三种梅毒螺旋体检测

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三种梅毒螺旋体检测方法的临床评价

作者:凌聪作者单位:广东省南雄市人民医院检验科,广东南雄512400

【摘要】目的:探讨三种血清梅毒螺旋体检测方法的应用价值。方法:应用甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST),酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)分别检测596份标本,其中57例确诊为梅毒感染。结果:ELLSA法与TPPA法检测结果之间无显著性差异(P > 0.05),二者敏感性和特异性分别为94.7 %,98.1%和91.2%, 97.2%;TRWST与ELISA法、TPPA法之间有显著性差异(P< 0 .05)。结论:ELISA法和TPPA法在临床的诊断中是较好的血清梅毒螺旋体的检测方法。

【关键词】梅毒螺旋体; 甲苯胺红不加热血清学试验; 酶联免疫吸附试验; 梅毒螺旋体明胶凝集试验

Research on Three Method for Detecting Treponema Pallidum

LING Cong

The People's Hosptial of Nanxiong, Guangdong Nanxiong 512400, China

Abstract: Objective: To explore three kinds of method for detecting treponema pallidum. Method: 596 specimens were detected with TRUST, ELLSA and treponema pallidum particle assay respectively, 57 of them infected treponema pallidum. Result: There's no significance difference between ELISA and TPPA method (P>0.05). The sensibility and specifity was 94.7%, 98.1% and 91.2%, 97.2& while, there's significant difference among TRUST, ELISA and TPPA (P<0.05). Conclusion: It's a good way to detect treponema pallidum with ELISA and PPPA method.

Key words: Treponema pallidum; TRUST; ELISA TPPA

梅毒是一种经典的性传播疾病,梅毒螺旋体属于密螺旋体属苍白螺旋体的苍白亚种,是引起人类梅毒的病原体。其传染性强,危害性大,感染后可以引起全身各组织、器官的损害,危害较大。近年梅毒的发病呈上升趋势,因此对梅毒的早期诊断和及时治疗已成为当前重要问题,尤其对控制其蔓延至关重要。实验室如何更合理地选用检测方法,避免错诊、误诊、漏诊而产生医患纠纷等问题是非常必要的。为此,就如何更合理地利用甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST)、梅毒酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋明胶凝集试验(TPPA)三种不同方法为临床对梅毒的辅助诊断在此进行探讨。我们对2007年1月至2007年12月门诊和妇产科采集的596份标本采用甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅素螺旋体明胶凝集试验(TPPA)方法进行梅毒检测,结果分析如下。

1 对象与方法

1.1 一般资料:本组596例,男134例,女462例,年龄25~70岁;均为我院皮肤科、外科门诊就诊患者和妇产科住院病人。根据2000年中国卫生部防疫司颁布的性病诊断标准,其中57例临床确诊为梅毒感染。

1.2 方法:596份标本分别采用TRUST,TPPA,ELISA三种方法检测,检测所用试剂在有效期内使用,严格按照试剂操作说明书操作。

1.3 试剂与仪器:①TRUST 试剂由上海荣盛生物技术有限公司提供、仪器使用江苏省姜堰市天力医疗器械TL-2000A型梅毒自动旋转仪;②TPPA 试剂由日本富士欧必株式会社提供;③ELISA 试剂由为厦门新创科技有限公司提供、仪器使用美国生产的Stat fax-2100酶标仪和Stat fax-2600洗板机。

1.4 统计学方法:应用S PS S14.0统计软件,不同方法间的比较采用X2检验。

2 结果

596 份标本中,临床确诊梅毒感染57例。TRUST, TPPA, ELISA三种方法的检测结果见表1。经X2检验,TRUST法与TPPA法、ELISA法检测结果之间有显著性差异(P< 0 .05),TP PA法与ELISA法检测结果之间无显著性差异(P> 0.05);与临床确诊的患者病例相比较,TRUST法检测假阳性77例,假阴性4例; TPPA法检测假阳性15例,假阴性5例;ELISA法检测假阳性10例,假阴性3例。表1 三种检测方法的敏感性与特异性比较(略)

3 讨论

梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的性传播疾病。人体感染梅毒螺旋体4~10 周,血清中可产生抗类脂抗原的非特异性抗体和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体。所以临床血清试验主要分为两大类:一类为非梅毒螺旋体抗原血清学试验,另一类为梅毒螺旋体抗原血清学试验。我国卫生部颁布的《性病诊断标准和治疗方案》中,将前者列为常规试验方法,后者作为确认试验方法。

检测抗类脂抗体的方法目前国内最常用的是快速血浆反应环卡片试验(RPR)法和甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST)法,并且长期以来作为国内临床疑似病人和血站献血员筛检的主要方法。检测抗密螺旋体抗体主要有梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)法和(TPPA) 法,目前主要用于筛检阳性标本的确诊。

ELISA是随着近年梅毒螺旋体基因工程的研制成功而发展起来的一种血清学检测方法,是将基因重组表达的梅毒螺旋体抗原包被在微孔板上,用双抗原夹心法测定梅毒螺旋体特异性抗体,该试验是使用基因工程方法制备的重组抗原代替以往使用的野生型梅毒螺旋体抗原,易于纯化,极大提高了试验的敏感性和特异性[1],与TPPA非常接近[2]。本试验的结果与程艳杰等[3]、周洪伟等[4]的报道相符,且抗梅毒螺旋体抗体即使经抗梅毒治疗后,仍持续存在,甚至终生存在[5,6]。ELISA方法适用于大量标本和献血员的筛查。ELISA 法检测时,如果血清中梅毒抗体浓度过高,会产生钩状效应[7]。对TRUST检测阳性而ELISA 法阴性的标本,必要时稀释后重新测定,同时做TPPA对比。综上所述,梅毒血清学诊断的各种方法均具有假阳性和假阴性的结果。ELISA法和TPPA法是较好的血清梅毒螺旋体的检测试验。最好能将筛选试验与确诊试验同时应用。临床医师做出诊断时,除考虑检测结果外,还应通过病史、症状、体征综合分析,以确定诊断。

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【参考文献】

[1]贾月琴,季必华.梅毒螺旋体实验室诊断研究进展[J].安徽医学.2005,26 (5):453-454.

[2]徐进春,许秀文,周明忠,等.贵阳地区无偿献血人群梅毒抗体筛查结果分析[J].中国输血杂志,2004,17(1):48-49.

[3]程艳杰,王广杰,刘明,等.梅毒螺旋体特异性抗体检测方法的实验室评价[J].中华检验医学杂,2006,29(3):272.

[4]周洪伟,林松.三种方法检测梅毒螺旋体抗体的比较[J].微生物学杂志,2005,25(3):99.

[5]王培华. 输血技术学[M].北京:人民卫生出版社,1998.103.

[6]尹跃平.梅毒血清学检测方法的应用评价[J].实用医院临床杂志,2006,3(2):

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