第三章 药物的杂质检查

三、铁盐检查法
（一）硫氰酸盐法
1．原理 Fe3+ + 6SCNHCl {Fe(SCN)6-]3- 红色
2．条件：[Fe3+] 条件：
0.01mg～0.05mg/50ml, 即相当于标准铁 01mg～ 05mg/50ml, mg mg/50 溶液1 溶液1～5ml。 ml。
酸 度
稀盐酸4ml/50ml。 稀盐酸4ml/50ml。 50ml
C2H5 N C2H5 C
S Ag S
白田道夫法
As → As ↓
SnCl 2 HCl
3+
有孔玻璃旋塞
导气管
检 查 砷 盐 仪 器 装 置
AsH3发生瓶
18cm
8cm
六、干燥失重 （ loss on drying）
结晶水或吸附水) 干燥失重物主要指水分 (结晶水或吸附水 结晶水或吸附水 或挥发性物质
微孔滤膜过滤法检查重金属装置
C 垫圈 外径 垫圈(外径 外径10mm,内径 内径6mm) 内径 D 滤膜 直径 滤膜(直径 直径10mm,孔径 孔径3.0µm) 孔径 E 辅助滤板
滤器上盖 A B 连接头
C D E
F 滤器下部
五、砷 盐
国内外常用方法：
(arsenic)
第一法 古蔡氏法 Gutzeit 第二法 Ag-DDC法 白田道夫法 Bettendorff
十、残留溶剂测定法
主要检查药物在生产过程中引入的有害的有机溶剂(如 主要检查药物在生产过程中引入的有害的有机溶剂 如 苯、氯仿、二氯甲烷、吡啶、甲苯、环氧乙烷、二氧六环 氯仿、二氯甲烷、吡啶、甲苯、环氧乙烷、 等）。常采用气相色谱法方法进行检查。常用的方法有二种： ）。常采用气相色谱法方法进行检查。常用的方法有二种： 常采用气相色谱法方法进行检查 直接进样法和②顶空进样法（试用于挥发性大的样品测定） ① 直接进样法和②顶空进样法（试用于挥发性大的样品测定） 色谱系统性试验的要求： 色谱系统性试验的要求： 系统性试验的要求 N＞ (1) N＞1000; 用内标法测定时，要求R (2) 用内标法测定时，要求R＞1.5; (3)外标法测定时，待测物的峰面积的RSD＜10%。 (3)外标法测定时，待测物的峰面积的RSD＜10%。 外标法测定时 RSD
1. 外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他 无干扰的有色溶液。 2. 内消色法。 3. 改用第四法，微孔滤膜过滤法。
第二法： 第二法：炽灼后的硫代乙酰胺法
适用对象：含芳环或杂环的有机药物， 适用对象：含芳环或杂环的有机药物， 如苯佐卡因、甲硝唑 如苯佐卡因、
第三法: 第三法 硫化钠法
适用对象：溶于碱的药物或在稀酸产生沉淀的 适用对象： 药物，如磺胺类、巴比妥类 药物，如磺胺类、
四、杂质的限量检查（limit test） 杂质的限量检查（
杂质的限量： 杂质的限量：药物中所含杂质的最大允许量。
限量表示(g/g) ：百分之几（%） 百万分之几（10-6）
限量检查： 检查所含杂质是否超过杂质限量的规定， 通常不要求测定其准确含量。
杂质限量检查方法
杂质的限量检查多数采用对照法，也可采用灵敏度法和 杂质的限量检查多数采用对照法，也可采用灵敏度法和比较 对照法 灵敏度法 法 对照法：取一定量 (C·V) 与被检杂质相同的纯品或对照品配 对照法： 成对照品溶液， 一定量 药物供试溶液在相同条件下处理 成对照品溶液，与一定量(S)药物供试溶液在相同条件下处理 后，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过规定。 比较反应结果，以确定杂质含量是否超过规定。 采用该法注意平行原则
古蔡氏法：
As 3As O 3 + H 2 → AsH 3 ↑ 3AsO 4
Zn+HCl
SbH3+HgBr2→SbH2(HgBr)+HBr 锑斑
3+
HgBr2 → 砷斑
→ Ag Ag- DDC
吡啶
黄→棕
红色胶态
二乙基二硫代氨基甲酸银法 Ag-diethyldithiocarbamate Ag-DDC法
例：纯度要求
Pethidine Hydrochloride 盐酸哌替啶
CH3 N O O CH3 HCl
CH 3 N
C2H5
N
OCH3 HCl
O
O O
CH 3 HCl
无效异构体I
无效异构体 II
二、杂质来源
source and sorts of impurities
1. 生产过程中产生
(C6H10O5)x + H2O 淀粉 H+ (C6H10O5)y 糊精 H2O, H+ C12H22O11 麦芽糖
NaCl对照液 对照液
葡萄糖
↓稀硝酸10ml 稀硝酸 硝酸银1ml ↓硝酸银
↓稀硝酸10ml 稀硝酸 硝酸银1ml ↓硝酸银
对照液浊度 > 供试液浊度
ห้องสมุดไป่ตู้
杂质限量的计算： 杂质限量的计算：
杂质限量= 杂质最大允许量 供试品量
杂质对照液浓度 × 其体积 = 供试品量
L=
C ⋅V × 100% S
式中： 式中： L 杂质的限度（%） 杂质的限度（ ） C 对照液浓度 （µg/ml） ） V 对照液的加入体积（ml) 对照液的加入体积（ S 供试品的量 供试品的量(g) 注意: 注意 单位统一
例 2：
葡萄糖中重金属的检查：样4.0g溶于23ml水，加入2ml缓 冲盐，依法检查，其重金属不得超过 百万分之五，取标 准铅（ 10µg/ml），v=? C= 10µg/ml L= 5 × 10-6 S=4.0g
5 × 10 −6
10 × V × 10 −6 = 4.0
V = 2.0 ml
注意：供试品如有色，需经处理后方可检查。 注意：供试品如有色，需经处理后方可检查。
例 1 ：
对乙酰氨基酚中氯化物的检查： 样 2.0g 溶于100ml水中，取25ml检查Cl-，与标准 NaCl溶液(10µg/ml) 5ml对照液相比，不得更深。 C= 10µg/ml V=5.0ml S= 25× 2.0 ÷ 100=0.5g
10 × 5.0 × 10−6 L= × 100% = 0.01% 0.5
2. 说明
在加巯基醋酸溶液前，先加枸橼酸溶液， 在加巯基醋酸溶液前，先加枸橼酸溶液，使其与铁离 形成配位离子， 形成配位离子，以免在氨碱性溶液中产生氢氧化铁沉 淀。（此法灵敏度比较高，但试剂较贵） 。（此法灵敏度比较高，但试剂较贵） 此法灵敏度比较高
四 、重金属（Heavy Metals ）的检查 1、第一法 硫代乙酰胺法
适用对象：溶于水、稀酸和乙醇的药物 适用对象：溶于水、
原 理： Pb2+ + 醋酸盐缓冲液 + 硫代乙酰胺(CH3CSNH2) → PbS ↓(黄~ 棕黑) 条件： 条件：
介质：醋酸盐缓冲液 (pH 3.5) 2ml 试剂：硫代乙酰胺 (CH3CSNH2) 2ml 杂质对照液： PbNO3 (10µg/ml) 灵敏度范围： 10~20 µg / 27ml
第三节 一般杂质检查方法
氯化物（ 一 、氯化物（Chloride ）检查 原理： 原理：
HNO3 药物： − + AgNO3 AgCl白色浑浊 Cl → HNO 对照： NaCl（c,V） AgNO3 3 →AgCl白色浑浊 +
条件：硝酸酸性条件（稀硝酸10ml） 反应试剂：硝酸银试液 1.0ml 杂质对照：NaCl (10µg/ml) 灵敏度范围： 50~80 µg / 50ml 讨论：选择稀硝酸反应条件的意义。
酸度：水解试剂带入 乙醇中不溶物：水解中间体(糊精) SO32-：产品用H2SO3漂白 可溶性淀粉：水解不完全
2C6H12O6 葡萄糖
2.贮藏过程中产生 2.贮藏过程中产生
外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、 外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、 微生物等引起药物产生
(O ) 例如： 例如： 麻醉乙醚 →
注 意：
1. 比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。 2. 平行操作原则。 3. 若供试品有色，需经处理后方可检查。
）干扰及排除
供试品有色处理方法
（1）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查， 可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。
（2）内消色法：倍量法
。二、硫酸盐检查法
1．原理 是利用SO 在盐酸酸性溶液中与氯化钡试液作用， 是利用SO42-在盐酸酸性溶液中与氯化钡试液作用， 生成硫酸钡的白色浑浊液，与一定量标准硫酸钾溶液 生成硫酸钡的白色浑浊液， 在相同条件下生成的硫酸钡浑浊液比较， 在相同条件下生成的硫酸钡浑浊液比较，以判断供 试品中硫酸盐是否超过限量。
3．干扰的排除
当有Fe 存在时，加氧化剂过硫酸铵氧化Fe （1） 当有Fe2+存在时，加氧化剂过硫酸铵氧化Fe2+成Fe3+。 （2）当供试液管与对照溶液管色调不一致，或所呈硫氰酸 当供试液管与对照溶液管色调不一致， 铁 的颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中， 的颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中，加正丁醇或 异戊醇提取，分别取提取液比色。 异戊醇提取，分别取提取液比色。
(二）巯基醋酸法 二
1. 原理 巯基醋酸还原 3+为Fe2+，在氨碱性试液中与 2 + 巯基醋酸还原Fe 在氨碱性试液中与Fe 作用生成红色配位离子。 作用生成红色配位离子。 2Fe3+ + 2HSCH2COOH 2Fe2+ + SCH2COOH + 2H+ SCH2COOH Fe2+ + 2HSCH2COOH Fe(SCH2COOH)2 + H+ 2OHFe(SCH2COOH)2 [Fe(SCH2COOH)2 ]2- + 2H2O
中国药科大学 药分教研室
第三章 药物的杂质检查
Test for purity
第三章 药物的杂质检查 Test for purity
药物杂质与限量 杂质的检查方法 药物中一般杂质检查 特殊杂质检查与鉴定方法
第一节 药物杂质与限量
一、药物杂质与纯度
药物的纯度：是指药物的纯净程度，药物中 的杂质是影响药物纯度的主要因素。 杂质：ChP将任何影响药物纯度的物质均称为 杂质。 对药物纯度的认识随着分离检测技术的进步而 提高；注意区别试剂纯度与临床用药品的纯度
恒温干燥 干燥剂干燥 减压干燥 热分析法 thermal analysis,TA
七、水分测定
费休氏法和甲苯法 费休法或K-F法，是在1935年由卡尔•费休提出的测 定水分的容量方法，属于碘量法，对于测定水分最为 专一，也是测定水分最为准确的化学方法。
炽灼残渣检查法(residue on ignition) 八、炽灼残渣检查法
第二节 杂质检查方法
药物中杂质的检查主要是依据药物与杂质在物理性 质和化学性质上的差异来进行。 质和化学性质上的差异来进行。
一、杂质的研究规范
1、有机杂质在药品质量标准中的项目名称 杂质的化学名称、某类杂质的总称、检测方法。 杂质的化学名称、某类杂质的总称、检测方法。 2、杂质项目的确立 针对性 3、杂质限度的确定 可根据原料药每日剂量来制定质控限度。 可根据原料药每日剂量来制定质控限度。 4、杂质检查方法的选择与验证 化学法、光谱法、色谱法(特别是 化学法、光谱法、色谱法 特别是HPLC) 特别是
条件： 2．条件： 0.1mg～ [SO42-] 0.1mg～0.5mg/50ml, 即相当于标准 硫酸钾溶液1 5ml。 硫酸钾溶液1～5ml。 酸 度 稀盐酸2ml/50ml。 稀盐酸2ml/50ml。 2ml/50ml
3．干扰的排除 供试品有色：可采用内消色法。 供试品有色：可采用内消色法。
醛及有毒的 过氧化物
三、杂质的种类
按照来源分类： (1)一般杂质： （也称信号杂质） 在多种药物中普遍存在的杂质。 (Cl- SO42Pb As Fe) (2)特殊杂质： （也称有关物质） 个别药物的生产及贮藏中引入的杂质。 按毒性分类： 有害杂质 ( Pb As )：考察生产工艺， 信号杂质 （Cl- SO42-）：反映药物的纯度水平 按化学类别和特殊性分类： 有机杂质、无机杂质、残留溶液
BP称硫酸灰分（sulphated ash) 称硫酸灰分（ 称硫酸灰分 是检查有机药物中混入的各种无机杂质。 是检查有机药物中混入的各种无机杂质。常采用 重量方法进行检查。 重量方法进行检查。 残渣及坩埚重 — 坩埚重 残渣% 残渣% = 100% 供试品重
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九、易炭化物检查法
是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的 微量有机杂质。这类杂质多数结构未知， 微量有机杂质。这类杂质多数结构未知，常采用与标 有机杂质 准比色液比色的方法进行检查。 标准比色液为 标准比色液为CoCl2, 准比色液比色的方法进行检查。(标准比色液为 K2Cr2O7, CuSO4)