血凝抑制实验报告
血凝实验实训报告
一、实验目的1. 掌握血凝实验的基本原理和操作步骤。
2. 学会使用血凝抑制实验检测禽流感病毒抗体水平。
3. 了解血凝实验在禽流感疫病监测和免疫抗体检测中的应用。
二、实验原理血凝实验是一种检测病毒抗原或抗体存在的方法。
禽流感病毒表面的血凝素(HA)蛋白具有识别并吸附于红细胞表面的受体,从而使红细胞发生凝集现象。
通过观察红细胞凝集情况,可以判断病毒抗原或抗体的存在。
血凝抑制实验是血凝实验的一种衍生方法,通过加入特异性抗体,抑制病毒与红细胞表面的结合,从而判断抗体水平。
三、实验材料与仪器1. 材料:禽流感病毒抗原、鸡红细胞、抗禽流感病毒抗体、生理盐水、微量移液器、酶标板等。
2. 仪器:微量振荡器、离心机、显微镜等。
四、实验步骤1. 配制病毒抗原稀释液:取禽流感病毒抗原,用生理盐水进行倍比稀释,得到一系列浓度梯度。
2. 设置实验组:取96孔酶标板,每孔加入25μl PBS液,然后将稀释后的病毒抗原加入第一排第1孔,混匀后依次进行倍比稀释至第24孔,最后弃去25μl。
3. 加入抗体:从第1孔吸取25μl混匀后的抗原液加到第2孔中,混匀后吸取25μl加入到第3孔中,依次进行倍比稀释至第24孔,最后弃去25μl。
第三排孔至第五排孔同上操作。
4. 加入红细胞:依次向第一至第五排孔的每孔中加入25μl 1%鸡红细胞悬液。
5. 混匀:将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒,使红细胞与病毒抗原充分混合。
6. 静置:室温(20-25℃)静置30分钟,观察红细胞凝集情况。
7. 结果判定:将板作45度倾斜,观察红细胞凝集情况。
若红细胞出现明显的凝集现象,则表示病毒抗原存在;若红细胞无凝集现象,则表示病毒抗原不存在。
8. 血凝抑制实验:取96孔酶标板,每孔加入25μl PBS液,然后按照血凝实验的步骤加入抗体和红细胞,观察红细胞凝集情况。
五、实验结果与分析1. 血凝实验结果:通过观察红细胞凝集情况,可以判断病毒抗原的存在与否。
2. 血凝抑制实验结果:通过观察红细胞凝集情况,可以判断抗体水平。
血凝抑制实验实训报告
一、实验目的1. 掌握血凝抑制实验的基本原理和操作方法。
2. 了解血凝抑制实验在禽流感抗体检测中的应用。
3. 培养实验操作技能和结果分析能力。
二、实验原理血凝抑制实验(Hemagglutination Inhibition Test,HIT)是一种检测禽流感病毒抗体水平的方法。
该实验原理是利用禽流感病毒对鸡红细胞具有血凝活性,当病毒与鸡红细胞接触时,红细胞会发生凝集现象。
如果血清中含有禽流感病毒特异性抗体,则抗体与病毒结合后,会抑制病毒与红细胞的凝集作用。
三、实验材料1. 实验动物:鸡红细胞。
2. 实验试剂:禽流感病毒抗原、标准阳性血清、标准阴性血清、血清样品、PBS 缓冲液、1%鸡红细胞悬液、微量移液器、酶标板、振荡器、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备96孔酶标板,用微量移液器在每孔加入25μL PBS缓冲液。
2. 将标准阳性血清、标准阴性血清、血清样品分别进行倍比稀释,从高浓度到低浓度依次加入孔中,每孔25μL。
3. 在每个孔中加入25μL禽流感病毒抗原,混匀后室温静置30分钟。
4. 在每个孔中加入25μL 1%鸡红细胞悬液,混匀后室温静置30分钟。
5. 将酶标板置于振荡器上振荡10秒,使红细胞充分混合。
6. 室温静置30分钟后,观察红细胞凝集情况。
7. 根据红细胞凝集程度,判断血清样品中禽流感病毒抗体水平。
五、结果与分析1. 阳性对照:红细胞凝集,表明禽流感病毒抗原具有血凝活性。
2. 阴性对照:红细胞未凝集,表明标准阴性血清不含有禽流感病毒抗体。
3. 标准阳性血清:红细胞凝集,表明标准阳性血清含有禽流感病毒抗体。
4. 血清样品:根据红细胞凝集程度,判断血清样品中禽流感病毒抗体水平。
六、实验讨论1. 本实验通过血凝抑制实验检测了血清样品中禽流感病毒抗体水平,为禽流感疫病监测和免疫抗体检测提供了有力手段。
2. 在实验过程中,应注意以下几点:(1)严格遵守实验操作规程,避免人为误差;(2)保证实验材料的质量,如鸡红细胞、禽流感病毒抗原等;(3)控制实验条件,如温度、振荡时间等;(4)观察结果时,注意红细胞的凝集程度,以便准确判断抗体水平。
血凝抑制实验报告三篇
血凝抑制实验报告三篇实验报告一:血凝抑制药物A的实验报告摘要:本实验旨在评估血凝抑制药物A对凝血过程的影响。
通过血小板聚集检测、凝血酶时间和纤维蛋白原时间测量,我们发现药物A可有效地抑制血小板聚集、延长凝血酶时间和纤维蛋白原时间,表明其具有明显的抗凝血作用。
引言:血凝抑制药物在医学领域具有广泛的应用,用于治疗各种凝血相关疾病。
血小板聚集、凝血酶时间和纤维蛋白原时间是评估凝血功能的重要指标。
本研究旨在探究血凝抑制药物A对这些指标的影响,为进一步研究和药物开发提供实验依据。
材料与方法:1. 实验药物:血凝抑制药物A2. 血浆样本:从健康人士收集的血浆样本3. 试剂:ADP激活剂,凝血酶试剂,纤维蛋白原试剂4. 实验仪器:光学密度计,凝血时间测定仪5. 实验组设置:将血浆样本分为对照组和药物A处理组结果:1. 血小板聚集检测:药物A处理组显示较对照组明显的血小板聚集抑制,表明药物A具有抗血小板聚集作用。
2. 凝血酶时间测量:药物A处理组凝血酶时间明显延长,表明药物A能有效延缓凝血过程。
3. 纤维蛋白原时间测量:药物A处理组纤维蛋白原时间较对照组显著增加,表明药物A可抑制纤维蛋白原合成和聚合。
讨论:本研究结果表明,血凝抑制药物A可通过抑制血小板聚集、延长凝血酶时间和纤维蛋白原时间发挥抗凝血作用。
这些发现与前期研究相一致,进一步验证了药物A的抗凝血机制。
然而,需要进一步的研究来探究该药物的作用机制以及临床应用前景。
结论:血凝抑制药物A具有明显的抗凝血作用,可通过抑制血小板聚集、延长凝血酶时间和纤维蛋白原时间发挥其作用。
这些发现为该药物的临床应用提供了实验基础,并为进一步相关研究提供了方向。
实验报告二:血凝抑制药物B的实验报告摘要:本实验旨在研究血凝抑制药物B对凝血通路的影响。
通过活化部分凝血活酶时间和凝血因子测定,我们发现药物B可显著延长活化部分凝血活酶时间,同时对凝血因子Xa和IIa具有明显的抑制作用。
血凝抑制实验_实验报告
一、实验目的1. 了解血凝抑制实验的基本原理和操作方法。
2. 掌握血凝抑制实验在禽流感病毒检测中的应用。
3. 学会通过血凝抑制实验结果判断禽流感病毒的感染情况。
二、实验原理血凝抑制实验(Hemagglutination Inhibition Test,HIT)是一种检测病毒感染的方法,通过检测血清中病毒特异性抗体的存在和效价,来判断动物是否感染过某种病毒。
在禽流感病毒检测中,该实验主要用于检测血清中的禽流感病毒抗体水平,从而判断禽流感病毒感染状态。
实验原理:当禽流感病毒与含有抗体的血清混合后,病毒表面的血凝素(HA)与抗体结合,导致病毒颗粒聚集,血凝素活性降低,从而使红细胞不发生凝集。
通过观察红细胞是否发生凝集,可以判断血清中是否含有禽流感病毒抗体。
三、实验材料1. 禽流感病毒抗原2. 1%鸡红细胞悬液3. 0.5%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)4. PBS缓冲液5. 96孔V型酶标板6. 微量移液器7. 振荡器8. 恒温培养箱9. 移液器吸头四、实验方法1. 准备工作(1)将禽流感病毒抗原用PBS缓冲液稀释至适当浓度。
(2)将鸡红细胞悬液用PBS缓冲液稀释至1%。
(3)将PVP用PBS缓冲液溶解,浓度为0.5%。
2. 血凝抑制实验(1)取96孔V型酶标板,每孔加入25μL PBS缓冲液。
(2)在第一排第1孔中加入25μL禽流感病毒抗原,混匀后,从第1孔吸取25μL加入第2孔,依次进行倍比稀释至第24孔,最后弃去25μL。
(3)向每孔加入25μL 1%鸡红细胞悬液,混匀后置于振荡器上振荡10秒。
(4)将酶标板置于室温(20-25℃)下静置30分钟。
(5)观察红细胞是否发生凝集,记录结果。
3. 结果判定(1)完全抑制:红细胞不发生凝集。
(2)部分抑制:红细胞发生凝集,但凝集程度较轻。
(3)未抑制:红细胞发生凝集,凝集程度明显。
五、实验结果与分析1. 结果记录根据实验结果,记录每孔红细胞凝集情况,并计算抑制率。
血凝抑制实验报告三篇
血凝抑制实验报告三篇血凝抑制实验报告一禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测,也可用于判断未使用疫苗群体的感染状态等。
该试验是目前世界卫生组织和国际动物健康组织进行全球流感监测所普遍采用的方法,而且因其具有经济、快速、可靠、操作简便、能够处理大量的样品,并能在短时间内报告禽流感抗体水平等优点,已经成为当前基层兽医实验室禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法。
但因该试验受人为操作影响较大,经常因操作不规范、不严谨等造成结果偏差大、重复性差等问题,现根据几年来的工作经验对该试验过程中应注意的事项做一探讨。
一、血凝试验操作程序1、取96孔90°V形酶标板,用微量移液器在第一至第五排的1~12孔每孔加25 μL PBS液。
2、吸取25 μL标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。
3、从第1孔吸取25 μL混匀后的抗原液加到第2孔中,混匀后吸取25μL加入到第3孔中,依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔,最后弃去25 μL。
第三排孔至第四排孔同上操作。
4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25 μL 1%的鸡红细胞悬液。
5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒,室温(20-25℃)静置30 min观察结果(如果环境温度太高,可置4℃环境下)。
6、结果判定:将板作45°倾斜,观察红细胞是否呈泪滴状流淌。
以完全凝集(不流淌)的抗原或病毒最高稀释倍数为1个血凝单位(HAU)二、血凝抑制试验操作程序1、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。
(即1HAU抗原除以4)2、取96孔V形酶标板,用移液器在第1~12孔各加入25 μL PBS。
3、在第1孔加入25 μL被检血清,充分混匀后移出25 μL加至第2孔,依次类推,倍比稀释至第12孔,弃去25 μL。
4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清(各做两份),作对照孔。
5、在第1~12孔各加入25 μL 4单位抗原,置于微量振荡器上轻轻混匀,室温20-25℃下静置30 min。
血凝实验和血凝抑制实验报告
血凝实验和血凝抑制实验报告一、引言血液凝固是维持人体生命活动的重要生理过程之一。
当人体受到损伤时,血液会迅速凝固形成血块,以阻止出血。
然而,血液凝固过程的异常可能导致血栓形成,进而引发心脑血管疾病。
因此,准确评估血液凝固功能对于疾病预防和治疗至关重要。
二、血凝实验血凝实验是一种常用的临床实验方法,用于评估血液的凝固功能。
该实验主要通过测量血液在一定时间内凝固的程度来获得结果。
常见的血凝实验包括凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血小板计数和纤维蛋白原测定等。
1. 凝血酶原时间(PT)凝血酶原时间是评估外源凝血系统的功能的指标。
该实验通过观察血浆中凝血酶原转化为凝血酶所需的时间来测定。
正常情况下,PT 的时间范围为11-13秒。
若PT延长,则可能存在凝血因子活性降低或凝血因子缺乏的情况。
2. 活化部分凝血活酶时间(APTT)活化部分凝血活酶时间是评估内源凝血系统的功能的指标。
该实验通过观察血浆中凝血酶形成所需的时间来测定。
正常情况下,APTT 的时间范围为25-35秒。
若APTT延长,则可能存在凝血因子活性降低或凝血因子缺乏的情况。
3. 血小板计数血小板计数是评估血小板功能的指标。
血小板是血液中的细小细胞片段,主要参与血液凝固过程。
正常情况下,血小板计数在150-450×10^9/L之间。
若血小板计数过低,则可能导致出血倾向。
4. 纤维蛋白原测定纤维蛋白原是血液凝固过程中的重要物质,参与形成纤维蛋白凝块。
纤维蛋白原测定可以评估纤维蛋白原的含量。
正常情况下,纤维蛋白原的浓度在2-4 g/L之间。
若纤维蛋白原浓度过低,则可能导致凝血功能异常。
三、血凝抑制实验血凝抑制实验是一种检测血液凝固抑制功能的方法。
该实验主要评估抗凝血酶、抗纤维蛋白聚合酶等物质对血液凝固过程的抑制作用。
1. 抗凝血酶实验抗凝血酶是一种重要的抗凝物质,可以抑制凝血酶的活性。
抗凝血酶实验通过测定血浆中抗凝血酶的活性来评估抗凝血酶功能。
血凝抑制实验报告
一、实验背景血凝抑制实验是一种检测血清中抗体水平的常用方法,主要用于监测禽流感等病毒感染。
该实验通过检测血清中抗体的存在和活性,可以判断个体是否感染过某种病毒,以及疫苗免疫的效果。
本实验旨在通过血凝抑制实验,监测禽流感病毒感染情况,评估疫苗免疫效果。
二、实验目的1. 掌握血凝抑制实验的基本原理和操作方法;2. 检测禽流感病毒感染情况;3. 评估疫苗免疫效果。
三、实验原理血凝抑制实验是利用病毒对红细胞表面的受体进行吸附,导致红细胞发生凝集的现象。
当血清中存在抗体时,抗体与病毒结合,阻止病毒与红细胞受体的结合,从而抑制血凝现象的发生。
通过观察血凝现象的变化,可以判断血清中抗体的存在和活性。
四、实验材料1. 禽流感病毒抗原;2. 鸡红细胞;3. 血清;4. PBS缓冲液;5. 微量移液器;6. 酶标板;7. 振荡器;8. 酶标仪;9. 实验室温度计。
五、实验方法1. 准备工作:将禽流感病毒抗原、鸡红细胞、血清、PBS缓冲液等实验材料准备齐全,并置于室温下平衡。
2. 血凝抑制实验操作:(1)取96孔90V形酶标板,用微量移液器在第一至第五排的1~12孔每孔加25μL PBS液。
(2)吸取25μL标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中,充分混匀。
(3)从第1孔吸取25μL混匀后的抗原液加到第2孔中,混匀后吸取25μL加入到第3孔中,依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔,最后弃去25μL。
第三排孔至第四排孔同上操作。
(4)依次向第一至第五排孔的每孔中加入25μL 1%的鸡红细胞悬液。
(5)将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒,室温(20-25℃)静置30分钟,观察结果(如果环境温度太高,可置4℃环境下)。
(6)将酶标板放入酶标仪,设置波长为540nm,读取各孔的吸光度值。
六、实验结果与分析1. 结果判定:(1)以血清最高稀释度抑制50%红细胞凝集的抗体滴度(ID50)为血清抗体水平。
(2)ID50越高,说明血清中抗体水平越高,病毒感染情况越严重。
血凝实验实验报告
一、实验目的1. 理解血凝现象的原理。
2. 掌握血凝实验的操作步骤。
3. 学习通过血凝实验判断血凝素和血凝抑制抗体的存在。
二、实验原理血凝现象是指某些病毒能够凝集动物红细胞的能力。
利用这一特性,可以通过血凝实验检测病毒的存在以及血清中抗体的水平。
血凝抑制试验(HI试验)是一种常用的血清学检测方法,通过检测血清中的血凝抑制抗体,可以判断感染状态、疫苗接种效果等。
三、实验材料1. 红细胞:鸡红细胞、兔红细胞等。
2. 病毒:流感病毒、副流感病毒等。
3. 血凝素(HA):用于血凝实验。
4. 血凝抑制抗体(HI):用于血凝抑制实验。
5. 实验器材:微量移液器、酶标板、振荡器、离心机等。
四、实验方法1. 血凝实验(1)将红细胞用生理盐水洗涤三次,制成1%的红细胞悬液。
(2)取96孔酶标板,每孔加入25μl PBS液。
(3)在第一孔中加入25μl病毒悬液,混匀后吸取25μl加到第二孔,依次倍比稀释至第二排最后一孔,弃去25μl。
(4)在每孔中加入25μl 1%红细胞悬液。
(5)将酶标板置于振荡器上振荡10秒,室温静置30min。
(6)观察结果,记录出现血凝现象的孔数。
2. 血凝抑制实验(1)取96孔酶标板,每孔加入25μl PBS液。
(2)在第一孔中加入25μl病毒悬液,混匀后吸取25μl加到第二孔,依次倍比稀释至第二排最后一孔,弃去25μl。
(3)在第三至第六排孔中加入不同浓度的血清。
(4)在每孔中加入25μl 1%红细胞悬液。
(5)将酶标板置于振荡器上振荡10秒,室温静置30min。
(6)观察结果,记录出现血凝抑制现象的孔数。
五、实验结果与分析1. 血凝实验通过观察实验结果,发现病毒悬液孔数越多,红细胞凝集现象越明显。
说明病毒具有血凝活性。
2. 血凝抑制实验通过观察实验结果,发现不同浓度的血清孔数出现血凝抑制现象的孔数不同。
说明血清中含有能够抑制血凝的抗体。
六、实验结论1. 血凝实验结果表明,病毒具有血凝活性。
血凝抑制实验报告10篇
血凝抑制实验报告10篇血凝抑制实验报告11 阿氏(Alsevers)液配制称量葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g,加蒸馏水至100mL,散热溶解后调pH值至6.1,69kPa 15min高压灭菌,4℃保存备用。
(3.8%枸橼酸钠(3.8g枸橼酸钠,100ml超纯水),101 kPa,20min高压灭菌,4℃保存备用,保存期1个月)。
2 10%和1%鸡红细胞液的制备2.1采血用注射器吸取阿氏液约1mL(3.8%枸橼酸钠),取至少2只SPF鸡(如果没有SPF鸡,可用常规试验证明体内无禽流感和新城疫抗体的鸡),采血约2~4mL,与阿氏液混合(3.8%枸橼酸钠),放入装10mL 阿氏液(生理盐水)的离心管中混匀。
2.2 洗涤鸡红细胞将离心管中的血液经1500~1800 r/min 离心8分钟,弃上清液,沉淀物加入阿氏液(生理盐水),轻轻混合,再经1500~1800 r/min 离心8分钟,用吸管移去上清液及沉淀红细胞上层的白细胞薄膜,再重复2次以上过程后,加入阿氏液20 mL(生理盐水),轻轻混合成红细胞悬液,4℃保存备用,不超过5天。
2.3 10%鸡红细胞悬液取阿氏液保存不超过5天的红细胞,在锥形刻度离心管中离心1500~1800 r/min 8分钟,弃去上清液,准确观察刻度离心管中红细胞体积(mL),加入9倍体积(mL)的生理盐水,用吸管反复吹吸使生理盐水与红细胞混合均匀。
(此步可省略,直接配制1%红细胞)2.4 1%鸡红细胞液取混合均匀的10%鸡红细胞悬液1 mL,加入9 mL生理盐水,混合均匀即可。
(根据检测血清的数量,估算一下需要的1%鸡红细胞量,可按0.3ml/每份血清)3 抗原血凝效价测定(HA试验,微量法)3.1 在微量反应板的1孔~12孔均加入25μl PBS(生理盐水),换滴头。
3.2吸取25μl抗原加入第l孔,混匀。
3.3从第1孔吸取25μl,病毒液加入第2孔,混匀后吸取25μl加入第3孔,如此进行倍比稀释至第11孔,从第11孔吸取25μl 弃之,换滴头。
血凝抑制实验报告
血凝抑制实验报告【导语】实验报告是把实验的目的、方法、过程、结果等记录下来,经过整理,写成的书面汇报。
以下是文库小编整理的血凝抑制实验报告,供大家借鉴!【篇一】血凝抑制实验报告禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测,也可用于判断未使用疫苗群体的感染状态等。
该试验是目前世界卫生组织和国际动物健康组织进行全球流感监测所普遍采用的方法,而且因其具有经济、快速、可靠、操作简便、能够处理大量的样品,并能在短时间内报告禽流感抗体水平等优点,已经成为当前基层兽医实验室禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法。
但因该试验受人为操作影响较大,经常因操作不规范、不严谨等造成结果偏差大、重复性差等问题,现根据几年来的工作经验对该试验过程中应注意的事项做一探讨。
一、血凝试验操作程序1、取96孔90°V形酶标板,用微量移液器在第一至第五排的1~12孔每孔加25μLPBS液。
2、吸取25μL标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。
3、从第1孔吸取25μL混匀后的抗原液加到第2孔中,混匀后吸取25μL 加入到第3孔中,依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔,最后弃去25μL。
第三排孔至第四排孔同上操作。
4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25μL1%的鸡红细胞悬液。
5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒,室温(20-25℃)静置30min 观察结果(如果环境温度太高,可置4℃环境下)。
6、结果判定:将板作45°倾斜,观察红细胞是否呈泪滴状流淌。
以完全凝集(不流淌)的抗原或病毒稀释倍数为1个血凝单位(HAU)二、血凝抑制试验操作程序1、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。
(即1HAU抗原除以4)2、取96孔V形酶标板,用移液器在第1~12孔各加入25μLPBS。
3、在第1孔加入25μL被检血清,充分混匀后移出25μL加至第2孔,依次类推,倍比稀释至第12孔,弃去25μL。
4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清(各做两份),作对照孔。
血凝抑制实验报告三篇
血凝抑制实验报告三篇(经典版)编制人:__________________审核人:__________________审批人:__________________编制单位:__________________编制时间:____年____月____日序言下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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血凝抑制实验报告
血凝抑制实验报告摘要:本实验旨在通过观察和比较不同药物对血凝过程的影响,评估其血凝抑制能力。
实验结果显示,药物B对血凝酶的抑制效果最佳,为进一步探究其作用机制,需进行进一步研究。
引言:血凝是机体产生凝块阻塞血管,进而停止出血的重要生理过程。
然而,在某些病理情况下,血液过度凝固会导致血栓形成,从而引发心血管疾病。
因此,寻找有效的血凝抑制剂具有重要的临床意义。
本实验旨在评估不同药物对血凝过程的抑制效果,为药物研发提供参考。
材料与方法:1. 实验所需材料:- 血浆样本- 药物A、B、C- 离心机、显微镜等实验设备2. 实验步骤:1) 取血浆样本,并分为若干小组。
2) 分别加入不同药物,设立对照组。
3) 动态观察每组血液在一定时间段内的凝固情况。
4) 记录观察结果,并进行数据统计与分析。
结果与讨论:实验结果显示,不同药物对血凝过程的抑制效果存在一定的差异。
药物A、B、C分别对血凝过程产生了不同程度的抑制作用。
其中,药物B对血凝酶的抑制效果最佳,血液凝固时间较长,形成的凝块较小。
对照组血液的凝固时间较快,凝块较大。
而药物A和C的抑制效果相对较弱。
针对药物B的抑制效果较好,进一步的研究可以考虑以下几个方面:1. 药物B的作用机制:通过进一步的实验与分析,可以剖析药物B是通过何种方式抑制血凝过程,为其进一步优化提供理论依据。
2. 药物B的剂量效应关系:将药物B的剂量进行调整与变化,观察其对血凝过程的抑制效果是否随着剂量的增加而增强或减弱,从而确定最佳用药剂量。
3. 药物B的安全性:对药物B的毒性与副作用进行评估,确保其在应用过程中的安全性和可靠性。
结论:本实验结果表明,药物B对血凝酶的抑制效果较佳,具有较大的潜力用于血凝抑制治疗。
进一步研究该药物的作用机制、剂量效应关系和安全性,可以为其临床应用提供更为准确的依据。
血凝抑制实验报告三篇
血凝抑制实验报告三篇血凝抑制实验报告一血凝试验操作程序1、取96孔90°V形酶标板,用微量移液器在第一至第五排的1~12孔每孔加25μLPBS液。
2、吸取25μL标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。
3、从第1孔吸取25μL混匀后的抗原液加到第2孔中,混匀后吸取25μL加入到第3孔中,依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔,最后弃去25 μL。
第三排孔至第四排孔同上操作。
4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25μL1%的鸡红细胞悬液。
5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒,室温静置30min观察结果。
6、结果判定:将板作45°倾斜,观察红细胞是否呈泪滴状流淌。
以完全凝集的抗原或病毒最高稀释倍数为1个血凝单位二、血凝抑制试验操作程序1、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。
2、取96孔V形酶标板,用移液器在第1~12孔各加入25μLPBS。
3、在第1孔加入25μL被检血清,充分混匀后移出25μL加至第2孔,依次类推,倍比稀释至第12孔,弃去25μL。
4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清,作对照孔。
5、在第1~12孔各加入25μL4单位抗原,置于微量振荡器上轻轻混匀,室温20-25℃下静置30 min。
6、每孔加入25μL1%的鸡红细胞悬液。
置于微量振荡器上轻轻混匀,室温静置40min后观察结果,若环境温度过高,可于4℃条件下进行,红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。
7、结果判定:只有阴性对照孔血清滴度不大于2log2,阳性对照孔误差不超过1个滴度,试验结果才有效。
将酶标板作45°倾斜,以完全抑制红细胞凝集的最大稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。
当被检血清效价大于等于4log2,判为禽流感抗体阳性。
三、试验过程中的注意事项1样品的保存及试验前处理1.1采集的血液样品应及时分离血清,最好分装至离心管中,标记清楚,离心后吸出血清,对应编号冷藏送检,并禁止运输过程中剧烈震动。
病毒血凝与血凝抑制实验报告
病毒血凝与血凝抑制实验报告一、实验目的本次实验旨在研究病毒的血凝现象以及血凝抑制反应,以深入了解病毒的特性和相关的免疫学机制。
通过实验,掌握病毒血凝与血凝抑制实验的操作方法和结果判断,为病毒的检测、诊断以及疫苗研发提供实验依据。
二、实验原理(一)病毒血凝现象某些病毒表面具有能够与红细胞表面受体结合的血凝素,从而使红细胞发生凝集。
这种凝集现象可以在显微镜下观察到,并且凝集的程度与病毒的浓度有关。
(二)血凝抑制反应当特异性抗体与病毒表面的血凝素结合后,会阻断病毒与红细胞的结合,从而抑制血凝现象的发生。
通过检测血清中抗体对血凝的抑制作用,可以判断血清中是否存在特异性抗体以及抗体的效价。
三、实验材料(一)病毒株选用已知血凝特性的病毒株,如流感病毒、新城疫病毒等。
(二)红细胞新鲜采集的鸡、豚鼠或人“O”型红细胞。
(三)血清待检血清和已知阳性、阴性对照血清。
(四)试剂磷酸盐缓冲液(PBS)、生理盐水等。
(五)器材96 孔微量血凝板、移液器、离心机、显微镜等。
四、实验步骤(一)红细胞悬液的制备1、采集新鲜血液,加入抗凝剂。
2、离心去除血浆,用生理盐水洗涤红细胞 3 5 次,直至上清液无色。
3、最后用生理盐水将红细胞配制成 1%的悬液备用。
(二)病毒血凝滴度的测定1、在 96 孔微量血凝板中,从第 1 孔至第 12 孔,每孔加入25μL PBS。
2、在第 1 孔中加入25μL 病毒液,然后从第 1 孔吸取25μL 病毒液至第 2 孔,依次倍比稀释至第 11 孔,从第 11 孔吸取25μL 弃去。
3、每孔加入25μL 1%红细胞悬液,轻轻振荡混匀,室温静置 30 60 分钟。
4、观察血凝结果,以出现“++”凝集的最高稀释度作为病毒的血凝滴度。
(三)血凝抑制实验1、取已测定血凝滴度的病毒液,按照 4 个血凝单位/25μL 的量加入 96 孔微量血凝板的第 1 孔至第 10 孔,第 11 孔为病毒对照,第 12 孔为红细胞对照。
影响血凝的实验报告(3篇)
第1篇一、实验背景血凝实验是生物化学和医学研究中的一个重要实验,主要用于检测病毒、细菌等微生物的凝血活性。
血凝现象是指某些微生物能够直接或间接地引起红细胞发生凝集的现象。
这一实验在病原体检测、疫苗研发、疾病诊断等方面具有重要意义。
然而,血凝实验的结果受到多种因素的影响,如温度、pH值、离子强度、抗原抗体比例等。
本实验旨在探讨这些因素对血凝实验结果的影响,以期为血凝实验的优化提供理论依据。
二、实验目的1. 探讨温度对血凝实验结果的影响。
2. 分析pH值对血凝实验结果的影响。
3. 研究离子强度对血凝实验结果的影响。
4. 评估抗原抗体比例对血凝实验结果的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 禽流感病毒抗原- 兔抗禽流感病毒抗体- 鸡红细胞- 生理盐水- 碳酸氢钠溶液- 磷酸缓冲溶液- 离子强度调节液- pH计- 恒温水浴箱- 移液器- 血凝板2. 实验仪器:- 电子天平- 离心机- 恒温振荡器- 显微镜四、实验方法1. 温度对血凝实验的影响:将抗原抗体混合液分别在4℃、20℃、37℃、50℃下孵育30分钟,观察红细胞凝集情况。
2. pH值对血凝实验的影响:将抗原抗体混合液分别在pH 4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0下孵育30分钟,观察红细胞凝集情况。
3. 离子强度对血凝实验的影响:将抗原抗体混合液分别在离子强度0.01mol/L、0.05mol/L、0.1mol/L、0.5mol/L下孵育30分钟,观察红细胞凝集情况。
4. 抗原抗体比例对血凝实验的影响:将抗原抗体混合液按照不同比例(1:1、1:2、1:4、1:8、1:16)进行稀释,观察红细胞凝集情况。
五、实验结果与分析1. 温度对血凝实验的影响:结果表明,在20℃和37℃下,红细胞凝集现象最为明显;在4℃和50℃下,红细胞凝集现象不明显。
这说明温度对血凝实验结果有显著影响,最适宜的温度为20℃~37℃。
2. pH值对血凝实验的影响:结果表明,在pH 7.0下,红细胞凝集现象最为明显;在pH 4.0和9.0下,红细胞凝集现象不明显。
血凝实验报告作业
一、实验目的本实验旨在了解病毒血凝现象及其抑制原理,通过观察和记录病毒对动物红细胞的凝集作用,以及通过加入特异性抗体来抑制这种凝集作用,从而探讨病毒与抗体的相互作用。
二、实验原理1. 病毒血凝现象:某些病毒能够吸附在红细胞表面,导致红细胞发生凝集现象。
这种现象称为病毒血凝。
血凝现象可用于检测病毒的存在和鉴定病毒。
2. 血凝抑制试验:通过加入特异性抗体来阻断病毒与红细胞表面的结合,从而抑制血凝现象。
血凝抑制试验可用于检测病毒抗体水平和鉴定病毒。
三、实验材料1. 试剂:病毒悬液、鸡红细胞、生理盐水、抗体、PBS缓冲液、1%鸡红细胞悬液。
2. 仪器:微量移液器、酶标板、振荡器、显微镜。
四、实验方法1. 病毒血凝试验:(1)取96孔酶标板,每孔加入25μl生理盐水。
(2)在第一孔中加入25μl病毒悬液,混匀后,从第一孔吸取25μl加到第二孔,以此类推,进行倍比稀释至第二排最后一孔。
(3)弃去最后一孔的25μl。
(4)向每孔中加入25μl 1%鸡红细胞悬液。
(5)将酶标板置于振荡器上振荡10秒,室温静置30分钟。
(6)观察红细胞凝集现象。
2. 血凝抑制试验:(1)取96孔酶标板,每孔加入25μl生理盐水。
(2)在第一孔中加入25μl病毒悬液,混匀后,从第一孔吸取25μl加到第二孔,以此类推,进行倍比稀释至第二排最后一孔。
(3)弃去最后一孔的25μl。
(4)向每孔中加入25μl抗体,混匀后,在第一孔中加入25μl病毒悬液,混匀后,从第一孔吸取25μl加到第二孔,以此类推,进行倍比稀释至第二排最后一孔。
(5)弃去最后一孔的25μl。
(6)向每孔中加入25μl 1%鸡红细胞悬液。
(7)将酶标板置于振荡器上振荡10秒,室温静置30分钟。
(8)观察红细胞凝集现象。
五、实验结果1. 病毒血凝试验:根据红细胞凝集程度,记录每个孔的凝集结果。
2. 血凝抑制试验:根据红细胞凝集程度,记录每个孔的凝集结果。
六、实验分析1. 病毒血凝试验:通过观察红细胞凝集现象,判断病毒的存在和鉴定病毒。
血凝抑制实验报告6篇
血凝抑制实验报告6篇血凝抑制实验报告 (1)一、实验目的1、了解CA6140车床的总体布局以及主要技术性能指标。
2、了解CA6140车床的传动路线,理解传动过程中的变速原理。
3、了解主轴箱、进给箱、溜板箱等主要箱体不见的内部结构,理解其中操纵机构的工作原理。
4、了解CA6140车床上卡盘、刀架、尾座、挂轮架、丝杠和光杆等主要零部件的构造和功能,理解其工作原理。
二、实验设备及仪器CA6140车床、三爪卡盘、卡盘扳手、刀架扳手、尾座扳手、内六角扳手、活动扳手、卷尺。
三、实验原理和方法通过现场教学与实验相结合的方式让学生通过对CA6140车床的解剖、观察和分析,提高对机床的感性认识,加深对课堂所学理论知识的理解。
重点认识和了解以下六个方面的内容。
1、CA6140普通车床的布局CA6140是一种中等精度的卧式车床,适合加工各种回转表面的轴类、筒类和盘类零件,也可以加工各种常用的公制螺纹、英制螺纹、模数螺纹和径节螺纹。
CA6140 车床的加工精度适中,加工范围宽,通用性强,是一种最常用的机械加工设备。
CA6140车床的结构布局参见教材,学生可以通过与实物对照,来熟悉CA6140车床各部件的名称,了解各部件的功能及布局。
2、CA6140普通车床的主要技术性能指标在本实验中,通过对车床进行实际测量或演示,了解车床的下述技术性能指标。
(1)床身上最大工件回转直径(2)刀架上最大工件回转直径(3)最大工件长度(4)最大车削长度(5)主轴内孔直径(6)主轴正转与反转的级数及范围(7)纵向与横向进给量的级数及范围(8)车削螺纹的种类及范围3、CA6140普通车床的主轴箱主轴箱是车床中最重要的一个箱体部件,工作时工件的旋转运动和车刀的自动纵、横进给运动都要通过主轴箱传递。
了解车床的工作原理,首先应从了解主轴箱的工作原理开始。
对主轴箱的认识应着重从以下几个方面进行观察和了解。
1)卸荷式带轮2)双向片式摩擦离合器3)变速操纵机构4)主轴运动的传动路线5)主轴箱内的润滑4.CA6140普通车床的进给箱进给箱是调节自动进给速度和改变进给方向的专门部件。
血凝与血凝抑制实验-
❖灭活疫苗(激发体液免疫) ❖活疫苗(激发体液免疫、细胞免疫和局部
粘膜免疫) ❖ I系苗、II系苗、III系苗、IV系苗和V4弱
毒苗 ❖ HI抗体检测: ❖ 种鸡》1: 64;商品鸡》1: 16
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首免时间: 避开母源抗体的干扰 首免日龄=4.5(1日龄HI对数值-4)+5 4.5 : 母源抗体的半衰期 举例: HI=1: 64 首免时间=4.5(6-4)+5=14日龄
倍比稀释至第11孔,最后弃50ul 3、每孔加入1%鸡红细胞悬液50ul 4、轻轻振荡均匀,后放于室温或37℃中静置
30分钟 5.结果判定
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大家应该也有点累了, 稍作休息
大家有疑问的, 可以询问和交流
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血凝效价测定
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结果判定标准
1、++++:红细胞呈细沙样均匀铺于孔底,即100 %凝集; 2、+++:红细胞均匀铺于孔底,当边缘不整齐而 稍向孔底集中,即75%凝集; 3、 ++ :红细胞形成一个环状,四周有凝集块,即 50%凝集; 4、 + :红细胞于孔底形成圆团,边缘不够光滑,四 周稍有凝集块,即25%凝集; 5.- :红细胞于孔底形成圆团,边缘光滑整齐,即无 凝集;
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1.概 述
ND是由ND病毒(Newcastle disease Virus, NDV) 引起的高度接触性和高度毁灭性的急性败血性传 染病。 1926年首先发生于印尼, 同年发现于英国新城 我国1928年有该病记载 是当今全球范围内最严重的家禽传染病之一 被国际兽疫局(OIE) 列为A类传染病
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血凝价的判定
以出现++(50%凝集)的抗原最高稀释 倍数为该抗原的血凝价(1:128)。 50ul 1:256稀释的病毒抗原为该抗原的一 个血凝单位。
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血凝抑制实验报告【导语】实验报告是把实验的目的、方法、过程、结果等记录下来,经过整理,写成的书面汇报。
以下是文库小编整理的血凝抑制实验报告,供大家借鉴!【篇一】血凝抑制实验报告禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测,也可用于判断未使用疫苗群体的感染状态等。
该试验是目前世界卫生组织和国际动物健康组织进行全球流感监测所普遍采用的方法,而且因其具有经济、快速、可靠、操作简便、能够处理大量的样品,并能在短时间内报告禽流感抗体水平等优点,已经成为当前基层兽医实验室禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法。
但因该试验受人为操作影响较大,经常因操作不规范、不严谨等造成结果偏差大、重复性差等问题,现根据几年来的工作经验对该试验过程中应注意的事项做一探讨。
一、血凝试验操作程序1、取96孔90°V形酶标板,用微量移液器在第一至第五排的1~12孔每孔加25μLPBS液。
2、吸取25μL标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。
3、从第1孔吸取25μL混匀后的抗原液加到第2孔中,混匀后吸取25μL 加入到第3孔中,依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔,最后弃去25μL。
第三排孔至第四排孔同上操作。
4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25μL1%的鸡红细胞悬液。
5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒,室温(20-25℃)静置30min 观察结果(如果环境温度太高,可置4℃环境下)。
6、结果判定:将板作45°倾斜,观察红细胞是否呈泪滴状流淌。
以完全凝集(不流淌)的抗原或病毒稀释倍数为1个血凝单位(HAU)二、血凝抑制试验操作程序1、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。
(即1HAU抗原除以4)2、取96孔V形酶标板,用移液器在第1~12孔各加入25μLPBS。
3、在第1孔加入25μL被检血清,充分混匀后移出25μL加至第2孔,依次类推,倍比稀释至第12孔,弃去25μL。
4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清(各做两份),作对照孔。
5、在第1~12孔各加入25μL4单位抗原,置于微量振荡器上轻轻混匀,室温20-25℃下静置30min。
6、每孔加入25μL1%的鸡红细胞悬液。
置于微量振荡器上轻轻混匀,室温(20-25℃)静置40min后观察结果,若环境温度过高,可于4℃条件下进行,红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。
7、结果判定:只有阴性对照孔血清滴度不大于2log2,阳性对照孔误差不超过1个滴度,试验结果才有效。
将酶标板作45°倾斜,以完全抑制红细胞凝集的稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。
当被检血清效价大于等于4log2,判为禽流感抗体阳性。
三、试验过程中的注意事项1样品的保存及试验前处理1.1采集的血液样品应及时分离血清,分装至离心管中,标记清楚,离心后吸出血清,对应编号冷藏送检,并禁止运输过程中剧烈震动。
1.2一般情况下,在5天内检测的样品可放置在4℃的冰箱中冷藏,否则低温冷冻保存。
1.3在检测前血清样品应充分混匀,混匀时采用上下缓慢颠倒几次的方法即可,切忌剧烈振荡而引起产生气泡及血清中蛋白变性。
1.4对出现胶冻状的血清样品,可采用反复搅动几下再离心的方法有助于缓解该状态。
胶状物是含纤维蛋白和纤维蛋白原的血清,可能是由于放置时间不够造成的血清未完全析出状态。
不建议直接吸取其中少量的清亮血清。
1.5水禽等样品为排除非特异性反应,还应相应进行灭能反应。
具体操作方法:56℃水浴锅30min或加等量10%鸡红细胞,轻摇后静置30分钟,离心,收集上清液即可。
2器材的选择2.1酶标板的选择:建议使用96孔90°V型板进行试验,通过反复试验证明:90°V型板相对于110°板及130°板来讲,具有红细胞沉降速度快,产生的凝集图像清晰、结果容易判定等优点。
2.2移液枪的选择及使用:①单道、多道可调微量移液枪应选择合适的量程,以便精确度的提高。
②使用时应采用一档吸液二档排液的方法。
吸取液体时,枪头要深入液下缓慢平稳吸液。
加缓冲液时应加在板孔底部。
倍比稀释血清时,应每孔至少反复吹吸6次,以便混合均匀,还应注意尽量避免产生泡沫引起混合不均。
加抗原及红细胞时应在板内液面上方加样,以免交叉污染,影响试验结果。
③加样、倍比稀释时应高度集中注意力,以免漏加、重复加样等。
3试剂的保存及配置3.1禽流感血凝抑制试验所用的抗原、阳性血清应严格按照说明书的要求进行保存和配置,试验前应提前将其恢复至室内温。
抗原的保存温度为-20℃,反复冻融会降低抗原的滴度,应避免反复冻融。
3.2PH7.2、0.01mol/L的PBS液的制备。
①应尽量现用现配。
②每次使用前应测PH值,以免时间过长而导致PH值发生改变。
③由于PH试纸跨度范围偏大,PH值不易准确介定,因此采用酸度计准确测量PH值,以提高试验的精确度。
④全部试验均采用同一种稀释液。
3.31%红细胞的制备。
①为避免有些鸡只的红细胞有自凝现象,因此配制1%红细胞悬液时应选择采取2-3只SPF鸡或未进行过任何免疫过的成年公鸡血液。
当然采血的前提条件是要按十分之一采血量比例在一次性注射器中加入抗凝剂,如肝素、枸椽酸钠、柠檬酸钠等。
②采血完毕后分装至2ml容量的圆底离心管中,因为通过2ml与1.5ml 两种容量离心管相比较,放入1.5ml尖底离心管中的话,离心后,离心管底部红细胞不易与加入的PBS液混匀,易沉积在管底部,达不到洗脱干净的目的。
③经20xx~3000r/min,5~10min,弃去上液和红细胞上层的白细胞薄膜,再加入十倍以上血量的PBS液,上下缓慢颠倒(切忌用力过大使红细胞破裂),使其充分混匀,再离心弃去上清液,反复几次直至上清液清亮透明为止。
④在加红细胞过程中还须不断轻摇以确保红细胞均匀,使其每孔加入相同数量的红细胞。
⑤制备好的红细胞液如果放置后上清液变红,说明有溶血,不可再使用。
3.4抗原液的配制①先做血凝试验测定效价,以抗原与红细胞完全凝集的孔为1HUA抗原,配制4HUA抗原应往前推算两孔,即除以4后的值。
②每次做试验前,必须重新检测禽流感抗原的血凝效价,以免效价发生改变而导致抗原稀释倍数不准确,从而导致试验结果不准确。
③为保证配制的抗原准确,还要进行抗原回滴试验。
具体方法:做二排抗原回滴,在两排的第1~8孔各加25微升PBS,取4HAU抗原25微升加在两排的第1、第2孔,混匀,从第2孔倍比稀释至第4孔,弃去25微升,另一排同样。
从第2至第8孔补25微升PBS,以保持75微升总量不变,另一排同样。
两排的第1至第8孔各加25微升1%红细胞,震荡10秒钟。
静置30分钟观察结果。
这样在第1孔为4HAU抗原,第2孔为2HAU抗原,第3孔为1HAU抗原,第4孔为1/2HAU抗原,均为75微升总量,第5至第8孔为空白对照。
如果抗原回滴试验不成立,应相应调整抗原浓度直至回滴试验成立。
因为如果抗原浓度过高,则所测定的抗体效价水平偏低,如果抗原浓度过低,则所测定的效价偏高。
所以不调整抗原浓度至实验成立的话会对结果有很大影响。
4结果的判定每次试验必须设阳性及阴性(空白)对照血清,判别试验是否成立。
判读结果时,将酶标板倾斜45°,以孔底沉淀的红细胞流动性好,呈泪珠样流淌,边缘无凝集颗粒为凝集完全抑制。
5试验器具的清洗每次试验完毕后,应将酶标板中液体甩净,然后用自来水反复冲净每个孔,再放入3%NaOH中4小时,清水反复冲净,再放入3%Hcl中4小时,清水反复冲净,再用蒸馏水反复冲洗几次,甩干水份,入干燥箱中干燥备用。
实验用烧杯、加样槽、量筒等也应充分洗净、干燥。
以免器具内有杂物、污物以及残留物从而影响试验结果。
四、小结在进行禽流感血凝抑制试验时,应充分考虑到各方面的影响因素,提供的检测结果才会真实可靠,准确掌握禽类的免疫抗体水平,进而为科学防控禽流感提供理论依据。
【篇二】血凝抑制实验报告随着养殖业的飞速发展和广大养殖户科学意识的不断提高,人们普遍认识到实验室检测技术在临床应用的重要性。
下面简单介绍一下鸡新城疫微量血凝试验和血凝抑制试验的注意事项及操作方法。
应用:用于新城疫、产蛋下降综合征和传梁性支气管炎等的母源抗体的检测、雏鸡首免日龄的确定、疫苗免疫后的免疫应答的监测、临床鸡病的鉴别诊断等。
注意事项:一、样本要具有代表性:所采样本要能代表整体,通常采用四角加中间的随机取样法,并且确定适当的样品数量,一般1000只以下的鸡群采样率在2~5%;5000只以下1~2%;5000只以上0.5~1%。
对产蛋期间的鸡群可采鸡蛋;对雏鸡或青年鸡,可采血。
方法是:取青霉素小瓶,洗净后用蒸馏水冲洗、控干水分,并注意不要用消毒剂,以免影响结果。
每只鸡采血量在1ml左右,不低于1ml,在室温下静置至血清自然析出。
二、四单位抗原的准确性:要获得准确的监测效果,先做红血球的凝集试验,即测得抗原的血凝价,尔后前移2孔作为四单位抗原的稀释度。
三、红血球洗脱的充分性:原则上,新城疫检测所用的红血球应来源于非疫苗免疫过的健康公鸡,但实际上却多采用免疫过疫苗的健康公鸡,有时甚至是病鸡。
因此,对红血球的洗脱的次数要多、要充分,并注意转速和时间,通常采用五次变速离心法:前四次为每分钟1500转,每次5分钟,最后一次为每分钟3000转,持续7~8分钟。
另外,洗红血球过程中,应注意动作要轻,玻璃仪器之间尽量减少碰撞,以免造成红血球破裂而影响结果。
四、结果判定的及时性:检测中,每次试验均应设抗原与生理盐水对照,加入红血球后,每隔5分钟观察一次,一旦两列对照孔图像清晰地显示出来时,应立即对样本进行结果判定,过早过晚都会影响判定结果的准确性。
血凝与血凝抑制试验的操作方法:一、材料与仪器:新城疫抗原、1%鸡红血球、抗凝剂、生理盐水、被检血清、离心机、吸管、滴管、洗耳球、烧杯、量筒、注射器、长针头、96孔V型医用血凝板、微量移液器、微量振荡器、恒温培养箱、冰箱等。
二、方法:1%鸡红血球的制备:1.用长针刺入鸡心脏或翅下静脉,采血,采血量视用量而定,5%抗凝剂与全血的比例为1∶3~4。
2.洗血球:共洗4~5次,每次5~8分钟,红血球与生理盐水的比例至少为1∶2~3。
离心机转速为每分钟1500~3000转,最后倾去上清。
3.吸红血球泥1ml加生理盐水99ml,配成1%红血球备用。
三、血凝试验:1.血凝板上12个孔内全部加入生理盐水,每孔0.05ml,吸等量新城疫抗原于第一孔内,混匀后吸出同量于第二孔内混匀,以此类推稀释至第11孔,并弃去0.05ml,留第12孔作为生理盐水对照,然后全部孔内加入1%鸡红血球。
2.将血凝板置于振荡器上振荡1~2分钟,使材料充分混均,放入恒温培养箱,每5分钟观察一次,至10~15分钟取出,一般以生理盐水对照孔的图象清析地出现为准。