草莓茎尖组培脱毒和种苗三级繁育体系的建立
草莓茎尖脱毒繁育体系研究进展
草莓茎尖脱毒繁育体系研究进展作者：马秀明缪军王俊峰韩伟孙杨来源：《安徽农业科学》2021年第24期摘要草莓茎尖脱毒技术能够从生产上解决草莓因长期无性繁殖，易受到多种病毒的侵染，从而导致植株长势变弱、果实品质劣化、产量下降等品种退化现象。
从草莓茎尖消毒、茎尖选取、培养基的筛选、多种脱毒方式结合、病毒检测、驯化移栽、种苗繁育等方面综述了草莓茎尖脱毒繁育体系的研究进展，以期为草莓茎尖脱毒繁育体系的建立提供参考。
关键词草莓;茎尖脱毒;种苗繁育中图分类号 S668.4 文献标识码 A文章编号 0517-6611（2021）24-0018-06doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.24.004Research Progress on Stem Apex Detoxification and Breeding System of StrawberryMA Xiu-ming，MIAO Jun，WANG Jun-feng et al （Institute of Vegetables，Shandong Academy of Agricultural Sciences，Shandong Provincial Key Laboratory of Vegetable Biology，Shandong Branch of National Center for Vegetable Improvement，Jinan，Shandong 250100）Abstract The technology of stem apex detoxification of strawberry can solve problems that finally results in the weakening of plant growth，deterioration of fruit quality and decline of yield，which due to long-term asexual reproduction that easily infected by a variety of viruses.This paper summarized the research progress on stem apex detoxification and breeding system of strawberry from the disinfection of stem apex，selection of stem apex，screening of culture medium，virus detection，combination of multiple detoxification methods，domestication and transplanting，seedling breeding and other aspects，in order to provide reference for the establishment of stem apex detoxification and breeding system of strawberry.Key words Strawberry;Stem apex detoxification;Seedling breeding基金项目 2021年度山东省农业科学院农业科技创新工程（CXGC2021A28）。
草莓茎尖超低温疗法脱毒技术体系的建立
草莓茎尖超低温疗法脱毒技术体系的建立草莓(Fragaria×ananassa Duch.)是蔷薇科(Rosaceae)草莓属(Fragaria)多年生草本植物。
其果实鲜嫩多汁、色泽艳丽、香气怡人、口感酸甜适中,是我国传统的优秀浆果果品之一。
其繁殖主要采用传统的分株繁殖或匍匐茎埋压,这种无性繁殖的方式提高了病毒侵染植株的几率。
避免病毒给生产带来巨大的经济损失,实现草莓无病毒苗栽培生产化,必将是我国草莓业目前势在必行的发展趋势和目标。
而超低温疗法是一种新型、高效脱除植物病毒的新技术,备受各研究科学者的亲睐。
本试验以‘红颜’草莓(Fragaria×ananassa Duch.cv. Benihoppe)品种大田茎尖为试验材料,对超低温疗法关键程序(预培养、预处理和化冻条件)进行了筛选和优化,并以茎尖脱毒法为对照,建立起完善的超低温疗法脱毒技术体系。
在此基础上,研究者对多重RT-PCR病毒检测体系相关参数(Mg2+浓度、引物浓度、PCR程序等)进行了优化和改进,以期建立完善的多重RT-PCR病毒检测体系。
最后利用DNA相关软件筛选分析SSR-PCR引物,分析超低温疗法脱毒苗遗传性状的稳定性,实验结果如下：1.适合‘红颜’草莓苗的超低温疗法脱毒技术体系为：在含0.3 mo.L一预培养基上暗培养7 d,室温下LS装载60 min,0℃下PVS2脱水1 h,液氮处理1 h,40℃水浴化冻120 s,用含1.2 mol·L-1蔗糖的液体MS 培养基洗涤两次,每次10 mmin。
该体系同时脱除草莓四种主要病毒(草莓镶脉病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓皱缩病毒和草莓斑驳病毒)的比率高达100%,成活率为69.03%。
将该体系再用于‘蜀丰’‘丰香’以及‘章姬’,其存活率分别为68.15%、71.00%和69.78%,达到预期的试验目标。
2.适用于多重RT-PCR检测体系的引物是SC1/SC2、SM1/SM2、SY1/SY2、SV1/SV2、A1/A2,目的片段大小分别是345 bp、394 bp、861 bp、271 bp和295 bp；多重RT-PCR病毒检测体系是1μl cDNA、2 μl 10×PCR bufer、2.0 mmol·L-1 MgCl2、 0.2 mmol·L-1 dNTPs、0.5UTaq酶,引物浓度0.2 μmol·L-1 (SCV 0.25 μmol·L/1),最后用超纯水补至20μl; PCR程序：94℃预变性3 min,94℃变性1 min,55℃退火40 s,68℃延伸40s,35个循环,72℃再延伸5 min。
脱毒草莓温室快速育苗技术
脱毒草莓温室快速育苗技术脱毒草莓温室快速育苗技术\_刘涛草莓(Fragaria ananassa Duch．)原产于南美洲的智利，其浆果营养丰富，深受人们喜爱，已遍及全球栽培。
自1915 年草莓引入中国以来，发展迅速，栽培面积现已居世界第一位。
常规草莓种苗的繁殖多采用匍匐茎，育苗时间长达2 年。
若母株感染病毒，则世代相传，严重影响草莓的产量和品质。
利用脱毒技术生产的草莓脱毒苗备受人们关注，脱毒组培苗到田间生产苗的进程可缩短在1 年内完成。
草莓脱毒后，利用组织培养技术，结合中国北方地区越冬日光温室的栽培设施，短时间内可生产大量原原种苗。
因在组培过程中草莓苗摄入激素较多，故原原种苗并不能作为生产种苗使用，否则极易出现果实畸形，坐果量下降等现象。
工厂化草莓育苗多分3 步进行，即原原种苗生产、原种苗生产、生产用苗的生产。
既保证了种苗的质量，又减少了草莓育苗的成本。
1 草莓茎尖脱毒及组培快繁1． 1 草莓茎尖脱毒取田间生长健壮的草莓匍匐茎茎尖(3 ～5 cm)，经杀菌消毒后，在超净工作台上利用解剖镜切取茎尖0． 2 ～0． 3 mm 生长点，接种于诱导分化培养基 MS +6 － BA 1 mg/L上，每瓶接种 1 株，保证无其他感染。
2 个月后愈伤组织周围长出丛生芽。
1． 2 草莓组培快繁丛生芽生长至1 ～2 cm 时进行转接予以继代培养。
在超净工作台上，用手术刀切取丛生芽，转移至增殖培养基MS + 6 －BA 1 mg/L 上，每瓶接种 5 ～ 6个芽点，1 个月后芽点周边愈伤组织长出丛生芽，扩繁数约 5 倍。
选取健壮丛生芽继代培养 5 ～ 6 次，可获得大量脱毒草莓组培苗，称为原原种。
选取健壮原原种苗转移至生根培养基(MS 培养基)，继续培养 1个月，可获得株高 3 ～5 cm 的生根组培苗。
2 原原种苗培育2． 1 原原种苗驯化11 月 3 日将组培瓶瓶盖打开，进行室温炼苗5 d，从组培瓶中取出，用清水冲洗掉培养基，将草莓苗放回瓶中，并在瓶中加注适量清水，防止幼苗干枯，室温放置5 d 驯化，使组培苗逐步适应外部环境。
草莓茎尖脱毒及原种苗的网室繁育技术
草莓是蔷薇科草莓属（
.）多年生草本植
物，果实酸甜适口，素有“水果皇后”的美称。果实成熟早，
温室栽培可以供应整个冬季市场，填补果品淡季，同时草
莓也是重要的食品加工原料。草莓是靠匍匐茎进行无性 繁殖的作物，经过几代后，容易感染多种病毒。感染病毒 病的草莓生长缓慢、叶片皱缩、果实小而畸形、品质变
收稿日期院2018-04-06 作者简介院赵霞（1972—），女，农艺师，主要从事果树技术研究与推广工作
1 草莓脱毒原理 植物体内的病毒是通过维管束纵向疏导和胞间连
丝横向传播的，茎尖是植物细胞分裂最旺盛的组织，其生 长点顶端还没有形成维管束，植物体内病毒的增殖、扩散 和传播速度较植物茎尖分生组织细胞的分裂速度慢，所 以茎尖分生组织往往不带病毒，因此通过茎尖培养可以 获得脱毒植株。茎尖脱毒为了取得较好的脱毒效果，在 保证成活率的前提下尽量切取较小的茎尖生长点。
果蔬博览
赵霞，等：草莓茎尖脱毒及原种苗的网室繁育技术
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差。我国已鉴定明确的草莓病毒病主要有四种，即草莓斑 驳病毒（SmoV）、草莓轻型黄边病毒（SMYEV）、草莓镶脉 病毒( SVBV）、草莓皱缩病毒( SCrV）等。一旦感染病毒， 常规药剂很难进行防治，极大地制约了草莓产业的发展。
通常草莓脱毒苗在培养瓶中增殖扩繁，容易导致植 物激素的累积，造成后代变异，如不易成花、产量低、畸形 果多等，给草莓生产带来极大风险。采用热处理结合茎 尖组织培养，获得草莓试管苗，在试管内不增殖的情况 下，直接进行炼苗移栽，然后对移栽成活的试管苗，通过 指示植物法进行病毒检测，然后对获得的脱毒原种苗在 网室内进行繁育，进而获得新一代苗。通过这种方法繁 育的一代苗，比通过单纯用试管苗进行多代增殖繁殖的 变异小，生产风险降低，可以在草莓脱毒育苗中使用。针 对草莓脱毒快繁，进行了 5 年的观察试验，并对草莓脱毒 结合网室育苗技术进行总结如下：
试述草莓种苗三级繁育体系生产规范
山西农经//2020年2期作者简介：谷旭琳（1975—），女，本科，助理农艺师，研究方向：农学。
DOI ：10.16675/14-1065/f.2020.02.052试述草莓种苗三级繁育体系生产规范□谷旭琳摘要：种苗三级繁育体系可以有效保证草莓优良种性和种苗优质。
规范化生产原种苗和良种苗是获得优质、标准种苗的有效途径。
分析了原原种苗生产规范、原种苗生产规范、良种苗生产规范的内容及注意事项。
关键词：草莓；种苗；三级繁育体系文章编号：1004-7026（2020）02-0094-02中国图书分类号：S668.4文献标志码：A（辽宁草莓科学技术研究院辽宁丹东118300）1原原种苗生产规范1.1..设施要求组培室要求设置在没有污染源、空气流通且光线好的地方，并且与周围的环境相隔离，组培室包括准备区和培养区[1]。
1.2..培养基配制与茎尖选取茎尖脱毒是成功培育草莓脱毒苗的关键。
包括制作培养基、田间选取茎尖，以及茎尖处理、接种。
1.3..接种接种时要求达到无菌工作环境。
先将接种室内和超净工作台进行紫外线杀菌，然后操作人员用酒精棉工作消毒，再对茎尖进行杀菌消毒处理，接着用镊子茎尖外面的苞叶层层拨开，剥出0.2～0.33mm 的微茎尖，迅速平放到培养瓶中的培养基上，然后马上将瓶口盖上，并写上日期和品种[2]。
1.4..初代培养接种好的茎尖放在温度20～253℃、光照23000～330003Lx 的环境中进行培养，每天灯照14～163h ，温度高低范围和光照强度一直保持不变。
经50～603d ，培养出组培初代苗，然后可以转瓶继代培养。
1.5..继代培养继代培养需要更换培养基，在MS 培养基的基础上，附加BA30.3～0.53mg/L 、IBA30.13mg/L 、GA30.13mg/L 、蔗糖303g/L 、琼脂5～73g/L 。
继代转瓶接种时，消毒方法与接种时的消毒方法一样。
打开培养瓶，用镊子将小苗株丛轻轻夹出，用剪刀将小苗的叶丛剪去，只留大约0.53cm 长的叶柄，然后将单株分开，将叶柄朝上放到继代培养基上，每瓶放4～5个，将瓶口封住放到培养室中进行培养，继代培养的温度、光照及其他管理要求和初代培养一样。
草莓脱毒健康种苗三级离体隔离扩繁技术[发明专利]
![草莓脱毒健康种苗三级离体隔离扩繁技术[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/e69c8d0130126edb6f1aff00bed5b9f3f90f7299.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010617997.0(22)申请日 2020.07.01(71)申请人 江苏徐淮地区徐州农业科学研究所(江苏徐州甘薯研究中心)地址 221000 江苏省徐州市鼓楼区高铁站北(72)发明人 赵林 张婷 李刚波 宋庆科 魏猛 张梅 (74)专利代理机构 徐州市三联专利事务所32220代理人 卓小彬(51)Int.Cl.A01H 4/00(2006.01)(54)发明名称草莓脱毒健康种苗三级离体隔离扩繁技术(57)摘要本发明公开了草莓脱毒健康种苗三级离体隔离扩繁技术，具体按照以下步骤实施：在组培室进行组培原原种，随后将原原种在无菌环境下隔离驯化，待驯化完成后，定植到原原种繁殖室，当原原种抽生匍匐茎形成根原基后及时剪下，集中密封于无菌袋中，然后到原种繁殖室中取出，定植于穴盘，经生长后形成分株，在形成气生根后剪下，并密封于无菌袋中，转移至生产种生产网室，然后经过压苗生产草莓脱毒种苗，因此本发明与传统脱毒育苗方式相比，脱毒种苗出组培室后可显著降低植株感染病毒病菌比例。
权利要求书1页 说明书4页CN 111685039 A 2020.09.22C N 111685039A1.草莓脱毒健康种苗三级离体隔离扩繁技术，其特征在于：按如下步骤进行：步骤1）草莓脱毒苗驯化完成后，采用去离子水，流水洗净根部培养基，由原原种繁殖人员及时定植于灭菌基质中，所处环境为原原种隔离网室，温度控制在15-20℃，基质湿度控制于55-65%，空气湿度控制于85-95%，维持4-6天，缓苗完成后，在水肥一体化中加入硝态氮水溶性多元素平衡肥，总浓度控制在0.01-0.03ppm范围内，水分供应标准为基质湿度在55-65%之间，肥料每隔7天供应一次，直至幼苗抽生3片新叶；随后空气湿度需维持在65-70%，肥料供应时，在原基础上加入微量元素肥料，浓度维持在0.01-0.05%之间，氮磷钾浓度调整为0.1-0.2%；随后维持养分供应，原原种（一级苗）抽生匍匐茎，待匍匐茎第二节气生根生长至1-2mm时，使用采集工具，将第一和第二节一次性采下，并装于无菌袋中；步骤2）将原原种繁殖室中装匍匐茎节的无菌袋带到原种隔离网室，并交于原种繁殖室操作专人，并对其使用工具及无菌袋外表面的灭菌；随后进入原种繁殖室，利用原种繁殖室工具将匍匐茎第一和第二节分离，定植于灭菌基质穴盘中，所用水仍为去离子水，基质湿度维持在75-85%，空气湿度维持在85-95%，待成活后，基质湿度将至60-70%，空气湿度将至60-65%，肥料采取硝态氮水溶性多元素平衡肥，浓度控制在0.1-0.2%，每隔7天施肥1次，直至抽生匍匐茎；待匍匐茎第二节气生根生长至1-2mm时，使用采集工具，将第一和第二节一次性采下，并装于无菌袋中；步骤3）将原种繁殖室中装匍匐茎节的无菌袋带到生产种隔离网室，并交于生产种繁殖室操作专人，并对其使用工具及无菌袋外表面的灭菌；随后进入生产种繁殖室，利用生产种繁殖室工具将匍匐茎第一和第二节分离，定植于灭菌基质穴盘中，所用水为紫外线灭菌水，具体方法为将清水置于水肥一体化容器中，用浸泡型紫外线灭菌灯，紫外灯功率选择100-150瓦，灭菌30-40分钟，基质湿度维持在75-85%，空气湿度维持在85-95%，待成活后，基质湿度将至60-70%，空气湿度将至60-65%；肥料采取硝态氮水溶性多元素平衡肥，浓度控制在0.1-0.2%，每隔7天施肥1次，直至抽生匍匐茎，待发生茎节后，直接将茎节压于穴盘穴内，保持穴盘内基质湿度70-80，待茎节根系发育完善后剪断匍匐茎，周而复始，逐渐繁殖生产苗。
草莓脱毒种苗繁育技术
草莓脱毒种苗繁育技术你们爱吃草莓吗？那红红的、甜甜的草莓，咬一口满是香甜的果汁，可美味啦。
可是你们知道吗，要种出这么好吃的草莓，有一种很特别的种苗叫草莓脱毒种苗，今天我就来给大家讲讲它的繁育技术。
我们先来说说为什么要有脱毒种苗呢。
就像我们人会生病一样，草莓也会生病。
有些病毒会让草莓长得小小的，结的果实也不好吃。
有个爷爷，他种了一大片草莓，可是他发现那些草莓越来越小，而且很多都长了奇怪的斑点，他以为是自己照顾得不好。
后来才知道是草莓感染了病毒。
那怎么得到脱毒种苗呢？这就像是一场奇妙的旅程。
首先要找到健康的草莓母株，就像在一群小朋友里找到最健康、最活泼的那个小伙伴一样。
这个母株要没有被病毒感染，要长得特别强壮。
比如说，茎要粗粗的，叶子要绿绿的，看起来就充满生机。
然后呢，要把这个母株的一部分，就像从一棵大树上剪下一根小树枝那样，取一小段茎尖。
这个茎尖可神奇了，它就像一个小小的宝藏，里面可能藏着没有病毒的细胞。
把这个茎尖放到一个特别的地方，这个地方就像一个小小的魔法屋，里面有适合它生长的营养物质和环境。
在这个魔法屋里，茎尖会慢慢长大，会长出根和新的叶子。
这时候就像看着一颗小种子慢慢发芽，一点点变成小幼苗，特别有趣。
不过这个过程要很小心，温度啊、光照啊都要刚刚好。
就像我们照顾小宠物一样，冷了不行，热了也不行，光照太强或者太弱都不好。
等小幼苗长大了一些，就可以把它移栽到小盆子里啦。
这就像给小朋友换了一个更大的房间，可以让它有更多的空间生长。
这个小盆子里面的土也要很有营养，就像我们吃的饭要营养丰富一样。
慢慢地，这些小幼苗会长成大的草莓苗，这个时候它们就可以被种到田地里啦。
种到田地里之后，它们会长出好多好多的草莓。
这些草莓因为是脱毒种苗长出来的，所以会长得又大又甜。
新品种草莓脱毒种苗繁育及推广 实施方案
新品种草莓脱毒种苗繁育及推广实施方案一、背景介绍在当前农业发展的背景下，新品种草莓脱毒种苗繁育及推广成为了热门话题。
草莓作为一种重要的水果作物，对种植环境、土壤和气候的要求较高。
如何推广新品种的脱毒种苗对于提高草莓产量和品质至关重要。
二、脱毒种苗繁育技术1. 遴选适宜品种：针对当地的气候环境和土壤条件，选择适宜生长的草莓品种，能够适应当地的气候和环境，抗病性和产量较高的品种更受农户欢迎。
2. 脱毒种苗繁育技术：采用组织培养技术，通过无菌培养的方式，从优质母株上分离培养出无病害的种苗。
这种繁育技术可以有效地避免病毒感染，提高种苗的品质和产量。
3. 母株管理：对母株进行定期的检测和管理，保持母株的健康状态，以提高脱毒种苗的繁殖效率。
4. 合理施肥：对脱毒种苗的育苗基质施加适量的有机肥和无机肥，保证其正常生长，提高成活率。
三、脱毒种苗推广实施方案1. 种苗示范基地：在当地建立草莓脱毒种苗示范基地，向农户展示脱毒种苗的繁育和种植技术，引导农户使用新品种的脱毒种苗。
2. 培训和技术指导：组织相关的种植技术培训，向农户传授种植管理技术和脱毒种苗的认识，提高他们对新品种脱毒种苗的认知和接受度。
3. 政府扶持政策：政府可以给予种植新品种脱毒种苗的农户一定的政策扶持，包括补贴、技术指导和市场保障，以激励农户种植新品种的脱毒种苗。
四、个人观点和理解新品种草莓脱毒种苗繁育及推广实施方案是现代农业的重要一环，对提高农业生产的效率和质量具有重要意义。
作为农业领域的一名写手，我深知推广新品种的脱毒种苗对于农业的发展至关重要。
在实施推广过程中，需要加强农户的培训和技术指导，同时政府和相关部门的支持也是非常重要的。
只有通过全社会的共同努力，才能够真正实现新品种草莓脱毒种苗繁育及推广的目标。
总结回顾新品种草莓脱毒种苗繁育及推广实施方案是一个复杂而系统的工程，需要从品种遴选到繁育技术再到推广实施方案都需要细致谨慎地考虑和实施。
只有通过科学的技术和政策的支持，才能够真正实现新品种草莓脱毒种苗的推广目标，从而提高农业生产的效率和质量。
草莓脱毒种苗两段繁育技术
种植技术 2021.1草莓脱毒种苗两段繁育技术田宗轩¹，汪洪清²（1.重庆市巫溪县农业委员会，重庆 405899；2.巫溪县溪月果蔬种植专业合作社，重庆 405899）草莓在长期的无性繁殖过程中，自身会感染和积累各种病毒，非常会引发草莓病毒，轻者植株生长势减弱，果实变小，产量降低；重者会出现叶片皱缩、植株矮小、果实奇形，品质低劣、产量下降，给种植户带来严重的经济损失。
目前还没有有效的药剂防治病毒病。
茎尖脱毒、原原种苗在组培室进行，原原种苗的驯化在驯化温室进行，繁殖原种苗、良种苗在生产基地进行。
整个过程划分两段：原原种苗——原原种苗的驯化在巫溪县脱毒组培中心进行，原种苗、良种苗繁殖在高山露地良种苗圃进行。
1 组培室茎尖脱毒1.1 配制培养基初代培养基以M S培养基成分为基础，添加细胞分裂素每升1.0mg，吲哚丁酸每升0.1～0.2mg，赤霉素每升0.1～0.2mg，蔗糖每升30g，琼酯每升5～7g。
大量无素：硝酸铵1650mg，硝酸钾1900mg，磷酸二氢钾170mg，氯化钙440mg，硫酸镁370mg，硫酸锰223mg，硫酸鋅8.6mg，硼酸6.2mg。
微量元素：碘化钾0.83mg，硫酸铜0.025mg，氯化钴0.025mg，钼酸钠0.25mg。
铁盐：乙二铵四乙酸二钠37.3mg，硫酸亚铁27.8mg，肌醇100mg，甘氨酸2mg。
有机成分：盐酸吡哚醇0.5mg，盐酸磺胺素0.1mg，烟酸0.5mg，蔗糖342.31mg。
PH：6.6～7.01.2 选取茎尖，茎尖处理，茎尖接种应在长势良好，没有病虫害的生产田进行，不适宜选择种苗田，选择匍匐茎长的茎尖，选取时间应在匍匐茎旺盛生长期。
选择方法：先进行株选，选择植株健壮苗，结果多，果形大，并具有品种典型性状的植株，再匍匐茎长势进行选择，茎尖叶片完全没有展开的匍匐茎，茎粗2～4mm，选好的匍匐茎指前端4～5cm的芽段，先用洗洁精进行冲洗，用自来水反复冲洗干净，接种前先将室内紫外杀灯打开，同时将超净工作台紫外杀菌灯打开，杀菌30～40min，空间消毒，操作人员用75%的消毒酒精棉对操作台面全面消毒。
《“香野”草莓茎尖组培快繁体系以及玻璃化法超低温保存体系的建立》
《“香野”草莓茎尖组培快繁体系以及玻璃化法超低温保存体系的建立》香野草莓茎尖组培快繁体系及玻璃化法超低温保存体系的建立一、引言随着现代农业科技的不断发展，草莓的种植与繁殖技术也得到了显著提升。
香野草莓作为市场上的热门品种，其繁殖效率及保存技术的改进尤为重要。
本文旨在介绍香野草莓茎尖组培快繁体系以及玻璃化法超低温保存体系的建立，以期为香野草莓的规模化种植及保存提供技术支持。
二、香野草莓茎尖组培快繁体系的建立1. 材料与设备组培所需材料包括香野草莓的茎尖、MS培养基、蔗糖等；设备包括组培室、灭菌锅、接种工具等。
2. 操作流程（1）选材：选择健康、无病虫害的香野草莓植株的茎尖作为组培材料。
（2）预处理：将选好的茎尖在无菌条件下进行表面消毒处理。
（3）接种：将处理好的茎尖接种到MS培养基上，置于组培室内进行培养。
（4）观察与繁殖：定期观察培养情况，挑选生长良好的茎尖进行扩繁。
3. 快繁体系特点香野草莓茎尖组培快繁体系具有繁殖速度快、保持品种纯度、节省空间等优点，为规模化种植提供了技术支持。
三、玻璃化法超低温保存体系的建立1. 材料与设备超低温保存所需材料包括香野草莓的组织块、玻璃化液、冷冻保护剂等；设备包括超低温冰箱、冷冻干燥机等。
2. 操作流程（1）预处理：将选好的香野草莓组织块进行清洗、消毒处理。
（2）玻璃化处理：将组织块放入玻璃化液中，进行逐步替换冷冻保护剂的过程，直至完全玻璃化。
（3）超低温保存：将玻璃化后的组织块放入超低温冰箱中保存。
（4）复苏：需要时将保存的组织块取出，进行复苏处理，使其恢复活力。
3. 玻璃化法特点玻璃化法超低温保存体系具有保存效果好、操作简便、对组织损伤小等优点，为香野草莓的长期保存及种质资源库的建设提供了有效手段。
四、结论本文成功建立了香野草莓茎尖组培快繁体系及玻璃化法超低温保存体系，为香野草莓的规模化种植及长期保存提供了技术支持。
茎尖组培快繁体系具有繁殖速度快、保持品种纯度等优点，可有效提高香野草莓的种植效率；而玻璃化法超低温保存体系则具有保存效果好、操作简便等优点，为种质资源的长期保存提供了有效手段。
草莓种苗脱毒快繁体系的建立及温室层架栽培技术的应用
莓，蔷薇科草莓属多年生草本植物，果实酸甜可口，营养丰富，富含糖、蛋白质、无机盐、维生素等多种营养物质，在世界小浆果生产中居于首位。
长期以来，中国大多数地区都依靠传统的分株繁殖法生产草莓种苗，导致草莓体内病毒的不断累积，病毒病的发生逐年加重。
利用草莓的脱毒、快繁技术进行草莓苗的规模化生产，既可以保持原品种的种质纯度，又可以提高草莓的繁殖系数，更重要的是可以提高草莓的产量和品质、促进草莓产业化发展。
因此，草莓脱毒快繁体系（图1）的建立可对草莓苗的规模化生产奠定重要的技术基础。
基于无土栽培营养液配方施肥基础上的温室内草莓层架栽培，既体现了农产品的高品质、高产量，也满足了人们日益增加的休闲观光生态采摘需求。
2008’是由中国农业科学院培育生产，是中国太空自育种金奖品种，果实大，一般单果重20~40 g ，最大果重89 g ，果实硬度中等，果皮有韧性，果肉软硬适口，完熟后全果鲜红，采摘后储运期果色不变，果肉红色，果味甜酸，甜味突出；‘玫瑰香’为河南郑州中牟地区广泛种植的品种，果实香味浓郁，果肉香甜（图2）。
草莓种苗脱毒快繁体系的建立及温室层架栽培技术的应用张 晖，孙婷婷，祖艳青，赵栋会 （鄢陵建业绿色基地建设有限公司，河南许昌 461000）图1 草莓脱毒快繁技术体系流程草莓品种的选择本试验选择3个草莓品种，分别是‘红颜’‘太空2008’‘玫瑰香’等适合温室促成栽培的品种。
‘红颜’是日本草莓品种之一，其果实甜、硬、香，多级花序，结果期长，产量高；‘太空图2 ‘玫瑰香’茎尖脱毒培养本试验中草莓脱毒快繁所取外植体为匍匐茎顶端嫩芽。
从温室中选取形状优良、生长健壮、无病虫危害的草莓母株，截取小叶尚未展开的匍匐茎顶端约2~3 cm 长的顶芽。
首先用0.2%洗洁精水溶液浸泡5 m i n ，然后用软毛刷轻轻刷洗一遍，再用流动清水冲洗2 h ，转入超净工作台中。
在超净工作台中先用无菌的镊子将匍匐茎草温室内选取外植体茎尖脱毒培养脱毒苗快速繁殖脱毒苗生根培养温室驯化移栽定植DOI: 10.16815/ki.11-5436/s.2016.22.010顶端外部的大叶摘除，然后用75%酒精快速灭菌30 s，用无菌水冲洗2遍后，再用0.1%升汞（滴入1~2滴吐温80）振荡灭菌6 min，最后用无菌水冲洗5遍。
草莓脱毒苗3级繁育体系建立
草莓脱毒苗3级繁育体系建立
史芳芳
【期刊名称】《农业科学与技术（英文版）》
【年(卷),期】2014(015)007
【摘要】草莓茎尖培养是获得无病毒植株的最重要途径,而且脱毒和快繁技术是大批量、快速生产优质种苗,实现草莓产业优质、高产、高效的关键技术.文章介绍了原原种的获得过程,即通过茎尖剥离及接种、初代培养、增殖培养、生根培养,将生根瓶苗移置消毒杀菌后的网室中,从而获得繁育所需的原原种,并介绍了原种苗及生产苗的繁育过程.经过生产实践,建立了较为完善的草莓脱毒苗三级繁育体系,为兵团草莓产业提供了优质种苗保障及技术支撑.
【总页数】3页(P1076-1078)
【作者】史芳芳
【作者单位】新疆兵团第十二师农业科学研究所,新疆乌鲁木齐830088
【正文语种】中文
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组培中心繁苗技术方案
组培中心草莓繁苗技术方案目录1、草莓脱毒种苗简述 (2)2、草莓组培技术流程： (3)3、草莓组培苗的驯化： (5)4、秋季9月下旬定植日光温室草莓种苗操作流程及注意事项： (8)5、春季3月中下旬定植露地草莓的注意事项： (10)1、草莓脱毒种苗简述草莓是多年生草本宿根植物，植物矮小呈丛装生长，植株高约20-30cm，短缩的茎上密集的着生叶片，并抽生花絮和匍匐茎，下部生根。
草莓的营养器官有根、缩短茎、叶、花、果实、种子和匍匐茎等。
传统方法繁殖草莓种苗经多代营养繁殖的植株中的毒素就会逐年增加，表现为植株变矮、果实变小、口感变差、畸形果实比例增加等，引起果实品质下降，草莓品种种性退化，从而降低了果实的商品价值和经济价值。
组织培养的方法具有繁殖速度快、无毒等特点，且组织培养苗生长性状优于常规繁殖方式，降低了染病率，提高了产量和品质。
草莓通过组织培养技术创造的的经济效益大幅度提高，能调动广大种植户的积极性，为果农增收，新农村建设做出更大的贡献。
以上为草莓组培脱毒种苗三级育苗流程图，经查阅文献和询问专业技术人员，草莓脱毒种苗继代培养一般不能超过4代，否则可能会导致后代的变异，并且出瓶驯化的第一代种苗为原原种，不能直接当做生产种用，需要经过一次试种，并观察原原种是否长势正常，取长势正常的原原种上生长的原种作为母本进行栽培种的扩繁。
2、草莓组培技术流程：2.1 外植体选择选取6月份刚扎根的匍匐茎苗，并在无菌条件下剥取茎尖生长点0.3-0.5毫米作为外植体。
2.2外植体预处理及灭菌将材料用洗洁精清洗后用吐温清洗之后在流动自来水中冲洗20-30分钟，在超净工作台上用75%酒精消毒30秒左右，用无菌水冲洗3次，吸干水后在0.1%升汞中消毒5分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水分，剥取茎尖生长点0.3-0.5毫米作为外植体。
2.3培养条件诱导培养基：MS + 6-BA 0.2mg/L + IBA0.04mg/L增殖培养基：MS + 6-BA 0.3mg/L +IBA 0.06mg/L生根培养基：1/2MS + IBA 0.1mg/L以上培养基均加蔗糖3% ，琼脂0.65%，pH值5.8-6.0。
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福 建果树 ・ 第 １８期 总 ３
Ｆｊ ｎＦｕｔ２０． 实用技 术 ｕｉ ｒｉ ０６３・ ａ ｓ
作者简介 ：花秀凤 （ ９ ３一） １７ ，女，农 艺师 。从事蔬菜育种与推广研 究 ５ ６
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福 建果树 ・ 第 １ ８期 总 ３
Ｆ ｊ ｎＦｕｔ ２ ０ ． 实用技术 ｕｉ ｒｉ ０ ６ ３・ ａ ｓ
南 酸 枣 特征 特 性 与栽 培技 术
～
８ 月太阳能高温消毒或移栽前用 甲醛消毒。先把
脱毒研究。经过 ３年的实践 ，建立 了较为完善 的草
莓脱毒苗三级繁育体系 ，产生了显著的社会效益和 经济效益。现总结如下 ：
试管苗从培养室移 到普通室 ，选 晴好 的天气移栽。
将培 养 基 冲 洗 干 净 ，用 １０ ００倍 甲基 托 布 津 浸 泡 ５ｉ ｍｎ后直 接 移 栽 室 外 栽 培 基 质 中 ，浇 透 水 后 盖上 小拱 棚膜保 温 保 湿 。 移栽 的头 ３ ｄ如果 是晴 天 ，中 午前 后须 盖 遮 阳网 以防 光 照 过 强 ，３ 撤 去遮 阳 ｄ后
．
止重新感染病毒 ，在扩大繁殖中必须采取严格的隔
水冲洗 ０ ５ ，然后在 ７ ％酒精 中浸泡 ｌ ｉ，再用 ．ｈ ５ ｍｎ
２ 次氯 酸 钠 消 毒 ｌｍｎ ％ Ｏ ｉ，无 菌 水 冲 洗 ３遍 ，在 超
净工 作 台上逐 层剥 去顶 芽外 面 的［ 片 ，用解 剖刀 切 １ － 卜
离措施 。 ２ １ 土壤 消毒 ．
草 莓茎 尖 组培 脱 毒 和 种 苗 三级 繁 育体 系的建 立
花秀凤 陈 铣 许 玲
（福建省福州市蔬菜科学研 究所，福建福州 ３ ０ １ ； ５０２ 福建省农业科学院果树研究所）
草莓常通过无性繁殖为生产提供种苗 ， 而长期
使用无性繁殖种苗易使 品种退化 ，病毒感染严重 ， 抗 病力减 弱 ，产 量 、质量 、效益 锐减 ，成 为生 产上
迫 切需要解 决 的 问题 。组 织 培 养 （ 称 组 培 ） 技 简
然后 转 入培 养基 Ⅱ进 行 生根 培养 。一 个 月后根 长 ２
～
５ ｍ 时 即可 出瓶移 栽 。 ｃ
１４ 试 管苗 的移 栽 ． ｌ Ｏ～１ 可 出瓶 移 栽 ，这 段 时 间 天气 晴 朗稳 １月 定 ，温 度适 宜 ，除 了小拱 棚 和遮 阳网外 ，不需 其它
诱导分化 和继代 增殖培 养基 Ｍ ６ Ｂ ｍ ／ Ｓ＋ Ａ １ ｇＬ＋
Ｎ Ａ０ １ ｇＬ ＋ ％蔗糖 ＋ ． ％琼脂 ；Ｉ，壮苗 Ａ ． ｍ ／ ３ ０７ Ｉ
生根培养基 Ｍ １５ Ｓ＋ ． ％蔗糖 ＋ ． ％琼 脂 。 ０７
１ ２ 接种 母株 的选 择 与处理 ．
选取生 长健 壮 、能充 分表 现本 品种 优 良性 状 的
植株为母株 。为了避免因材料带菌而产生污染 ，须
种在山区进行移栽扩繁。
对母株进行杀菌，每周用 ５０倍 甲基托布津处理 １ ０
次。 １３ 接种 、增 殖 、生根培 养 ． ５～ ６月取 刚抽 生 的匍 匐 茎 茎 尖 约 １ｍ，用 流 ｅ
２ 原种苗的生产
由于实验室所生长的脱毒组培苗数量有限 ，成 本很高，须进一步扩大繁殖 ，生产原种茁。为了防
不能 重茬 或选 择 前茬 为茄科 作物地 ，最好选 择 水 稻 田 ，用 甲醛或 氯化 苦对 苗地 进行 消毒 ，以防止
下带 一个 叶原基 （ ０２～ ．ｍ 长 ． ０培养。２ 个月后愈伤组
织周围长满丛 生芽 ，把芽逐个切下 ，每瓶放 ５～ ６
林朝楷 曾赣林 李小红
（江西省崇义县农业局，江西崇义 ３ １０ ； 江西省赣州市林业科学研 究所） ４００
崇义县 南 酸枣 分 布 面 积 达 １３ ．３万公 顷 ，其 中 野生 面积 １万公 顷 ，栽 培 面积 ０ ３ ．３万公 顷 ， 目前 以每 年 ３０ｍ 的速 度递 增 。２０ ３ｈ ０４年 经 国家林 业 局 认定 ，崇义 县 获 全 国 唯 一 的 “ 国 南 酸 枣 之 乡 ” 中
土壤中线虫 、病菌 的侵染。
２ ２ 防 虫 网隔离 ．
个芽继续增殖 ，每 ２ ｄ可增殖 １ （ ５ ） ５ 代 约 倍 ，一 般增殖 ３ （ １５倍）就可以获得所需的数量。 代 约 ２
收稿 日 ： ０ ６ ０ — ８ 期 ２０ — ７ １
用４ Ｏ目防虫网隔离 ，防止传毒昆虫进入。
２ 田 间管理 ．３
术是草莓脱除病毒的一种最经济有效 的途径。专家 证明，草莓脱毒苗生长势强 ，抗病力提高 ， 大果率 增加 ，能增产 ３ ％ ～ ０ ０ ８ ％。为此 ，福建省福州市 蔬菜科学研究所从 ２０ ００年开始进行草莓茎尖组培
设施 ，移栽成活率可 达 ９ ％ 以上。采用腐熟的移 ０ 栽基质 （ 如草炭土和草木灰按 １ 混合） ：１ ，利用 ７
称号 。
１ 特征特性
南酸枣 （ ｈ ｅ ｓｏ ｄａ ｘ ｌｒ ） 是 江 西 的优 Ｃ ｏｒ ｐ ｎ ｉ ａ ｉａｉ ｏ ｓ ｌ ｓ
良速生乡土树种 ，又称酸枣 、五眼果、鼻涕果 ， 为 漆树科 （ ｎｃ ｄ ｃａ）南 酸枣属 （ ｈｅ ｓ ｎｉ Ａ ａａ ｉ ｅｅ ｒａ Ｃｏｒｐ ｄ ｏｏ ． ｎ）落叶大乔木 ，高达 ３ ｍ，胸径 ８ｅ ０ ０ｍ。树干通 直 ，树皮灰褐色 ，浅纵裂 ，老树皮条片状剥落。奇 数羽状复叶，小 叶 ７一ｌ ９片 ，卵状披针形 ，先端
１ 原原种的获得
１ １ 培养基 的配 制 ．
草莓茎尖组织培养需要配制 ２种培养基 ： Ｉ ，
网，棚内温度 过高 （ ３ ＞３ ％） 时再 加盖遮 阳网。
移栽 １ｄ ５ 后小苗新 叶长出，表明移栽成活。
１５ 组培 苗 的越 冬 ． 经过 ２个 月 ，组 培 苗 长 到 ５～ ６片 叶 时 ，撤 去 小拱 棚 ，盖 上 ４ Ｏ目防虫 网 ，让 组培 苗在 １ ２月低 ～ 温 下缓慢 生 长 。经过 自然 低 温 休 眠 ，３月作 为原原