不规则抗体筛查
不规则抗体筛查的重要性，你一定要知道！
不规则抗体筛查的重要性，你一定要知道！发布时间：2021-07-15T06:42:43.238Z 来源：《航空军医》2021年5期作者：陈玉碧[导读]（四川省巴中市中心血站检验科 636000）你知道什么是Rh（D）阴性血吗？Rh（D）阴性血是指红细胞表面不含D抗原的血液，红细胞表面含D抗原的血液，则称Rh（D）阳性血。
Rh（D）阴性血，通常被称为熊猫血，这类血型的人血液非常娇贵，可不要觉得他们是天之骄子，他们在输血时可发生溶血的情况，甚至发生严重的输血反应。
你知道什么是不规则抗体吗？不规则抗体是指血清中出抗A、抗B以外的其他血型抗体。
人体的血型抗体有IgG型抗体和IgM型抗体两类，大多数人的血型抗体主要为免疫性抗体，也就是所谓的IgG型抗体。
其中ABO血型系统中的抗A和抗B属于IgM型抗体，不能通过胎盘。
由于食物或外来物质在体内产生了抗A或抗B以外的抗体，都属于IgG型抗体，可以通过胎盘。
IgM型抗体在盐水介质中红细胞会与相应的抗体产生凝集现象，而IgG型系统的红细胞需要相应的生物酶或人球蛋白才能产生凝集现象，这就是传统ABO血型的鉴定方法，也就是说，传统的盐水血型鉴定和交叉配血实验，只能针对ABO血型系统有效，对于其他多种血型系统无效。
科普不规则抗体筛查的原理和方法不规则抗体筛查的原理：使用筛选细胞上存在的多种红细胞抗原与被被检血液的血清进行反映，若出现凝集现象，则表示血液中存在不规则抗体。
不规则抗体筛查的方法：抗人球蛋白实验、酶实验、盐水介质凝集试验等。
为什么要做不规则抗体的筛查不规则抗体的产生主要是通过输血、妊娠等刺激产生，其在盐水介质中无法形成凝集现象。
因此必须通过生物酶等方法才能刺激红细胞出现凝集反应。
在临床实践过程中，只有通过血型鉴定和抗体筛查，才有可能检测出ABO血型系统抗体以外的不规则抗体。
含有不规则抗体的血液用于患者，可能产生溶血反应。
筛查不规则抗体有什么临床意义1、虽然不规则抗体阳性的机率很小，但也不能忽略对不规则抗体的的筛查工作。
血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤
悬液浓度（%） 压实红细胞（滴） 盐水（滴）
2 1 2.0ml（40）
5 1 0.8ml（16）
10 1 0.4ml（8）
20 1 0.2ml（4）
2.为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取3个以上健康成人血液，按A、B、O型分别混合后，按上法制备。
弃去上清液，留约0.1ml，轻轻混匀
肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）
各试管分别加入重悬液2滴（100ul），轻轻混匀
肉眼观察凝集是否在1min内消失
显微镜检查
三.交叉配血试验（生理盐水法+凝聚胺法）
1.标本准备
分离供血者血浆与红细胞
三次洗涤，制备供血者2%-5%红细胞悬液
2.排管标记
血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤
一.血型鉴定
1.排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO正定型试管、患者ABO反定型试管、患者RhD定型试管。
2.标本准备 分离患者的血浆，取一滴压积红细胞，三次洗涤，制备患者2%-5%红细胞悬液。
3.加样
ABO正定型：1滴（50ul）抗A、抗B试剂加1滴（50ul）患者红细胞悬液。
排管，主侧、次侧及自身对照管
3.加样
各试管分别加入相应的备检血清2滴（100ul）及2%-5%备检红细胞悬液1滴（50ul）
4. 结果观察
离心（2档），观察结果
先看上清液有无溶血
轻
各试管分别加入低离子介质0.65ml，轻轻混匀（参照试剂说明书）
各试管再分别加凝聚胺溶液2滴（100ul）混匀，离心
ABO反定型：1滴（50ul）患者血清加1滴（50ul）反定型试剂红细胞。
RhD定型：1滴（50ul）抗D血清加1滴（50ul）患者红细胞悬液。
不规则抗体筛查标准操作规程
不规则抗体筛查标准操作规程(一)检验目的检测受血者、孕妇等血清中是否存在抗A、抗B以外的不规则抗体，为交叉配血、ABO血型正确定型(不规则抗体干扰反定型)以及新生儿溶血病产前、产后诊断提供参考依据。
(二)检验原理1.盐水介质法IgM类不规则抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应，使用手工试管法就可以判断受检者血液中是否存在IgM类不规则抗体。
2.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而被不规则抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断受检者血液中是否存在不规则抗体。
3.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
4.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，而未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、手工微柱凝胶法、手工玻璃珠微柱法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法不规则抗体筛查及鉴定试验。
(四)设备性能参数各种用于不规则抗体筛查试验的检测系统性能指标参见相应说明书。
(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型配血系统、阅片灯箱、卡式专用离心机、孵育器、塑料软试管、塑料硬质试管(75m m×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液器、一次性移液枪头。
不规则抗体筛查与鉴定 PPT
临床意义
献血者：防止含有不规则抗体的血液输注给病 人，避免溶血性输血反应
受血者：有助于血液选择，充分的时间选择相合 的血液
孕妇：早发现，孕期进行新生儿溶血病的预防和 治疗，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤 害
小结
1.不规则抗体两类：IgG型、 IgM型
面,但是不能和两个红细胞同 时结合（致敏） 3.加入抗人球蛋白
4.抗人球蛋白同时和两个 不完全抗体的Fc段结合， 从而把红细胞连接在一起
方法学评价
盐水介质法：最基本，检测IgM型血型抗体
聚凝胺介质法：速度快，实验时间5分钟左右 ； 不适合于Kell系统抗体的检测，但汉 族人群至今无Kell系统抗体检出报道
产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少
IgM抗体
多以五聚体形式存在，分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
IgG 抗体
单体形式存在，分子量较小 盐水介质中只能致敏相应抗原的红细胞，而不能
使之凝集，又称为不完全抗体 必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集
35.7nm
不规则抗体检测原理
14nm
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全 抗体致敏
2.加入聚凝胺，缩短红细 胞之间的距离，不完全抗 体同时与两个红细胞结合 使其特异性凝集
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
不完全抗体
抗人球蛋白介质法
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表
不规则抗体筛查
不规则抗体筛查卡式法
不规则抗体筛查卡式法不规则抗体筛查卡式法，听起来有点复杂对吧？别担心，我们今天就来聊聊这个话题，让它变得简单又有趣！大家都知道抗体是什么。
就像是身体里的小卫士，保护我们免受各种病菌的侵害。
不过，有些人呢，身体里会出现一些“不听话”的抗体，或者说是不规则抗体。
这些家伙就像是那种在球场上不守规矩的球员，时不时给你带来点麻烦。
没错，这就是我们要筛查的对象了。
什么是筛查卡式法呢？嘿，这个听起来可就像个科学实验室的高科技产品了。
其实吧，它就是一种简便、快速的检测方法。
想象一下，你在家里做实验，不需要太多的仪器，也不需要太复杂的步骤，简单易懂。
你只需要一张小卡片，加上一点样本，等待一段时间，就可以看到结果，轻轻松松。
就像在煮泡面，等个几分钟就可以吃上一碗热腾腾的美食，谁不爱呢？再说到这些不规则抗体，为什么要筛查它们呢？想想，身体里有个“小坏蛋”在作乱，肯定得赶紧找出来啊。
那些不规则抗体可能会导致各种疾病，像过敏反应、免疫系统紊乱，甚至更严重的病情。
筛查就像是医生的“侦探工作”，帮助找到潜在的健康隐患。
相信我，早发现早治疗，才是王道！这就好比在海里钓鱼，提前知道哪儿有鱼，绝对能大获全胜。
说到检测的过程，其实也没那么复杂。
你只需要用小针扎一下，取一点血液，像是在做一个小实验。
然后，把这点血液放到那张神奇的卡片上，等待个十几分钟，期间你可以喝杯茶，看看电视，完全不影响你的生活。
等到时间到了，看看卡片上的结果。
如果出现了一条线，那恭喜你，没问题！如果有两条线，哎呀，可能就得去医院进一步检查了。
这卡式法还有个大优点，操作方便，结果直观。
就像是考试成绩一样，分数高低一目了然，谁也不用再去揣测。
很多人都害怕去医院抽血，想象中都是一阵紧张，结果搞得自己心慌慌的。
可这卡式法，简直就是解放双手，既省时又省力，真是给人一种“轻松搞定”的感觉。
这个方法也不是万能的。
有些复杂的情况，可能还得通过其他的检测手段来进一步确认。
不过，作为初步筛查，卡式法无疑是个好选择。
不规则抗体筛选和鉴定标准操作规程
不规则抗体筛选和鉴定标准操作规程1.检验目的不规则抗体筛选和鉴定可在交叉配合之前进行或一起进行，这样有利于患者抗体的早期确认及鉴定，发现临床上有意义的抗体，避免一些可能的情况而造成病情的延误。
2.检验方法分盐水介质法、抗球蛋白法和微柱凝胶法。
3.检验原理让待检者的血清与已知血型的试剂红细胞即筛选红细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套）起反应，以发现在37℃中有反应活性的抗体。
这种抗体可引起新生儿溶血病、溶血性输血反应、或使输入的红细胞存活期缩短等。
当不规则抗体筛选试验阳性后，再进行不规则抗体鉴定，即利用谱红细胞（11套鉴定细胞）与待检者的血清反应，根据反应结果判断机体所产生的同种抗体类别。
4.标本要求受检者不抗凝静脉血4.0ml，分离血清，48小时内使用5.试剂5.1.筛选红细胞：由2或3人份的O型红细胞组成为一套试剂，每套试剂筛选红细胞中至少有以下常见的抗原：D、C、E、c、e、M、N、S、s、P、Le a、Le b、K、k、Fy a、Fy b、Jk a、Jk b等。
每次用3套试剂（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）进行抗体筛选，见表1005-1。
5.2.鉴定谱细胞：除包括常见的抗原以外还有：C w、Kp a、Kp b、Js a、Js b、Lu a、Lu b、Xr/min a等。
每次用11套试剂进行抗体鉴定，见表1005-2。
5.3.抗球蛋白试剂：多特异性抗球蛋白血清（IgG、C3d）。
5.4.致敏红细胞（质控细胞）。
5.5.0.9%生理盐水。
5.6.Coombs微柱凝胶卡。
6.器材试管、吸管、37℃水浴箱、台式离心机、滤纸、微量加样器等。
7.操作程序7.1.盐水介质法7.1.1．取受检者血清2滴于标记有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的3支小试管中。
7.1.2．对应加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套2%～5%筛选红细胞生理盐水悬液1滴，37℃孵育30分钟。
7.1.3.以3000r/min离心10秒，观察凝集和溶血情况，并记录反应情况于表1005-1中。
如果抗体筛选试验阳性，继续做以下试验。
不规则抗体筛查及鉴定培训7.27
情况一：抗筛阳性反应强度不一，自身对照阴性
表型与抗体互相验证
情况二：抗筛全部呈阳性反应，反应强度大致相同， 自身对照阳性
情况二：抗筛全部呈阳性反应，反应强度大致相同， 自身对照阳性
3 抗筛阳性输血原则
抗筛阳性患者输血
确认只有不规则抗体
自身（-）、抗体筛选（+）
配血时患者血清中的同种抗体与供 者红细胞上相应抗原起反应。
P 血型 系统抗体
最常见的表型 ：P1、P2 P1 红细胞上有两种不同的 抗原：P1 和 P；P2 红细胞 上只有 P 抗原，可以产生 抗-P1。
不规则抗体种类（其他）
Lewis血型系统抗体： 多为IgM类，属自然产生的抗体，37℃一般不发生反应
Lutheran 血型系统抗体： LU抗原剂量效应，导致混合凝集、临床意义一般不大
结果判读：根据谱细胞的反应格局一般可以鉴定常见的抗体,但有 一定的局限性，有可能漏检常见的组合抗体
排除法：纯合子表达抗原无反应则直接排 除对应的抗体（举例：与5号细胞dCCee、11 号细胞DCCEe、12号细胞DCcEE反应均为阴性， 表明不存在单特异性抗-C）
情况一：抗筛阳性反应强度不一，自身对照阴性
操作:抗体鉴定谱细胞分别与被检血清进行间接抗球 蛋白试验，同时做自身对照
自身细胞检查：确定患者血清内是否有自身抗体或自身抗体与同 种抗体并存，只有是阴性时，才能排除自身抗体或其他凝集素导 致的谱细胞凝集；
使用试剂谱细胞：谱细胞一般是由8～16单人份的已知血型表型的O 型红细胞配套组成，具有各种不同的抗原成分；
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全抗体致敏
2.加入聚凝胺，缩短红细胞之间的距离，不完全 抗体同时与两个红细胞结合使其特异性凝集
不规则抗体筛查
不规则抗体检查不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。
不规则抗体是指抗Ａ、抗Ｂ以外的血型抗体。
ＡＢＯ系中的亚型,变异型抗Ａ1或某种抗Ｂ等抗体,也称为不规则抗体。
其多为ＩｇＧ抗体。
主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。
临床上通常所称的“同型血”实际上是指ＡＢＯ血型系统和Ｒｈ血型系统相同,其它红细胞血型系统未必相同。
如果交叉配血不仔细,或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ＡＢＯ血型系统之外的不规则抗体,而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生。
红细胞血型抗体检查适用于下列情况：1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时；2、供血者血清抗体筛检；3、输血前受者血清抗体检查；4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时；5、孕妇血清的抗体检查；6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查；7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。
1. 原理利用筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应，如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体。
2. 试剂2.1 5%筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）2.2 凝聚胺试剂2.3 直接抗人球试剂外周血或静脉血3. 操作步骤3.1 取试管三支，标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清（血浆）2滴，加5%筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）各1滴。
3.2 各加LIM0.7ml，混合均匀后，再各加Polybrene 溶液2滴，并混合均匀。
3.3 用BASO专用离心机1000G离心力，离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。
3.4 轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重作。
3.5 最后加入Resuspending 2滴，轻轻转动试管混合并同时观察结果。
如果凝集散开，表示是由Polybrene引起的非特异性聚集，抗体筛检结果为阴性；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，抗体筛检结果为阳性，应进一步作抗体鉴定。
不规则抗体筛查试验
不规则抗体筛查试验（SOP）【产品名称】通用名称：不规则抗体检测试剂（人血红细胞）英文名称：Red Blood Cells Reagent for Irregular Antibody Test【包装规格】每盒有OⅠ、OⅡ、OⅢ红细胞各1瓶，5ml/瓶，浓度4%。
【生产企业】企业名称：长春博迅生物技术有限责任公司【预期用途】有临床意义的不规则抗体会导致溶血性输血反应，破坏输入的红细胞或缩短其寿命，轻则影响治疗效果，重则危及病人生命；对于孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病，影响新生儿脏器及智力发育，严重者则会危及新生儿的生命。
对受血者和献血者进行不规则抗体检测，能够发现有临床意义的抗体，从而减少溶血性输血反应。
本品采用凝聚胺方法检测待检血浆（血清）是否存在不规则抗体，只用于临床检测，不用于血源筛查。
【检验原理】本实验原理为血凝试验。
红细胞上含有D、C、E、c、e、Jk a、Jk b、M、N、s、Fy a、Fy b、k、Le a、Le b、P1，该实验用已知抗原的红细胞与待检血浆（血清）孵育，以发现待检血浆（血清）中是否存在不规则抗体。
【主要组成成份】本品由3人份（单人份/瓶）直接抗人球蛋白试验阴性的O型健康成人红细胞组成，红细胞上含有能引起溶血性输血反应的抗原，抗原谱至少包括Rh系统的D、C、E、c、e抗原，Kidd系统的Jk a、Jk b抗原，MNS系统的M、N、s抗原，Kell系统的k抗原，Duffy系统的Fy a、Fy b抗原，Lewis系统的Le a、Le b抗原，P系统的P1抗原。
每套试剂红细胞中至少有2人份红细胞含有D、C、c、e、s、Fy a、k抗原，至少1人份红细胞含有E、Jk a、Jk b、M、N、Fy b、Le a、Le b、P1抗原。
OⅠ红细胞5ml×1OⅡ红细胞5ml×1OⅢ红细胞5ml×1不同批号的红细胞试剂不可以互换。
【储存条件及有效期】2~8℃保存。
不规则抗体筛查试验操作规程
XXX医院不规则抗体筛查试验操作规程1.目的为规范红细胞不规则抗体筛选、鉴定的技术操作,保证检查结果准确和临床输血安全、有效,依据输血实验室管理程序有关条款的要求制定本规程;2.适用范围本规程适用于本院红细胞不规则抗体的筛查;3.职责输血科具有专业技术资格的人员负责红细胞不规则抗体的筛选和鉴定,但只对所筛选或鉴定的标本负责;4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理采用盐水介质法、凝聚胺法或抗球蛋白法等试验使受检者血清血浆与筛选红细胞反应,检测受检者血清血浆中是否存在红细胞不规则抗体,红细胞不规则抗体阳性者进一步与谱红细胞反应,根据反应格局鉴定抗体特异性;7.仪器设备和检测环境7.1.仪器设备等：玻璃试管75X12mm、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱;7.2. 检测环境：室温应控制在18~27℃,湿度应保持在30~70%;8.试剂①生理盐水、凝聚胺试剂、直接抗人球蛋白试剂抗IgG,C3d,均为有合格证件的正品;②市售O型筛选红细胞：为三支以上不同人份的3%筛选红细胞,均为有合格证件的正品;抗凝血标或自制O型筛选红细胞：选择已确认ABO血型为O型的健康者,采集EDTAK2本离心,取少许红细胞置于试管中,用生理盐水离心洗涤3次得压积红细胞3400转/分钟1000g,每次离心1分钟,离心后将上清液全部倒出,再取30µl游离红细胞加入到标记为Ⅰ号的试管中,然后加入1ml生理盐水混匀,即得Ⅰ号O型3%的筛选红细胞；依同样方法分别制备不同人份的Ⅱ号和Ⅲ号O型3%的筛选红细胞;9.血标本的处理将受检者血标本离心分离出血清血浆和压积红细胞,血清血浆备用；再吸取30µl压积红细胞中的游离红细胞,加入1ml生理盐水中,混匀配成3%的自身对照红细胞悬液备用;10.实验方法与步骤10.1.盐水介质法①取4支干净试管,分别标记为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和自身对照；②每管中先各加入2滴受检者血清血浆；③再分别加入1滴对应的3%的Ⅰ号、Ⅱ号、Ⅲ号筛选红细胞和自身对照红细胞悬液；④混匀后,用交叉配血专用离心机120 g离心1分钟；⑤先肉眼观察溶血情况,再轻轻充分混匀后,用肉眼或光学显微镜观察凝集情况,并记录;⑥结果判读：自身对照管和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管均无凝集者,为不规则抗体筛查阴性,表明未检出红细胞不规则抗体；自身对照管和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管均凝集者,为不规则抗体筛查阳性,表明受检者血清血浆中含冷自身抗体或同时伴有同种免疫性红细胞不规则抗体；自身对照管无凝集,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管中至少有1管出现凝集,为不规则抗体筛查阳性,表明受检者血清血浆中含IgM同种免疫性红细胞不规则抗体;10.2.凝聚胺法①盐水介质法筛选红细胞不规则抗体试验结束后转做凝聚胺法试验,具体执行凝聚胺法交叉配血试验操作规程;②结果判读：自身对照管和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管均无凝集者,为不规则抗体筛查阴性,表明未检出红细胞不规则抗体；自身对照管和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管均凝集者,为不规则抗体筛查阳性,表明受检者血清血浆中含IgG自身抗体或同时伴有IgG同种免疫性红细胞不规则抗体；自身对照管无凝集,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号管中至少有1管出现凝集,为不规则抗体筛查阳性,表明受检者血清血浆中含IgG同种免疫性红细胞不规则抗体;10.3.直接抗人球蛋白法①盐水介质法筛选红细胞不规则抗体试验结束后转做直接抗人球蛋白试验,具体执行直接抗人球蛋白试验操作规程;②结果判读：同10.2. ②;10.4.红细胞不规则抗体特异性鉴定对红细胞不规则抗体筛选试验阳性的血标本,建议受检者到省级以上三甲医院作进一步的红细胞不规则抗体特异性鉴定;11.质量控制11.1.进行红细胞不规则抗体筛选试验时,应至少选择1种可检出IgG抗体的方法;11.2.所有试剂均应在有效期内使用,每批试剂使用前均应对试剂进行质量控制,以确保质量符合要求;11.3.操作时,应同步设置必要的阴性、阳性和自身对照;12.注意事项12.1.多数IgG类红细胞不规则抗体比IgM类红细胞不规则抗体更有临床意义,盐水介质法通常只能检出IgM类红细胞不规则抗体,不宜单独采用盐水介质法检测红细胞不规则抗体,可结合凝聚胺法或抗球蛋白法;12.2.理论上,凝聚胺法除不能检出抗-K外,其它红细胞血型抗体均可检出,但实际工作中许多红细胞血型弱抗体包括IgM和IgG类不能被凝聚胺法检出,对部分IgM类血型抗体的检测,凝聚胺法甚至没有盐水介质法敏感;12.3.抗球蛋白法对有临床意义的IgG类抗体检测敏感,且可鉴别多数无临床意义的抗体,但本方法操作复杂、费时,目前尚不能实现自动化,不适合批量血标本的检测;12.4.红细胞不规则抗体筛选试验检出自身抗体时,应采用自身吸收试验后,再检测血清血浆中是否还有同种不规则抗体;12.5.用于红细胞不规则抗体筛选试验的筛选细胞,应尽可能多地表达有临床意义的抗体对应的抗原,而且纯合子基因所表达的抗原更有利于相应抗体的检出;要求筛选细胞必须表达D、C、E、c、e、M、N、S、s、P、Le a、Le b、K、k、Fy a、Fy b、Jk a和Jk b18种抗原;12.6.由于用于红细胞不规则抗体筛选试验的筛选细胞很难表达所有有临床意义的抗体对应的抗原,以往免疫所产生的抗体也可降至难以检出的水平,故无论采用何种方法进行红细胞不规则抗体筛选试验,都有漏检由临床意义抗体的可能;12.7.自身抗体和同种抗体可同时存在,也可能有多种同种抗体同时存在,还可能有联合抗体存在,故实际工作中常会遇到难以鉴定红细胞不规则抗体特异性,可送有条件的实验室进行鉴定;。
不规则抗体筛查试验操作规程
XXX医院不规则抗体筛查试验操作规程1.目的为规范红细胞不规则抗体筛选、鉴定的技术操作，保证检查结果准确和临床输血安全、有效，依据《输血实验室管理程序》有关条款的要求制定本规程。
2.适用范围本规程适用于本院红细胞不规则抗体的筛查。
3.职责输血科具有专业技术资格的人员负责红细胞不规则抗体的筛选和鉴定，但只对所筛选或鉴定的标本负责。
4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理采用盐水介质法、凝聚胺法或抗球蛋白法等试验使受检者血清（血浆）与筛选红细胞反应，检测受检者血清（血浆）中是否存在红细胞不规则抗体，红细胞不规则抗体阳性者进一步与谱红细胞反应，根据反应格局鉴定抗体特异性。
7.仪器设备和检测环境7.1.仪器设备等：玻璃试管(75X12mm)、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱。
7.2. 检测环境：室温应控制在18~27℃，湿度应保持在30~70%。
8.试剂①生理盐水、凝聚胺试剂、直接抗人球蛋白试剂（抗IgG,C3d），均为有合格证件的正品。
②市售O型筛选红细胞：为三支以上不同人份的3%筛选红细胞，均为有合格证件的正品。
或自制O型筛选红细胞：选择已确认ABO血型为O型的健康者，采集EDTAK抗凝血2标本离心，取少许红细胞置于试管中，用生理盐水离心洗涤3次得压积红细胞[3400转/分钟（1000g），每次离心1分钟，离心后将上清液全部倒出]，再取30µl游离红细胞加入到标记为Ⅰ号的试管中，然后加入1ml生理盐水混匀，即得Ⅰ号O型3%的筛选红细胞；依同样方法分别制备不同人份的Ⅱ号和Ⅲ号O型3%的筛选红细胞。
不规则抗体筛查收费项目
简介
不规则抗体筛查是一项检测人体血液中不规则抗体的检查。
不规则抗体，也称为不完全抗体，是指那些不能通过常规血清学检测方法检测到的抗体。
这些抗体通常在输血、怀孕或其他免疫刺激后产生，可能对患者的输血治疗产生重要影响。
不规则抗体筛查的目的主要是为了确保患者在接受输血治疗时能够获得安全的血液产品。
在不规则抗体筛查中，医生会收集患者的血液样本，并通过特定的检测方法来寻找不规则抗体的存在。
这些检测方法可能包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫固定电泳等。
不规则抗体筛查的费用因地区和医疗机构而异。
在中国，根据不同的地区和医疗机构，费用可能在数百元人民币到上千元人民币之间。
不规则抗体筛查通常不被纳入基本医疗保险报销范围，但具体情况可能因地区而异。
不规则抗体筛查对于需要定期输血的患者尤其重要，如重型地中海贫血患者、白血病患者等。
通过筛查不规则抗体，医生能够更好地选择合适的血液产品，降低患者在输血过程中出现排斥反应的风险，从而提高治疗效果和患者的生活质量。
总之，不规则抗体筛查是一项重要的医疗服务，能够确保患者在接受输血治疗时的安全。
尽管存在费用问题，但对于需要定期输血的患者来说，这项检查的潜在益处是显而易见的。
不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响
不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响产前不规则抗体筛查是预防新生儿溶血病的重要手段。
然而，对于高危孕妇，仅进行抗体筛查可能不足以及时发现溶血危险，因此必须进行进一步的血清学测试以确定抗体的特异性和效价。
本文旨在探讨不规则抗体筛查及效价对新生儿溶血病的影响。
在胎儿溶血病中，母体与胎儿之间的Rh血型差异是导致危险的最常见原因。
血型不合，如Rh阴性母亲与Rh阳性胎儿，则母体可能会产生抗Rh-D不规则抗体，这些抗体可穿过胎盘，在胎儿红细胞表面结合并诱导免疫反应。
如果胎儿红细胞破坏过于严重，可能会导致黄疸、贫血、肝脾大、死亡等不良后果。
一般来说，不规则抗体筛查应在产前进行，以检测母亲体内的不规则抗体。
考虑到母亲身体内可能存在多种不同的不规则抗体，应尽可能筛查出所有可能的不规则抗体，并确定各个抗体的特异性和效价。
这样可以更好地了解母亲胎儿间溶血危险的评估。
抗体效价可用于评估溶血危险，大多数情况下准确预测了新生儿的黄疸和需要输血的风险。
当母亲体内不规则抗体存在时，抗体效价对于安排产前防护性治疗和产后监测非常有用。
在高效价抗体（>16）存在的情况下，更容易发生严重的胎儿红细胞破坏，因此，这是进行胎儿治疗或引产的指征。
在筛查和监测期间，进行不规则抗体效价的测试具有相当的重要性。
与临床检测相关的因素，例如涉及诊断和疾病预后的敏感性和特异性，均可能影响效价的测量。
因此，应使用高度规范化和准确的试剂和测量方法，以保证结果的准确性和再现性。
总之，产前不规则抗体筛查和效价检测是评估母婴溶血危险及制定预防措施的重要措施。
对于在危险范围内的孕妇，及时进行有效评估和治疗，可以降低新生儿溶血病的风险，保障母婴健康。
不规则抗体筛查标准操作规程
不规则抗体筛查标准操作规程(一)检验目的检测受血者、孕妇等血清中是否存在抗A、抗B以外的不规则抗体，为交叉配血、ABO血型正确定型(不规则抗体干扰反定型)以及新生儿溶血病产前、产后诊断提供参考依据。
(二)检验原理1.盐水介质法IgM类不规则抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应，使用手工试管法就可以判断受检者血液中是否存在IgM类不规则抗体。
2.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而被不规则抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断受检者血液中是否存在不规则抗体。
3.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
4.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，而未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、手工微柱凝胶法、手工玻璃珠微柱法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法不规则抗体筛查及鉴定试验。
(四)设备性能参数各种用于不规则抗体筛查试验的检测系统性能指标参见相应说明书。
(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型配血系统、阅片灯箱、卡式专用离心机、孵育器、塑料软试管、塑料硬质试管(75m m×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液器、一次性移液枪头。
【2017年整理】不规则抗体筛查与血型抗体效价
不规则抗体筛查●申请单项目：不规则抗体筛查●标本要求：EDTA抗凝管抽取2ml，标本不得有溶血、脂血及凝块，否则视为不合格标本给予退回。
●检测时间：每次收取标本，当天发出报告。
●费用：50元/次●临床意义：不规则抗体是指抗-A、抗-B或抗AB以外的其他抗体。
目前不规则抗体的筛查方法是采用O型试剂红细胞检测被检者的血清中的不规则抗体。
由于有临床意义的不规则抗体会导致溶血性输血反应，破坏输入的不配合的红细胞或缩短其寿命，产生溶血性输血反应，轻则影响治疗效果，重则危及病人生命；此外，对孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病，影响新生儿脏器的发育，并使其智力发育受到伤害，严重者则会危及新生儿的生命安全。
因此，抗筛选择是很必要而且必须的。
●其筛选的意义主要在三个方面:1.献血者的血清或血浆进行抗体筛查，可以防止有不规则抗体的血液输注给病人，避免由于献血者血液中的不规则抗体引起病人红细胞的破坏二引起的溶血性输血反应，同时可以减少血液浪费，可将有不规则抗体的血液制备成抗体血清，用于稀有血型的检测。
2.对需要输血治疗的患者，进行不规则抗体筛查，可以有助于血液的选择，从而有充分的时间来选择不含有针对某抗体的影响抗原的血液，从而防止因为输注含有某种抗体相应抗原的血液而引起溶血性输血反应，保证输血安全。
3.孕妇进行不规则抗体筛查，可以尽早发现不规则抗体，可以在孕期进行新生儿溶血病的预防和防治，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤害，减少新生儿溶血病的程度，提高胎儿或新生儿的身体素质。
反复输血或多次妊娠可以使患者受到免疫刺激而产生不规则抗体。
因此，输血前对有输血史，人生史的患者进行不规则抗体筛查非常必要，有利于早起发现和确认具体有临床意义的抗体并可以在配血前鉴定此抗体，已获得充足的时间来选择缺乏相应抗原的相配合的供者，确保输血安全。
临床意义：1.孕妇及产妇必查此项目。
2.有输血史者（血制品），输血前必查此项目。
3.建议入院检测血型时一同检测，每次输血前检测。
不规则抗体筛查与血型抗体效价
不规则抗体筛查与血型抗体效价不规则抗体筛查? 申请单项目：不规则抗体筛查 ? 标本要求：EDTA抗凝管抽取2ml，标本不得有溶血、脂血及凝块，否则视为不合格标本给予退回。
? 检测时间：每次收取标本，当天发出报告。
? 费用：50元/次? 临床意义：不规则抗体是指抗-A、抗-B或抗AB以外的其他抗体。
目前不规则抗体的筛查方法是采用O型试剂红细胞检测被检者的血清中的不规则抗体。
由于有临床意义的不规则抗体会导致溶血性输血反应，破坏输入的不配合的红细胞或缩短其寿命，产生溶血性输血反应，轻则影响治疗效果，重则危及病人生命；此外，对孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病，影响新生儿脏器的发育，并使其智力发育受到伤害，严重者则会危及新生儿的生命安全。
因此，抗筛选择是很必要而且必须的。
? 其筛选的意义主要在三个方面:1.献血者的血清或血浆进行抗体筛查，可以防止有不规则抗体的血液输注给病人，避免由于献血者血液中的不规则抗体引起病人红细胞的破坏二引起的溶血性输血反应，同时可以减少血液浪费，可将有不规则抗体的血液制备成抗体血清，用于稀有血型的检测。
2.对需要输血治疗的患者，进行不规则抗体筛查，可以有助于血液的选择，从而有充分的时间来选择不含有针对某抗体的影响抗原的血液，从而防止因为输注含有某种抗体相应抗原的血液而引起溶血性输血反应，保证输血安全。
3.孕妇进行不规则抗体筛查，可以尽早发现不规则抗体，可以在孕期进行新生儿溶血病的预防和防治，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤害，减少新生儿溶血病的程度，提高胎儿或新生儿的身体素质。
反复输血或多次妊娠可以使患者受到免疫刺激而产生不规则抗体。
因此，输血前对有输血史，人生史的患者进行不规则抗体筛查非常必要，有利于早起发现和确认具体有临床意义的抗体并可以在配血前鉴定此抗体，已获得充足的时间来选择缺乏相应抗原的相配合的供者，确保输血安全。
? 临床意义：1.孕妇及产妇必查此项目。
2.有输血史者（血制品），输血前必查此项目。
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不规则抗体检查
不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。
不规则抗体就是指抗Ａ、抗Ｂ以外得血型抗体。
ＡＢＯ系中得亚型，变异型抗Ａ1或某种抗B等抗体,也称为不规则抗体。
其多为ＩｇG抗体。
主要就是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原得红细胞，必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。
临床上通常所称得“同型血”实际上就是指AＢＯ血型系统与Rｈ血型系统相同，其它红细胞血型系统未必相同。
如果交叉配血不仔细，或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ＡBＯ血型系统之外得不规则抗体,而此抗体与相应抗原发生免疫反应，可导致溶血性输血反应得发生。
红细胞血型抗体检查适用于下列情况：1、AＢO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时;2、供血者血清抗体筛检；3、输血前受者血清抗体检查;4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时;5、孕妇血清得抗体检查;6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查；7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体得检查.
1、原理
利用筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）上存在得多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应,如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体.
２、试剂
２、1 5％筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）
2、2 凝聚胺试剂
２、3 直接抗人球试剂
外周血或静脉血
3、操作步骤
３、１取试管三支，标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清(血浆）2滴，加5％筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）各1滴。
３、2 各加LIM0、７mｌ，混合均匀后,再各加Polybｒｅne 溶液２滴，并混合均匀。
３、３用BAＳO专用离心机1000G离心力，离心10秒,然后把上清液倒掉，不要沥干,让管底残留约0、１ml液体。
3、4 轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重作。
３、５最后加入Reｓuspenｄｉng 2滴,轻轻转动试管混合并同时观察结果。
如果凝集散开，表示就是由Ｐolybreｎe引起得非特异性聚集，抗体筛检结果为阴性；如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合得特异性反应，抗体筛检结果为阳性,应进一步作抗体鉴定。
4、筛选Ⅰ号细胞，筛选Ⅱ号细胞，筛选Ⅲ号细胞。
对应得细胞反应格局表一张.
红细胞血型抗体筛选细胞反应格局表
4、临床意义
虽然不规则抗体筛选阳性率仅为0、37％,但就是该项阳性得患者一旦输入具有相应抗原得红细胞,抗原、抗体发生免疫性结合，在
补体得参与下,使输入得红细胞发生溶解,即发生溶血性输血反应。
患者出现发热、贫血、黄疸与血红蛋白尿，严重时甚至危及其生命.因此,在输血中要经常警惕这种输血反应发生得可能性。
当不规则抗体筛选阳性时，必须进一步作抗体鉴定，确定其特异性后,再输入无相应抗原得红细胞，才能达到安全输血之目得.
新生儿溶血病(ＨDN）也就是由于母亲体内存在着与其胎儿红细胞不配合得ＩgＧ性质得不规则抗体，引起得同种被动免疫性疾病。
凡就是以IgG性质出现得不规则抗体,理论上都可以引起ＨＤN,因为ＩｇG性质抗体能通过胎盘进入胎儿血循环,破坏胎儿红细胞，引发胎儿水肿、黄疸、贫血与肝脾肿大，甚至并发核黄疸。
因此对有输血史或妊娠史得孕妇也应作不规则抗体筛选,若检测出不规则抗体，应作出相应得预防与治疗。
Ｒｈ血型中Ｄ抗原得抗原性强于Ｅ抗原得抗原性，因此产生抗D抗体得几率大于抗-E抗体。
抗A1抗体为Ａ亚型中不规则抗体，它得存在提示我们在注意ＡBＯ血型以外得不规则抗体得同时,也应高度重视ABO亚型中得不规则抗体，因为它也就是引起溶血性输血反应得一个因素。
抗M抗体为冷凝集素,很少在37℃有活性,一般在体内不能引起溶血反应,但患者处于低温麻醉状态下手术时应注意，因为此类抗体可激活补体。
当机体得体温在冷抗体最适反应温度范围内（4～２0℃)时,可发生溶血反应。
不规则抗体产生大多为Rｈ血型系统，除抗Ｄ外,其她如抗Ｅ，抗Ec,抗Ｃe检出率占Ｒｈ系统67、8%,提示Rh阳性患者输血也可引起溶血反应,且机率较高、根据我国汉族人群Ｒh抗原分布特点，Ｅ抗原阳性比D抗原阳性低,产生抗E抗体得机率高于抗D抗体，故Rh血型系统D抗原阳性E抗原阴性者输血不容忽视、Ｒｈ阴性个体免疫后产生抗Ｄ得机率为70、9%，产生得抗体其效价在体内会逐渐下降，甚至常规试验会漏检，若以后作为受血者输入Ｒh（Ｄ）阳性
血刺激时，会很快出现免疫性回忆反应、抗体效价会在1～2ｗｋ内达到高峰,引起迟发性血管外溶血，且发生在输血后几天、造成得输血无效以及溶血,易被临床忽视、溶血反应得强度与抗体效价成正比关系,抗体产生得强度增加溶血反应愈严重、抗M、抗Ｌea、抗P1均较少见,但抗Ｌｅａ抗体可引起严重得溶血性输血反应，所以不能作为供血者,如为受血者时应给Ｌe(ａ—ｂ－）血液输入、抗M抗体只有3７℃或抗球蛋白试验出现阳性时才具有临床意义、抗P1最理想得反应温度为4℃,偶可在3７℃查出、抗Ｐ1抗体很少在体内造成溶血，几乎总就是ＩｇM型抗体，所以不能通过胎盘，不会造成H ＤN、冷凝集素在配血时可忽略、自身抗体在自身溶血性贫血时出现较多，一直以来就是输血得一大难题,我们仍遵循一般输血原则、综上所述，不规则抗体就是引起溶血性输血反应与新生儿溶血病得主要因素之一，对输血发生溶血性反应所引起肾衰、死亡病例得诊断有临床意义。
因此为了保证输血安全,提高输血疗效，减少或杜绝溶血性输血反应得发生,不规则抗体检查必须作为输血前检查得重要项目之一。