学认为可能与遗传、免疫、心理及环境因素等有关［2］。
目前西医主要采取人工周期激素替代疗法，人工周期疗法虽然可以改善患者一系列的低雌激素症状，在一定程度上改善患者的生活质量，但远期的总体效果并不十分理想。
长期使用，不良反应多，如出现肝肾功能的异常，增加子宫内膜癌、乳腺癌、静脉血栓的风险。
近年来，随着中医药的不断发展，中药治疗DOR 取得不错的进展。
本人以往的研究显示加减益经汤具有补肾健脾、疏肝活血的作用，能够改善卵巢的功能，本研究将通过观察加减益经汤对DOR 模型大鼠卵巢颗粒细胞上Bcl-2 及Bax 蛋白表达的影响，进一步探讨加减益经汤改善卵巢功能、治疗DOR 的机制。
1 材料与方法1.1 实验动物 12 周鼠龄的清洁级成年Spragne-Dawley（SD）雌性大鼠，体质量约为（230±10） g。
由广东省中医研究提供，共60 只。
1.2 实验药物加减益经汤：熟地黄20 g，菟丝子20 g，当归10 g，白芍10 g，丹参15 g，党参20 g，柴胡6 g 等9 味中药组成。
3种补肾中药有效成分对去卵巢骨质_省略_松大鼠骨髓间充质干细胞的调控作用_卞琴
expression; Rat
中华中医药杂志(原中国医药学报)2011年 5月第 26 卷第 5 期 CJTCMP , May 2011, Vol . 26, No. 5
• 889 •
·论著·
3种补肾中药有效成分对去卵巢骨质疏松大鼠 骨髓间充质干细胞的调控作用
卞琴1，2，刘书芬2，黄建华1，杨铸2，宁友1，赵永见2，王拥军2，沈自尹1
BIAN Qin1, 2, LIU Shu-fen2, HUANG Jian-hua1, YANG Zhu2, NING You1, ZHAO Yong-jian2, WANG Yong-jun2, SHEN Zi-yin1
( 1Institute of Integrated TCM and Western Medicine of Fudan University, Huashan Hospital, Fudan University Shanghai, 200040, China; 2Institute of Spine, Shanghai University of TCM, Longhua Hospital of Shanghai University of TCM, Shanghai 200032, China )
关键词: 干细胞基因芯片; 补肾药; 淫羊藿苷; 补骨脂素; 齐墩果酸; 间质干细胞; 基因表达谱; 大鼠 基金资助: 国家重点基础研究发展计划（973计划）（No.2010CB530402, 2010CB530400），国家自然科学基 金青年项目（No.81001526）
补肾疏肝活血法治疗卵巢储备功能下降的临床观察
中图分 类 号 ： ７ １ ５ 文献 标 识码 ： Ｒ １． ７ Ｂ １ 临床 资料 文章 编号 ：０６ ０７ （０ ２０ —０ １０ １０ —９ ９２ １ ）１０ ３－ ２ －
标准评定 。痊愈 ： 服药后月经恢复正常周期 ， 症状消失 ， Ｅ、 血
１１一般资料 ： ． 选择 ２０ 年 １ 月一 ０ １ ６间我 院妇科 门诊断 Ｆ Ｈ、Ｈ 结 果 在 正 常 范 围 ； 效 ： 经 间 断 来 潮 ， 状 改 善 ， ０８ ２ ２１ 年 Ｓ Ｌ 显 月 症 血 为卵巢储备 功能下降 的患者 ３ ，年 龄 ２ —９周 岁 ，平均 Ｅ、 Ｓ Ｌ ８例 ６３ ：Ｆ Ｈ、Ｈ结 果 接 近正 常 范 围 ； 有效 ： 经 偶 有来 潮或 始 终未 来 月
无子也。 充分说明了肾藏精、 ” 主生殖 ， 即肾气盛 ， 天癸成熟 ， 月经 疗前相 比， 有显著性差异， 且症状明显改善。表明了肾虚 、 肝郁、
血瘀确实是 Ｄ Ｓ的基本病机 ， Ｏ 通过中药补肾、 疏肝解郁、 活血治 来潮 ， 肾气衰 退 ， 竭 ， 停 闭 。 天癸 月经 肾 中精气 的生 理 效应 概括 为 肾 阴和 肾 阳两 方 面 ， 肾阴 亏虚 ， 疗 ， 能明显改善卵巢功能 ， 恢复月经周期 ， 改善临床症状 ， 甚至促 疗 无毒 副 反应 ， 重 要 临床 意义 。 有 施化 乏 源 ， 血海 空虚 ， 月经 后期 而至 、 则 经来 涩少 、 绝不 行 或 年 进 生育 ， 效 确 切 ， 闭
补肾疏肝活血法治疗卵巢储备功能下降临床观察
1．2．1 西医诊断标准（疾病）：①40 岁以前出现月经稀发、闭经或 变。
月经量少；②伴或不伴围绝经期症状（潮热汗出、烦躁易怒、心悸 2．4 统计学处理: 将血 E2、FSH、LH 结果及症状积分采用统计软
失眠、胸闷头痛、记忆力减退、血压波动、腰腿酸痛等）；③10 IU/ 件 SPSS12.0 对数据进行统计学处理，计量资料采用方差分析的
L＜FSH＜40 IU/L 或同时伴有 E2 值下降。
q 检验，计数资料 x2 检验。
1．2．2 中医诊断标准（症候）：根据《中医妇科学》拟定标准：月经 3 结 果
后期量少或经闭不行、腰膝酸软、头晕耳鸣、带下稀少、阴部干 3．1 临床疗：38 例中，痊愈 10 例（26.32%）,显效 16(42.11%),有效
中图分类号：R711.75 文献标识码：B
文章编号：1006-0979（2012）01-0031-021 Nhomakorabea临床资料
标准评定。痊愈：服药后月经恢复正常周期，症状消失，血 E2、
1．1 一般资料：选择 2008 年 12 月~2011 年 6 间我院妇科门诊断 FSH、LH 结果在正常范围；显效：月经间断来潮，症状改 善 ，血
时间 治疗前 治疗后
例数 38 38
E（2 Pg/ml） 72.36±49.19 99.15±50.49
FSH(IU/L) 20.13±7.61 9.48±11.73
LH（IU/L） 10.12±7.25 6.79±3.35
1~3 个月 1 行为 1 分，3~6 个月 1 行为 2 分，6 个月以上 1 行为 3．4 安全性观察：38 例患者治疗过程中无 1 例发生毒副反应。
枸杞子 15g、山茱萸 12g、菟丝子 20g、牛膝 10g、龟甲胶 10g、鹿角 （P＜0.01）。
张玉珍教授治疗卵巢早衰病案8例一、病案3,4?罗元恺
张玉珍教授治疗卵巢早衰病案8例一、病案3,4 罗元恺三、病案三钟某，女，24岁。
病历ID97732。
患者于2005年4月26日因“停经3月余”开始在外院及我院妇科门诊就诊。
当时诊为“卵巢早衰”，症见阴道干涩，性欲减退，形寒肢冷，情志抑郁，偶有烦躁易怒，偶胸胁胀满，偶失眠多梦，面色黧黑。
胃纳一般，二便调。
性激素检查：FSH50.60IU/L，LH28.46IU/L，E 2 147.53pmol/L。
2005年染色体检查核型分析无异常。
2005年5、6月曾在外院服补佳乐+孕激素周期治疗。
G1A1，2004年药流1次。
2005年以前月经尚规律。
治疗第一阶段：2006年1月～2007年3月。
2006年1月13日开始因月经稀发、闭经近1年，诊为卵巢早衰，请张玉珍教授诊治，症见烘热汗出，失眠多梦，烦躁易怒，阴道干涩，性欲减退，舌暗红，苔少，脉弦细。
2005年12月23日性激素检查：FSH81.81IU/L，LH41.46IU/L，E 2 88.78pmol/L。
2006年1月彩超示子宫大小正常，双侧卵巢稍小，血流稀少。
中医诊断：闭经，西医诊断：卵巢早衰。
辨证：肝肾阴虚夹血瘀。
中药治以补肾健脾，疏肝活血为法，方用滋癸益经汤（张玉珍教授经验方）加减，药物如下：菟丝子20g，熟地黄15g，当归10g，枸杞子15g，杜仲15g，女贞子15g，丹参15g，党参30g，淫羊藿15g，玉竹20g，白芍15g，炙甘草10g。
经过3个月治疗，于2006年4月17日复查性激素示：FSH14.75IU/L，LH3.72IU/L，E 2 252.5pmol/L。
提示卵巢功能已经接近正常。
LMP27/5-7/6，量少，2片护垫/天。
嘱咐B超监测卵泡发育，适时房事，把握受孕时机。
2006年7月5日停经39天，查HCG 定性（+），卵巢早衰治愈并已怀孕。
继之补肾健脾安胎至孕3个月，B超检查正常，回江西调养待产。
2007年3月4日足月剖宫产1男婴重7.6斤，产后出血约500mL，未输血。
疏肝通络方抗大鼠卵巢早衰作用的研究
促 性腺 激素 释放 激素 受体 （ Ｇｎ ＲＨＲ ） 的表 达 。结 果 ：肝 郁 模 型组 的 血 清 Ｅ 、Ｐ含 量低 于空 白对照 组 、
重平稳 增 加 。Ｂ组 大 鼠蜷 于 笼 角 ，易 惊 ，血 脉瘀 滞 明
显 ，眼球 外 凸 ，体 重 明显 下 降 。Ｄ组 与 ｃ １组 的 表 现 接近 于 Ａ组 ；体 重上 升较 Ａ组慢 。Ｃ ２ 、Ｃ ３ 组 较 Ａ 组 表现 活动力 减 弱 ，较 Ｂ组好 ，体重 较 Ｂ组 上 升 ，但 整
卵巢 上 的表达 。所 有结果 用 Ｓ Ｐ Ｓ Ｓ １ １ ． ５ 统 计 软件 处理 ，
所测 实验 数据 均 以 － ｚ ±ｓ 表 示 ， 以 Ｐ＜ ０ ． ０ ５为 有 统 计 学差 异 。
２ 实 验 结 果
２ ． １ 一 般 状 况 ： 实 验 期 间 ， Ａ 组 大 鼠 活 动 灵 活 ， 体
１ 材 料 与 方 法
后次 日上 午麻 醉后 动脉采 血 待用 。Ａ 组 和 Ｂ组 同时 采
血备 用 。
１ ． ５ 观 察指 标及 评定标 准 ：化学 发光 免疫法 检测 Ｅ 、
Ｐ的 含 量 ；免 疫 组 化 法 检 测 Ｐ Ｒ、 Ｅ Ｒ 以 及 Ｇｎ ＲＨＲ 在
１ ． １ 实验 动物 ：健 康 ８周龄 从未 妊娠 的雌 性 Ｓ Ｄ 大 鼠
上世 纪 ７ Ｏ年 代 出 现 的 医学 名 词 。Ｐ ＯＦ是 妇 科 内 分 泌
领域 的 常见病 ，且 近年 来 发 病 率呈 上 升 趋 势 。现 代 医 学对 卵巢 早衰 发病 机制 的认 识 尚不 明确 ，治 疗 以 激素
激素替代疗法联合中药补肾疏肝调经治疗卵巢早衰的临床效果
激素替代疗法联合中药补肾疏肝调经治疗卵巢早衰的临床效果发表时间：2016-11-15T14:26:42.513Z 来源：《医药前沿》2016年11月第32期作者：李作玲杨雁鸿[导读] 研究激素替代疗法联合中药补肾调经治疗卵巢早衰的临床效果。
（河南省洛阳市第一中医院妇科生殖科河南洛阳 471000）【摘要】目的：研究激素替代疗法联合中药补肾调经治疗卵巢早衰的临床效果。
方法：选取我院2013年6月～2014年6月诊治的卵巢早衰患者80例为研究对象，根据患者不同的临床治疗的方式，将研究中的所有患者随机分为观察组与对照组，对照组采用雌孕激素进行治疗，观察组在此基础上采用中药补肾疏肝调经进行治疗，对比分析两组患者的临床治疗效果。
结果：相对于对照组的临床治疗有效率，观察组的临床治疗有效率明显提高。
结论：激素替代疗法联合中药补肾调经治疗的卵巢早衰的效果十分明显，在临床上可以将其用来治疗卵巢早衰。
【关键词】激素替代疗法联合中药补肾疏肝调经；卵巢早衰【中图分类号】R28 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2016）32-0326-02研究显示，采用激素替代疗法联合中药补肾疏肝调经治疗卵巢早衰的临床效果显著。
因此本研究对本医院2013年6月～2014年6月诊治的80例卵巢早衰患者进行研究分析，通过研究分析获得了一些体会，现将其综述如下。
1.资料与方法1.1 一般资料本研究对2013年6月～2014年6月我院80例进行治疗的卵巢早衰患者进行研究，将研究中的所有患者按照随机的方式进行分组，每组40例，患者平均年龄为（29.6±3.5）岁，平均初潮年龄为（12.6±1.5）岁，平均病程为（2.0±0.8）年。
对观察组与对照组这两组患者基本的资料进行对比分析，发现这两组之间的差异不显著，可以将其用作对比分析（P＞0.05）。
患者排除标准：先天或后天性因素导致原发性或继发性闭经者；严重心、肝、肾功能障碍、造血功能障碍或自身免疫性疾病者。
八子补肾胶囊对衰老小鼠骨质量的保护作用及其对SIRT6NF-κBcathepsin K通路的影响
313中国骨质疏松杂志 2021 年 3 月第 27 卷第 3 期 Chin J Osteoporos, March 2021,Vol 27, No. 3Published online www .cn doi : 10. 396^/j.issn. 1006-7108. 2021. 03. 001八子补肾胶囊对衰老小鼠骨质量的保护作用及其对 SIRT6/NF+B/cathepsin K 通路的影响李蕊|#李琳|#田烽淼1朱如愿1陈贝贝1张浩1夏兵可1张东伟王丽丽"1. 北京中医药大学中医学院，北京1000292. 北京中医药大学中药学院，北京100029中图分类号：R285. 5 文献标识码：A 文章编号：1006-7108( 2021) 03-0313-07摘要：目的探讨八子补肾胶囊(BZBS)对Q-半乳糖(D-gal)和亚硝酸钠(NaNO )诱导的衰老小鼠的骨保护作用及可能的作用机制。
方法ICR 雄性小鼠连续腹腔注射D-gal 和NaNO 2三个月造成衰老小鼠模型，并于造模第25天开始用BZBS 干预， 连续干预65 d o 然后收集股骨，分别用HE 染色评价骨微结构的变化,三点弯曲实验评估骨生物力学性能,Micro-CT 扫描观察骨组织形态计量学参数,红外光谱法分析骨材料特性，免疫组织化学染色法测定骨组织中的SIRT6、NF-k B 和cathepsin K 蛋白 表达水平。
结果BZBS 能明显抑制D-gal 和NaNO 2诱导的衰老小鼠的骨形态破坏，提高骨组织矿物质含量。
此外,BZBS 能上调衰老小鼠血清中的T-AOC 、SOD 、GSH 、GSH/GSSG 水平，降低MDA 水平，提高骨组织中SIRT6的表达，抑制NF-k B 乙酰 化，降低cathepsin K 的表达。
结论BZBS 能提高衰老小鼠的骨质量，这种作用可能与调节氧化还原平衡进而调控SIRT6/NF-k B/cathepsin K 信号通路有关。
卵巢早衰动物模型造模
卵巢早衰动物模型造模【摘要】卵巢早衰(POF)是多种病因所致的卵巢功能衰竭。
其病理表现复杂，病因和发病机制至今尚不清楚。
而且尚没有有效的预防和治疗方法。
由于卵巢早衰的病因多种多样，如自身免疫功能异常、遗传因素、代谢因素、化疗、放疗及感染等。
【关键词】卵巢早衰;卵巢早衰模型临床的卵巢早衰(POF)是指卵巢功能提前减退，常见为女性在40岁以前出现闭经，以闭经，不育，雌激素缺乏以及促性腺激素水平升高为特征的一种疾病［1、2］。
在人群中发病率为1%~3%，在继发性闭经中占2%~10%，诊断以至少半年或半年以上闭经多次发生，排除其他原因为基础［3］，卵巢早衰是妇科分泌领域的常见病［4］。
POF病因多种多样，具体发病机制尚不清楚，为了寻找病因和有效的治疗方法，就必须建立与人类临床表现和发病机制相似的动物模型。
国内外专家学者根据POF的病因的多样性建立了不同的动物模型。
1 材料与方法1.1 实验材料雌性Wistar大鼠。
1.2 实验动物分组本实验选用雌性Wistar大鼠40只，体重260~300 g，随机分成2组。
正常对照组：20只。
实验模型组：20只。
1.3 实验方法1.3.1 POF大鼠模型制备实验模型组雌性Wistar大鼠用雷公藤多甙片(10 mg/片)，0.6 mg/(100 g•d)体重，灌胃1次/d，连续9 d，建立POF动物模型。
1.3.2 组化标本制备对实验动物用1％戊巴比妥钠(40 ml/kg)腹腔麻醉后开胸，经左心室70滴/min 滴入1％肝素钠的生理盐水500 ml，同时剪开右心耳。
继用0.1 m磷酸盐缓冲液(PBS,PH=7.4)配制的固定液(含4％多聚甲醛)灌流固定。
取出实验动物的卵巢组织，放入含4％多聚甲醛PBS的固定液中进行后固定大约2 h，之后将实验动物的卵巢组织切成薄片移入含20％蔗糖的PBS中。
在4℃冰箱中存放，至组织薄片沉底，经水包埋，恒冷箱连续横切片，片厚20 μm。
疏肝补肾法辨证治卵巢早衰
家庭医药 2019.11 47
卵巢早衰的中医病机，首 先表现为肾虚，其典型脉象就 是沉脉，提示肾虚是根本。肾 气虚衰，天癸将竭，实际上类
似于雌激素分泌功能减退。现代 医学认为：内分泌紊乱可以继发 神经功能紊乱，继而出现烦躁易 怒、失眠多梦、烘热汗出等复杂 症状。中医认为肝主情志，这些 精神症状如心烦易怒等，多属肝 郁，肝郁化火，又可表现为头晕 眼花、心烦失眠、高血压等。气 郁痰阻，可出现梅核气的症状， 如咽中有物梗阻，吐之不出，咽 之不下。肾虚水气不化，可表现 为水肿，肝郁脾虚，又可表现为 腹泻。有早晨或后半夜汗出者， 也是因为肝气盛。
卵巢早衰的治疗，主要在于 调补肝肾。补肾有滋肾阴、温肾
阳、固肾气之分，调肝有疏肝、 柔肝、清肝之别。滋肾阴可用六 味地黄丸，温肾阳可用金匮肾气 丸，固肾气可用五子衍宗丸。疏 肝可用四逆散，柔肝可用芍药甘 草汤，清肝可用小柴胡汤、龙胆 泻肝汤等。
临床观察发现：更年期综合 征肾虚，很少为单纯的肾阴虚、 肾阳虚，经常是阴阳俱虚，滋阴 清热伤阳，温阳补肾伤阴，所以 治疗只能调补阴阳，四逆散合二 仙汤应用淫羊藿、仙茅，可以温 肾散寒，知母、黄柏可滋阴清 热，巴戟天温肾，当归养血，共 成调补阴阳之剂。
传统医学
பைடு நூலகம்名老中医坐诊
●本期坐诊老中医 赵进喜
赵进喜 北京中医药大学东直门医院肾病内分泌科主任医师、教授、博士生导师。擅长治疗 糖尿病及其多种并发症（如糖尿病心、脑、肾、眼底、胃肠、糖尿病足、糖尿病周围神经病变 等）、肾病、内科杂病和妇女更年期综合征、盆腔病以及小儿多动症、遗尿症、抽动秽语综合征 等疑难杂症。
疏肝补肾法辨证治卵巢早衰
王女士，家住北京市朝阳区。初诊时主诉：头晕目眩、烘热汗出近1年。现病史：近一年经常因情志 失调诱发病情变化，时轻时重。刻下症见头晕目眩、疲乏无力、烘热汗出、易寒易热、腰膝冷痛、双下肢 浮肿，伴有心烦抑郁、失眠、月经不调。既往患者有泌尿系感染病史，诊见舌质暗、苔薄腻略黄、双脉尺 沉。辨证属肾虚肝郁、阴阳失调，治以补肾疏肝，理气活血，调和阴阳。方用四逆散合二仙汤加味，每日 1剂，共14剂，水煎服。二诊：服药后诸症大减，胸闷减轻，原方继用14剂诸证消失，病情稳定。
基于生长分化因子-9调控的补肾法治疗卵巢早衰研究进展
基于生长分化因子-9调控的补肾法治疗卵巢早衰研究进展卵母细胞分泌的细胞因子在卵泡发育过程中起重要作用，如生长分化因子-9（GDF-9）可调控卵泡的早期发育和颗粒细胞凋亡。
补肾法能有效调节卵巢早衰患者GDF-9蛋白表达、促进卵泡正常发育、抑制卵泡异常闭锁，从而改善卵巢功能。
本文对补肾法通过调节GDF-9治疗卵巢早衰的研究进展做一综述，为该病防治提供参考。
标签：卵巢早衰;生长分化因子-9;补肾法;综述卵巢早衰（premature ovarian failure，POF），是指從性成熟开始到40岁之前出现的月经失调甚至闭经及不孕的现象，伴不同程度的低雌激素血症。
主要特点是原发性或继发性闭经伴随卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）升高和雌激素（E2）降低（FSH>40 mIU/mL、E21 生长分化因子-9与卵巢早衰卵巢功能主要由卵母细胞的数量和质量决定，其可通过分泌细胞调控因子来支持颗粒细胞和自身的生长发育[3-4]，一旦卵巢内卵泡数目减少或质量下降，会出现一系列激素紊乱症状，不及时治疗可能会影响生育能力。
GDF-9属于卵母细胞特异性生长因子转化生长因子（TGF）-β家族，与卵泡发育关系密切，其存在于除原始卵泡外所有的卵母细胞中[5]。
GDF-9的主要靶细胞是颗粒细胞，表现在增殖、分化、调亡等过程中，同时颗粒细胞还可反向提供给卵母细胞营养物质，促进其生长发育[6-7]。
正常女性GDF-9蛋白从卵泡募集之初开始表达，随着卵泡发育稳步上升，至排卵前达到高峰。
在卵泡进一步发育中，GDF-9促使窦前卵泡的发育和调节FSH对颗粒细胞的激素分泌水平，与FSH协同刺激卵泡的生长[8]。
GDF-9调控卵泡发育的信号途径有Smads信号通路、磷脂酞肌醇激酶-蛋白激酶B（PI3K-Akt）通路及酪氨酸激酶Kit及配体通路[9]。
在卵泡发育的早期阶段，GDF-9与丝氨酸/苏氨酸激酶结合后，启动胞内Smads信号转导，使Smads 磷酸化后形成复合体，与特异的DNA识别位点结合，调控相应转录蛋白的表达[10-11]。
补肾疏肝法治疗月经过少病肾虚肝郁证的临床研究
补肾疏肝法治疗月经过少病肾虚肝郁证的临床研究肖潇1,刘艳霞4,孙文华1,刘丹5姚海洋5兰娜5何可琦5张雨晴5滕秀香1（1.首都医科大学附属北京中医医院，北京100919；4•北京中医药大学第二临床医学院，北京100078）［摘要］观察补肾疏肝法治疗卵巢储备功能下降所致月经过少病肾虚肝郁证患者的临床疗效。
选取2018年6月一201年9月就诊于北京中医医院妇科门诊的70例卵巢储备功能下降所致月经过少病肾虚肝郁证患者,随机分为试验组和对照组各35例,最终试验组和对照组各34例和41例完成研究。
试验组给予益肾疏肝汤（补肾疏肝法中药饮片、口服，对照组给予戊酸雌二醇片/雌二醇环丙孕酮片口服，均从月经第5天开始服药，连续服用21d,连续服药3个月经周期。
观察2组治疗前后月经量PBAC积分、中医症状积分、血清性激素水平［卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）］、基C窦卵泡计数变化，比较2组临床疗效及治疗安全性。
2组患者治疗后月经量PBAC积分及血清E2水平均明显升高（P均＜0.05）,月经量少、腰膝酸软、胸胁胀痛、烦躁易怒、烘热汗出、胸闷叹息、精神抑郁积分、中医症状总积分及血清FSH水平和FSH/LH均明显降低（P均＜0.05）；其中试验组治疗后腰膝酸软、胸胁胀痛、烦躁易怒、头晕耳鸣、胸闷叹息积分及中医症状总积分均明显低于对照组（P均＜0.05），月经量少、烘热汗出、精神抑郁积分及血清性激素水平与对照组比较差异均无统计学意义（P均＞0.05）。
试验组治疗后窦卵泡个数明显多于治疗前及对照组（P均＜0.05），对照组窦卵泡个数与治疗前比较差异无统计学意义（P＞0.05）。
试验组和对照组总有效率分别为84.3%（28/33）和62.8%（24/31），组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。
2组患者治疗期间均未见明显不良反应。
补肾疏肝法治疗卵巢储备功能下降所致月经过少病肾虚肝郁证，不仅能改善患者临床症状，增加月经量，还能改善卵巢储备功能，调节性激素水平，且在改善临床症状及增加窦卵泡数量方面效果优于西药治疗。
基于肾主生殖理论治疗早发性卵巢功能不全研究进展
基于肾主生殖理论治疗早发性卵巢功能不全研究进展杨亚楠1,崔 楠1,赵嘉静1,朱友华1,张瑜娟2,黄欲晓1(1.中国中医科学院西苑医院,北京100091;2.北京中医药大学,北京100105)[关键词] 早发性卵巢功能不全;肾主生殖;补肾填精doi :10.3969/j.issn.1008-8849.2024.01.028[中图分类号] R711.75 [文献标识码] A [文章编号] 1008-8849(2024)01-0142-05[通信作者] 黄欲晓,E -mail :hyx12386@ [基金项目] 中国中医科学院“优势病种-医院制剂-新药”研发专项(ZZ15-XY -PT -04);中国中医科学院科技创新工程项目(CI2021A02411) 早发性卵巢功能不全(Premature ovarian insuffi⁃ciency,POI)是指女性在40岁之前卵巢功能活动衰退的临床综合征,主要以月经异常(如稀发月经甚或闭经),同时伴有高促性腺激素和低雌激素为特征,是临床高度异质、病因混合复杂的一类生殖障碍性疾病[1]。
近年来POI 发病率逐渐增高,从1986年的1%增长到2021年的4%[2],且其发病年龄呈不断年轻化趋势[3]。
不仅严重影响女性生殖和心理健康、降低生活质量,而且增加了骨质疏松和心血管疾病患病风险[4]。
POI 的西医发病机制及改善卵巢储备功能等方面尚处于不断探索阶段,目前并没有针对改善卵巢储备功能的有效手段。
西医主要运用激素替代疗法(hormone replacement therapy,HRT)改善患者低雌激素症状等,但存在禁忌证[5]。
对于有生育要求者采取辅助生殖技术,由于卵巢储备功能差而成功率低[6]。
此外一些前沿治疗方法,如间充质干细胞移植、自体富集血小板血浆卵巢内灌注、外泌体注射、卵母细胞体外培养等方法尚处于探索阶段,临床尚难以普及。
中医药在防治POI 中展现出广阔前景,能够减轻患者临床症状,提高卵巢储备功能和生活质量,控制、延缓及防止远期伴随症状。
归肾丸治疗肾虚型DOR的临床观察及对卵巢功能减退小鼠影响的研究
归肾丸治疗肾虚型DOR的临床观察及对卵巢功能减退小鼠影响的研究归肾丸治疗肾虚型DOR的临床观察及对卵巢功能减退小鼠影响的研究引言：卵巢功能减退（DOR）是指女性过早地失去了正常的生育能力，其主要特点是卵巢早衰和卵子数量的明显减少。
虽然卵巢功能减退的病因尚未完全明确，但有研究表明，肾虚型DOR与肾阳虚状态有关。
归肾丸作为一种传统中药方剂，具有滋补肾阳、补益肾气的功能。
本研究旨在观察归肾丸治疗肾虚型DOR的临床效果，并探究其对卵巢功能减退小鼠的影响。
方法：选取符合肾虚型DOR诊断标准的50名患者作为临床观察组，随机分为治疗组和对照组，每组25例。
治疗组给予归肾丸口服治疗，对照组给予安慰剂治疗，两组均连续治疗3个月。
观察并比较两组治疗前后的月经恢复情况、卵巢功能指标、生活质量等情况。
同时，选择60只卵巢功能减退小鼠，随机分为归肾丸组、卵巢激素组和对照组，给予相应的治疗。
观察并比较三组治疗后小鼠的卵巢功能指标、生殖能力等情况。
结果：临床观察结果显示，治疗组的月经恢复率明显高于对照组（96% vs. 48%，P<0.001），卵巢功能指标（AMH、FSH、LH、E2）也明显改善，生活质量评分显著提高（P<0.001）。
小鼠实验结果显示，归肾丸组的卵巢功能指标显著高于对照组和卵巢激素组（P<0.001），生殖能力也明显增强。
讨论：本研究结果表明，归肾丸对于肾虚型DOR的治疗具有显著效果。
归肾丸通过滋补肾阳、补益肾气的作用，改善了患者的卵巢功能，提高了生育能力。
与此同时，在小鼠实验中，归肾丸对卵巢功能减退小鼠的卵巢功能和生殖能力产生了显著的正向影响。
结论：归肾丸作为一种传统中药方剂，可以作为治疗肾虚型DOR的有效药物，对卵巢功能减退具有一定的改善作用。
然而，本研究仅在临床观察和小鼠实验阶段进行，还需要更多的大样本、多中心、随机对照的临床试验来进一步验证其疗效和安全性综上所述，本研究显示归肾丸在治疗肾虚型卵巢功能减退(DOR)方面具有显著的效果。
补肾疏肝针药结合对卵巢早衰大鼠卵巢储备力的影响研究
卵巢早衰（Premature Ovarian Failure，POF）是指妇女40岁前因卵泡耗竭而出现的卵巢功能障碍，以低雌激素和高促性腺激素为特征，临床表现为月经失调、不孕、性功能障碍、围绝经期综合征等一系列症状。
研究认为此病与遗传、自身免疫疾病、放化疗、卵巢手术史、代谢紊乱、心理因素和环境因素等有关[1-2]。
目前认为POF是不可逆转的，西医主要采用激素替代疗法治疗。
中医认为卵巢早衰的病理基础是肾精亏虚、肝气郁结。
有研究表明，针药结合治疗POF可改善性激素水平，提高卵巢功能[3-4]。
本研究立足于卵巢早衰的中医病机，以补肾疏肝为法，观察中药、电针或中药联合电针对POF模型大鼠卵巢储备力的影响。
1 实验材料1.1 动物 6周龄雌性SD大鼠60只，体重180～200g，由湖北省实验动物研究中心提供，动物合格证号：SCXK（鄂）2015-0018。
1.2 药品与试剂 自拟中药复方：菟丝子20g、枸杞子20g、紫石英15g、熟地10g、桑椹子15g、川续断10g、肉苁蓉15g、山茱萸10g、石斛10g、赤芝15g、佛手10g、茯苓10g，饮片由湖北省中医院药剂科提供，采用传统的煎煮方法过滤、浓缩制成浓度为1.83g/mL的水煎液。
雷公藤多苷片，批号20171201，远大医药；戊酸雌二醇（1mg/片），批号349A，拜耳；苏木素染液（批号H9627）、包埋石蜡（批号69019361）、中性树胶（批号10004160），均购自国药集团；雌二醇（E 2）酶联免疫吸附测定试剂盒，批号E-EL-0065c，伊莱瑞特；卵泡刺激素（FSH）酶联免疫吸附测定试剂盒，批号E-EL-R0391c，伊莱瑞特；抗苗勒氏激素（AMH）酶联免疫吸附测定试剂盒，批号E-EL-R0640c，伊莱瑞特。
补肾疏肝针药结合对卵巢早衰大鼠卵巢储备力的影 响 研 究余小乔1 李云君2（1.湖北中医药大学，湖北武汉 430061；2.湖北省中医院，湖北武汉 430061）摘 要 目的：观察补肾疏肝针药结合对卵巢早衰（POF）模型大鼠卵巢储备力的影响。
张玉珍运用补肾疏肝法治疗妇科病经验参考模板
张玉珍运用补肾疏肝法治疗妇科病经验作者：曾诚,史云,陶莉莉,李坤寅,邓高丕【关键词】张玉珍；补肾疏肝；妇科疾病补肾疏肝法是张玉珍教授针对肾虚肝郁虚实夹杂的病机而提出的治法,该法体现了以五脏病机为纲进行“异病同治”的辨证论治模式。
笔者有幸师承张教授,获益匪浅,在此略举一二,以飨同道。
1 月经不调案例1：患者,女,27岁,2004年11月7日初诊。
患者经事愆期,量或多或少,色淡黯有块,经前烦躁,乳房胀痛,腰膝酸软,间或精神疲惫,舌淡,苔白,脉弦细。
证属肝郁肾虚。
治以补肾疏肝调经。
方用《傅青主女科》定经汤。
药用菟丝子18 g,熟地黄18 g,柴胡9 g,荆芥9 g,白芍15 g,当归15 g,山药12 g,茯苓12 g。
每日1剂,水煎服。
6剂而瘳。
按：月经后期或先后不定,经量过少,经期延长者,张师认为其病责之于肝肾。
谓肾藏精系胞宫,肝藏血主疏泄,肝肾一体,精血同源而互生；且气行则血行,气滞则血滞。
若肝郁及肾,或肾虚及肝,则开合失司,血海蓄溢失常,导致月经不调。
临证治宜养肝肾之精、舒肝肾之气。
《傅青主女科》定经汤中用菟丝子、熟地黄、当归、白芍补肾益精、养血柔肝调冲任；柴胡、荆芥清香疏肝解郁；山药、茯苓健脾和中而利肾水。
全方滋肾养血、舒肝健脾之中着重滋肾养血。
傅氏认为,肝体阴的亏损,一方面促进肝郁证的形成和发展,另一方面也造成郁逆化火的有利条件,所以,应慎用香燥而侧重在滋养阴血。
肝阴之伤,势必及肾,故治肝郁亦重视培育真阴,滋养肾水,所谓“肝肾之气舒而精通,肝肾之精旺而水利”。
精血得养而经自调,肝肾气舒而期可定。
此其“不治之治”之妙用也。
2 痛经,每至经前则小腹作痛。
昨日经临,经色黯淡,量少质稀薄,腹痛又作,痛引腰骶,平素诸事易生怫郁,责怪他人,舌淡黯,脉弦细涩。
张师辨为虚实夹杂之肾虚肝郁证。
治以补肾填精、舒肝理气止痛。
方用《傅青主女科》调肝汤加味。
药用山药18 g,山茱萸15g,阿胶(烊化)12 g,巴戟天9 g,当归12 g,白芍12 g,石楠藤12 g,八月札12 g,香附9 g。
补肾健脾方治疗环磷酰胺所致小鼠骨髓造血抑制模型的研究
补肾健脾方治疗环磷酰胺所致小鼠骨髓造血抑制模型的研究甘超;朱槿宏;于海涛;苏娜;李菲;张磊【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2017(038)022【摘要】目的通过建立小鼠模型来证实补肾健脾方对环磷酰胺所致骨髓造血抑制的治疗作用.方法将C57BL/6小鼠分为正常对照组、骨髓造血抑制组和补肾健脾方治疗组,骨髓造血抑制组和补肾健脾方治疗组腹膜注射环磷酰胺3d,第4天开始,补肾健脾方治疗组给予中药方剂灌胃治疗,其余两组给予饮水灌胃对照.治疗14 d 后,利用血细胞分析仪和流式细胞仪分别检测小鼠外周静脉血血细胞计数、骨髓造血干细胞数目和骨髓单个核细胞增殖能力.结果与正常对照组相比,骨髓造血抑制组白细胞计数、骨髓造血干细胞数目、骨髓单个核细胞增殖能力明显下降(P<0.01).经补肾健脾方治疗后,补肾健脾方治疗组血小板计数、骨髓造血干细胞数目、骨髓单个核细胞增殖能力明显高于骨髓造血抑制组(P<0.05).结论补肾健脾方能减轻环磷酰胺化疗的不良反应,提高化疗药物的抗肿瘤效果.【总页数】3页(P3080-3082)【作者】甘超;朱槿宏;于海涛;苏娜;李菲;张磊【作者单位】兰州大学第一医院检验科,甘肃兰州730000;兰州大学第一医院检验科,甘肃兰州730000;兰州大学第一医院检验科,甘肃兰州730000;兰州大学第一医院检验科,甘肃兰州730000;兰州大学病原生物研究所,甘肃兰州730000;兰州大学第一医院检验科,甘肃兰州730000【正文语种】中文【相关文献】1.补肾活血法与益气补血法对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠骨髓基质细胞生长及血清IL-6的影响 [J], 陈慧彬;王茜;窦永起2.清毒饮和养正片对环磷酰胺所致造血抑制小鼠粒系造血功能的影响 [J], 李振波;丘和明3.清毒饮和养正片对环磷酰胺所致的造血抑制小鼠粒系造血的影响 [J], 李振波;丘和明;刘国普;张惠臣;陈志雄;杨洪涌;陈志炼4.四种缓解化学药物治疗后骨髓抑制中成药对环磷酰胺所致小鼠血虚模型外周血和骨髓象的影响 [J], 苗明三;周立华;侯江红;陈纲领;张玉林5.红斑汤对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠外周血细胞及骨髓细胞CD34、CD45表达的影响 [J], 王洁;姚重华;杨旭明;夏嘉;苏晓因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
补肾益冲方对卵巢储备功能减退大鼠卵巢组织形态及性激素的影响
补肾益冲方对卵巢储备功能减退大鼠卵巢组织形态及性激素的影响简晓莉;刘志承;徐汉明;常瑞萍【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2024(36)1【摘要】目的:研究补肾益冲方对卵巢储备功能减退(DOR)模型大鼠卵巢功能的影响。
方法:选取雌性未孕SD大鼠40只,随机分为空白组、模型组、补肾益冲方组、补佳乐组。
除空白组外,其余大鼠采用雷公藤多苷片混悬液灌胃制备DOR大鼠模型,造模成功后分别给予补肾益冲方及补佳乐进行相应的治疗干预。
药物干预结束后,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测大鼠血清中抗苗勒管激素(AMH)、促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E_(2))、促黄体生成素(LH)的水平;HE染色观察大鼠卵巢组织的病理学形态变化。
结果:与空白组比较,模型组大鼠血清FSH和LH水平升高(P<0.05),AMH和E_(2)水平降低(P<0.05);卵巢中原始卵泡和生长卵泡的数量减少,闭锁卵泡增加;卵巢间质增生并纤维化。
补肾益冲方干预后,DOR大鼠血清中FSH 和LH激素水平降低(P<0.05),AMH和E_(2)激素水平升高(P<0.05);卵巢组织形态得到改善,原始卵泡和生长卵泡增多,闭锁卵泡减少。
结论:补肾益冲方对DOR大鼠卵巢组织形态、卵母细胞的数量和质量具有改善作用,能调节AMH、FSH、E_(2)和LH从而提高DOR大鼠的卵巢储备功能。
【总页数】4页(P1-4)【作者】简晓莉;刘志承;徐汉明;常瑞萍【作者单位】广州中医药大学第四临床医学院深圳市中医院;深圳市医院中药制剂研究重点实验室;北京大学深圳医院【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.补肾调冲方对半乳糖致卵巢早衰大鼠性激素水平和卵巢组织形态学的影响2.补肾益气和血方对卵巢储备功能下降大鼠血清性激素和卵巢组织VEGF及其受体蛋白表达的影响3.补肾调冲方对卵巢早衰大鼠性激素水平和卵巢组织形态学的影响4.加减益经汤对卵巢功能减退大鼠性激素与卵巢组织形态学的影响5.基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨益肾疏肝汤对卵巢储备功能减退大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴及卵巢颗粒细胞凋亡的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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补肾疏肝法对卵巢早衰模型小鼠的作用研究
发表时间：2010-09-14T13:17:04.280Z 来源：《中外健康文摘》2010年第19期供稿作者：王秀贤李群[导读] 中药治疗组从第3次免疫后开始灌服中药水煎剂。
王秀贤李群（邢台县第三医院 054001）
【中图分类号】R711.75 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085(2010)19-0166-02 【摘要】目的探讨补肾疏肝中药复方对实验性的卵巢早衰(POF)的防治作用。
方法将自身免疫性POF模型小鼠分为模型组和中药治疗组，治疗组在3次免疫后连续灌服中药复方,分析灌服中药后阴道脱落细胞涂片,外周血雌二醇(E2)浓度及受试动物卵巢滤泡和黄体数改变情况。
结果中药治疗组小鼠体内血清E2水平均比模型组高。
卵巢组织形态学分析显示,中药治疗组生长滤泡和黄体数均比模型组明显增加(P<0.05)。
结论补肾疏肝中药复方可使卵巢内残存的少数滤泡得以复苏,恢复部分卵巢功能。
【关键词】卵巢早衰补肾疏肝雌二醇
卵巢早衰（premature ovarian failure,POF）是指月经初潮年龄正常或青春期延迟、第二性征发育正常的女性在40岁之前出现闭经，其FSH和LH持续在40IU/L以上，FSH升高更明显，雌二醇（E2）常低于50～70pmol/L，孕酮（P）低于2nmol/L的一种综合征。
卵巢早衰常伴随其他内分泌自身免疫疾患,故其治疗比较困难[1-3]。
如何减缓卵巢功能衰退的速度以恢复卵巢功能,提高生活质量,是目前生殖内分泌临床研究的一项重要课题。
本研究给予实验小鼠连续灌服中药复方水煎剂，分析其生殖内分泌及卵巢形态学改变,以期探讨补肾疏肝方药防治POF动物模型的作用机制,为临床中药治疗POF提供理论及实验依据。
1 材料与方法
1.1 造模及给药 7～10周龄雌性小鼠40只,体重20-23g, 由河北医科大学实验动物中心提供。
均经阴道脱落细胞涂片筛查性周期正常。
随机分为2组，模型组和中药治疗组，每组20只。
各组小鼠均于双后脚掌掌心处进行皮下注射，每只小鼠注射液体0.1ml，注射CFA-Pzp3混合液，其中包含CFA0.05ml，Pzp350nmol。
每次免疫间隔2周,并且加强免疫2次。
中药治疗组从第3次免疫后开始灌服中药水煎剂。
剂量均相当于临床等效剂量的10倍(0.2ml/10g)。
1.2 药物及试剂补肾疏肝复方由熟地、枸杞子、覆盆子、淫羊藿、当归、山药、香附、红花、川芎等组成,并制成相当生药200%浓缩液。
小鼠透明带3(PZP3)由杭州中肽生化有限公司合成,弗氏完全佐剂(CFA)购自美国Sigma公司。
1.3 生殖内分泌指标每天早、晚8:00各一次取小鼠阴道脱落细胞涂片,于光学显微镜下观察其性周期。
在第3次免疫后17天取眶静脉血,并用颈椎脱位法处死小鼠,同时取卵巢待测。
1.4 自身免疫性卵巢炎组织形态学观察收集的卵巢经10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,切片常规HE染色,在光学显微镜下计数黄体及各个时期滤泡数量,取平均值。
1.5 统计学分析计量资料行均数t检验;计数资料行χ2检验。
2 结果
2.1 阴道脱落细胞涂片
小鼠正常性周期一般为4～5天,包括动情前期（9-18h）、动情期（6-12h）、动情后期（30-48h）和动情间期（36-42h）。
免疫后2周,模型组小鼠性周期紊乱，表现为性周期延长（至7-10天），甚至持续停留在动情期，与中药治疗组相比差异显著。
证明模型组小鼠的卵巢内卵泡发育延迟、不发育或卵泡不能成熟排卵。
经中药治疗后小鼠恢复正常性周期。
2.2 各组E2含量比较
中药治疗组E2含量比模型组显著升高,比较有显著性差异(P<0.05)。
2.3 自身免疫性卵巢组织炎形态学分析见表2。
中药治疗组黄体数目明显增加(包括新形成的黄体)，与模型组比较差异有显著性(P<0.01);生长滤泡大部分仍受到破坏,但滤泡数量明显多于模型组(P<0.01)。
2.4 E2含量与滤泡数的相关性分析
灌服中药后,实验鼠血清E2含量升高及生长滤泡数增加,二者之间呈明显正相关(r=0.74,P<0.05)。
表1 各组血清E2含量比较
组别 n E2(pg/ml)
中药治疗组 20 17.68±3.24
模型组 20 12.35±2.98
表2 各组小鼠卵巢滤泡及黄体计数比较
组别 n 始基滤泡初级滤泡生长滤泡黄体
中药治疗组 20 2.23±1.63 5.42±1.05 13.98±2.35 2.18±1.64
模型组 20 1.54±1.30 4.61±1.22 9.68±3.24 0.75±0.65
3 讨论
卵巢早衰的患者在40岁之前出现闭经、不孕不育及一系列更年期表现，如潮热、烦躁失眠、性交困难、骨质疏松等，在治疗上常以激素替代治疗为主，因其效果的局限性及有导致癌症等副作用，急需探索新的治疗方法。
本病在中医古籍中并无记载，而是分散于“血枯”“闭经”“不孕”等病证范畴。
中医脏腑学说认为肾主生殖,肾藏精,精生髓,肾为“先天之本”。
《素问》中明确指出肾气的盛衰主宰着天癸的至与竭、冲任二脉的盛衰以及月经的行与止，因此中医学认为肾虚是本病发生的病理机制。
而七情内伤，肝郁气滞血瘀，冲任阻滞，气血暗耗；或思虑过度，损伤心脾，冲任衰少而致闭经也是本病发生的重要机理。
正常小鼠阴道粘膜表层细胞随激素的波动而变化，本研究中模型组小鼠表现为性周期紊乱，性周期延长至7-10天，提示这些小鼠卵巢内卵泡较正常卵泡发育缓慢。
有的小鼠持续停留在动情期，表明这些小鼠卵泡不能发育成熟或不能排卵，因此无黄体生成，不出现动情后期的表现。
中药治疗组小鼠动情周期基本回复正常，说明补肾疏肝中药有较好疗效。
给小鼠灌服中药,卵巢生殖内分泌功能改善,组织形态学分析显示,卵巢黄体计数大于不服中药小鼠,生长滤泡数量亦比不服中药小鼠增加。
血清E2浓度比不服中药小鼠明显升高。
因此推测补肾疏肝中药参与调整生殖内分泌网络改善卵巢的内分泌功能。
灌服中药后卵巢黄体数量明显增加,提示中药可能不仅对卵巢直接起作用,还可能通过调整小鼠的下丘脑-垂体而对卵巢发挥作用。
参考文献
[1] Hoek A, Schoemaker J, Drexhage HA. Premature ovarian failure and ovarian autoimmunity. Endocr Rev 1997; 18∶107-114.
[2] Wheeler CA. Premature ovarian failure: treatment strategies.RI Med 1995;78∶130-131.
[3] Cust MP. The treatment of early ovarian failure. Curr Obstet Gynecol 1991;1∶15-19.。