生物化学酶
生物化学酶
Km
[S]
反映了酶与底物的亲和力，Km值越小，亲 和力越高，酶对底物的催化效率也越高。
底物浓度，影响反应速率的重要因素之一 。
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12
影响酶促反应速率的因素
底物浓度
底物浓度增加，反应速率加快，但当底物 浓度达到一定程度后，反应速率不再随底
物浓度的增加而加快。
温度
在一定范围内，温度升高，反应速率加快 ；但超过一定温度后，酶会变性失活，反
利用不同物质在固定相和流动相之间分配系数的差异进行分离，如 凝胶层析、离子交换层析等。
电泳法
在电场作用下，利用酶分子所带电荷和形状大小的差异进行分离， 如凝胶电泳、等电聚耗法
通过测定底物消耗量来推算酶活性，如比色法、荧光法等。
产物生成法
通过测定产物生成量来推算酶活性，如放射性同位素标记法、高效 液相色谱法等。
03
酶在基因编辑中的应用
近年来发展的基因编辑技术如CRISPR-Cas9等，利用特定的酶实现对基
因组的精确编辑，为疾病治疗和基因功能研究提供了新的手段。
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07
实验技术与方法
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酶的分离纯化技术
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沉淀法
通过改变溶液条件使酶沉淀析出，包括盐析、有机溶剂沉淀等。
层析法
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05
生物体内重要酶类介绍
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氧化还原酶类
01
02
03
脱氢酶
催化底物脱氢反应的酶， 如乳酸脱氢酶、苹果酸脱 氢酶等。
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氧化酶
催化底物加入氧原子或失 去氢原子的酶，如细胞色 素氧化酶、醇氧化酶等。
生物化学第三章 酶
（四）酶的比活力（比活性） • 酶的比活力是指每单位质量样品中的酶 活力，即每毫克酶蛋白中所含的活力单 位数或每千克酶蛋白中所含的Kat数。
比活力=
酶活力单位数 酶蛋白质量（mg）
• 比活力是表示酶制剂纯度的一个重要指 标，对同一种酶而言，酶的比活力越高， 纯度越高。
七、酶促反应动力学
• 酶促反应动力学主要研究酶催化的反 应速度及影响反应速度的各种因素。 • 在探讨各种因素对酶促反应速度的影 响时，通常测定其初始速度来代表酶
单纯酶 酶→ 结合酶（全酶）→ 辅助因子→ 酶蛋白 辅酶 辅基 金属离子
●
●酶蛋白与辅助因子单独存在时均无催化活性，二 者只有结合成完整的分子时，才具有催化活性。 ●一种酶蛋白只与一种辅酶结合，组成一种全酶， 催化一种或一类底物进行某种化学反应。 ●一种辅酶可以和多种酶蛋白结合，组成多种全酶， 分别催化不同底物进行同一类反应。
（三） 诱导契合学说-关于酶作用专一性的假说 ●1890年，Emil Fischer提出“锁钥学说” ：底 物的结构和酶活性部位的结构非常吻合，就象 锁和钥匙一样，这样它们就能紧密结合形成中 间产物。
底物
+
酶
酶 –底物复合物
●1958年，Koshland提出“诱导契合学说”： 酶活性部位的结构与底物的结构并不特别 吻合，但活性部位具有一定的柔性，当底 物与酶接近时，可以诱导酶活性中心的构 象发生改 变，使之 成为能与 底物分子 密切结合 的构象 。
促反应速度，即底物转化量 <5% 时的
反应速度。
（一）酶浓度对反应速度的影响 • 当反应系统中底物的浓度足够大时， 酶促反应速度与酶浓度成正比，即 ν =k[E]。
(二) 底物浓度对反应速度的影响
生物化学 第四章 酶
生物化学 第四章 酶1、什么是酶?(酶的定义是什么)?酶的化学本质是什么?(1)酶是由活细胞产生的对特异底物具有高效催化作用的蛋白质和核酸(2) 化学本质：蛋白质2、什么是单体酶?寡聚酶?多酶复合体?多功能酶?单体酶：由一条多肽链构成的酶，溶菌酶；寡聚酶：由多个相同或不同亚基以非共价键连接的酶，磷酸化酶a ；多聚复合体：由几种酶靠非共价键彼此嵌合而成。
可一次催化连锁反应的复合体，丙酮酸脱氢酶系；多功能酶：一条多肽链上同时具有多种不同催化活性的酶，生物进化中基因融合的产物，DNA 聚合酶3、简述酶的分类?单纯酶、结合酶的定义是什么?酶蛋白、辅助因子的作用? 酶的分类：单体酶、寡聚酶、多酶复合体及多功能酶单纯酶：仅由多肽链组成，如淀粉、脲酶、核糖核酸酶等结合酶：由蛋白质部分和非蛋白质部分组成，其催化作用依赖于两部分的共同参与，如氨基转移酶、碳酸酐酶、乳酸脱氢酶等。
酶蛋白的作用：决定反应专一性辅助因子的作用：决定反应的种类与性质4、辅助因子的分类及分类依据是什么?各自(辅酶、辅基)的作用分别由哪些? 辅助因子的分类：辅酶和辅基。
分类依据：按照其与酶蛋白结合的紧密程度及作用特点不同辅酶的作用：与酶蛋白共价键结合紧密，不可用透析、超滤方法除去 辅基的作用：与酶蛋白非共价键结合不牢固，可用透析、超滤方法除去5、什么是酶的活性中心?酶的活性中心包括哪些基团?这些基团的功能是什么? 酶的活性中心：酶分子中必需基团相对集中，形成一个与底物特异性结合并催化其反应生成产物的具有特定三维结构的区域。
活性中心的基团 (1)结合基团：可与底物结合(2)催化基团：催化底物发生化学反应6、什么是酶原?什么是酶原激活?酶原激活的机制是什么?简述酶原激活的生理意义?酶原：是细胞内合成或初分泌时处于无活性状态的酶的前体 酶原激活：在一定条件下，酶原向有活性酶转化的过程。
酶原激活的生理意义：(1)酶原是酶的安全转运形式，避免细胞产生的酶对细胞进行自身消化，并使酶在特定的部位和环境中发挥作用，保证体内代谢正常进行。
生物化学第六章酶
邻近效应与定向排列：
3.表面效应使底物分子去溶剂化 酶的活性中心多是酶分子内部的疏水“口袋”， 酶反应在此疏水环境中进行，使底物分子脱溶剂 化 (desolvation)，排除周围大量水分子对酶和底 物分子中功能基团的干扰性吸引和排斥，防止水
化膜的形成，利于底物与酶分子的密切接触和结
合。这种现象称为表面效应(surface effect)。
维生素B2（核黄素）
维生素B2（核黄素） 维生素B1（硫胺素） 泛酸 硫辛酸 维生素B12 生物素 吡哆醛（维生素B6之一） 叶酸
辅酶中与酶蛋白共价结合的辅酶又称为辅基 (prosthetic group)。
辅基和酶蛋白结合紧密，不能通过透析或超 滤等方法将其除去，在反应中不能离开酶蛋
白，如FAD、FMN、生物素等。
酶原激活的生理意义 避免细胞产生的酶对细胞进行自身消化， 并使酶在特定的部位和环境中发挥作用，保证 体内代谢正常进行。
有的酶原可以视为酶的储存形式。在需要
时，酶原适时地转变成有活性的酶，发挥其催
化作用。
第三节 酶的作用机制
（一）酶比一般催化剂更有效地降低反应活化能
酶和一般催化剂一样，加速反应的作 用都是通过降低反应的活化能 (activation energy) 实现的。 活化能：底物分子从初态转变到活化 态所需的能量。
2.邻近效应与定向排列使诸底物正确定位于 酶的活性中心 酶在反应中将诸底物结合到酶的活性中心，使它 们相互接近并形成有利于反应的正确定向关系。 这种邻近效应(proximity effect)与定向排列 (orientation arrange)实际上是将分子间的反应变 成类似于分子内的反应，从而提高反应速率。
生物化学03 酶
1、酶的别构（变构）效应 •概念：有些酶分子表面除了具有活性中心外，还存在被称为调节位
点（或变构位点）的调节物特异结合位点，调节物结合到调 节位点上引起酶的构象发生变化，导致酶的活性提高或下降， 这种现象称为别构效应，具有上述特点的酶称别构酶。
效应剂
别
构 中
活性 中心
心
2、酶的多种分子形式——同工酶
最适 温度
温度
4、pH对酶促反应速度的影响
v
•过酸过碱导致酶蛋白变性
•酶的最适pH不是一个固定 不变的常数
最
pH
适
pH
5、激活剂对酶作用的影响
凡是能提高酶活力的物质，称为酶的激活剂。
类别
金属离子：K+、Na+、 Mg2+、Cu2+、Mn2+、Zn2+、Se3+ 、 Co2+、Fe2+ 阴离子： Cl-、Br有机分子 抗坏血酸、半胱氨酸、谷胱甘肽
v
Vm axS K m S
PE
（2）米氏常数Km的意义
① 当v=Vmax/2时，Km=[S]（ Km的单位为浓度单位） ②是酶在一定条件下的特征物理常数，通过测定Km的数值，可
鉴别酶。 ③可近似表示酶和底物亲合力，Km愈小，E对S的亲合力愈大，
Km愈大，E对S的亲合力愈小。 ④在已知Km的情况下，应用米氏方程可计算任意[s]时的v，或
相对专一性：要求底物具有一定的化学键，且对键的某 一端所连的基团也有一定的要求，如胰蛋白酶。
键专一性：只作用于一定的键，而对键两端的基团并无 严格要求，如二肽酶。
2、 立体异构专一性 只能催化一种立体异构体，对另一种立体异构体无
作用，如乳酸脱氢酶能催化L-乳酸，而不能催化D-乳酸。
生物化学 第3章 酶
生物化学第3章酶生物化学第3章酶第3章酶自学建议1.掌握酶及所有相关的概念、酶的结构与功能的关系、酶的工作原理、酶促反应动力学特点、意义及应用。
2.熟识酶的分子共同组成与酶的调节。
3.了解酶的分类与命名及酶与医学的关系。
基本知识点酶是对其特异底物起高效催化作用的蛋白质。
单纯酶是仅由氨基酸残基组成的蛋白质，融合酶除所含蛋白质部分外，还所含非蛋白质辅助因子。
辅助因子就是金属离子或小分子有机化合物，后者称作辅酶，其中与酶蛋白共价紧密结合的辅酶又称辅基。
酶分子中一些在一级结构上可能相距很远的必需基团，在空间结构上彼此靠近，组成具有特定空间结构的区域，能与底物特异结合并将底物转化为产物，这一区域称为酶的活性中心。
同工酶就是指催化剂相同化学反应，酶蛋白的分子结构、化学性质乃至免疫学性质相同的一组酶，就是由相同基因编码的多肽链，或同一基因mRNA分解成的相同mrna所译者的相同多肽链共同组成的蛋白质。
酶促反应具有高效率、高度特异性和可调节性。
酶与底物诱导契合形成酶-底物复合物，通过邻近效应、定向排列、表面效应使底物容易转变成过渡态。
酶通过多元催化发挥高效催化作用。
酶促反应动力学研究影响酶促反应速率及其影响因素，后者包括底物浓度、酶浓度、温度、ph、抑制剂和激活剂等。
底物浓度对反应速率的影响可用米氏方程表示。
v?vmax[s]km?[s]其中，km为米氏常数，其值等同于反应速率为最小反应速率一半时的底物浓度，具备关键意义。
vmax和km需用米氏方程的双倒数作图去求得。
酶在拉沙泰格赖厄县ph和拉沙泰格赖厄县温度时催化活性最低，但拉沙泰格赖厄县ph和拉沙泰格赖厄县温度不是酶的特征性常数，受到许多因素的影响。
酶的抑制作用包含不可逆遏制与对称遏制两种。
对称遏制中，竞争抑制作用的表观km值减小，vmax维持不变；非竞争抑制作用的km值维持不变，vmax增大，反竞争抑制作用的km值与vmax均增大。
在机体内酶活性与含量的调节是代谢调节的重要途径。
生物化学酶
活化能阈:低能分子转变 为高能分子所需要的 最低能量。
酶
活化能阈
活化分子相对数量 反应速度
2.高度的特异性（专一性）
酶的特异性
酶对底物的选择性。
酶对底物具有严格的选择性。即一种酶只能作用于一
种或一类底物，或一定的化学键，催化一定的反应，得到
一定的产物。
（1）绝对特异性
指某些酶只能作用于一种
特定的底物，进行一种反应，生成特定的产物的
碳酸酐酶、羧肽酶
Mg2+
激酶类、磷氨酸酶
Mn2+
精氨酸酶、超氧化物歧化酶
Na+
质膜 ATP 酶 (也需K+和Mg2+)
K+
丙酮酸激酶 (也需Mg2+和Mn2+ )
维生素(vitamin) ---------机体维持正常生理功能所必需，但在人体 内不能合成或合成量很少，必须由食物供给的一 组低分子有机物质。
酶所具有的催化能力
。酶失活
酶失去了催化能力
。
二、酶作用的特点 （一）共同点
1.只能进行热力学上允许进行的反应； 2.缩短化学反应到达平衡的时间，而不 改变反应的平衡点； 3.反应前后没有质和量的改变。
（二）酶作用的特点
1.高度的催化效率
通常要高出非生物催化剂催化活性的 106~1020倍
酶与一般催化剂催化效率的比较
维生素的分类与命名：
脂溶性维生素 维生素A、D、E、K 按溶解性
分为
水溶性维生素
B族维生素：B1、B2、PP、 泛酸、B6、叶酸、生物素、B12 、
B族维生素的主要作用：维构生成素酶C、的硫辅辛酶酸 或辅基参与体内物质代谢。
特点：
生物化学-酶
酶一级结构的差别也决定了催化性质的不同， 如胰蛋白酶、 胰糜蛋白酶和弹性蛋白酶三种蛋白 酶的活性中心Ser残基附近都有一个在立体结构上 的“口袋”状结构。由于三种蛋白酶的口袋”状结 构不同，决定其与不同底物结合即有不同特异性。
酶的特异的三维空间结构是酶催化功能的基础。 酶的二、三级结构是维持酶的活性中心空间构象的 必需结构。
酶的命名包括习惯命名和系统命名，酶可分为六类。 酶与疾病发生、诊断、治疗等密切相关。
➢一、酶的概念 酶是由生物活细胞产生的具有高效催化功能
和高度专一性的一类特殊蛋白质，又叫生物催化 剂•．绝大多数的酶都是蛋白质。
酶的化学本 质是什麽？
酶的概念
• 一、相关概念 • 酶催化的生物化学反应，称为酶促反应。 • 被酶的催化的物质称为底物(S) • 反应的生成物为产物（P） • 酶所具有的催化能力称酶的活性． • 酶失去催化能力称酶的失活．
第四章 酶 (Enzymes)
内容简介
酶是具有高度催化效率及高度特异性的蛋白质。 酶通过多种机制降低反应活化能使反应速率增加。 酶分子一级结构及空间结构是催化功能的基础。 酶促反应速率受到[S]、[E]、pH、T、抑制剂及激活
剂的影响
酶活性可受到别构调节、共价修饰、酶原激活、关键 酶、多酶体系、同工酶等调节
H N C O
COOH CH
R6
氨基酸
氨基酸
消化道中各种蛋白酶的专一性
3．立体异构特异性：一些酶仅能催化一种立体异
构体进行反应，或其催化的结果只产生一种立体异
构体，酶对立体异构物的选择性称为立体异构特异
性（stereospecificity）。
L-乳酸
D-乳酸
H
H
C
OH
酶名词解释生物化学
酶名词解释生物化学
酶是一类特殊的蛋白质，它们能够促进生物体内的生物化学反应，大多数酶都是由氨基酸构成的，它们是一种非常重要的活性物质，主
要起到催化反应的作用。
酶在细胞代谢中具有重要作用，它们可以促
进物质的合成，也可以代谢物质或物质类别，使其变成另一种物质或
物质类别。
在生物体内，酶活动受到许多因素的影响，如pH、温度、酸碱度等，因此，当环境条件发生变化时，这些条件就会影响酶活性的变化。
人体的各种酶的活性，受到多种因素的影响，这些因素是酶的活性的
主要影响因素之一。
合适的pH值是释放酶活性最重要的条件之一，
酶在pH值变化不大，生物体正常温度范围内，才能发挥最大活性，如
果受到外界环境影响，会出现活性降低或丧失的情况。
酶特性稳定性也是其发挥功能的重要因素，生物体的酶的活性一
定的条件下会稳定，活性的变化不大。
常见的酶是热稳定的，水溶性的，能够耐受较高的温度，而冷稳定的酶则受冷的影响，它的活性会
随着温度的降低而降低。
酶可以将一种物质转化成另一种物质，这种物质通常是激素和药物，它们可以促进生物体内物质的消化和吸收，也可以促进有机物质
的形成，例如胆汁酸、胰液酶等，它们可以帮助人体正常的新陈代谢，而且与免疫反应和胃肠道有关的酶也起着重要作用。
以上就是对酶名词解释生物化学的大概介绍，酶是生物体内重要
的反应物质，它们可以催化和促进物质的合成、代谢，并受到外界环
境条件影响，代谢过程中发挥重要作用，是生物体新陈代谢过程中不
可或缺的一环。
生物化学-第二章-酶
*有机磷农药：敌百虫、敌敌畏、乐果杀虫剂1059 等
（二）可逆抑制
抑制剂与酶蛋白通过非共价键可逆性结合，使 酶活性降低或消失。
可用透析或超滤方法将抑制剂除去。
竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制
① 竞争性抑制(Competitive inhibition)
➢抑制剂与底物结构相似，可与底物竞争酶的 活性中心，与酶形成可逆的EI复合物，减少 酶与底物结合的机会，从而抑制酶活性。
基团
其它
二、 酶原及其激活
酶原(zymogen)： ✓在细胞内合成和初分泌的无活性的酶的前体。
酶原激活： ✓在一定条件下，由无活性的酶原转变为有催 化活性的酶的过程，其实质是酶的活性中心 形成或暴露的过程。
生理意义：
✓可视为有机体对酶活性的一种特殊调节方式， 保证酶在需要时在适当的部位、适当的时间 发挥作用，避免在不需要时发挥活性而对组 织细胞造成损伤。酶原还可以视为酶的一种 贮存形式。
5、具有生物催化剂特征的核酶(ribozyme)其 化学本质是（ ）
A、蛋白质 B、RNA C、DNA D、糖蛋白
一、名词解释 1.酶 2.酶原 3.竞争性抑制剂 4.辅基/辅酶
二、填空题：
1.酶催化作用的特点是
、
、
、
。
2.影响酶促反应的因素有 、 、 、 、 。
三、问答题： 1.何谓酶原激活？试述酶原激活的机理及其生理意义。
➢抑制剂与变性剂的区别： ✓抑制剂对酶有一定的选择性，而变性剂 对酶没有选择性
➢抑制的类型：
不可逆抑制
竞争性抑制
可逆抑制 非竞争性抑制
反竞争性抑制
（一）不可逆抑制
➢抑制剂通常以共价键与酶蛋白活性中心上的 必需基团结合，使酶活性消失。
生物化学——第三章酶
2）高度专一性
• 酶的专一性 （Specificity）(特异性)
指酶在催化生化反应时对底物的选择性。
3）反应条件温和,对环境变化敏感
• 酶促反应一般在pH 5-8 水溶液中进行，反应温度范
围为20-40C。 • 高温或其它苛刻的物理或化学条件，将引起酶的失活。
4) 酶的催化活力受调控
如抑制剂调节、共价修饰调节、反馈调节、酶原激活 及激素控制等。
结构专一性 键专一
基团专一
1）绝对专一性
（结构专一性）
• 酶对底物的要求非常严格，只作用于一个特定的 底物。这种专一性称为绝对专一性（Absolute specificity)。
• 例：脲酶、
O
2HN-C-NH2
• 精氨酸酶
2)相对专一性(Relative Specificity)
• 酶的作用对象不是一种底物，而是一类化合物或
+ E
酶 与 中 间 产 物
3、决定酶专一性的机制
（a）锁钥学说：认为整个酶分子的天然构象是具有刚
性结构的，酶表面具有特定的形状。酶与底物的结合如
同一把钥匙对一把锁一样
（b）诱导契合学说：
酶表面并没有一种与底物互补的固定形状，但酶的活性 中心具有一定的柔性，两者相遇底物诱导酶构象发生变 化，才形成了互补形状。
(2)酸碱性基团：
CH2 H2N CH2 C
• Asp和Glu的羧基
• Lys的氨基
OH H2N
• Tyr的酚羟基
• His的咪唑基 • Cys的巯基等
活性中心的结构特点
• 只占酶分子总体积的很小一部分 • 具有三维空间结构
• 酶的活性部位和底物的辨认和结合过程，称
为诱导契合（induced-fit）
生物化学第四章酶
⽣物化学第四章酶第四章酶酶是⼀类具有⾼效率、⾼度专⼀性、活性可调节的⾼分⼦⽣物催化剂。
1957巴斯德提出酒精发酵是酵母细胞活动的结果。
1 分⼦Glc→2分⼦⼄醇+2分⼦CO2 从Glc开始，经过12种酶催化，12步反应，⽣成⼄醇。
1897 Buchner兄弟证明发酵与细胞的活动⽆关，不含细胞的酵母汁也能进⾏⼄醇发酵。
1913 Michaelis和Menten提出⽶⽒学说—酶促动⼒学原理。
1926 Sumner⾸次从⼑⾖中提出脲酶结晶，并证明具有蛋⽩质性质。
1969 化学合成核糖核酸酶。
1967-1970 从E.coli中发现第I、第II类限制性核酸内切酶。
1986 Cech发现四膜⾍细胞⼤核期间26S rRNA前体具有⾃我剪接功能。
ribozyme ，deoxyribozymeE.coRI5’——GAA TTC——3’3’——CTTAAG——5’限制作⽤修饰作⽤5’——GAATTC——3’5’——GAATTC——3’3’——CTTAAG——5’ 3’——CTTAAG——5’第⼀节酶学概论⼀、酶的⽣物学意义⼤肠杆菌⽣命周期20分钟，⽣物体内化学反应变得容易和迅速进⾏的根本原因是体内普通存在⽣物催化剂—酶。
没有酶，⽣长、发育、运动等等⽣命活动就⽆法继续。
限制性核酸内切酶（限制-修饰）⼆、酶的概念及其作⽤特点1、酶是⼀种⽣物催化剂酶是⼀类具有⾼效率、⾼度专⼀性、活性可调节的⾼分⼦⽣物催化剂。
⽣物催化剂：酶(enzyme)，核（糖）酶(ribozyme)，脱氧核（糖）酶(deoxyribozyme)2、酶催化反应的特点（1）、催化效率⾼酶催化反应速度是相应的⽆催化反应的108-1020倍，并且⾄少⾼出⾮酶催化反应速度⼏个数量级。
（2）、专⼀性⾼酶对反应的底物和产物都有极⾼的专⼀性，⼏乎没有副反应发⽣。
（3）、反应条件温和（4）、活性可调节根据据⽣物体的需要，许多酶的活性可受多种调节机制的灵活调节，包括：别构调节、酶的共价修饰、酶的合成、活化与降解等。
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习题——酶一、选择题1．具有生物催化剂特征的核酶(ribozyme)其化学本质是（B）A．蛋白质B．RNA C．DNA D．糖蛋白2．下列关于酶活性中心的叙述正确的是（A）A．所有酶都有活性中心B．所有酶的活性中心都含有辅酶C．酶的活性中心都含有金属离子D．所有抑制剂都作用于酶活性中心。
3．酶催化作用对能量的影响在于（B）A．增加产物能量水平B．降低活化能C．降低反应物能量水平D．增加活化能4．酶原作为酶的前体，其特性为（B）A．有活性B．无活性C．提高活性D．降低活性5．如果有一酶促方反应，[S]=1/2Km，v等于（B ）A．0.25Vmax B．0.33Vmax C．0.50Vmax D．0.75Vmax 6．一种酶的竞争性抑制剂将有的动力学效应是（ A ）A．K m值增加，V max不变B．K m值减小，V max不变C．K m值不变，V max增大D．K m值不变，V max减小7．K m值与底物亲和力大小关系为（A）A．K m值越小，亲和力越大B．K m值越大，亲和力越大C．K m值与底物亲和力无关D．1/K m越小，亲和力越大8．乳酸脱氢酶属于（A）A．氧化还原酶类B．转移酶类C．水解酶类D．异构酶类9．转氨酶的辅酶是（D）A．NAD+B．NADP+C．FAD D．磷酸吡哆醛10．辅酶不具有的功能是（D ）A．转移基团B．传递氢和电子C．某些物质分解代谢时的载体D．决定酶的专一性11．酶原激活的生理意义是（C）A．加速代谢B．促进生长C．避免自身损伤D．保护酶的活性12．某种酶活性需要以—SH为必需集团，能保护此酶不被氧化的物质是（B ）A．Cys B．GSH（谷胱甘肽）C．尿素D．乙醇13．下列符合“诱导锲合”学说的是（B）A．酶与底物的关系如锁钥关系B．酶活性中心有可变性，在底物的影响下其空间构象发生一定的改变，才能与底物进行反应C．底物类似物不能诱导酶分子构象的改变D．底物和酶不直接接触，而是以辅酶为桥梁进行接触，底物与酶的结构发生一定变化并联结在一起14．米氏方程能很好的解释（C）A. 多酶体系反应过程的动力学过程B. 多底物酶促反应过程的动力学过程C. 单底物单产物酶促反应的动力学过程D. 非酶促简单化学反应的动力学过程15．酶的比活力是指（B）A. 以某种酶的活力作为1来表示其他酶的相对活力B. 每毫克蛋白的酶活力单位数C. 任何纯酶的活力与其粗酶的活力比D. 每毫升反应混合液的活力单位16．一种酶的非竞争性抑制剂会有的动力学效应是（D）A．Km值和Vmax都减小B．Km值减小，Vmax不变C．Km值不变，Vmax增大D．Km值不变，Vmax减小17．对于具有正协同效应的别构酶，V达到Vmax的10％时的[S]与V达到Vmax的90％时的[S]之比可能为（ B ）A．1：500 B．1：100 C．1：1 D．1：318．下列有关酶的概念哪一项是正确的（D）A. 所有蛋白质都有酶活性B. 其底物都是有机化合物C. 其催化活性都需有特异的辅助因子D. 一些酶的活性是可以调节控制的二、填空题1、根据酶的专一性程度不同，酶的专一性可以分为立体专一性、几何专一性和底物专一性。
2、 Km是酶的特征常数，表征酶的催化效率。
3、酶是生物催化剂，其特点是专一性、高效性、温和性。
4、酶的化学本质是蛋白质和RNA。
5、影响酶促反应速度的因素有PH 、温度、底物浓度、酶量、离子强度等。
三、判断题1．抑止剂对酶的抑止作用是通过使酶变性从而导致失活。
（N）2．米氏常数只与酶的种类有关，而与酶的浓度无关。
（Y ）3．酶分子中形成活性中心的氨基酸的残基在其一级结构的位置上并不相连，而在空间结构上却处于相近位置。
（Y ）4．如果加入足够的底物，即使存在非竞争性抑制，酶催化反应也能达到正常的Vmax。
（N ）5．酶促反应的初速度与底物浓度无关。
（Y）6．对于酶的催化活性来说，酶蛋白的一级结构是必需的，而与酶蛋白的构象关系不大。
（N）7．固定化酶是指无需提取直接固定在细胞内的酶。
（N）8．当底物处于饱和状态时，酶促反应的速度与酶的浓度成正比。
（Y ）9．固定化酶有很多优点，但其很难作用于水不溶性底物。
（Y）10．对于多酶体系，正调节物一般是别构酶的底物，负调节物一般是别构酶的直接产物或代谢序列的最终产物。
（Y ）11．酶和底物的关系比喻为锁和钥匙的关系是很恰当的。
（N）12．酶原激活过程实际就是酶活性中心形成或暴露的过程。
（Y）13．米氏常数（Km）是与反应系统的酶浓度无关的一个常数。
（Y ）14．本质为蛋白质的酶是生物体内唯一的催化剂。
（N）15．一种酶有几种底物就有几种Km值。
（N）16．酶的催化作用具有一定的专一性。
（Y）17．Km是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶浓度无关。
（Y）四、名词解释1、酶活力：酶活力也称为酶活性，是指酶催化一定化学反应的能力。
2、酶的活性中心：酶分子中直接与底物结合，并和酶催化作用直接有关的区域叫酶的活性中心2、酶原酶的无活性前体：有些酶合成之后是没有活性的，需要酶原的激活，无活性的酶是有活性酶的酶原酶活性前体4、同工酶：来源于同一种系、机体或细胞的同一种酶具有不同的形式。
催化同一化学反应而化学组成不同的一组酶。
5、固定化酶：水溶性酶经物理或化学方法处理后，成为不溶于水的但仍具有酶活性的一种酶的衍生物。
在催化反应中以固相状态作用于底物。
6、米氏常数K m在酶促反应中，某一给定底物的动力学常数，是由反应中每一步反应的速度常数所合成的。
7、诱导契合学说为说明底物与酶结合的特性，在锁钥学说的基础上提出的一种学说。
底物与酶活性部位结合，会引起酶发生构象变化，使两者相互契合，从而发挥催化功能。
8、核酶：是具有催化功能的RNA分子,是生物催化剂。
9、组成酶：细胞内以相对恒定量存在的酶，其含量不受组织、介质的组成和生长条件的影响。
10、多酶体系（多酶复合体）：在完整细胞内的某一代谢过程中，由几种不同的酶联合组成的一个结构和功能的整体，催化一组连续的密切相关的反应。
11、酶原激活：某些酶在细胞内合成或初分泌时没有活性，这些没有活性的酶的前身称为酶原,使酶原转变为有活性酶的作用称为酶原激活五、问答题1、举例说明酶的结构和功能之间的相互关系。
大多数酶的主要成分是蛋白质,蛋白质是由氨基酸组成.之间有一种称为多肽链的结构进行连接.主要是用作催化不同的物质.例如人的胃中就有胃蛋白酶的协助消化作用.这是一种高效的催化剂,比很多无机催化剂的效率高很多.2、pH影响酶反应速度的三种可能原因是什么?PH可能可以影响酶蛋白的结构，酶活性部位的解离状态，辅酶的解离以及底物分子的解离，从而影响酶与底物的结合以及对底物的催化能力。
3、脲酶的Km值为25mM，为使其催化尿素水解的速度达到最大速度的95%，反应系统中尿素浓度应为多少?写出计算过程。
解：0.95Vmax = Vmax[S]/Km + [S]0.95Km + 0.95[S] = [S]0.05[S] = 0.95Km[S] = 19Km[S] = 475 mM所以反应系统中尿素浓度为475 mM4、温度对酶反应速度的双重影响是什么?一是反应速率随着温度的升高而升高，二是蛋白质结构在较高温度下的热变性。
5、什么是可逆的抑制作用？有哪几种类型？相应Km及Vmax的变化情况？可逆抑制作用是通过非共价方式同酶结合。
由于是通过非共价结合，很容易通过透析或者凝胶过滤等方法从酶溶液中除去。
可逆抑制作用分为三类：1、竞争性抑制 2、反竞争性抑制 3、非竞争性抑制竞争性抑制：Km增大，Vmax不变反竞争性抑制：Vmax和Km降低，Vmax/Km比值不变非竞争性抑制：1、纯粹非竞争性抑制：Vmax降低，Km保持不变2、混合非竞争性抑制：Vmax降低，Km升高或者降低6、当一酶促反应进行的速度为V max的80％时，在K m和[S]之间有何关系？据米氏方程V=Vmax ×[S]/(Km+[S])，有Km=1/4[S]。
7、已知工业生产L-苹果酸是采用富马酸酶催化富马酸加水形成L-苹果酸，现从100 ml 的粗酶液中取2 ml，用凯氏定氮法测得含蛋白氮0．4 mg 。
再取1 ml 酶液，以富马酸为底物反应10分钟形成了20μmol苹果酸。
酶活力单位；以每分钟能转化1 μmol 富马酸的酶量为一个活力单位。
试问：1．计算该酶液中的蛋白含量和富马酸酶的比活力2．总活力及理论最大反应速度（以100 ml 酶液计）。
解： m = 0.4÷0.16÷2×100= 125 mg比活力： (20÷10×100)/125 = 1.6 zV/mg总活力：20÷10×100 = 200 zVVmax = 100×20/10 = 200 zV7、试简述Km的意义及应用（1）Km值等于酶促反应速度为最大速度一半时的底物浓度。
（2）Km值越小，酶与底物的亲和力越大。
（3）Km是酶的特征性常数，只与酶的结构、底物和反应环境有关，与酶的浓度无关。
8、写出酶对细胞代谢的两种主要调节方式，并简述酶活性调节的两种主要方式。
酶对细胞代谢两种主要调节方式：1、激素调节2、神经调节酶活性调节：1、酶量调节2、酶活性调节。