实验精讲系列：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
高中生物知识点：实验：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
⾼中⽣物知识点：实验：检测⽣物组织中的糖类、脂肪和蛋⽩质 ⽣物组织中糖类、脂肪和蛋⽩质的检测⽅法： 1、检测原理: ⽣物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产⽣特定的颜⾊反应。
(1)糖类 (2)脂肪 (3)蛋⽩质 2、检测步骤 (1)还原糖的检测与观察: (2)脂肪的检测: (3)蛋⽩质的检测: (4)淀粉的检测与观察: 斐林试剂与双缩脲试剂的⽐较： 斐林试剂双缩脲试剂 鉴定成分还原糖蛋⽩质 鉴定原理还原糖中的醛基（-CHO）在加热条件下能将Cu(OH)2中的Cu2+还原成Cu+，从⽽⽣成砖红⾊的Cu.0沉淀双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)在碱性溶液中能与Cuz+结合⽣成紫⾊络合物，蛋⽩质分⼦中含有与双缩脲结构相似的肽键 试剂浓度甲液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液；⼄液：质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液A液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液；B液：质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液 使⽤⽅法甲液、⼄液混合均匀后，再加⼊样液先加A液造成碱性环境，再滴加B液 使⽤条件加热不加热 实验现象浅蓝⾊⼀棕⾊—砖红⾊紫⾊ 知识点拨： (1)在还原糖的鉴定实验中，最理想的实验材料是含还原糖量较⾼的⽣物组织（或器官），⽽且组织颜⾊较浅，或近于⽩⾊的苹果、梨等材料。
另外，由于⽢蔗、甜菜中含有的蔗糖是⾮还原糖，不宜选⽤。
(2)在脂肪的鉴定实验中，实验材料最好选择富含脂肪的种⼦。
(3)在蛋⽩质的鉴定实验中，最好选⽤富含蛋⽩质的⽣物组织，植物材料常⽤的是⼤⾖，动物材料常⽤的是稀释的鸡蛋清。
注意事项： 还原糖的检测和观察： ①还原糖有葡萄糖，果糖，麦芽糖； ②甲⼄液必须等量混合均匀后再加⼊样液中，现配现⽤； ③必须⽤⽔浴加热 脂肪的鉴定： ①切⽚要薄，如厚薄不均就会导致观察时有的地⽅清晰，有的地⽅模糊。
②酒精的作⽤是：洗去浮⾊ ③需使⽤显微镜观察 ④使⽤不同的染⾊剂染⾊时间不同 蛋⽩质的鉴定： ①先加A液1ml，再加B液4滴 ②鉴定前，留出⼀部分组织样液，以便对⽐。
生物必修一 实验：检测生物组织中的糖类_脂肪和蛋白质
不加热处理 紫色反应
1-2滴体积分数为 50%的酒精溶液
观察
低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒， 然后用高倍镜观察
圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。 结果及结论：
脂肪的检测结果
1、选材：浸泡1-2天的黄豆种子（或用豆浆）
或用鸡蛋蛋白
2、制样： 黄豆浸泡切片→研磨→过滤→滤液
A液：0.1g/mL NaOH 3、试剂： B液：0.01g/mL CuSO4
实验现象明显（富含检测之物，避免干扰）；
选材的原则 便于处理，易获得； 经济节约；
1、选材：含糖较高、颜色为白色或近于白色的
植物组织，苹果、梨最好。
2、制样： 苹果切块→研磨→过滤→滤液
甲液：0.1g/mL NaOH 3、试剂： 乙液：0.05g/mL CuSO4
4、检测：组织样液（2ml）→斐林试剂
方法二：制作子叶临时切片，显微 观察子叶细胞的着色情况。
特别提醒： 实验用的花生种子需提前浸泡3-4h,浸 泡时间太短，不易切片;浸泡时间太长，则 组织太软，切下的薄片不易成形。
取材： 花生种子(浸泡3～4h），将子叶削成薄片
制片
①取最理想的薄片 ②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液（2～3min） ③去浮色（如何去浮色） ④ 制成临时装片
☆思考讨论
你能举例说出哪些植物器官的细胞中富含糖 类,脂质和蛋白质吗? 植物叶肉细胞.果实细胞和种子细胞中 通常含有较多的糖类、脂质和蛋白质
禾谷类果实、种子：淀粉(多糖)
蔗糖(二糖) 甘蔗的茎、甜菜的根： 脂质 花生、芝麻种子：
大豆种子：蛋白质
第二章
组成细胞的分子
检测生物组织中的糖类、 脂肪和蛋白质
4、检测： 组织样液（2ml）→ 双缩脲试剂A （1ml）
检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质
检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质引言生物组织是多种不同类型细胞的集合体，其中包含着大量的糖类脂肪和蛋白质。
这些生物分子在细胞的正常功能以及许多疾病的发生和发展中起着重要的作用。
因此，准确、可靠地检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质是科学研究和医学诊断的关键。
检测方法糖类的检测糖类是生物组织中常见的一类生物分子，包括单糖、双糖、多糖等多种形式。
常用的糖类检测方法包括：1.纸层析法：将样品和标准溶液分别点于纸层析板上，通过上升色谱将样品中的糖类分离，并通过特定显色剂反应显示糖类的位置和含量。
2.高效液相色谱（HPLC）：通过色谱柱和流动相的相互作用，将混合物中的糖类分离，并通过检测器测量各组分的峰面积或浓度。
3.质谱法：利用质谱仪对样品中的糖类进行离子化和质量分析，根据质谱图谱确定糖类的结构和含量。
脂肪的检测脂肪是生物组织中重要的能量储存物质，包括甘油三酯、磷脂等多种类型。
常用的脂肪检测方法有：1.色谱法：通过将样品中的脂肪分离，并通过色谱柱和检测器测量各组分的峰面积或浓度来定量。
2.光谱法：利用紫外-可见吸收光谱或红外光谱测量样品中脂肪的吸收或振动特征，从而确定脂肪的含量。
3.核磁共振（NMR）：利用核磁共振技术对样品中的脂肪进行分析和定量。
蛋白质的检测蛋白质是生物组织中的重要成分，不仅参与细胞的结构和功能，还承担信号传导、酶催化等多种生物过程。
常用的蛋白质检测方法包括：1.分光光度法：通过测量蛋白质溶液中的吸收或荧光强度来确定蛋白质的含量。
2.凝胶电泳法：将蛋白质溶液分离成不同带电性质的组分，通过电泳进行分离，并通过染色或荧光标记检测蛋白质的位置和含量。
3.质谱法：利用质谱仪对蛋白质进行离子化和质量分析，根据质谱图谱确定蛋白质的结构和含量。
应用检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质在不同领域具有广泛的应用，例如：•医学诊断：通过检测生物组织中特定糖类脂肪和蛋白质的异常水平，可以帮助医生确定特定疾病的诊断和治疗方案。
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验
实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。
还原糖（葡萄糖、果糖、麦芽糖而蔗糖、纤维素、淀粉不是）+ 斐林试剂～砖红色沉淀脂肪+ 苏丹III ～橘黄色脂肪+ 苏丹IVⅢ～红色，橘红色蛋白质+ 双缩脲试剂～紫色反应（在碱性溶液中，Cu2＋与蛋白质发生反应，鉴定肽键）三、实验过程1、还原糖的检测（1）材料的选取：苹果或梨匀浆（无色，含糖量高，颜色为白色或近于白色。
植物叶片有液泡，内含色素，干扰试验）（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用，水浴。
（3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→50~65°温水大烧杯中温水浴加热2min左右→观察颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色）2、脂肪的检测（1）材料的选取：选择富含脂肪的种子（实验前浸泡3-4h）如花生子叶。
（2）步骤：制作切片（切片越薄越好，透光便于观察）将最薄的花生切片放在载玻片中央（花生切片细胞一部分清晰一部分模糊说明切片薄厚不均）↓染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）↓制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片）↓镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒。
先用低倍镜，找到子叶最薄处，并移到视野中央，再换高倍镜，调整细焦螺旋观察，可见已着色的脂肪颗粒）3、蛋白质的检测（1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）（2）步骤：选材（豆浆或鸡蛋蛋白,若用鸡蛋实验则用水稀释，防止粘在试管内壁，利于清洗）→取组织样液加入试管中试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A 液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色)4.淀粉的检测和观察（1）材料选取：淀粉遇碘变蓝。
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
考点三 （实验）检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（5年6考）检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.检测原理(1)糖类的检测(2)脂肪的检测：脂肪＋⎩⎨⎧苏丹Ⅲ染液―→橘黄色苏丹Ⅳ染液―→红色 (3)蛋白质的检测：蛋白质＋双缩脲试剂―→紫色2.实验步骤3.实验成功关键点(1)三个实验中都不宜选取有颜色的材料，否则会干扰实验结果的颜色变化。
(2)由于苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精，故可用体积分数为50%的酒精洗去浮色。
(3)蛋白质鉴定中，若用大豆作材料，必须提前浸泡；若用蛋清作材料，必须稀释，防止其黏在试管上不易刷洗。
(4)物质鉴定实验一般可预留部分样液作对照实验，若需进一步设立对照实验，对照组应加入成分已知的物质，如验证唾液淀粉酶是蛋白质，对照组可加入稀释的鸡蛋清溶液。
1.下图是检测还原糖的实验(1)如下图示的处理，2 min后试管内将呈现何种颜色？试加以分析说明。
(2)向某试管内无色液体中加入斐林试剂，经加热若出现砖红色沉淀，则表明试管内含有葡萄糖，对吗？提示(1)应为蓝色(斐林试剂的颜色，因未经水浴加热，只有将试管置于50～65 ℃温水中，经水浴加热后，方可呈现“砖红色沉淀”)。
(2)不对。
只能证明含有“还原糖”，不能具体证明是哪种还原糖。
2.下图为某种物质鉴定方案，请推测：(1)图示的实验方案用于鉴定何类物质，其中“某试剂”是什么？A液、B液分别指什么？(2)若溶液中有被检测物质则右侧试管“摇匀后”变成何种颜色？提示(1)蛋白质及多肽化合物；双缩脲试剂；A为0.1 g/mL NaOH溶液；B为0.01 g/mL CuSO4溶液。
(2)紫色。
糖类、脂肪与蛋白质的检测1.(2016·海南卷，15)下列实验中，加入试剂后不能产生特定颜色的是()A.取成熟香蕉匀浆，用斐林试剂检测还原糖B.黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，用碘液检测淀粉C.玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核D.花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒解析成熟香蕉中含有较多葡萄糖，用斐林试剂检测会出现砖红色沉淀；黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，淀粉被消耗，加入碘液不会产生蓝色；玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核呈绿色；花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒呈橘黄色。
第7讲实验：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
提取到的DNA + 二苯胺试剂
沸水浴加热
蓝色
1.还原糖 + 斐林试剂 50~65℃水浴加热 砖红色沉淀 ①还原糖与非还原糖
还原糖
所有的单糖 麦芽糖、乳糖
非还原糖
所有的多糖 蔗糖
常见的还原糖：___葡___萄__糖___、__果__糖___、__麦___芽__糖_____
1.还原糖 + 斐林试剂 50~65℃水浴加热 砖红色沉淀
思考：斐林试剂为何要现配现用? 因为斐林试剂很不稳定,配置好的Cu(OH)2悬浊液 放置一段时间后，会形成沉淀，影响实验效果。 其次是Cu(OH)2放置久了会发生分解反应，形成部 分黑色的CuO，也会影响实验结果。
水浴 Cu(OH)2被 加热 还原糖原Cu2O(砖红色沉淀)
所以应将甲液和乙液分别保存,使用时现配现用。
④颜色变化 Cu(OH)2悬浊液 + 还原糖 50~65℃水浴加热
Cu2O(砖红色沉淀)
斐林试剂
斐林试剂与还原糖反应结束 Cu(OH)2 + Cu2O
蓝色
棕色
砖红色
2.蛋白质 + 双缩脲试剂
紫色
①双缩脲试剂
成分 A液：0.1g/mL NaOH溶液 B液：0.01g/mL CuSO4溶液
使用 先加较多A液 方法 再加少量(几滴)B液
比较斐林试剂和双缩脲试剂
作用
成分
使用 方法
原理 反应 条件
检测还原糖
甲液：0.1g/mLNaOH 乙液：0.05g/mLCuSO4 甲液与乙液等体积混合使 用，现配现用。水浴加热。
Cu(OH)2被还原糖还 原成Cu2O砖红色沉淀。
检测蛋白质
A液：0.1g/mLNaOH B液：0.01g/mLCuSO4
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一、可溶性还原糖的检测： （1）原理：还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀。 （2）选材：苹果、梨、白萝卜。含糖量较高，颜色为
水浴加热
白色或近于白色的植物组织。
（3）检测过程：
2mL 组织 样液
刚配制的斐 林试剂2mL
振荡混匀
呈现浅蓝色
50～65℃水浴 加热2min
反应 条件 反应 现象 50～65 ℃水浴加热 样液变砖红色沉淀 不需加热，摇匀即可 样液变紫色
双缩脲试 剂B 3-4滴
（创造碱性条件）
无色 紫色
（提供Cu2+）
原理：在碱性条件（NaOH）下，蛋白质中的肽键（—NH— CO—）与Cu2＋作用生生紫色络合物。因此，操作时，应先加 A再加B
四、淀粉的检测：
（1）原理：淀粉 + 碘 （2）选材：马铃薯匀浆 （3）检测过程：
2 ml组织样液 2滴碘液 观察颜色变化
蓝色
蓝色
斐林试剂与双缩脲试剂的比较
斐林试剂 甲液 成分 鉴定 物质 0.1 g/mL NaOH溶液 乙液 0.05 g/mL CuSO4溶液 双缩脲试剂 A液 B液 0.1 g/mL NaOH溶液 0.01 g/mL CuSO4溶液
可溶性还原糖
蛋白质或多肽
添加 甲乙两液等量混匀后立即使用 先加入A液1 mL，摇匀，再加 入B液4滴（不能过量），摇匀 顺序 （现配现用）
选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央 染色：在薄片上滴加23滴苏丹Ⅲ染液，染色23min
制片
洗去浮色：用吸水纸吸去染液，滴加体积分数为50%的酒精12滴 制成临时装片：滴12滴蒸馏水，盖上盖玻片
镜检观察：在低倍镜下寻找到已着色的 圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。
实验：检测生物组织中的糖类、淀粉、蛋白质、脂肪
（五）显微镜的使用
（五）显微镜的使用
如果不移到视 野中央就转换
高倍镜，可能
①调节粗准焦螺旋使镜筒下降时，双眼要从侧面注视物会镜造与成玻什么片后
果？为什么？
标本之间的距离，到快接近时(距离约为0.5 cm)停止下降。
②必须先用低倍物镜观察，找到要观察的物像，移到视野中央，
然后再换用高倍物镜。
③转换物镜时要转动转换器，不可握住物镜直接转动。
富含Te还xt原i糖n here
T富ex含t 蔗in糖 here
Texh含te原r淀ie糖n粉很但少还
颜色干扰
富含还原糖
富含还原糖
①材料要含有丰富还原糖 ②材料颜色为白色或近于白色以免造成干扰
（一）还原糖的鉴定
思考：若检测结果出 现红黄色沉淀，能否 说明样品含有葡萄糖？
（二）淀粉的鉴定
1、实验原理
（即洗去切片的浮色）
（四）油脂的鉴定
1.在实验中观察到位于两个细胞之 间的脂肪滴，如何解释这种现象？
位于两个细胞之间的脂肪滴可能是 在制作切片时细胞破碎，细胞中的 脂肪滴改变了位置。
2.切片较厚可以吗？
不可以，较厚的切片细胞叠，不 易观察脂肪小颗粒。
3.染色后为什么要用50%的酒精溶 液漂洗切片？漂洗时应注意什么 问题？ 洗去多余的染料，漂洗时速度要快， 否则酒精会将油脂溶解掉，观察不 到实验现象。
（三）蛋白质的鉴定
1、实验原理 蛋白质+来自缩脲试剂2、操作过程紫色
左：双缩脲试剂A液(NaOH) 右：双缩脲试剂B液(CuSO4)
（四）油脂的鉴定
检测原理: 苏丹Ⅲ染液能使生物组织中的油脂呈橙黄色，此现象可通过将
生物组织材料制成薄片后在显微镜下观察。 目的要求
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
约2min50~65℃水浴加热三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
①还原糖+斐林试剂———————>砖红色沉淀②淀粉+碘液→蓝色③脂肪+苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→橘黄色（或红色） ④蛋白质+双缩脲试剂→紫色2.实验步骤及实验现象：①还原性糖鉴定：取材→制备组织样液→加斐林试剂1ml →水浴加热煮沸→显色（浅蓝色→棕色→砖红色沉淀） ②淀粉鉴定：取材→制备组织样液（马铃薯匀浆）→滴加碘液→摇匀后变成蓝色③脂肪鉴定：方法一：取材与制备组织样液（花生种子匀浆）→滴加苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）→摇匀后变成橘黄色（红色） 方法二：取材、切片、制片：花生种子浸泡，将子叶切成薄片→滴加苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→用50%酒精洗去浮色→镜检（看到橘黄色或红色的脂肪颗粒）④蛋白质鉴定：取材→制备组织样液（豆浆或蛋清稀释液）→加双缩脲试剂A 液1ml →摇匀→加双缩脲试剂B 液4滴→观察颜色（紫色）3.实验注意事项：（1）从植物器官中提取糖类、脂肪、蛋白质的方法：设法使细胞破碎（如研磨、挤压或切割等），再将这些物质提取出来。
（2）禾谷类的果实、种子中含淀粉较多；甘蔗的茎和甜菜的根含蔗糖较多；花生、芝麻的种子中含脂质较多；大豆种子中含蛋白质较多。
（3）显色反应材料选择时要注意：①材料本身应浅色，以免对实验结果的观察产生干扰； ②材料应含有丰富的相关物质，使现象更显著。
（4）还原性糖鉴定①常见的还原糖有葡萄糖、果糖、半乳糖、麦芽糖、果糖、乳糖等。
②实验材料要选含还原性糖量高，白色或近于白色的组织，如苹果和梨的匀浆。
③不能选用甜菜、甘蔗，因为它们所含的蔗糖属于非还原性糖。
④马铃薯含淀粉较多，也不能作为该实验材料。
⑤西瓜、血液、绿色叶片等材料本身的颜色会对实验结果造成干扰，也不能作为该实验材料。
⑥斐林试剂实际上是Cu(OH)2的悬液，不稳定，如果长时间放置，Cu(OH)2悬液会变成Cu(OH)2沉淀，不易和还原糖发生反应。
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
实验一检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理—颜色反应,识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握ＮａＯＨ溶液和CuＳO4溶液的使用方法。
二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
1．生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。
实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖,而不能鉴定可溶性非还原糖。
ﻫ可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。
如:葡萄糖+ ２Cu2++ 4OH—加热葡萄糖酸＋Cu 2Ｏ↓（砖红色)+ ＨＯ２即Cu 2+被还原成Ｃu２O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色（直链）或紫(红）色（支链）。
2．脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。
它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。
在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。
脂类的主要功能是氧化供能。
脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。
在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。
脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ，苏丹黑及油红Ｏ等。
脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。
经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好。
根据这一原理,适当提高温度（37℃-6０℃）对组织切片染色效果是有好处的。
脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固,如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。
实验检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质ppt课件
２、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起
世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，
肯定不需要用到的化学试剂是(
B)
A.斐林试剂
B. 红墨水
C.双缩脲试剂
D.苏丹Ⅳ染液
为 深 入 学 习 习近平 新时代 中国特 色社会 主义思 想和党 的十九 大精神 ,贯彻全 国教育 大会精 神,充分 发挥中 小学图 书室育 人功能
2、配制斐林试剂：
→ 甲液
0.1g/mLNaOH
+
乙液 0.05g/mLCuSO4
2
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3、材料用具：
如果植物组织中积累的成分是淀粉 和蔗糖，那就无法检测到还原性糖。 有些植物尽管含有较多的还原性糖， 但如果本身含有叶绿素或其他色素， 这些色素就会影响实验现象起到遮 盖作用。这些都不适宜做实验材料。
将量取的蛋清液和双缩脲试 剂A液分别倒入到试管中，震 荡均匀，此时可见试管内仍 然是透明的。
再向试管中加入4滴双缩脲 试剂B液。
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震荡均匀，此时可见试管内溶液呈紫色，这就表明蛋清 液中含有蛋白质。
可看到溶液呈橘黄色，则 证明样液中含脂肪。
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方法二：制作切片
实验材料
芝麻，脂肪含量丰富，但 种子颗粒太小，不利于切 片制作。 玉米，脂肪含量较少，种 子颗粒也较小，因此也不 适合做实验材料。
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另一方面所含被检测物质高。梨色浅且含大量还原糖适合做还
原糖鉴定的实验材料，甘蔗、甜菜含蔗糖较高，蔗糖无还原性。 花生种子中脂肪含量高，而且易切成薄片，油菜籽不宜做切片。 豆浆和鸡蛋清富含蛋白质且色浅，适合做蛋白质的鉴定材料。
【易错提醒】检测脂肪实验中对材料处理的时间应适宜 (1)实验用的花生种子需提前浸泡3～4 h，浸泡时间太短，不
(1)检测还原糖：反应原理是Cu(OH)2与还原糖反应生成砖红色
的Cu2O沉淀，所以先将甲液和乙液混合生成Cu(OH)2后再与还 原糖反应。 (2)检测蛋白质：反应原理是肽键在碱性环境中与 Cu2+反应产 生紫色络合物，所以先滴加A液的目的是制造碱性环境。
7.在还原糖、蛋白质和脂肪的检测实验中，加相应试剂检测之 前，为什么要留出一部分组织样液？ 提示：留出一部分组织样液的目的是与检测后的样液颜色作对
A.不加热、尿液、不变色
B.隔水加热、血清、砖红色沉淀 C.酒精灯直接加热、唾液、不变色 D.不加热、胃液、蓝色
【解析】选B。用斐林试剂检测还原糖，需要隔水加热，产生 砖红色沉淀。若不加热则斐林试剂与还原糖不发生反应。健康
人血清中含有葡萄糖等还原糖，而尿液、唾液、胃液中不含还
原糖。
化学物质的检测方法
常用的试剂或 指示物 碘 液
作
用
现
象
检测、鉴定淀粉
淀粉遇碘变蓝
斐林试剂
双缩脲试剂
检测、鉴定还原糖
检测、鉴定蛋白质
Hale Waihona Puke 砖红色沉淀紫色苏丹Ⅲ/Ⅳ染液
二苯胺
检测、鉴定脂肪
检测、鉴定DNA
橘黄色/红色
蓝色
常用的试剂或 指示物 余烬木条 Ca(OH)2溶液 溴麝香草酚蓝 水溶液 浓硫酸中的 重铬酸钾
作
用
现
象
检测、鉴定O2 检测、鉴定CO2 检测、鉴定CO2 检测、鉴定酒精
制片 ↓ 苏丹Ⅲ染液 ，染色3 min ②染色：滴2～3滴___________ 酒精溶液 ③去浮色：加1～2滴体积分数为50%的_________ 蒸馏水 ，盖上盖玻片 ④制成临时装片：滴一滴_______ 高倍显微镜 低倍显微镜 下寻找已着色颗粒，再用___________ 观察：先在___________ 观察 ↓
橘黄色 ，证明有脂肪存在 结论：圆形小颗粒呈_______
3.蛋白质的检测： 选材与制备：蛋清稀释液或豆浆滤液
４
紫色
蛋白质 结论：组织样液中存在_______
1.在检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的实验中，对于选
材有什么要求？ 提示：主要有两个方面的要求： (1)含量较高，如检测还原糖时宜选用苹果，苹果含大量还原 糖，不能选择甘蔗、甜菜等，因为这两种实验材料中含蔗糖较 高，蔗糖不具有还原性。 (2)颜色为白色或浅色。白色或浅色的材料可以避免材料本身
易切片。
(2)浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形。
2.(2014·石家庄模拟)下列关于检测实验操作步骤的叙述中， 正确的是( B ) A.用于检测还原糖的斐林试剂甲液和乙液可直接用于蛋白质的 鉴定 B.脂肪的检测需借助显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪颗粒 C.检测还原糖时，要在加入斐林试剂甲液摇匀后，再加乙液 D.用于检测蛋白质的双缩脲试剂A液与B液混合均匀后，再加入 到含样液的试管中，且需现配现用
实
验
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
考纲 考情
三年4考
高考指数：★★★☆☆
检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质
【实验原理】 还原糖+斐林试剂 脂肪+ 苏丹Ⅲ染液
50 ℃～65 ℃ 温水浴
砖红色沉淀 ___________
橘黄色 红色 _____ _____ 紫色
苏丹Ⅳ染液
蛋白质+双缩脲试剂
【实验步骤】
比，以增强实验的说服力。
1.在还原糖、脂肪、蛋白质的检测实验中，最佳的一组实验材 料是( D ) ①甘蔗的茎 ⑤甜菜的块根 A.④②⑥ ②油菜籽 ⑥豆浆 B.⑤③⑦ ③花生种子 ⑦鸡蛋清 C.①②⑥ D.④③⑥ ④梨
【解析】选D。物质的检测实验材料选择时一方面要选择颜色 浅的，颜色浅可以避免材料本身的颜色对实验结果造成干扰，
的颜色遮盖反应结果，如检测还原糖时一般不选择西瓜，检测
蛋白质时一般不选择血红蛋白等。
2.蔗糖溶液中加入斐林试剂后呈现什么颜色？ 提示：蔗糖属于非还原糖，不与斐林试剂发生反应。观察到的
现象不是无色，而是浅蓝色[Cu(OH)2的颜色]。
3.检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质的实验中，哪些实
验需要加热？哪些实验需要用显微镜观察？
1.还原糖的检测： 白色或近于白色 的植物组织 选材：含糖量较高、_______________
刚配制的 斐林试剂 砖红色沉淀
还原糖 结论：组织样液中含有可溶性_______
2.脂肪的检测： 橘黄色 方法一：花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→_______ 方法二：
取材：花生种子(浸泡，去掉种皮)，将子叶切成薄片 ①取最薄的切片，放在载玻片中央 ↓
5.鉴定还原糖时使用的斐林试剂为何要现配现用？
提示：因为斐林试剂很不稳定，容易产生蓝色的 Cu(OH)2沉淀， 所以应将甲液和乙液分别配制，使用时现配现用。
6.斐林试剂与双缩脲试剂成分相同，但在使用时，斐林试剂甲 液与乙液必须混合使用，而双缩脲试剂则先滴加A液，再滴加B 液，请分析原因。 提示：两个实验的反应原理不同，所以使用方法不同。
O2使余烬木条 复燃
CO2使Ca(OH)2 溶液变混浊 与CO2反应变 黄色 灰绿色
【解析】选B。斐林试剂与双缩脲试剂所用溶液相同，但两者 所用的CuSO4溶液浓度不同，不可直接将斐林试剂乙液用作双
缩脲试剂B液；由于脂肪颗粒小且分散在细胞中，所以需要借
助显微镜观察；检测还原糖时，甲液与乙液要现配现用，同时 加入样液中；鉴定蛋白质时，先加双缩脲试剂 A液，再加双缩 脲试剂B液。
3.(2014·信阳模拟)收集健康人的4种液体，分别用斐林试剂 检测。鉴定方法、液体和现象相匹配的一组是( B )
提示：(1)只有检测还原糖的实验需要加热，且实验中需要用
温水浴加热，不能用酒精灯直接加热。
(2)只有检测脂肪的实验需要用显微镜观察，因为脂肪颗粒储 存于细胞中，必须用显微镜观察。
4.用蛋清稀释液作为实验材料鉴定蛋白质，为什么一定要稀释 到一定程度？ 提示：如果不充分稀释蛋清液，与双缩脲试剂发生反应后会粘 在试管的内壁上，使反应不彻底，试管也不容易洗刷干净。