【CN109999189A】用于预防弓形虫感染的RHΔtkl1减毒活疫苗及其制备方法和应用【专利】
犬、猫弓形虫基因重组疫苗简介
四、弓形虫的危害
弓形虫感染的孕妇可将病原通过胎盘垂直传播给胎儿，造 成流产、早产、死胎和畸胎等； 存活的胎儿也往往伴随有弓形虫性脑、眼疾病等严重的后 遗症。
弓形虫病影响优生，成为人类先天性感染中最严重的疾 病之一，已引起广泛重视。 随着家庭饲养犬、猫等宠物的盛行，人类与动物密切接 触机会增多，被寄生动物排出含弓形虫卵囊的粪便污染 食物、食具、水源等外界环境，人类感染弓形虫病的比 率逐年上升。
An enhanced GRA1—GRA7 cocktail DNA vaccine primes anti-Toxoplasma immune responses in pigs
Fig. 3. Survival curves of mice immunized with pcDNA/TgSAG1 alone or with pVAX/mIL-18 against T. gondii RH strain challenge. Results from one of three similar experiments are shown. Each group was composed of 10 mice.
M
1
2
3
4
1
2
3
4
14.4KD 20.1KD 31KD 33KD 43KD 66.2KD
表达产物SDS-PAGE和Western blotting鉴定结果
动物实验
动物：毕格犬
抗体免疫应答ELISA检测结果
OD(490nm) 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 14 28 42 56 (d)
年龄：18个月 分组：每组3条
接种后天 数
2 4 6 8 10 12 14
一种用于预防弓形虫病的多价腺病毒疫苗[发明专利]
![一种用于预防弓形虫病的多价腺病毒疫苗[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/cb5a2522f08583d049649b6648d7c1c708a10bf0.png)
(10)申请公布号 (43)申请公布日 2014.10.29C N 104117072A (21)申请号 201410345709.5(22)申请日 2014.07.18A61K 48/00(2006.01)A61K 39/235(2006.01)A61P 33/02(2006.01)(71)申请人山东大学地址250061 山东省济南市历下区文化西路44号(72)发明人丛华 袁泉 赵玲潇 丛海滋张晓丽 尹绘权(74)专利代理机构济南圣达知识产权代理有限公司 37221代理人杨琪(54)发明名称一种用于预防弓形虫病的多价腺病毒疫苗(57)摘要本发明公开了一种用于预防弓形虫病的复合多价抗原基因、重组质粒及腺病毒疫苗，将泛素蛋白基因与弓形虫速殖子抗原基因，缓殖子抗原基因以及子孢子抗原SPA 基因，AS15基因连接起来，合成用于预防弓形虫病的复合多价抗原基因；将合成的目的基因经双酶切后插入载体的BamH Ⅰ和SmaI 位点间,产生重组质粒；重组质粒经酶切，PCR 和测序鉴定后，提取质粒并纯化，将该重组质粒与骨架质粒共同转染入细胞中包装出毒，获得重组腺病毒疫苗。
本发明的腺病毒疫苗可有效预防人或动物弓形虫感染，控制弓形虫慢性感染过程中脑组织包囊形成，以及在急性感染时提高免疫反应及生存率，提供较为全面保护性的有效疫苗的候选成分。
(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书6页序列表4页 附图3页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书6页序列表4页 附图3页(10)申请公布号CN 104117072 A1.一种用于预防弓形虫病的复合多价抗原基因，其特征在于，将泛素蛋白基因与弓形虫速殖子抗原基因SAG3101-144,ROP18347-396,MIC6288-347,GRA7182-224，缓殖子抗原基因MAG158-125,BAG1156-211以及子孢子抗原SPA基因，AS15基因连接起来，其核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。
一种预防人或动物弓形虫病的DNA疫苗[发明专利]
![一种预防人或动物弓形虫病的DNA疫苗[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/b04590cd05a1b0717fd5360cba1aa81144318f8c.png)
(10)申请公布号(43)申请公布日 (21)申请号 201610079069.7(22)申请日 2016.02.04A61K 48/00(2006.01)A61K 39/012(2006.01)A61P 33/02(2006.01)C12N 15/12(2006.01)C12N 15/79(2006.01)(71)申请人山东大学地址250061 山东省济南市历下区文化西路44号(72)发明人周剑 何深一 吕刚 王琳赵晗婷(74)专利代理机构济南圣达知识产权代理有限公司 37221代理人董洁(54)发明名称一种预防人或动物弓形虫病的DNA 疫苗(57)摘要本发明公开了一种预防人或动物弓形虫病的DNA 疫苗，通过PCR 扩增ROP19基因，将其插入真核表达载体pEGFP-C1中构建重组质粒pEGFP-C1-ROP19(pROP19)，提取含目的基因的重组质粒获得弓形虫ROP19DNA 疫苗。
本发明采用DNA 疫苗对BALB/c 小鼠进行主动免疫后，通过测定免疫鼠的细胞和体液免疫指标来评价疫苗的免疫原性，通过计数小鼠弓形虫攻击实验后大脑中包囊的数量以及小鼠存活率来评估疫苗的免疫保护性。
本发明可有效地增强体液免疫和细胞免疫反应，有效地降低免疫小鼠在接受弓形虫PRU 株(II 型)攻击后大脑包囊的形成率，以及延长弓形虫RH 株(I 型)攻击后小鼠的存活时间。
(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书5页序列表1页 附图3页CN 105561343 A 2016.05.11C N 105561343A1.一种预防人或动物弓形虫病的DNA疫苗，其特征是：将弓形虫棒状体蛋白19的基因插入真核表达载体pEGFP-C1中，构建重组质粒pEGFP-C1-ROP19，该重组质粒pEGFP-C1-ROP19即为弓形虫ROP19DNA疫苗。
2.如权利要求1所述的DNA疫苗，其特征是：所述弓形虫棒状体蛋白19的基因插入pEGFP-C1中BamH I和Kpn I位点间。
同时预防新孢子虫和弓形虫感染的疫苗及其制备方法和应用[发明专利]
![同时预防新孢子虫和弓形虫感染的疫苗及其制备方法和应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/062aaf1eba0d4a7303763aaa.png)
专利名称：同时预防新孢子虫和弓形虫感染的疫苗及其制备方法和应用
专利类型：发明专利
发明人：贾立军,刘明明,张蕾,李积旭,张守发,玄学南
申请号：CN201510157559.X
申请日：20150403
公开号：CN104922696A
公开日：
20150923
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供同时预防新孢子虫和弓形虫感染的疫苗、编码该疫苗抗原的核苷酸序列以及该疫苗的制备方法和应用。
该疫苗抗原的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2及SEQ.ID.NO.4所示。
该疫苗的制备方法具体为根据新孢子虫AMA1基因序列和弓形虫AMA1基因序列的开放阅读框，设计新孢子虫和弓形虫交叉抗原AMA1基因的通用引物，构建pMD18-T-Nc/TgAMA1重组克隆质粒、重组腺病毒穿梭质粒pCR259-Nc/TgAMA1及表达质粒H294-Nc/TgAMA1，脂质体介导转染QBI-HEK293细胞包装Ad5-Nc/TgAMA1重组腺病毒，扩增、纯化制备Ad5-Nc/TgAMA1重组腺病毒载体疫苗。
申请人：延边大学
地址：133002 吉林省延边朝鲜族自治州延吉市公园路977号
国籍：CN
代理机构：北京纽盟知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：许玉顺
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疫苗及接种医学课件
智能化接种服务
利用信息技术手段，提高接种 服务的便捷性和可及性，降低 接种成本。
全球疫苗接种合作
加强国际间疫苗接种合作与交 流，共同应对全球公共卫生挑
战。
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疫苗及接种医学课件
汇报人： 日期:
目录
• 疫苗基本概念及分类 • 常见疫苗介绍 • 疫苗接种原则与策略 • 预防接种不良反应及处理 • 特殊人群接种建议 • 疫苗接种效果评估及监测
01
疫苗基本概念及分类
疫苗定义与作用
疫苗定义
疫苗是一种预防传染病的生物制 品，通过接种使人体免疫系统产 生特异性免疫应答，从而预防疾 病的发生。
包括发热、乏力、头痛、恶心、呕 吐、腹泻等。
过敏反应
包括皮疹、瘙痒、荨麻疹、血管神 经性水肿和过敏性休克等。
不良反应发生原因及危险因素
疫苗本身特性
疫苗成分、佐剂、生产 工艺等可能引起不良反
应。
个体差异
受种者年龄、性别、体 质等因素可能影响不良
反应发生。
接种操作不当
如接种部位不准确、接 种剂量过大等。
02
接种对象：8月龄以上的易感者。
03
接种方案：8月龄和18-24月龄各接种1剂次。
04
注意事项：接种后可能出现发热、皮疹等反应，一般可自行消退；如 出现高热、惊厥等严重反应，应及时就医。
脊髓灰质炎疫苗
疫苗作用
预防脊髓灰质炎（小儿麻痹症）。
接种方案
共接种4剂次，分别在2月龄、3月龄、4月 龄和4周岁进行接种；其中，前3剂次为基
地方级监测体系
各省级、市级疾控中心建立相应的监测体系，负 责收集、整理和分析本地区的疫苗接种信息。
监测结果反馈
不同类型的疫苗及其作用
不同类型的疫苗及其作用疫苗是预防传染病最有效的方法之一，通过注射疫苗可以让我们的免疫系统学会识别并消灭病原体。
然而，不同类型的疫苗并非都适用于所有疾病，下面我将介绍几种不同类型的疫苗及其作用。
1. 灭活疫苗灭活疫苗是用死去的病原体制成的疫苗，可以刺激人体免疫系统产生针对病原体的抗体。
这种疫苗的优点是安全性高，因为使用的病原体已死亡，不会导致感染。
但同时也因为病原体已经死亡，所以需要注射多次才能产生足够的免疫力。
灭活疫苗被广泛用于接种霍乱、百日咳、流感、脑膜炎和狂犬病等疾病。
2. 游离糖蛋白疫苗游离糖蛋白疫苗是由病原体表面的蛋白质制成的，可以激活人体免疫系统，产生特异性抗体。
此类疫苗具有较长的免疫期，并且可以很容易地被生物体吸收并通过血液循环运输。
葡萄球菌、气性坏疽杆菌和肺炎球菌等病原体可以通过接种游离糖蛋白疫苗来预防。
3. 全细胞疫苗全细胞疫苗是由整个病原体制成的，不仅包含病原体的所有蛋白质成分，还包括其细胞壁和核酸等成分。
全细胞疫苗具有触发免疫系统的所有部分的能力，可以产生广谱的免疫响应，但同时也由于包含全部病原体的成分，存在感染的风险。
接种百日咳、麻疹、风疹、乙肝等疾病时常用全细胞疫苗。
4. 亚单位疫苗亚单位疫苗是通过提取病原体的部分成分制成的，这些成分可以Stimulate人体的免疫系统，激发产生特异性抗体。
亚单位疫苗的安全性更高，由于疫苗中只包含部分病原体的成分，所以不可能导致感染性疾病。
肝炎B疫苗、HPV（人乳头瘤病毒）疫苗和甲流等疫苗便采用了这种制备方法。
5. 基因重组疫苗基因重组技术可以通过将病原体与其他基因组进行混合制造出新的疫苗，其中的病原体成分通常是被改造过的，以便激发更有效的免疫反应。
这类疫苗的优点是无感染性，具有较好的安全性和免疫效果。
现在的流感疫苗就是基于基因重组技术制备的，已经得到了广泛的应用。
总的来说，不同类型的疫苗各有所长，应根据疾病的类型、特点及其所处的环境做出选择。
猪疫苗英文缩写
猪疫苗英文缩写【篇一：猪疫苗英文缩写】猪常用疫苗主要有猪瘟，猪丹毒，副伤寒，伪狂犬，细小病毒，大肠杆菌等。
这些疫苗简单可以分为灭活疫苗（又称死疫苗）和弱毒疫苗（又称活疫苗），另外还有就是单价疫苗、多价疫苗、混合疫苗、同源疫苗、亚单位疫苗、基因工程疫苗，这些是从疫苗的制备情况和疫苗的发展阶段来划分的。
【篇二：猪疫苗英文缩写】常见猪病的缩写ar：传染性萎缩性鼻炎（萎鼻），swine infectious atrophic rhinitisapp：传染性胸膜性肺炎（传胸）porcine in fectious p leuropneumonia胸膜肺炎放线杆菌(a ctinobacillus p leuropneum on iae,appct：先天性震颤 congenital tremorscdcd：初乳缺乏症 colostrum deficencycp：猪衣原体 chlamydia pneumoniaees：内毒素引起休克 endotoxic shockery：猪丹毒 erysipelas (swine)ed：大肠杆菌病,仔猪水肿病( edema disease, ed)又称猪溶血性大肠杆菌病ec：肠道病毒fmd：口蹄疫（五号病）foot and mouth diseasehc: 猪瘟 the hog cholera或the classical swine feverhps：副嗜血杆菌haemophilus parasuisje：流行性乙型脑炎流行性乙型脑炎 (日本脑炎) (japanese encephalitis (je)lister：李氏杆菌病 listeriosislepto：钩端螺旋体病 leptospirosismh（mp）：支原体肺炎（气喘）mycoplasmal pneumonia ofpig od：水肿pwt：仔猪腹泻仔猪断奶腹泻(post-weaning escherichia coli diarrhea, pwecd)prrs：繁殖与呼吸综合障碍症（蓝耳）porcine reproductive and respiratory syndromeprv：伪狂犬伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,prv伪狂犬病(pseudorabies,pr)ppv：细小病毒猪细小病毒(porcine parvovirus,ppv)prcv：呼吸道冠状病毒 porcine respiratory corona viruspcv2：圆环2型病毒porcine circovirus type ii,pde：增生性肠炎pmws：断奶仔猪多系统衰竭综合症postweaning multisystcmic wasting syndromepdns：皮炎肾病综合症 porcine dermatitis nephropathy syndromeped：流行性腹泻 porcine epidemic diarrheapcv：间质性肺炎与繁殖综合症 interstitial pneumonia and productive failurepss：猪应激综合症 porcine stress syndromeprdc：出血性巴氏杆菌引起的炎呼吸道综合症 porcine respiratory disease complexpasteur：猪肺疫rv：轮状病毒 rotavirusrr：布氏杆菌病 brucellosissd：猪痢疾 swine dysenterysvd：水泡病 swine vesicular diseasesve：水泡性疹sc：猪霍乱classical swine fever (hog cholera猪霍乱)si：流感 swineinfluenzass：链球菌 swine strept0c0ccsissalm：副伤寒 salmonella paratyphitge：传染性胃肠炎 transmissible gastroenteritistp：弓形虫体病 toxoplasmosistb：结核病tuberculosis【篇三：猪疫苗英文缩写】一、猪的几种常用疫苗1猪繁殖与呼吸综合征（蓝耳病）灭活疫苗（nvdc-jxa1株）【兽药名称】通用名猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗（nvdc-jxa1株）商品名无英文名 porcine reproductive and respiratory syndrome vaccine, inactivated (nvdc-jxa1 strain)汉语拼音 zhu fanzhiyuhuxizonghezheng miehuoyimiao (nvdc-jxa1 zhu)【主要成分与含量】采用进口佐剂，疫苗中含有猪繁殖与呼吸综合征病毒nvdc-jxa1株，灭活前每毫升病毒含量应不低于106.0tcid50。
动物疫苗种类及其简介
第4月 上半月刊动物疫苗种类及其简介文/ 王磊在畜牧行业，动物疫苗可使养殖的动物获得相应的免疫力，降低动物感染疾病的概率。
如何在种类繁多的疫苗产品中选择合适的进行免疫是养殖者面临的重要问题。
本文对当前常见动物疫苗及其种类进行介绍，希望对养殖户有所帮助。
疫苗（vaccines）是用微生物（细菌、病毒、支原体、衣原体、钩端螺旋体等）、微生物代谢产物、原虫、动物血液或组织等，经加工制成，作为预防、治疗特定传染病或其他有关疾病的生物制剂。
常见的疫苗可分为常规疫苗和基因工程疫苗两大类。
（一）根据抗原灭活与否可以分为活疫苗和灭活疫苗1. 活疫苗：又称弱毒苗或活苗，是微生物的自然强毒通过物理、化学方法处理和生物的连续继代，使其对原宿主动物丧失致病力或只引起轻微的亚临床反应，但仍保存良好的免疫原性的毒株，用以制备的疫苗。
常见的如猪瘟兔化弱毒疫苗、鸡痘活疫苗、羊小反刍兽疫活疫苗等。
大多数的活疫苗都采用冷冻真空干燥的方式冻干保存，这可延长疫苗的保存时间，保持疫苗的效价。
病毒性冻干疫苗常在-15℃以下保存，一般保存期1～2年。
细菌性冻干疫苗在-15℃保存时一般保存期编辑：王磊wanglei9548@其杀死（灭活）后制成的疫苗。
灭活苗一般要加佐剂，以提高其免疫力，储存温度为2～8℃，不宜冻结。
常见的如猪细小病毒灭活苗、猪伪狂犬灭活疫苗、猪链球菌灭活疫苗、禽流感灭活疫苗等。
根据佐剂不同，灭活疫苗又可分为以下三类：（1）油佐剂疫苗，以白油为佐剂乳化而成，大多数病毒性灭活疫苗采用这种方式。
油佐剂疫苗注入肌肉后，疫苗中的抗原物质缓慢释放，从而延长疫苗的作用时间。
（2）铝胶佐剂疫苗，以铝胶按一定比例混合而成，大多数细菌性灭活疫苗采用这种方式，疫苗作用时间比油佐剂疫苗快。
（3）蜂胶佐剂疫苗，以提纯的蜂胶为佐剂制成，蜂胶具有增强免疫的作用，可增加免疫的效果，减轻注苗反应，作用时间比较快，但工艺要求高，需高浓缩抗原配苗，用前充分摇匀。
疫苗分类知识
疫苗的分类疫苗是预防接种工作的重要物质基础。
世界各国现沿用的“疫苗”一词泛指所有自动免疫的生物制品。
我国《疫苗流通和预防接种管理条例》规定，疫苗是指为了预防、控制传染病的发生、流行，用于人体预防接种的疫苗类预防性生物制品。
目前疫苗的发展，已经从预防用疫苗发展到治疗用疫苗。
按其性质划分，可分为灭活疫苗、减毒活疫苗、组分疫苗、重组基因工程疫苗等；按剂型划分，可分为液体疫苗、冻干疫苗；按成分划分，可分为普通疫苗、提纯疫苗；按品种划分，可分为单价疫苗、多价疫苗；按含吸附剂划分，可分为吸附疫苗、非吸附疫苗；按使用方法划分，可分为注射用、划痕用、口服用、喷雾用等。
虽然疫苗的分类方法很多，但常用的分类方法还是依据疫苗性质来划分。
1.减毒活疫苗减毒活疫苗是通过改进“野”病毒或细菌而制备，将病原微生物在人工培育的条件下，促使产生定向变异，使其最大限度地丧失致病性，但仍保留一定的剩余毒力、免疫原性及繁殖能力，所得到的疫苗株微生物保留了复制（生长）和引起免疫的能力，但通常不致病。
减毒活疫苗一般只需接种一次，且用量较小，免疫效果巩固，维持时间长。
但减毒活疫苗须在低温条件下保存及运输，有效期相对较短，存在毒力返祖的风险。
常用的减毒活疫苗包括皮内注射用卡介苗（简称卡介苗，BCG）、口服脊髓灰质炎减毒活疫苗（简称脊灰疫苗，OPV）、麻疹腮腺炎风疹联合减毒活疫苗（简称麻腮风疫苗，MMR）、甲型肝炎减毒活疫苗（简称甲肝减毒活疫苗，HepA−L）、乙型脑炎减毒活疫苗（简称乙脑减毒活疫苗，JE−L）、水痘减毒活疫苗等。
2.灭活疫苗灭活疫苗是细菌、病毒或立克次氏体的培养物，经化学或物理方法灭活，使之完全丧失对原来靶器官的致病力，而仍保存相应抗原的免疫原性。
灭活疫苗既可由整个病毒或细菌组成，也可由他们的裂解片断组成。
灭活疫苗免疫效果相对较差，维持时间短，但较稳定易于保存。
目前常用的灭活疫苗有吸附百日咳白喉破伤风联合疫苗（简称百白破疫苗，DPT）及吸附白喉破伤风联合疫苗（简称白破疫苗，DT）、流行性感冒裂解疫苗、甲型肝炎灭活疫苗、狂犬病疫苗等。
弓形虫疫苗——Toxovax
弓形虫疫苗——Toxovax
李秉鸿
【期刊名称】《畜牧兽医科技信息》
【年(卷),期】1996(000)011
【摘要】一种活的致弱的抗刚地弓形虫疫苗已在新西兰生产。
用这种疫苗接种母羊,使其产仔存活数量明显高于非接种对照组,这是疫苗抵抗引起母羊流产的刚地弓形虫的结果。
此外,接种疫苗产下的羔羊患先天性刚地弓形虫感染数明显低于对照组,该疫苗是用流产的绵羊胎儿中分离出的弓形虫制成,自1958年以来经小鼠每周两次腹膜内传代,完整保留在速殖子阶段。
这种
【总页数】1页(P6-6)
【作者】李秉鸿
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】S859.79
【相关文献】
1.黄芪对弓形虫wx2b2a表位疫苗免疫小鼠后抗急性弓形虫感染的免疫调节作用[J], 谢荣华;舒衡平
2.可溶性弓形虫棒状体分泌蛋白2(ROP2)的免疫原性和抗弓形虫感染核酸疫苗的研究 [J], 陈晨; 公茂庆; 寇景轩
3.可溶性弓形虫棒状体分泌蛋白2(ROP2)的免疫原性和抗弓形虫感染核酸疫苗的研究 [J], 陈晨; 公茂庆; 寇景轩
4.弓形虫E/SA疫苗对小鼠抗弓形虫感染的保护作用 [J], 杜重波;张德林;李惠萍;李学瑞
5.弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠抵抗弓形虫感染作用的观察 [J], 殷国荣;孟晓丽;马广源;马晓明
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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910187582.1
(22)申请日 2019.03.13
(71)申请人 中国农业科学院兰州兽医研究所
地址 730046 甘肃省兰州市城关区盐场堡
徐家坪1号
(72)发明人 王金磊 梁勤立 侯俊玲 白梦捷
朱兴全
(74)专利代理机构 北京科亿知识产权代理事务
所(普通合伙) 11350
代理人 汤东凤
(51)Int.Cl.
A61K 39/002(2006.01)
A61P 33/02(2006.01)
C12N 15/113(2010.01)
C12N 15/90(2006.01)
C12N 1/11(2006.01)
(54)发明名称
用于预防弓形虫感染的RH:Δtkl1减毒活疫
苗及其制备方法和应用
(57)摘要
本发明公开了一种用于预防弓形虫感染的
RH:Δtkl1减毒活疫苗，该减毒活疫苗的制备方
法是构建质粒pSAG1::Cas9::U6sgTKL1和DHFR抗
性片段，然后构建弓形虫RH:Δtkl1虫株，以PBS
作为溶剂在细胞培养基中制成弓形虫弱毒虫株
RH:Δtkl1的速殖子混悬液。
本发明确立了该减
毒活疫苗的免疫剂型，探明了其免疫接种程序及
剂量，通过动物实验发现本发明制备的减毒活疫
苗对于弓形虫急性感染、慢性感染及先天性感染
均具有良好的免疫保护作用，可有效预防弓形虫
病。
权利要求书1页 说明书5页 附图4页CN 109999189 A 2019.07.12
C N 109999189
A
权 利 要 求 书1/1页CN 109999189 A
1.一种用于预防弓形虫感染的RH:Δtkl1减毒活疫苗，其特征在于，所述减毒活疫苗是以PBS作为溶剂制成的弓形虫弱毒虫株RH:Δtkl11的速殖子混悬液。
2.如权利要求1所述的用于预防弓形虫感染的RH:Δtkl11减毒活疫苗的制备方法，其特征在于，所述制备方法如下：
(1)敲除质粒的构建
根据弓形虫TKL1基因设计sgRNA：GATGAAGGTGCAAGCTCCCG，然后将pSAG1::Cas9:: U6sgUPRT中的sgRNA替换成TKL1，即构建质粒pSAG1::Cas9::U6sgTKL1；从质粒pUPRT-DHFR-D扩增获得DHFR抗性片段；
(2)弓形虫RH:Δtkl11虫株的构建
培养速殖子用于弓形虫的电转染，将所述质粒pSAG1::Cas9::U6sgTKL1与DHFR抗性片段电转到弓形虫中，获得弓形虫单克隆虫株，放大培养后，提取基因组DNA，验证TKL1基因是否敲掉，PCR扩不出来者为阳性RH:Δtkl11虫株；
(3)减毒活疫苗的制备
含FBS的DMEM培养基中加入100μL RH:Δtkl11虫株，培养并收集RH:Δtkl11速殖子，过滤细胞碎片，然后用无菌PBS调整速殖子的浓度。
3.如权利要求2所述的用于预防弓形虫感染的RH:Δtkl11减毒活疫苗的制备方法，其特征在于，所述DHFR抗性片段扩增的引物为：
DHFR-F：AAGCTTCGCCAGGCTGTAAA；
DHFR-R：GGAATTCATCCTGCAAGTGC。
4.如权利要求2所述的用于预防弓形虫感染的RH:Δtkl11减毒活疫苗的制备方法，其特征在于，验证TKL1基因是否敲掉时，所用引物为：
KO-TKL1-F:GATTTGTCGCATGTGCCATCT；
KO-TKL1-R：CGCACTTGCATGAATTTACCA。
5.如权利要求2所述的用于预防弓形虫感染的RH:Δtkl11减毒活疫苗的制备方法，其特征在于，所述速殖子的浓度为106个/200μL。
6.如权利要求1所述的用于预防弓形虫感染的RH:Δtkl11减毒活疫苗应用于急性弓形虫感染的免疫保护。
7.如权利要求1所述的用于预防弓形虫感染的RH:Δtkl11减毒活疫苗应用于慢性弓形虫感染的免疫保护。
8.如权利要求1所述的用于预防弓形虫感染的RH:Δtkl11减毒活疫苗应用于先天性弓形虫感染的免疫保护。
2。