DNA分子标记技术研究进展
dna分子标记技术及其在植物育种中的应用
dna分子标记技术及其在植物育种中的应用
DNA分子标记技术是一项挖掘植物DNA组的分子先导技术，它大
大提高了植物育种的效率。
该技术可以快速辨别特定品种的遗传信息，为植物育种和改良提供精确有效的工具。
DNA分子标记技术是由扩增子链式反应（PCR）和后续诸多分析技术（如电泳分析、杂交分析、SNP分析等）构成的。
PCR 可以用来检测和分析特定 DNA 的序列，它可以将一个极小的 DNA 方面成期，从而
使植物育种避免复杂和费时的繁殖过程。
这种技术还可以跨区域筛选
具有抗逆性的基因，从而获得超高产的品种，提高植物适应恶劣环境
的能力。
借助DNA分子标记技术，植物育种者可以快速准确的筛选目标遗
传特性，优化作物基因池，缩短作物改良的周期，从而实现作物质量
和产量的提升，满足社会逐渐增长的作物需求。
DNA分子标记在中药材鉴定中的应用研究
DNA分子标记在中药材鉴定中的应用研究一、本文概述中药材作为中华传统医学的瑰宝，其品质与真伪直接关系到患者的疗效与健康。
然而，随着市场需求的增加，中药材的掺假、混淆现象日益严重，因此，中药材的鉴定成为了中医药领域的重要研究课题。
近年来，DNA分子标记技术的快速发展为中药材鉴定提供了新的解决方案。
本文旨在探讨DNA分子标记在中药材鉴定中的应用，以期为提高中药材品质、保障患者用药安全提供科学依据。
本文首先介绍了中药材鉴定的传统方法及其局限性，包括形态学鉴定、化学鉴定等，并指出了这些方法在面临复杂中药材鉴定时的不足。
随后，详细介绍了DNA分子标记技术的基本原理、分类及其在中药材鉴定中的应用案例。
通过对比分析，本文阐述了DNA分子标记技术在中药材鉴定中的优势，如准确性高、稳定性好、操作简便等。
在此基础上，本文进一步探讨了DNA分子标记技术在中药材鉴定中的具体应用，包括中药材真伪鉴别、品种鉴定、产地溯源等方面。
本文也关注了DNA分子标记技术在应用中面临的挑战与问题，如技术成本、操作标准化等，并提出了相应的解决策略。
本文总结了DNA分子标记技术在中药材鉴定中的应用价值及前景，认为随着技术的不断完善与成本的降低，DNA分子标记技术将在中药材鉴定中发挥越来越重要的作用，为保障中药材品质、促进中医药产业健康发展提供有力支持。
二、DNA分子标记技术概述DNA分子标记技术，也被称为DNA指纹技术，是一种通过直接分析生物体DNA序列的多态性来鉴定生物种类和个体间遗传差异的方法。
该技术基于DNA分子的独特性质，如高度的稳定性、个体间的特异性以及可遗传性等，为中药材鉴定提供了新的视角和有效手段。
DNA分子标记技术的核心在于通过特定的方法识别DNA序列中的多态性，这些多态性可以是单核苷酸多态性（SNP）、插入或删除、倒位、易位等。
这些多态性在DNA序列中形成独特的“标记”，可以作为鉴定生物种类和个体间遗传关系的依据。
在中药材鉴定中，DNA分子标记技术具有显著的优势。
DNA分子标记技术的研究与应用
DNA分子标记技术的研究与应用一、本文概述本文旨在对DNA分子标记技术的研究与应用进行全面的概述。
DNA分子标记技术作为现代分子生物学领域的一项重要工具，已经在生物学研究、遗传育种、疾病诊断等多个领域展现出广泛的应用前景。
本文首先介绍了DNA分子标记技术的基本概念、发展历程以及主要类型，包括限制性片段长度多态性（RFLP）、随机扩增多态性DNA（RAPD）、扩增片段长度多态性（AFLP）和单核苷酸多态性（SNP）等。
接着，文章详细阐述了这些技术在不同领域中的具体应用，包括基因克隆、基因定位、遗传图谱构建、物种亲缘关系分析、基因表达和调控研究等。
本文还讨论了DNA分子标记技术在实践应用中面临的挑战和未来发展趋势，如高通量测序技术的结合、大数据分析的利用以及生物信息学的进一步发展等。
通过本文的综述，旨在为相关领域的研究人员和技术人员提供一个全面、深入的了解DNA分子标记技术的平台，以促进该技术的进一步发展和应用。
二、DNA分子标记技术的基本原理与类型DNA分子标记技术是一种直接以DNA多态性为基础的遗传标记技术，其基本原理在于利用DNA分子在基因组中存在的丰富的多态性，通过特定的技术手段将这些多态性转化为可识别的遗传信息，从而实现对生物个体或群体的遗传差异进行精确分析。
这种技术以其高度的准确性、稳定性和多态性，在生物学研究、遗传育种、种质鉴定、基因定位、分子育种、疾病诊断等领域中得到了广泛应用。
基于DNA-DNA杂交的分子标记技术：这类技术主要包括限制性片段长度多态性（RFLP）和DNA指纹技术。
它们通过比较不同个体或群体间DNA片段的杂交信号差异，揭示出基因组中的多态性。
这类标记具有稳定性高、共显性遗传等特点，但操作复杂、成本较高。
基于PCR的分子标记技术：随着聚合酶链式反应（PCR）技术的出现和发展，基于PCR的分子标记技术应运而生。
这类技术包括随机扩增多态性DNA（RAPD）、扩增片段长度多态性（AFLP）和序列特征化扩增区域（SCAR）等。
dna分子标记技术及其在蔬菜遗传育种研究中的应用
dna分子标记技术及其在蔬菜遗传育种研究中的应用
DNA分子标记技术是一种通过分析DNA序列上的特定标记位点来研究物种的遗传变异和亲缘关系的技术。
在蔬菜遗传育种研究中，DNA分子标记技术被广泛应用于以下方面：
1. 遗传多样性研究：DNA分子标记技术可以通过分析不同蔬菜品种或不同个体之间的DNA序列差异来评估物种的遗传多样性。
通过比较不同品种或个体之间的DNA分子标记，可以确定它们之间的亲缘关系和遗传距离。
2. 基因定位和图谱构建：DNA分子标记技术可以用来帮助研究人员定位蔬菜的重要遗传特征或性状的基因。
通过分析与目标性状相关联的DNA分子标记的位置，可以确定这些标记位点与目标基因的连锁关系，并构建相应的遗传图谱。
3. 品种鉴定和纯度鉴定：DNA分子标记技术可以用来对蔬菜品种进行鉴定和纯度测试。
通过与已知标准品种的DNA序列进行比对，可以确定蔬菜品种的基因组组成，并判断其纯度和真实性。
4. 分子辅助选择育种：DNA分子标记技术可以与传统育种方法相结合，进行分子辅助选择育种。
通过对目标性状相关的DNA分子标记进行筛选、分析和评价，可以在早期育种阶段就有效地选择与目标性状相关的优良个体，提高育种效率。
总之，DNA分子标记技术在蔬菜遗传育种研究中发挥重要作
用，可以帮助研究人员分析遗传多样性、定位遗传特征、鉴定品种和辅助选择育种，为蔬菜遗传改良提供科学依据。
DNA分子标记技术在水产动物中的研究综述
DNA分子标记技术在水产动物中的研究综述摘要：分子生物学的飞速发展及其各项技术的广泛应用,对水产动物的研究工作产生了很大的影响.DNA分子标记在水产动物研究中的广泛应用,对于优良品种的选育、亲缘关系和品系家系的鉴定、重要经济性状基因的定位克隆以及大规模疾病的防治有重要的作用。
关键词：DNA分子标记；RFLP；RAPD；AFLP；水产动物近年来，由于物种种质退化、病害频繁、养殖环境恶化等问题，严重制约了水产养殖业的发展。
将分子标记技术广泛的应用到水产动物研究，不仅有利于选育优良品种和对养殖品种的遗传改良、野生种质资源的恢复、保护，而且还有利于防止种质退化，使水产动物养殖走上健康养殖的道路。
当前，RFLP、RAPD、AFLP 和微卫星DNA等分子标记技术，已被广泛地应用到水产动物遗传育种、疾病检测及系统发育领域的研究中。
1DNA分子标记技术DNA分子标记技术是以基因组DNA的多态性为基础的一种新型遗传标记技术，它可以直接反映生物个体在DNA水平上的差异。
与传统的遗传标记相比，DNA 分子标记具有标记位点多、遗传信息量大、实验重复性强、不受生物的年龄、发育阶段、性别和养殖环境条件的影响等特性，因此倍受遗传学家和育种学家的青睐，已被广泛地应用于生物的基因定位、基因克隆、遗传育种等诸多方面，并成为分子生物学与分子遗传学研究的主要内容之一。
如今，应用于遗传育种领域的DNA分子标记技术主要有：RFLP；RAPD；AFLP；微卫星DNA。
2 几种DNA分子技术在水产动物中的研究进展2.1 RAPD标记2.1.1 RAPD标记的原理及其特点RAPD即随机增多态性DNA（Random Amplified Polymorphic DNA），是在PCR 基础上发展起来的一项分子标记技术，是由美国科学家J.Williams和J.Welsh 两个研究小组于1990年几乎同时建立的。
基本原理是用一系列（通常为数百个）不同的碱基顺序随机排列的寡核苷酸单链（一般10bp）作为引物，对所研究的基因组DNA进行PCR扩增。
DNA分子标记技术在药用植物研究方面的应用
DNA分子标记技术在药用植物研究方面的应用
一、绪论
药用植物的研究对于促进人类健康有着重要的作用。
在现代药学的发展中，DNA分子标记技术已经成为一种重要的技术，它可以帮助我们更好地利用药用植物，也可以更好地了解药用植物的分子基础。
本文将从以下几方面探讨DNA分子标记技术在药用植物研究方面的应用：
1、DNA分子标记技术的基本原理
2、DNA分子标记技术的种类
3、DNA分子标记技术在药用植物研究中的应用
4、DNA分子标记技术的发展前景
二、DNA分子标记技术的基本原理
DNA分子标记技术是一种利用DNA来识别和定位细胞或分子的技术。
它可以通过检测特定的DNA序列，从而让研究者更好地了解一个基因的结构、功能以及其与其他基因周围交互的方式。
DNA分子标记技术可以根据特定的DNA片段的存在或缺失来鉴定它们在特定的细胞内是否存在，从而给出有关它们起作用的生物过程的其中一种细胞活性的信号。
三、种类
1、RFLP（限制性片段长度多态）是最常使用的DNA分子标记技术之
一、它的原理是对特定DNA片段进行限制性酶切，并使用电泳技术对酶切产物进行纯化，从而产生具有特定长度的DNA条带。
借助于这种特定的DNA条带长度，研究者可以定位特定的DNA片段，进而进行基因定位。
2、RAPD（随机扩增多态位点）也是一种常用的DNA分子标记技术。
DNA分子标记技术在白僵菌上的应用研究进展
２ １ 年 ９月 ０１
广
东
蚕
业
Ｖｏ． ，Ｎｏ３ １ ４５ ．
ＧＵＡ ＮＧＤＯＮＧ ＡＮＹＥ Ｃ
Ｓ ．２ １ ＥＰ ０ １
３ ９
Ｄ Ａ分子标记技术在 白僵菌上 的应用研究进展 Ｎ
吕思行 刘吉平 术
（ 华南农业大学动物科学学院 ，广州 ５ ４ ） １ ６ ２ ０
锁 ，不需专 门创造特殊 的遗传材料［ ４ ］ 。基于上述这
些优 点 ，分 子标记技术对 白僵菌的分类研究在世 界范围广泛地 开展起来 ，使分类鉴定工作 由一般
类和谱系分析带来 了许多困难和不确定 性。因此
的表型特征鉴定深化到分子水平和遗 传型特征 的
资助项 目： 现代农业产业技术体系建设 专项 （ ｃ ｘ２一ｗＯ） 广 东省科技计划项 目 （ ０Ａ ２１００） ｎ ｙ 一７ｇ ２２ ， ｙｔ ２ ８ ０４００２。 ０
１９ 的 ７０ 种昆虫及 蜱螨 目的 ６科 、ｌ ４科 ０余 ０余种
螨 和蜱［ １ １ 。根据 Ｎ Ｂ 的最新分类报道 ［ ＣＩ ２ ］ ，显示 白 僵菌隶属 于真菌界的子囊菌Ｊ ～ 一 ｔ 粪壳菌 ａ ） 纲 （ｏｄｒ ｍ ｃｔ ） Ｓｒａ ｏ ｙｅ ｓ，肉座菌 目（ ｙｏｒ ｌ ） ｉ ｅ Ｈ ｐｃｅ ｅ ，虫 ａｓ 草科 （ ｏｄｃ ｉｃａ） Ｃ ｒｙｉ ｔ ｅｅ ，虫草属 （ｏｄｃｐ） ｐａ Ｃ ｒｙｅｓ。具
有寄主范围广 、致病力强 ，对人 、畜无毒害 ，不
伤害天敌 ，不污染环境等优点 ，既是家蚕常见 的 病害，也被广泛应用于害虫的生物防治［ ３ ］ 。 综观各 国学者对 白僵菌 的分类历史 ，基本上 都是依据传统的生物分类 法即根据微生物物种的 形态特征和生理学特性对其进行分类的 。白僵 菌 菌株的形态 、生化指标 等受培养 基质 、温度 等环 境条件影响 ，表现出较 大差异性 ，这 给真菌的分
分子标记辅助育种技术
分子标记辅助育种技术分子标记辅助育种技术是在水稻、小麦、玉米、大豆、油菜等重要作物上，通过利用与目标性状紧密连锁的DNA分子标记对目标性状进行间接选择，以在早代就能够对目标基因的转移进行准确、稳定的选择，而且克服隐性基因再度利用时识别的困难，从而加速育种进程，提高育种效率，选育抗病、优质、高产的品种。
（一）发展回顾我国的农作物分子标记辅助育种的研究始于90年代初，在过去的近十年时间里，取得了重要的研究进展：1.构建了水稻等作物的染色体遗传图谱；2.构建了水稻染色体物理图谱；3.利用分子标记对我国作物种质资源遗传多样性进行了初步的研究；4.对一些重要的农艺性状进行了定位、作图与标记，相应的基因克隆已在进行。
在基因组计划开展以来的短短的几年时间内，主要农作物的遗传连锁图的绘制均已完成。
1996年我国用RFLP标记对水稻进行作图，构建了水稻12条染色体的完整连锁图。
此后，又构成了有612个标记的水稻遗传连锁图，较好地满足水稻遗传育种工作的需要。
除水稻之外，还绘制了谷子的RFLP连锁图。
构建了大豆分子标记遗传框架图、小麦野生近缘植物小伞山羊草的连锁图以及小麦的第1、第5、第6染色体部分同源群RFLP连锁图等。
1997年，利用广陆矮4号水稻品种构建的BAC文库，建立了631个长度不同的跨叠群。
用水稻遗传图谱上的RFLP标记及STS标记确定了631个跨叠群在水稻12条染色体上的位置，绘制出了水稻的染色体物理图。
该物理图长为352284Kb，覆盖了水稻基因组的92%。
我国近年来对作物的重要性状，如育性基因、抗性基因及产量性状基因的作图与标记方面开展了大量研究工作。
在育性方面，找到了与光敏核不育水稻的光敏不育基因位点连锁的RFLP标记。
定位了水稻不育系5460F的育性隐性单基因tms1，并找到与之紧密连锁（1.2cM）的RFLP标记。
定位水稻野败不育系恢复基因的两个主效基因Rfi3和Rfi4，初步确定了与其中Rfi3基因紧密连锁(2.7cM)的RFLP标记，并已转化为STS标记。
食用菌DNA分子标记研究的十年历程回顾
了遗传多样性研究。为香菇的亲缘关系分析和菌株鉴定提供了依据。徐学锋、林芳灿嗍测定了中国的５９个
野生香菇菌株ｒＤＮＡ的ＩＴＳ区域序列，发现自然群体不同菌株的ＩＴＳ序列存在相当程度的变异，可以根据
ｌ佟序列差异将不同菌株划分为不同的谱系。认为ＩｆＩＳ序列分析是研究香菇的系统发育和生物地理学的有
效手段。詹才新等ｆ，对来源于不同地区双孢蘑菇菌株的ＲＡＰＤ分析发现它们的遗传变异不丰富，认为可能
ＤＮＡ（ｒＤＮＡ）线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）和基因组总ＤＮＡ的进行了研究，供试菌株分为四大类。为草菇的育种提
供了科学依据。
２４卷
边银丙等：中国食用菌ＤＮＡ分子标记研究的十年历程回顾
１７
５分子标记在食用菌线粒体遗传研究中的应用
DNA分子标记及其在犬中的研究进展
口 学 术 研 讨
ＸＵＥ ＳＨＵ ＹＡＮ Ｔ ＡＯ
口Ｎ 分 子 标 记 Ａ 及 其在 犬 中的研 究进展
刘清 神
本文概 述 了Ｒ Ｐ 、 Ｓ 、ｍ ＤＡ 种分子标记技术及近年来在犬 ＡＤ ＳＲ ｔＮ －
中应用的国内外研 究进 展。
Ｎ 家犬是最 早被人类驯化 的家畜 ，目前也是数量最 多 测基 因组相应 区域 Ｄ Ａ多态性 。虽 然一 个引物只能检测 Ｎ 部分 区域的 多态性 ，但是一 系列引物可 以检 的犬科 动物 ，全世界 有超过 ４ ０ 家犬品种 ，总共约有 基 因组 Ｄ Ａ ０个 是一种 快速检测 多态性 的方法。 ４Ｚ只 ， ｛ 是世界上外形差异 最大、 分布最 广和品种最 多的 测整个基 因组 的多态性 ， ０ Ｒ Ｐ 标记 以其具有 孟德尔显性遗 家畜 。在基 因组计划 启动 之初 ，由于犬 并未作为基 因组 从 上世纪 ９ 年代 以来 ， Ａ Ｄ 研究 的模式动物 ， 另外犬也 不属于重要的农业经济动物 ， 传 方式 、 无需预 知受试 基 因组 Ｄ Ａ Ｎ 序列 、 术简单易行 、 技 Ｎ 量极 少 、无放射性 、周期短 等特 点 ，该技术 因此与人 类、小 鼠、猪和牛等动物 相 比，犬基 因组相关 需要的 Ｄ Ａ 广泛 用于品种／ 系鉴定 、 因定位 、 基 研究开展相对 滞后。２ 世纪 ９ 年代末 以来 ， ０ ０ 科学家开始 的应用范 围不 断扩 展 ，
速 ，至 ２ ０ 年 ９ ，Ｋｒｎ ｓ ０３ 月 ｉｋ ｅｓ等在 Ｓ ｉｎ ｅ ｃｅ ｃ 上首次公布 和遗 传分析等方面具 有重要价值 。
第一个
对于 Ｒ Ｐ 用于犬方 面研 究 ，国内外 已有许 多报道。 ＡＤ
享受基 因组测序 的哺乳动物 ，许多犬 的遗传标 记 日益 明 据 报道 ， Ａ Ｄ Ｒ Ｐ 技术能够构建 鉴别犬科 品种 的指纹 图谱和 晰。近年来 ，人们对分子标记在犬 的遗传 、进化 、基 因 确 定不同品系犬 间的遗传 关系。黄朝峰等 （ ０ ２） 用 ２０ 运 定位及育种等方 面的应用也进行 了广泛的研究。本文 以 Ｒ Ｐ 技 术对 实验用 比格犬进 行遗 传背景分析 ， ＡＤ 筛选 到 １ ６ 犬为主 ， 概述 了 Ｒ Ｐ 、 Ｓ 、ｍ Ｄ Ａ Ａ Ｄ Ｓ Ｒ ｔ Ｎ 等分子标记 的在犬 中 个 引物对 ４ 个样 品的分析 ，共得到 ９ 个扩增 条带 。所 ０ ３
DNA分子标记技术在水产动物重要经济性状基因筛选中的-海洋科学
第49集海洋科学集刊No.49 2008年８月STUDIA MARINA SINICA Aug,2008动物重要经济性状相关分子标记筛选及应用的研究进展*倪静1，2尤锋1张培军1徐永立1（1中国科学院海洋研究所青岛 266071）（2 中国科学院研究生院北京 100039）每一个生物个体，有许多进化上非常重要的性状，如身体大小、生长速度、抗病能力等，在遗传学中被称为数量性状。
数量性状往往与生产性能的经济价值相联系，因而一直是动物育种学家关注和倾心研究的热点。
数量性状的研究，通常是借助各种遗传标记，运用统计学方法，将影响数量性状的多个基因剖分开，使其定位于特定的染色体上，最终分析出其DNA序列。
在此基础上，还可进一步利用标记与数量性状位点（quantitative trait locus, QTL）间的连锁关系对数量性状进行遗传操作。
DNA分子标记技术是根据基因组DNA 存在丰富的多态性而发展起来的可直接反映生物个体在DNA水平上的差异的一类新型的遗传标记技术。
它是继形态学标记、细胞学标记、生化标记之后最为可靠的遗传标记技术，并取得了快速的发展。
DNA分子标记主要包括：线粒体DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)、限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP)、随机扩增多态性DNA (Random Amplified Polymorphic DNA，RAPD)、扩增片段长度多态性(Amplifted Fragment Length Polymorphism，AFLP)、单链构象多态性（Single-Strand Conformation Polymorphism，SSCP）、微卫星[ (Microsatellite DNA),又称简单序列重复(Simple Sequence Repeat，SSR)]、单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymerphism，SNP)、表达序列标签(Expressed Sequence Tags，ESTs)等标记技术。
DNA分子标记及其在犬中的研究进展
家犬是最早被人类驯化的家畜，目前也是数量最多的犬科动物，全世界有超过４００个家犬品种，总共约有４亿只，是世界上外形差异最大、分布最广和品种最多的家畜。
在基因组计划启动之初，由于犬并未作为基因组研究的模式动物，另外犬也不属于重要的农业经济动物，因此与人类、小鼠、猪和牛等动物相比，犬基因组相关研究开展相对滞后。
２０世纪９０年代末以来，科学家开始意识到犬基因组研究在认识哺乳动物生长、发育及进化的遗传本质、人类疾病的动物模型等且有重要的应用前景，在比较基因组研究的推动下，犬基因组发展非常迅速，至２００３年９月，Ｋｉｒｋｎｅｓｓ 等在Ｓｃｉｅｎｃｅ上首次公布了犬基因组的草图，使得犬成为继人类和鼠之后第一个享受基因组测序的哺乳动物，许多犬的遗传标记日益明晰。
近年来，人们对分子标记在犬的遗传、进化、基因定位及育种等方面的应用也进行了广泛的研究。
本文以犬为主，概述了ＲＡＰＤ、ＳＳＲ、ｍｔＤＮＡ等分子标记的在犬中的研究进展。
一、ＲＡＰＤ分子标记技术及其应用随机扩增多态性ＤＮＡ是通过利用随机引物扩增基因组ＤＮＡ来寻找具有多态性的ＤＮＡ片段，是以ＰＣＲ扩增为基础的一种分子遗传标记。
ＲＡＰＤ利用一系列碱基随机排列而成的寡核苷酸单链（一般为１０ｂｐ）作为引物，对所研究的基因组ＤＮＡ进行扩增，扩增产物经电泳分离可检测基因组相应区域ＤＮＡ多态性。
虽然一个引物只能检测基因组ＤＮＡ部分区域的多态性，但是一系列引物可以检测整个基因组的多态性，是一种快速检测多态性的方法。
从上世纪９０年代以来，ＲＡＰＤ标记以其具有孟德尔显性遗传方式、无需预知受试基因组ＤＮＡ序列、技术简单易行、需要的ＤＮＡ量极少、无放射性、周期短等特点，该技术的应用范围不断扩展，广泛用于品种／系鉴定、基因定位、性状标记和遗传连锁图谱构建等方面。
对有关动植物的大量研究报告显示，ＲＡＰＤ是一种多位点遗传标记，几乎可以适合于所有的生物种类，在分析动植物的亲缘关系和遗传分析等方面具有重要价值。
DNA分子标记技术在桑树上的应用研究进展
２ １ ，１ ７ ： ２ ６ ５ ０ ０４ （ ） ６ — ４ ４
Ｇｕ ｎ ｘ ｒｃ ｌ ｒ ｌＳ ｉ ｎ ｅ ａ ｇｉ Ａｇ ｉ ｕ ｔ ａ ｃｅ ｃ ｓ ｕ
ＤＡ Ｎ 分子标记技术在桑树上的应用研究进展
邱长 玉 ，朱方 容 ， 林 强
（ 西 蚕 业科 学研 究 院 ， 南 宁 广 ５ ００ ） ３０ ７
摘要 ： 近年来 ， 随着分子生物学及其技术 的快速发展 ， 分子标记技术 已在各种 作物种质资 源鉴定与分类、 遗传 图 谱构建 、 基因定位 以及育种 中广泛应用。文章介绍了几种常用分子标记技术的原理 、 方法、 特点及其在桑树上 的应用
现状 ， 指出今后应加强分子标记技术在桑树遗传图谱 构建 、 亲缘关系和系统分类 、 种质资源 的保存和利用 、 良性状 优
（ ｕ ｎ ｘ ａ ｅ ｆ ｅｉｕｔｒｌ ｃｅ ｃ ， ｎ ｉｇ５ ０ ０ ， ｉａ Ｇ ａｇｉ Ａｃ ｄ ｍｙｏ ｒ ｌ ａ ｉｎ ｅ Ｎａ ｎｎ ３ ０ ７ Ｃｈｎ ） Ｓ ｃ ｕ Ｓ
Ａｂ ｔ ａ ｔ ｎ ｒ ｃ ｎ ｅ ｒ ， ｌｃ ｌｒ ｍａ ｋ ｒｔ ｃ ｎ ｌｇ ａ ｅ ｎ ｗ ｄ ｌ ｐ ｌ ｄ ｆｒｉ ｅ ｔ ｃ ｔ ｎ ａ ｄ ｃ ａ ｓ ｉａｉ ｎ ｓｒ ｃ ：Ｉ ｅ ｅ ｔｙ ａ ｓ ｍｏｅ ｕ ａ ｒ ｅ ｅ ｈ ｏｏ ｙ ｈ ｓ ｂ ｅ ｉ ｅｙ ａ ｐ ｉ ｏ ｄ ｎ ｉ ａｉ ｎ ｌｓ ｉ ｃ ｔ ｅ ｉ ｆ ｏ ｆ ｏ
是起 源地 之一 … 桑树 良种 是发 展蚕 业 生产 的重 要 物质基 础 ．种植 优 良桑 树 品种 不仅 可 增加 产量 ， 而 且 对茧 、 、 的品质 改善 具有 一定 作用 。 丝 绸 采用 常规 育种 方法 存在 育种 周 期长 、 目标 单 株 的选 择效 率 对 低 、 本 高等难 以克服 的缺 点 ， 利用 分 子标 记 ， 成 而 可 以在Ｄ Ａ 子水 平 上科 学 选 配育种 亲 本 ， Ｎ 分 利用 与 重 要 目标 性 状连 锁 的 分 子标 记 对 杂 种 后 代 进 行 科 学 选择 ， 实现育 种 的新 突破 ， 加快 育种 进程 。 文 综述 本 了分 子标 记技 术 在桑 树 中 的应用 现状 ， 以期 为进 一 步研 究 桑树 提供 参考 。
DNA分子标记技术在红菇分子鉴定中的应用进展
摘要 ： 总结 了近年来 国内外 ８ 种主要分子标记技术在红菇分类鉴定 、 遗传多样性及进化关 系等方面 的研究 进展 ，
介绍 了 Ｉ Ｇ Ｓ 、 Ｉ Ｔ Ｓ 、 Ｌ Ｓ Ｕ区域的标记技术以及限制性长度片段多态性 （ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ ） 、 随机扩增 片段多态性分 析 （ Ｒ ＡＰ Ｄ） 、 扩增 片段长度多态性 （ Ａ Ｆ Ｌ Ｐ ） 、 微卫星序列 （ Ｓ Ｓ Ｒ ） 和微卫星间隔序列（ Ｉ Ｓ Ｓ Ｒ） 等分子标记技术的原理和方 法。 关键词 ： 红菇 ； Ｄ Ｎ Ａ分子标记 ； 鉴定
基酸 ， 味道鲜美 ， 也有许多种具有抗病毒 、 抗肿瘤 、 舒筋活血等
Ｉ Ｓ 即 内部转 录间 隔区 ， Ｔ 是 核糖体 Ｄ Ｎ Ａ（ ｒ Ｄ Ｎ Ａ）中的非
编码转间隔区 ， 该区保守性强 ， 在绝大多数真核生物中表现
出较高 的序 列多态性 ， 可用 于真菌鉴 定、 检测及 亲缘关 系分
高， 使得菌物学家对种 和亲缘种 的鉴 定以及对 于红菇属 内各
种间的分类关 系存在争议 。随着分子生物学及生物技术 的发 展， 分子 标记技术 如 Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ—Ｐ Ｃ Ｒ， 核 糖体 ｒ Ｄ Ｎ Ａ序列分 析 即
结果。王桂文等采用 ｒ Ｄ Ｎ Ａ—Ｉ Ｓ 法 分析 了广西不 同地 区红 Ｔ 菇子实体和分离菌株的遗传 多样性 ， 得到了 １ ２个红菇子实体
析。因该法具有快速、 准确、 简便等特点 ， 在红菇属 系统进化 、 亲缘 关系、 种鉴定等方 面应用较多。Ｓ ｔ ｅ ｎ ｖ ｅ ｎ等利用 ｒ Ｄ Ｎ Ａ—
药效 。但很多毒菌也 出 自该属 ， 食用后 轻者引起肠 胃不适 、 呕吐等症状 ， 重者致死 。因此在红菇鉴定 过程 中对精 确度要 求较高 ， 由于 红菇 属的子实体形态 、 颜 色、 孢子 等结构常随环
DNA分子标记的研究进展及几种新型分子标记技术_关强
黑龙江农业科学2008(1):102～104 Heilong jiang Ag ricultural Sciences综述 102 黑龙江农业科学DNA 分子标记的研究进展及几种新型分子标记技术关 强1,张月学2,徐香玲1,孙德全2,李绥艳2,林红2,潘丽艳2,马延华2(1.哈尔滨师范大学生命与环境科学学院,哈尔滨150080;2.黑龙江省农业科学院草业研究所,哈尔滨150086)摘要:分子标记是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展起来的一种比较理想的遗传标记技术。
综述了DN A 分子标记的类型,基本原理和特点,同时还对几种最新出现的分子标记技术作了简要的介绍。
关键词:新型DN A 分子标记;RG A s 标记;RM A P D ;SRA P ;T RAP中图分类号:Q 78 文献标识码:A 文章编号:1002-2767(2008)01-0102-03Development of DNA Molecular Marker and SeveralNew Types of Molecular MarkersGUAN Qiang 1,ZHANG Yue -xue 2,XU Xiang -ling 1,SUN De -quan 2,LI Sui -yan 2,LIN Hong 2,PAN Li -yan 2,MA Yan -hua2(1.Life and Environmental Co lleg e ,H arbin No rm al U niversity ,H arbin 150080;2.Pratacultural Science Institute ,Heilongjiang Academy of Ag ricultural Sciences ,H arbin 150086)Abstract :DN A molecular mar ke r is a compar atively ideal g enetic mar ker s develo ped after the shape ma rker ,cellu -lar ma rker and biochemical mar ke r .I n this pape r ,the ty pe s ,basic principles a nd cha racte rs we re summarized ,meanw hile ,several new ty pes of mo lecular ma rkers we re intro duced w hich appea red rece ntly .Key words :DN A mo lecular marker ;RGA s marker s ;RM A PD ;SRA P ;T RA P收稿日期:2007-05-29第一作者简介:关强(1982-),男,黑龙江人,在读硕士,从事遗传学研究。
DNA分子标记在中药鉴定中的应用及发展趋势分析
DNA分子标记在中药鉴定中的应用及发展趋势分析中药是中国传统医学的重要组成部分，具有丰富的药材资源。
然而，随着全球中药市场的扩大，中药的质量和安全性问题也日益凸显。
因此，中药鉴定成为确保中药质量的重要环节。
近年来，DNA分子标记在中药鉴定中得到广泛应用，并且在不断发展，成为中药鉴定的重要手段。
DNA分子标记在中药鉴定中的应用主要通过检验样品中的特定DNA序列来鉴定药材的真伪和品质。
与传统的中药鉴定方法相比，DNA分子标记具有不可替代的优势。
首先，DNA分子标记具有高度特异性。
每个生物种类的DNA序列都是独特的，所以通过检测特定的DNA序列，可以准确地鉴定药材的种类。
其次，DNA分子标记具有高度灵敏性。
即使是微量的DNA 也能在样品中检测到，因此可以更准确地确定药材的成分和含量。
此外，DNA分子标记还可以与传统的化学分析方法相结合，提高鉴定的准确性和可靠性。
DNA分子标记在中药鉴定中的应用已经在许多药材中取得了成功。
例如，DNA分子标记已经应用于鉴定何首乌、当归、绿豆等多种中药材。
通过建立药材的DNA图谱和测定特定的DNA序列，可以快速、准确地鉴定药材的真伪。
此外，还可以通过检测药材中的DNA片段来鉴定杂质和掺假情况，确保中药的质量和安全性。
随着科学技术的不断发展，DNA分子标记在中药鉴定中的应用也在不断深化。
首先，越来越多的中药材的DNA序列被解析和研究。
这为建立更为完善的DNA图谱和DNA分子标记提供了更多的基础数据。
其次，新的分子生物学技术的应用也推动了DNA分子标记的研究。
例如，PCR技术的快速发展使得更快、更有效地扩增目标DNA片段成为可能。
此外，DNA芯片技术和次代测序技术的应用也强化了DNA分子标记的鉴定能力。
这些新技术的引入使得DNA分子标记在中药鉴定中的应用更加高效和准确。
然而，DNA分子标记在中药鉴定中还存在一些挑战和亟待解决的问题。
首先，目前大多数的DNA分子标记仅限于对单一药材的鉴定，而无法同时鉴定多种中药材。
分子标记的发展及分子标记辅助育种
分子标记的发展及分子标记辅助育种分子标记是一种分子生物学技术，利用分子标记可以对生物体进行精确的鉴定和分类，从而为种质资源的收集、保存和利用提供了科学依据，也为育种研究提供了有力的工具。
在过去的几十年里，分子标记在植物和动物育种中的应用得到了快速的发展，并取得了显著的成果。
分子标记的发展始于20世纪80年代初，当时人们发现了一种短序列的DNA片段可以在不同个体之间显示出遗传多样性，这是由于这些DNA片段的序列差异引起的。
这些DNA片段被称为分子标记，通过对它们进行分析可以对个体之间的遗传关系和遗传多样性进行研究。
最早被应用的分子标记技术是限制性片段长度多态性（RFLP），它通过酶切基因组DNA并利用凝胶电泳分析鉴定目标DNA片段。
随着技术的不断进步，研究者们开发了更多的分子标记技术，如随机扩增多态性DNA（RAPD）、简单重复序列（SSR）、单核苷酸多态性（SNP）等。
这些技术的应用使得分子标记研究更加快速、精确和可行，并且具有较高的标记密度和遗传显著性。
分子标记辅助育种是一种利用分子标记技术辅助繁殖和选育目标生物种的育种方法。
通过对目标性状的分子标记进行检测和分析，可以提高育种效率和精确性。
分子标记可以用来鉴定和筛选出具有良好性状的亲本，进行遗传多样性分析，生成遗传地图，以及进行分子辅助选择等。
分子标记辅助育种可以节省时间和人力，并且提高了育种的预测能力和成功率。
在植物育种中，分子标记辅助育种已经取得了显著成果。
例如，通过利用分子标记鉴定具有抗病性的基因或性状，育种者可以选择更适应特定环境或具有更好品质的材料，从而加速育种进程。
此外，分子标记辅助选育还可以用于配制亲本材料，避免不受欢迎的亲缘关系交配，从而提高杂交育种的成功率。
在动物育种中，分子标记辅助育种也得到了广泛应用。
例如，通过对动物基因组进行分子标记分析，可以提高畜禽在繁殖、营养和抗病等方面的性能。
另外，分子标记辅助选择还可以用于肉用动物的品质评估和选育，对于提高畜禽产品的品质和市场竞争力具有重要意义。
分子标记及其应用研究的新进展
分子标记及其应用研究的新进展随着物种数量的快速增加和物种之间的关系逐渐复杂化，如何有效的鉴定、分类和研究这些生物体的特征成为了生物学研究的重要课题之一。
分子标记是一种基于生物分子形态和功能的标志物，其具有分子生物学特征，能够反映整个生物体系发育历史上的关系和演变过程，因此是现代生物学研究中不可或缺的工具。
本文将探讨分子标记研究的新进展以及其在生物学研究中的应用。
一、分子标记的种类和常用分类方法分子标记种类多样，其中常用的包括基因序列、蛋白质序列、核酸序列、微卫星等，还有DNA指纹技术、DNA芯片技术、SNP鉴定技术等。
在分类上，主要可分为分型标记和基因标记两类。
分型标记用于确定物种之间遗传性状的差异，常用的分型标记包括RAPD（随机扩增多态性DNA）、AFLP（扩增片段长度多态性）、SSR（微卫星）、ISSR（插入缺失扩增多态性序列）、SRAP（序列相关的扩增片段）等，它们以拟南芥、玉米、大麦、水稻等植物物种为主要研究对象。
而基因标记则是指那些能够显式或隐式的遗传的分子标记，例如限制性片段长度多态性（RFLP, Restriction Fragment Length Polymorphism）、单序列重复（SSR, Simple Sequence Repeats）以及单核苷酸多态性（SNP, Single Nucleotide Polymorphism）等标记。
二、分子标记进展1. SSR标记在遗传关系的研究中，SSR标记是最常用的分子标记之一。
其具有高度多态性、遗传稳定性，能够反映出物种内、群体间的遗传多样性，已具有广泛的应用价值。
最新的SSR标记研究显示，SSR标记可以不仅用于物种之间及个体群体的遗传差异的鉴定，还可以用于自然选择以及人为选择在作物、畜禽和人类之间的比较研究。
SSR标记也可以在生态学、遗传学、生物多样性以及系统学研究中起到不可替代的作用。
2. SNPs标记SNP标记是一类单核苷酸多态性标记，由于其数量众多，便捷性高、数据产生速度快等原因，越来越受到广大研究人员的青睐。
选育新品种的分子标记研究进展
选育新品种的分子标记研究进展随着科学技术的不断发展，育种技术也在不断地改进和创新。
选育新品种的分子标记研究是当前育种技术中的一项重要内容，本文将讨论这一领域的发展和进展。
一、分子标记的基本概念分子标记是指通过分子生物学方法，从生物体的奶牛t的DNA 序列中提取出来的一段具有特定功能的DNA片段。
在生物学研究中，分子标记可以作为一种遗传标记，用于研究物种间的遗传关系和基因组的结构和组成。
二、分子标记在育种中的应用分子标记在育种中的应用越来越广泛。
在育种中，通过分子标记技术可以对基因型进行鉴定和分析，从而实现选择优良基因型并加速选育新品种的目的。
此外，分子标记技术还可以辅助育种者进行较为精确的品种鉴定和基因组测序，同时也能够帮助筛选优良种质资源。
三、基因图谱的构建基因图谱是利用分子标记技术构建的一种基因组系谱图，包括不同染色体的分子标记和其相对位置的信息。
基因图谱的构建可以帮助育种人员快速检测优良品种的基因组结构，并对不同品种间的基因组差异进行分析和研究。
此外，基因图谱的构建还可以为基于基因组选择的育种提供重要参考。
四、SSR分子标记的发展在分子标记的研究中，SSR分子标记是目前应用较为广泛的一种。
SSR分子标记是被剪切酶剪切后的DNA特定区域中所存在的短重复序列，也被称为微卫星标记。
SSR分子标记具有多态性高、操作简单、鉴别度强等特点，在基因鉴定和品系分析等方面具有重要的应用价值。
五、SNP分子标记的发展随着DNA测序技术的发展，SNP分子标记也成为育种研究中备受瞩目的一种分子标记。
SNP分子标记是指在DNA片段中存在的单核苷酸多型性，与SSR分子标记相比，SNP具有多样性更高、操作精确、可大规模高通量的特点。
同时，SNP分子标记还可以与基因测序等新兴技术联合进行研究，进一步加速基因筛选和优化效率。
六、未来展望随着育种技术的不断发展，分子标记在选育新品种中的应用前景也越来越广阔。
未来，应进一步深入研究分子标记技术，将其应用于更多育种领域，以帮助育种者更加快速精准地进行新品种的选育和改进。
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DNA分子标记技术研究进展遗传标记在遗传学的建立和发展过程中有着举足轻重的作用，随着遗传学的进一步发展和分子生物学的异军突起，遗传标记先后相应地经历了形态标记、细胞学标记、生化标记和DNA分子标记四个发展阶段。
前三种标记都是以基因表达的结果为基础的，是对基因的间接反映；而DNA分子标记则是DNA水平遗传变异的直接反映，它具有能对各个发育时期的个体、各个组织、器官甚至细胞作出“中性”以及操作简便等特点。
正是这些特点，奠定了它极其广泛的应用基础。
DNA分子标记本质上是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异的特异特DNA片段[1]。
DNA分子标记大多以电泳谱带的形式表现生物个体之间DNA差异，通常也称为DNA的指纹图谱。
在过去10多年中，分子标记技术得到了突飞猛进的发展，至今已有几十种分子标记技术相继出现，并在基因库构建、基因克隆、基因组作图、基因定位、作物遗传育种、植物亲缘关系鉴别等各个研究领域得到了广泛的应用。
1．第一代分子标记1.1 RFLP标记技术1980年Botesin提出的限制性片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphisms ，RFLP)可以作为遗传标记，开创了直接应用DNA多态性的新阶段，是最早应用的分子标记技术[2]。
RFLP是检测DNA在限制性内切酶酶切后形成的特定DNA片段的大小，反映DNA分子上不同酶切位点的分布情况，因此DNA序列上的微小变化，甚至1个核苷酸的变化，也能引起限制性内切酶切点的丢失或产生，导致酶切片段长度的变化。
RFLP 标记的等位基因具有共显性的特点，结果稳定可靠，重复性好，特别适应于构建遗传连锁图。
但是，在进行RFLP分析时，需要该位点的DNA片段做探针，用放射性同位素及核酸杂交技术，既不安全又不易自动化。
另外，RFLP对DNA多态性检出的灵敏度不高，RFLP连锁图上还有很多大的空间区[3]。
1.2 RAPD标记技术为了克服RFLP技术上的缺点，Williams等[4]于1990年建立了随机扩增多态DNA(Randomamplified polymorphic DNA ，RAPD)技术，由于其独特的检测DNA多态性的方式使得RAPD技术很快渗透于基因研究的各个领域。
RAPD是建立于PCR基础之上的分子标记技术，基本原理是利用一个随机引物(8～10个碱基)通过PCR反应非定点地扩增DNA片段，然后用凝胶电泳分离扩增片段来进行DNA多态性研究[5]。
对任一特定引物而言，它在基因组DNA序列上有其特定的结合位点，一旦基因组在这些区域发生DNA片段插入、缺失或碱基突变，就可能导致这些特定结合位点的分布发生变化，从而导致扩增产物的数量和大小发生改变，表现出多态性。
与RFLP相比，RAPD技术简单，检测速度快，DNA用量少，实验设备简单，不需DNA探针，设计引物也不需要预先克隆标记或进行序列分析，不依赖于种属特异性和基因组的结构，合成一套引物可以用于不同生物基因组分析，用一个引物就可扩增出许多片段，而且不需要同位素，安全性好。
当然，RAPD技术受许多因素影响，实验的稳定性和重复性差[6]，首先是显性遗传，不能识别杂合子位点，这使得遗传分析相对复杂[7]，在基因定位、作连锁遗传图时，会因显性遮盖作用而使计算位点间遗传距离的准确性下降;其次，RAPD对反应条件相当敏感，包括模板浓度、Mg2+浓度，所以实验的重复性差[8]。
1.3 AFLP标记技术扩增片段长度多态技术(AFLP)，又名限制片段选择扩增技术(Selective restriction fragment amplifi2cation ，SRFA)，于1993年由荷兰KEYGENE公司的Zabean和Vos等发明[9]，并已申请专利。
AFLP是近年来迅速发展起来的一种分子标记技术，它将基因组DNA用成对的限制性内切酶双酶切后产生的片段用接头(与酶切位点互补)连接起来，并通过5′端与接头互补的半特异性引物扩增得到大量DNA片段，从而形成指纹图谱的分子标记技术。
AFLP指纹呈孟德尔式共显性和显隐性遗传。
它兼具RAPD与RFLP的优点，有较高的稳定性，用少量的选择性引物能在较短时间内检测到大量位点，并且每对引物所检测到的多个位点都或多或少地随机分布在多条染色体上，各染色体上AFLP标记的数目与染色体长度呈正相关(r =0.501)，而一对引物获得的标记涉及的染色体数与标记数呈正相关(r =0.826)。
因此，通过少量效率高的引物组合，可获得覆盖整个基因组的AFLP标记[10]。
目前，AFLP作为一种高效的指纹技术，已在遗传育种研究中发挥它的优势[11]。
不过也有研究认为，AFLP对基因组纯度和反应条件要求较高[12]，另外用于遗传作图时，少数的标记与图谱紧密度有出入。
此外，在RAPD和RFLP技术基础上建立了SCAR(Sequence characterizedamplified regio ，序列特异性扩增区域)、CA(Cleaved ampli2fied polymorphic sequence ，酶切扩增多态序列)和DAF(DNA amplified fingerprints ，DNA扩增指纹)等标记技术[13]。
这些技术的出现，进一步丰富、完善了第1代分子标记技术，增加了人们对DNA多态性的研究手段。
2．第二代分子标记2.1 R标记技术在真核生物基因组中存在许多非编码的重复序列，如重复单位长度在15～65个核苷酸的小卫星DNA(Minisatellite DNA)，重复单位长度在2～6个核苷酸的微卫星DNA(Microsatellite DNA)。
小卫星和微卫星DNA分布于整个基因组的不同位点。
由于重复单位的大小和序列不同以及拷贝数不同，从而构成丰富的长度多态性。
Moore等于1991年结合PCR技术创立了R(Simple sequence repeat，简单重复序列)标记技术。
R也称微卫星DNA，是一类由几个(多为1～5个)碱基组成的基序串联重复而成的DNA序列，其中最常见的是双核苷酸重复，即(CA)n和(TG)n ，每个微卫星DNA的核心序列结构相同，重复单位数目10～60个，其高度多态性主要来源于串联数目的不同。
不同遗传材料重复次数不同，导致了R 长度的高度变异性，这一变异性正是R标记产生的基础。
R标记的基本原理是根据微卫星重复序列两端的特定短序列设计引物，通过PCR反应扩增微卫星片段。
由于核心序列重复数目不同，因而扩增出不同长度的PCR产物，这是检测DNA多态性的一种有效方法。
微卫星序列在群体中通常具有很高的多态性，而且一般为共显性，因此是一类很好的分子标记。
2.2 IR 标记技术IR即内部简单重复序列，是一种新兴的分子标记技术。
1994年Zietkiewicz等对R技术进行了发展，建立了加锚微卫星寡核苷(Anchored-microsatell ite-oligonucleotides)技术[14]。
他们用加锚定的微卫星寡核苷酸作引物，即在R的5′端或3′端加上2～4个随机选择的核苷酸，这可引起特定位点退火，从而导致与锚定引物互补的间隔不太大的重复序列间的基因组节段进行PCR扩增。
这类标记又被称为IR(Inter simple sequence repeat)、AR(Ancho red simple sequence repeats)[15]或AMP PC R[16]。
在所用的两翼引物中，可以一个是AR引物，另一个是随机引物。
如果一个是5′端加锚的AR引物，另一个是随机引物，则被称为RAMP技术[17]。
3.第三代分子标记3.1 标记技术单核苷酸多态性(Single nucleotidepolymorphism，)被称为第3代DNA分子标记，是指同一位点的不同等位基因之间个别核苷酸的差异，这种差异包括单个碱基的缺失或插入[18]，更常见的是单个核苷酸的替换，且常发生在嘌呤碱基(A与G)和嘧啶碱基(C与T)之间。
标记可帮助区分两个个体遗传物质的差异，被认为是应用前景最好的遗传标记。
目前，已有2000多个标记定位于人类染色体上，在拟南芥上也已发展出236个标记。
在这些标记中大约有30%包含限制性位点的多态性。
检测的最佳方法是DNA芯片技术，最新报道的微芯片电泳(Microchip electrophoresis)，可以高速度地检测临床样品的，它比毛细管电泳和板电泳的速度可分别提高10 和50倍[19]。
与第1代的RFLP及第2代的R标记的不同有2个方面:其一，不再以DNA片段的长度变化作为检测手段，而直接以序列变异作为标记;其二，标记分析完全摒弃了经典的凝胶电泳，代之以最新的DNA芯片技术。
3.2 EST标记技术表达序列标签(Expreed sequence Tag ，EST)是美国国立卫生研(National Ititutes of Health ，NIH)的生物学家Venter于1991年提出的[20]。
随着人类基因组计划的开展，EST技术首先被广泛应用于寻找人类新基因，绘制人类基因组图谱，识别基因组序列编码区等研究领域，之后又被广泛应用于植物基因组研究[21]。
EST是指在来源于不同组织的cDNA文库中随机挑选克隆、测序，得到部分cDNA序列，一个EST对应于某一种mRNA的cDNA克隆的一段序列，长度一般为150～500，只含有基因编码区域。
EST可代表生物体某种组织某一时间的一个表达基因，所以被称之为“表达序列标鉴”;而EST的数目则显示出其代表的基因表达的拷贝数，一个基因的表达次数越多，其相应的cDNA克隆越多，所以通过对cDNA克隆的测序分析可以了解基因的表达丰度[22]。
目前构建cDNA文库一般都使用试剂盒，方法成熟，而且飞速发展的DNA测序技术，也使得进一步降低大规模DNA序列测定成本成为可能[23]。
4．几种新型分子标记4.1 RGAs标记(Resistance Gene Analogs，抗病基因类似物)RGAs是用基于抗病基因保守序列设计的引物扩增基因组得到的抗病基因类似序列的新型的分子标记。
尽管基因间整个序列的同源性不足于用RFL P 杂交检测，但抗病基因中存在的这些保守区域为在其它植物中进行PCR 扩增和分离RGAs 提供了机会[24]。
4.2 RMAPD 标记(random microsatellite amp lify polymorp hic DNA ，随机微卫星扩增多态)利用RAPD引物和微卫星上游或下游引物结合，对基因组DNA 进行扩增，探索更有效的揭示所有微卫星及其他DNA遗传多态性的方法，以期获得研究DNA多态性的新的分子标记方法。
因该方法同时利用随机引物和微卫星引物进行扩增，暂时定名为随机微卫星扩增多态DN A[25]。