时间分辨荧光免疫法检测乙肝E抗体阳性及PCR定量阴性的意义

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时间分辨荧光免疫分析仪与ELISA法检测乙肝两对半的临床价值比较

时间分辨荧光免疫分析仪与ELISA法检测乙肝两对半的临床价值比较摘要目的探讨时间分辨荧光免疫分析仪法（TRFIA）与酶联免疫吸附实验（ELISA法）检测乙肝两对半的临床价值。

方法回顾性分析220例乙肝患者临床资料，随机分为两组，130例TRFIA法检测者记为观察组，90例采用ELISA法检测者记为对照组，比较受检者两对半相关指标敏感度、特异性。

结果检测结果发现观察组中阳性符合率均高于对照组，其中乙肝表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒e抗体（HBeAb）、乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），两组乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）、乙型肝炎病毒e抗体（HBeAg）对比差异无统计学意义（P>0.05）；观察组灵敏度均高于对照组，HBsAg、HBeAb、HBcAb指标显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），观察组特异性HBeAb、HBcAb及阳性预示值HBcAb指标显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。

结论时间分辨荧光免疫检测乙肝两对半指标阳性符合率高，特异性高，值得推广。

关键词时间分辨荧光免疫；酶联免疫吸附实验；乙肝两对半乙型肝炎病原体为乙型肝炎病毒（HBV），属于危害严重、流行广泛的传染病之一[1]。

普遍检测乙肝两对半方法为酶联免疫吸附试验，但耗时长、操作复杂且受方法学本身影响[2]，仅能作为辅助方法检测乙肝。

本研究为比较两组检测方法疗效，回顾性分析220例病检资料，现报告如下。

1 资料与方法1. 1 一般资料收集2012年6月～2014年2月在本院就诊的220例乙肝患者临床资料，其中，男134例，女86例；年龄32～66岁，平均年龄（48.26±5.92）岁，均经病理检查确诊，并排除心脏病及其他肝肾功能疾病患者。

随机分为观察组130例和对照组90例，两组一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

时间分辨荧光免疫分析仪与ELISA法检测乙肝两对半的临床价值比较

时间分辨荧光免疫分析仪与ELISA法检测乙肝两对半的临床价值比较摘要】目的：比较时间分辨荧光免疫分析仪与ELISA法检测乙肝两对半的临床价值。

方法：选择2014年1月至2015年12月我院收治的35例乙肝患者临床资料分析，应用时间分辨荧光免疫分析仪与ELISA法两种不同的检测方法对乙肝两对半的检测，分析检测结果。

结果：应用时间分辨荧光免疫分析仪检测乙肝五项指标准确率更高，而且具有重复性，对HbsAg和HBeAg这两项指标的检测没有明显差异（P＞0.05）；应用时间分辨荧光免疫分析仪检测HbsAb、HbeAb、HBcAb等指标与ELISA检测差异显著，具有统计学意义（P＜0.05）。

两对半检测结果表明，应用时间分辨荧光免疫分析仪检测率明显比ELISA法检出率高，差异显著（P＜0.05）。

结论：应用时间分辨荧光免疫分析仪与ELISA法相比，具有更高的特异性和灵敏度，可以根据乙肝两对半定量检测确诊乙肝，并为乙肝治疗和预后提供有效的监测，值得推广应用。

【关键词】时间分辨荧光免疫分析仪；ELISA；乙肝两对半【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）22-0215-02乙型肝炎病毒血清及早检测可以对乙型肝炎进行有效的预防和诊治。

现阶段，大多应用酶联免疫吸附试验（ELISA）对乙肝血清检测，这种检测方法十分方便，而且成本低，不过这种检测方法的灵敏度不高，还容易受到环境、检测操作等影响，为临床提供定性结果，并不能提供乙肝标志物含量，影响了乙肝疾病的临床治疗和预后评估[1]。

近些年来，时间分辨免疫荧光技术（TRIFA）是一种定量检测方法，具有较高的灵敏度和稳定性[2]。

本次研究中，应用TRIFA和ELISA这两种方法对乙肝标志物进行检测，探讨TRIFA的临床价值，选择2014年1月至2015年12月我院收治的35例乙肝患者临床资料分析，应用时间分辨荧光免疫分析仪与ELISA法两种不同的检测方法对乙肝两对半的检测，分析检测结果，报道如下。

乙肝e抗原及e 抗体有何意义

乙肝e抗原及e 抗体有何意义
（文章来自：广东省肝病研究院官方网站）乙肝两对半是目前国内检查乙肝病毒感染的标志物，主要由表面抗原、表面抗体、乙肝e抗原、e 抗体以及核心抗体五项指标组成。

其中每一项指标都有着不同的含义，那么乙肝e抗原及e 抗体有何意义呢?
e抗原
1、e抗原单项阳性者较少，表示疾病处于急性期。

如果长期阳性，则代表进入慢性乙型肝炎活动期。

2、乙肝e抗原阴性说明体内乙肝病毒含量少或没有乙肝病毒，病毒复制不活跃或不复制，传染性小或没有传染性。

e 抗体
1、e抗体是人体内乙肝病毒是否复制的标志物，一般来说，e抗体阳性意味着体内乙肝病毒正在减少，传染性降低。

2、如果仅有乙型肝炎e抗体阳性，表示曾经感染过乙肝病毒。

温馨提示：乙肝两对半的检查结果只是反应了人体内乙肝病毒存在的状态，它并不能代表病情的轻重程度，所以e抗原、e抗体只能帮助患者了解乙肝病毒在体内的情况，要想真正了解乙肝病情，还需要结合乙肝病毒DNA、肝功能、B超等检查来综合判定。

（原文来自：/yigankangti/2012458.html）。

时间分辨荧光技术在乙肝病毒标志物定量检测中的应用

ｓｍｐｌｄｔｒｉｅｙＴＩａｄａ￣ｓｗｅ￣＇ｅｅｎｄｂＲＦＡｎＥＬＳｅｐｃｉｅｙｈｃｎｉｔｎｅｏｓｌＷａｃｌｔｄｍＩＡｒｓｅｔｌ．ｅｏｓｅｃｆｒｕｔａｃｌｕａｅ．ＲｅｕｔｖＴｓｅｓｓｓｌｓ
ｃｕｒｖｅｅｃａｅｏｉｎｓｇｅａａｎｅｌｉａｔａｅｔｆｃ，ｎｊｃｎｐｔｉＢｖｃｉｅｏｌｐｏｉ￣ｉｅｂｒａｏｉ，ｖｌｔｇｔｉｃｅｔｎｅｔａｄｉｅｔｇｅａｔａｃｎ、ｄｄｎｓｆｄｇｎｕｉｈｃｎｌｒｍｅｎｉｈｉｓ
在着明显不足，以需要一种新的灵敏、所快捷的方法来弥补这
一
表１ＴＦＲＩＡ与ＥＩＡ法测定ＨＶＭ结果的比较ＬＳＢ—
缺陷。本实验用两种方法检测ＨＶＭ，Ｂ — 旨在探讨ＴＦＡ在ＲＩ由表１可见，两种方法的结果符合率在９％以上，０各检测项目阴阳性结果经配对资料卡方检测均无显著性差异，
【ｙＷｏｄ】ＴＦＡＬＳＨＶＭＡＫＤＫｅｒｓＲＩＥＩＡＢＲＥ
我国是乙型肝炎高感染的国家，乙型肝炎病毒的总感染率高达３．％一１１５５６．％，而目前常用的乙肝两对半检测主要为ＥＩＡ方法，ＬＳ由于方法学本身的局限性，检测结果用“ 阳性 ” 阴性” 或“ 表示，即只能定性不能定量。在疗效观察和疫苗注射后抗体产生情况的观察上存
维普资讯
时间分辨荧光技术在乙肝病毒标志物定量检测中的应用

定量检测乙肝血清学标志物及其临床意义

的复制量，患者机体的免疫状态及治疗效果等一直是医生和患者自动免疫分析仪。
都十分关注的问题 … 。ＨＶ～Ｍ的检测是诊断乙型肝炎的必备Ｂ手段，而病毒指标检测的准确性直接关系到患者的诊断、合理用药和有效治疗］目前国内检测ＨＶ感染血清学标志物应用较。Ｂ
时检测２０例乙肝血清标志物五项指标，８即乙肝病毒表面抗原（ＢＡ）乙肝病毒表面抗体（一Ｈｓ、Ｈｓｇ、抗Ｂ）乙肝病毒ｅ原（ｅｇ、抗ＨＢＡ）乙
肝病毒ｅ抗体（一ＨＢ）乙肝病毒核心抗体（一ｎＢ）结果不一致标本再采用美国Ａｂｕ抗ｅ和抗ｃ，ｂｏ￣公司生产的Ａｓｍ雅培试剂检测。并ｘｙ运用Ｅｃｌｘｅ管理数据库分析处理数据。结果两种方法比较得出定量检测的敏感性、特异性均高于定性检测，阳性检出率具有显著差ＨＶ—Ｍ定量检测更适合于临床诊治的应用，Ｂ定性检测更适合于常规筛查异：ｓｇＰ＜．５抗一Ｈｅ抗一ＨｃＰ＜．１ＨＢＡ，００；Ｂ、Ｂ，００。结论
定性结果参照试剂说明中的判定方法ＳＣ／Ｏ≥２ｉ严格检测，Ｒ．Ｔ一ＦＡ法检测的不同浓度标准品对应ＥＩＡ法定性检测的结果为：ＩＬＳ
以ＨＢＡｓｇ≥１Ｏｍ，一ＨＢ ≥１ｍｌ／，ＢＡ．ｎｌ抗ｓ０ＵｍｌＨｅｇ≥０５Ｃ／．ＮＵｍ，一Ｈｅ．ＮＵｍｌ抗Ｂ ≥４０Ｃ／ｌ和抗一Ｈｃ≥０６Ｃ／ｌＢ．ＮＵｍ判定为阳性，反之为阴性，见表１。

化学发光免疫测定、酶联免疫、时间分辨免疫荧光三种方法检测乙肝

时间分辨免疫荧光与化学发光法、酶联免疫法测定乙肝标志物的比较摘要目的: 比较化学发光免疫测定（CL）、酶联免疫（EIA）与时间分辨免疫荧光（TRFIA）三种方法检测乙肝病毒免疫标志物的优缺点。

方法: 用上述三种方法的检测试剂及仪器对189例临床血清标本分别进行检测，然后进行结果分析。

结果: 三者对乙肝表面抗原的检测灵敏度均达到了0.1ng/ml。

对HBcAb的测定，以CL的灵敏度最高，ELISA最低。

对表面抗体、E抗原及E抗体的检测，相互符合率均在95%以上，但对核心抗体的检测符合率，TRFIA与CL为83.23%，TRFIA与EIA为85.19%。

结论: 三种方法的检测性能相差不大，但操作性各有特点，应按各实验室具体情况加以选择。

关键词：化学发光法，酶联免疫试验，时间分辨荧光免疫测定本文作者:肖征周薇薇白立彦赵莉萍parison of chemiluminescence, ELISA and time-resolved fluoroimmunoassay in detecting Hepatitis B markers肖征，副主任医师，副教授周薇薇，主管技师白立彦，主管技师赵莉萍，主管技师解放军总医院微生物科，100853Zheng Xiao, Weiwei Zhou, Liyan Bai, Liping ZhaoGeneral Hospital of PLA, Beijing, 100853 PRCAbstractSubject:To pare three deferent assays to see their abilities in detecting hepatitis B markers.Methods：By using Chemiluminescence (CL), ELISA and Time-resolved fluoroimmunoassay (TRFIA), 189 serum samples were tested for hepatitis B markers, then the results were analyzed.Results:The three assays all can detect as low as 0.1ng/ml of HBsAg. But in HBcAb, The CL showed the highest sensitivity, ELISA showed the lowest sensitivity. The coincidences of the three methods in detecting HBsAb, HBeAg, and HBeAb are normally above 95%, but for HBcAb, the coincidence was 83.23% between TRIF and CL, and 85.19% between TRIFA and EIA.Conclusion:There were not much difference among these three methods regarding their abilities in detecting hepatitis B markers, but the maneuver flexibilities of each method differed a lot. One should consider his own lab's situation before making choice.Key words:chemiluminescence, ELISA, time-resolved fluoroimmunoassay自二十世纪七十年代以来，许多高灵敏度的测定方法应用于临床免疫学检测。

时间分辨荧光免疫法在乙肝标志物检测中的应用价值

血清乙肝标志物（两对半）定性测定始于上世纪８０年代中期，对乙肝的疾病诊断、病程监测、疗效观察发挥了重要的作用。

目前临床常用的方法有酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）和时间分辨荧光免疫分析（ＴＲＦＩＡ），本文就两种方法用于乙肝标志物检测进行了对比分析，现报告如下。

１资料与方法１．１一般资料随机检测我院感染科就诊患者２４０例及普通门诊患者２２０例。

１．２方法清晨空腹采集５ｍＬ静脉血，分别放入２只一次性试管内（各２．５ｍＬ），室温３０ｍｉｎ，充分分离血清。

所有标本分别应用ＥＬＩＳＡ法和ＴＲＦＩＡ法进行乙肝标志物（两对半）检测。

ＥＬＩＳＡ试剂盒购自北京万泰生物药业有限公司，ＴＲＦＩＡ试剂盒购自ＳＹＭ－ＢＩＯ生物。

所有操作严格按试剂盒说明书进行，结果不符合的标本用罗氏ＥＣＬ２０１０复检，试剂为罗氏原装试剂。

２结果２．１两种方法检测４６０例标本，结果完全符合４３０例，符合率为９３．５％。

２．２两种方法不完全符合结果有五种模式，共３０例，见表１。

表１ＥＬＩＳＡ法与ＴＲＦＩＡ法不符合模式及分布ＨＢｓＡｇＨＢｓＡｂＨＢｅＡｇＨＢｅＡｂＨＢｃＡｂＥＬＩＳＡＴＲＦＩＡＥＬＩＳＡＴＲＦＩＡＥＬＩＳＡＴＲＦＩＡＥＬＩＳＡＴＲＦＩＡＥＬＩＳＡＴＲＦＩＡ模式一（９例）－＋－－－－＋＋＋＋模式二（４例）－＋－－－－－－＋＋模式三（６例）＋＋－－＋＋－＋＋＋模式四（９例）＋＋－＋－－－－＋＋模式五（２例）－－－－＋－－－－－注：“＋”代表“阳性”，“－”代表“阴性”。

【摘要】目的探讨时间分辨荧光免疫分析（ＴＲＦＩＡ）检测乙肝病毒血清标志物（ＨＢＶ－Ｍ）的临床价值。

方法用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和时间分辨荧光免疫分析分别对４６０例血清标本进行乙肝标志物的定性检测和比较，结果不符的用电化学发光仪进行复检，对结果进行分析。

结果两种方法检测乙肝病毒标志物无显著差异，但ＴＲＦＩＡ提高了病毒早期感染的检出率，表面抗体的效价定量便于把握疫苗的接种时机，有效降低了假阳性和假阴性的发生率。

乙肝e抗原阳性的含义

乙肝e抗原阳性的含义
乙肝e抗体阳性就是在乙肝两对半检查中的第四项阳性，这种情况大部门是乙肝e抗体阳性慢性肝炎患者，慢性乙型肝炎，主要是由前c基因突变株乙型肝炎病毒所致。特点是血清乙型肝炎e抗原阴性，乙肝e抗体阳性，体内乙肝病毒脱氧核糖核酸进行复制，肝脏有严峻而迅速进展的慢性流动性炎症，血清丙氨酸转氨酶水平很大，易发展成重型肝炎、肝硬化及肝癌，干扰素疗效不佳。那么乙肝e抗体阳性是什么意思呢?
乙肝e抗体阳性是什么意思?乙肝e抗体阳性最重要的是根据不同情况，理解乙肝e抗体(HBeAb)不同的临床意义:
在急性乙肝的恢复期，测到乙肝e抗体阳性，常与乙肝表面抗体、乙肝核心抗体阳性相伴，这种情况表明传染性相对减低，病情好转。
慢性乙型肝炎病人血清e抗原早期转阴，乙肝e抗体早期阳转，多数也是预后好的指标，有的是抗病毒治疗的结果，常伴有ALT下降和肝炎流动减轻，乙肝病毒复制减少，但并不意味着完全休止。少数情况下，乙肝e抗体阳性伴随HBV DNA持续阳性，常提示乙肝病毒C基因变异，乙肝e抗原不能产生，病情较严峻，病程进展迅速，有的可发展为暴发性肝衰竭，天然缓解率低。
乙肝病毒表面抗原携带者血清e抗原早期阴转，乙肝e抗体早期阳转，也是预后好的标志。30岁以录 “” 网站浏览

时间分辨荧光免疫法在乙肝标志物检测中的应用价值

ｄｔｃｅｄｃｍｐｒｄＴｅｉｃｎｉｅｔｒｓｌｒｅｔｄａａｎｗｔｌｃｏｈｍｉａｌｍｉｅｃｎｅｉｓｒｍｅｔｅｅｔｄａｏａｅ．ｈｎｏｓｓｎｅｕｔｗｅｅｔｓｅｇｉｉＥｅｔｃｅｃｎｔｓｈｒｌｕｎｓｅｃｎｔｕｎ，ｎｌｓｓｏｔｅｕｔＲｅｕｔａａｙｉｅｒｓｌ．ｓｌＴｔｏｓｆｒｔｅｄｔｃｉｎｏｅａｔｉｓｍａｋｒｏｓｎｔｅｉｔｓｇｉｃｔｆｈｓｓｗｏｍｅｄｅｅｔｆｈｐｔｓＢｖｒｒｅ８ｄｅｏｘｓｉｎｆａｈｏｈｏｉｉｕｉｎｄｆｒｎｅｂｔＲＦＡｉｒｖｅｅｌｅｅｔｎｒｔｆｉｆｃｏｉｅｅｃ，ｕＴＩｍｐｏｅｔａｙｄｔｃｏａｅｏｅｔｎ，ＳｒｃｔｏｙｑａｔｔｅａａｙｉＣｒｓｅｈｒｉｎｉｕｆｅａｉｄｕｉｉｎｓａｇａｐｔａｎｂｎｔｖａｌｓｎｈｉｔｎａｃｎｔｎ，ｌｗｒｆｓｏｋｖｄｆｓｅａｉｅｒｔ，ｅｍｅｏｓｗｒｐｐｌｒｉｇｍｉｇｏｖｃｉａｏｆｉｏｅａｅｐｓｉｅａａｅｎｇｔａｅｔｔｄｉｏｔｏｕａｉｎ．ＣｏｃｕｉｎｌｎｌｖｈｈｈｚｎｌｓｏｓＴｍｅｒｓｌｅｕｒｓｅｃｍｍｕｏｓａｏｅｅｔｎｏｅｍｒｋｒｆｈｐｔｉＢｖｒｓｈｄｇｏｓｎｉｖｔｄｉ－ｅｏｖｄｆｏｅｃｎｅｉｌｎａｓｙｆｒｄｔｃｏｓｒｉｆｕｍａｅｏｅａｉｓｉａｏｄｅｓｉａ８ｔｕｉｔｙｎ

乙肝五项时间分辨免疫荧光分析与PCR-HBV定量的关系

［ｂｔａｔｂｅｔｅＴｎｅｔａｅｔｅｒｌｔｎｈｐｅｗｅＶｉｆｃｅａｉｎｓｍｎｌｇｃｌｍｒｅｅｅｔｄｙｔｍ－Ａｓｒｃ］ＯｊｃｉｅｉｖｓｉｔｈｅａｉｓｉｓｂｔｅｎＨＢｎｅｔｄｐｔｅｔ’ｉｍｕｏｏｉａａｋｒｄｔｃｅｂｉｅｖｇｏ
Ｈｅｂ＋）ＨＢＡｂ＋）ＨＢＡ（，ｓｂ＋）ａｄＨＢ－Ｍ－ｎｇｔｖ，ｈＢ — ＤＡａｓｔｖａｅｗｅｅ８７５３５％，，，ＢＡ（／ｃ（。ｃｂ＋）ＨＢＡ（ｎＶ－ｅａｅｔｅＨＶｉＮｐｉｉｅｒｔｒ９．％，９．％，０００
ｒｓｅｔｖｌＣｃｕｉｎＲＦＡｎＶ－ＤＮＡａｃｏｅｅａｏｓｉＴｅｐｃｅｙ．ｏｎｌｓｏＴＩａｄＨＢ－ｉｈｄａｌｓｒｌｔｎｈｐ．ＲＨＡｎｃｍｂｎｔｏｗｔｉｉｏｉａｉｎｉｈＨＢＶ－ＤＮＡａｅｔｅｎｅｆｃｎｍｅｔｈｅｄｏ
ｃｉｉｂｔｅ．ｌｎｃｅｔｒ
［ｅｏｄ］Ｔｍ－ｒｓｅｌｏｏｍｎａｓｙＲａ－ｔｍｕｎｉｔｒＣＫｙＷｒｓｉｅｅｏｖｄｆｕｒｉｍｕｏｓａｌｅｌｉｅｑａｔｔｉｅＰＲａ
直都是依靠检测血清学标志物来判断，然而传统的血清学方法检测
大多用ＥＩＡ方法，ＬＳ由于本身方法学的限制，ＬＳＥＩＡ方法只能提供阴阳性判断，不能提供ＨＢ并Ｖ血清学标志物的具体含量。另外，ＬＳＥＩＡ方法的灵敏度也受到方法学上的限制。ｕｎ等人Ⅲ 出，Ｋｈｓ指将ＨＢＡｓｇ的灵敏度从０５ｇｍ提高到０ＩｇｍＬ显著提高处于潜在感染窗．ｎ／Ｌ．ｎ／能口期的检出率。时间分辨免疫定量检测乙肝血清学标志物不仅能提供每个项目检测的具体含量，更重要的是该方法学本身具有极高的灵

两种检测乙肝血清学标志物方法的应用比较

两种检测乙肝血清学标志物方法的应用比较摘要】目的研究时间分辨荧光免疫测定法(TRFIA)定量检测乙型肝炎血清学标志物(HBV-M)与酶联免疫吸附试验(ELISA)定性检测HBV-M的临床应用价值及关系。

方法采用TRFIA和ELISA法分别检测236份血清标本HBV-M，对结果进行分析，比较两种检测方法的结果异同。

结果TRFIA法的HBeAb检测结果与ELISA法比较差异有统计学意义(P<0.05)，而其他单个HBV-M检测项目比较差异均无统计学意义(P>0.05)。

另外，TRFIA法和ELISA法两种检测方法在HBsAg、HBeAb、HBcAb3种血清学标志物，HBsAg、HBcAb2种血清学标志物组合模式中阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。

结论TRFIA检测HBV-M比ELISA法敏感，可作为乙型肝炎病毒指标定量的种常规方法，能为临床检测诊断与疗效监测、预后判断和科学试验以及乙型肝炎疫苗免疫力的评价和高危人群预防提供及时准确的实验信息。

【关键词】乙型肝炎病毒血清学标志物时间分辨荧光免疫测定法酶联免疫吸附试验1对象选择与研究方法1.1 对象选择所选病例均为09年至10年本院收治的乙肝或疑似乙肝病例，共180例，男女比例为：男110例，女70例，年龄19～60岁，平均(32.1±10.2)岁。

1.2 研究方法1.2.1试剂采用上海新波生物技术有限公司生产的HBsAg，HBsAb，HBeAg，HbeAb，HBcAb定量检测试剂盒和上海荣盛有限公司生产的ELISA法定性试剂盒。

1.2.2分析仪器采用Anytest2000型时间分辨荧光免疫分析仪和ELx-800酶标仪。

1.2.3检测方法所有病例均在空腹的情况下，从静脉抽取血液5毫升，取出后当即用仪器分离血清，分离后采用定量和定性检测。

采用TRFIA法测定时，首先对试剂盒内的乙肝线性参比体划出标准曲线，然后用软件Anytest 2003得出各标准曲线皆符合工作要求;采用ELISA法需先设定阴阳性对照。

时间分辨荧光免疫技术检测乙肝两对半的临床应用价值

时间分辨荧光免疫技术检测乙肝两对半的临床应用价值【摘要】目的研究利用时间分辨荧光免疫分析仪（trfia）检测乙肝两对半的临床应用价值。

分析其含量结果与酶联免疫吸附试验（elisa）法的符合程度，及灵敏度及其特异性进行比较分析，总结trfia法测定乙肝两对半的准确性，灵敏度及其临床应用价值。

方法分别用trfia法和elisa法测定乙肝病毒感染者血清标本乙肝两对半（hbv-m）结果及含量。

结果分别用trfia法和elisa法对乙型肝炎患者血清作乙肝病毒表面抗原（hbsag）检测trfia法灵敏度高于elisa法，360例乙肝患者血清中有10例标本elisa法检测结果阴性，而用trfia法可以检测到。

另外，对elisa法检测hbsag弱阳性的标本，trfia法检测结果为阳性，且hbsag的浓度处在一个较低的范围（0.5-10ng/ml），两法符合率为97%；对抗乙肝病毒表面抗体（抗-hbs）的检测，elisa法有20例阳性，而用trfta法检测有28例阳性，两法符合率为98%；对乙肝病毒e抗原（hbeag）的检测，elisa法检测31例阴性，而用trfia法检测为阳性，两法符合率为91%；对抗乙肝病毒e抗体（抗-hbe）的检测有44例elisa法结果阴性，而用trfia法检测结果为阳性，两法符合率为88%；对抗乙肝病毒核心抗体（抗-hbc）的检测有52例elisa法检测结果阴性的患者，而用trfia法检测结果为阳性，两法符合率为86%。

结论 trfia法比elisa法反应快，准确率高，elisa 法检测不到的一些标本，trfia法能够检测出来。

trfia法定量检测乙肝两对半，灵敏度高，特异性强，能及时敏感反映病毒在体内的感染状况。

【关键词】时间分辨免疫分析技术；乙肝两对半应用价值在我们的临床试验中，最常用的是乙型肝炎病毒（hbv）感染的血清学标志物（hbv-m）（以下简称为hbv）主要取决于酶联免疫吸附试验（elisa）方法。

时光分辨荧光免疫法对乙型病毒性肝炎检测效果

时光分辨荧光免疫法对乙型病毒性肝炎检测效果发表时间：2016-08-12T14:23:51.913Z 来源：《心理医生》2016年9期作者：王旭1 马可佳1 江云飞1 李冬梅2[导读] 可以引起多种器官损害的一种严重疾病，属于全球性疾病，其中儿童以及青壮年为高发人群[2]。

王旭1 马可佳1 江云飞1 李冬梅2（1黑龙江省农垦总局疾病预防控制中心黑龙江哈尔滨 150090）（2哈尔滨工业大学市政环境工程学院黑龙江哈尔滨 150090）【摘要】目的：时光分辨荧光免疫对乙型肝炎检测效果临床观察。

方法：回顾性从我院选取自2014年10月～2015年4月共收治的18例乙型病毒性肝炎患者，分别使用时光分辨荧光免疫法(TRFIA)和酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)进行测试，时光分辨荧光免疫法为研究组，酶联免疫吸附剂测定法则为对比组。

检测后对比两组患者乙型肝炎病毒感染情况。

结果：研究组检测率达到98%(17人)，对比组检测率达到64%(10人)。

采用TRFIA检测法的研究组乙肝病毒阳性率要显著高于对比组。

结论：由此可见TRFIA检测法可以更加有效检测患者乙肝病毒感染情况，值得广泛应用。

【关键词】乙型肝炎；FRFIA；ELISA【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）09-0063-02乙型病毒性肝炎主要病因是由乙肝病毒引起的[1]。

可以引起多种器官损害的一种严重疾病，属于全球性疾病，其中儿童以及青壮年为高发人群[2]。

并且有恶化成肝硬化甚至肝癌的可能，严重威胁了患者的生命安全[3]。

我国经济渐渐增强，人们生活质量显著提高，同时乙型病毒性肝炎患者也有明显增高的趋势。

该疾病具有传染性，通过汗水，血液，唾液等皆有可能传染，一年四季都有可能发病[4]。

主要病症体现为体力不支，水肿，容易疲劳。

因为肝脏是消化器官，患有乙型肝炎的患者，有可能会因为胆汁分泌减少，出现食欲不振，恶心等症状。

时间分辨荧光免疫分析定量检测乙型肝炎病毒五项指标的临床评价

２２ＴＦＡ及ＥＩＡ两种方法检测的乙肝标志物血清学灵敏．ＲＩＬＳ度比较对Ｈｓｇ：．ｎ／ｌＨｓｂ１Ｕｍ，ｅｇ０５ＢＡ０２ｇｍ，ＢＡ：０ｍＩ／ｌＨＢＡ：．
龄性别不限。空腹抽取静脉血５ｌ时分离血清，ｍ及进行ＴＦＡＲＩ
１２１ＴＦＡ法ＴＦＡ采用上海新波生物技术有限公司生．．ＲＩＲＩ产的Ａ）ｓ一时间分辨荧光分析仪及其配套试剂测定前用试ｎｅｔｔ剂盒内配套乙型肝炎线性参比品制定标准曲线，由Ａ）ｓ并ｎｔｔｅ２００３中文软件得出其各标准曲线皆符合工作要求（ＥＰ的ＲＳ
ＨｅｇＨｅｂＨｃｂ进行临床评价。方法ＢＡ，ＢＡ，ＢＡ）
ＴＦＡ与ＥＬＡ检测ＨＶ五项血清学指标的结果符合率较高，ＲＩＬＳＢ经配对资料检验，两测定方法所得结果无显著性差
异（００）Ｐ＞．５。结论ＴＦＡ作为一种高灵敏度的定量方法，乙肝的临床诊断、ＲＩ对疗效观察、接种乙肝疫苗提供可靠的实验依据，
Ｃ％与ＣＮＶＯＣ的ＣＶ％全部＜％）５。
１２２ＥＩＡ法．．ＬＳ
１３检测方法．
ＥＩＡ试剂盒为上海科华生物技术有限公ＬＳ２３结果检测结果显示，．两种方法Ｈｅｇ结果一致率较ＢＡ好，其余４个指标ＴＦＡ检测的阳性率均大于ＥＡ。ＴＦＡ法ＲＩＩＲＩ检测乙肝病毒五项血清学标志物的灵敏度均高于ＥＩＡ法，ＬＳ提

乙肝五项指标两种常用检测方法的比较分析

·医学检验·2012年3月第19卷第8期目前，在各级医院实验室检测乙肝病毒血清标志物开展最为广泛的项目就是乙肝五项指标[1]，乙肝五项指标俗称“两对半”，包括乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎表面抗体（HBsAb）、e抗原（HBeAg）、e抗体（HBeAb）、核心抗体（HB-cAb），在许多方面如诊断乙肝、乙肝判断愈后、筛选献血员、乙肝的流行病学调查、判断人群对乙型肝炎的免疫水平，对食品、保育及饮水管理行业人员定期进行健康体检等起着重要的作用[2]。

因此，选择一种特异、敏感、稳定的实验室检测方法检测乙型肝炎病毒的五项指标显得尤为重要，为此，本文选取了临床实验室较为常用的ELISA法和TRFIA法对501份肝病患者的血清标本进行了比对分析，现将结果报道如下：1材料与方法1.1标本来源501份血清标本来自2009年1月～2011年9月在本院肝病科住院的的肝病患者，男336例，女165例，年龄14～71岁，平均（40.5±9.5）岁，其中TRFIA为准测出的大三阳165例（HBsAg+，HBeAg+，抗-HBc+），小三阳142例（HBsAg+，抗-HBe+，抗-HBc+），1、4阳性86例（HBsAg+、抗-HBe+），1、5阳性91例（HBsAg+、抗-HBc+组）、其他模式17例（包括抗-HBs+、抗-HBe+、抗-HBc+单项或者多项模式）。

1.2方法1.2.1仪器与试剂ELISA法使用北京普朗新技术公司酶免仪以及配套洗板机，测定试剂由上海科华生物工程股份有限公司提供，通过卫生部批检，并贴有防伪标签。

TRFIA法使用上海新波生物技术有限公司生产的SYM-B10时间分辨荧光检测仪，测定试剂由上海新波生物技术有限公司提供，通过卫生部批检，并贴有防伪标签。

1.2.2检测方法抽取患者空腹静脉血3～5mL，入干燥试管或者促凝分离胶密封试管内，37℃放置待凝固后，离心分离血清后1～2h内检测。

操作时差对半自动中和抑制法时间分辨荧光免疫分析检测乙型肝炎病毒e抗体的影响

二、法方
１基础试验．
将试剂盒从冰箱取出平衡至室
温（０～５ｏ，２２Ｃ）每加入１个血清样本随即加入中
和抗原，准品亦如此；严格按说明书操作，标后此步加样时差为０即无时差。，
２时差试验随机抽取基础试验中结果＜．１５ＮＵｍ的样本，浓度（Ｃ／）．Ｃ／Ｌ按ＮＵｍＬ０～０２．
医出版社，０５３．２０：１
这些决定簇的抗体｝合物。受此因素制约，昆ｊ当固相上的多克隆抗一Ｂ与待检血清长时间接触Ｈｅ
（收稿日期：０００－）２１－１４０
（本文编辑：姜
敏）
ＬｂｒｔｙＭｅｉｉ，Ｆｂｕｒ２１，Ｖｌ６ｏ２ａｏａｏｄｃｎｅｒａｙ０１ｏ２．Ｎｒｅ
１ｉ随加人中和抗原间隔时间的延长而明显０ｒｎ后ａ增高，并且阳性例数有增加的趋势，表１见。采用多个样本比较的秩和日检验，各浓度组内超过１０
时，操作时差＞１ｉ０ｍｎ可造成测定结果的假性增高和假阳性，建议在加入血清样本后的１ｉ０ｒｎ内加入中和抗原，ａ
以降低错误结果的发生率。关键词：乙型肝炎病毒；抗体；间分辨荧光免疫分析；ｅ时操作时差；阳性假
时间分辨荧光免疫分析（ＲＩ因其敏感性ＴＦＡ）高、定性好，剂寿命长和非放射性等特点，稳试已经成为临床及治疗监测和基础医学研究等方面的

实时荧光PCR在乙肝病毒DNA检测中的临床意义

实时荧光PCR在乙肝病毒DNA检测中的临床意义目的对采用血清学标志物检测确定为乙型肝炎的患者进行实时荧光PCR 检测，探讨实时荧光PCR 检测的临床应用价值。

方法首先要对患者采用血清学标志物这种方法检测，进一步确定他是乙型肝炎的患者。

再次就是选择500例患者进行检测，这样有利于保证实验的准确性。

结果几种乙肝模式中，“大三阳”患者的DNA阳性检出率和拷贝数均比其他模式高，并有显著性差异。

PreS1-Ag的阳性率与乙肝DNA的阳性率有很好的一致性，但由于两者检测的成分和表达的意义不完全一致，因此不能等同于或代替HBV-DNA的检测。

结论PCR定量测定H13V-DN13可以真实反映体内乙肝病毒感染和复制及病毒载量情况，更有利于临床治疗和疗效观察。

标签：乙型肝炎病毒；实时荧光PCR；DNA；临床意义乙肝是目前世界上最常见、最广泛、危害最严重的病毒性肝炎之一，其传播广，危害性较大，易形成持续性带病毒状态而转为慢性感染，少数甚至转变为肝硬化一、原发性肝细胞癌。

荧光PCR技术融合了PCR和DNA探针杂交技术的优点，解决了PCR定量和防污染等问题，而且具有快速、准确、特异等特点。

本研究采用实时荧光PCR法进行HBV-DNA检测共500例，报道如下。

1、资料与方法1.1一般资料首先选择可能携带乙型肝炎的患者，这些患者最好是年龄跨度较大，在15一70岁的年龄段中都有患者存在，这样更有利于实验的准确}h}，防止出现偏差。

然后采用血清学标志法进一步确定他们是乙肝患者，这样可以使实验结果的偏差较小。

最重要的是要记录好乙型肝炎患者中乙肝病毒DNA的数据，并且要注意保存仔细。

然后将这500位乙肝病毒携带者和患者，再用荧光PCR的方法对其进行检测，然后仔细记录这些数据。

最后把用血清学标志法检验的乙肝病毒DNA 数据与用荧光PCR方法检验的乙肝病毒DNA数据做比较，然后把比较的数据进行分析，并用论文的形式呈现出来。

1.2 方法1.2.1 试剂和仪器乙肝血清标志物检测试剂盒来自兰州标佳生物技术有限公司，批号分别为：表面抗原20081206，表面抗体20090302，E抗原20090201，E抗体20081104，核心抗体20090201，前S1抗原为20081002；HBV-DNA试剂购于中山大学达安基因股份有限公司；酶标仪为上海瑞美公司MultisKanMK3；PCR仪为中山大学达安基因股份有限公司核酸扩增实时荧光检测系统DA7600型。

时间分辨在乙肝检测中的应用1

300 300 400 500 600
400
500
600
波长nm 波长 Eu螯合物荧光光谱螯合物荧光光谱
波长nm 波长异硫氰酸荧光素发射光谱
D: 发射光谱窄发射光谱宽度∠ 发射光谱宽度∠10nm，利用，利用615±5范围的滤 ± 范围的滤光片，只允许此波段内发射光通过并被检测，光片，只允许此波段内发射光通过并被检测，排除其它波长的荧光，一方面降低了背景，除其它波长的荧光，一方面降低了背景，另一方面使能量消耗减少，提高检测灵敏度。面使能量消耗减少，提高检测灵敏度。
– 产前筛查：AFP*/ βHCG* 、PAPPA*、uE3* 产前筛查： – 新生儿筛查：Neo-TSH*、Neo-T4*、Neo-17a-OH Prog、新生儿筛查： G6PD
时间分辨荧光法检测乙肝标志物的特点和意义
一、极大地提高了检测的灵敏度
时间分辨荧光法（TRFIA）检测HBsAg灵敏度可达0.2 ng/mL，而酶免（ELISA）检测 HBsAg灵敏度是1ng/ml，也就是说只有血清中的HBsAg达到1ng/ml酶标才会呈阳性。
利用稀土元素光谱利用稀土元素光谱特点，将发射荧光与激光谱特点，将发射荧光与激发荧光分辨发荧光分辨开来，零本底的又一保障分辨开来，零本底的又一保障
发射光谱与激发光谱间存在的巨 Stokes位移。大Stokes Stokes 可以通过干涉滤光片将发射光谱与激发光谱完全分离。
C：激发光谱带宽激发光谱宽可增加激发能，激发光谱宽可增加激发能，提高灵敏度
缩短急性乙肝HBsAg 检测“窗口检测“ 缩短急性乙肝期”
动态观察疗效和病情监测。二、动态观察疗效和病情监测。
疾病的发生、发展、疗效、预后是一个动态的变化的过程，时间分辨荧光免疫法（TRFIA）定量检测乙肝“两对半”各项标志物的浓度变化可对乙肝的病程、治疗、预后起一个全程动态检测的作用，能够为医生对病情疗效作出合理的解释提供依据，指导治疗。

时间分辨荧光免疫法检测乙肝E抗体阳性及PCR定量阴性的意义

时间分辨荧光免疫法检测乙肝E抗体阳性及PCR定量阴性的意义【摘要】目的：阐述时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)在乙型肝炎血清学E抗体阳性检测中的临床意义。

方法：收集50例乙型肝炎血清学E抗体阳性且PCR定量结果<1.00×103 copies/ml及肝功正常的血清标本，用时间分辨荧光免疫分析技术进行定量检测，然后进行结果分析。

结果：用TRFIA方法检测，有18例血清标本HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性，而且HBsAg、HBeAb、HBcAb的滴度都很低，HBsAb 的滴度都超出参考范围。

32例HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性血清标本，HBsAg、HBeAb、HBcAb的滴度都比较高。

结论：HBVM定量和定量PCR 技术充分的互补。

长期E抗体阳性且PCR定量结果<1.00×103 copies/ml及肝功能正常的患者。

通过TRFIA定量，其数据能直观的观察患者病情，能预示患者的恢复情况。

【关键词】时间分辨荧光免疫分析乙型肝炎病毒临床意义乙肝病毒(Hepatits B veius HBV)感染是我国最常见的感染性疾病之一，而应用免疫技术测定HBV特异性抗原抗体是HBV感染诊断的主要手段。

由于免疫学技术的不断发展，抗原抗体检测灵敏度明显提高，使低水平HBV感染得以检出，对临床诊断及流行病学有重要意义［1］。

1 材料与方法1.1 材料收集50例乙型肝炎血清学E抗体阳性且PCR定量结果<1.00×103 copies/ml及肝功正常的血清标本；TRHA试剂盒由上海新波生物技术有限公司提供；DDR-M6601型时间分辨荧光分析仪。

1.2 方法TRFIA 严格按产品说明书进行。

在最后一步比色时间分辨免疫荧光测定仪测定发光度。

2 结果用ELISA方法检测出50例乙型肝炎血清学E抗体阳性的标本(HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性)，再用TRFLA方法定量检测，有18例血清标本HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性，而且HBsAg、HBeAb、HBcAb的滴度都很低，HBcAb的滴度都超出参考范围。

时间分辨荧光免疫技术

食品安全检测
兽药残留检测
该技术可用于检测动物性食品中的兽药残留，如抗生素、激素等，保障消费者健康和食品安全。
非法添加物检测
可用于检测食品中的非法添加物，如瘦肉精、苏丹红等，保障消费者健康和食品安全。
环境监测
水质监测
时间分辨荧光免疫技术可用于检测水体中的有害物质，如重金属、有机污染物等，为环境保护提供技术支持。
技术应用领域
临床医学领域
传染病检测
时间分辨荧光免疫技术可用于检测乙肝、丙肝、艾滋病等传染病病毒的抗原和抗体，有助
于早期发现和预防传染病。
肿瘤标志物检测
该技术可用于检测肿瘤标志物，如癌胚抗原、甲胎蛋白等，有助于肿瘤的早期发现和预后评估。
免疫系统疾病检测
时间分辨荧光免疫技术还可用于检测自身免疫性疾病、风湿病、红斑狼疮等免疫系统疾病的相关抗体。
02
在过去的几十年中，TRFIA技术不断取得突破，如采用纳米材料增强荧光信号、开发多通道TRFIA等方法，使其在灵敏度、特异性、分析速度等方面得到了显著提升。
03
目前，TRFIA技术已经广泛应用于临床检验、生物分析、环境监测等领域，成为一种重要的分析工具。未来，随着技术的不断进步和应用领域的拓展， TRFIA技术有望在更多领域发挥重要作用。
总结词
实时、在线、预警。
详细描述
时间分辨荧光免疫技术还可应用于环境污染物监测，如水体、土壤和空气中的有害物质监测。该技术能够实时、在线检测环境中的污染物，及时发出预警，为环境保护和治理提供科学依据。通过该技术的应用，能够有效地保护环境和人类健康。
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Hale Waihona Puke 未来发展趋势与前景随着科学技术的不断进步和生物医学领域的需求不断增长，时间分辨荧光免疫技术将继续得到发展和完善。未来，该技术将进一步向着高灵敏度、高特异性、高准确性和低成本的方向发展，以适应更多样化的应用场景和更广泛的临床需求。此外，随着人工智能和大数据等技术的快速发展，时间分辨荧光免疫技术有望与这些技术相结合，实现自动化、智能化和远程化的检测和分析，进一步提高检测效率和精度。