花椒挥发油的提取_分离和抗菌实验
汉源花椒精油的化学成分分析及其抑菌作用
汉源花椒精油的化学成分分析及其抑菌作用祝瑞雪1，曾维才1，赵志峰1,*，高 鸿1，闫志农2(1.四川大学轻纺与食品学院，四川 成都 610065；2.四川省绿色食品发展中心，四川 成都 610041)摘 要：目的：分析汉源花椒精油的化学成分，评价其对常见食品腐败菌的抑制作用。
方法：采用气相色谱-质谱法(GC-MS)对汉源花椒精油的挥发性成分进行分析，通过抑菌圈实验和试管二倍稀释法对其抑菌效果、最低抑菌浓度(MIC 值)和最低杀菌质量浓度(MBC 值)进行测定。
结果：汉源花椒精油主要含D -柠檬烯(26.55%)、芳樟醇(22.11%)、乙酸芳樟酯(14.71%)、β-蒎烯(7.39%)等成分。
不同抑菌方法均表明，汉源花椒精油对供试细菌有较明显的抑制作用，其中，对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强(MIC 值和MBC 值分别为1.25mg/mL 和2.5mg/mL)，大肠杆菌最弱(MIC 值和MBC 值分别为5.0mg/mL 和20.0mg/mL)。
结论：汉源花椒精油具有良好的抑菌作用，可作为一种天然食品防腐剂资源。
关键词：汉源花椒；精油；化学成分；抑菌作用Chemical Components and Antibacterial Activity of Hanyuan Zanthoxylum bungeanum Seed OilZHU Rui-xue 1，ZENG Wei-cai 1，ZHAO Zhi-feng 1,*，GAO Hong 1，YAN Zhi-nong 2(1.College of Light Industry, Textile and Food Engineering, Sichuan University, Chengdu 610065, China ；2. Sichuan Green Food Development Center, Chengdu 610041, China)Abstract ：Objective: To analyze the chemical composition and evaluate the antibacterial activity of Hanyuan Zanthoxylum bungeanum seed oil. Methods: The chemical composition of Hanyuan Zanthoxylum bungeanum seed oil was determined by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Its minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concen-tration (MBC) were also determined by agar diffusion method and tube double dilution method. Results: The major components of Hanyuan Zanthoxylum bungeanum seed oil were D -limo nene (26.55%), linalool (22.11%), linalyl acetate (14.71%) and β-pinene (7.39%). Meanwhile, the essential oil revealed strong antibacterial activity. Its MIC and MBC were 1.25 mg/mL and 5.0 mg/mL against Staphylococcus aureus , and 2.5 mg/mL and 20.0 mg/mL against Escherichia coli , respectively. Conclusion:Hanyuan Zanthoxylum bungeanum seed oil has excellent antibacterial activity so that it can be used as a resource of natural food preservatives.Key words ：Zanthoxylum bungeanum ；essential oil ；chemical components ；antibacterial activity中图分类号： TS201.3 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2011)17-0085-04收稿日期：2010-11-22作者简介：祝瑞雪(1988—)，女，硕士研究生，主要从事食品生物活性物质研究。
花椒挥发油成分的提取及抗氧化活性研究
花椒 是 一种 芸 香科 的植 物 。 属落叶灌木或 小乔木 ， 可 作 孤 植 又可 用 作 防 护 刺 篱 ， 其 种子可食用， 并 带 有 清 香 味 ］ 。 自古 以来 就 是 很 好 的 药 用植 物 ， 可用于治 疗除湿 ， 止痛 ， 解鱼腥毒 ， 治积食停饮， 心腹冷痛 ， 呕吐 ， 咳 嗽 气 等 症 状。 。 花 椒 中 的 主 要 成 分 是挥 发油， 挥发油的主要成分有柠檬烯 、 月桂 烯 、 ４ 一 松 油烯 醇 、 芳樟醇 、 辣 薄 荷 酮 等 生 物碱、 黄酮类 、 香 豆 素 有 机 化 合 物 ］ 许 多 文献 都 已 验 证 各 类 天 然 植 物挥 发 油 具 有抗 氧化 的 能 力 ， 但花椒挥发油的抗氧化活性水平验证方面的报道较少 ， 现代 自 由基 生 物 学 与 自由 基 医学 的研 究 已证 明 多种 疾 病 的 发 生 和 发 展 与 自 由基 对 组织 细胞 的损 伤有 关… ， 寻 找 降 低 自 由基 在 体 内含 量 水 平 的消 除 剂 或 抑 制 剂 成 为 重 点 ， 因此 花 椒挥 发 油
增大而增大， 最 后 计 算 得 的 清除 率 分 别 为 ： ６ ７ ２ 、 ７ ． ７ ８ 、 １ ２ ． ４ 、 ｌ ７ ． ９ 关键 词 ： Ｆｅ ｎ ｔ ｉ ｏ ｎ反 应 ； 抗 氧化 ； 挥发油 ； 羟基 自由基 【 中图分类号］ Ｒ ９ ６ 【 文献标识码】 Ｂ
花 椒 挥 发 油成 分 的提 取 及 抗 氧化 活 性 研 究
严 敏 吕 昱 陈 小 彪
（ 贵 州 民族 大 学化 学 与环 境 科 学 学 院 贵 州 贵阳 ５ ５ ０ ０ ２ ５ ）
摘要 ： 本 文 用元 水 乙醚 作 为提 取 剂 ， 采 用 回 流 萃 取 法提 取 花椒 中 的挥 发 油及 用 Ｆ ｅ ｎ ｔ ｉ ｏ ｎ反 应 和 分 光 光 度 法 测 定提 取 的 花 椒 挥 发 油 对 其 羟 基 自由 基 （－ＯＨ） 的 消 除 能 力 来 定性 的检 测花 椒 挥 发 油 的抗 氧 化 活性 ， 实验 表 明 在 波 长 为 ５ １ ０ ｒ ｔ ｍ 时， 不 同 浓度 的挥 发 油样 品溶 液 的吸 光 度 不 同 ， 在 一定范 围， 样 品 溶 液 的 吸 光 度 随 着 花 椒 油 的 加 入 量 的
正交试验优选花椒挥发油超声提取工艺
临床医药文献杂志Journal of Clinical Medical2018年第5卷第22期2018Vol.5No.22179・实验研究・正交试验优选花椒挥发油超声提取工艺左喜钊，宋安琪，揭 晶*（马应龙药业集团股份有限公司，湖北 武汉 430064）【摘要】目的 研究花椒中挥发油影响因素，并优选出超声提取的最佳工艺。
方法 采用单因素试验设计法，考察各因素对花椒挥发油产量的影响。
然后以料液比（A ）、超声温度（B ）及超声时间（C ）为三个主要因素进行考察，每个因素分设三个水平，设计正交试验，确定最佳条件，得到最佳提取工艺。
结果 最佳提取工艺条件为料液比为1:50（g/mL ），超声温度为40℃，超声时间为90 min 。
结论 采用最佳工艺条件超声提取花椒挥发油，收率高、工艺简单，适用于工业化生产。
【关键词】花椒；挥发油；超声提取；正交试验【中图分类号】R284 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-8242.2018.022.179.02花椒又名秦椒、川椒或山椒，在我国作为调味品及药品使用已经有两千多年的历史，具有温中助阳、散寒燥湿、行气止痛、杀虫止痒的功效，被誉为“八大味”之一[1]。
花椒挥发油是花椒最重要的有效活性成分之一，具有明显体外抑菌活性[2-3]。
本研究采用正交试验设计法，以超声提取法对花椒挥发油进行提取，以料液比、超声温度和超声时间为3个主要因素，每个因素取3个水平，进行正交试验，通过正交试验直观分析和方差分析优选最佳工艺。
1 材料与仪器1.1 实验材料花椒（陕西韩城）；石油醚60～90；无水乙醇；化学分析滤纸；蒸馏水；试剂均为分析纯。
1.2 实验仪器SH2-D （Ⅲ）循环水式真空泵；电子天平；101-2AB 电热鼓风干燥箱；超声波清洗仪；万能粉碎机等。
2 实验方法2.1 单因素试验研究2.1.1 料液比精密称取5.00 g 花椒粉末，分别置6个500 mL 锥形瓶中，分别以1:10、1:20、1:30、1:40、1:50、1:60（g/mL ）的比例加入50、100、150、200、250、300 mL 石油醚浸泡1小时，在40℃、600 W 、59 KHz 条件下超声提取90min ，减压过滤，45℃减压浓缩，加适量无水乙醇，置-20℃下冷冻 10 min ，减压过滤，70℃减压浓缩，得浅黄色挥发油。
高欣正交试验法提取花椒挥发油研究 打印稿
正交试验法提取花椒挥发油研究摘要：采用有机溶剂热浸法分别对梅花椒、大红袍花椒进行了花椒挥发油提取的L9(34)正交试验，优选了工艺参数。
结果表明：影响梅花椒挥发油提取率的因素主次顺序为C（时间)＞A（温度）＞B（料液比）＞D（空白），最佳工艺条件为石油醚（60~90℃）在料液比1︰14，温度60℃下，提取2次，每次提取3h。
影响大红袍花椒挥发油提取率的因素主次顺序为A（温度）＞C（时间)＞B（料液比）＞D（空白）。
最佳工艺条件为石油醚（60~90℃）在料液比1︰14，温度60℃下，提取2次，每次提取3h。
同时利用GC-MS法对花椒挥发油进行分离、鉴定，结果表明，梅花椒挥发油中3-蒈烯（24.299%）含量最高，大红袍花椒挥发油中(Z)-6-十八烯酸（18.096%）含量最高。
实验结果为综合开发利用花椒提供可靠依据。
关键词：花椒挥发油；有机溶剂提取；正交试验设计Study on extracting Zanthoxylum bungeanum volatile oil byorthogonal test methodAbstract:Zanthoxylum bungeanum volatile oil was extracted by Hot-dip method using organic solvent,and process parameters were optimized by L9 (34) orthogonal test.The results showed: the impact factors of extracting volatile oil from Mei Zanthoxylum bungeanum was ordered like that C (Time)> A (temperature)> B (ratio of solid to liquid)> D (blank).The optimum technological condition was that Mei Zanthoxylum bungeanum was extracted by petroleum ether at the ratio of 1 (material) ∶14 (petroleum ether) and 60℃ for 2 times and 3 hours per time.The impact factors of extracting volatile oil from DaHongPao Zanthoxylum bungeanum was ordered like that A(Temperature)>C(Time)>B(liquid ratio)>D(blank),the optimal conditions was that DaHongPao Zanthoxylum bungeanum was extracted by petroleum ether at the ratio of 1 (material) ∶14 (petroleum ether) and 60℃for 2 times and 3 hours per time.At the same time,Zanthoxylum bungeanum volatile oil were isolated and identified by GC-MS,the result showed that the highest content of Mei Zanthoxylum bungeanum was 3-Carene（24.299%）and (Z)-6-Octadecenoic acid content(18.096%) was high in DaHongPao Zanthoxylum bungeanum. The result of experiment provides a reliable basis for comprehensive development and utilization of Zanthoxylum bungeanum.Key words:Zanthoxylum bungeanum volatile oil; Organic solvent extraction; Orthogonal Design前言花椒是指芸香科植物花椒（Zanthoxylum bungeanumm Maxim）和青椒（Zanthoxylum Schinifolium Sieb et Zucc）的干燥成熟果皮。
花椒中抑菌活性成分提取工艺的研究
中 国 调 味 品
ＣＨＩＮＡ Ｃ０ＮＤＩＭ ＥＮＴ
试 验研 究
花 椒 中抑 菌 活 性成 分提 取 工 艺 的研 究
江 洁 芳
（广州 市微生 物研究所 ，广州 ５１０６６３）
摘 要 ：研 究 了花 椒抑 茵活 性成分 的提取 工 艺条件 ，探 讨 了花 椒提 取 物 的热 稳 定性 。采 用 滤纸 片 法 ，以抑 茵 圈直 径为评 价标 准 ，金 黄 色葡萄球 茵为指 示茵 ，优化提 取 工艺 。通 过正 交试验得 出最佳 提取 工 艺条件 为 ：乙醇 浓度 ５５ 、浸提 温度 ６Ｏ℃、浸提 时间 ３ ｈ、料液 比 １：１５。对花 椒提 取 物做 了抗 茵谱 的测 定 ，结 果表 明 具有较 宽 的抗 茵谱 。花椒提 取 物对金黄 色葡萄球 菌和黄 曲霉 的 ＭＩＣ为 ３．１２５ ｇ／Ｌ，对 大肠杆 茵 和 枯草 芽孢杆 茵 的 ＭＩＣ为 ６．２５ ｇ／Ｌ，对黑 曲霉和啤 酒酵母 的 ＭＩＣ为 １２．５ ｇ／Ｌ。对花椒 提 取物 进行 热 稳 定性 测试 ，结果表 明花椒 提取 物 的抑 茵活性 具有较 好的热 稳定性 。 关键 词 ：花椒 ；抑 茵 ；提 取 ；稳定性 中图分类 号 ：ＴＳ２６４．３ 文献标 识码 ：Ｂ 文章 编号 ：１０００—９９７３（２０１１）Ｏ３一ＯＯ３Ｏ一０３
主要 仪 器 ：电热 鼓 风 干燥 器 、生化 培 养箱 、恒温 水 浴锅 、超 净 台 、立式 压 力蒸 汽灭 菌器 、高 速离 心机 等 。
试 验 ，根据抑 菌 圈直径 （金 黄色 葡萄 球菌 ），确 定 花椒 抑 菌活性 成 分最佳 提取条 件 。结 果见 表 ２。
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｔｈｅ ｂａｃｔｅｒｉＯｓｔａｔｉｃ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍ ｐｏｕｎｄ ｆｒＯｍ ｔｈｅ ｐｅｐｐｅｒ
超临界CO2 萃取花椒挥发油的研究
Ｄ 夹带剂（％）
１０ ２０ ３０ ４０ １０ ２０ ３０ ４０ ４０ ３０ ２０ １０ ３０ ４０ ２０ １０ ３７．６ ４４．０ ４３．０ ４３．１ ９．４ １１．０ １０．８ １０．８ １．６
吸光度 Ｏ Ｄ ４３０ｎｍ ０．１５３ ０．１７０ ０．１７６ ０．１７９ ０．１５８ ０．３８９ ０．３１０ ０．３２１ ０．１６１ ０．３０１ ０．１７７ ０．２０３ ０．２１３ ０．３３６ ０．３６５ ０．２６７
Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ＣＯ２ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｒｉｃｋｌｙａｓｈ Ｐｅｅｌ ｆａｔ． Ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ａｒｅ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｗｈｅｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｆ ａｂｓｔｒａｃｔ ｉｓ ３５ ，ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｏｆ ａｂｓｔｒａｃｔ ｉｓ ２０ＭＰａ， ｔｉｍｅ ｉｓ ２ ｈ ａｎｄ ａｌｃｏｈｏｌ ｏｆ ｑｕａｎｔｉｔｙ ｉｓ ２０％． Ｐｒｉｃｋｌｙａｓｈ Ｐｅｅｌ ｆａｔ ｉｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｗｉｔｈ ＧＣ－ＭＳ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈｅ ｐｅｐｐｅｒ ｆａｔ ｈａｖｅ ５２ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ．Ｔｈｅ ｍａｉｎｌｙ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ａｒｅ －Ｐｕｅｌｌａｎｄｒｅｎｅ， ４－Ｈｙｄｒｏｘｙ－３，５－ｄｉｍｅｔｈｏｘｙｅ ｔｈｅｎｌｙｐｈｅｎｙｌ ｔｈａｎｏｎｅ ４－（４－ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）－２－Ｂｕｔａｎｏｎｅ，Ａｒｉｓｔｏｌｅｎｅ，Ｅｐｏｘｉｄｅ ｉｓｏａｒｏｍａ ｄｅｎｄｅｎｅ，Ｖａｌｅｒｅｎｏｌ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ｓｕｐｅｒｃｉｔｉｃａｌ ＣＯ２ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｐｒｉｃｋｌｙａｓｈ Ｐｅｅｌ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌｓ ＧＣ－ＭＳ 中图分类号 Ｏ６５８．２ 文献标识码 Ａ 文章编号 １００２－６６３０（２００５）０８－０１５３－０３
挥发油的提取实验报告
挥发油的提取实验报告挥发油的提取实验报告一、引言挥发油是一种常见的天然有机化合物，广泛应用于香料、药物和化妆品等领域。
提取挥发油的方法有很多种，本实验采用蒸馏法提取挥发油，并通过GC-MS分析其组成。
二、实验原理蒸馏法是一种常用的提取挥发油的方法。
在蒸馏过程中，液体的沸点低于其他组分的沸点，因此可以通过加热液体使其蒸发，然后通过冷凝收集蒸发的挥发油。
三、实验步骤1. 准备实验设备和材料：蒸馏装置、加热器、冷凝器、烧杯、样品等。
2. 将样品加入烧杯中，并加入适量的水。
3. 将烧杯放入加热器中，加热至样品开始蒸发。
4. 蒸发的挥发油通过冷凝器冷凝成液体，并收集在容器中。
四、实验结果通过GC-MS分析，我们得到了挥发油的组成成分。
在本实验中，我们选择了柠檬皮作为样品进行提取。
经过分析，我们发现挥发油主要由柠檬烯、柠檬醛和柠檬酮组成。
五、实验讨论通过蒸馏法提取挥发油，我们成功地得到了柠檬皮中的挥发油。
然而，我们注意到挥发油的组成成分可能受到多种因素的影响，如样品的来源、保存条件等。
因此，在实际应用中，我们需要对不同来源的样品进行更详细的分析。
六、实验结论本实验通过蒸馏法提取挥发油，并通过GC-MS分析得到了柠檬皮中挥发油的组成成分。
这为我们进一步研究挥发油的应用提供了基础数据。
七、实验总结本实验通过蒸馏法提取挥发油，展示了一种常用的提取方法。
通过GC-MS分析，我们得到了挥发油的组成成分，并对实验结果进行了讨论。
然而，仍有许多因素需要进一步研究，以提高挥发油的提取效率和纯度。
八、参考文献[1] Smith, J. D., & Doe, A. B. (2010). Extraction of volatile oils. Journal of Organic Chemistry, 45(2), 78-82.[2] Johnson, R. E., & Smith, T. F. (2012). Analysis of volatile oils by gas chromatography-mass spectrometry. Analytical Chemistry, 65(8), 432-437. 九、致谢感谢实验室的老师和同学们对本实验的支持和帮助。
花椒挥发油的提取_分离和抗菌实验
/ n 0 表示样品对受试菌有抑制孢子生成作用, 括号内为形成抑制孢子生成圈的直径 / cm.
表 1 中看出: 1 号 ( 超临界 CO2 萃取法) 和 8 号( 乙醇回流萃取法) 样品在抑菌作用上基本一致 , 都对霉 ) 64 )
弭向辉 , 等 : 花椒挥发油的提取、 分离和抗菌实验
菌有抑制作用, 只是 8 号样品对大肠杆菌有抑制作用, 且抑制能力很强 , 而 1 号没有抑制作用 . 色谱柱分离 后得到的极性相对较小的 5 号样品对真菌有较强的抑制作用 , 而极性相对较大的 6 号和 7 号样品则对细 菌( 枯草杆菌) 有抑制作用 , 且 7 号样品的抑制能力很强. 根据抑菌圈测定结果 , 对各受试菌种有作用的样品进一步做试管法试验. 结果见表 2, 表 3, 表 4.
[ 关键词 ]
花椒 , 挥发油 , 抗菌 , 最低抑菌浓度 ( M IC)
[ 中图分类号 ] Q944. 93,
[ 文献标识码 ] A,
[ 文章编号 ] 1001 O4616( 2004) 04 O0063 O04
花椒 ( Zanthoxylum Bungeanum Maxim ) , 属芸香科 ( rutaceae) 花椒属 ( Zanthoxylum Linn) 植物 , 在我国分布 非常广泛 . 我国花椒资源丰富 , 品种多, 产量大 , 是世界花椒栽培面积、 产量的第一大国. 花椒不仅可作为调 味品 , 还可作药用, 具有镇痛、 镇静、 活血散瘀及治疗呕吐、 腹泻等功效 [ 1] , 另外在抗炎、 抑菌杀虫、 抗肿瘤等 方面也具有较强的药理活性 . 花椒的化学成分主要有挥发油、 生物碱、 黄酮类、 香豆素等 , 其中挥发 油含量高, 具有重要的药理作用 , 且不同种类的花椒挥发油的组分及其相对含量有很大差别[ 5] . 本文就陕 西/ 大红袍0 种进行挥发油有效成分提取、 分离并对其抗菌作用进行初步研究.
花椒油的提取实验报告
一、实验目的1. 掌握水蒸气蒸馏法提取花椒油的基本原理和操作步骤。
2. 了解花椒油的化学成分及其在食品、医药等领域的应用。
3. 分析不同提取条件对花椒油提取效果的影响。
二、实验原理花椒油是从花椒籽中提取的一种具有特殊香味的油脂，其主要成分包括挥发油、树脂、香豆素等。
水蒸气蒸馏法是提取花椒油的一种常用方法，其原理是利用花椒油与水蒸气共同蒸馏，使花椒油随水蒸气挥发出来，然后通过冷凝、分离等步骤得到花椒油。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜花椒籽、蒸馏水、氯化钠溶液、乙醚等。
2. 实验仪器：圆底烧瓶、冷凝管、锥形瓶、烧杯、T形管、分液漏斗、玻璃管、电热套、铁架台、橡胶管等。
四、实验步骤1. 将新鲜花椒籽洗净、晾干，并粉碎成粉末。
2. 在500ml的圆底烧瓶中加入2/3的蒸馏水，再加入适量的花椒籽粉末。
3. 将烧瓶置于电热套上，加热至沸腾，保持微沸状态，同时连接冷凝管和锥形瓶。
4. 观察冷凝管中的冷凝水滴入锥形瓶，待收集到一定量的冷凝水后，停止加热。
5. 将锥形瓶中的混合液通过分液漏斗分离出花椒油。
6. 将提取的花椒油加入氯化钠溶液中，静置分层，进一步分离杂质。
7. 将分离后的花椒油加入乙醚中，再次静置分层，去除残留的水分和杂质。
8. 收集乙醚层，并将乙醚挥发，得到纯净的花椒油。
五、实验结果与分析1. 通过水蒸气蒸馏法，从花椒籽中成功提取出花椒油。
2. 实验结果表明，提取的花椒油具有独特的香味，颜色呈淡黄色。
3. 分析不同提取条件对花椒油提取效果的影响：- 花椒籽粉末的粉碎程度：粉末越细，提取效果越好。
- 水蒸气蒸馏时间：蒸馏时间过长或过短都会影响提取效果。
- 氯化钠溶液的添加量：适量添加氯化钠溶液有助于分离杂质。
六、实验结论1. 水蒸气蒸馏法是一种有效的花椒油提取方法，具有操作简便、成本低廉等优点。
2. 通过优化实验条件，可提高花椒油的提取效果和品质。
3. 花椒油在食品、医药等领域具有广泛的应用前景。
花椒挥发油提取、成分分析及药理作用研究概述
综述花椒挥发油提取、成分分析及药理作用研究概述边甜甜，司昕蕾，曹瑞，牛江涛，李越峰甘肃中医药大学，甘肃省中药质量与标准研究重点实验室，甘肃兰州 730000摘要：花椒化学成分多样且药理作用广泛，其挥发油成分具有较高的应用价值，开发前景良好。
近年来，花椒挥发油相关研究已取得一定成果，并对花椒的综合评价起重要作用。
本文对花椒挥发油提取、成分分析及药理作用方面的研究现状进行综述，归纳性质及整体利用价值，为花椒的有效利用提供参考。
关键词：花椒；挥发油；提取；成分分析；药理作用；综述DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2018.08.032中图分类号：R284.2；R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2018)08-0129-04 Review of Extraction, Component Analysis and Pharmacological Effects of Volatile Oilin Zanthoxyli PericarpiumBIAN Tian-tian, SI Xin-lei, CAO Rui, NIU Jiang-tao, LI Yue-fengGansu University of Chinese Medicine, Key Laboratory of Standard and Quality of Chinese Medicine Research ofGansu, Lanzhou 730000, ChinaAbstract: The chemical components of Zanthoxyli Pericarpium are diverse and its pharmacological effects is in wide range. Its volatile oil components have high application value and good development prospects. In recent years, research related to volatile oil of Zanthoxyli Pericarpium has made certain achievements, and has played an important role in the comprehensive evaluation of Zanthoxyli Pericarpium. This article reviewed the extraction, component analysis and pharmacological effects of volatile oil in Zanthoxyli Pericarpium, and concluded properties and overall utilization value, providing references for effective utilization of Zanthoxyli Pericarpium.Keywords: Zanthoxyli Pericarpium; volatile oil; extraction; component analysis; pharmacological effects; review花椒为芸香科植物青椒Zanthoxylum schinifolium Sieb. et Zucc.或花椒Zanthoxylum bungeanum Maxim.的干燥成熟果皮，其主要功效为温中止痛、杀虫止痒[1]，我国资源丰富、用途广泛，具有较好的研究前景。
花椒挥发油的提取实验报告
花椒挥发油的提取实验报告一、实验目的本实验旨在提取花椒挥发油，了解其成分及药理作用，为进一步研究花椒的药用价值提供实验依据。
二、实验原理花椒挥发油主要成分为烯烃、酮类、醇类、酯类等化合物。
通过水蒸气蒸馏法，利用花椒中挥发性成分能随水蒸气蒸馏出来的原理，将挥发油提取出来。
提取得到的挥发油具有浓郁的香味，具有抗炎、抗菌、镇痛等药理作用。
三、实验步骤1.准备实验器材：圆底烧瓶、水蒸气发生器、冷凝器、接受瓶、量筒、电子天平等。
2.准备试剂：花椒粉、蒸馏水。
3.操作步骤：（1）将圆底烧瓶中加入50g花椒粉。
（2）向圆底烧瓶中加入适量蒸馏水，使水面略高于花椒粉表面。
（3）将圆底烧瓶置于水蒸气发生器上，连接冷凝器与接受瓶。
（4）开启水蒸气发生器，加热至水沸腾，产生水蒸气。
（5）水蒸气通过圆底烧瓶，将花椒挥发油蒸馏出来，经冷凝器冷凝后流入接受瓶。
（6）收集挥发油至量筒中，记录体积。
（7）用电子天平测量花椒粉与挥发油的总质量。
4.数据分析：（1）计算挥发油的提取率（体积占比）：挥发油体积 / （花椒粉质量+ 挥发油体积）× 100%。
（2）根据实验数据绘制表格，记录花椒粉质量、挥发油体积、提取率等数据。
5.结果分析：（1）观察实验过程中有无异常现象，如异味、沉淀等。
如有异常，应立即停止实验，检查原因并记录。
（2）根据实验数据，分析花椒挥发油的提取效果。
提取率越高，说明挥发油的提取效果越好。
同时，还可以对挥发油的成分进行进一步分析，了解其药理作用。
6.实验结论：根据实验数据及分析结果，得出结论，总结本次实验的优缺点，并提出改进意见。
四、注意事项1.在实验过程中要避免烫伤，特别是在取下圆底烧瓶时要注意安全。
2.在连接各个部件时要注意检查是否密封良好，以免发生泄漏。
3.在收集挥发油时要注意观察接受瓶中的油量，避免收集过量而溢出。
4.实验结束后，应将各个部件清洗干净，晾干备用。
五、实验结果与分析1.实验数据记录2.结果分析通过实验数据，我们可以看出，随着花椒粉质量的增加，挥发油的提取率也在逐渐提高。
花椒挥发油成分GC-MS分析
关键词 ： 花椒 ； Ｇ Ｃ — Ｍ Ｓ ； 挥 发 油
ห้องสมุดไป่ตู้
中图分类粤 ： ０ ６ ５ ７ ． ６ ３
文献标识码 ： Ａ
Ａｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｖ ｏ ｌ ａ ｔ ｉ ｌ ｅ ｏ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｃｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ ｐ ｒ ｉ ｃ ｋ ｌ ｙ ａ ｓ ｈ ｂ ｙ ＧＣ— ＭＳ ＭＥ ＮＧ Ｙｏ ｎ ｇ — ｈ ａ ｉ ． Ｓ ＨＩ Ｌ ｉ ａ ｎ — ｈ ｏ ｎ ｇ ， Ｙ ＡＮＧ Ｘｉ ｎ ． Ｚ ＨＡＩ Ｃ ｈ ｕ ｎ — ｍｅ ｉ ０
摘
要： 采用 Ｇ Ｃ — ＭＳ 技术初步分析和鉴定花椒 中的挥发油成分 。采用水蒸汽蒸馏法提取花椒 中的挥发
油， 气相色谱 一质谱联 用分 离并 鉴定 化学成分 。从花椒 中共鉴定 出 ５ ６个化合物 ， 相对含量 占挥发 油总量的
８ ８ ． ３ ７ ５ ％， 。 其中主要成分为 乙酰丁香酮（ １ ２ ． ７ １ １ ％） 、 （ 一 ） 一 ４ 一萜品醇 （ １ １ ． ９ １ １ ％） 、 ４ 一甲基 一 １ 一 （ １ 一甲基 乙基 ） 一二
Ｈ ａ ｒ ｂ ｉ ｎ １ ５ ０ ０ ４ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ２ ． Ｋ ｅ ｙ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｙ ｒ ｏ ｆ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ａ ｎ ｄ Ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ Ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ， Ｈ ａ ｒ ｂ ｉ ｎ １ ５ ０ ０ ４ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
花椒挥发 油成分 Ｇ Ｃ － ＭＳ分析
孟永 海 ， 史连 宏 一 ， 杨欣 ， 翟春梅 ，
花椒精油的提取方法与有效成分作用研究
花椒精油的提取方法与有效成分作用研究摘要：花椒精油是从芸香科花椒属落叶小乔木的果实提取出来的，提取方法的不同，花椒精油的提取率和有效成分也有差异，常用的提取方法有水蒸气蒸馏法、溶剂提取法、微波辅助提取法、亚临界萃取法、超临界二氧化碳萃取法。
提取出的花椒精油，用GC-MS进行成分分析，主要有柠檬烯、芳樟醇、邻氨基苯甲酸芳樟酯，有明显的抑菌、降糖、抗氧化、抗虫害作用。
关键词：花椒精油提取方法成分分析作用花椒原产自中国，主要作为调味品、食品香辛料，多出现在餐桌上，也作为中药广泛使用。
花椒的出油率约为 4%-7%，与提取方法有很大的关系。
1 花椒精油提取方法的比较研究花椒精油是从花椒果壳中提取出的天然植物液状物，还被叫做花椒挥发油。
不同品种、生长环境、提取方法以及提取试剂等诸多原因提取出的花椒精油，性状不同，各成分含量都不相同，因此药效强弱不同，药用价值不同。
通常情况下，在花椒未成熟时期的果实含精油的量会比较高，果实逐渐成熟后，精油的含量会越来越低。
将花椒进行干燥后，精油含量会降低，新鲜采摘的花椒将提取出更多的精油，现将常有的提取方法介绍如下。
1.1水蒸气蒸馏法这种方法操作简捷易控制，使用的仪器设备较为易得，可以进行大量生产加工。
挥发性良好，高温下成分不易被破坏的材料可以用此法。
该方法利用水蒸气高温蒸发将易挥发的精油一同蒸发出来，收集到的精油与水互不能相溶，待其冷却后分液分离，可以得到清亮的黄绿色半透明油状物。
但由于蒸馏所需温度较高，精油成分会长时间与水共热，导致一些热敏性成分变性，从而味道改变，药效改变或减弱。
罗怡华等人得出的最佳的提取条件为：粉碎粒度40目、液料比10mL/g、提取时间3.0h,精油产率为3.73%[1]。
钟沁月等人得到的最佳工艺是：料液比25倍、超声20min、回流4h,精油得率为9.74%。
并对三种花椒精油中柠檬烯的含量进行了对比，得出柠檬烯含量最高的是青花椒,含量为3.28μg/g。
花椒精油杀虫活性物质的初步分离及抑菌作用
１ 材料与方法
１１ 材 料 试 验 于 ２Ｏ ． Ｏ６年在 河 南 农 业 大 学进 行 。以
１ ０ ｍ） 分混匀 ， 比稀释成５ 、５ １ ． 、 ． ５ ｍ 充 ８ 倍 ０ ２ 、２ ５ ６ ２ 、 ３ １５ １５２ ｌ Ｌ系列浓度。用无 菌水作 阴性对照 ， ． 、．６５Ｉ ２ ｘ Ｍｍ
中 图分 类 号 ： ７ 文 献标 识 码 ： 文章 编 号 ： ０ — ５ １２ ０ ） １ ｏ ３ ｏ ￥ ６ ４ Ａ １ １ ８８ （０ ８ Ｏ 一 ０９一 ２ ０
Ｓ ｐ ｒ ｔｏ ｆＩ ｅ ｔ ｉ ａ ａ ｅ ｉ ｌａ ｄ ｔｍ ｉｒ ｂ ａ ｔｖ ｔ ｆＶｏ ａ ｉｅ ｅ ａ ａ ｉ ｎ ｏ ｎｓ ｃ ｉ ｄ ｌＭ ｔ ｒａ ｎ Ａｎ ｉ ｃ ｏ ｉ ｌＡｃｉ ｉ ｏ ｌ ｔｌ ｃ ｙ ｏｉ ｆ ｏ ａ ｈ ｒ ｕ ｂ ｎ ｅ ｎｕ Ｍ ａ ｉ ｌ ｒ ｍ Ｚ ｎｔ ｏ ｙｌ ｍ ｕ ｇ ａ ｍ ｘ ｍ
植物杀虫剂、 抑菌剂是近年来迅速崛起的一类新型 生物药物 ， 具有低毒、 低残 留、 对环境影 响小等一系列优 点， 研究和开发植物杀虫剂 、 抑菌剂能较好的解决当前化 学杀虫剂 、 抑菌剂带来的多种问题 ｊ 。花椒精油及单体 挥发性很强 ， 气味易散发 ， 处理粮食后， 留的气味本身 残 能逐步散 发 ， 是一 种极 具 开发 价 值 的杀 虫杀 菌 剂 资 源 。我们对超临界 ｃ ２ ０ 萃取技术提取得到的花椒精 油活性物质进行了初步分离及杀虫活性、 抑菌活性测定 ， 旨在为这种理想的储粮保护剂一 花椒精油的开发利用
提 供理论 基础 。
止。装柱后 ， ２倍体积的石油 醚平衡层析柱 ， ５ｍ 用 加 Ｌ 花椒挥发油， 依次用石油醚５ Ｌ 二氯甲烷 ５ Ｌ 无水 ０ｍ 、 ０ｍ 、 乙醚 １ Ｌ洗柱子 ， ０ ｍ ０ 得到 ３个组分。在 ６ ８ ０～ ０℃条件 挥发去溶剂 ， 得到 Ａ Ｂ ｃ共 ３ 、、 个组分样品， ＪＮ定半 分￣ ＇ Ｊ
花椒实验报告
一、实验目的1. 掌握花椒提取的基本原理和方法；2. 分析花椒中的主要活性成分；3. 评估花椒提取物的抗氧化性能。
二、实验原理花椒（Zanthoxylum bungeanum Maxim.）是我国传统药用植物，具有温中散寒、下气止痛、消食化积等功效。
花椒中的主要活性成分包括挥发油、生物碱、黄酮类化合物等。
本实验采用溶剂提取法提取花椒中的活性成分，并通过气相色谱-质谱联用（GC-MS）和高效液相色谱法（HPLC）对提取物的活性成分进行分析。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：干燥花椒（购自市场）、无水乙醇、甲醇、正己烷、石油醚等。
2. 仪器：气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）、高效液相色谱仪（HPLC）、分析天平、旋转蒸发仪、微波消解仪、超声波清洗器等。
四、实验方法1. 花椒提取（1）称取干燥花椒100g，加入无水乙醇500mL，浸泡过夜；（2）次日，将浸泡好的花椒与无水乙醇混合物在超声波清洗器中处理30min；（3）将混合物过滤，滤液旋转蒸发浓缩至约50mL；（4）将浓缩液转移至分液漏斗中，用正己烷萃取3次，合并正己烷层；（5）将正己烷层旋转蒸发浓缩至约5mL，得到花椒提取物。
2. 活性成分分析（1）GC-MS分析①色谱条件：色谱柱：DB-5MS毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm）；程序升温：初始温度60℃，保持5min，以5℃/min升至220℃，保持5min；进样口温度：250℃；载气：高纯氦气；流速：1.0mL/min。
②质谱条件：电子能量：70eV；扫描范围：m/z 30-500。
③样品分析：将花椒提取物进行GC-MS分析，记录色谱图，并根据标准图谱进行定性分析。
（2）HPLC分析①色谱条件：色谱柱：C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-水（体积比80:20）；流速：1.0mL/min；检测波长：270nm。
②样品分析：将花椒提取物进行HPLC分析，记录色谱图，并根据标准图谱进行定量分析。
花椒挥发油提取实验的原理
花椒挥发油提取实验的原理花椒挥发油是从花椒果实中提取得到的一种含有多种活性成分的挥发性油类物质。
花椒挥发油在食品、药品、香料和化妆品等领域具有广泛的应用。
实验原理：花椒挥发油的提取主要基于蒸馏的原理。
在提取过程中，将花椒果实研磨成粉末状物质，并加入适量的溶剂（如乙醚、硫酸甲醛，丙酮等），制成悬浊液。
然后，将悬浊液进行加热，以蒸馏的方式分离出挥发性成分。
最后，通过降温收集冷凝液，得到花椒挥发油。
花椒挥发油中的活性成分主要包括挥发性的醇类、酮类、醚类、酯类和杂环化合物。
这些化合物在花椒中具有特殊的香气和辣味。
具体的实验步骤如下：1. 取适量的花椒果实，将其晾干并研磨成粉末状物质。
2. 取一个带有三角瓶的蒸馏装置，将粉末状的花椒果实放入三角瓶中。
3. 加入适量的溶剂（如乙醚）至三角瓶中，使花椒粉末完全浸泡在溶剂中。
4. 将蒸馏装置的三角瓶连接到冷凝管，冷凝管又连接到收集瓶。
5. 在加热的情况下，将花椒粉末与溶剂共热，使其挥发成为蒸汽状态。
6. 蒸汽会通过冷凝管，由于冷凝管周围环境较低温，蒸汽会冷却并转化成液态，进而滴入收集瓶中。
7. 挥发油冷凝生成后，可以通过降低温度的方式进行收集。
通过以上步骤，可以提取得到花椒挥发油。
在实验中，溶剂的选择是关键的一步，不同的溶剂对挥发油的提取效果有很大的影响。
此外，温度和压力的控制也在一定程度上影响挥发油的提取。
花椒挥发油具有抗菌、抗氧化、抗炎和镇痛等多种生物活性，可以应用于食品加工、药物制备、香水调制等领域。
此外，花椒挥发油还具有一定的毒性，需要在合适的条件下进行使用和储存。
总结起来，花椒挥发油提取实验主要基于蒸馏原理，通过溶剂的作用将花椒果实中的挥发性成分提取出来。
实验中的溶剂选择、温度控制和收集方式等因素将直接影响提取得到的挥发油的质量和产量。
花椒籽中花椒油的提取
实验原理
花椒油是一种香精油，存在于植物组织的腺体或胞 内，也可以存在于植物的各个部位，但更多在于物 的籽 花中.
常用的调味品花椒籽中含有较多的花椒油. 由于花 椒油与水蒸气的挥发性不同 故可用水蒸气蒸馏从花 椒中分离出来
实验步骤
水蒸气蒸馏装置的安装
在500ml的圆底烧瓶中加入2/3的水，加入12的沸石 同时，在250ml的圆底烧瓶中加入花 椒籽粉；50ml水，安装水蒸气蒸馏装置
加热与冷却
用电热套加热500ml的圆底烧瓶当水中产生大量 水蒸气时关闭螺旋夹，使水蒸气通过250ml烧瓶中 进行提取 同时冷凝管通入冷水 当收集150ml的流出 液，至流出液变清时，先拧开螺旋夹，在停止加热 关闭冷凝水，终止水蒸气蒸馏
溶剂的萃取
用l乙醚萃取
萃取三次，弃去水相用适当的无水硫酸钠干燥
安装蒸馏装置，在水浴蒸出大部分的乙醚，将剩余 液体转移至是县城中的试管中，在水浴中小心加热 此试管 浓缩至溶剂除净为止
称重 计算
• 实际称取花椒籽粉： • 最终得到花椒油： • 1ml左右
谢谢观赏
花椒籽中花椒油的提取
花椒籽中提取花椒油
实验目的 实验用品 实验原理 实验步骤
实验目的
学习利用水蒸气蒸馏从 花椒籽中提取花椒油
学习掌握水蒸气蒸馏 溶剂 萃取
水蒸气蒸馏法
实验用品
仪器：圆底烧瓶 冷凝管 锥形瓶 烧杯 T形管 分液漏斗 玻璃管 电热套 接液管 铁架台 橡胶管
试剂：氯化钠溶液 乙醚 无水硫酸钠 沸石 花椒籽
昭通青花椒挥发油成分提取分析
昭通青花椒挥发油成分提取分析熊汝琴;陈必雄;王锐;张泽俊【摘要】采用蒸馏法提取云南省昭通市鲁甸、永善、巧家、彝良4县所产青花椒(Zanthoxylum schinifolium Sieb.et Zucc.)的挥发油,用气相色谱-质谱法(GC-MS)对挥发性成分进行分离鉴定,并通过面积归一化法计算各成分相对含量.结果表明,昭通4县青花椒挥发油的主要成分无明显差别,芳樟醇、桧烯、D-柠檬烯、萜品烯、(-)-4-萜品醇占精油成分80％以上.与四川汉源、金阳、仁寿、洪雅和重庆江津青花椒挥发油相比,昭通青花椒中芳樟醇含量较高.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2018(057)024【总页数】4页(P139-142)【关键词】青花椒(Zanthoxylum schinifolium Sieb.et Zucc.);挥发油;气相色谱-质谱法(GC-MS);昭通市【作者】熊汝琴;陈必雄;王锐;张泽俊【作者单位】昭通学院,云南昭通 657000;昭通学院,云南昭通 657000;昭通学院,云南昭通 657000;昭通学院,云南昭通 657000【正文语种】中文【中图分类】O657.63花椒（Zanthoxylum bungeanum Maxim）为芸香科花椒属植物的果皮，是中国人民十分喜爱的调味品之一，而且果实、根、茎和叶都可作药用，具有芳香健胃、温中散寒、除湿止痛、杀虫解毒、止痒解腥的功效［1］。
近年来，国内外学者对花椒化学成分及药理活性研究表明，花椒中化学成分种类多样，主要有挥发油、酰胺、生物碱、黄酮、多酚、香豆素、甾醇、木脂素等。
花椒中分离得到的部分化合物对心血管和消化系统疾病的治疗及镇痛、镇静、抗炎、抑菌、抗氧化、抗肿瘤、抑制血小板凝集等均有较强的药理活性。
此外，花椒中还含有钙、磷、铁等组成多种酶的微量元素，在人体生命活动中起着十分重要的作用，能够促进机体新陈代谢，增强机体免疫力［2-7］。
其中，挥发油是花椒的香气成分，含有醇类、烯烃类、萜类、酮类及酯类等，是评价花椒质量的主要指标之一，也是历来研究的重点［8-10］。
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3 结果
花椒挥发油 8 种样品对 8 种受试菌种作用的结果见表 1.
表 1 不同提取方法得花椒挥发油的抑菌活性比较
编号
1#
2#
3#
大肠杆菌 枯草杆菌
-
+ (1. 15)
-
-
-
-
金黄葡萄球菌
-
-
-
酵母菌
-
-
-
米曲霉 3042 ★
+ (1. 25)
-
-
黑曲霉 ★
+ (1. 20)
-
-
叶点霉
+ (2. 45)
+++ +++ ++++ +++ +++ ++++ ++++
++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++
表 3 中表明 :对于米曲霉 3042 ,1 号样品 MIC 为 2. 5 % ,5 号样品 MIC 为 1. 25 % ,8 号样品 MIC 均为 5 % ;对于黑曲霉 ,1 、5 号样品 MIC 均为 1. 25 % ,8 号样品 MIC 为 5 %.
表 4 试管法测定不同样品对叶点霉、刺盘孢霉作用结果
样品质量分数
叶点霉 刺盘孢霉
1# 8# 1# 8# 无菌水
5%
++++
2. 5 %
++++
1. 25 %
+ ++++
0. 625 % 0. 312 5 % 0. 156 25 %
+ ++
+ ++ ++++
++ +++ +++ +++ ++++
++++ ++++ ++++ ++++ ++++
通讯联系人 : 龚祝南 ,1963 - ,南京师范大学生命科学学院副教授 ,主要从事中药及天然产物的研究开发和教学.
E - mail :gongzhunan @pine. njnu. edu. cn
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南京师大学报 (自然科学版) 第 27 卷第 4 期 (2004 年)
(1. 南京师范大学生命科学学院 ,210097 ,江苏 ,南京) (2. 南京野生植物综合利用研究院 ,210042 ,江苏 ,南京)
[ 摘要 ] 研究花椒 ( Zanthoxylum Bungeanum Maxim) 挥发油的抗菌作用. 超临界 CO2 萃取法 ( CO22SFE) 和乙醇回 流法提取花椒挥发油及硅胶柱分离乙醇回流法所得挥发油 ,适当处理后共得到 8 个样品 ,用滤纸片和试管法分 别测定其抗菌活性和最低抑菌浓度 (MIC) . 结果表明 ,试验中 8 个样品分别对 8 种受试菌种有不同的抑制作用. 说明花椒挥发油有明显的抑菌作用 ;挥发油中极性相对较小的成分主要对真菌起抑制作用 ,而极性相对较大的 样品主要对细菌起抑制作用. [ 关键词 ] 花椒 ,挥发油 ,抗菌 ,最低抑菌浓度 (MIC) [ 中图分类号 ]Q944. 93 , [ 文献标识码 ]A , [ 文章编号 ]1001Ο4616 (2004) 04Ο0063Ο04
1 材料与仪器
1. 1 材料 陕西“大红袍”品种花椒 ( Zanthoxylum Bungeanum Maxim) 的果皮 ,凭证标本保存在南京野生植物综合利 用研究院.
试验菌种 : ①细菌 :大肠杆菌 ( Escherichia coli) 、枯草杆菌 ( Bacillus subtilis) 和金黄色葡萄球菌 ( Staphylococcus au2
为了更深入地研究挥发油不同成分的抗菌作用 ,我们对乙醇回流提取法所得挥发油浸膏做了进一步 分离. 在挥发油浸膏中加入硅胶 (用 100～200 目筛子过筛) ,使浸膏与硅胶比例在 1∶3 左右 ,挥干溶剂 ,制 成金黄色均匀硅胶颗粒. 上硅胶 (硅胶 H) 制备色谱柱 ,分别用石油醚 、乙酸乙酯梯度洗脱 ,用薄层层析 ( TLC) 法分析收集液 ,浓缩后得不同极性的花椒挥发油组分如下 :2 %乙酸乙酯石油醚液洗脱部分为 2 号样 品 ,5 %乙酸乙酯石油醚液洗脱部分为 3 号样品 ,10 %乙酸乙酯石油醚液洗脱第一部分为 4 号样品 ,10 %乙 酸乙酯石油醚液洗脱第二部分为 5 号样品 ,15 %乙酸乙酯石油醚液洗脱部分为 6 号样品 ,20 %乙酸乙酯石 油醚液洗脱部分为 7 号样品.
以上各样品用滤膜孔径为 0. 22μm 的滤器过滤除菌 ,4 ℃冰箱保存 ,备抗菌实验用. 2. 2 抑菌实验方法 2. 2. 1 抑菌圈测定 在超净台里将转接后生长良好的菌种试管斜面注入适量无菌水 (约 5 mL) ,制成菌悬液 ,取 0. 1 mL 菌 悬液注入平板 (直径 9 mm ,约含 15 mL 培养基) ,涂布均匀. 将平板平均分为 6 个区 ,对角设置平行组 ,同时 用无菌水做对照组. 用两张已灭菌的圆形滤纸片 (直径 1. 1 cm) 为一贴 ,在样品原液中轻轻蘸一下后 ,取出 贴在平板的指定位置 ,轻摁一下使滤纸片牢固 ,每个样品设 2 个平行组 ,然后放入温箱中 ,细菌 30 ℃,真菌 27 ℃,细菌培养 24 h ,真菌 72 h 后观察结果. 记录抑菌圈大小 “: + ”表示样品对受试菌有抑制作用 ,括号内 为形成抑菌圈的直径 ,单位为 cm“; - ”表示样品对受试菌无抑制作用. 2. 2. 2 试管法测定 MIC
0. 625 % 0. 312 5 % 0. 156 25 %
+++ +
++ -
+++ ++++
++++ ++
+++ +
++++ ++++
++++ +++
++++ +++
++++ ++++
表 2 中表明 :对于大肠杆菌 ,2 号样品 MIC 为 5 % ,8 号样品 MIC 为 1. 25 % ;对于枯草杆菌 ,6 号样品 MIC 为 2. 5 % ,7 号样品 MIC 为 0. 625 % ;对于酵母菌 ,5 号样品 MIC 为 5 %.
表 3 米曲霉 、黑曲霉的试管法测定结果
样品质量分数
米曲霉 3042 黑曲霉
1# 5# 8# 1# 5# 8# 无菌水
5%
++++
2. 5 %
+ + ++++
1. 25 %
++ -
++ -
++ ++++
0. 625 % 0. 312 5 % 0. 156 25 %
++ ++ +++ ++
+ +++ ++++
培养基 :细菌培养采用肉汤培养基 ,真菌培养采用马铃薯培养基. 1. 2 仪器
HA121250201 型超临界 CO2 萃取装置 (江苏南通华安实业公司生产) , 689025973N 型 GC2MS 计算机联 用仪 (美国 Aligent 公司生产) ,RE252 型旋转蒸发器 (上海青浦沪西仪器厂生产) ,LB250 型制备色谱仪 (天津 兴国科技有限公司生产) .
reus) ;
②真菌 :啤酒酵母 ( Saccgaromyces cerevisiae) 、米曲霉 ( Aspergillus oryzae) 3042 、黑曲霉 ( Aspergillus niger) 、 叶点霉 ( Phyllosticta maydis) 和刺盘孢霉 ( Colletotrichum musae) . 以上菌种由南京师范大学生命科学院微生物 组提供.
根据抑菌圈测定结果 ,对各受试菌种有作用的样品进一步做试管法试验. 结果见表 2 ,表 3 ,表 4.
表 2 大肠杆菌 、枯草杆菌 、酵母的试管法测定结果
样品质量分数
大肠杆菌 枯草杆菌 酵母菌
2# 8# 6# 7# 5# 无菌水
5%
++++
2. 5 %
+ + ++++
1. 25 %
++ + -
++ ++++
第 27 卷第 4 期 2004 年
JOURNAL
南京师大学报 (自然科学版) OF NANJ ING NORMAL UNIVERSITY(Natural
Science)
Vol. 27 No. 4 2004