《优良菌种的选育》PPT课件
优良菌种选育(杂交育种).
酵母菌的杂交育种
双单特性:存在单倍体和二倍体的生活史, 二倍体生活力强,生产能力高,可 通过杂交得二倍体来育种。 方法:获单倍体细胞进行杂交。 杂交方式: 孢子与孢子; 孢子与单倍体细胞; 单倍体细胞间。
《酵母菌的生活史》
《酵母菌的杂交》
杂交过程包括遗传标记菌株的选择,子囊 孢子诱导、接触、接合、接合子形成,直至 二倍体细胞出芽为止的一系列过程。
混合培养
异核体亲本分离子A Nhomakorabea异核现象
A
结合现象 染色体 连接 染色体 重组 分离
B
B
部分合子
异核系
重组体
《放线菌的杂交技术》
放线菌杂交方法: (一)平板杂交法(测定亲和性) (二)混合培养法 (三)玻璃纸法
《平板杂交法》
大量菌株(A组)与一个共同试验菌株(B)进行杂交 用来检测亲和性
A组 Ap-,phe+ B Ap+,pheA组和B的重组体
《分离子》
• 杂合二倍体经过染色体杂交和单倍化后产生的子细胞, 称为分离子。 • 亲本分离子:基因型和直接亲本一样 • 原养型分离子:同野生型,失去了亲本的营养缺陷型 标记,能在基本培养基上生长。进入筛选程序。 • 异养型分离子 :与两直接亲本的一个相同 亲本 杂合二倍体 分离子
A+BA-B+
A+BA-B+
A+B- + A-B+
A +B +
进入 筛选程序
A+B- or A-B+
名词解释
野生型 营养缺陷型 原养型 异养型 原养型分离子 异养型分离子 亲本分离子 A+B+ A+BA+B+ A+BA+B+ A+BA+BA+B+ A-B+ A-B+
菌种选育实用PPT课件PPT课件
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例:醛肟水解酶的筛选 --Journal of biotechnology 94(2002), 65-72
培养基中含0.05% of Z-PAOx 每隔2-3天移去一半培养物,补充新鲜培养基 不断分析样品,2-3个月后Z-PAOx降低后,稀释分离条菌落
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目的微生物富集方法的研究进展
第一节 微生物的特性及工业微生物的要求
一、微生物的特性 ❖ 有些微生物能在厌氧的条件下生长; ❖ 有些微生物能够利用简单的有机物和无机物满足自身 的生长; ❖ 有些微生物能进行复杂的代谢; ❖ 有些微生物能利用较复杂的化合物; ❖ 有些微生物能在极端的环境下生长。
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二:工业化菌种的要求
1g
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a.倾注平皿分离法 b.涂布平皿分离法
1.稀释平皿分离法
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2.平皿划线分离法 a.分区划线分离法
b.连续划线分离法
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菌落的选出
从产物角度出发 在培养时以产物的形成有目的的设计培养基; 利用简单、快速的鉴定方法,如抗生素。
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目的微生物培养分离
从自然界中分离培养微生物是菌种选育的重要和基础的步骤 。 到 目 前 为 止 , 还 没 有 一 种 分 离 培 养 方 法 能 揭 示 一 个 试 样 中 所
包含的所有微生物总数和种类。 在 任 一 试 样 中 所 存 在 的 微 生 物 仅 为 极 少 数 特 定 种 类 的 菌 株 ;
《优良菌种的选育》课件
生理生化鉴定
通过测定菌种的生理生化指标,如糖发酵试验、 氧化酶试验、氨基酸脱羧酶试验等,对菌种进行 进一步的分类和鉴定。
分子生物学鉴定
利用基因测序、PCR扩增、DNA指纹图谱等技术 ,对菌种的基因组进行分析,从而准确鉴定菌种 的种属和分类地位。
测定菌种在不同环境压力下的存活率 、耐受性等,了解菌种的抗逆性能和 适应性。
05 优良菌种的应用与案例分析
优良菌种在工业生产中的应用
01
02
03
生物能源
利用优良菌种将有机废弃 物转化为生物燃料,如乙 醇、生物柴油等,降低对 化石燃料的依赖。
生物化工
通过优良菌种生产高附加 值的化学品、材料和生物 聚合物,如柠檬酸、聚乳 酸等。
《优良菌种的选育》 ppt课件
目录
Contents
• 优良菌种选育的重要性 • 优良菌种的选育方法 • 优良菌种的保藏与复壮 • 优良菌种的鉴定与评价 • 优良菌种的应用与案例分析
01 优良菌种选育的重要性
菌种选育对生产效率的影响
菌种选育能够提高生产效率
通过选育具有优良性状的菌种,可以缩短发酵周期,提高产物的合成速度,从 而提高生产效率。
生物冶金
利用微生物从矿石中提取 有价值的金属,如铜、钴 等,具有环保和资源可持 续性的优势。
优良菌种在农业生产中的应用
生物肥料
01
通过微生物肥料提高土壤肥力和植物生长,减少化肥使用,降
低环境污染。
生物农药
02
利用有益微生物防治植物病虫害,减少化学农药的使用,保障
食品安全。
生物饲料
《菌种选育》PPT课件
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9
耐高浓度酒精的酵母菌的酒精发酵 能力较高,也适宜提高发酵醪浓度,提 高醪液酒精浓度。
而耐高渗透压的酵母菌株具有积累甘 油的性能,可用于甘油发酵。
耐高酒精度、高渗透压的菌株也可分 别在高浓度酒精或加蔗糖等造成的高渗 环境下一次性筛选获得。
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2)阶梯性筛选法
药物抗性即抗药性突变株可在培养基中 加入一定量的药物或对菌体生长有抑制作 用的代谢物结构类似物来筛选,大量细胞 中少数抗性菌在这种培养基平板上能长出 菌落。但是在相当多的情况下,无法知道 微生物究竟能耐受多少高浓度的药物,这 时,药物抗性突变株的筛选需要应用阶梯 性筛选法。
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27
Avermectin产生菌诱导推理选育
avermectin(AVM)系一簇十六元大环内酯 类抗生素,它含有8个结构相似的组份:A1a、 A1b、A2a、A2b、B1a、B1b、B2a、B2b。8 个组分中B1a为主要有效成份。
Avermecti精n选化课件学ppt 结构
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13
(1)梯度平板法(Gradient plate) 先将10ml左右的一般 固体培养基倒入培养皿中,将皿底斜放,使培养基凝结 成斜面,然后将皿底放平,再倒入7-10ml含适当浓度的 药物的培养基,凝固后放置过夜。由于药物的扩散,上 层培养基越薄的部位,其药物浓度越稀,造成一由稀到 浓的药物浓度渐增的梯度。再将菌液涂布在梯度平板上, 药物低浓度区域菌落密度大,大都为敏感菌,药物高浓 度区域菌落稀疏甚至不长,浓度越高的区域里长出的菌 抗性越强。在同一个平板上可以得到耐药浓度不等的抗 性变异菌株。如果菌体对药物有个耐受临界浓度,则会 形成的明显界线。
菌种的选择PPT课件
在医学研究中的应用
药物筛选
选择具有特定生理功能或药理作用的菌种,能够发现新的药物候选 物或用于药物筛选的模型。
疾病治疗
选择具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等作用的菌种,能够用于疾病治疗和 辅助治疗。
医学研究
选择具有代表性或特殊性的菌种,能够用于医学研究和学术交流,促 进医学领域的发展。
06 展望和未来研究方向
品安全。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
当前研究的挑战和限制
技术难题
当前在菌种选择上仍存在技术难题,如准确识别和筛选有益菌种 的方法尚不成熟。
数据缺乏
对于菌种间的相互作用和生态平衡等方面的数据积累不足,影响了 研究的深入。
伦理问题
在菌种研究中涉及到伦理问题,如人类肠道微生物组研究中的隐私 保护和知情同意等。
未来研究方向和潜在应用
01
02
通过RNA引导的DNA切割酶Cas9,实现对特异DNA序列的精准编辑和敲除。
05 菌种选择的实践应用
在工业生产中的应用
1 2 3
发酵工业
在发酵工业中,选择具有高发酵效率和高产物质 量的菌种,能够提高发酵产物的产量和品质,降 低生产成本。
食品工业
在食品工业中,选择具有优良发酵特性和产物的 菌种,能够生产出各种风味和营养价值的食品, 满足消费者需求。
盐浓度
选择能够在目标盐浓度下生长和代谢的菌种,可 以提高发酵的耐受性和效率。
对抗生素的抗性
抗药性
了解菌种对抗生素的抗性,有助于预防和控制生产过程中的 杂菌污染。
耐药性
选择对常见抗生素具有低耐药性的菌种,可以提高抗生素的 有效性并降低抗药性风险。
04 菌种改良和基因编辑技术
菌种选育的一般流程ppt课件
选育结果
通过基因工程育种和代 谢工程育种等方法,成 功选育出高产谷氨酸的 菌株,谷氨酸的产量和 质量得到显著提高。
实例三:柠檬酸高产菌株的选育
基因工程育种的方法
01
02
03
农杆菌转化法
利用农杆菌感染植物细胞 ,将目的基因导入植物基 因组中,实现遗传转化。
基因枪法
利用基因枪将带有目的基 因的金属微粒直接射入受 体细胞或组织,实现基因 转移。
花粉管通道法
在植物授粉后,利用花粉 管作为通道,将外源DNA 导入受精卵细胞,实现遗 传转化。
基因工程育种的优缺点
杂交育种的优缺点
遗传不稳定
杂交后代的遗传物质来自两个亲 本,容易出现分离和不稳定现象
。
技术难度高
杂交育种需要较高的技术水平和 精细的操作,对实验条件和操作
人员要求较高。
难以预测结果
由于基因互作和环境因素的影响 ,杂交后代的表型难以准确预测
。
06
菌种选育实例分析
实例一:青霉素高产菌株的选育
1 2 3
自然选育的优缺点
优点
简单易行,不需要复杂的仪器设 备;可以筛选出适应特定环境的 优良菌种。
缺点
筛选过程漫长且效率低下;受环 境因素影响大,结果不稳定;无 法对微生物的遗传物质进行精确 改造。
03
诱变育种
诱变育种的原理
80%
基因突变
利用物理、化学或生物因素诱导 生物体发生基因突变,从而产生 新的遗传性状。
打破物种界限
基因工程育种可以克服远缘杂交不亲和的障碍,实现不同物种间基因的转移和 重组。
《菌种的选育》幻灯片
三、筛选微生物代谢产物的目标
• 筛选抑制抗生素抗性菌株的活性物质; • 筛选抗肿瘤、抗病毒的活性物质; • 研究有药理活性的酶抑制剂及免疫调节剂; • 寻找食品工业最好的酵母培养物; • 筛选降解有害物质的微生物以及治疗上具有低
毒、长效的化学药物等。
四、筛选微生物代谢产物的方法
(一)直接方法 为了尽快确定微生物代谢产物的利用前途,在体外
试验测得活性后,可以将培养液的有效成分直接 作用于机体,观察被测样品的疗效。 这种直接确定代谢产物用途的方法亦称动物体内治 疗试验。
(二)间接方法
筛选医用抗生素,可用细茵、真菌、病毒或肿瘤 模型,寻找抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗肿瘤 抗生素、酶抑制剂、免疫制剂等有效物质。
• 其准确的作用机制尚不很清楚,据认为是 伴随着重氮甲烷的生成及在酸性条件下生 成亚硝酸,直接作用于细胞内的DNA复制 系统,从而诱发了变异。
• MNNG的诱变作用随pH的升高而增强。
• (二)操作步骤
• 1.单孢子悬液制备 取斜面,参加6ml 0.1mol /L pH6.0的磷酸缓冲液,用接种环刮下孢子, 振荡试管,立即通过带滤纸漏斗过滤,由此制得 单孢子悬液,假设孢子液浑浊状,其孢子浓度可 达l06个/ml,此为待处理孢子悬液。
一、开发新的代谢产物的途径
(1) 从自然界别离新的微生物菌株,或采用新的检 阅方法筛选新的代谢产物。
(2) 对微生物的代谢产物进展化学修饰。 (3) 利用微生物转化改造代谢产物的构造。 (4) 通过原生质体融合获得新的代谢产物。 (5) DNA重组技术。
二、筛选微生物新的代谢产物 的程序
突变型菌株的筛选
• 与营养缺陷型对应的是野生型。
• 能满足野生型菌株正常生长的培养基称根本培 养基(MM);
菌种选育方法ppt课件
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工程菌不稳定性的原因
工程菌稳定与否,与重组质粒本身的分子组成、宿主细胞生理 和遗传性及环境条件等因素有关。
质粒本身的分子结构:引起工程菌不稳定常常是由于稳定区 受到影响。另外可能由于重组质粒上有重复序列,或与宿主 染色体有部分同源等都会造成质粒的不稳定
B.抗生素依赖变异法 即通过诱变使宿主细胞成为某抗生素的依赖
性突变株,只有存该抗生素存在时宿主细胞才能生长,而重组质粒上含 有该抗生素的非依赖性基因,将重组质粒导入宿主细胞后,所得的克隆 菌就能在不含抗生素的培养基中生长。
C.营养缺陷型法 与上述抗生素依赖变异法相类似。其原理是通过
诱变使宿主细胞染色体缺失生长所必需的某一基因,而将该基因插入到 重组质粒中,然后选择适当组成的培养基使失去重组质粒的细胞不能存 活,而只有含重组质粒的细胞才能生长。
35
重组子筛选-蓝白筛选
36
DNA重组-重组子的筛选及表达菌株的转化
重组质粒的提取 表达菌株感受态细胞的制备 转化及复苏
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外源基因在大肠杆菌中的诱导表达Leabharlann SDS-PAGE 免疫分析
细胞 破碎
蛋白 分离
培养
滤
凝胶
免疫
纸
分析
NC 膜
+
转膜 38
工程菌的稳定性问题
由工程菌产生的珍稀药物如:胰岛素、干扰素、人生长激素、 乙肝表面抗原、人促红细胞生成素(EPO)、重组激酶、集落 刺激因子GM-CSF等,成本大大下降
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菌种退化原因
基因突变 自发负突变 回复突变:生产株成为野生型
分离现象:多核(或单核)但是DNA双链之一发生 突变,随着传代,核发生分离,导致突变基因和未 突变基因的分离。
第三章、优良菌种的选育
第三章、优良菌种的选育导言优良生产菌种应具备的基本特性:(1)生产菌种应具有在较短的发酵周期内产生大量发酵产物的能力。
(2)在发酵过程中不产生或少产生与目标产品相近似的副产物及其它产物。
(3)生长繁殖能力强,有较快的生长速率,产生孢子的菌种应该具有较强的产生孢子能力。
(4)能高效地将原料转化为产品。
(5)具有利用广泛来源原料的能力,并对发酵原料成分的波动敏感性较小。
(6)对需要添加的前体物质有耐受能力,并且不能将这些前体物质作为一般碳源利用。
(前体:)(7)在发酵过程中产生的泡沫要少。
(8)具有抗噬菌体感染的能力。
(9)遗传特性稳定。
3-1自然选育定义:自然突变的结果:自然选育的特点:简单易行,可以纯化菌种,防止菌种退化,稳定产量。
但自然选育的效率低,应该经常跟诱变选育交替使用,提高育种效率。
自然选育的一般程序:3-2诱变选育导言3-2-1诱变育种的原理诱变育种的理论基础是基因突变,突变包括染色体畸变和基因突变两大类。
染色体畸变指的是,染色体或DNA片段发生缺失、易位、逆位、重复等。
基因突变指的是,DNA中的碱基发生变化,即点突变。
过适当的筛选方法获得所需要的高产优质菌种的育种方法。
常用的诱变剂包括物理、化学、生物的三大类。
表3-1所示。
3-2-2诱变育种的基本方式导言3-2-2-1出发菌株的选择进行诱变的出发菌株的性能,对提高诱变效果和效率十分重要。
选择出发诱变菌株的注意事项:诱变育种的程序:3-2-2-2诱变剂的使用方法|------单一诱变剂处理:对野生菌株处理有效。
诱变方法||------复合诱变剂处理:对经过多次诱变处理的老菌株。
复合诱变剂处理|----同一诱变剂多次处理|----两种以上诱变剂先后分别处理|----两种以上诱变剂同时或多次处理举例:青霉菌的选育。
3-2-2-3诱变剂的剂量选择诱变剂的剂量与致死率有关,而致死率又与诱变率有关。
因此,可用致死率作为诱变剂剂量的选择依据。
关系:诱变率随诱变剂剂量的增加而提高,但达到一定程度后,反而下降。
优良菌种选育
第三章工业微生物优良菌种选育从自然界分离所得的野生菌种,不论在产量上或质量上均不适应微生物工程的要求,因此从自然界存在的产生某种代谢产物的菌种,经筛选分离和优良菌选育,已成为微生物工程菌种管理上的必要程序。
故优良菌种的选育是为生产提供各种类型的突变株,大幅度提高菌种产生利用价值代谢产物特别是基因工程,细胞工程和蛋白质工程等较为定向技术的发展,促进菌种选育技术不断更新,进而研制出众多有价值的微生物工程产品。
微生物工程优良菌种的选育方法包含自然选育、诱变选育、抗噬菌体菌种的选育、杂交选育、原生质体融合技术、基因工程技术等等。
微生物工程评价生产菌种优劣的标准和菌种选育工作的研究目标是实现工业化生产。
也就是说,选育的菌种特性能否满足工业化生产的实际需要,是否具有工业化生产价值和实际利用价值。
因此,一株优良的生产菌种应该具备如下的特性:①菌种的生长繁殖能力强,具较强的生长速率,产生孢子的菌种应具有较强的产孢子能力。
这样有利于缩短发酵培养周期,减少种子罐的级数,最终得以减少设备投资和运转费用。
同时,还可以减少菌种在扩大生产过程中可能发生的生产下降,或杂菌污染的可能性。
②菌种的培养基和发酵原料来源广泛、价格便宜、尤其对发酵原料成分的波动敏感性较小。
③对需要添加的前体物质具有耐受能力,且不能将这些前体物质作为一般碳源利用。
④菌种应具有在较短的发酵周期内产生大量发酵产物的能力,高产菌株的应用,可以在不增加投资的情况下,大幅度提高企业的生产能力。
⑤能高效地将原料转化为产品,这样可以降低生产成本,提高产品的市场竟争力。
⑥在发酵过程中不产生或少产生与目标产品性质相近的副产物及其它产物,这样不但可以提高营养物质的有效转化率,还会减少分离纯化的难度,降低成本,提高产品质量。
⑦在发酵过程中产生的泡沫要少,这对提高装料系数,提高单罐产量,降低成本具有重要意义。
⑧具有抗噬菌体感染的能力。
⑨菌株遗传特性稳定,以保证发酵能长期、稳定地进行,有利于实施最佳的工艺控制。
优良菌种的选育
1、原核表达系统
原核生物不适宜表达需后加工处理的那一部分真核基因
优点:简单易行,可与生产同步进行。 优点:简单易行,可与生产同步进行。 缺点:频率低, 次分裂。 缺点:频率低,10-8—10-9 /次分裂。 次分裂
二、诱变选育
诱导微生物发生突变进行的菌种选育, 诱导微生物发生突变进行的菌种选育,包 诱变和筛选两个步骤 两个步骤。 括诱变和筛选两个步骤。 原理:染色体畸变;基因突变。 原理:染色体畸变;基因突变。
④物敏突变: 物敏突变:
如:氟乙酸抑制顺乌头酸酶,氟乙酸敏感突变型, 氟乙酸抑制顺乌头酸酶,氟乙酸敏感突变型, 顺乌头酸酶活性极低,更敏感, 顺乌头酸酶活性极低,更敏感,异柠檬酸产量 柠檬酸积累。 少,柠檬酸积累。
三、杂交育种
长期诱变会使菌种生活能力下降。 长期诱变会使菌种生活能力下降。 借助有性重组, 借助有性重组,使不同菌株的遗传物质 得以交换(获优良性状集中的重组体)。 得以交换(获优良性状集中的重组体)。 1.细菌的杂交育种 细菌的杂交育种
应用:解决了一些药物或材料来源困难, 应用:解决了一些药物或材料来源困难,或制造技术复
杂,或造价昂贵而无法大量生产和应用的问题。 或造价昂贵而无法大量生产和应用的问题。 产生了巨大的经济和社会效益。 产生了巨大的经济和社会效益。 工业生产的意义: 工业生产的意义: 基因的表达产量; 表达产物的稳定性; 基因的表达产量; 表达产物的稳定性; 产物的生物活性; 产物分离纯化。 产物的生物活性; 产物分离纯化。 (一)基因表达系统 从育种的角度考虑,最重要的是目的基因的高效表达 最重要的是目的基因的高效表达。 从育种的角度考虑 最重要的是目的基因的高效表达。 原核表达系统; 真核表达系统 真核表达系统. 1.原核表达系统;2.真核表达系统. 原核表达系统
第4章优良菌种选育
醇
式
互
变
异
构
第4章优良菌种选育
自然选育的一般程序是将菌种制成菌悬 液,用稀释法在固体平板上分离单菌落, 再分别测定单菌落的生产能力,从中选出 高水平菌种。
※自然突变可能会产生两种截然不同的 结果,一种是菌种退化而导致目标产物产量 或质量下降;另一种是对生产有益的突。
第4章优良菌种选育
自然选育是一种简单易性的选育方法,可 以达到纯化菌种、防止菌种退化、稳定生 产、提高产量的目的。
§4 菌种选育
尽管生产菌种最初均是来自于自然界,但天然 菌种的生产性能一般比较低下。优良菌种的选育为 生产提供了各种类型的突变株,大幅度提高了菌种 产生有利用价值代谢产物的水平,还可以改进产品 质量,去除不需要的代谢产物或产生新的代谢产物。
第4章优良菌种选育
特别是基因工程、细胞工程和蛋白质工程等较为定 向技术的发展,使菌种选育技术不断更新,而产生出 众多有价值的微生物工程产品。主要的育种技术包括: –自然选育 –诱变选育 –抗噬菌体菌种的选育 –杂交育种 –原生质体融合技术 –基因工程技术等
第4章优良菌种选育
4.1自然选育
自然选育:不经人工处理,利用微生物的自 然突变进行菌种选育的过程称为自然选育。
一般认为自然突变有两种原因引起,即多 因素低剂量的诱变效应和互变异构效应。
第4章优良菌种选育
多因素低剂量的诱变效应:是指在自然环境中 存在着低剂量的宇宙射线,各种短波辐射, 低剂量的诱变物质,和微生物自身代谢产生 的诱变物质等的作用引起的突变。
第4章优良菌种选育
4.2.1 诱变育种的原理
诱变育种的理论基础是基因突变,突变主 要包括染色体畸变和基因突变两大类。
诱变育种:就是利用各种物理化学诱变剂处 理微生物细胞,提高基因突变频率,再通过 适当的筛选方法获得所需要的高产优质菌种。
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一、遗传与变异的概念
遗传和变异是生物体的最本质的属性之一。 遗传(heredity):亲代生物的性状在子代得到表现;亲代生物传
递给子代一套实现与其相同形状的遗传信息。特点:具 稳定性。
遗传型(genotype):又称基因型,指某一生物个体所含有的 全部基因的总和;------是一种内在可能性或潜力。
菌种的复壮措施: ①纯种分离:(平板划线法、涂布法、倾注法、单细 胞挑取法等)。 ②通过寄主体内生长进行复壮(如Bacillus huringiensis 的复壮) ; ③淘汰已衰退的个体(采用比较激烈的理化条件进行 处理,以杀死生命力较差的已衰退个体)。 ④采用有效的菌种保藏方法。
纯化分离的方法
生产中把变异细胞在群体中尚未占主导的 现象称为退化现象.
把变异细胞在群体中已占主导地位的现 象称为变异现象.
当群体中出现变异现象时,则要把群体中 的大量变异细胞除掉,只留下少数优良细胞进 行培育,这种操作叫做自然选育.
菌种的复壮(rejuvenation):使衰退的菌种恢复原来 优良性状。 狭义的复壮是指在菌种已发生衰退的情况下,通过纯 种分离和生产性能测定等方法,从衰退的群体中找出 未衰退的个体,以达到恢复该菌原有典型性状的措施; 广义的复壮是指在菌种的生产性能未衰退前就有意识 的经常、进行纯种的分离和生产性能测定工作,以期 菌种的生产性能逐步提高。实际上是利用自发突变 (正变)不断地从生产中选种
第七章 优良菌种的选育
授课教师:贺立虎
理想的工业发酵菌种应符合以下要求:
①遗传性状稳定; ②生长速度快,不易被噬菌体等异种微生物污染; ③目标产物的产量尽可能接近理论转化率; ④目标产物最好能分泌到细胞外,以降低产物抑制并利 于分离; ⑤尽可能减少产物类似物的产量,以提高目标产物的产 量并利于分离; ⑥培养基成分简单、来源广、价格低廉; ⑦对温度、pH、离子强度、剪切力等环境因素不敏感; ⑧对溶氧的要求低,便于培养及降低能耗。
❖ 菌种选育,就是利用微生物遗传变异的特性,采用各种手段, 改变菌种的遗传性状,经筛选获得新的适合生产的菌株,以 稳定提高抗生素生产或得到新的抗生素产品。
❖ 任何抗生素要不断提高生产水平,菌种选育是一重要手段, 一些高产菌株在传代和保藏过程中,不可避免地会逐步发生 退化,这也需要通过菌种选育来复壮菌种
1.单孢子分离
微生物群体中存在不同类型菌落的组成,并认为 是由一些亚种混合组成的。
其原因是遗传基因型与环境因素共同作用的结果。 因此,不可能得到绝对纯一的菌种。但通过选择可 以得到相对纯一的群体。
纯种的标准有两条:
一是群体中存在的不同菌落类型数量限制在相对 低的水平,例如限制在3~5种类型以下。
二是群体中起主导作用的菌型的比例数应占绝对 优势,如达到90%以上,或更高的比例,如98%、99 %以上。
代谢
遗传型 + 环境条件
发育
表型
表型(phenotype):指生物体所具有的一切外表特征和内在 特性的总和;------是一种现实存在,是具一定遗传型的 生物在一定条件下所表现出的具体性状。
遗传与变异的概念
变异(variation):生物体在外因或内因的作用下,遗传 物质的结构或数量发生改变。 变异的特点: a.在群体中以极低的几率出现(一般为10-6~10-10); b.形状变化的幅度大; c. 变化后形成的新性状是稳定的,可遗传的。
后来在病毒重建实验和噬菌体感染实验中又进一步 证明绝大多数生物的遗传物质都是DNA,只有一小部分 病毒(包括动物、植物病毒和噬菌体)没有DNA,它们的 遗传物质是核糖核酸(RNA)。
第二节 菌种复壮与自然选育
在微生物的遗传与变异这对矛盾中,遗传是相对 的,而变异是绝对的。
抗生素产生菌的变异主要是负变异,其表现为: a.产量低, b.产孢子能力减退, c.菌落形态不纯, d.存活能力下降, e.产色素能力改变, f.代谢活动减慢, g.抵抗不良环境能力减弱 这些变异是自然发生的不定向的、缓慢进行的, 是一个由量变到质变的过程.
杆菌素;在37℃下培养,不产生色素;如果重新将温 度降ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ25℃,又恢复产色素的能力。
二、 遗传变异的物质基础
1.遗传基因 早在1865年,遗传学的鼻祖孟德尔用豌豆做遗传学 试验,得出了重要的遗传学规律—著名的分离定律和 自由组合定律,揭示了遗传的本质: 性状是由遗传因子决定的,性状的遗传是由于。遗传 因子在子代和亲代间的传递。 孟德尔的遗传因子后人改称为遗传基因。 孟德尔的分离定律和自由组合定律,就是成对基因在 杂合状态中保持相对独立性,在形成配子时,成对基 因彼此分开,分离到不同的配子中去,两种配子数相 等,配子的结合随机;两对或多对基因形成的配子, 是自由组合的。。
❖ 菌种选育常用的方法有:菌种的自然选育、诱变育种、菌种 的基因重组。
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第一节 微生物的遗传和变异
研究微生物遗传学的意义
微生物是研究现代遗传学和其它许多主要的生物 学基本理论问题中最热衷的研究对象。
对微生物遗传规律的深入研究,不仅促进了现代 分子生物学和生物工程学的发展,而且为育种 工作提供了丰富的理论基础,促使育种工作从 不自觉到自觉、从低效到高效、从随机到定向、 从近缘杂交到远缘杂交的方向发展。
2.基因的物质基础
孟德尔不仅发现基因是生物体遗传的基本单位,并 认定基因是由生殖细胞来传递的。当细胞核中的染色体 被发现以后,人们认识到基因的传递规律和细胞分裂时 染色体的行为是一致的。
1910年摩尔根用果蝇进行的遗传学实验证实了基因 在染色体上,进而把基因和染色体联系了起来。
1928年格里费斯的转化实验证明了染色体的化学成 分脱氧核糖核酸(DNA)是遗传物质。
遗传与变异的概念
饰变(modification):指不涉及遗传物质结构改变而只 发生在转录、转译水平上的表型变化。特点是:
a.几乎整个群体中的每一个个体都发生同样的变化; b.性状变化的幅度小; c.因遗传物质不变,故饰变是不遗传的。引起饰变的因素
消失后,表型即可恢复。 例如:粘质沙雷氏菌:在25℃下培养,产生深红色的灵