NE对THP-1细胞IL-6HMGB1和CD137表达的影响
流式细胞术分析PMA诱导THP1分化为巨噬细胞的表型特征
流式细胞术分析PMA诱导THP1分化为巨噬细胞的表型特征一、本文概述流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种在液流中快速分析单个细胞的多参数特性的强大技术。
该技术通过标记特异性抗体与细胞表面或内部抗原的结合,结合流式细胞仪的高通量分析能力,使我们能够精确测量细胞群体的表型特征。
在生物医学研究中,流式细胞术广泛应用于细胞分化、细胞周期、细胞凋亡、信号转导等多个领域。
本文旨在利用流式细胞术分析佛波酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导人急性单核细胞白血病细胞系THP-1分化为巨噬细胞的表型特征。
我们将通过流式细胞术检测分化过程中细胞表面标志物的表达变化,如CDCD68等,以及细胞内分子如肿瘤坏死因子TNF-α、白介素IL-1β等的表达情况,从而全面揭示PMA诱导THP-1细胞向巨噬细胞分化的分子机制。
通过本文的研究,我们期望能够为深入理解巨噬细胞分化过程中的分子事件提供新的视角,并为开发针对巨噬细胞相关疾病的治疗策略提供理论依据。
本文还将探讨流式细胞术在细胞分化研究中的应用价值,以期为生物医学领域的研究人员提供有益的参考。
二、材料与方法1 细胞系:人单核细胞系THP-1,购自美国ATCC(American Type Culture Collection)。
2 试剂:佛波酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA),购自Sigma-Aldrich公司;RPMI 1640培养基、胎牛血清(FBS)、青霉素/链霉素双抗,购自Gibco公司;流式细胞术抗体,包括但不限于CDCDHLA-DR等,购自BD Biosciences或eBioscience公司。
3 仪器:流式细胞仪(如FACS Canto II,BD Biosciences);二氧化碳培养箱;离心机;倒置显微镜。
1 细胞培养:THP-1细胞在含有10%胎牛血清、1%青霉素/链霉素双抗的RPMI 1640培养基中,于37℃、5% CO2的条件下培养。
thp-1诱导实验原理
thp-1诱导实验原理
THP-1细胞诱导实验原理如下:
THP-1细胞是单核细胞系,通常用于模拟研究人体单核细胞/巨噬细胞的生物学特性和功能。
这些细胞可以被诱导分化为不同类型的巨噬细胞,如M1型和M2型巨噬细胞。
在具体的诱导分化实验中,THP-1细胞首先被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞。
这个过程中,细胞会发生形态变化和生长方式的改变,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松,细胞核增大明显,可见大量明显细胞器,胞膜周围可见少量突起。
分化后的巨噬细胞可以被进一步诱导分化为M1型或M2型巨噬细胞。
M1型巨噬细胞主要通过脂多糖(LPS)和IFN-γ诱导,进一步发生M1型极化,释放出TNF-α、IL-6等细胞因子,这是经典的炎症模型。
而M2型巨噬细胞则通过IL-4、IL-13和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导,进一步发生M2型极化,分泌TGF-β、IL-10等抑制性细胞因子,模拟炎症后期的组织修复和重建的过程。
以上就是THP-1细胞诱导实验的基本原理,希望对您有所帮助。
抗CD137L单抗对再生障碍性贫血T细胞亚群及细胞因子诱生水平的影响及意义
检验论著抗CD137L单抗对再生障碍性贫血T细胞亚群及细胞因子诱生水平的影响及意义王志敏1,潘学霞2,李尊昌1,王雨存3,王立盼1(1. 滨州市人民医院血液内科;2. 儿科;3. 风湿免疫科,山东滨州 256600)摘要:目的探讨抗CD137L单克隆抗体阻断CD137/CD137L信号通路对再生障碍性贫血(aplastic anemia, AA)T淋巴细胞亚群及单个核细胞体外诱生细胞因子水平的影响,及其在AA免疫治疗中的作用和意义。
方法采用流式细胞术及ELISA方法,分析AA患者经抗CD137L单抗刺激前后骨髓T淋巴细胞亚群及单个核细胞诱生细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-10的变化。
结果 AA患者经抗CD137L单抗诱导后骨髓CD3+、CD4+、CD8+、CD25+ T细胞比值显著降低(P<0.05),而对照组T细胞亚群几无影响。
抗CD137L使再障患者骨髓单个核细胞IL-2、IFN-γ水平降低,但较正常对照组升高(P<0.05),使IL-10水平升高,但较正常对照组仍显著降低(P<0.05)。
结论抗CD137L单抗可使AA患者T细胞亚群恢复或接近正常,使免疫状态得到改善,亦可使体外骨髓单个核细胞(BMMNC)中IL-2、IFN-γ水平下降,IL-10水平提高,具有重要意义。
关键词:再生障碍性贫血;T淋巴细胞;抗CD137LmAb;细胞因子Effect and significance of anti-CD137L monoclonal antibody on T cell subsetsand cytokine induced level in aplastic anemiaZhimin WANG1, Xuexia PAN2, Zunchang LI1, Yucun WANG3, Lipan WANG11. Department of Hematology;2. Department of Pediatrics;3. Department of Rheumatism Immunology;Binzhou People's Hospital, Binzhou 256600, ChinaABSTRACT:Objective To investigate the effect of blocking CD137/CD137L signaling pathway on T lym-phocyte subsets and cytokines induced by mononuclear cells in vitro, and their roles in aplastic anemia (AA) immuno-therapy. Methods The changes of bone marrow T lymphocyte subsets and mononuclear cells inducing cytokines (IL-2, IFN-γ, and IL-10) in AA patients before and after stimulation with anti-CD137L monoclonal antibody were analyzed by flow cytometry and ELISA. Results In patients with AA, the ratio of CD3+, CD4+, CD8+ and CD25+ T cells decreased significantly after the induction of anti CD137L monoclonal antibody (P<0.05), while the T cell subsets in control group almost had no effect. Anti-CD137L to patients with aplastic anemia bone marrow mononuclear cells of IL-2, IFN-γ levels decreased, but increased compared to normal control group (P<0.05), which elevated IL-10 levels, but still significantly lower than the normal control group (P<0.05). Conclusion Anti-CD137L monoclonal antibody can make T cell subsetsof AA patients recover or near normal, improve the immune state, and also decrease the level of IL-2 and IFN-γ in bone marrow mononuclear cell (BMMNC), and improve IL-10 level.KEY WORDS:Aplastic anemia; T cell; Anti-CD137LmAb; Cytokines再生障碍性贫血(aplastic anemia, AA)是一种骨髓造血功能衰竭性疾病,其发病机制复杂,目前的观点认为,细胞免疫异常介导的造血组织免疫损伤在AA的发病机制中起着重要作用。
THP-1基因敲除细胞系 ——免疫与炎症研究的利器
THP-1基因敲除细胞系——免疫与炎症研究的利器THP-1细胞系是从一名患有急性单核细胞白血病的1岁小男孩的外周血中分离得到的[1],自1980年建系以来,THP-1细胞被广泛用于单核细胞和巨噬细胞相关的机制、信号通路以及营养和药物运输等研究中。
相对于U937、HL-60、ML-2等白血病细胞系,THP-1更有类似人原代单核细胞的形态和功能特征(包括细胞分化标记)。
相对于人外周血单核细胞(PBMC),THP-1更易在实验室中培养和扩增,且具有更稳定的基因背景,不存在PBMC 的个体差异性问题,利于实验结果的重现[2]。
因此,THP-1是各大实验室常用的急性单核细胞白血病细胞系,是研究免疫和炎症的理想工具。
THP-1的应用——巨噬细胞分化与炎症模型THP-1与人原代单核细胞都可以被诱导分化为巨噬细胞M1和M2,并释放相应的细胞因子。
●巨噬细胞M1极化:THP-1可被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,并且可再通过脂多糖(LPS)和IFN-γ诱导M1极化,释放出TNF-α、IL-6等细胞因子,这是典型的炎症模型。
●巨噬细胞M2极化:通过IL-4 、IL-13和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导可实现M2极化,分泌TGF-β、IL-10等抑制性细胞因子,这与炎症后期的组织修复和重建的过程类似。
●粥样硬化慢性炎症模型:在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)的作用下,巨噬细胞可进一步形成泡沫细胞,这是动脉粥样硬化斑块内出现的特征性病理细胞,是一种慢性炎症模型。
THP-1与CRISPR/Cas9技术相结合,有助于免疫和炎症的疾病研究THP-1是一种近四倍体的悬浮细胞,常规的基因编辑方法在THP-1中阳性率很低。
由于CRISPR/Cas9易于构建、效率较高和在人细胞中的毒性较低,在基因编辑应用中备受青睐。
使用CRISPR/Cas9构建THP-1基因敲除模型,发现与巨噬细胞清除病原体的关键基因巨噬细胞的吞噬体酸化是其清除病原体的必需步骤,吞噬体酸化与巨噬细胞的代谢以及营养物质转运息息相关,而代谢物的转运与溶质运载蛋白(SLC)密不可分。
伤寒杆菌ⅣB型菌毛诱导THP-1细胞IL-6表达的机制探讨
中图分类号 : R 3 9 2 . 1
文献标 志码 : A
文章编号 : 1 0 0 2 - 2 6 6 X( 2 0 1 3 ) 2 3 - 0 0 1 3 - 0 4
Me c h a n i s m o f I L - 6 e x p r e s s i o n i n T H P - 1 c e l l s i n d u c e d b y t y p e I V B p i l i o f S a l mo n e l l a t y p h i
I L - 6 wa s d e t e c t e d b y E L I S A,t h e a c t i v i t y o f NF ・ K B w a s me a s u r e d b y l u e i f e r a s e r e p o r t e r g e n e a s s a y .T HP 一 1 c e l l s p r e t r e a t e d w i t h P K C i n h i b i t o r DE CA we r e i n d u c e d b y t h e S a l mo n e l l a t y p h i s t r a i n A 2 1 6 ,t - h e l e v e l o f I L 6 - a n d t h e a c t i v i t y o f NF — K B
S a l mo n e l l a t y p h i t h r o u g h a c t i v a t i o n o f P KC - NF — K B p a t h wa y .M e t h o d s T HP 一 1 c e i l s a n d p e ip r h e r l a b l o o d mo n o n u c l e a r c e l l
流式细胞术分析PMA诱导THP-1分化为巨噬细胞的表型特征
流式细胞术分析PMA诱导THP-1分化为巨噬细胞的表型特征彭卓颖;李想;丛喆;薛婧【摘要】目的用流式细胞术明确单独使用PMA诱导THP-1细胞分化而来的巨噬细胞的分化情况.方法首先用PMA刺激THP-1细胞分化为巨噬细胞,再分别使用LPS、IFN-γ和IL-6将细胞诱导为M1型巨噬细胞,用IL-4、IL-13和IL-6将细胞诱导为M2型巨噬细胞.显微镜下观察三种细胞的形态学改变,并用流式细胞术检测各细胞主要CD分子表达的差异.结果当THP-1分化为巨噬细胞后变为贴壁生长,细胞形态呈较规则的圆形或椭圆形;M1和M2细胞形态不规则,细胞突起较明显,细胞颗粒度较大.巨噬细胞表面与抗原提呈功能相关的CD分子的表达均较低,大部分呈阴性;而M1和M2细胞表面这些CD分子的表达均较高.结论单独使用PMA刺激THP-1细胞所分化而来的巨噬细胞抗原提呈能力较弱,基本处于静息状态.%Objective To identify the characteristics of the subtype of PMA-induced THP-1 macrophages by flow cytometry analysis. Methods THP-1 monocytic cells differentiate into macrophages promoted by PMA, then induced into M1 and M2 by adding different cytokines, such as LPS,IL-6 and IFN-γ for THP-1-M1, IL-4,IL-13 and IL-6 for THP-1-M2. Morphology of cells were observed under a microscope and the expression of CD14, CD68, CD16, CD80, CD86, CD163, CD206, CD209, CD83, CD1a, CD11c, HLA-DR were detected by flow cytometry. Results The macrophages stimulated by PMA became adherent;THP-1-M1 and THP-1-M2 lost their spherical morphology, appeared more irregular with many obvious projections. The expression of CD83, CD1a, CD11c, HLA-DR which had the function ofantigen presenting on the surface of THP-1-Mφwere very low, and most of them were negative, but those of THP-1-M1 and THP-1-M2 were very high. Conclusions The macrophages differentiated from THP-1 stimulated by PMA are weak in antigen presenting function.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2017(027)010【总页数】7页(P10-15,22)【关键词】THP-1;巨噬细胞;佛波酯;流式细胞术【作者】彭卓颖;李想;丛喆;薛婧【作者单位】北京协和医学院比较医学中心,中国医学科学院医学实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室,新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室,北京 100021;北京协和医学院比较医学中心,中国医学科学院医学实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室,新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室,北京 100021;北京协和医学院比较医学中心,中国医学科学院医学实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室,新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室,北京 100021;北京协和医学院比较医学中心,中国医学科学院医学实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室,新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室,北京 100021【正文语种】中文【中图分类】R-33巨噬细胞(macrophage,Mφ)是一类由血液中单核细胞分化而来的固有免疫细胞,在机体免疫反应中发挥重要作用[1]。
PMA诱导人单核细胞白血病细胞株THP-1细胞表面标志物CD14和CD11b的表达
PMA诱导人单核细胞白血病细胞株THP-1细胞表面标志物CD14和CD11b的表达李晓琴;陈利荣【摘要】目的考察豆蔻佛波醇乙酯(PMA)对体外培养的原单核细胞THP-1的分化诱导条件. 方法首先用PMA梯度剂量(0,25,50,100,200,400 ng/ml)作用于THP-1细胞24h,通过CCK-8法检测细胞活力,再分别采用0,10,50 ng/ml PMA体外刺激THP-1细胞24h、48 h,流式细胞术检测细胞表面标志物CD11b、CD14. 结果梯度PMA剂量(0-100 ng/ml)对细胞活力没有影响(P>0.05).10 ng/ml、50 ng/ml PMA处理后,CD11b、CD14阳性细胞百分比均有显著上调(与0 ng/ml相比,P<0.05). 结论 10 ng/ml PMA能够诱导THP-1细胞向巨噬细胞方向分化,为PMA诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞模型提供依据.【期刊名称】《山西医科大学学报》【年(卷),期】2018(049)009【总页数】4页(P1051-1054)【关键词】PMA;THP-1细胞;CD14;CD11b【作者】李晓琴;陈利荣【作者单位】山西医科大学汾阳学院医学检验系,汾阳032200;山西医科大学汾阳学院医学检验系,汾阳032200【正文语种】中文【中图分类】R733.7巨噬细胞(macrophage)是一类由血液中单核细胞分化而来的固有免疫细胞[1],是机体固有免疫系统的重要成分之一,具有吞噬、抗原提呈和分泌多种细胞因子的功能,在炎症、防御、修复、代谢等生理过程中发挥重要作用,同时也是机体维持自身稳定的关键因素[2]。
在激活和平衡宿主免疫系统的促炎和抑炎途径中,巨噬细胞发挥着核心作用[3]。
但是由于细胞数量少,分离过程较复杂,因此多用豆蔻佛波醇乙酯(phorbol myristate acetate, PMA)诱导THP-1单核细胞分化而来的THP-1-巨噬细胞作为研究巨噬细胞功能的体外细胞模型[1],因在某些方面可替代人血液及组织中的单核/巨噬细胞,成为目前最常用的巨噬细胞模型之一[4]。
同型半胱氨酸对人thp-1巨噬细胞il-8mrna及其蛋白表达的影响
浙江大学硕士学位论文同型半胱氨酸对人THP-1巨噬细胞IL-8mRNA及其蛋白表达的影响姓名:***申请学位级别:硕士专业:内科学(心血管病)指导教师:***20040401浙江大学硕士学位论文同型半胱氨酸对人唧一l巨噬细胞IL一8mRNA及其蛋白表达的影响浙江大学医学院内科学(心血管病专业)0l级硕士研究生导师彭文辉朱建华中文摘要研究背景同型半胱氨酸(homocysteine,Hey)是一种含巯基的氨基酸,它是蛋氨酸代谢过程中一个重要的中间产物。
血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平升高已被证明是动脉粥样硬化(atheosclerosis,AS)独立的危险因素。
Hcy可通过损害内皮功能、激活血小板、诱导平滑肌细胞增殖、促脂质过氧化以及增加肝细胞胆圃醇合成等途径参与As病变发生,但Hcy确切的致病机制尚未完全阐明。
目前认为脶是一种慢性炎症性疾病,细胞因子在涉及As各阶段的炎症反应中发挥重要的调节作用。
自介素一8(interleukin一8,IL一8)是参与As发病密切的细胞因子之一。
新近研究发现Hey能引起平滑肌细胞、内皮细胞、单核巨噬细胞细胞因子释放增加,并能诱导细胞内NF_kB的激活,提示Hey还是一种炎症刺激物。
我们推测IIcy的致炎作用可能为其参与As发病的重要机制之一。
在人类和动物As病变部位的单核巨噬细胞、内皮细胞和血管平滑肌细胞均可检测到IL--8mRNA和蛋白表达,其中巨噬细胞被认为是IL-8主要的来源。
迄今为止,Hcy对人THP一1巨噬细胞lL一8表达的作用尚未见文献报道。
本研究旨在观察llcy对人THP—l巨噬细胞合成和分泌IL一8影响。
浙江大学硕士学位论文目的从核酸和蛋白两个水平观察同型半胱氨酸(Hcy)对人THP一1巨噬细胞IL一8mRNA的表达和IL一8分泌的影响。
方法培养的THP一1单核细胞株,)JnA.佛波脂(PMA)诱导分化成THP一1巨噬细胞。
HMGB1在浸润性喉鳞状细胞癌发生和发展中的作用及临床意义
J Clin Pathol Res2024, 44(1) 临床与病理杂志HMGB1在浸润性喉鳞状细胞癌发生和发展中的作用及临床意义苏才丽1,滕孝静1,王苗1,岳冰1,陈光勇1,刘红刚2(1. 首都医科大学附属北京友谊医院病理科,北京 100050;2. 首都医科大学附属北京同仁医院病理科/头颈部分子病理诊断北京市重点实验室,北京 100730)[摘要] 目的:浸润性喉鳞状细胞癌(invasive laryngeal squamous cell carcinoma ,I-LSCC)早期诊断、早期干预治疗是降低其发病率和病死率的关键。
本研究旨在探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)在 I-LSCC 发生和发展中的作用及临床意义。
方法:收集2009年11月至2011年6月北京同仁医院病理科的石蜡包埋标本281例,包括I-LSCC 123例、喉黏膜异型增生(laryngeal precursor lesions ,LPLs)103例(其中低级别异型增生31例、高级别异型增生49例、原位癌23例)及声带息肉(vocal polyp ,VP)55例。
应用免疫组织化学染色检测标本中HMGB1及Ki-67的表达,其中HMGB1阳性强度和阳性率得分相加总分为0~7(0~4分为低表达,5~7分为高表达);Ki-67阳性率≥50%为高表达,<50%为低表达。
结果:HMGB1在I-LSCC 中的表达(4.35±1.33)高于在LPLs(3.12±0.95)及VP(2.11±0.71)中(均P <0.001)。
HMGB1表达在喉黏膜低级别异型增生、高级别异型增生及原位癌之间无明显差异(P >0.05)。
36.59%的I-LSCC 同时具有HMGB1高表达及Ki-67高表达,且HMGB1高表达组和低表达组的Ki-67阳性率差异有统计学意义(P =0.01);33.33%的I-LSCC 同时具有HMGB1高表达及淋巴结转移,且HMGB1高表达组和低表达组的淋巴结转移率差异有统计学意义(P <0.001);47.15%的I-LSCC 同时具有HMGB1高表达及高临床分期(III 期及IV 期),且HMGB1高表达组和低表达组的临床分期差异有统计学意义(P <0.001)。
烟曲霉对人THP-1细胞中IL-6分泌和信号分子IκBα活化的影响
CHEN Qing ,E—mail:1728397217@ qq.con [Abstrat] Objective:To determine the effect of Aspergillus fumigatus on the production of interleukin一6
[Key words] AspergiUus m f ;THP一1 cells line;NF—KB
decreased when induced by NF—KB signaling pathway inhibitor of bay 1 1—7082.Conclusion :A. m igatus stimulates the secretion of IL一6 in human THP一1 cells through activating IKBu.
m ̄atus group was lower than that in the 10 CFU/mL group.The levels of IL一6 mRNA and protein in the 10
CFU/mL A. m gⅡf group were 209.38 ̄25.35 and 879.86_.32.35 ng/L,which were higher than that in the
group and blank control g r oup.The level of IL一6 mRNA and protein was detected by RT—PCR and ELISA re— spectively.The level of IKBa and phosphorylated IKBo was detected by W estern blot.R esults:The expef imen— tal concentration was selected to be 10 CFU/mL,because the level of IL一6 mRNA in the 10 CFU/mL A 一
肺炎衣原体下调THP-1源性巨噬细胞ABCA1、ABCG1表达的机制研究
肺炎衣原体下调THP-1源性巨噬细胞ABCA1、ABCG1表达的机制研究何平;刘玮;成蓓;梅春丽;王彦富;万晶晶【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2010(026)001【摘要】目的: 观察c-Jun氨基末端激酶(JNK)对肺炎衣原体(Cpn)诱导的THP-1源性巨噬细胞ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、ATP结合盒转运蛋白G1(ABCG1)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的调控作用,探讨Cpn 下调THP-1源性巨噬细胞ABCA1/ABCG1表达的信号转导机制.方法: 将THP-1单核细胞诱导分化为巨噬细胞后,观察Cpn感染对细胞内ABCA1/ABCG1及PPARγ mRNA和蛋白表达的影响.并用不同浓度的JNK特异性抑制剂SP600125对细胞进行预处理,观察SP600125对Cpn诱导的ABCA1/ABCG1、PPARγ mRNA和蛋白表达的影响.分别用RT-PCR和Western blotting检测各组ABCA1/ABCG1及PPARγ mRNA和蛋白表达.结果: Cpn下调THP-1源性巨噬细胞ABCA1/ABCG1及其上游调控基因PPARγ mRNA和蛋白表达.而SP600125能呈浓度依赖性地抑制Cpn感染所带来的上述影响.结论: Cpn可能通过JNK-PPARγ信号转导通路下调ABCA1/ABCG1表达,减少巨噬细胞内胆固醇流出,促进动脉粥样硬化发生发展.【总页数】6页(P64-69)【作者】何平;刘玮;成蓓;梅春丽;王彦富;万晶晶【作者单位】华中科技大学同济医学院附属协和医院老年科,湖北,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院老年科,湖北,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院老年科,湖北,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院老年科,湖北,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院老年科,湖北,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院老年科,湖北,武汉,430022【正文语种】中文【中图分类】R543.3【相关文献】1.肺炎衣原体通过下调ABCA1和ABCG1诱导THP-1源性泡沫细胞形成 [J], 梅春丽;何平;成蓓;刘玮;王彦富;万晶晶2.氧化低密度脂蛋白、荷叶生物碱对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达的影响 [J], 杨莉军;常冠楠;徐新;张社兵;马绍椿;唐良秋;何凤萍;范文茂3.血脂康胶囊对巨噬细胞源性泡沫细胞形成以及ABCA1、ABCG1表达的影响 [J], 王俊;蒋卫民;钟勇;顾萍;王立军;宫剑滨;江时森4.血管生成素1通过LXRα途径调节THP-1源性泡沫细胞ABCA1、ABCG1表达及胆固醇流出 [J], 欧翔;陈凌燕;周志姣;夏晓丹;龚朵;赵真旺;王斯琦;张强;唐朝克5.荷叶生物碱下调THP-1源性巨噬细胞microRNA-33a-5p的表达及上调ABCA1/G1的表达 [J], 佟文娟;徐新;张社兵;陶军因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
HMGB-1等不同细胞黏附因子在不同类型乳腺癌组织中的表达及意义的开题报告
HMGB-1等不同细胞黏附因子在不同类型乳腺癌组织中的表达及意义的开题报告题目:HMGB-1等不同细胞黏附因子在不同类型乳腺癌组织中的表达及意义摘要:乳腺癌是常见的恶性肿瘤之一,其发病率在女性恶性肿瘤中位居第一。
细胞黏附因子在肿瘤生长和侵袭过程中发挥重要作用,但在不同类型乳腺癌中其表达及意义尚不清楚。
本文旨在探究HMGB-1等细胞黏附因子在不同类型乳腺癌组织中的表达及其意义,并为临床治疗提供参考依据。
关键词:乳腺癌、细胞黏附因子、HMGB-1、表达、意义一、研究背景乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其病发率在全球不断上升。
不同类型的乳腺癌病理特征和治疗方法各异,因此对其病理生物学研究尤为重要。
细胞黏附因子作为肿瘤侵袭和转移的关键因子,在多种恶性肿瘤中表达异常,影响肿瘤的恶性程度和预后。
如何对不同类型乳腺癌中细胞黏附因子的表达及意义展开深入研究,对指导临床治疗和提高患者生存率有重要作用。
二、研究目的探究HMGB-1等不同细胞黏附因子在不同类型乳腺癌组织中的表达特征及其意义,为乳腺癌的预后、病理分型以及治疗提供参考依据。
三、研究方法通过检索PubMed等多个数据库,筛选出和本研究相关的文献,并对其中的病例数据进行统计和分析,结合组织学、免疫组化等技术手段对不同类型乳腺癌组织中HMGB-1等不同细胞黏附因子的表达及其意义进行探究。
四、预期结果本文预计得出以下结论:1. HMGB-1等不同细胞黏附因子在不同类型乳腺癌组织中的表达差异明显;2. 不同乳腺癌亚型中HMGB-1等细胞黏附因子的表达及意义存在差异;3. HMGB-1等细胞黏附因子对乳腺癌的侵袭和转移具有重要作用;4. 细胞黏附因子可以作为新的乳腺癌治疗靶点。
五、意义该研究在探索不同类型乳腺癌的病理生物学机制、预后及临床治疗方面具有重要意义,通过对细胞黏附因子的研究,可以更好地指导肿瘤的治疗和防治工作,提高乳腺癌患者的生存率和生活质量。
人血清对生殖支原体LAMPs诱导THP-1细胞表达TNF-α的影响
人血清对生殖支原体LAMPs诱导THP-1细胞表达TNF-α的影响何军;游晓星;伍绍坚;田巍;吴移谋【摘要】Objective To investigate the effects of human serum on TNF-α expression activated by lipid-associated membrane proteins ( LAMPs) of Mycoplasma genitalium( Mg) . Methods LAMPs were extracted and pretreated with lipo-protein lipase or protease K or serum human. THP-1 cells were stimulated and the expression of TNF-α was detected by ELISA. Results LAMPs are mixed proteins and the active ingredients are lipid moiety. The secretion of TNF-αwas media-ted in LAMPs induced THP-1 cells and was significantly increased by LAMPs in a dose-dependent manner. TNF-αlevels were significantly up-regulated in LAMPs activated THP-1 cells by Human serum and was significantly increased by LAMPs in a dose-dependent manner. Conclusions The human serum raised TNF-αlevels by Mg LAMPs induced THP-1 cells.%目的探讨人血清对生殖支原体( Mg)脂质相关膜蛋白( LAMPs)诱导TNF-α表达的影响。
CD137在人外周血T细胞的表达及其介导信号对T细胞增殖的影响
CD137在人外周血T细胞的表达及其介导信号对T细胞增殖
的影响
宋静;张利宁
【期刊名称】《山东医科大学学报》
【年(卷),期】1999(037)004
【摘要】为研究CD137在正常人静止状态和活化T细胞上的表达特点及CD137单抗协同PHA刺激T细胞增殖作用。
利用流式细胞术测定CD137的表达,利用^3H-TdR掺测定T细胞增殖。
结果显示,静止T细胞CD137经为(0.65±0.05%),经PHA刺激后24、48、72小时,T细胞上CD137表达率分别为(8.16±1.28%)、(12.39±2.15)%、(21.6±0.05)%,CD4^+T细胞的
【总页数】3页(P283-285)
【作者】宋静;张利宁
【作者单位】山东医科大学微生物教研室;山东医科大学微生物教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R392.12
【相关文献】
1.IL-4受体介导的T细胞增殖信号传导及研究进展 [J], 酆孟洁;邱晨
2.去甲基化KG1a细胞DNA对人外周血单个核细胞杀伤活性和T细胞受体Vαβ T 细胞增殖的影响 [J], 贾振薇;郭坤元;黄迎;曲佳;佘秒容
3.CD137/CD137L信号通路在体外T细胞增殖反应和体内SGVHD诱导中的作用[J], 刘兴田;张利宁;张蘋;王玉坤;王群;孙汶生
4.内皮细胞表达CD137分子介导对T细胞的抑制效应 [J], 张利永;黄钢;傅晓岚;肖宇宏;张立群;白云
5.CD137信号通过外泌体传递活化T细胞核因子c1介导小鼠血管平滑肌细胞钙化[J], 王宁;崔星钢;杨萍;许尧;李波;仲威;邵晨;王中群;严金川
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T细胞表达CD137L分子介导对血管内皮细胞的活化刺激效应
T细胞表达CD137L分子介导对血管内皮细胞的活化刺激效应张利永;傅晓岚;肖宇宏;黄钢;张立群;白云【期刊名称】《第三军医大学学报》【年(卷),期】2005(27)16【摘要】目的探讨活化T细胞表面表达的CD137L分子对内皮细胞功能的影响。
方法将活化的T细胞与内皮细胞共培养,ELISA检测共培养上清中IL-1、IL-8的含量;流式细胞仪检测内皮细胞表面粘附分子ICAM-1的表达变化,并观察用融合蛋白CD137-Fc阻断CD137-CD137L共刺激通路后内皮细胞分泌细胞因子的变化。
结果活化的T细胞刺激了内皮细胞活化,诱导了内皮细胞合成和分泌细胞因子IL-1、IL-8以及粘附分子ICAM-1的表达;可溶性融合蛋白CD137-Fc成功地阻断了CD137-CD137L的相互作用,内皮细胞合成和分泌细胞因子的能力降低。
结论证明CD137-CD137L的相互作用在内皮细胞与T细胞的相互作用中发挥了重要的作用,提示CD137与其配体交联具有刺激内皮细胞活化的生物学功能。
【总页数】3页(P1671-1673)【关键词】CD137;CD137L;CD137-Fc;共刺激分子【作者】张利永;傅晓岚;肖宇宏;黄钢;张立群;白云【作者单位】第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室;第三军医大学高原军事医学系中心实验室【正文语种】中文【中图分类】R322.12;R392.2【相关文献】1.内皮单核细胞活化多肽Ⅱ及趋化因子受体3在高糖介导血管内皮细胞损伤中的表达变化及机制研究 [J], 段雨函;吴钢2.5-脂氧合酶激活蛋白在介导细胞因子诱导血管内皮细胞黏附分子表达中的作用[J], 欧阳涛;黎健3.烧伤血清激活p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路和核因子κB诱导血管内皮细胞血管细胞黏附分子1的表达 [J], 陈旭林;夏照帆;韦多;贲道锋;王永杰;邓廿庆4.内皮细胞表达CD137分子介导对T细胞的抑制效应 [J], 张利永;黄钢;傅晓岚;肖宇宏;张立群;白云5.丙丁酚对晚期糖化终产物刺激的微血管内皮细胞血管细胞粘附分子-1表达的影响 [J], 徐茂锦;邹大进;叶江洪因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
HMGB1在子宫内膜癌中的表达及意义
HMGB1在子宫内膜癌中的表达及意义摘要】目的:通过检测高迁移率族蛋白1(HMGB1)在子宫内膜组织中的表达,探讨HMGB1在子宫内膜癌发生、发展过程中的作用。
方法:利用免疫组织化学方法检测30例正常增生期子宫内膜(NE)、30例单纯性-复杂性增生子宫内膜(SH-CH)、30例不典型增生子宫内膜(AH)以及30例子宫内膜癌(EC)中HMGB1的表达情况。
结果:HMGB1蛋白随子宫内膜病变加重呈现上升趋势,差异有显著统计学意义(P <0.01)。
NE与SH-CH之间表达差异无统计学意义(P >0.05)。
NE与AH、EC之间表达差异有统计学意义(P <0.05)。
AH与EC之间表达差异无统计学意义(P>0.05)。
结论:在子宫内膜癌组织中,HMGB1呈高表达状态。
【关键词】子宫内膜癌 HMGB1 免疫组化【中图分类号】R730.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)29-0380-02子宫内膜癌为女性生殖系统三大恶性肿瘤之一。
全球每年约有142000位妇女患子宫内膜癌,并有42000个患者死于该疾病[1]。
高迁移率族蛋白-1(High mobility group box-1 protein,HMGB1),在多种肿瘤中过表达,正常组织较低[2]。
1 材料与方法1.1 研究对象收集内蒙古自治区人民医院2010年-2014年期间临床及病理资料完善,经病理确诊的手术标本,NE、SH-CH、AH、EC各组的平均年龄分别为37.60±6.21岁、45.23±5.28岁、49.63±7.76岁、56.65±7.33岁。
且所有患者术前或就诊前均未行激素治疗、化疗或放疗。
所有HE切片均经病理专家复核。
1.2 方法标本用10%甲醛固定,石蜡包埋4μm连续切片。
兔抗人HMGB1多克隆抗体,工作浓度1:100,购自武汉博士德公司。
异丙酚对内毒素诱导人单核细胞系THP-1细胞TREM-1表达的影响
异丙酚对内毒素诱导人单核细胞系THP-1细胞TREM-1表达的影响陆立仁;张良清;卢燕【期刊名称】《天津医药》【年(卷),期】2014(42)8【摘要】目的:探讨异丙酚对内毒素诱导人单核细胞系THP-1细胞髓样细胞触发性受体-1(TREM-1)表达的影响。
方法培养THP-1细胞,分成7组,分别对应:Control组,单纯无血清培养基培养;内毒素(LPS)组,单纯LPS 100μg/L刺激;Pro组,单纯加入异丙酚100μmol/L;P1组,LPS+异丙酚12.5μmol/L;P2组,LPS+异丙酚25μmol/L;P3组, LPS+异丙酚50μmol/L;P4组,LPS+异丙酚100μmol/L。
观察16 h后收集细胞培养上清液采用ELISA测定肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;收集细胞采用流式细胞术检测TREM-1蛋白表达水平;收集细胞采用实时定量PCR检测TREM-1 mRNA表达水平。
结果与LPS组相比,P3组与P4组的细胞表面TREM-1蛋白表达水平明显增高(P<0.05),细胞上清液中TNF-α水平明显下降(P<0.05);与Control组比较,LPS组TREM-1 mRNA表达明显增加(P<0.05);与LPS组比较,P4组细胞TREM-1 mRNA表达水平降低(P<0.05)。
结论异丙酚可使LPS诱导的THP-1细胞表面TREM-1蛋白表达水平增加,细胞TNF-α的释放减少,TREM-1 mRNA的表达量下降。
%Objective To evaluate the effects of propofol on TREM-1 expressionin THP-1 cells stimulated by lipo-polysaccharide (LPS). Methods Cells were divided into 7 groups: (1) control group; (2) LPS group that was exposed to LPS in final concentration of 100μg/L;(3) Progroup that was incubated with100μmol/L propofol;(4-7) groups combin ed 100μg/L LPS with propofol at different dose of 12.5μmol/L (P1 group), 25μmol/L (P2 group), 50μmol/L (P3 group), 100μmol/L (P4 group) respectively. After 16 hours of incubation, the TNF-α concentration in supernatants were measured by ELISA. TREM-1 expression were examined by FACS and TREM-1 mRNA were detected using qRT-PCR. Results TREM-1 on THP-1 increased significantly in group P3 and group P4 compared with LPS group (P<0.05). The concentra-tions of TNF-αin P3 and P4 (P<0.05) decreased substantially in supernatant compared with LPS group. TREM-1 mRNA transcription level in group LPS rise considerably (P < 0.05) compared to that in control group, and it dropped greatly in group P4 (P <0.05) compared with that in group LPS. Conclusion Propofol could enhance TREM-1 expression on sur-face of THP-1 stimulated by LPS. Propofol reduces TNF-αlevel in culture supernatant. And propofol may restrain TREM-1 mRNA expression.【总页数】4页(P759-761,785)【作者】陆立仁;张良清;卢燕【作者单位】广东佛山,南方医科大学附属南海医院麻醉科邮编528000;广东医学院附属医院麻醉科;广东医学院附属医院麻醉科【正文语种】中文【中图分类】R364.5【相关文献】1.Dectin-1介导香菇多糖诱导人单核细胞系THP-1细胞产生IL-12的研究 [J], 陈青;陈晓;孙俊;曾容;胡素泉;李岷;刘维达2.黄芪多糖对内毒素诱导人单核/巨噬细胞炎症因子表达的影响 [J], 王新平;王硕;王源;徐德生;冯怡3.丙泊酚对内毒素诱导人单核细胞释放细胞因子和表达SOD1蛋白的影响 [J], 孙艺娟;黄希照;胡祖荣;杨世辉;罗辉;宋匀韵4.脂多糖结合蛋白抑制肽对内毒素诱导的人单核巨噬细胞株表达CD14的影响 [J], 吴学玲;钱桂生;徐德斌;侯一峰5.9-顺式维甲酸抑制PMA诱导人单核细胞系THP-1表达MMP-9 [J], 周磊;曾锦章;沈玲红;王力;胡刘华;何奔因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
牛分枝杆菌感染巨噬细胞(THP-1)全基因表达谱变化的研究
牛分枝杆菌感染巨噬细胞(THP-1)全基因表达谱变化的研究高峰;李卫民;李传友;刘毅;孙照刚;张建源;姜平;范伟兴【期刊名称】《结核病与胸部肿瘤》【年(卷),期】2009(000)001【摘要】目的分析可用于牛结核病免疫学诊断的后选靶标,同时初步探讨由牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)引起人结核病的免疫学发病机制。
方法牛分枝杆菌(AF2212/97)和结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis(H37Rv))感染人的模式巨噬细胞(THP-1),采用含有22000个基因全长的基因芯片分析感染72个小时后的THP-1细胞全基因组在转录水平的表达谱变化。
在确定所分析的芯片的特异性和稳定性均达到要求的基础上,通过GO显著性统计分析,研究表达变化的基因所对应蛋白的分子功能、生物过程以及细胞组分;进一步采用Pathway显著性统计分析,研究表达差异蛋白之间的相互作用。
结果感染H37Rv后的THP-1细胞,存在290个差异基因表达,其中170个上调表达,120个下调表达,与以往的结果类似。
牛分枝杆菌感染的THP-1细胞中有1899(8.6%)个基因差异表达,其中1075个基因被上调表达(56.6%),其它43.4%被下调。
1899个基因中1674个在GenBank有记录,263个是新基因,基质金属蛋白酶12(H200000442)被上调达60.4921倍;下调幅度最大的蛋白丝氨酸/半胱氨酸抑制酶(H200006177)被下调6.29倍。
采用GO分析发现,这些基因对应的多为炎症因子蛋白、凋亡蛋白、细胞外基质蛋白、T细胞受体信号通路相关蛋白等。
其中与炎症相关的的蛋白有47个,如TNF、IL8、CXCL3、CCL8、CCL7、IFNK、IL-26、CCL28等。
随后的Pathway分析差异表达基因对应的2014个蛋白,展示了一系列引起结核病发病的重要信号传导通路。
结论基因表达谱研究可为牛结核病发病机制及其诊断研究提供大量有益的生物学信息。
THP-1分化巨噬细胞的铍摄入及相关生物学影响研究的开题报告
THP-1分化巨噬细胞的铍摄入及相关生物学影响研究的开题报告一、研究背景及意义近年来,随着生物医学领域的不断发展,以及废旧电子产品的大量排放,人类暴露于持续胁迫下的情况越来越普遍。
在这些废旧电子产品中,含有大量的重金属元素,如铍。
铍是一种具有广泛应用的金属元素,但其毒性也很大,会对人体健康造成严重的损害。
巨噬细胞作为免疫系统的重要成分之一,具有吞噬和清除异物的功能。
然而,由于胞内吞噬过程中往往 Begazzlement 报告卡,无法将异物完全清除,导致其在巨噬细胞内滞留,并发生一系列生物学影响。
因此,针对巨噬细胞内的铍摄入情况进行研究,非常有必要。
二、研究目的本研究旨在探讨THP-1分化巨噬细胞摄入铍的生物学影响,为研究人员提供更具体的巨噬细胞对铍的反应类型和机制方向,为其提供相关的参考价值。
通过实验方法,探究铍在巨噬细胞内的形态变化和生物学效应,为后续的巨噬细胞内生理和病理过程研究奠定基础,同时对于应对废旧电子产品中重金属污染具有一定的现实意义。
三、研究内容及方案本研究将采用THP-1细胞模型,模拟人体吸入铍的情况。
重点研究THP-1分化后巨噬细胞对铍的吞噬、转运、滞留以及相关生物学影响。
具体方案如下:1. THP-1细胞的培养、分化和准备THP-1细胞将通过超声波处理,定量检测其状态,并温度适宜条件下进行培养、分化。
并采用荧光染色进行鉴定,保证加入后的细胞健康生长。
2. 铍的添加及摄入实验根据前期的实验数据,确定铍的适宜添加量,如5μg/ml,同时与一定量的巨噬细胞混合培养,进行24小时的实验。
添加和摄入实验结束后,制备细胞样品自然生活,检测其中铍的含量,继续后续实验。
3. 形态变化和生物学效应的观察通过显微镜、体积计量等手段观察THP-1细胞的形态变化,同时通过细胞增殖实验、光镜下染色以及电子显微镜的观察来探究其生物学效应。
四、预期成果本研究预期可以探究出THP-1分化巨噬细胞中铍摄取的机制和相关的生物学影响,为后续的研究工作提供相关的参考价值,对于巨噬细胞内生理和病理过程的研究和电子垃圾中的重金属污染的处理有一定的推动作用。
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关键 词 :去 甲贤上腺 素 ;HP l细胞 ; D T: 一 T — CB I 6 L
中 图分类号 : l R 9
文 献标 志码 : A
文章 编号 :6 2 7 8 2 0 )3 0 9 — 4 1 7 — 3 X( 0 8 0 — 0 0 0
探讨去 甲肾上腺素在炎性反应中的作用 。
l 材 料 和 方 法
11 仪 器 和 试 剂 .
人单 核细胞 T P l由 中国科 学 院上 海 细胞 库 H—
提供 ;逆转 录多 聚酶链 反应 试剂盒 为美 国 Po g rmea 公 司 产 品 ;f o T zl为 Iv rg n公 司 产 品 ; T q i n io e t 2x a P R Matr x为北 京 天为时 代公 司产 品 ; Dl7 C s Mi e C 3、
应激是 内环境稳态受到威胁 的状态 . 心理 、 环境 、 生理性应激原都可以引起机体 的应激反应- 1 1 。儿茶 酚
公 司合成 ; 他试 剂均 为进 口或 国产分 析纯 。 其
1 细胞 培 养 . 2
胺类激 素 、 皮质醇 、 氢表雄酮是应 激效应 的主要介 脱
质分子 。 许多证据表 明心理社会 因素参与一部分 心血 管疾病如动脉粥样硬化 ( S 的起病和进程 。 A) 越来越
I一 、 L 6 HMG 1和 G P H 引 物 均 由 上 海 生 物 工 程 B A D
5 C I- ) 5 ̄( 6 复性 3 sc7 L 0 e ,2℃延伸 l i, A D I_ nG P H、 m L
6共 2 8个循环 , D 3 、 C 1 7HMG 共 3 Bl 4个循环 。末 次
多的研 究结 果支持 A S是 血管壁 持久 而过度 的炎 症 反应 的结果 。因此观察去 甲肾上腺素对 T — 细 HP l 胞促炎 细胞 因子基 因表达 的影 响对于进一 步探究应 激性心 理社 会 因素是 否能够启 动和参与诱 导动脉 粥
样硬化 的炎性反应意义重大 。本研 究以人 T P l H — 单 核细胞为研究对象 ,观察去 甲肾上腺 素对 T P l H — 细 胞 C 3、- D17 I 6和 H L MG I mR A表 达 的影 响 , B N 以
v l 3 No3 o- . 2 Ma 0 8 y2 0
N T 一 细胞 l一 1 CD1 7 E对 HP 1 6H B 和 L MG 表达的影响 3
凌 伯 勋 陈 光 军 田 英 ,
44 0 ; 10 0 44 0 ; 1 0 0 ( . 阳职业 技术 学院 ,湖南 岳 阳 1岳 2 .岳 阳市二 医院 。湖南 岳 阳 3 .南 华大学 。湖 南 衡阳
HMG N 的表 达 。结果 :1i o L的去 甲肾上腺 素能 上调 T P l BlmR A 0ml x / H — 细胞 C 3 D1 7及 I一 N L 6mR A的表
达, 与对 照组 比较 差异有 显 著性 ( < .1; 对 HMG lmR A 的表 达没 有影 响 。结论 : 甲 肾上腺 素 上调 P0 ) 0 但 B N 去
培 养 液 , 入 去 甲 肾 上 腺 素 ( 、0 m l ) 组 3 加 0 1I oL 每 X /
孔, 理 l 处 小时 , 然后检 测 指标 。
1 . 逆 转 录 聚 合 酶 链 反 应 3
收 集 各 组 T P l 胞 。 按 Ti l 剂 盒 ( vt H — 细 ro试 z I i n .
rgn公司 ) oe 说明书提取 细胞总 R A。采用琼脂糖凝 N 胶 电泳 和紫外分光光 度法检 测 R A的纯度和浓度 。 N 取2 g各组 细 胞 总 R A逆转 录合 成 c N N D A,再取 l L逆转 录产物进行 P R循环 。 4℃温育 4m n9 C 9 i,4 ℃变性 l i,0 G P H, MG 1 、8 C 3 ) m n 6 ℃( A D H B )5 ℃( D17 、
4 10 ) 2 0 0
摘 要 :目的 :探 讨 去 甲肾上腺 素 对人 T — HP l细胞 C 3 、L 6及 H BI 达 的影 响 。方 法 :加 D17 I一 MG 表
入 1 i o L 的 去 甲 肾上 腺 素 处 理 T P l细 胞 l小 时 。运 用 逆 转 录 多 聚 酶 链 反 应 检 测 其 C 3 、L 6及 0 ml x / H — D17 I 一
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第2 3卷 第 3期 20 年 5 08 月
岳 阳 职 业 技 术 学 院 学 报
J URN F UE NG OC I AL T C O AL O Y YA V ATON E HNIAL C L E C OL EG
循环 7 2℃, 延伸 1 n 人G P H l 0mi。 A D — 的引物序列 : 上
游 5一G G T A G C C A A G T A C唧 C C_ C 3:下 游 5一
收 稿 1期 :0 8 0 — 3 20 - 4 1 O
作者简介: 凌伯勋( 6一 ) 男, 1 2 , 湖南平江 人, 阳职业技 术学院药理学 副教授。研究方向: 9 岳 心血 管药理学。
T P l单核 细 胞 用含 有 l%胎牛 血 清 的 R . H — 0 P
MI 14 一 6 0培养 液 ( 养 液 中 加青 霉 素 和 链 霉 素各 培
1 x 0 I / )于 3 ℃ 、%C 2 . 1 5UL 0 7 5 O 培养 箱 中静 置培 养 。 实验 前一 天传 代 ,按 3 15接 种 于六孔 培 养板 , x0 接 种 一 天 后 更 换 为 含 05 .%胎 牛 血 清 的 R MI 14 P 一 60