细胞培养箱的清洁和消毒

细胞培养箱的清洁和消毒

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1. 培养箱消毒：先用纯水擦洗，再用95的酒精擦洗，再照紫外就可以拉！注意周围环境的清洁就不会那么容易污染的

拉！

2. 我的经验是在补充水时最好把水加热一下，达到培养箱的温度。

3. 这么早就养细胞了，我们这里一般是用70％的乙醇擦洗，然后再用0.1％的新洁尔灭擦洗，不放心的话再用高锰酸

钾加甲醛1：1比例熏一遍。注意要是熏的话千万注意混合之后马上离开，然后密闭细胞培养室，味道很刺激的。最好在养细胞前消毒，否则，确实没地方放细胞。

4. 我们的方法比较简单，先用75%酒精擦拭内壁，通风10分钟，紫外线照射30分钟即可。

5. 我们的通常处理是先用75%的酒精擦拭内壁，然后用甲醛+高锰酸钾熏蒸一个晚上，然后通风一整天（同时打开紫外

线照射）。

6. 我们是把培养箱里的板层拿出来高压一下，箱壁用75％酒精擦一遍，换用诗乐氏擦一遍，再紫外照一夜，效果很好，

其他的请高手指教。

7. 熏蒸后吹一天是绝对不够的，最起码要一个星期才可以让甲醛散尽，要不细胞长不好的

8. 有的培养箱能加热内壁到90度，也有的带有紫外线功能。常规应该每周用酒精擦洗内部一次。具体的操作请参考培

养箱的手册，或着咨询培养箱技术支持。使用消毒剂应小心，培养箱内有检测温度、湿度和二氧化碳浓度的传感器，腐蚀性消毒剂或有机溶剂有可能损坏某些器件，请慎用。另外，挥发性的甲醛有毒，易燃、易爆。如果在培养箱内残留甲醛的话，细胞会死光光哦（我实验室的真实故事）。总之，先看培养箱手册，再联系技术支持，方可万无一失啊。

9. 常规最好什么也不放！硫酸铜的作用是抑制细菌生长（但多数用在处理污染的孔板）。因为现在的孵箱都有抑菌功

能。

10. 我们实验室的做法:把平皿高压灭菌后,在无菌操作台内加入适量的灭菌双蒸水或者生理盐水.再加少量新洁尔灭,

浓度没关系.细胞养的都可以.

11. 我建议

1 最好先把培养箱彻底消毒.具体方法也是用75%的酒精好好清洗培养箱.

2,操作时严格按照无菌操作的原则

3 我认为双抗的更换问题倒是不大,除非你正在使用的是污染的抗生素.

4 尽量减少观看细胞的次数及时间.

12. 我们实验室清洁培养箱的方法：用洗衣粉或洗洁精洗一遍——清水冲净——84消毒液洗——清水冲净——75％酒精擦洗一遍

13. 这是我们实验室常规的培养箱消毒方法（一般一个月一次），希望对你会有用

14. 首先把培养箱里的东西全部取出，放尽培养箱里的三蒸水；反复用三蒸水冲洗培养箱，然后用75%酒精擦3遍，之后再用三蒸水擦3遍；培养箱里的架子先用自来水反复冲洗，然后用蒸馏水、三蒸水、75%酒精各擦3次，于紫外下照射消毒1 h左右；最后将三蒸水（里面应加少许染料）加入培养箱，将消毒好的架子放入即

15. 培养箱应放置无菌室,水中应加适量的叠氮钠(防腐)或者硫酸铜,注意空气消毒.

16. 消毒培养箱的常用方法有两种：

把细胞移出，记住拧紧瓶盖，通常放在超净台内，室温一两个小时，问题不大。如培养室有空调，也可将空调打开。然后先用75%酒精棉球擦拭培养箱内壁，注意不要漏掉任何一个角落。擦拭两遍后用一蒸水或二蒸水清洗内壁，可多清洗几遍。最后用消过毒的棉球或75%酒精棉球把内壁再擦拭一遍即可。整个操作没有必要在无菌条件下。最后可在培养箱的水里加上亚甲基蓝，混匀即可。亚甲基蓝溶液可起到一定的抑菌杀菌作用。待培养箱内酒精几乎挥发完时，将细胞放入培养箱中。还有一种办法就是直接用蒸馏水清洗完，然后再用紫外灯照(最好是那种培养箱里就带有紫外灯的，就方便多了。)

通常培养箱是需要定期清洗的，我们室是1-2月清洗一次，当然这要根据细胞养的多少和培养箱使用的频繁程度来决定的。

17. 我们实验室液发生过类似事件，我把我们处理过程告诉你，希望对你有帮助：

首先消毒培养箱，如果你们有两个或以上培养箱就好办了，如果只有一个且还有很多其他细胞就麻烦点。只能暂时的放在超净台上。具体如下，中午将空调温度打到最高（也只有31度），超净台开紫外。下午早点来关紫外，将细胞培养瓶盖盖紧，转到超净台内，用75％酒精擦洗培养箱，再用无臭氧型可移动的紫外等照射半小时，然后将细胞放回，松开盖口即可（切记CO2瓶子阀门要关紧啊，不然气全跑光了）。

一般实验室长了霉菌的话，肯定要全部消毒。

再消毒实验室，先把室内空调和消毒柜过滤网都拆下清洗，在锥形瓶内加点高锰酸钾，放在实验室地上，然后倒入甲醛，

立马关门走人就可以了。

2天后再开门装好东西，和往常一样开始工作了。由于2天不能做事，个人细胞要先计划好，大家都可以休息两天。

18. 我们实验室是将细胞全部取出，酒精擦洗培养相，然后用紫外线照射4小时以上，污染细胞全部丢掉。还有就是培养室也采用紫外线消毒

19. 我也碰过这个情况，是自己的基础培养基污染了，光镜下面可以看见瓶底有细细的黑色小颗粒，但具体原因不详。处理方法：

1、被污染的细胞全部照过紫外线2小时以上后扔掉；

2、同一批的培养基、使用的细胞清洗液等等全部重新滤过消毒（有点舍不得全部扔掉，就尝试了一下，结果证明是可以的）；

3、打开培养箱，用75%酒精擦洗，然后用新洁尔灭擦洗（此步骤我们重复了2次，隔天），用紫外照射4小时以上；

4、清扫培养室，紫外照4小时以上，重复一次；

后来就没有啦。：）如果污染严重的话，那就要重复重复再重复了。

20. 偶也在年前遇到两次大爆发，先是真菌后是细菌。搞得我对细胞培养都快失去信心了，我养细胞都一年半了，平时细胞没什么，感觉养细胞是很简单的事，可是当污染大爆发时真的有招架不住的感觉。记得当时丢掉了几乎所有的细胞，近一百瓶，就只剩下保种的三两瓶，寒！！！至于处理方法，也就是乳酸熏蒸（记得把培养箱及超净台打开）之后一周关门关窗，不再进培养室，一周后75%酒精做彻底灭菌，也就是用酒精搽培养箱及培养室里的所有平面，甚至包括地面。到现在有四个月了，偶的细胞一直很好。建议不要惊慌，所谓兵来将挡，水来土掩。呵呵呵，一切会好起来的。

21. 看来你要大动干戈了。首先考虑培养基的问题。可以单独放置一瓶培养基到其他的培养箱里培养24小时看看是不是培养基污染。不过建议还是全部扔掉重新配置比较好。其次考虑培养箱和培养室的问题。基本上应该每一个月将培养箱彻底消毒一次的。首先用75％酒精擦洗，一般的培养箱都是可以拆卸的，将能拆卸的部分拆开擦洗后放到烤箱里烘烤（18 0度5个小时）。剩下的培养箱里用戊二醛擦洗后用紫外灯反复照射。然后在要用培养箱培养室之前再用紫外灯照射消毒2小时。你的照片里显示的应该是细菌污染，咳比较好对付。

22. 设置5％，却显示5.1％（当然这点差距实在不算太大，至于显示HIGH CO2，那是可以自己设定的，你可以自己设定二氧化碳浓度达到多少时报警（也即显示HIGH CO2，同时可能发出警鸣音，如果你没有按MUTE按钮或同等设置），同样地，你可以设置下限，还有温度的上下限），培养箱温度升高时CO2浓度会增加，反之亦然。检查一下你的CO2减压阀上