560484人TH1TH2TH17细胞因子CBA分析试剂盒原理及方法
麻风病患者外周血中Th1,Th2及Th17相关细胞因子检测分析
附表
料， Ｐ ＜ ０ ． ０ ５表示差异具有统计学意义 。 试 验组 血清 细胞 因子 Ｉ Ｌ 一 ２ 、 Ｉ Ｌ 一 ４ 、 Ｉ Ｌ 一 ６ 、 Ｉ Ｌ 一 １ ０ 、 Ｔ Ｎ Ｆ 、 Ｉ Ｆ Ｎ 一 、 Ｉ Ｌ 一 １ ７水 平 与 对 照 组 比较 ， 差 异 有 统 计 学 意 义 ｆ Ｐ ＜ ０ ． ０ ５ ） 。见 附表 。
关键 词 ： 麻风病 ； 外周血 ； 相关 细胞 因子 ； 检测分析 中图分类号 ： Ｒ ７ ５ ５ 文献标识码 ： Ｂ 文章编号 ： １ ０ ０ １ — ８ １ ７ ４ （ ２ ０ １ ５ ） １ ３ — ３ ０ ６ ２ — ０ １
麻风病是 一种慢性传 染病 ， 主要 由麻风分枝杆 菌引起 ， 表 现为皮损 、 浅感觉 障碍 、 闭汗。麻风病严 重影响患者 的生
样本分析工作 ， 并借助 Ｃ ｅ ｌ ｌ Ｑ ｕ ｅ ｓ ｔ 软件收集相关数据 ， 最后应
用Ｂ Ｄ Ｃ Ｂ Ａ软件进行结果 的运算 。 １ ． ３ 统 计学处 理
２ 结 果
患者中的检测价值 ， 报告如下 。
１ 资料 和方 法
１ ． １ 一 般资料
收集 ２ ０ １ ２年 ６月～ ２ ０ １ ４年 １ ０月 我 院 皮
Ｉ ． ２ 方法
试验组 于 系统治疗 前 、 病情稳 定时进 行外周 血
相关细胞因子检测 ， 准备并调整流式细胞仪 ， 设定各项参数 ， 按 照梯 度法 将试 剂盒 内的 细胞 因子稀 释为 １ ： ｉ ， ｉ ： ２ ， Ｉ ： ４ ，
Ｉ ： ８ ， Ｉ ： １ ６ ， Ｉ ： ３ ２ ， Ｉ ： ６ ４ ， Ｉ ： １ ２ ８ ， １ ： ２ ５ ６九 种 浓 度 。 将 ５ ０ ｍ ｌ
细胞因子检测试剂盒的原理及操作流程解析
细胞因子检测试剂盒的原理及操作流程解析细胞因子检测试剂盒是一种用于检测细胞因子水平的重要工具，它可以帮助科研人员了解细胞因子在生物体内的表达水平和功能。
本文将为您解析细胞因子检测试剂盒的原理和操作流程，以帮助您更好地理解和应用该检测方法。
一、细胞因子检测试剂盒的原理细胞因子是细胞间相互作用的信号分子，它们在生物体内起着重要的调节和传递功能。
细胞因子的异常表达与多种疾病的发生和进展密切相关，因此检测细胞因子的水平对于研究疾病的机制和评估治疗的疗效具有重要意义。
细胞因子检测试剂盒一般基于酶联免疫吸附测定法（ELISA）或流式细胞术（FACS）原理进行检测。
以ELISA为例，其原理如下：1. 抗原夹心法：将目标细胞因子捕获抗体固定在微孔板上，样品中的细胞因子与固相抗体发生特异性结合。
经过洗涤去除非特异性结合的物质。
2. 二抗法：加入与目标细胞因子结合的二抗，例如HRP（辣根过氧化物酶）标记的兔抗小鼠IgG。
3. 三抗法：加入HRP底物，例如TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺），与HRP酶发生反应，生成蓝色物质。
4. 加入终止剂：添加硫酸或其他酸性溶液终止反应，产生黄色终止产物。
基于这一原理，通过测定产生的蓝色或黄色产物的光吸光度或荧光信号，可以间接测定细胞因子的含量。
二、细胞因子检测试剂盒的操作流程操作细胞因子检测试剂盒需要按照特定的步骤进行，下面将介绍一般的操作流程：1. 准备样品：根据检测需要，准备待测样品，可以是细胞培养上清液、血清、血浆等。
样品的收集、保存等步骤要符合规范和实验要求。
2. 样品处理：根据检测要求，对样品进行必要的处理，如离心、稀释等。
注意避免样品的冻融循环，以免影响检测结果。
3. 制备标准品：根据检测试剂盒的要求，制备一系列已知浓度的标准品，用于绘制标准曲线。
4. 实验操作：将标准品、样品和空白对照依次加入已经被固定抗体的微孔板中，充分混合后覆盖反应盖板，进行孵育。
细胞因子检测试剂盒的原理与应用
细胞因子检测试剂盒的原理与应用细胞因子是一类可溶性蛋白质分子，能够调节和调控细胞间的通讯，参与调节免疫反应和炎症反应等生理过程。
细胞因子在细胞生物学研究和临床试验中具有重要作用。
细胞因子检测试剂盒是一种常用的实验工具，用于检测和量化细胞因子的含量和活性。
下面将从原理和应用两个方面介绍细胞因子检测试剂盒。
一、细胞因子检测试剂盒的原理细胞因子检测试剂盒的原理主要分为几个步骤：细胞培养、处理样本、荧光标记以及检测。
首先，细胞培养是细胞因子检测试剂盒的基础，可以使用细胞培养技术获得大量的细胞。
不同的细胞因子需要不同的细胞系进行检测。
其次，在处理样本的过程中，需要对样本进行预处理，以提取细胞因子并去除杂质。
对于细胞培养上清液或组织样本，可以通过离心等操作去除细胞和细胞碎片。
对于血液样本，可以通过离心或其他方法去除红细胞和凝块。
然后，荧光标记是细胞因子检测试剂盒中非常重要的一步。
荧光标记可以使用特异性的抗体或荧光染料。
抗体可以与细胞因子发生特异性结合，并用荧光染料进行标记。
荧光标记后的细胞因子可用于检测和定量。
最后，检测是细胞因子检测试剂盒的最后一步。
常用的检测方法有酶联免疫吸附实验（ELISA）、流式细胞术以及生物成像等。
ELISA是一种将细胞因子与特异性抗体结合测定的方法，具有灵敏度高、特异性好等特点。
流式细胞术可用于分析单个细胞的细胞因子含量和产生细胞因子的细胞类型。
生物成像可以通过引入荧光染料或放射性示踪剂进行成像，实现对细胞因子的可视化定量。
二、细胞因子检测试剂盒的应用细胞因子检测试剂盒在许多生物领域有广泛的应用，包括免疫学、癌症研究、炎症反应、药物开发等。
在免疫学研究中，细胞因子检测试剂盒可用于定量分析和表征不同细胞因子的生物学功能。
通过测定细胞因子的含量和活性，可以了解免疫细胞之间的相互作用和调节机制。
同时，在疫苗研究和免疫治疗中，细胞因子检测试剂盒也起到了重要的作用。
通过定量细胞因子的表达水平和作用机制，可以评估和优化免疫治疗的效果。
人酪氨酸羟化酶(TH)酶联免疫分析. 试剂盒使用说明书
人酪氨酸羟化酶（TH）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：0.78ng/ml-50ng/ml最低检测限：0.195ng/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人TH，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中TH含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗TH抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗TH抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的TH呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板（Assay plate）：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3.样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
常用的细胞因子检测试剂盒及其特点
常用的细胞因子检测试剂盒及其特点细胞因子检测是研究细胞间相互作用和通信的重要手段。
细胞因子是一类由多种细胞分泌的蛋白质，它们在细胞间传递信息、调节免疫应答、细胞增殖和分化等生物学过程中发挥着重要的作用。
为了准确、方便地检测细胞因子的表达水平和功能，研究人员广泛使用细胞因子检测试剂盒。
下面我将介绍一些常用的细胞因子检测试剂盒及其特点。
1. ELISA检测试剂盒：ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的细胞因子检测方法。
ELISA检测试剂盒可以快速、准确地检测细胞因子的水平。
这种检测方法基于酶标记的抗体与待测细胞因子结合，通过颜色反应指示细胞因子的含量。
ELISA检测试剂盒操作简单、灵敏度高，适用于大规模筛选或快速筛选细胞因子。
2. 蛋白芯片：蛋白芯片是一种高通量的细胞因子检测技术。
它将多种细胞因子蛋白质固定在芯片上，待测样品中的细胞因子与芯片上的蛋白质相互作用并形成信号，通过扫描仪或荧光显微镜等设备读取信号强度。
蛋白芯片具有高通量、高灵敏度、多样化和自动化等特点，适用于同时检测多个细胞因子的表达水平。
3. 流式细胞术：流式细胞术是一种利用流式细胞仪检测细胞因子的方法。
流式细胞术通过将待测样品细胞与荧光染料标记的抗体一起流经流式细胞仪，测量细胞因子的表达水平。
它具有高通量、多参数、高灵敏度和快速等特点，适用于单细胞水平的细胞因子检测。
4. PCR检测试剂盒：PCR（聚合酶链反应）是一种用于扩增DNA序列的技术，也可以应用于细胞因子检测。
PCR检测试剂盒通过引物特异性扩增目标序列，在荧光信号和GAPDH 校正的基础上计算细胞因子的表达量。
这种检测方法灵敏度高，适用于低表达细胞因子的检测。
5. 生物传感器：生物传感器是一种利用生物分子识别和信号传导机制检测细胞因子的方法。
生物传感器可以将待测细胞因子转化为电子信号、光信号或质子信号等，通过检测传感器输出信号来测量细胞因子的表达水平。
生物传感器具有高灵敏度、高特异性和实时监测等特点。
细胞因子的检测与应用CBA
a
5
流式细胞术流程
样本收集及处理 制备单细胞悬液
免疫荧光染色
上机检测
数据分析
a
6
流式细胞术检测样本
可检测的样本种类多样
各种细胞（如外周血，骨髓，细针穿刺，灌洗液，实体组 织，悬浮或贴壁培养的细胞），微生物，人工合成微球等
a
7
流式细胞仪的检测范围
细胞结构
• 细胞大小 • 细胞颗粒度 • 细胞表面积 • 核浆比例 • DNA含量与细胞周
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a
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CBA应用相关中文文献
a
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CBA特点
• 液相中反应，同时检测多种蛋白 • 操作简单(标本制备和上机检测），省时省力 • 微量样本(5-50ul) • 灵敏度2.8pg/ml • 所有分析只需一组标准曲线 • 避免酶联反应信号放大带来的假阳性 • 更好的线性度和更宽的检测范围(5000pg/ml) • 流式细胞仪和CBA软件自动分析
a
23
传统的ELISA与CBA相比
ELISA
单一 样本量体积大
CBA
多元和同步 Elisa样本体积的1/6
灵敏度低，稳定性差
灵敏度高，稳定性好
每个蛋白分别检测，样本浓度 芯片式集成测定，所需样本浓度低
高，时间长，效率低 酶联放大效应，结果易失真
缩短时间，提高效率 流式荧光定量检测，避免假阳性
a
24
a
19
F L -3H o r -NAI R
BD CBA Flex Set
1 2 3 4 56 78 9
A B C D E F G H I
F L4-H or R ed-A
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CBA Flex Set的分析软件 － FCAP Array Software
细胞因子检测中常用的试剂盒及其原理
细胞因子检测中常用的试剂盒及其原理细胞因子检测是研究生物体内细胞间相互作用以及免疫和炎症反应的重要工具。
试剂盒是细胞因子检测中常用的实验工具，通过检测细胞因子的表达水平，可以了解细胞因子在机体免疫调节、疾病发展以及治疗效果等方面的作用。
本文将介绍几种常用的细胞因子检测试剂盒及其原理。
1. ELISA试剂盒ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的细胞因子检测方法，其原理是利用酶标记的抗体与待测细胞因子结合，通过底物反应等方法来测定细胞因子的浓度。
ELISA试剂盒一般包括固相酶标板、抗体、酶标记抗体、底物等多个组分。
首先，在固相酶标板上固定特异性的抗体，然后加入待测样品和酶标记抗体，待测样品中的细胞因子与抗体结合形成免疫复合体。
随后，通过底物反应产生荧光或色素等信号，测定底物反应的光强度或吸光度，从而确定细胞因子的浓度。
2. PCR试剂盒PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种用于扩增DNA片段的技术，也常用于细胞因子的检测。
PCR试剂盒包括DNA聚合酶、引物、模板DNA等多个组分。
PCR试剂盒的原理是在适当的温度条件下，利用DNA聚合酶酶活性，引物定向结合至待扩增的DNA片段，然后进行反复的变温扩增，分别进行DNA的变性、引物的结合和DNA片段的合成等步骤，最终扩增得到相应数量的特定DNA片段。
通过测定PCR产物的数量，可以推断细胞因子的表达水平。
3. 流式细胞术试剂盒流式细胞术是一种广泛应用于细胞因子检测的方法，也称为流式细胞仪。
流式细胞术试剂盒包括荧光染色剂、抗体等。
流式细胞术试剂盒的原理是将待测样品进行细胞标记，通常使用荧光染色剂标记细胞表面的某些蛋白，或者使用特异性的抗体标记细胞表面的特定细胞因子。
然后，通过流式细胞仪检测细胞标记的荧光强度或颜色，以及细胞数量，通过对流式细胞仪所得数据的分析，可得出细胞因子的表达水平。
细胞因子检测试剂盒的原理及实验操作流程
细胞因子检测试剂盒的原理及实验操作流程细胞因子检测试剂盒是一种用于检测细胞因子水平的实验试剂盒。
细胞因子是一类具有调节和介导免疫、炎症和细胞增殖等生物学功能的蛋白质分子，它们在机体免疫应答、疾病发展以及药物研究等领域具有重要的意义。
细胞因子检测试剂盒通过特定的试剂和技术，可以快速、准确地检测细胞因子的水平，为科学研究和临床诊断提供有力的支持。
细胞因子检测试剂盒的原理主要包括两个方面：免疫学方法和酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
免疫学方法是通过免疫学反应原理来检测细胞因子的水平。
具体步骤包括：1. 样品收集和预处理：收集需要检测的样品，如血液、血清、血浆或细胞上清等。
对样品进行预处理，例如离心、稀释或加标等，以提高检测的灵敏度和准确性。
2. 抗体结合：将与目标细胞因子相关的抗体加入样品中，通过抗原-抗体结合的方式，形成特异性复合物。
这些抗体通常是特异性识别目标细胞因子的单克隆或多克隆抗体。
3. 洗涤：对于非特异性结合的物质，通过洗涤步骤将其除去，以减少干扰并提高检测的特异性。
4. 信号产生：添加特定的辅助试剂，如酶标记的二抗或荧光标记的二抗等，在免疫结合复合物中形成信号物质。
5. 信号检测：利用光谱设备或荧光显微镜等仪器对信号物质进行检测和定量分析。
检测的方法根据试剂盒的不同而有所差异，常见的包括酶标记法、荧光法、放射免疫法等。
ELISA法是目前最常用的细胞因子检测方法之一，其原理基于酶标记物介导的免疫反应。
ELISA法可以快速、准确地检测细胞因子的水平，并且具有灵敏度高、重复性好的特点。
具体步骤如下：1. 吸附：将经预处理的样品加入包被了特异性抗体的微孔板孔中，目标细胞因子会与抗体结合。
2. 洗涤：将非特异性结合的物质通过洗涤步骤除去，以减少背景干扰。
3. 检测：添加特异性酶标记的二抗，它会与目标细胞因子结合。
通过酶底物的作用，产生可定量测定的颜色反应。
4. 反应终止：通过反应终止剂停止酶反应，阻止进一步的颜色反应产生。
biolegend细胞因子试剂盒原理
biolegend细胞因子试剂盒原理BioLegend细胞因子试剂盒原理细胞因子是一类分泌性蛋白质，它们在细胞间起着重要的信号传递作用。
细胞因子可以调控免疫应答、炎症反应、细胞增殖和分化等生物学过程。
因此，研究细胞因子的表达水平对于理解疾病的发生机制、评估治疗效果以及开发新型药物具有重要意义。
BioLegend细胞因子试剂盒是一种常用的实验工具，用于检测细胞因子在样本中的表达水平。
该试剂盒基于ELISA（酶联免疫吸附测定法）原理，通过特异性抗体与目标细胞因子结合，利用酶标记二抗的反应来定量测定细胞因子的浓度。
BioLegend细胞因子试剂盒的操作步骤通常分为以下几个主要步骤：1. 样本处理：首先，需要准备样本，可以是细胞培养上清液、血清、血浆、组织提取液等。
样本处理的目的是提取样本中的细胞因子并使其可测量。
2. 包被抗体处理：将特异性抗体溶液加入试剂盒中的酶标板孔中，并在室温下孵育一定时间，使抗体与酶标板表面结合。
3. 样本添加：将经过处理的样本加入到酶标板孔中，与包被抗体结合。
4. 洗涤：通过洗涤，去除未结合的物质，以减少假阳性反应的发生。
5. 检测抗体添加：加入检测抗体溶液，与目标细胞因子结合。
6. 洗涤：再次洗涤以去除未结合的物质。
7. 底物添加：加入底物溶液，底物与酶标记的抗体反应，产生可测量的信号。
8. 反应停止：通过加入反应停止液，停止底物的反应。
9. 测量：使用酶标仪测量吸光度，根据吸光度值可以计算细胞因子的浓度。
BioLegend细胞因子试剂盒的原理是基于酶联免疫吸附测定法，该方法利用特异性抗体与目标分子的结合来定量测定分子的浓度。
试剂盒中的特异性抗体与目标细胞因子结合后，通过酶标记二抗的反应来产生可测量的信号。
这种信号与细胞因子的浓度成正比，通过对标准曲线的测量，可以计算出样本中细胞因子的浓度。
BioLegend细胞因子试剂盒具有以下优点：1. 高灵敏度：该试剂盒能够检测到非常低浓度的细胞因子，可以满足对低表达细胞因子的检测需求。
重要细胞因子检测方法及其原理解析
重要细胞因子检测方法及其原理解析细胞因子是一类通过细胞间相互作用传递信息的蛋白质，对于机体免疫应答和炎症反应等有重要调控作用。
检测细胞因子水平的变化可以帮助了解疾病的发生发展过程，为疾病诊断、治疗和预后评估提供有力依据。
本文将介绍几种常用的重要细胞因子检测方法及其原理。
一、酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）ELISA是一种常用的细胞因子检测方法，其原理基于酶标记抗体与待检测的细胞因子结合形成抗原-抗体复合物。
ELISA有两种常用的形式：间接ELISA和夹心ELISA。
间接ELISA首先在酶标记抗体上固定抗原，待检测样本中的细胞因子与抗体结合，然后加入底物使酶催化染色反应，最终通过测定反应产物的光密度来确定待检测样本中细胞因子的浓度。
夹心ELISA则是将待检测样本中的细胞因子固定在检测板上，然后添加抗体结合检测细胞因子，与抗体结合形成复合物，继而加入酶标记抗体，通过酶催化染色反应来检测细胞因子的浓度。
二、流式细胞术（Flow Cytometry）流式细胞术通过流式细胞仪检测细胞因子的表达水平。
流式细胞仪将细胞悬浮液通过微细管道以单个细胞为单位流经检测区域，并用激光束照射细胞，观察细胞因子与荧光检测标记之间的相互作用。
这种方法具有高灵敏度和高通量优势，可以检测多种细胞因子的表达情况以及细胞因子在不同亚群细胞中的分布情况。
三、免疫组化（Immunohistochemistry，IHC）免疫组化是一种利用免疫反应原理来检测组织中细胞因子表达的方法。
它通过固定、切片和染色等步骤，利用特异性抗体与待检细胞因子发生特异性结合反应，然后通过染色反应来观察抗原-抗体复合物的颜色变化。
免疫组化可以直接在组织切片上观察细胞因子的分布情况和定位，进一步了解细胞因子在疾病发生发展过程中的作用机制。
四、多普勒超声（Doppler Ultrasonography）多普勒超声是一种无创检测细胞因子反应的方法。
细胞因子检测试剂盒的原理和应用范围
细胞因子检测试剂盒的原理和应用范围细胞因子是一类介导细胞间相互作用和通讯的蛋白质分子，它们通过细胞外信号传导途径参与调节免疫反应、细胞增殖、凋亡和炎症等生物学过程。
细胞因子检测是研究细胞间相互作用和信号传递的重要方法之一，检测细胞因子水平可以帮助医学研究人员了解细胞信号传递途径的功能异常，发现疾病的发生机制，评估疾病的严重程度和疗效，指导临床诊断和治疗。
细胞因子检测试剂盒是一种用于定量检测细胞因子含量的试剂盒。
其工作原理主要有两种：酶联免疫吸附试验（ELISA）和流式细胞术。
酶联免疫吸附试验（ELISA）是应用酶的底物显色反应进行定量分析的方法。
该方法利用特异性抗体与目标细胞因子结合形成免疫复合物，通过添加酶标记的二抗与免疫复合物结合，产生化学反应使底物进行显色或荧光发光。
利用对照品制作标准曲线，通过测定样本的吸光值或发光强度，可以得到细胞因子的含量。
ELISA方法具有灵敏度高、准确性好、专属性强等特点。
常见的ELISA试剂盒有测定细胞因子如TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-10等。
流式细胞术（Flow Cytometry）是利用荧光染料标记的抗体与细胞因子结合后，通过激光照射并检测荧光信号的强弱来进行细胞因子的定量分析。
流式细胞术可以快速、精确地分析多个细胞因子的表达情况，并可以对单个细胞进行分析，具有高通量、高分辨率的优点。
常见的流式细胞术试剂盒有如BD Cytometric Bead Array (CBA)等，可用于检测多个细胞因子如IL-2、IL-4、IL-17、IL-23等。
细胞因子检测试剂盒的应用范围非常广泛，主要涵盖以下几个方面：1. 免疫学研究：细胞因子检测试剂盒可用于研究癌症、自身免疫性疾病、感染性疾病等的发病机制。
通过检测细胞因子的含量和表达水平，可以了解疾病的免疫反应异常情况，研究疾病的发展过程，为疾病的预防和治疗提供依据。
2. 临床诊断：细胞因子检测具有较高的临床应用价值。
细胞因子检测试剂盒的关键技术和优势分析
细胞因子检测试剂盒的关键技术和优势分析细胞因子检测试剂盒是一种用于检测细胞因子水平的实验工具，通过测定细胞因子的产生和释放水平，可以评估细胞的免疫状态、疾病进程和治疗效果。
考虑到细胞因子在许多重要生物过程中的作用和机制，如炎症、免疫反应和细胞信号传导，细胞因子检测试剂盒在人类健康和疾病研究中发挥着重要作用。
一、关键技术1. 免疫测定法：细胞因子检测试剂盒使用免疫测定法，通常涉及酶联免疫吸附试验(ELISA)、流式细胞术和多重免疫灵敏性测定(MSD)等技术。
这些技术基于抗原与抗体的特异性结合，通过检测抗原-抗体复合物的形成来定量细胞因子水平。
2. 特异性抗体：细胞因子检测试剂盒所用的特异性抗体被设计用于与目标细胞因子的特定表位结合。
这些抗体可以通过单克隆抗体技术或重组DNA技术获得，具有高亲和力和特异性，能够检测目标细胞因子的低浓度。
3. 标准曲线法：细胞因子检测试剂盒通常通过建立标准曲线来定量细胞因子水平。
标准曲线法是一种定量分析方法，通过使用浓度已知的标准品，建立标准曲线并根据待测样本的光密度值或信号强度进行定量测定。
4. 自动化和高通量：为了提高操作效率和实验重复性，现代细胞因子检测试剂盒已逐渐引入自动化和高通量的技术。
自动化设备可以实现样品处理、洗涤、反应和测定等步骤的自动化操作，而高通量技术可以同时处理多个样本，提高检测速度和效率。
二、技术优势1. 灵敏度和特异性：细胞因子检测试剂盒使用高亲和力和特异性抗体，能够有效地检测目标细胞因子的低浓度。
这种高灵敏度和特异性有助于准确评估细胞因子的产生和释放水平。
2. 快速和简便：细胞因子检测试剂盒的操作相对简单，不需要复杂的实验操作和仪器设备。
在短时间内就可以获得准确的结果，节省了实验人员的时间和精力。
3. 多重测定：细胞因子检测试剂盒可以同时检测多种细胞因子的水平，具有多重测定的能力。
这对于研究人员来说是非常有价值的，因为它们可以在一次实验中获得多项数据，提供更全面和准确的信息。
最新发展的细胞因子检测试剂盒技术
最新发展的细胞因子检测试剂盒技术细胞因子是一类分泌于人体细胞中的蛋白质，它们在人体免疫系统的调节中起着至关重要的作用。
细胞因子的异常表达与多种疾病的发生和发展密切相关，因此，对细胞因子进行检测和监测对于疾病的早期预警和诊断具有重要意义。
近年来，细胞因子检测试剂盒技术得到了持续发展和创新，为疾病的诊断和治疗提供了更准确、快速和便捷的方法。
下面将对最新发展的细胞因子检测试剂盒技术进行详细介绍。
首先，最新的细胞因子检测试剂盒技术在敏感性和特异性方面有了显著的提升。
利用新的材料和技术，可以更好地捕捉和检测细胞因子，从而提高检测的准确性。
例如，一些新型检测方法，如酶联免疫吸附测定法（ELISA）和免疫荧光法（IFA），可以通过与特异性抗体结合来检测细胞因子的表达水平，实现对细胞因子的高灵敏度定量测定。
此外，新的荧光探针和放射性同位素标记技术也被引入，使得检测结果更加准确可靠。
其次，最新的细胞因子检测试剂盒技术还注重快速和高通量的检测。
得益于自动化仪器和微芯片技术的不断进步，细胞因子的快速检测已经成为可能。
例如，有些细胞因子检测试剂盒配备了自动检测仪器，可以在短时间内完成对多种细胞因子的监测。
这种高通量的检测方法可以大大提高诊断效率和临床应用的便捷性，有助于及早发现疾病并制定相应的治疗方案。
此外，最新的细胞因子检测试剂盒技术还注重样本的多样性和非侵入性。
以往的检测方法可能需要大量的血液样本或细胞培养物，而新技术可以利用更少的样本数量进行检测，并且可以检测更多类型的样本，如尿液、唾液和组织等。
这种改进让患者在进行细胞因子检测时更加便利，同时减少了对患者身体的创伤。
此外，最新的细胞因子检测试剂盒技术还有助于疾病的个性化诊断和治疗。
通过检测患者体内的细胞因子表达水平，可以更好地了解疾病的发展和治疗效果。
在临床应用中，医生可以根据细胞因子检测结果为患者制定个性化的治疗方案，提供更有效、更安全的治疗策略。
综上所述，最新发展的细胞因子检测试剂盒技术为疾病的预警、早期诊断和治疗提供了更加准确、快速和便捷的方法。
测细胞因子的方法
测细胞因子的方法《测细胞因子的方法：超有趣的独家秘籍》嘿，宝子们！今天我就像个慷慨的大侠，要把我压箱底的测细胞因子的方法分享给你们。
这就好比我要把我独家秘制的美食菜谱传授给你们一样，可得好好听着哦！首先呢，咱们得把前期准备工作做好，这就像出门旅行前要收拾行李一样重要。
你得准备好你的样本，这个样本就像是你的宝贝材料，可能是细胞培养上清液，也可能是血清之类的。
我曾经有一次，迷迷糊糊地拿错了样本，还以为能测出来啥神奇结果呢，结果就像你拿着错的钥匙想开别人家的门一样，根本行不通。
所以啊，一定要确认好样本的来源和类型，这是测细胞因子的关键第一步。
接下来，咱们要选择合适的检测方法。
这就有点像选衣服，得根据不同的场合（也就是你的样本特点和实验目的）来选。
常见的检测方法有酶联免疫吸附测定（ELISA）、流式细胞术（FCM）还有液相芯片技术（Luminex）等等。
ELISA呢，就像是一个老实巴交的工匠，虽然操作起来有点繁琐，但是很靠谱，适合大规模的样本检测。
我记得我第一次做ELISA 的时候，那个板子上的小孔就像一个个小眼睛盯着我，我紧张得手都有点抖呢。
操作的时候啊，要把样本和抗体按照规定的量加进去，这就像给这些小眼睛喂食物一样，可不能多也不能少。
如果是选择流式细胞术呢，那就比较酷炫啦。
它就像一个超级侦探，可以在一群细胞里把那些表达细胞因子的细胞给揪出来。
但是这个方法要求你的细胞得是单个的，就像你要让一群小朋友排队站好，一个一个来检查一样。
在做流式之前，你得把细胞处理好，让它们分散开来，可别让它们黏糊糊地抱成一团，不然流式细胞仪这个大侦探也会迷糊的。
液相芯片技术呢，有点像是一个多功能的小机器人，它可以同时检测好多种细胞因子。
不过这个小机器人比较娇贵，操作起来要更加小心。
你得按照说明书一步一步来，就像给这个小机器人编程一样，一个代码错了，它可能就罢工了。
不管你选择哪种方法，在检测之前都得对样本进行处理。
比如说，如果你的样本里有杂质，那就得像淘米一样把杂质去掉。
细胞因子检测技术的发展与细胞因子检测试剂盒的优势比较
细胞因子检测技术的发展与细胞因子检测试剂盒的优势比较细胞因子是一类由机体的免疫细胞产生的蛋白质分子，它们在调节免疫反应、细胞增殖和分化、炎症反应等方面起着重要作用。
由于细胞因子在疾病的发生和发展中发挥着关键作用，对细胞因子的检测变得至关重要。
随着科技的进步，细胞因子检测技术也在不断发展。
目前常用的细胞因子检测技术主要包括酶联免疫吸附法（ELISA）、流式细胞术和蛋白芯片技术等。
首先，酶联免疫吸附法（ELISA）是最常用的细胞因子检测技术之一。
通过ELISA可以快速、准确地检测细胞因子的浓度，并可以同时检测多个细胞因子。
ELISA技术的原理是利用特异性的抗体与目标细胞因子结合，再通过酶反应使得颜色变化，从而判断目标细胞因子的浓度。
ELISA技术具有灵敏度高、特异性强、样本处理简便等优点，已被广泛应用于临床医学研究中。
其次，流式细胞术是一种通过激光散射和荧光标记等技术来定量和分析细胞表面或细胞内标志物的方法。
流式细胞术可以对单个细胞进行分析，可以在单一细胞级别确定特定细胞因子的表达情况。
这种技术适用于复杂的样本类型，如全血和组织样本，具有高通量、高灵敏度和高准确性等优点，已在免疫学、肿瘤学和病毒学等领域得到广泛应用。
另外，蛋白芯片技术是近年来发展起来的一种高通量、高灵敏度的蛋白质分析方法。
蛋白芯片是一种具有多个离散点（即蛋白小点）的载玻片或罐状载体，上面固定了成千上百种不同的蛋白质。
通过将待测蛋白样本与蛋白芯片结合，然后使用荧光染料或其他检测方法来定量测量蛋白质的表达水平。
蛋白芯片技术具有高通量、高灵敏度和多参数检测等优点，可用于大规模筛查和分析细胞因子等蛋白质的表达动态。
针对细胞因子检测技术的不同优势，市场上也推出了相应的细胞因子检测试剂盒。
这些试剂盒包括ELISA试剂盒、流式细胞术试剂盒和蛋白芯片试剂盒等，针对不同检测技术需要而设计。
通过使用这些试剂盒，可以快速、准确地检测细胞因子的浓度，为疾病的早期诊断和治疗提供重要的依据。
流式微球分析法检测血清中 Th1／Th2／Th17型细胞因子的表达在肺结核病患者中的临床意义
流式微球分析法检测血清中 Th1／Th2／Th17型细胞因子的表达在肺结核病患者中的临床意义张萧萧;周慧芳;张朝霞;张琼;孟存仁【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2017(038)002【摘要】目的：探讨流式微球分析法（CBA 法）检测血清 Th1／Th2／Th17型细胞因子的表达在结核病患者中的临床意义。
方法按照 BD CBA Flex Set 检测试剂盒的要求，用 CBA 法检测98例肺结核患者（痰涂片阳性肺结核患者38例，痰涂片阴性肺结核患者60例）和79例同期健康体检者的 Th1型细胞因子（白细胞介素2、γ干扰素、肿瘤坏死因子），Th2型细胞因子（白细胞介素4、白细胞介素6、白细胞介素10）以及 Th17型细胞因子（白细胞介素17A）的表达水平，并分析3组之间的差异。
结果除白细胞介素17A 组间、组内差异无统计学意义（P ＞0．05）外，结核组白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素6、白细胞介素10、肿瘤坏死因子、γ干扰素水平均高于对照组（P ＜0．05）；痰涂片阳性患者白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素10、γ干扰素水平均高于对照组（P ＜0．05），痰涂片阳性患者和阴性患者差异无统计学意义（P ＞0．05）；而痰涂片阳性患者白细胞介素6和肿瘤坏死因子水平均显著高于痰涂片阴性患者（P ＜0．05）。
结论白细胞介素6和肿瘤坏死因子可作为判断结核病严重程度的指标，监测结核病病情的转归。
与此同时，CBA 法作为1种新兴的检测技术，敏感度高，可同时检测多种细胞因子，并能大大节约血清用量与时间，因此可作为结核病检测和病情监测的实验室技术。
【总页数】3页(P145-147)【作者】张萧萧;周慧芳;张朝霞;张琼;孟存仁【作者单位】新疆医科大学第一附属医院医学检验中心 830054;新疆维吾尔自治区喀什地区第一人民医院检验科 844000;新疆医科大学第一附属医院医学检验中心 830054;新疆医科大学第一附属医院医学检验中心 830054;新疆医科大学第一附属医院医学检验中心 830054【正文语种】中文【相关文献】1.慢性乙型肝炎外周血单个核细胞与血清中 TO域样受体及Th1/Th2/Th17型细胞因子的表达 [J], 邵丽春;邓国伟;金国贤2.大肠癌患者外周血血清中Th1/Th2型细胞因子表达的测定及临床意义 [J], 陈贵平;鞠海星;李德川3.阿苯达唑治疗泡球蚴病患者血清中Th1/Th2型细胞因子的变化及临床意义 [J], 李富荣;石佑恩;史大中;DA Vuitton;PS Craig4.Th1/Th2/Th17型细胞因子在口腔扁平苔藓患者血清和唾液中的表达及临床意义[J], 柳惠荣5.miRNA-155、miRNA-21和Th1、Th2、Th17相关细胞因子在急、慢性布鲁菌病患者中的表达及其意义 [J], 徐峥;谢松松;阿孜古丽·阿布来提;谭风雷;张跃新因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
免疫学实验：流式CBA多因子检测
【嘉美实验】虽然液相蛋白定量检测的技术很多，但是大多数的技术仅能对样本进行单一指标的检测，同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测，操作繁琐，且各指标间差异性较大。
对于样本量较少或需要对比各指标的用户，传统的技术无法满足需要。
日常实验中，常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测，如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析，由于这些因子的含量较少，低于一般常规方法的检测下限，使用常规的蛋白检测方法Western Blot 等很难检测。
为此，著名的流式抗体公司BD-Pharmingen开发了基于流式细胞仪的液相蛋白定量技术——CBA。
嘉美生物是该技术在国内最早的推广者，并同时为广大生命科学研究者提供流式CBA的检测外包服务。
CBA工作原理：Cytometric Bead Array（CBA），即细胞因子微球检测技术。
是一种基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。
BD公司利用流式细胞仪可对荧光信号进行级数放大的特性，将受检的可溶性因子附着于一些具有近似细胞直径的微粒上，即可对受检样品中的各种可溶性因子进行检测。
CBA的基本原理近似于ELISA 的检测，即利用微小、分散的颗粒捕获液体待测物，并利用流式细胞仪检测类似“三明治”的颗粒——待测物复合体所散发的荧光，从而测定待测物的数量。
详细原理介绍：每个CBA微球大小一致，具有特定的荧光强度，包被有适用于特定分析（如其它抗体或者可溶性蛋白）的特异性捕获抗体（Capture Antibody），提供了类似ELISA孔板的捕获表面。
当微球和待测样品溶液混合后，微球上的特异性抗体就与样品（血清、血浆或者细胞培养液）中相应的抗原或蛋白结合，然后加入荧光标记的检测抗体，就会形成“三明治”夹心复合物。
最后通过流式细胞仪对特异性目的蛋白进行检测。
CBA的每种微球携带有不同强度的红色荧光，在流式细胞仪的FL3通道通过检测微球荧光强度的差异对目的蛋白定性；检测抗体带有PE荧光素标记，在流式细胞仪的FL2通道检测，通过检测抗体的PE荧光强度定量目的蛋白。
TH2-TH17细胞分化预实验总结2014.12.4
5、试剂的配制5.1 10% FBS-RPMI-1640培基100ml：RPMI-1640 培养液87ml胎牛血清10ml100×谷氨酰胺1mll0000U/ml青、链霉素双抗2ml经0.22μm过滤器过滤除菌后4℃保存备用5.2 0.4%台盼蓝染液：0.4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，再加双蒸水至10ml，滤纸过滤，4℃保存。
取上述4%染液1ml，加PBS 9ml，稀释为0.4%染液。
5.3 磁珠分离缓冲液100ml：PBS (PH7.2-7.4) 100ml牛血清白蛋白0.5gEDTA 58.45mg经0.45μm过滤器过滤除菌后4℃保存备用5.4 0.5%BSA-PBS液100ml：PBS 100mlBSA 0.5g经0.45μm过滤器过滤除菌后4℃保存备用5.5 Monensin稀释液20 ml：Monensin原液 2.0 ml完全性RPMI-1640培养基18.0 ml2、留取脾脏、脾单个核细胞计数1)10%水合氯醛按3ml/kg腹腔注射麻醉小鼠后，小鼠取右侧位，消毒左侧背腹部皮肤，取无菌眼科剪剪开腹部外皮肤，再以无菌止血甜分离皮肤和肌肉。
以无菌眼科镊轻轻提起小鼠脾脏，剪掉其周围筋膜和脂肪组织，小心分离出脾脏，用无菌SAL洗去脾脏血迹，将脾脏装入以预装有3ml RPMI-1640培养液的5ml无菌离心管中，轻轻摇晃，洗去新鲜脾脏表面残留的血迹和组织残渣以备研磨。
2) 超净台消毒、灭菌等准备工作完毕后，于50ml无菌离心管中倒入5ml RPMI-1640培养液，将一次性无菌200目细胞筛网置于离心管口上、用培养液湿润，用无菌眼科镊固定脾脏、无菌眼科剪尽量剪碎脾脏，再用5ml无菌玻璃注射器活塞轻轻在筛网上研磨小鼠脾脏，最后用2ml RPMI-1640培养液洗涤筛网，以使分散的单个核细胞都进入培养液中。
3)400g离心10分钟。
4)弃去上清，往细胞沉淀中加入5倍细胞体积的无菌红细胞裂解液，轻轻吹打混匀后裂解2分钟。
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FITC 阳性质控（E2）：FITC 标记抗体质控品，流式细胞仪调整仪器补偿 时使用。4C 保存，勿冷冻。 Human TH1/TH2/TH17 细胞因子标准品（C）：为人类细胞因子重组蛋白 冻干品。一瓶用 0.2mL 分析稀释液稀释，成为 10标准品（人 IL-2、IL-4、 IL-5 (Kit I)或 IL-6 (Kit II)、IL-10、TNF-、IFN-和 IL-17A 蛋白各含 50ng/mL）。4C 保存。 Human TH1/TH2/TH17 细胞因子标准品可以存放至有效期。复溶后的 10标 准品在 2-8C 保存，可存放 12 个小时。
156 156 156 156 156 156 156 156
80 80 80 80 80 80 80 80
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20 20 20 20 20 20 20 20
2. Human TH1/TH2/TH17 细胞因子捕获微球混悬液的制备 捕获微球分为（A1）-（A7）七瓶，制备捕获微球混悬液之后应立即进行下 一步操作，加入 PE 信号抗体、标准品和待测样本。 1) 计算分析实验管数（包括标准品和质控品），例如分析 8 个待测样本，加 9 个标准管和 1 个阴性质控管，共计 18 管； 2) 充分摇匀各捕获微球试剂瓶（A1）-（A7）； 3) 每个测试需加入（A1）-（A7）捕获微球各 10L，制成捕获微球混悬液， 例如 18 管实验需要（A1）-（A7）捕获微球各 180L； 4) 如果是血清或血浆，先 300g 离心混匀的捕获微球，轻轻吸出上清，加入等 量的 H 富集血清，室温避光 30 分钟。
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为了满足不同用户的实际需要，BD 公司 2005 年初推出了可以自由组合的 CBA Flex set。它改变了 CBA KIT 的固定形式，成为自由组合、灵活搭配的自助餐。 CBA Flex set 的原理与 KIT 相似，捕获微球用来定性目的蛋白，检测抗体的荧光强 度来定量目的蛋白。与 KIT 不同的是，Flex set 微球是带有两种荧光，分别在流式 细胞仪的 FL3 和 FL4 通道检测，通过这两个二维矩阵来对捕获微球定性。PE 检测 抗体在 FL2 通道来对目的蛋白定量。(如下图)
1) 各管加入 50L 捕获微球混悬液，注意加样之前混匀微球； 2) 各管加入 50L 的 Human TH1/TH2/TH17（I 或 II）PE 信号抗体（B）； 3) 各管加入 50L 相应的 Human TH1/TH2/TH17 细胞因子标准品稀释液； 4) 各管加入 50L 检测样本； 5) 室温避光孵育 3 小时；
5000 5000 5000 5000 5000 5000 5000 5000
2500 2500 2500 2500 2500 2500 2500 2500
1250 1250 1250 1250 1250 1250 1250 1250
625 625 625 625 625 625 625 625
312.5 312.5 312.5 312.5 312.5 312.5 312.5 312.5
3. 缓冲液： 分析稀释液（G）：30mL 蛋白缓冲液（1），用于 Human TH1/TH2/TH17 细胞因子标准品的复溶和稀释，还用于待测样本的稀释。4C 保存。 洗液（F）：130mL 磷酸盐缓冲液（PBS），含有蛋白和表面活性剂，用于 CBA 分析中微球的洗涤和重悬。4C 保存。 富集血清（H）:10ml 血清缓冲液（1），用于检测血清或血浆样品时，稀 释捕获微球 实验用具 Human TH1/TH2/TH17 细胞因子 CBA 分析试剂盒 I（货号：550749）或 II（货 号：551809） 流式细胞仪（如 FACScan、FACSort、FACSCalibur）和 BD CellQuest 软件 1275mm FALCON 进样管（货号：352008） BD CBA 分析软件（货号：550065） BD CaliBRITE 三色微球（货号：340486）
Human TH1/TH2/TH17 细胞因子 CBA 分析试剂盒操作步骤
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图2
Human TH1/TH2/TH17 细胞因子 CBA 分析试剂盒操作步骤示意图
1. Human TH1/TH2/TH17 细胞因子标准品的制备 Human TH1/TH2/TH17 细胞因子标准品冻干粉需要复溶并倍比稀释后使用。 1) 一瓶 Human TH1/TH2/TH17 细胞因子标准品（C）用 0.2mL 分析稀释液 （G）复溶成为 10标准品。充分混匀溶解，放置至少 15 分钟； 2) 1275mm FALCON 进样管顺序标记：原倍标准品、1:2 稀释、1:4 稀释、1:8 稀释、1:16 稀释、1:32 稀释、1:64 稀释、1:126 稀释、1:256 稀释； 3) 在原倍标准品管内加入 900L 分析稀释液； 4) 在其余管内各加入 300L 分析稀释液； 5) 在原倍标准品管内加入 100L 的 10标准品，充分混匀； 6) 倍比稀释：取原倍标准品 300L，加入到 1:2 稀释管中，充分混匀；取 1:2 稀释液 300L，加入到 1:4 稀释管中，充分混匀；依此类推，直至 1:256 稀 释管，充分混匀；分析稀释液为阴性标准管。 Nhomakorabea6
5) 捕获微球混悬液充分混匀，待用。 实验时每测试管需要 Human TH1/TH2/TH17 细胞因子捕获微球混悬液 50L。详见第 4 部分——Human TH1/TH2/TH17 细胞因子 CBA 操作步骤。 3. 待测样本制备 标准曲线的检测范围是 20-5000 pg/mL。如果待测样本细胞因子的含量超过 了检测范围，则样本需要稀释。稀释步骤如下： 1) 使用分析稀释液（G）按照理想浓度稀释样本（如 1:2、1:10、1:100）； 2) 在加样前充分混匀稀释样本。 4. Human TH1/TH2/TH17 细胞因子 CBA 操作步骤 准备好标准品倍比稀释液、捕获微球混悬液和待测样本，就可以按照以下步 骤进行 CBA 分析样本制备和分析了。为了保证流式细胞仪的定量分析结果，要求 每次实验时都要运行仪器调整程序，并定标。 标准管试剂用量一缆表： 管 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 号 20 pg/mL 40 pg/mL 80 pg/mL 156 pg/Ml 312 pg/mL 625 pg/mL 1250 pg/mL 2500 pg/mL 5000 pg/mL 试 剂 组 成 （所 有 试 剂 用 量 均 为 50 L） 阴性 0 pg/mL 捕获微球混悬液、PE 检测试剂、分析稀释液 捕获微球混悬液、PE 检测试剂、细胞因子标准品 1:256 稀释液 捕获微球混悬液、PE 检测试剂、细胞因子标准品 1:128 稀释液 捕获微球混悬液、PE 检测试剂、细胞因子标准品 1:64 稀释液 捕获微球混悬液、PE 检测试剂、细胞因子标准品 1:32 稀释液 捕获微球混悬液、PE 检测试剂、细胞因子标准品 1:16 稀释液 捕获微球混悬液、PE 检测试剂、细胞因子标准品 1:8 稀释液 捕获微球混悬液、PE 检测试剂、细胞因子标准品 1:4 稀释液 捕获微球混悬液、PE 检测试剂、细胞因子标准品 1:2 稀释液 捕获微球混悬液、PE 检测试剂、细胞因子原倍标准品
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图3
Human TH1/TH2/TH17 细胞因子标准品的倍比稀释
稀释后的细胞因子标准品浓度：
蛋白(pg/ml) 原倍 标准 1:2 稀释 1:4 稀释 1:8 稀释 1:16 稀释 1:32 稀释 1:64 稀释 1:128 稀释 1:256 稀释
Human IL-2 Human IL-4 Human IL-5 Human IL-6 Human IL-10 Human TNF- Human IFN- Human IL-17A
细胞因子捕获微球、PE 标记的信号抗体和标准品或待测样本共孵育，形成 双抗夹心复合物。在流式细胞仪上获取数据，并使用 BD CBA 分析软件得到各分 析参量的标准曲线和各样本中七种细胞因子的分析结果。 与传统 ELISA 方法相比较，BD CBA 的优点是： 一个样本可以做七种细胞因子的分析，与 ELISA 方法相比较，大大节省 了样本用量 只需要做一组标准品，七种细胞因子的标准曲线同时得到 用传统 ELISA 方法，需要做七种不同细胞因子的实验，而 CBA 实验一 次就可以得到七种细胞因子的分析结果，大大节省了操作时间 BD CBA Flex set 试剂
分析试剂 1. CBA 微球： 人类细胞因子捕获微球（A1-A7）：七种特异性捕获微球的 FL3 荧光强度不 同，从强到弱依此为：（A1）IL-2；（A2）IL-4；（A3）IL-5（Kit I）或 IL-6（Kit II）；（A4）IL-10；（A5）TNF-；（A6）IFN- 和(A7)IL17A。4C 保存，勿冷冻。使用前注意混匀 3-5 秒。 流式细胞仪 CBA 仪器调整微球（D）：调整仪器 PMT 电压和荧光补偿，用 量为 50L/test。 2. 抗体和标准品： Human TH1/TH2/TH17（I 或 II）PE 信号抗体试剂（B）：PE 标记的抗人 IL-2、IL-4、IL-5（Kit I）或 IL-6（Kit II）、IL-10、TNF-、IFN-和 IL17A 特异抗体，用量为 50L/test。4C 保存，勿冷冻。 PE 阳性质控（E1）：PE 标记抗体质控品，流式细胞仪调整仪器补偿时使 用。4C 保存，勿冷冻。
BD CBA 流式细胞仪微球捕获芯片技术
例：人 TH1/TH2/TH17 细胞因子 CBA 分析试剂盒
Human TH1/TH2/TH17 Cytokine CBA Kit （货号：560484，80 Tests/Kit）：检测 人血清、血浆或培养上清液中的 IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、TNF-、IFN-和 TH17。 A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 B C D E1 E2 F G H 概述 流式细胞仪可以通过细胞大小和荧光信号的不同将各种细胞群体区分开来。 另外，在流式细胞仪上还可以使用单管多色分析的技术。利用流式细胞仪的特点， BD 推出了流式细胞仪微球捕获芯片技术 CBA（Cytometric Bead Array），使用标 有不同荧光强度的一系列微球，同时检测多种可溶性蛋白，极大提高了检测效率。 BD CBA 系统利用流式细胞仪荧光检测灵敏度高的特点，通过微球表面免疫 分析，达到检测可溶性蛋白的目的。在微球上包被有捕获抗体，提供了类似 ELISA 包被微孔板的捕获表面。这样，只需很小体积的样本两，就可以用 CBA 捕 Human IL-2 捕获微球； Human IL-4 捕获微球； Human IL-5 捕获微球； Human IL-10 捕获微球； Human TNF-捕获微球； Human IFN-捕获微球； Human IL-17A 捕获微球； Human TH1/TH2/TH17 PE 信号抗体； Human TH1/TH2/TH17 细胞因子标准品； 流式细胞仪校正微球； PE 阳性质控品 FITC 阳性质控品 洗液 分析稀释液 细胞因子富集血清