实验七培养基的制备和常用器皿的准备
【报告】培养基制备实验报告
【关键字】报告培养基制备实验报告篇一:培养基的制备与灭菌实验报告陕西师范大学远程教育学院生物学实验报告报告题目培养基的制备与灭菌姓名刘伟学号专业生物科学批次/层次指导教师学习中心培养基的制备与灭菌一、目的要求1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
2. 掌握培养基的配置原则和方法。
3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。
二、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基:是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌:主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。
待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽,关闭排气阀继续加热。
此时蒸汽不溢出,压力增大,沸点升高,获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性,而达到灭菌的目的。
三、实验材料1. 药品:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/L的NaOH和HCl溶液。
2. 仪器及玻璃器皿:天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。
3. 其他物品:药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。
四、操作步骤(一)玻璃器皿的洗涤和包装1.玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。
将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中.用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净。
移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗。
洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。
2.灭菌前玻璃器皿的包装(1)培养皿的包扎:培养皿由一盖一底组成一套,可用报纸将几套培养皿包成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌。
包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。
(2)移液管的包扎:在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉),它的作用是避免外界及口中杂菌进入管内,并防止菌液等吸入口中。
培养基的制备和灭菌操作规程
1 目的
1.1 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
1.2 掌握培养基的配制方法。
1.3 掌握压力蒸汽灭菌器的操作方法。
2 范围
规程适用于我司产品、环境的微生物检测。
3 职责
质量部实验室负责依据本规范实施操作。
4 程序内容
4.1 实验材料
4.1.1 培养基:营养琼脂培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基、硫乙醇酸盐
流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基
4.1.2 仪器及玻璃器皿:电子天平、压力蒸汽灭菌器、试管、量筒、锥形瓶、培养皿、镊子
4.1.3 其他物品:药匙、75%酒精棉、棉线、牛皮纸(或报纸)、记号笔、酒精灯
4.2 操作步骤
4.2.1 玻璃器皿的洗涤
玻璃器皿在使用前必须洗刷干净,将锥形瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂
的水中,用毛刷刷洗,然后用自来水及纯化水冲净。
4.2.2 灭菌前培养皿的包扎
培养皿由一盖一底组成一套,可用报纸将几套培养皿包成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌。
包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。
4.2.3 培养基的配制过程
(a)称量:一般可用精度不低于0.01g的电子天平称量,先按培养基配方计算出用量.然后进行准确称量。
(b)溶解:将称好的培养基置于锥形瓶中,用量筒加入量好的蒸馏水,用玻璃棒轻轻搅动加热。
实验七 培养基的配制和灭菌
(二)培养基灭菌
培养基分装好后,塞上棉塞,外面再包一牛皮纸,便 可灭菌。灭菌的时间和温度按各培养基规定进行,以保证 灭菌效果和不损坏培养基的必要成分。培养基经灭菌后, 可放在37恒温箱培养24小时,无菌者方可使用。 在实验室里用得最多的加热灭菌法是高压蒸汽灭菌 和干热灭菌。一般培养基和水等用高压蒸汽灭菌,而玻璃 器皿常用干热灭菌。蒸汽灭菌为105-121℃,15-20分钟, 干热灭菌为160-170℃,1-2小时。目的都是使细菌体内蛋 白质凝固变性而达到灭菌的目的。 在同一温度下,湿热杀菌效力比干热大,因为在湿 热情况下,菌体吸收水分,使蛋白质易于凝固,同时湿热 穿透力强,而且当蒸汽与被灭菌物体接触凝成水分时,又 可放出热量,使温度迅速增高,从而增加灭菌效力。
高压蒸汽灭菌步骤如下: 高压蒸汽灭菌步骤如下:
灭菌器内加入一定量的水,将包扎好的物品放入其中。 1. 灭菌器内加入一定量的水,将包扎好的物品放入其中。 接通电源, 2. 接通电源,进行加热 排除高压锅内的空气,可将排气阀打开, 3. 排除高压锅内的空气,可将排气阀打开,待排出大气后 关闭排气阀;或关闭排气阀,待压力上升到0.5kg/cm2 0.5kg/cm2时再 关闭排气阀;或关闭排气阀,待压力上升到0.5kg/cm2时再 打开排气阀,待压力回复到0时再关闭排气阀。 打开排气阀,待压力回复到0时再关闭排气阀。 当压力达1.05kg/cm2 1.05kg/cm2时 此时灭菌器内的温度为121℃ 121℃, 4. 当压力达1.05kg/cm2时,此时灭菌器内的温度为121℃, 维持20min 对热不稳定的培养基如含有葡萄糖、 20min。 维持20min。对热不稳定的培养基如含有葡萄糖、氨基酸等 物时,应适当降低压力,延长时间。 物时,应适当降低压力,延长时间。 灭菌时间一到,切断电源,待压力降至零时, 5. 灭菌时间一到,切断电源,待压力降至零时,才能打开 排气阀,然后打开灭菌器盖, 排气阀,然后打开灭菌器盖,取出物品
实验室常用培养基
.常用培养基的制备(1)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和马铃薯蔗糖琼脂(PSA)培养基培养真菌最常用的培养基,成分如下:去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15-20g 水1000 ml配制方法:将马铃薯洗净去皮,称取200 g,切成小块(不必大小)放入锅中,加水1000ml,煮沸半小时,稍冷后用双层纱布过滤,在滤液中加蔗糖20g,加水补足到1000ml。
配成的培养基一般呈酸性,用于培养真菌,可以不必调pH。
如配制固体培养基,在加蔗糖前先加15-20g 琼胶加热熔化,最后加入蔗糖,混匀并加水补是至1000ml,趁热分装在试管或三角瓶中。
标准试管(15×150mm)分装量如下:一般用作斜面培养的每试管装培养基3-5ml,用作平面培养的每试管约10ml,加棉花塞后灭菌。
培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性(pH7.0左右)。
(2)牛肉汁蛋白胨培养基(NA)是培养细菌最常用的培养基,又称营养琼脂或肉汤培养基。
成分如下:酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖(或葡萄糖)l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法:称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用,在其余水中加入琼脂,加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀,然后加水补足到1000 ml,用NaOH或HCL调整至pH7.0,趁热分装,加棉花塞后灭菌。
(3)玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片,洗净后剪成1㎝2左右的小块,放在250ml的三角瓶中,盛放量一般为三角瓶的1/3,然后加少量的水以保持湿润,加棉花塞后灭菌。
天然培养基一般不必调整pH。
(4)查氏(Czapek)培养基查氏培养基是一种组合培养基,其成分如下:NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0.5g KCl 0.5gFeSO4 0.01g 蔗糖30g水1000ml(5)灭菌水的配制蒸馏水(或自来水)经过灭菌处理即成灭菌水,是实验室用量最大的必备品之一,常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。
微生物培养基配制操作规程
微生物培养基配制操作规程1. 引言微生物培养基的配制是微生物学研究中重要的实验操作之一。
培养基的配制质量直接影响微生物培养实验的结果,因此,需要严格按照操作规程进行培养基的配制。
本文档介绍了微生物培养基的配制操作规程,以确保培养基的质量和稳定性。
2. 材料和仪器•试剂:包括蛋白胨、葡萄糖、琼脂、酵母粉、磷酸二氢钾等。
•仪器:包括天平、电热板、烧杯、移液器等。
3. 培养基配制操作步骤3.1 准备工作•清洗容器:将烧杯、烧瓶等容器用肥皂水彻底洗净,再用去离子水冲洗干净,确保容器干净无杂质。
•消毒操作:将容器用高温高压自动消毒器进行消毒处理。
充分消毒后,放置在无菌条件下待用。
3.2 培养基成分配制1.清量试剂:根据配方,使用天平准确称取所需的试剂。
注意避免交叉污染,每次称取完一个试剂后,清洁秤盘。
2.溶解试剂:按照配方所需的顺序,将试剂加入适量的去离子水中,并使用电热板加热搅拌溶解。
3.pH调节:根据培养基的需求,使用磷酸二氢钾或氢氧化钠溶液进行pH调节。
使用pH计检测pH值,调节至所需范围内。
3.3 琼脂平板制备1.蒸汽消毒:将琼脂平板瓶放入高温高压自动消毒器中,进行蒸汽消毒处理。
注意避免瓶内产生真空现象,以免使琼脂变质。
2.冷却倒填:倒出适量的琼脂溶液,均匀铺平于无菌工作台上,并迅速冷却至约40℃左右。
3.加药:将需要添加的抗生素等药物加入琼脂中,并充分混匀。
4.转移菌液:待琼脂冷却凝固后,使用无菌技术将待测微生物菌液转移到琼脂平板上。
3.4 培养基灭菌1.灭菌器验证:使用化学指示剂验证培养基灭菌器的灭菌能力,确保达到灭菌要求。
2.灭菌操作:将配制好的培养基装入无菌烧瓶或试管中,使用高压灭菌器进行灭菌处理,温度和时间根据不同培养基的需求进行设置。
3.冷却保存:灭菌完成后,将烧瓶或试管放置在无菌条件下,待其冷却至室温后,即可进行保存。
4. 注意事项1.操作无菌技术:操作过程中,需要严格采用无菌技术,防止外源菌的污染。
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告篇一:《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告实验目的1.学习和掌握配制培养基(以牛肉膏蛋白胨培养基的配制为例)的一般方法和原理。
2.了解消毒和灭菌的原理,掌握常用灭菌方法的操作步骤。
实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中.微生物种类繁多,营养类型多样,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的种类很多。
但是,不同种类的培养基中,一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。
不同微生物对PH要求不一样.雷菌和酵母的培养基的pH一般是偏酸性的,而细菌和放线菌的培养基的pH一般为中性或微碱性的(嗜碱细菌和嗜酸细菌例外)。
所以配制培养基时,都要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到合适的范围。
此外,由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物,因此,已配制好的培养基必须立即灭菌.如果来不及灭菌,应暂存冰箱内,以防止其中的微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养的酸碱度所带来不利的影响。
高压蒸气灭菌是将持灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅套间的水沸腾而产生蒸气。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀.继续加热,此时由于蒸气不能道出,而增加了灭菌器内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供作微生物生长繁殖之用。
基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素,而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂,琼脂在常用浓度下96℃时溶化,实际应用时,一般在沸水浴中或下而垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
培养基 配制方法
培养基配制方法
培养基的配制方法是根据不同微生物的生长要求来确定的。
下面是一般的培养基配制方法:
1. 准备所需成分:根据所需的培养基成分,准备好相应的化学品和试剂,如氨基酸、糖类、盐类、维生素等。
2. 称量和溶解:按照配方中各成分的比例和浓度,称取相应的化学品,并加入适量的蒸馏水或去离子水中溶解。
3. 调节pH 值:使用pH 仪或pH 纸检测溶液的pH 值,并根据需要,用盐酸或氢氧化钠等酸碱溶液调节pH 值,使其符合要求。
4. 加热和消毒:将配制好的培养基溶液倒入试管、烧杯等容器中,并加热至沸腾,持续煮沸几分钟以杀灭其中的微生物。
5. 经冷却和灭菌:将煮沸后的培养基放置自然冷却至室温,并使用高压灭菌器或培养器进行灭菌处理,以确保培养基的无菌性。
6. 添加营养补充物:在无菌培养基冷却后,根据需要可以添加营养补充物,如血清、酵母提取物等,以满足特定微生物的生长需求。
7. 盛装分装:将配制好的培养基倒入无菌试管、琼脂瓶或平板上,根据需要冷却凝固成固体或保持为液体状态。
8. 贮存和标签:将分装好的培养基密封保存在低温冰箱或冷库中,并在容器上贴上标签,注明培养基的名称、配方、pH 值和贮存日期等信息。
以上是一般培养基的配制方法,不同类型的培养基可能还有其他特殊的步骤和要求。
在配制过程中要注意无菌操作,以确保培养基的纯净度。
微生物培养基的制备
微生物培养基的制备一、玻璃器皿的清洗在制备培养基的过程中,首先要使用一些玻璃器皿,如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。
这些器皿在使用前都要根据不同的情况,经过一定的处理,洗刷干净。
有的还要进行包装,经过灭菌等准备就绪后,才能使用。
1、新购的玻璃器皿除去包装沾染的污垢后,先用热肥皂水刷洗,流水冲净,再浸泡于1~2%的工业盐酸中数小时,使游离的碱性物质除去,再以流水冲净。
对容量较大的器皿,如大烧瓶、量筒等,洗净后注入浓盐酸少许,转动容器使其内部表面均沾有盐酸,数分钟后倾去盐酸,再以流水冲净,倒置于洗涤架上将水空干,即可使用。
2、用过的玻璃器皿凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿,使用后可随时冲洗,吸取过化学试剂的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定数量后再集中进行清洗。
有可能被病原菌污染的器皿,必须经过适当消毒后,将污垢除去,用皂液洗刷,再用流水冲洗干净。
若用皂液未能洗净的器皿,可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。
洗液的主要成份是重铬酸钾和浓流酸,其作用是将有机物氧化成可溶性物质,以便冲洗。
洗液有很强的腐蚀作用,使用时应特别小心,避免溅到衣服、身体和其他物品上。
二、培养基的类型在实验室中配制的适合微生物生长繁殖或累积代谢产物的任何营养基质,都叫做培养基(Media)。
由于各类微生物对营养的要求不同,培养目的和检测需要不同,因而培养基的种类很多。
我们可根据某种标准,将种类繁多的培养基划分为若干类型。
1、根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分,可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。
1)天然培养基天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。
用作这种培养基的主要原料有:牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。
用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分,但一般来讲,营养是比较丰富的,微生物生长旺盛,而且来源广泛,配制方便,所以较为常用,尤其适合于配制实验室常用的培养基。
培养基制备规程及使用规程
培养基制备规程及使用规程培养基制备规程1.目的规范本中心微生物实验室培养基制备工作,保证培养基的质量。
2.适用范围本规程适用于使用商品化干粉培养基制备各种待用培养基。
3.职责3.1 培养基制备人员负责按本规程制备各类培养基,及时填写成品培养基制备记录,编制培养基目录,粘贴标签。
3.2 科室负责人:负责指导、监督检验人员按规程制备培养基。
4.制备程序4.1 概述4.1.1 制备培养基所用的化学药品,均为化学纯。
有些试剂在使用前应先试用。
4.1.2 使用脱水培养基和其他含有有害物质(如胆盐或其他选择剂)的成分时,应遵循良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。
4.1.3 使用商品化脱水合成培养基制备培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配制。
如质量/体积、pH、制备条件、灭菌条件和操作步骤等。
4.1.4 使用个别成分制备培养基时,应按配方准确配制,并记录所使用成分的特性。
4.1.5 制备培养基常用的容器为玻璃、不锈钢铝、锅或搪瓷容器。
不宜使用铜或铁锅。
培养基中的含铜量过高时(>0.3mg∕1000mL),细菌不易生长;含铁量过高时(>0.14mg∕1000mL),则妨碍细菌毒素的产生。
1.1.1 制备培养基应使用蒸储水或相同质量的水,以排除测试条件下抑制或影响微生物生长的物质。
电阻率在25。
C时应≥300000Ω∙cm o 最好每周检测一次。
1.1.2 制备培养基时避免采用离子交换器生产的去离子水,其微生物含量可能较高,这种水在过滤灭菌后仍可能带有细菌生长的抑制因子。
4.3 称量和复水4.3.1 称量所需量的脱水培养基(注意缓慢操作,必要时佩戴口罩或在通风柜中操作,以防吸入含有有毒物质的培养基粉末),先加入少量的水,充分混合(注意避免培养基结块),然后再加水至所需的量。
4.3.2 必须选择合适的天平和量筒,以确保称量和移液的准确性。
4.4 溶解和分装脱水培养基加水后应适当加热,并不停搅拌使其快速溶解,必要时,重新溶解。
细菌培养实验报告
篇一:培养基的制备与灭菌实验报告陕西师范大学远程教育学院生物学实验报告报告题目培养基的制备与灭菌姓名刘伟学号专业生物科学批次/层次指导教师学习中心培养基的制备与灭菌一、目的要求1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
2. 掌握培养基的配置原则和方法。
3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。
二、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基:是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌:主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。
待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽,关闭排气阀继续加热。
此时蒸汽不溢出,压力增大,沸点升高,获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性,而达到灭菌的目的。
三、实验材料1. 药品:牛肉膏、蛋白胨、nacl、琼脂、1mol/l的naoh和hcl溶液。
2. 仪器及玻璃器皿:天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。
3. 其他物品:药匙、称量纸、ph试纸、记号笔、棉花等。
四、操作步骤(一)玻璃器皿的洗涤和包装1.玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。
将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中.用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净。
移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗。
洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。
2.灭菌前玻璃器皿的包装(1)培养皿的包扎:培养皿由一盖一底组成一套,可用报纸将几套培养皿包成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌。
包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。
(2)移液管的包扎:在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉),它的作用是避免外界及口中杂菌进入管内,并防止菌液等吸入口中。
塞入此小段棉花应距管口约0.5cm左右,棉花自身长度约1~1.5cm。
配制培养基的方法
配制培养基的方法
配制培养基的方法可以分为以下几个步骤:
1. 准备所需材料:培养基成分包括水、碳源、氮源、矿质元素、生长因子等。
根据不同的微生物需要,选择合适的成分。
2. 称量和溶解:根据配方将各成分称量出来,然后用适量的去离子水溶解。
3. 调整pH值:使用pH计将培养基的pH值调整到合适的范围内,通常为7.0左右。
4. 加热和消毒:将溶解后的培养基加热至沸腾,保持沸腾1-2分钟以杀灭可能存在的微生物。
然后,使用高压灭菌器或高温灭菌法将培养基灭菌。
5. 倾倒和分装:将已灭菌的培养基倒入无菌培养瓶或培养皿中,然后密封好。
6. 检查和保存:检查培养基是否有异常,如变色或发霉等。
将已制备好的培养基保存在合适的温度和条件下,以防止污染。
以上是一般的培养基制备方法,具体的步骤和条件可以根据不同的微生物和实验需要进行调整。
基础培养基的制备实验报告(共10篇)
基础培养基的制备实验报告(共10篇) 培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目:培养基的制备与灭菌二、实验目的:1、明确培养基的配置原则,掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理,学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材:1、药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器:三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理:1、培养基的制备包括一下几种成分:(1)水分:主要成分。
(2)N源:包括无机氮和有机氮。
(3)C源:主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
(4)无机盐:如NaCl、KH2PO4等。
微量元素:Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”,通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的,选用不同的培养基,但有机物总量不得超过15%,盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类:按成分:天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态:固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途:基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌,防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌:用理化手段杀灭一切微生物的营养体,包括芽孢和孢子,在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
(1)高压蒸汽灭菌:将物品放入封闭的加压灭菌器,加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽,将冷空气排尽,压力上升,使水沸点变高,导致菌体蛋白质变性,一般0.1MPa、121℃、15~30min 可以彻底灭菌,本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基,110℃、30min。
(2)干热灭菌:微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温,所以含水量小,不利于蛋白质受热变性,所以温度高,时间长。
(3)紫外灭菌:诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
(4)过滤除菌:实验室中用微孔滤膜(孔径一般为0.22μm)。
除病菌需更小。
五、实验步骤:1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯,加入100mL水,用玻璃棒搅匀溶解,移入三角瓶,并加入1.5g琼脂。
玻璃器皿的准备、常用仪器的使用及培养基的制备实验报告
实验一玻璃器皿的准备、常用仪器的使用及培养基的制备[实验目的]1、系统掌握玻璃器皿的准备方法及常用仪器的使用。
2、掌握一般培养基制备的原则和要求,熟悉一般培养基制备的过程。
[实验原理]一、玻璃器皿的无害处理:1、新购置的玻璃器皿因含有游离碱,一般在2%的盐酸溶液中浸泡数小时后再用清水洗净,也可在洗衣粉水中煮30-60min,取出用清水洗净。
2、常用玻璃器皿洗涤时可用鬃刷蘸取洗衣粉刷洗,然后用自来水冲洗干净。
3、带油污玻璃器皿先将倒空的玻璃器皿用10%的氢氧化钠浸泡半小时或放在5%的苏打液内煮两次,去掉油污,再用洗衣粉和热水刷洗。
4、带菌玻璃器皿经121℃高压蒸汽灭菌20min后,趁热倒去内容物,再用洗衣粉水刷洗干净,以水在内壁均匀分布成一薄层而不出现水珠为油垢除尽的标准。
经以上处理的玻璃器皿,可满足一般实验用。
少数实验对玻璃器皿清洁度要求较高,除用上述方法外,还应先用2%的HCl溶液浸泡数10min,再用自来水冲洗,蒸馏水淋洗2-3次。
有的尚需超纯水淋洗然后烘干备用。
二、玻璃器皿的包扎:吸管、平皿、瓶口等的包扎。
三、玻璃器皿的灭菌:分为两种,高压蒸汽灭菌法和干热灭菌法。
高压蒸汽灭菌法是湿热灭菌中应用最为广泛的一种方法。
其原理是依据在一个密闭的高压蒸汽灭菌器中,水的沸点随水蒸汽压的增加而上升,加压是为了提高水蒸汽的温度。
把待灭菌物品放在灭菌器内,当灭菌器内压力为0.1MPa时,温度可达到121℃,一般维持20min,即可杀死一切微生物的营养体及其孢子。
一般的培养基、玻璃器皿、金属用具、实验服、传染性标本等均可用这种方法有效灭菌。
灭菌的温度及时间视灭菌物品中的微生物种类及数量而定。
干热灭菌法也叫热空气灭菌法。
实验室通常使用恒温控制的电热鼓风干燥箱作为干热灭菌器。
此法常用于空的玻璃器皿、金属器具和其他耐高温的物品(如陶瓷培养皿盖、石蜡油、碳酸钙)的灭菌。
其优点是灭菌器皿保持干燥。
但带有胶皮、塑料的物品、液体及固体培养基不能用此法。
实验六、培养基的制备及常用器皿的准备共18页文档
2g 1g 0.5g 0.5g 0.01g 60g 30g 20g 1000ml
建议每班集中配1000ml, 然后均分到各组。
煮沸后倒入无塞三角瓶中,加棉塞灭菌。
四、实验方法和步骤
2、无菌水的制备(稀释用)
取 9 ml 蒸 馏 水 于 试 管 ( 18×180mm) 中 , 塞 棉塞,报纸包扎后湿热灭菌。
三、实 验 器 材
1、培养基:营养琼脂培养基、改良查氏培养基。 2、器皿:移液管、培养皿、试管、三角瓶、搪瓷 缸、量筒等。 3、仪器:高压蒸汽灭菌锅、电热鼓风干燥箱。 4、其他:报纸、纱布、棉花、棉线绳。
实验所需物品
综合性实验每排5人一组,每组请备齐下列物品: 1、洗干净的培养皿10个。 2、洗干净的试管10个。 3、洗干净的无塞三角瓶2个,具塞三角瓶2个。 4、培养皿桶1个。 5、1-2ml刻度吸管3支。 6、洗耳球1个、玻璃棒1支。 7、搪瓷量杯1个。 8、量筒1个。 ➢ 纱布、棉花、棉绳、培养基、天平等在最后一排实验台
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取90ml蒸馏水于具塞三角瓶中。
手提小型高压蒸汽灭菌
立式高压蒸汽灭菌
四、实验方法和步骤
四、实验方法和步骤
4、常用器皿准备(干热灭菌)
a. 刻度吸管的包装 b. 培养皿的包装
电热鼓风干燥箱(干热灭菌用)
五、 作 业 题
1、高压蒸汽灭菌和干热灭菌各适用于哪 些物品? பைடு நூலகம்、两种灭菌技术应注意哪些关键操作? 3、培养皿等干热灭菌前包扎的目的?
一、实验目的及要求
1、学会培养基的制备和常用器皿的准备 方法。 2、学会高压蒸汽灭菌及干热灭菌方法。
二、实 验 原理
培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。 培养基的种类很多,使用的原料也各有差异。但 从营养角度分析,培养基中一般含有微生物所需的 C源、N源、无机盐、生长因子以及水等。另外, 培养基中一般含有适宜的pH值,一定的氧化还原 电位及合适的渗透压。 任何一种培养基制成后应及时的灭菌,以备培养 菌使用,一般培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌。
实验七培养基的制备和常用器皿的准备
一、实验目的
1、明确培养基配制的原理;
2、掌握配制培养基的方法和步骤。
二、实验原理 1、培养基配制原则 目的明确:细菌、放线菌、酵母菌、霉菌 营养协调: 微生物六大营养要素:碳源、氮源、能源、无 理化条件适宜: 机盐生长因子、水 温度、pH值、氧化还原电位等 经济节约:
下次实验时间及内容
1、绘出你所观察到的各种细菌的特殊结构。 2、芽孢染色为什么要加热法?
四、实验步骤 1、培养基的制备: 称量→溶化→定容→调pH→(过滤) 培养基的分装: 2、常用器皿的准备: 玻璃器皿的包装 试管:1/3(半固体),1/4(液体),1/5(摆斜面) 3、灭菌 (1)移液管的包装 0.1 MPa或110 kPa灭菌20 min。 锥形瓶的分装: 4、斜面和平板的制作 斜面制作:斜面长度不超过试管长度1/2。 (2)三角瓶的包扎 振荡培养:10%,培养基:50~60% 5、培养基的无菌检查 平板制作:10~12 (3)试管的包扎 ml/平皿(18×180) 无菌检查:37℃培养1~2 d。 6、无菌水的制备 试管:4.5 ml或9 ml/18×180。 三角瓶:99 ml/250 ml
三、实验材料 1、药品:待配各种培养基的组成成分,琼脂,1 、药品:待配各种培养基的组成成分,琼脂,1 mol/L NaOH 溶液、1 mol/L HCl溶液。 溶液、1 HCl溶液。 2、仪器:天平,高压蒸汽灭菌锅 3、玻璃器皿:移液管,试管,烧杯,量筒,锥形瓶, 培养皿,玻璃漏斗等。 4、其它物品:药匙,称量纸,pH试纸,记号笔,棉 、其它物品:药匙,称量纸,pH试纸,记号笔,棉 花,纱布,线绳,牛皮纸,报纸等。
培养基的制备实验报告
As a high school student with a keen interest in science, Ive always been fascinated by the marvels of technology that we take for granted every day. One such wonder is the refrigerator, a common household appliance that plays a crucial role in preserving food and making our lives more convenient. But have you ever wondered how a refrigerator manages to keep things cold? Let me take you on a journey to understand the science behind this everyday miracle.The heart of a refrigerators cooling system is its refrigeration cycle, which is based on the principles of thermodynamics. The process begins with a substance known as a refrigerant, which is typically a fluid that can easily evaporate and condense. This refrigerant absorbs heat from the interior of the fridge, causing it to evaporate into a gas. This is the first step in the refrigeration cycle and is known as the evaporation process.Once the refrigerant has evaporated, it is drawn into a compressor, a device that increases the pressure of the gaseous refrigerant. This increase in pressure causes the temperature of the refrigerant to rise, which is a crucial step in the cycle. The highpressure, hot refrigerant gas then moves to the condenser, which is usually located at the back of the refrigerator. Here, the heat from the refrigerant is released into the surrounding environment, causing the refrigerant to condense back into a liquid state.The liquid refrigerant, now cooled, is then allowed to pass through an expansion valve, where its pressure is rapidly decreased. This sudden drop in pressure causes the refrigerant to cool even further, turning it into a very cold liquid. This cold liquid then flows back into the refrigeratorsevaporator, where it absorbs heat from the air inside the fridge, thus cooling it down.This entire process is a continuous cycle, powered by an electric motor that drives the compressor. The refrigerant constantly circulates through the system, absorbing heat from the interior and releasing it outside, ensuring that the temperature inside the fridge remains consistently low.But why is it important for the refrigerator to keep things cold? Well, low temperatures slow down the growth of bacteria and other microorganisms, which helps to preserve food for longer periods. This is particularly important for perishable items like meat, dairy products, and fresh vegetables, which can spoil quickly if not stored at the right temperature.Moreover, the cooling effect of a refrigerator also helps to maintain the texture and flavor of food. For instance, ice cream would lose its creamy texture and become a soupy mess if it were not kept cold. Similarly, chilled beverages are often more refreshing and enjoyable than those served at room temperature.In addition to its role in food preservation, refrigerators also have a significant impact on our daily lives. They allow us to stock up on groceries and reduce the frequency of shopping trips, saving time and effort. They also enable us to enjoy a variety of foods that would otherwise be difficult to store, such as frozen meals and readymade snacks.Furthermore, the invention of the refrigerator has had a profound impacton society as a whole. It has transformed the way we eat, allowing for a greater variety of foods to be available yearround. It has also played a crucial role in the development of modern food distribution systems, enabling perishable goods to be transported over long distances without spoilage.In conclusion, the refrigerator is a remarkable piece of technology that we often take for granted. Its ability to keep things cold is the result of a complex refrigeration cycle that relies on the principles of thermodynamics. By understanding the science behind this everyday appliance, we can appreciate the ingenuity of its design and the significant role it plays in our lives. So the next time you open your fridge to grab a cold drink or store some leftovers, take a moment to marvel at the hidden workings that make it all possible.。
细菌培养实验报告
细菌培养实验报告文件编码(008-TTIG-UTITD-GKBTT-PUUTI-WYTUI-8256)篇一:培养基的制备与灭菌实验报告陕西师范大学远程教育学院生物学实验报告报告题目培养基的制备与灭菌姓名刘伟学号专业生物科学批次/层次指导教师学习中心培养基的制备与灭菌一、目的要求1.掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
2.掌握培养基的配置原则和方法。
3.掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。
二、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基:是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌:主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。
待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽,关闭排气阀继续加热。
此时蒸汽不溢出,压力增大,沸点升高,获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性,而达到灭菌的目的。
三、实验材料1.药品:牛肉膏、蛋白胨、nacl、琼脂、1mol/l的naoh和hcl溶液。
2.仪器及玻璃器皿:天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。
3.其他物品:药匙、称量纸、ph试纸、记号笔、棉花等。
四、操作步骤(一)玻璃器皿的洗涤和包装1.玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。
将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中.用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净。
移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗。
洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。
2.灭菌前玻璃器皿的包装(1)培养皿的包扎:培养皿由一盖一底组成一套,可用报纸将几套培养皿包成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌。
包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。
(2)移液管的包扎:在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉),它的作用是避免外界及口中杂菌进入管内,并防止菌液等吸入口中。
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三、实验材料 1、药品:待配各种培养基的组成成分,琼脂,1 、药品:待配各种培养基的组成成分,琼脂,1 mol/L NaOH 溶液、1 mol/L HCl溶液。 溶液、1 HCl溶液。 2、仪器:天平,高压蒸汽灭菌锅 3、玻璃器皿:移液管,试管,烧杯,量筒,锥形瓶, 培养皿,玻璃漏斗等。 4、其它物品:药匙,称量纸,pH试纸,记号笔,棉 、其它物品:药匙,称量纸,pH试纸,记号笔,棉 花,纱布,线绳,牛皮纸,报纸等。
实 验 七 培养基的制备和常用器皿的准备
一、实验目的
1、明确培养基配制的原理;
2、掌握配制培养基的方法和步骤。
二、实验原理 1、培养基配制原则 目的明确:细菌、放线菌、酵母菌、霉菌 营养协调: 微生物六大营养要素:碳源、氮源、能源、无 理化条件适宜: 机盐生长因子、水 温度、pH值、氧化还原电位等 经济节约:
四、实验步骤 1、培养基的制备: 称量→溶化→定容→调pH→(过滤) 培养基的分装: 2、常用器皿的准备: 玻璃器皿的包装 试管:1/3(半固体),1/4(液体),1/5(摆斜面) 3、灭菌 (1)移液管的包装 0.1 MPa或110 kPa灭菌20 min。 锥形瓶的分装: 4、斜面和平板的制作 斜面制作:斜面长度不超过试管长度1/2。 (2)三角瓶的包扎 振荡培养:10%,培养基:50~60% 5、培养基的无菌检查 平板制作:10~12 (3)试管的包扎 ml/平皿(18×180) 无菌检查:37℃培养1~2 d。 6、无菌水的制备 试管:4.5 ml或9 ml/18×180。 三角瓶:99 ml/250 ml
下次实验时间及内容
1、绘出你所观察到的各种细菌的特殊结构。 2、芽孢染色为什么要加热或延长染色时间? 3、荚膜染色为什么要用负染色法?