梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法)
梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程
1、检验申请单独检验项目申请：梅毒螺旋体抗体（缩写TP ELISA）测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2、标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中，或采用含分离胶的真空采血管。
也可采集血浆，用肝素、EDTA或枸橼酸盐抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对检测结果可能有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在置1-2h后将标本离心分离出血清或血浆，避免溶血。
离心必须达到3000rpm 15min，离心后的血清中不能含有颗粒物和微量纤维蛋白。
2.2.2标本保存时间：室温（15-25℃）下可稳定48h，普通冰箱中（2-8℃）稳定7d，在-20℃最多可保存4周。
避免反复冻融。
不可使用热灭活的标本。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4-8℃冰箱内保存7d。
2.3标本采集的注意事项采血前使受检者保持平静、松弛，避免剧烈活动。
3．方法原理本试剂盒用梅毒螺旋体抗原包被反应板，用梅毒螺旋体抗原标记辣根过氧化物酶，应用双抗原夹心法原理，检测人血清或血浆样本中的梅毒螺旋体抗体。
4．试剂及其他用品4.1试剂：梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒，由上海科华生物技术有限公司出品，试剂盒药品批准文号：国药准字S2*******(96人份)。
未打开的试剂盒保存于2-8℃，不可冻存。
微孔反应板打开包装后，应立即将未试用的板条装入有干燥剂的自封袋中密封，置2-8℃避光保存。
TPPA试剂盒说明书
T P P A试剂盒说明书-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1梅毒TPPA试书剂盒说明书1、试验原理：梅毒抗体检测是采用抗原抗体凝集反应中的抗原抗体凝集反应。
其原理如下：将梅毒 (Nichols 株)的精制菌体成分包被在人载体明胶粒子上。
这种致敏粒子和样品中的梅毒螺旋体（TP）抗体进行反应发生凝集，产生粒子凝集反应（TP）抗体，并且可用来测定抗体效价。
2、样本收集和贮存：血清或血浆1ml，标本应无溶血，无脂血，无微生物污染。
不满足上述要求的标本拒收，标本的采集应使用清洁，无菌的一次性的干燥管。
标本用量最少50ul，七天内检测的标本应在2-8℃保存，贮存在-20℃可保存4W，同时避免反复冻融血清。
3、安全防范：3．1此试剂盒内含人血成分。
尽管所有的对照及定点对照都已经过试验验证并且发现对于乙型肝炎表面抗原，丙型肝炎抗体，HIV抗体均为阴性；但仍认为它们具有潜在的感染性。
3．2移液过程禁止用口。
3．3 在处理试剂和标本的地方禁止吸烟，饮食。
3．4使用试剂盒和标本时，必须戴一次性手套，穿试验服。
使用后请彻底洗手清洁。
3．5患者样本及其他潜在感染材料试验后应放入医用垃圾桶内。
3．6试剂的溶解液，血清稀释液和阳性对照血清含有叠氮钠作为防腐剂,叠氮钠可以和铅铜反应形成爆炸的金属叠氮化合物.为防止金属叠氮化合物的形成,应用大量的水冲洗以免其堆积.4、试剂：4．1 储存与稳定性：试剂应在2-10℃保存。
冻干试剂必须在复溶后的当天使用，如果保存在2-10℃最多可使用7天。
4．2 试剂盒组成：（由富士瑞士欧公司出产）（1）溶解液（液体） 8mL×1瓶用于调制致敏粒子和未致敏粒子。
（2）血清稀释液 29mL×1瓶用于样品的稀释。
（3）致敏粒子（冷冻干燥）调制浓度为1%的Treponema Pallidum(Nichols 株)致敏明胶粒子。
（4）未致敏粒子（冷冻干燥）经单宁酸处理调制浓度为1%的明胶粒子。
化学发光免疫法与胶体金法检测梅毒抗体的比较
化学发光免疫法与胶体金法检测梅毒抗体的比较摘要目的:通过比较这两种梅毒血清学检测方法的敏感性和特异性,选择敏感性高和特异性强的检测方法。
提高对梅毒的早期诊治,控制梅毒传播。
方法:采用化学发光免疫法和梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金)检测190例已确诊为梅毒患者的血清标本。
结果:化学发光免疫法与胶体金法对190例确诊梅毒患者的血清标本的敏感性分别为97.9%、88.4%,特异性分别为98.4%、96.7%。
化学发光免疫法的敏感性高于胶体金法,差异有统计学意义(P<0.05);化学发光免疫法的特异性高于胶体金法,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:胶体金法简便快速,适用于临床急诊标本检测。
化学发光免疫法特异性强、敏感性高适合于大批量的梅毒抗体筛查,提高了梅毒检测的阳性率对有效控制妊娠期梅毒和胎传梅毒的发生及梅毒传播都要重要的临床意义[1]。
关键词梅毒;化学发光法;胶体金梅毒(Syphilis)是由梅毒螺旋抗体(又称苍白螺旋体)引起的常见性传播疾病之一。
其临床病程漫长,临床表现极为复杂,几乎可侵犯皮肤粘膜,晚期侵犯内脏器官。
实验室可以通过检测血液中的非特异性抗体和特异性抗体[2],判断是否感染梅毒螺旋体。
现采用化学发光免疫法和胶体金法检测190例梅毒患者的血清标本,结果报告入下。
1 材料和方法1.1 标本来源经病史、临床症状及血清学实验确诊的梅毒患者的血清标本190例。
1.2 试剂科美CHEMCLIN600全自动化学发光免疫分析仪,试剂是由北京科美东雅生物技术有限公司提供的配套试剂盒,(胶体金法)梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒是由广州万孚生物技术有限公司生产。
1.3 方法采用化学发光免疫法和胶体金法严格按照说明书对190例确诊标本进行检测。
1.4 结果判定化学发光免疫法的结果判定:临界值=2.1×N(N为阴性对照RLU的平均值),待测样品RLU值≥临界值,判定为阳性,待测样品RLU值<临界值,判定为阴性。
3种临床常用梅毒检测方法的比较
3种临床常用梅毒检测方法的比较李珍瑶;龙华泉;陈银仲【摘要】目的通过比较检测梅毒的不同检测方法,选出高特异性和灵敏度的梅毒检测方法.方法用国产梅毒甲苯胺红不加热血清试验,国产梅毒螺旋体抗体诊断试剂(胶体金法)和进口梅毒螺旋体抗体诊断试剂(凝集法)即TP.PA 法对临床送检标本进行检测,比较各种检测方法结果,评价各种梅毒检测方法的特异性、灵敏度.结果TRUST 法的特异性、敏感性相对较低,存在漏检,存在局限性.而梅毒胶体金法与TP.PA 法的特异性、敏感性均较理想,同时胶体金法比TP.PA法操作更简便快捷.结论 TRUST 法更适合作为已诊断的患者的疗效跟踪;而梅毒胶体金法与TP.PA 法可作为确证试验;胶体金法更适用于临床大批量人群的筛查及输血前全套检查的初筛试验.【期刊名称】《中国医药科学》【年(卷),期】2011(001)019【总页数】2页(P140-141)【关键词】梅毒;TRUST;胶体金法;TP.PA法【作者】李珍瑶;龙华泉;陈银仲【作者单位】广东省江门市新会区人民医院检验科,广东江门,529100;广东省江门市新会区人民医院检验科,广东江门,529100;广东省江门市新会区人民医院检验科,广东江门,529100【正文语种】中文【中图分类】R446.6梅毒（syphilis）属于一种性传播疾病，病原体为苍白密螺旋体（treponema pallidum，TP）苍白亚种，又称梅毒螺旋体，主要通过性接触直接传染，接吻、手术、哺乳、输血、接触污染物也可被传染。
患梅毒的孕妇可通过胎盘感染胎儿，早期可致胎儿流产、早产，晚期感染的成活胎儿可患先天梅毒。
近几年梅毒的检测阳性率有所增高，现在很多医院都将梅毒作为住院患者的常规检查项目，笔者所在医院这几年也加大了对门诊及体检中心的检查患者的宣传防治力度，很多体检患者都会进行梅毒的血清学检测，住院手术患者也开展了输血前全套检查，其中就包括梅毒的血清学检测，因此，如何找出一种灵敏性和特异性都高，同时操作快速简便的方法，是本研究的目的。
梅毒抗体检测(TP-Ab)
梅毒抗体检测（TP-Ab）1.方法：胶体金法2.原理：本品采用胶体金免疫检测技术和层析原理，定性检测血清（浆）样本中的梅毒螺旋体抗体。
检测时，样本中梅毒抗体可与胶体金标记抗原结合形成抗原抗体复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的抗原结合形成“Au-TPAg-TPAb-TPAg”夹心物而凝聚显色，游离胶体金标记梅毒抗原则在对照线处与预包被的兔抗TP抗体结合而富集显色。
阴性标本则仅在对照线处显色。
3.样本要求3.1无菌条件下采集静脉的血清、血浆样本，并避免溶血。
3.2血清和血浆样品在收集后七天内检测，样品须放在2-8°C保存；如果大于七天须冷冻保存4.3临床常用抗凝剂化口丁人，肝素、枸檬酸钠）等血浆样本不影响检测结果。
4.检测方法再进行测试前必须先完整的阅读使用说明书，使用前将试剂盒和待测样本恢复至室温（18-25o C）4.1从原包装中取出试剂，在1小时内应尽快的使用5.2将试剂置于干净平坦的台面上，在加样区使用微量加样器加入100Ul样本。
6.320±2分钟内观察并记录试验结果5.结果判断阳性：试剂盒在检测线和对照线位置出现两条紫红色条带。
如果检测线的紫红色条带隐约可见，建议对该样本重复试验，并使用其他方法确认。
阴性：试剂盒只在对照线位置出现一条紫红色条带失效：对照线未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏。
在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。
如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。
注意：检测线内的紫红色条带可呈现颜色深浅的现象。
但是，在规定的观察时间内，不论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带也应判定为阳性结果。
6产品性能指标6.1阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、最低检出限、重复性、精密性、稳定性性均应符合要求。
6.2.本试剂盒与乙肝、甲肝、丙肝、人类免疫缺陷病毒(HlV)、类风湿因子(RF)阳性血清均不产生交叉反应6.3、胆红素(342.0μmol∕L)∖胆固醇(20.7mmol/L)、血红蛋白(5.0g∕L)>甘油三酯(28.2mmol∕L)不影响检测结果。
3种不同方法检测梅毒的结果比较分析
42中外医疗 CH IN A F OR EI G N ME DI C AL T R EA TM EN T临 床 医 学梅毒是因梅毒螺旋体而引起的一种慢性性传播疾病,一旦人体被感染梅毒螺旋体后,血清中则会出现特异性抗螺旋体抗体与非特异性抗类脂质抗体,故临床上梅毒诊断的重要依据为血清学检测[1]。
本文用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法)三种血清学检测法进行检验,并将结果进行统计分析,现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选自2008年3月至2009年5月来我院就诊与住院的梅毒患者98例,其中男性37例,女61例;年龄最小2岁,最大65岁,平均年龄37.6岁;其中一期梅毒患者31例,二期梅毒患者42例,三期梅毒患者15例,隐性梅毒患者10例。
再选取同时间段来我院就诊的50例健康体检者为对照组(来我院就诊者女性较多,少数病例可能母婴传播,数据有改动,请酌情处理)。
1.2 方法受检者均抽取肘静脉血3m L ,分离血清后,采用T R U S T 、TPPA及胶体金法3种方法及时检测,操作方法均按照使用说明书严格操作。
1.3 试剂与仪器T RU ST 试剂由上海荣盛生物技术有限公司提供,T PP A 试剂由日本富士瑞必欧株式会社提供,胶体金法试剂由杭州艾康生物技术有限公司提供。
所有试剂均通过卫生部生物制品鉴定所批批检合格,使用时均在有效期内。
1.4 结果判断(1)TRUST：阳性即能见中等或较大的凝集物,阴性即能见均匀抗原颗粒,且无凝集物;(2)TPPA：阳性即凝集周围杂乱且外周边缘不均匀,阴性即粒子成纽扣状凝集,外周边缘均匀且呈现平滑的圆形;(3)胶体金：阳性即检测区与对照区的位置各有1条红色的反应线出现,阴性即对照区位置有有1条红色的反应线出现,测试区无红色的反应线出现。
1.5 统计学处理使用SPSS 10.0软件进行统计分析处理,计数资料比较用 2检验,P <0.05为差异有统计学意义。
梅毒螺旋体抗体检测试剂盒(胶体金法)生产环节风险清单和检查要点
序号
风险环节
风险点
检查要点
1
机构与人员
是否配备与梅毒螺旋体抗体检测试剂盒（胶体金ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ）生产相适应的检验人员。
梅毒螺旋体抗体检测试剂盒（胶体金法）产品的性能指标包括阴性参考品符合率、阳性参考品符合率等功能性检测项目，需对其进行检测。企业应确保：
原辅料的物理性能、功能性能是否符合设计开发输出的要求。
2.洁净室的温湿度（如低湿要求）应当满足梅毒螺旋体抗体检测试剂盒（胶体金法）生产工艺需求，如湿度＜30%。
2.检查洁净区温湿度（如低湿要求）日常监控记录，确保满足18-28℃，45%-65%或者梅毒螺旋体抗体检测试剂盒（胶体金法）生产工艺自身对温湿度的要求，如湿度＜30%。
3.梅毒螺旋体抗体检测试剂盒（胶体金法）产品仓储过程温湿度符合产品贮存要求。
1.检查采购订单/采购合同，确认生产企业从合格供应商采购物料。检查供应商资质证书及相关资料，资质证书及相关资料是否有效，且按照供应商管理制度进行管理。
2.建立梅毒螺旋体抗体检测试剂盒（胶体金法）物料清单，物料检验标准，仓储部门是否来料进行查验，质检部门是否根据检验标准对来料进行抽样和检验。
2.检查梅毒螺旋体抗体检测试剂盒（胶体金法）物料清单，对于关键物料的来料是否制定相关进货查验制度，明确检验标准，并进行抽样和检验，保存相关记录。
6.梅毒螺旋体抗体检测试剂盒（胶体金法）企业参考品是否能有效控制产品的性能。
6.检查梅毒螺旋体抗体检测试剂盒（胶体金法）企业参考品的设计资料，确认企业参考品能有效控制梅毒螺旋体抗体检测试剂盒（胶体金法）的性能（如阳性符合率、阴性符合率、最低检出限等）。
5
赛乐迪亚TPPA诊断试剂盒
微量反应板 U 型
微量加样器 25ｕ L（0.025mL）用
微量滴管 25 ｕL（0.025mL）用
移液管 微量移液管和刻度滴管
滴管
平板混合器
判定用观测板
七. 操作上的注意事项
样品中如果存在红细胞等其他有形成分，会给反应带来不便，所以应在离心除去之后再进行检查。血清样品
即使钝化也不会影响检查结果。
致敏粒子以及未致敏粒子在使用之前均应该混合均匀后再使用。
2 小时后，在观察镜上记录并观察其反应图象，或者利用免疫稀释判定装置进行测定。另外，即使静置至次
日也不影响判定结果。
表1
Well No. 1 2 3 4 血清稀释液 样品 100
25 25 25 25 25 25 25 样品稀释倍数 1：5 1：10 1：20 1：40 未致敏粒子（μl） 25 致敏粒子（μl） 25 最终稀释倍数 1：40 1：80 进行混合，盖上盖后静置反应 2 个小时
赛乐迪亚梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒
广州健仑生物科技有限公司.编译
请在使用前 30 分钟于室温（15-30℃ ）下进行调制。
D：未致敏粒子（冷冻干燥）
加入一定量的溶解液进行调制。
请在使用前 30 分钟于室温（15-30℃ ）下进行调制。
E：阳性对照血清（液状）
按照测定操作规则使用。
六. 使用器具
使用本试剂时，请准备好以下器具。
每个试剂盒中的阳性对照血清都要与样品用相同的测定方法进行试验。阳性对照血清调制成抗体效价为 1：
320（最终稀释倍数）。
九. 测定结果的判定方法
1. 反应图象的判定
在判定用观测板上静置微量反应板，观察粒子的反应图象。将反应图象与介质对照的图象进行比较，并参照
胶体金、RPR两种筛查梅毒抗体方法的对比与应用分析
胶体金、RPR两种筛查梅毒抗体方法的对比与应用分析作者：黄彩英来源：《中外医疗》2014年第36期[摘要] 目的为了比较胶体金（Collodal Gold TPCG）与快速血浆反应素环状卡片试验（ RPR）法筛查梅毒抗体区别与联系，以便对这两种方法有更明确的认识，合理选择检测方法，减少误诊与漏诊。
方法 2013年该院门诊和住院患者中需要检测梅毒抗体的标本，先用TPPA法检测，TPPA法检测出的阳性标本322例，再同时进行TPCG法和用RPR滴度检测。
结果 322例TPPA法阳性标本中TPCG法320例，阴性2例；RPR阳性114例，阴性208例。
在TPPA阳性的标本中TPCG和RPR阳性率有显著性差异，TPCG阳性率高于RPR。
结论TPCG法比较RPR更适合医院筛查，尤其是基层医院。
[关键词] 梅毒抗体；TPCG；RPR；TPPA；梅毒筛查[中图分类号] R [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2014）12（c）-0169-02梅毒是由苍白螺旋体感染所致的系统性传播疾病，其次是母婴传播及血液传播。
目前临床对梅毒的诊断除了临床症状以外，更依赖于实验室诊断。
实验室检测梅毒感染的方法很多，比较常用的筛查方法有RPR、TPCG，酶联，发光法等，确证TPPA、TPHA和免疫印迹法较为常用。
RPR和TPCG法由于实验要求低，操作简便，作为筛查方法被广泛应用，尤其是基层医院。
选自该院2013年住院及门诊检测梅毒项目的血清样本，并用上术两种方法进行检测，为了对这两种筛查方法有更明确的认识，合理应用于临床，减少误诊与漏诊的发生，对两种方法进行比较，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料标本选自该院住院及门诊检测梅毒项目的血清标本，均24 h内进行检测。
1.2 试剂与仪器梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验诊断试剂盒，试剂均当天配置或在4～8℃冰箱保存并24 h 内用于检测；TPCG法梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒；RPR试剂；移液器经质检部门校准。
梅毒螺旋体抗体使用说明
梅毒螺旋体抗体诊断试剂（凝集法）使用说明书一、检验方法：如果利用自动分析测定装置来使用本试剂时，请按照仪器的使用说明书进行操作。
以下所述是手工操作方法，请连贯地进行操作。
试剂的调制。
A：溶解液（液状）按照测定操作规则使用。
B：血清稀释液（液状）按照测定操作规则使用。
C：致敏粒子（冷冻干燥）加入一定量的溶解液进行调制。
请在使用前30分钟于室温（15~30℃）下进行调制。
D：未致敏颗粒（冷冻干燥）加入一定量的溶解液进行调制。
请在使用前30分钟于室温（15~30℃）下进行调制。
E：阳性对照血清（液状）按照测定操作规则使用。
1.方法1（1）用微量滴管将血清稀释液滴入微量反应板第一孔中，共计4滴（100μl），从第二孔至第四孔各滴1滴（25μl）。
（2）用微量移液管取样品25μl至第一孔中。
然后用微量加样器或微量移液管以2m的方式从第一空稀释至第四孔。
（3）用试剂盒中提供的滴管在第三孔中滴入1滴（25μl）未致敏粒子，在第四孔中滴入1滴（25μl）致敏粒子。
（4）用平板混合器以不会导致微量反应板内容物溅出的强度混合30秒钟，加盖后于室温（15~30℃）下水平静置。
2小时后，在观察镜上记录并观察其反应图像，或者利用免疫稀释判定装置进行测定。
另外，即使静置至次日也不影响判定结果。
在方法1中判定为阳性的样品，请再用具有确定意义的方法2进行检测。
2.方法2（1）用微量滴管将血清稀释液滴入微量反应板第一孔中，共计4滴(100μl)，从第二孔至最后一孔各滴入1滴（25μl）。
（2）用微量移液管取样品25μl至第一孔中。
然后用微量加样器或微量移液管以2m的方式从第一孔稀释至最后一孔。
（3））用试剂盒中提供的滴管在第三孔中滴入1滴（25μl）未致敏粒子，从第四孔至最后一孔各滴入1滴（25μl）致敏粒子。
（4）用平板混合器以不会导致微量反应板内容物溅出的强度混合30秒钟，加盖后于室温（15~30℃）下水平静置。
2小时后，在观察镜上记录并观察其反应图像，或者利用免疫稀释判定装置进行测定。
化学发光免疫法与胶体金法检测梅毒抗体的比较(精)
化学发光免疫法与胶体金法检测梅毒抗体的比较摘要目的:通过比较这两种梅毒血清学检测方法的敏感性和特异性,选择敏感性高和特异性强的检测方法。
提高对梅毒的早期诊治,控制梅毒传播。
方法:采用化学发光免疫法和梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金)检测190例已确诊为梅毒患者的血清标本。
结果:化学发光免疫法与胶体金法对190例确诊梅毒患者的血清标本的敏感性分别为97.9%、88.4%,特异性分别为98.4%、96.7%。
化学发光免疫法的敏感性高于胶体金法,差异有统计学意义(P<0.05);化学发光免疫法的特异性高于胶体金法,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:胶体金法简便快速,适用于临床急诊标本检测。
化学发光免疫法特异性强、敏感性高适合于大批量的梅毒抗体筛查,提高了梅毒检测的阳性率对有效控制妊娠期梅毒和胎传梅毒的发生及梅毒传播都要重要的临床意义[1]。
关键词梅毒;化学发光法;胶体金梅毒(Syphilis)是由梅毒螺旋抗体(又称苍白螺旋体)引起的常见性传播疾病之一。
其临床病程漫长,临床表现极为复杂,几乎可侵犯皮肤粘膜,晚期侵犯内脏器官。
实验室可以通过检测血液中的非特异性抗体和特异性抗体[2],判断是否感染梅毒螺旋体。
现采用化学发光免疫法和胶体金法检测190例梅毒患者的血清标本,结果报告入下。
1 材料和方法1.1 标本来源经病史、临床症状及血清学实验确诊的梅毒患者的血清标本190例。
1.2 试剂科美CHEMCLIN600全自动化学发光免疫分析仪,试剂是由北京科美东雅生物技术有限公司提供的配套试剂盒,(胶体金法)梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒是由广州万孚生物技术有限公司生产。
1.3 方法采用化学发光免疫法和胶体金法严格按照说明书对190例确诊标本进行检测。
1.4 结果判定化学发光免疫法的结果判定:临界值=2.1×N(N为阴性对照RLU的平均值),待测样品RLU值≥临界值,判定为阳性,待测样品RLU值<临界值,判定为阴性。
胶体金、RPR两种筛查梅毒抗体方法的对比与应用分析
胶体金、RPR两种筛查梅毒抗体方法的对比与应用分析目的为了比较胶体金（Collodal Gold TPCG）与快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）法筛查梅毒抗体区别与联系，以便对这两种方法有更明确的认识，合理选择检测方法，减少误诊与漏诊。
方法2013年该院门诊和住院患者中需要检测梅毒抗体的标本，先用TPPA法检测，TPPA法检测出的阳性标本322例，再同时进行TPCG法和用RPR滴度检测。
结果322例TPPA法阳性标本中TPCG 法320例，阴性2例；RPR阳性114例，阴性208例。
在TPPA阳性的标本中TPCG和RPR阳性率有显著性差异，TPCG阳性率高于RPR。
结论TPCG法比较RPR更适合医院筛查，尤其是基层医院。
标签：梅毒抗体；TPCG；RPR；TPPA；梅毒筛查梅毒是由苍白螺旋体感染所致的系统性传播疾病，其次是母婴传播及血液传播。
目前临床对梅毒的诊断除了临床症状以外，更依赖于实验室诊断。
实验室检测梅毒感染的方法很多，比较常用的筛查方法有RPR、TPCG，酶联，发光法等，确证TPPA、TPHA和免疫印迹法较为常用。
RPR和TPCG法由于实验要求低，操作简便，作为筛查方法被广泛应用，尤其是基层医院。
选自该院2013年住院及门诊检测梅毒项目的血清样本，并用上术两种方法进行检测，为了对这两种筛查方法有更明确的认识，合理应用于临床，减少误诊与漏诊的发生，对两种方法进行比较，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料标本选自该院住院及门诊检测梅毒项目的血清标本，均24 h内进行检测。
1.2 试剂与仪器梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验诊断试剂盒，试剂均当天配置或在4～8℃冰箱保存并24 h内用于检测；TPCG法梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒；RPR试剂；移液器经质检部门校准。
1.3 实验方法对该院住院需要首次用TPPA法检测梅毒抗体的患者，抽取静脉血并分离血清，用TPPA法定性检测，对检测阳性的血清标本，再用TPCG法和RPR法同时检测。
2021年梅毒螺旋体抗体胶体金法
梅毒螺旋体抗体胶体金法测定1【目的】定性检测血清或血浆中是否含有梅毒抗体2【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并经下述人员批准:专业主管，科主任。
3原理梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法)采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术来定性检测血清/血浆中是否含有梅麦抗休试剂食含有被事先固定于膜上测试区（T）重组特异性梅毒抗原和质控区（C）的相应抗体。
测试时，血浆/血清标本滴入试剂盒加样孔(S)内，血标本中的梅毒抗体与预包被在膜上的胶体金结合物反应。
然后，混合物随之在毛细效应下向上层析，在测试区(T)与固定在膜上的重组特异性梅毒抗原反应。
如果血清中含有抗梅毒抗体，在测试区内(T)会出现一条紫红色条带，表明时阳性结果。
如果在测试区内(T)没有出现紫红色条带，则血标本中不含有抗梅毒抗体，表明是阴性结果。
无论抗梅毒抗体是否存在于血标本中，混合物都会继续向上层析至质控区(C)，质控区的相应抗体与胶体金结合物反应出现一条紫红色条带。
质控区内(C)所显现的紫红色条带。
质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。
4标本采集与处理:4.1受检者准备:4.1.1受检者的状态:a.不可变的生物因素:年龄，性别，生活环境遗传;b.可变的生物因素:A)情绪:原则上患者应在平静，休息的状态下以晨起空腹时采集标本，患者对采集标本时的恐惧、紧张会造成标本采集的失败。
B)运动:受检者应处于平静状态下采集标，可减少由运动带来的影响。
C)生埋节律变化:昼夜的生理变化可能使测定结果不恒定，晨起固定时间空腹血尽可能减少昼夜节律带来的影响。
4.2采取标本时:A)体位:除非是卧床的病人，一般采血时取坐位。
B)止血带:一般从肘静脉采血使用止血带的时间不宜超过1min，穿刺成功后立即松开止血带，静脉阻滞也可影响。
4.3受检者的饮食:餐后采集的标本，易发现乳糜状，影响检验测定的正确性，故应嘱受检者采晨起空腹血为宜。
胶体金法和TPPA法检测血清梅毒抗体的比较与分析
胶体金法和TPPA法检测血清梅毒抗体的比较与分析黄彩英;辛颖;车欣【摘要】目的通过梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)和胶体金(Colloidal Gold,TPAb)检测血清梅毒抗体的比较,探讨胶体金法和TPPA法检测血清梅毒螺旋体抗体结果之间的关系.方法通过对本院首次用TPPA法检测阳性后的血清标本,再用TPAb法复查,共616例,以及急诊术前和腔镜检查前用TPAb法筛查出阳性的血清标本,再用TPPA法复查,共88例,并对7份两种方法共同阳性梅毒抗体血清用阴性血清进行倍比稀释,对稀释后的同一份血清分别用TPPA法和TPAb法进行定性检测,以比较两种方法灵敏度.结果 TPPA法检出616例阳性,用TPAb法复查612例阳,符合度99.35％;TPAb法共检测出88例阳性,用TPPA法复查77例阳性,符合度87.5％.结论稀释实验表明TPAb法灵敏度比TPPA法更高,能检测出更低的下限.【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2014(021)004【总页数】3页(P450-452)【关键词】梅毒螺旋体抗体;TPPA法;胶体金法【作者】黄彩英;辛颖;车欣【作者单位】本钢总医院检验科,辽宁本溪117000;本钢总医院检验科,辽宁本溪117000;本钢总医院检验科,辽宁本溪117000【正文语种】中文梅毒是由梅毒螺旋体感染所引起的一种传染性疾病。
在对梅毒疾病的诊断中常需要实验室提供支持性诊断。
目前检测患者是否感染梅毒的方法有多种［1］，其中TPPA 法和胶体金(Colloidal Gold，TPAb)法是实验室提供支持性诊断的较为常用的方法。
但关于TPPA法和TPAb法对血清梅毒螺旋体抗体检测结果的报道结论并不一致［2-4］。
为了探讨TPPA法和TPAb法对血清梅毒螺旋体抗体检测结果的关系，将本院近2年分别用TPPA法和TPAb法检测所得阳性的血清标本分为A、B两组进行比较，对结果不一致者用梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)复查。
3种不同方法检测梅毒的结果比较分析
3种不同方法检测梅毒的结果比较分析作者：姜泽升来源：《中外医疗》2011年第03期【摘要】目的探讨与分析3种不同方法检测梅毒的临床价值。
方法对我院98例梅毒患者与50例健康体检者均分别采用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法)检测血清梅毒,对3组检测方法的结果进行比较分析。
结果TRUST的试验检验符合率为86.7%,TPPA的试验检验符合率为100%,胶体金的试验检验符合率为99.0%。
TPPA与TRUST相比(c2=13.92,P【关键词】梅毒 TRUST 胶体金法 TPPA【中图分类号】 R759 【文献标识码】 A 【文章编号】 1674-0742(2011)01(c)-0042-02梅毒是因梅毒螺旋体而引起的一种慢性性传播疾病,一旦人体被感染梅毒螺旋体后,血清中则会出现特异性抗螺旋体抗体与非特异性抗类脂质抗体,故临床上梅毒诊断的重要依据为血清学检测[1]。
本文用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法)三种血清学检测法进行检验,并将结果进行统计分析,现报道如下。
1资料与方法1.1一般资料选自2008年3月至2009年5月来我院就诊与住院的梅毒患者98例,其中男性37例,女61例;年龄最小2岁,最大65岁,平均年龄37.6岁;其中一期梅毒患者31例,二期梅毒患者42例,三期梅毒患者15例,隐性梅毒患者10例。
再选取同时间段来我院就诊的50例健康体检者为对照组(来我院就诊者女性较多,少数病例可能母婴传播,数据有改动,请酌情处理)。
1.2方法受检者均抽取肘静脉血3mL,分离血清后,采用TRUST、TPPA及胶体金法3种方法及时检测,操作方法均按照使用说明书严格操作。
1.3 试剂与仪器TRUST试剂由上海荣盛生物技术有限公司提供,TPPA试剂由日本富士瑞必欧株式会社提供,胶体金法试剂由杭州艾康生物技术有限公司提供。
三种梅毒血清学检测方法的应用分析
三种梅毒血清学检测方法的应用分析摘要】目的分析比较梅毒螺旋体胶体金法（TP-RT）和快速血浆反应素试验（RPR）以及梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验（TP-PA）三种梅毒检测方法。
方法用TP-RT方法检测标本9336例，99例阳性标本再用RPR法与TPPA法平行测定。
结果TP-RT检测出的99例阳性标本中，TP-PA法检出阳性91例，阴性8例；RPR法阳性35例，阴性64例。
结论通过正确合理利用梅毒的血清学检测方法，为梅毒的临床诊治提供重要的参考。
【关键词】梅毒血清学检测方法梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性的、系统性的性传播疾病。
其临床表现呈多样性，给诊断带来了一定困难。
实验室合理地选用检测方法，及时、准确及快速对梅毒进行诊断，避免漏诊、误诊，以减少病人病痛和控制疾病蔓延极为重要。
通过对三种常用检测方法梅毒螺旋体胶体金法(TP-RT）、梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验(TP-PA)和快速血浆反应素试验(RPR）进行分析比较，为临床合理选择检测方法提供参考。
1 材料与方法1.1 标本来源2012年01月01日-2012年06月31日，本院半年的门诊、住院术前及输血前梅毒检查患者9336例，年龄在15-85岁之间，其中男5216例，女4120例。
1.2 试剂来源梅毒螺旋体胶体金法(TP-RT)梅毒螺旋体抗体诊断试剂由英科新创(厦门)科技有限公司提供，快速血浆反应素试验（RPR）试剂由上海荣盛生物技术有限公司提供，梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验（TP-PA）试剂由日本富士株式会社提供，试剂均在有效期内使用。
1.3 仪器离心机、加样器和医用梅毒旋转振荡仪等。
1.4 试验方法静脉采血3-5ml，分离血清，用梅毒螺旋体胶体金法(TP-RT)进行初筛，阳性标本同时用梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验（TP-PA）和快速血浆反应素试验（RPR）进行检测，三种方法的检测均严格按照试剂盒中说明书规范操作。
1.5 统计学方法采用ｘ２检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
梅毒螺旋体抗抗体检测试剂盒(乳胶法)上课讲义
梅毒螺旋体抗抗体检测试剂盒（乳胶法）说明书【检测原理】本试剂采用了高度特异性的抗体抗原反应及乳胶标记免疫层析分析技术。
试剂上含有事先固定在膜上检测区（T）的梅毒重组抗原和被包被在聚酯膜上的梅毒重组抗原乳胶颗粒。
检测时，将样本滴入试剂的加样处与预包被的乳胶颗粒结合的梅毒重组抗原反应，然后，混合物在毛细效应下向上层析。
如果是阳性，乳胶重组抗原在层析过程中先与样本郑的梅毒抗体结合，随后结合物会被固定在膜上的梅毒重组抗原结合，在检测区（T）会出现一条红色条带，如果是阴性，则检测区内（T）将没有红色条带。
无论抗梅毒抗体是否存在于样本中，混合物都会继续向上层析至质控区(C),出现一条红色的条带。
质控区内（c）所显示的红色条带是判定层析过程中是否正常的标准，同时也是检测试剂的内控标准。
【主要组成成份】本试剂主要原材料包括：包被用梅毒重组抗原、标记用梅毒重组抗原、链霉亲和素结合物、生物素、红色乳胶颗粒、硝酸纤维塑膜、聚酯纤维塑膜。
梅毒螺旋体抗体血清/血浆检测试剂40人份一次性塑料吸管40份缓冲液2瓶使用说明书1份注意：不同批号试剂中各组份不可互相使用，以免产生错误结果。
检测时另需准备样本收集容器和计时器。
【样本要求】静脉采血后离心获得血清/血浆样本，不同的抗凝剂如柠檬酸三钠，肝素钠，EDTA-钾，草酸钠，枸橼酸钠的血浆标本均可。
在2—8℃条件下可保存一周，长期保存需-20℃冷冻，以避免反复冻融。
发臭、溶血等异常样本请勿使用。
【检验方法】在进行检验前必须先完整阅读使用说明书，并将试剂、样本、和缓冲液恢复至室温（20℃-30℃）。
1.从原包装铝箔袋中取出试剂。
2.将试剂放在干净的平台上，用一次性塑料管吸取1滴血清/血浆（25μl）于加样孔（S）中，随后加入2滴缓冲液，同时开始计时。
3.等待红色条带的出现，检测结果应在15~20分钟判读，20分钟后判读结果无效。
【检验结果的解释】阳性（+）：两条红色条带出现。
一条带位于检测区内（T），另外一条带位于质控区内（C）。
TPPA试剂盒说明书
T P P A试剂盒说明书 The document was finally revised on 2021梅毒TPPA试书剂盒说明书1、试验原理：梅毒抗体检测是采用抗原抗体凝集反应中的抗原抗体凝集反应。
其原理如下：将梅毒 (Nichols 株)的精制菌体成分包被在人载体明胶粒子上。
这种致敏粒子和样品中的梅毒螺旋体（TP）抗体进行反应发生凝集，产生粒子凝集反应（TP）抗体，并且可用来测定抗体效价。
2、样本收集和贮存：血清或血浆1ml，标本应无溶血，无脂血，无微生物污染。
不满足上述要求的标本拒收，标本的采集应使用清洁，无菌的一次性的干燥管。
标本用量最少50ul，七天内检测的标本应在2-8℃保存，贮存在-20℃可保存4W，同时避免反复冻融血清。
3、安全防范：3．1此试剂盒内含人血成分。
尽管所有的对照及定点对照都已经过试验验证并且发现对于乙型肝炎表面抗原，丙型肝炎抗体，HIV抗体均为阴性；但仍认为它们具有潜在的感染性。
3．2移液过程禁止用口。
3．3在处理试剂和标本的地方禁止吸烟，饮食。
3．4使用试剂盒和标本时，必须戴一次性手套，穿试验服。
使用后请彻底洗手清洁。
3．5患者样本及其他潜在感染材料试验后应放入医用垃圾桶内。
3．6试剂的溶解液，血清稀释液和阳性对照血清含有叠氮钠作为防腐剂,叠氮钠可以和铅铜反应形成爆炸的金属叠氮化合物.为防止金属叠氮化合物的形成,应用大量的水冲洗以免其堆积.4、试剂：4．1 储存与稳定性：试剂应在2-10℃保存。
冻干试剂必须在复溶后的当天使用，如果保存在2-10℃最多可使用7天。
4．2 试剂盒组成：（由富士瑞士欧公司出产）（1）溶解液（液体） 8mL×1瓶用于调制致敏粒子和未致敏粒子。
（2）血清稀释液 29mL×1瓶用于样品的稀释。
（3）致敏粒子（冷冻干燥）调制浓度为1%的Treponema Pallidum(Nichols 株)致敏明胶粒子。
（4）未致敏粒子（冷冻干燥）经单宁酸处理调制浓度为1%的明胶粒子。
金标法检测梅毒螺旋体抗体的可行性分析
金标法检测梅毒螺旋体抗体的可行性分析李清森【期刊名称】《齐齐哈尔医学院学报》【年(卷),期】2009(030)004【摘要】采用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST),梅毒螺旋体抗体明胶凝集法(TPPA)检测梅毒有较多报道,用胶体金法检测并替代TPPA的报道较为少见,本文就3种方法对318份标本检测结果报道如下。
1对象和方法1.1对象我院门诊、住院疑为梅毒患者318例,抽静脉血2～3ml,离心后取血清,备用。
1.2试剂梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)诊断试剂盒:由上海荣盛生物技术有限公司生产。
梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法):由蓝十字生物药业(北京)有限公司生产。
梅毒螺旋体被动明胶颗粒试验(TPPA)试剂:由日本富士瑞必欧株式会社生产。
1.3方法对318份标本同时进行TRUST、胶体金法和TP-PA检测。
三种检测方法均严格按试剂盒说明书步骤操作。
TRUST结果判断:可见中等或较大的凝集物为阳性,可见均匀抗原颗粒而无凝集物为阴性。
胶体金法结果判定:阳性在检测线位置及对照线位置各出现一条红包反应线;阴性仅在对照线位置出现一条红色反应线;无效,测试纸无红色反应线出现,或仅在检测线位置出现一条红色反应线,表明实验失败或检测试纸失效。
TPPA结果判断:若粒子成纽扣状聚集,呈现外周边缘均匀且平滑的圆形,为阴性;若粒子形成小环状,呈现...【总页数】1页(P434)【作者】李清森【作者单位】黑龙江省大庆市林甸县医院,166300【正文语种】中文【中图分类】R75【相关文献】1.梅毒螺旋体明胶凝集试验对酶联免疫吸附试验法和金标法梅毒抗体检测的结果评价 [J], 张赞;陈娜云;孙阳;姚仁南2.梅毒螺旋体抗体金标法检测漏检原因分析与对策 [J], 李佳3.胶体金法与ELISA法检测梅毒螺旋体抗体效果比较 [J], 王艳军;张小丽4.金标法检测梅毒螺旋体特异性抗体的适用性分析 [J], 徐树良;赵源源;蒋理;赵旺胜5.金标法在梅毒螺旋体抗体检测中的应用 [J], 侯新芳;王书锋;孙定勇;吕毅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒（胶体金法）
[产品名称]
通用名称：梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒（胶体金法）
英文名称：Diagnostic Kit for Antibody to Treponema Pallidum（Colloidal Gold）
[包装规格]
一人份/袋，100袋/盒；25人份/筒，100人份/盒；单支/袋，50支/盒。
[临床意义]
快速检测人血清或血浆中的梅毒螺旋体特异性抗体。
[检验原理]
应用免疫层析式双抗原夹心法原理
[主要组成成份]
由纯化的基因重组梅毒螺旋体（Treponema Pallidum）抗原，免疫重组梅毒螺旋体抗体，固相硝酸纤维膜，胶体金交联的重组梅毒螺旋体抗原及其他试剂制成。
[储存条件及有效期]
4-30℃避光干燥处密封储存，切勿冰冻。
有效期24个月。
[样本要求]
采集静脉血1-2ml与干净容器中分离出血或血浆样本，如不及时测定可置4℃冰箱贮存，超过三天应加入0.1%硫柳汞防腐，不可使用冻干样本。
[检验方法]
1、待测样本、检测试纸或其他检测用材料等均在室温平衡后取出试纸条或测试卡。
2、条型产品将测试条有剪头的一段插入血清或血浆样本容器中，约10秒后取出平放，15
分钟内观察显示结果。
测试纸插入样本深处不可超过MAX标志线。
3、板型产品用所配滴管加2-3滴（约80μl-120μl）样本于加样孔中，15分钟在观察孔中
观察显示结果。
[检验结果的解释]
阳性：在检测线位置及对照线位置各出现一条反应线。
阴性：仅在对照线位置出现一条反应线。
无效：测试纸无反应线出现或仅在检测线位置出现一条反映现，表明试验失败或检测试纸失效。
请用新测试纸重试。
如果问题仍然存在，请停止使用本批产品，并与当地经销商联系。
[试验方法的局限性]
1、由于技术上和操作上可能出现的失误，以及样本中可能存在的干扰物质，会导致错误的
结果。
对可疑结果请重新测试。
2、本试剂只是定性的筛查梅毒螺旋体特异性抗体的存在，它不能确定被测物在样本中的具
体含量。
3、本试剂仅是一种临床辅助诊断工具，如结果呈阳性，请及时采用其他方法做进一步检查
并以医师诊断为准。
[产品性能指标]
测试临床2400多人份临床血清/血浆样本，并与临床所用确诊试剂比较，结果证明该产品的临床诊断灵敏度为98.6%，临床诊断特异性为99.7%。
[注意事项]
1、本品为一次性使用体外诊断试剂，应在有效期内使用。
2、如发现铝箔袋包装破损，请勿使用。
3、铝箔袋包装内有干燥剂，请勿食用。
4、简装产品开启后，请尽快使用。
5、本品若从冰箱取出，应先重新复温再打开包装，打开包装后请尽快使用。
6、同所有的其他快速诊断试剂一样，其检测结果必须结合临床情况以确定。
7、本试剂在20分钟后的显示结果无临床意义。
8、检测样本应视为传染品，操作时须按传染病实验室操作规范，注意生物安全操作。
包括
（但不仅限于此）
1）戴安全手套；
2）不可在处理这些物品时吸烟、进食、喝饮料、美容和处理隐形眼镜；
3）用合适的消毒剂如0.5%的次氯酸钠对溅出的样品或试剂进行消毒；
4）按当地的有关条例来消毒和处理多有标本、试剂和潜在的污染物。