免疫层析快速诊断技术简介(胶体金)
胶体金免疫层析技术原理
胶体金免疫层析技术原理介绍胶体金免疫层析技术（Colloidal Gold Immunochromatography Test）是一种常用于快速、便捷地检测生物体内特定分子的方法。
该技术基于免疫层析原理，利用胶体金颗粒作为信号指示剂，实现对目标分子的高灵敏检测。
原理胶体金免疫层析技术主要依赖于抗原-抗体的专一性识别和相互结合。
当胶体金颗粒与特异性抗体结合后，形成颗粒/抗体/抗原复合体。
通过将样品与含有抗原的试剂盒进行反应，可使目标分子与胶体金颗粒上的特异性抗体结合，形成颗粒/抗体/抗原/目标分子复合体。
操作步骤使用胶体金免疫层析技术进行检测通常需要以下步骤：1.样品处理–收集待测样品，并进行必要的前处理，例如离心、稀释等。
–如果样品是固体，需要先进行溶解或悬浊处理。
2.反应溶液的制备–根据试剂盒的说明书，将试剂溶解或稀释到适当的浓度。
3.准备试剂盒–打开试剂盒包装，并将提供的试剂按照指示加入到试剂盒中。
4.加样–使用专用的吸管或滴管，将处理好的样品滴入试剂盒的样品孔中。
5.反应–让样品与试剂盒中的抗体共反应一定时间，通常为几分钟。
6.拍照解读–将试剂盒放置在专门的解读器上，并对结果进行解读。
–解读器会对胶体金颗粒的颜色进行分析和判断，从而得出检测结果。
7.结果判读–根据解读器显示的结果，确定样品中目标分子的存在与否。
–通常，胶体金免疫层析技术结果可分为阴性、阳性或无效，具体判读标准需根据试剂盒说明书确定。
优势和应用领域胶体金免疫层析技术具有以下优势和应用领域：1.快速：检测时间短，通常在几分钟内可以得出结果。
2.简便：操作简单，无需复杂的设备和专业技术人员。
3.准确：具备高灵敏性和特异性，可以有效地识别目标分子。
4.可视化：结果直接显示在试剂盒上，无需显微镜等设备。
5.应用广泛：可以用于临床医学、环境检测、食品安全等多个领域。
局限性和发展趋势胶体金免疫层析技术虽然具有许多优点，但也存在一些局限性：1.灵敏度限制：相比于其他方法，如PCR和ELISA，胶体金免疫层析技术的灵敏度相对较低。
胶体金层析法
胶体金层析法
胶体金层析法（Colloidal Gold Lateral Flow Assay）是一种常见的免疫层析检测技术，也被称为“快速测试纸条”或“快速诊断试纸条”。
这种技术被广泛用于医学诊断、食品安全检测、环境监测等领域。
下面是胶体金层析法的基本原理和步骤：
原理：
1.抗原-抗体反应：根据抗原和抗体之间的特异性结合原理，将被检测的分
子（如蛋白质、病毒抗原等）与特异性抗体结合。
2.胶体金标记：抗体或抗原被标记上胶体金颗粒，使其呈现颜色。
3.层析效应：在试纸条上形成的吸附带将试剂中的标记复合物隔离出来，
通过毛细管作用，使其沿着试纸条上的纵向扩散。
步骤：
1.取得待检样本（如血液、尿液、食品提取物等）。
2.将待检样本加入试剂盒中，与试剂中的抗体或抗原相结合。
3.混合物通过毛细管效应在试纸条上扩散。
4.当待检样本中存在目标分子时，会与试纸条上的抗体或抗原结合，形成可
见的标记复合物。
5.标记复合物在试纸条上的特定区域显示出色带，从而进行目标物的定性或
半定量检测。
这种技术具有简单、快速、便携、成本低等优点，在诊断和快速检测中应用广泛。
例如，它被用于临床诊断、药物滥用检测、感染病原体检测（如流感、艾滋病毒等）以及食品安全检测等领域。
胶体金层析
胶体金层析
摘要：
一、胶体金层析简介
二、胶体金层析原理
三、胶体金层析的应用
四、胶体金层析的优缺点
五、发展趋势与展望
正文：
胶体金层析是一种固相免疫测定技术，广泛应用于生物医学、食品安全、环境监测等领域。
它基于抗原和抗体之间的特异性结合反应，通过胶体金标记的抗体捕捉样品中的目标抗原，从而实现对目标物质的快速、灵敏、准确检测。
胶体金层析的原理是将抗原固定在层析介质上，样品中的目标抗原与胶体金标记的抗体发生特异性结合，形成免疫复合物。
在层析液的带动下，免疫复合物沿着层析介质移动，最终与检测线上的抗原结合，根据颜色变化判断样品中目标抗原的含量。
胶体金层析具有广泛的应用，如在新型冠状病毒核酸检测、农药残留检测、重金属检测等方面。
近年来，随着科技的进步，胶体金层析技术不断发展，如纳米胶体金颗粒的制备、多重胶体金层析、高通量胶体金层析等，为多个领域提供了更多创新应用的可能性。
胶体金层析具有以下优点：高灵敏度、快速检测、操作简便、结果直观
等。
但同时也存在一定的局限性，如抗体制备难度大、检测线稳定性不足、假阳性现象等。
为克服这些缺点，研究人员在胶体金层析的基础上，发展了多种改进方法，如化学发光免疫层析、电化学免疫层析等。
展望未来，胶体金层析技术将继续向高度集成、高灵敏度、高通量、多功能化等方向发展。
同时，加强对抗体制备和检测方法的研究，提高胶体金层析的准确性和稳定性，以满足不断增长的社会需求。
新冠胶体金免疫层析法原理
新冠胶体金免疫层析法原理新冠病毒（COVID-19）是一种由严重急性呼吸综合症冠状病毒2型（SARS-CoV-2）引起的传染病。
为了迅速检测和诊断感染新冠病毒的个体，科学家们开发了各种检测方法，其中包括胶体金免疫层析法。
胶体金免疫层析法（Colloidal Gold Immunoassay）是一种基于免疫学原理的快速诊断方法，它利用纳米金颗粒的性质来检测特定抗原或抗体。
在这种方法中，纳米金颗粒被包裹在特定抗体上，并形成一种可见的复合物。
这种方法的原理是通过特定抗体的配对反应来检测患者体内是否存在新冠病毒相关的抗体。
在检测过程中，首先将待测试血样加入试剂盒中。
这些试剂盒通常包含有两种类型的试剂，一种是带有新冠病毒抗原的纳米金颗粒，另一种是检测特定抗体的试剂。
当血样中存在新冠病毒相关的抗体时，它们与试剂中的新冠病毒抗原结合，形成一种反应复合物。
这种反应复合物随后与试剂盒中的带有特定抗体的纳米金颗粒结合。
这样，纳米金颗粒就会聚集在一起，形成一个可见的颜色变化，通常是红色线条或斑点。
如果血样中不存在新冠病毒相关的抗体，则不会发生聚集，试剂盒上不会出现颜色变化。
这意味着测试结果为阴性。
胶体金免疫层析法的优点是快速、简单、可视化和便携。
这种方法不需要特殊的设备或技术，并且可以在短时间内提供结果。
因此，它被广泛应用于临床和流行病学调查中，特别是在资源有限的地区和快速筛查人群时。
然而，需要指出的是，胶体金免疫层析法并不是一个确定性的检测方法。
尽管它可以快速筛查出可能感染新冠病毒的个体，但其结果需要进一步经过实验室验证，以确认感染或否定感染。
因此，在使用此方法时应谨慎，并且应与其他检测方法相结合，以确保准确性和可靠性。
胶体金层析
胶体金层析
胶体金层析是一种固相免疫测定技术，广泛应用于生物医学、食品安全、环境监测等领域。
它基于抗原和抗体之间的特异性结合反应，通过检测样品中目标物质的含量，为科研和临床诊断提供可靠依据。
胶体金层析的原理是将抗原或抗体固定在载体上，形成一层薄膜。
样品经过薄膜时，目标物质与薄膜上的抗体或抗原结合，随着流动相的移动，形成可见的彩色带。
根据彩色带的宽度和颜色深浅，可以判断样品中目标物质的含量。
胶体金层析具有较高的灵敏度和特异性，检测范围广泛。
在实际应用中，胶体金层析可用于测定激素、药物、病毒、细菌等生物活性物质。
此外，胶体金层析操作简便、结果快速，适用于现场检测和大规模筛查。
尽管胶体金层析具有很多优点，但也存在一定的局限性。
例如，对于复杂样品的干扰物质去除困难，薄膜的稳定性受环境影响较大等。
为克服这些缺点，研究者们在胶体金层析的基础上发展了多种改进方法，如化学发光免疫层析、荧光免疫层析等。
展望未来，随着科技的进步和市场需求的增长，胶体金层析技术将不断优化和发展。
新型载体、高效检测仪器和智能化分析系统的研究和开发将进一步提高胶体金层析的灵敏度、准确性和可靠性。
胶体金免疫层析竞争法
胶体金免疫层析竞争法1. 背景介绍胶体金免疫层析竞争法（Colloidal Gold Immunochromatographic Assay）是一种常见的免疫层析快速检测方法。
该方法基于免疫学原理，利用胶体金颗粒与样品中的目标分子相互作用，通过色素沉淀形成可见的测试结果。
这种检测方法具有检测快速、操作简单、结果直观等优点，在临床诊断、食品安全监测、环境污染监测等领域得到广泛应用。
2. 原理介绍2.1 免疫学原理免疫学原理是胶体金免疫层析竞争法的基础。
免疫层析法是一种通过抗原-抗体反应实现分离和检测的技术。
在该方法中，通过将抗原（目标分子）与抗体（特异性与抗原结合的蛋白质）结合，形成免疫复合物，从而实现目标分子的检测。
2.2 胶体金颗粒胶体金颗粒是胶体金免疫层析法的关键试剂。
胶体金颗粒具有良好的生物相容性、稳定性和可见性，广泛应用于免疫学和生物医学领域。
胶体金颗粒的颜色通常为红色或紫色，直径一般在10-100纳米之间。
在光学显微镜下观察，胶体金颗粒呈现明显的表面等离子共振吸收峰，即表现为红色。
2.3 竞争反应胶体金免疫层析竞争法通过竞争反应实现目标分子的检测。
竞争反应分为两个步骤：竞争体系构建和检测结果显示。
2.3.1 竞争体系构建竞争体系构建是胶体金免疫层析竞争法的关键步骤。
在这一步骤中，将胶体金颗粒与目标分子结合。
首先，将目标分子与胶体金颗粒中的抗体结合，形成免疫复合物。
然后，将样品中的目标分子与胶体金颗粒中的抗体竞争结合。
当样品中的目标分子存在时，会与胶体金颗粒中的抗体竞争结合，导致免疫复合物的形成减少。
而当样品中的目标分子不存在时，胶体金颗粒中的抗体能与胶体金颗粒自身上的抗原结合，免疫复合物形成量较多。
2.3.2 检测结果显示检测结果显示是胶体金免疫层析竞争法的关键步骤。
在这一步骤中，利用胶体金颗粒的可见性进行结果显示。
当竞争体系构建完成后，将样品滴在测试纸上，胶体金颗粒会经由纸质的吸收作用，沿纸张上升。
[医学]免疫层析快速诊断技术简介(胶体金)
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检测原理
免疫检测的原理就是使用一种分析物— 要么是抗原要么是抗体—探测和捕获与其 对应的另外一半。
免疫层析法检测原理分类介绍 （双抗体夹心）
（以HCG检测为例）
免疫层析法检测原理分类介绍 （竞争反应）
（以吗啡检测为例）
相关仪器设备
业 边检口岸,农牧类院系和
研究所
病毒（烟草花叶病毒、犬细小病毒等）
环境 环保监测部门,研究机构 有害物质超标
食 品 食品安全检测中心,各监 农兽药残留（磺胺类、瘦肉精等）,大肠杆菌,黄曲霉素 安全 管部门
胶体金纸条生产厂商
目前，国内能点出来的厂家有40多家 北京蓝十字 杭州艾康等
上海科华 厦门新创 北京万泰
AJQ3000: 0.5-5mm 最小喷量
BJQ3000:10nl/drop
AJQ3000:1ul/cm 划线精密度 BJQ3000:±1% AJQ3000: ±2%
切条机
仪器参数: 进料宽度：≤100 mm 进料长度：不限,可连续进料切割 切割宽度：≥1 mm, 宽度连续可调 切割宽度设定位数：0.01 mm 切割精度：±0.1 mm 切割速度：230次/分钟, 速度连续可调 切条计数：单次工作和总工作分别计数 刀片: 日本进口, 耐磨高碳钢材料 抗静电装置：建议选配 电源：220VAC 重量：20KG 尺寸：430(L)×330(W)×260(H) mm
免疫层析快速诊断技 术简介(胶体金)
一、胶体金纸条总述
二、胶体金纸条种类 三、胶体金纸条结构 四、胶体金纸条优缺点 五、胶体金纸条应用领域 六、胶体金纸条检测原理 七、胶体金纸条相关仪器设备 八、胶体金纸条判读方法
免疫层析快速诊断技术简介胶体金课件
BJQ3000:10nl/drop
AJQ3000:1ul/cm 划线精密度 BJQ3000:±1% AJQ3000: ±2%
切条机
仪器参数: 进料宽度：≤100 mm 进料长度：不限,可连续进料切割 切割宽度：≥1 mm, 宽度连续可调 切割宽度设定位数：0.01 mm 切割精度：±0.1 mm 切割速度：230次/分钟, 速度连续可调 切条计数：单次工作和总工作分别计数 刀片: 日本进口, 耐磨高碳钢材料 抗静电装置：建议选配 电源：220VAC 重量：20KG 尺寸：430(L)×330(W)×260(H) mm
这种检测可以以独立的试纸条，也可以 以装在塑料盒中的形式进行。
总的来说，做此项检测至少需要50ul的 液体标本，可在5－30分钟完成。
胶体金纸条的不同种类
层析法技术优势:简单\现场\快速
试纸条组成结构
控制线（C线）
与常规诊断方法相比：
优点 快速：全部检测过程仅需 5-30分钟。
缺点 定量问题
很多厂家都开发了对应的读条仪，大部分都是采用简单的30万 象素数码摄像头做一个拍摄，然后用软件分析。
农兽药残留（磺胺类、瘦肉精等）,大肠杆菌,黄曲霉素 免五疫、层 胶析体快金速纸诊条断应技用术领简域介胶体金
快廉速价：全单部个检测测试过条程成仅本需极低5-30分钟。 2可在0单非mm份 临/检床dro测检p：测）对中标，本样既本能可成能批是检由测土，壤又、可粉单尘份、检植测物，或可者立食刻品拿制到备结的果微，量不溶必液等。待。 A传很J染多Q3病 厂0（家00乙都: 0肝开. 五发项了对,H应IV,的S读AR条S仪等，）大部分都是采用简单的30万象素数码摄像头做一个拍摄，然后用软件分析。 传这BIO染种D病 检O（测T 乙可X肝以YZ五以30项独50立,H点的IV膜,试S喷纸AR金条S机，等也）可以以装在塑料盒中的形式进行。 五B刀八IO、片D胶 : O日体T本金X进纸Y口Z条3,0应判耐50用读磨点领方高膜域法碳喷钢金材机料 传目农刀染前兽片病 涉 药 : 日（足残本乙该留进肝领（口五域磺, 项的胺耐科类,磨H研、I高V,机瘦碳S构肉A钢R很精材S多等料等，））从,大中肠科杆院菌到,黄C曲DC霉，素细数来也有三五十家。 可 5免 刀 廉 农-5单疫片价兽m份层:：药m日检 析 单 残本测 法 个 留进： 检 测 （口对 测 试 磺, 标 原 条 胺耐本 理 成 类磨既 分 本 、高能类极瘦碳成 介 低 肉钢批 绍 精材检 等料测 ），,大又肠可杆单菌份,黄检曲测霉，素可立刻拿到结果，不必等待。 六最（可标环、小竞单志保胶 喷 争 份 物 监体量反检（测金应测A部F纸）：门P、条对,研肌检标究钙测本机蛋原既构白理能、成粪批便检血测红，蛋又白可等单）份检测，可立刻拿到结果，不必等待。 然B目进廉这J后前料价种Q3打 ， 长 ： 检0开国度单测00分内：个可:1析能不测以0n软点限试以l/d件出条独,r可o，来成立p连将的本续该厂极试进灰家低纸料度有条切图，4割0象也多导可家入以，以自装动在分塑析料出盒灵中敏的度形，式本进底行情。况。 这A然快简食J种后速便品Q3检 打 ： 安0测开全不00可分部需检:1以析检其测ul/以软测它中cm独件过任心立，程何,各的将仅仪监试该需器管纸灰设部5-条度备3门0，图分也象操钟可导作。以入也以，极装自其在动简塑分单料析，盒出无中灵需的敏专形度业式，人进本员行底，。情携况带。方便，可随时随地进行。 八划免总仪、线疫的器胶 精 层 来 参体密析说数金度法，纸检做条测此判原项读理检方分测法类至介少绍需要50ul的液体标本，可在5－30分钟完成。
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用胶体金免疫层析技术（Colloidal gold immunochromatography assay，CGIA）是一种简便、快速、准确的检测方法，在食品安全现场快速检测中得到广泛应用。
该技术可用于检测食品中的污染物质，如农药残留、细菌、病毒、毒素等，具有检测时间短、操作简便、准确性高等优点。
胶体金免疫层析技术基于抗体与抗原之间的特异性识别原理，是一种间接固相免疫层析技术。
同时，该技术利用了胶体金颗粒的物理特性，即在特定pH值下，胶体金颗粒呈现出红色或紫色的可见光谱。
当产生特异性抗体与抗原之间的结合后，存在于测试区的胶体金颗粒会沉淀下来，使红色或紫色的可见光谱消失或变浅，从而可以获得结果。
目前，CGIA技术在食品行业中已经得到广泛应用。
例如，在动物源性食品检测中，CGIA技术可用于检测牛奶中的咖啡因和抗生素残留、肉和海鲜中的细菌、病毒、病原菌和其它污染物质等。
在植物源性食品检测中，CGIA技术可用于检测蔬菜和水果中的农药残留、食用油中的氯丹残留、谷物中的镉污染等。
此外，CGIA技术还广泛应用于饮料、水产品、奶制品、肉制品、调味品等食品中的快速检测。
CGIA技术的优点在于其操作简单、迅速、用量少、化学废物少、设备要求少、误差小、灵敏度、特异性高，可以在平板和便携式检测设备上使用。
这使得CGIA技术成为了实现食品安全快速检测的重要方法之一。
但是，也需要注意，CGIA技术的敏感度较高，但定量度不如高通量手段。
因此，在现场快速检测中，CGIA技术可以与其它技术相结合，实现对食品安全的全面检测。
通过多种技术手段的协同作用，我们可以更全面地了解食品中存在的污染物质情况，从而更好地保障公众的食品安全问题。
[医学]胶体金免疫层析技术
![[医学]胶体金免疫层析技术](https://img.taocdn.com/s3/m/8c232dc719e8b8f67c1cb9d7.png)
◊ 在其后的20年中，免疫层析产品得到了快速 的发展：
项目 早孕检测 毒品检测 疾病检测
所占百分比 90%以上 80-90% 30-40%
◊ 快速，定性 10分钟以内就可得到检测结果。
◊ 无需设备 一根检测条就能完成检测
◊ 准确、灵敏 灵敏度可以达到10-9数量级
◊ 应用范围不断扩大
疾病诊断，食品安全，药物检测，DNA检测
1978年geoghega发现了胶体金标记物在光镜水平的应用
+ 胶体金结构：
胶体金颗粒由一个基础金核 （原子金Au）及包围在外的双 离子层构成，紧连在金核表面 的是内层负离子（AuC12－）， 外层离子层H+则分散在胶体间 溶液中，以维持胶体金游离于 溶胶间的悬液状态。
∆染色—不同粒径，不同颜色
出现了全新的免疫学理论 从分子水平对免疫系统进行研究
抗原抗体——钥匙和锁的 关系
抗体能够特异性的结合 抗原的活性位点。
基因工程指按人们意愿设计，通过改造基因 或基因组而改变生物的遗传特性，从而获 得新的品种货或产品。
意义：可以稳定的获得人类所要的蛋白。
◊ 20世纪90年代初，第一个免疫层析产品诞 生——用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测 定。
粒径 2～5nm 10～20nm 30～80nm
颜色 橙色的 酒红色 紫红色
∆ 胶体的特性—充分的溶解性，良好的流动性
∆吸附能力—在不改变蛋白性质的情况下，稳 定迅速的吸附蛋白
+ 胶体金在电镜水平的应用 + 胶体金在光镜水平的应用 + 胶体金在流式细胞仪中的应用 + 免疫印迹技术
什么叫硝酸纤维素膜？ 以硝酸纤维素为基质，经过匀浆，滚筒铺膜，
是机体识别“自身”与“非己”抗原，对 自身抗原形成天然免疫耐受，对“非己” 抗原产生排斥作用的一种生理功能。正常 情况下，这种生理功能对机体有益，可产 生抗感染、抗肿瘤等维持机体生理平衡和 稳定的免疫保护作用
实验六 胶体金免疫层析技术
原理：利用胶体金 颗粒与抗体或抗原 结合形成免疫复合 物通过层析技术进 行分离和检测。
胶体金颗粒具有高 灵敏度、高稳定性 和易于观察的特点 。
应用领域：广泛应 用于医学、生物技 术、食品检测等领 域。
历史和发展
1971年胶体金免疫层析技术首 次被提出
1980年代胶体金免疫层析技术 开始应用于临床诊断
05
胶体金免疫层析技术的应用案例
在医学诊断中的应用
快速检测：用于 快速检测传染病、 肿瘤标志物等
定量检测：用于 定量检测激素、 药物浓度等
早期诊断：用于 早期诊断某些疾 病如阿尔茨海默 病等
疾病监测：用于 监测疾病进展和 治疗效果如糖尿 病等
在食品安全检测中的应用
检测食品中的农药残留
检测食品中的重金属含量
准备实验材 料：胶体金 免疫层析试 纸条、样本、
缓冲液等
样本处理： 将样本进行 稀释、离心
等处理
加样：将样 本加入到试 纸条的加样
孔中
孵育：将试 纸条放入孵 育器中设定 合适的温度
和时间
观察结果： 在孵育结束 后观察试纸 条上的颜色 变化判断结
果
数据分析： 根据实验结 果进行数据 分析和报告
撰写
实验结果分析
稳定性好：胶体金颗粒不易氧化 稳定性好
技术局限性
灵敏度较低：胶体金免疫层析技 术灵敏度较低难以检测到低浓度 的抗原或抗体。
检测时间较长：胶体金免疫层析 技术检测时间较长需要等待一定 时间才能得到结果。
添加标题
添加标题
பைடு நூலகம்
添加标题
添加标题
特异性较差：胶体金免疫层析技 术特异性较差容易发生交叉反应 导致假阳性结果。
1990年代胶体金免疫层析技 术逐渐成熟广泛应用于传染病、 肿瘤等疾病的检测
胶体金免疫层析技术PPT课件
用于检测生物样本中药物残留，如抗生素、化疗药物等，评估药物 治疗效果和预防药物滥用。
生物分子检测
用于检测生物样本中特定的生物分子，如抗原、抗体等，辅助诊断疾 病和研究生物过程。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
该技术主要适用于小分子抗 原和抗体的检测，对于大分 子物质如蛋白质、细胞等的 检测效果不佳。
成本较高
虽然胶体金免疫层析技术试 剂成本相对较低，但仪器设 备和生产工艺的成本较高， 导致整体成本较高。
对环境因素敏感
胶体金免疫层析技术的检测 结果易受环境因素影响，如 温度、湿度等，需要在一定 的条件下进行操作。
抗体或抗原的纯化
通过亲和层析、凝胶过滤等方法去除杂质，获得纯度较高的抗体或 抗原。
抗体或抗原的标记
将抗体或抗原与胶体金颗粒结合，形成抗体-胶体金或抗原-胶体金 复合物，以便后续检测时能够与目标物质发生反应。
制备胶体金与抗体或抗原的结合物
1 2
胶体金与抗体或抗原的结合
通过物理吸附、化学键合等方法将抗体或抗原固 定在胶体金颗粒表面，形成结合物。
胶体金免疫层析技术 PPT课件
目 录
• 胶体金免疫层析技术概述 • 胶体金免疫层析技术的基本组成 • 胶体金免疫层析技术的制作过程 • 胶体金免疫层析技术的优缺点 • 胶体金免疫层析技术的应用实例
01
胶体金免疫层析技术概 述
定义与特点
定义
胶体金免疫层析技术是一种基于 胶体金标记和免疫层析原理的快 速检测技术。
结合物的纯化
通过离心、超滤等方法去除未结合的抗体或抗原， 获得纯度较高的结合物。
3
结合物的稳定性
通过调节溶液的pH值、加入稳定剂等手段，提 高结合物的稳定性，以确保其在存储和使用过程 中性能稳定。
胶体金快速免疫诊断技术
2 分光光度计扫描吸收峰时光波长来估计金颗粒的大小
3 电镜可见精确测定金颗粒的大小
免疫胶体金的制备
胶体金在弱碱环境下带负电荷;可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固 的结合;由于这种结合是静电结合;所以不影响蛋白质的生物特性
颜色与颗粒的关系 最佳标记颗粒大小40nm
1％柠檬酸三钠ml 0 30 0 45 0 70 1 00 1 50 2 00 金溶胶颜色 蓝灰 紫灰 紫红 红 橙红 橙 吸收峰nm 220 240 535 525 522 518
径粒nm 147 97 5 71 5 40 24 5 15
胶体金的鉴定
切条\包装
切条
演示:BIODOT CM4000切条机
包装
质量控制
1 特异性 用30份阴性参考血清进行检测;结果不得出现假 阳性；
2 敏感性 用30份阳性包括强阳性 中阳性 弱阳性参考血清 进行检测;假阴性率不得超过3份;并用已知抗体效价血清系 列稀释测试其最小检出量
3 精密度 观察批间 批内差异;CV%应不高于10% 4 稳定性检测 37℃放置3天;鉴定指标应达到以上标准
廉价：单个测试条成本极低
可单份检测：对标本既能成批检测;又可单份检测;可立刻拿 到结果;不必等待
稳定性好：金标试剂稳定;可长期保存
检测标本种类多：既可用于查血;又可用于检尿或唾液;因而 适合各种检查
技术应用
类别 人类医学
农牧业 环境 食品安全
应用领域
检测的物质
各级医院;血站;CDC;防疫 站;诊断中心；家庭自检； 商检系统；边检口岸；公 安系统
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用胶体金免疫层析技术是一种利用抗体对特定抗原的专一性识别来快速检测待检样品中是否含有目标成分的技术。
它的原理是利用胶体金颗粒的特性，在试剂纸上形成一条稀释液前进的前沿，当待检样品中含有目标成分时，会与胶体金颗粒上的抗体结合发生凝聚，导致胶体金颗粒的前进受阻，从而形成一条明显的测试线。
通过观察测试线的形成情况，就能够判断待检样品中是否含有目标成分。
这种技术具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性好等特点，因此在食品安全现场快速检测中得到了广泛应用。
胶体金免疫层析技术在食品中毒事件的现场快速检测中发挥了重要作用。
食品中毒事件往往发生突然，而且影响范围广泛，如果不能及时准确地检测出问题食品，后果将不堪设想。
胶体金免疫层析技术可以在现场迅速检测出食品中是否含有有毒物质，为食品安全问题的迅速处理提供了技术支持。
其敏感度高、操作简单的特点，使得它可以在最短的时间内完成检测，为食品安全事件的应急处理提供了重要的技术手段。
胶体金免疫层析技术在食品添加剂和农药残留快速检测中发挥了重要作用。
食品添加剂和农药残留一直是食品安全领域的一个难题，传统的检测方法往往需要耗时耗力，不能满足快速检测的需求。
而胶体金免疫层析技术可以在现场快速检测食品中是否含有添加剂和农药残留，为食品安全监管提供了一种快速、有效的手段。
通过这种技术，可以在生产现场、市场和餐饮场所等地方对食品进行快速检测，保障了广大消费者的食品安全。
胶体金免疫层析技术在食品质量追溯中也具有重要意义。
食品质量追溯是保障食品安全的一项重要工作，通过对食品的原料、生产过程、流通环节等进行追溯，可以找出食品质量问题的来源，防范和控制食品安全风险。
而胶体金免疫层析技术可以在食品的生产环节和流通环节进行快速检测，及时发现和排除问题食品，保障食品质量和食品安全。
这对于食品质量追溯和食品安全管理具有重大的意义。
实验六胶体金免疫层析技术
简 介
胶体金（Colloidal gold）是氯金酸（HAuCl4）的水溶胶，利用HAuCl4在还原剂（柠檬酸钠）的作用下，聚合成特定大小的金颗粒，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，故称胶体金。
胶体金的质量判定标准
简 介
质量好的胶体金：溶液呈红色，胶体金颗粒为球形，大小均一，无棱角。 质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，形状各异。
胶体金试纸条诊断技术
实验目的
掌握胶体金试纸条诊断技术的原理、使用方法及结果的判定
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析技术研制而成，该技术是90年代初在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）等检测。
过剩的免疫金复合物继续前行，至参照区与固相抗小鼠IgG结合（免疫金复合物中的单克隆抗体为小鼠IgG），而显出红色质控线条（R）。 测 定
阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。 测 定
简捷快速：操作简单，一般只要5-10min 就会出结果，而其它方法如ELISA需要1-2h，PCR 需要时间更长。
结果易于判定：阴、阳性呈色很明显，肉眼很容易判断。
特异性好：因为该技术大多用单克隆抗体标记，这决定了它具有很好的特异性。
胶体金快速诊断技术的特点
病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、新城疫、犬细小病毒、猪瘟等。 寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫病、恙虫病。 细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
胶体金快速诊断技术的应用
01
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电吸引而形成牢固结合。
02
胶体金标记技术（Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用随着社会快速发展，人们对食品安全的关注度也越来越高。
食品安全问题直接关系到每个人的健康，而快速有效的食品安全检测技术就显得尤为重要。
胶体金免疫层析技术是一种先进的生物分析技术，具有快速、灵敏度高、操作简便等优点，因此在食品安全现场快速检测中得到了广泛的应用。
一、胶体金免疫层析技术原理及优势胶体金免疫层析技术是一种基于免疫反应的快速检测技术，其原理是将标记了胶体金颗粒的抗体与待测样品中的靶分子发生特异性识别结合，形成抗原-抗体-胶体金复合物。
随后将复合物加载到免疫层析膜上，待样品在膜上流动时，复合物将随之流动，并在免疫层析膜上形成一个特定的条带，最终通过观察胶体金颗粒在免疫层析膜上的聚集情况来判断待测物质的存在与浓度。
（1）快速性：该技术检测时间短，通常在30分钟以内即可得到结果，适用于快速现场检测。
（2）灵敏度高：胶体金颗粒作为标记物质，具有良好的散射光学性能，检测灵敏度高，可达到ppb或ppm级别。
（3）特异性强：抗体的高特异性保证了该技术对靶物质的特异性识别能力，可准确判断待测样品中目标分子的存在与浓度。
（4）操作简便：仪器设备简单，不需要复杂的实验步骤和条件，操作简便，适合于现场快速检测。
1. 农药残留检测：2. 食品中有害物质检测：食品中有害物质如重金属、致癌物质等对人体健康造成严重威胁，通过胶体金免疫层析技术，可以对食品中的这些有害物质进行快速准确的检测，及时发现并处理食品安全隐患。
3. 食品真伪鉴别：胶体金免疫层析技术还可以用于食品的真伪鉴别，通过对食品成分中的特定分子进行快速检测，判断食品原料的真实性，避免假冒伪劣产品对消费者健康造成危害。
4. 生物毒素检测：食品中的生物毒素是一种常见的食品安全隐患，而胶体金免疫层析技术可以用于生物毒素的快速检测，保障食品安全，防止食品中毒事件的发生。
随着人们对食品安全意识的提高和食品安全检测技术的不断进步，胶体金免疫层析技术将在食品安全现场快速检测中发挥越来越重要的作用。
胶体金法免疫层析法
胶体金法免疫层析法胶体金法免疫层析法是一种现代生物医学研究中常用的实验技术，它具有简单、快速、灵敏和特异性高的特点。
下面将详细介绍这一技术的原理、实验步骤以及在医学研究中的应用。
胶体金法免疫层析法原理简单易懂，利用胶体金颗粒的特殊性质与生物分子相互作用，实现对特定生物分子的检测。
胶体金颗粒表面覆有一层稳定的染色剂，当与目标生物分子结合后，会发生凝集现象，形成可见的颜色变化。
这种颜色变化与样品中目标分子的含量成正比，从而可以定量检测目标物质的浓度。
这种特性使得胶体金法免疫层析法成为医学研究中常用的无标记检测技术。
在实验中，胶体金法免疫层析法通常包含以下步骤：制备胶体金溶液、制备抗体与胶体金的复合物、准备免疫层析纸条和进行样品检测。
首先，制备胶体金溶液是实验的关键步骤之一。
胶体金溶液是由金纳米颗粒悬浮于溶液中形成的，具有特定的粒径和稳定性。
制备胶体金溶液需要精确控制金纳米颗粒的粒径和浓度，遵循特定的实验条件。
接下来，制备抗体与胶体金的复合物。
这一步骤是为了将目标分子的抗体与胶体金颗粒结合，形成一种稳定的复合物。
复合物的制备需要考虑抗体的浓度、胶体金的浓度以及反应时间等参数，以保证复合物的稳定性和活性。
准备免疫层析纸条是实验中的重要步骤之一。
免疫层析纸条是一种特殊的纸条，具有高吸附性和分离性。
在纸条上，可以固定目标分子的抗体，并与胶体金复合物相互作用。
纸条的制备需要准备特定尺寸的纸条，将抗体吸附于纸条上，并进行固定，确保纸条的功能和稳定性。
最后，进行样品检测。
将待测样品滴加在准备好的免疫层析纸条上，允许样品与固定的抗体发生反应。
当样品中存在目标分子时，胶体金和目标分子的抗体会结合并形成可见的颜色变化。
利用专业的检测设备或者目视检测，可以定量检测样品中目标分子的含量。
胶体金法免疫层析法在医学研究中具有广泛的应用。
例如，它可以用于检测临床样品中的蛋白质标记物，如肿瘤标志物，用于早期癌症的诊断和监测。
此外，该技术还可以用于检测传染病病原体，如流感病毒和结核杆菌，为疾病的诊断和流行病学调查提供重要的信息。
胶体金免疫层析技术简介胶体金免疫层析技术原理
保护层
玻璃纤维
纸
GICT
猪痢疾
胶体金试剂条实验操作
•样品制备：
•组织样品处理：按常规方法取病变组织器官制成1：2（W/V ）组织悬液，反复冻融3次后，离心，上清液即为待
测样品。
•肛拭子处理：按常规方法处理即可。
•实验步骤：
•将密封袋打开，取出试纸条。
•取40ul 待检样本加在试纸条/板的•加样区，在加样区滴加1滴稀释液。
•
30分钟内观察并记录试验结果。
•结果判断：
•阳性结果：观察窗T 、C 线均出现一条紫红色条带。
•阴性结果：观察窗仅C 线出现一条紫红色条带。
•无效结果：观察窗未出现紫红色条带。
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(优)优选免疫层析快速诊断技术简介胶体金pptppt文档
检测的物质
人类 医学
各级医院,血站,CDC,防 疫站,诊断中心；家庭自 检；商检系统；边检口 岸；公安系统.
传染病（乙肝五项,HIV, SARS等） 标志物（AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋白等） 女性妊娠（hCG(早孕),LH,FSH)
毒品（吗啡,K粉,摇头丸,冰毒）
农 牧 畜牧兽医站, 商检系统, 传染病（禽流感,兽瘟疫等）
胶体金结果判读方法：
1.色卡法
将反应好的试纸条Tห้องสมุดไป่ตู้颜色与制作的色卡比较，看颜色属于那一 个档次，则在数据记录时候填写该档次标识。最后做灵敏度比较。 2.图形扫描法
将反应好的试纸条放在扫描仪器内，选择灰度扫描，获得灰度线 条图象。然后打开分析软件，将该灰度图象导入，自动分析出灵敏 度，本底情况。 3.读条仪法
一、胶体金纸条总述
二、胶体金纸条种类 三、胶体金纸条结构 四、胶体金纸条优缺点 五、胶体金纸条应用领域 六、胶体金纸条检测原理 七、胶体金纸条相关仪器设备 八、胶体金纸条判读方法
什么是快速检测？
快速检测是一种廉价的、一次性的、基 于膜的检测方法，它能提供分析物存在于 液体样品的视觉证据。
这种检测可以以独立的试纸条，也可以 以装在塑料盒中的形式进行。
然后打开分析软件，将该灰度图象导入，自动分析出灵敏度，本底情况。 可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立刻拿到结果，不必等待。
免疫层析法检测原理分类介绍 （竞争反应）
（以吗啡检测为例）
相关仪器设备
BIODOT XYZ3050 点膜喷金机
仪器参数 仪器尺寸为： 430mmx410mmX360mm 平台大小: 450mmX70mm 平台移动速度: 0-330mm/sec X、Y、Z轴移动误差: <50um 定位精度: ±10um in 1 axis;±25um in 2 axis 喷点方式 BJQ3000: 非接触喷点 AJQ3000: 非接触喷点 划线宽度 （喷点）
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胶体金结果判读方法：
1.色卡法
将反应好的试纸条T线颜色与制作的色卡比较，看颜色属于那一 个档次，则在数据记录时候填写该档次标识。最后做灵敏度比较。
2.图形扫描法
将反应好的试纸条放在扫描仪器内，选择灰度扫描，获得灰度线 条图象。然后打开分析软件，将该灰度图象导入，自动分析出灵敏 度，本底情况。
3.读条仪法 很多厂家都开发了对应的读条仪，大部分都是采用简单的30万 象素数码摄像头做一个拍摄，然后用软件分析。
谢 谢！
控制线（C线）
与常规诊断方法相比：
优点 快速：全部检测过程仅需 5-30分钟。 简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，无需专 业人员，携带方便，可随时随地进行。 廉价：单个测试条成本极低 可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立 刻拿到结果，不必等待。 稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。 检测标本种类多：在临床检测中，样品可能有尿、血液、 血清、唾液或其他体液。在非临床检测中，样本可能是由 土壤、粉尘、植物或者食品制备的微量溶液。 缺点 定量问题 灵敏度问题
切条机
仪器参数: 进料宽度：≤100 mm 进料长度：不限,可连续进料切割 切割宽度：≥1 mm, 宽度连续可调 切割宽度设定位数：0.01 mm 切割精度：±0.1 mm 切割速度：230次/分钟, 速度连续可调 切条计数：单次工作和总工作分别计数 刀片: 日本进口, 耐磨高碳钢材料 抗静电装置：建议选配 电源：220VAC 重量：20KG 尺寸：430(L)×330(W)×260(H) mm
环境
环保监测部门,研究机构
有害物质超标
食 品 食品安全检测中心,各监 农兽药残留（磺胺类、瘦肉精等）,大肠杆菌,黄曲霉素 安全 管部门
胶体金纸条生产厂商
目前，国内能点出来的厂家有40多家 北京蓝十字 杭州艾康等
上海科华 厦门新创 北京万泰 目前涉足该领域的科研机构很多，从中科院 到CDC，细数来也有三五十家。
Lateral-Flow Diagnostic Technology
免疫层析快速诊断技术简介
胶体金法
一、胶体金纸条总述 二、胶体金纸条种类 三、胶体金纸条结构 四、胶体金纸条优缺点 五、胶体金纸条应用领域 六、胶体金纸条检测原理 七、胶体金纸条相关仪器设备 八、胶体金纸条判读方法
什么是快速检测？
检测原理
免疫检测的原理就是使用一种分析物— 要么是抗原要么是抗体—探测和捕获与其 对应的另外一半。
免疫层析法检测原理分类介绍 （双抗体夹心）
（以HCG检测为例）
免疫层析法检测原理分类介绍 （竞争反应）
（以吗啡检测为例）
相关仪器设备
BIODOT XYZ3050 点膜喷金机
仪器参数 仪器尺寸为： 430mmx410mmX360mm 平台大小: 450mmX70mm 平台移动速度: 0-330mm/sec X、Y、Z轴移动误差: <50um 定位精度: ±10um in 1 axis;±25um in 2 axis 喷点方式 BJQ3000: 非接触喷点 AJQ3000: 非接触喷点 划线宽度 BJQ3000:0.50mm/line （喷点0.20mm/drop） AJQ3000: 0.5-5mm 最小喷量 BJQ3000:10nl/drop AJQ3000:1ul/cm 划线精密度 BJQ3000:±1% AJQ3000: ±2%
快速检测是一种廉价的、一次性的、基 于膜的检测方法，它能提供分析物存在于 液体样品的视觉证据。 这种检测可以以独立的试纸条，也可以 以装在塑料盒中的形式进行。 总的来说，做此项检测至少需要50ul的 液体标本，可在5－30分钟完成。
胶体金纸条的不同种类
Байду номын сангаас
层析法技术优势:简单\现场\快速
试纸条组成结构
应用领域
类别 应用领域 检测的物质
人 类 各级医院,血站,CDC,防 传染病（乙肝五项,HIV, SARS等） 医学 疫站,诊断中心；家庭自 检；商检系统；边检口 标志物（AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋白等） 岸；公安系统. 女性妊娠（hCG(早孕),LH,FSH)
毒品（吗啡,K粉,摇头丸,冰毒） 农 牧 畜牧兽医站, 商检系统, 传染病（禽流感,兽瘟疫等） 业 边检口岸,农牧类院系和 病毒（烟草花叶病毒、犬细小病毒等） 研究所