仪器分析实验讲义V0.4 (1)
仪器分析讲义正式
生命科学与技术学院仪器分析实验讲义2012.6实验一荧光分光光度法测定维生素B2一、实验目的1、学习荧光分析法的基本原理2、了解荧光分光光度计的构造，掌握其使用方法。
二、实验原理在一定波长紫外光的照射下，维生素B2会发出荧光。
在PH6－7 的溶液中荧光最强，在PH11 时荧光消失。
在低浓度时，溶液的荧光强度与溶液中荧光物质的浓度呈线性关系。
因此，选择荧光峰值波长为测量波长，测量维生素B2 溶液的荧光强度，可对维生素B2进行定量分析。
本实验采用标准曲线法来测定维生素B2的含量。
三、仪器与试剂仪器960 型荧光分光光度计、比色皿1个、50ml 容量瓶6 个、5.0ml吸量管1支。
试剂维生素B2标准溶液、1％醋酸溶液、维生素B2样品溶液。
四、实验内容1、配置标准溶液（实验室准备）（1）维生素B2标准溶液：取维生素B2约10mg，精密称定，置1000ml 容量瓶中，用1％醋酸溶解并稀释至刻度。
再精密量取此溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml 分别置50ml 容量瓶中，以1％醋酸稀释至刻度，待测。
（2）维生素B2样品溶液：取维生素B2片20 片，精密称定，计算平均片重。
研细混匀后，精密称取2片量的维生素B2片样品粉未，置1000ml 容量瓶中，用1％醋酸溶解并稀释至刻度。
滤过。
精密取续滤液2ml, 置50ml 容量瓶中，以1％醋酸稀释至刻度。
待测。
2、测定（1）扫描图谱：选择EM=200－700nm，lEX=365nm(固定波长)对空白和维生素B2标准溶液进行扫描，找出荧光峰值处对应的lEMmax。
（2）标准工作曲线的绘制（F-C）：在lEMmax下分别测定上述五种维生素B2标准溶液的荧光强度（INT），然后以浓度（ug/100ml）为横坐标，荧光强度（INT）为纵坐标绘制标准工作曲线。
（3）维生素B2样品溶液中维生素B2的含量测定：将配置好的维生素B2样品溶液置1cm比色皿中，以1％醋酸为空白，在上述波长下测定荧光强度值，从工作曲线上求出维生素B2样品溶液中维生素B2的浓度。
仪器分析实验讲义
实验一 荧光物质稀溶液的激发、发射和同步荧光光谱测定一. 实验目的1.学习荧光分析法的基本原理和LS －55B 发光分析仪的操作。
2.学习同步荧光的操作，了解同步荧光的优点。
二. 实验原理荧光是分子从激发态的最低振动能级回到原来基态时发射的光。
利用物质被光照射后产生的荧光辐射对该物质进行定性分析和定量分析的方法，称为荧光分析。
在一定光源强度下，若保持激发波长ex λ不变，扫描得到的荧光强度与发射波长em λ的关系曲线，称为荧光发射光谱；反之，保持em λ不变，扫描得到的荧光强度与ex λ的关系曲线，则称为荧光激发光谱。
在一定条件下，荧光强度与物质浓度成正比，这是荧光定量分析的基础。
荧光分析的灵敏度不仅与溶液的浓度有关，而且与紫外光照射强度及所选测量波长等因素有关。
苯酚由于其共轭结构，有荧光活性，可以用荧光分析法测定。
它们的激发光谱和发射光谱有互相重叠的现象。
对于复杂组分，当激发光谱和发射光谱有互相重叠的现象时，可以用同步荧光扫描，同步扫描荧光光谱技术可以简化、窄化光谱，提高选择性。
三. 实验仪器和试剂 1. LS-55型发光谱仪;2. 移液枪(德国BRAND 公司生产);3. 50ml 容量瓶，25ml 容量瓶10支;4. 苯酚储备液：960mg/L5. 去离子水; 四. 实验内容 1.预扫描(pre-scan)用储备液配制浓度为10ppm （mol/L ）的工作液，设定仪器参数，进行全波长预扫描，并记录扫描结果，得出最大激发和发射波长，同时查看其瑞利散射波长、以及双倍频峰波长。
2．激发光谱、发射光谱和同步荧光扫描①设定合适的参数，分别对苯酚溶液进行荧光激发、发射和同步荧光光谱扫描。
②取浓度为0.010（mol/L ）的工作液，扫描发射光谱，加水稀释后再在同样波长下扫描发射光谱，观察荧光猝灭效应。
发射光谱参数：扫描波长范围200—750nm ；Ex=214nm 、270nm ，扫描速度=1000 nm/min, Ex-Slit=10nm, Em-slit=5nm,，记住取文件名。
(精)仪器分析实验讲义
实验一722 型分光光度计的性能检测一、目的1、学会使用分光光度计2、掌握分光光度计的性能检验方法二、提要1、分光光度计的性能好坏，直接影响到测定结果的准确性，因此新购仪器及使用一定时间后，均需进行检验调整。
2、利用KMnO4溶液的最大吸收峰值来检验波长的精度。
3、用同种厚度的比色皿，由于材料及工艺等原因，往往造成透光率的不一致，从而影响测定结果，故在使用时须加以选择配对。
三、仪器与试剂1、722 型分光光度计；2、小烧杯；3、坐标纸；4、滴管；5、擦镜纸；6、KMnO4溶液；四、操作步骤1、吸收池透光率的检查（测定透光率）吸收池透光面玻璃应无色透明，并应无水、干燥。
检查方法如下：以空气的透光率为100%，则比色皿的透光率应不低于84%，同时在450nm、650nm 处测其透光率，各透吸收池透光率差值应小于5%。
2、吸收池的配对性（测定透光率）同种厚度的吸收池之间，透光率误差应小于0.5%。
检查方法如下：将蒸馏水分别注入厚度相同的几个吸收池中。
以其中任一个比色皿的溶液做空白，在440nm 波长处分别测定其它各比色皿中溶液的透光率，然后选择相差小于0.5% 的吸收池使用。
3、重现性（光度重复性）（测定透光率）仪器在同一工作条件下，用同种溶液连续测定7 次，其透光率最大读数与最小读数之差（极差）应小于0.5%。
检查方法如下：以蒸馏水的透光率为100%，用同一KMnO4溶液连续测定7 次，求出极差，如小于0.5%，则符合要求。
4、波长精度的检查（测定A）为了检查分光系统的质量，可用KMnO4溶液的最大吸收波长525nm 为标准，在待检查仪器上测绘KMnO4溶液的吸收曲线。
检查方法如下：取3.0×10-5mol/L 的KMnO4溶液，以蒸馏水为空白，在460nm~580nm 范围内，分别测定460、480、500、510、520、522、524、525、526、528、530、540、550、560、570、580nm 波长处的吸光度，在坐标纸上绘出吸收曲线。
仪器分析实验讲义
大连民族学院化学工程系《仪器分析与波谱解析》实验讲义编写：吴小伟实验1 可见吸收光谱的绘制一、实验目的1. 初步熟悉722型分光光度计的基本构造，掌握使用方法。
2. 熟悉测绘吸收光谱的一般方法，加深理解Lamber-Beer 吸收方法。
3. 学习标准曲线定量方法，掌握吸收光谱的绘制方法二、实验原理在建立一个新的吸收光谱法时，必须进行一系列条件试验，包括显色化合物的吸收光谱曲线（简称吸收光谱）的绘制、选择合适的测定波长、显色剂浓度和溶液pH 值的选择及显色化合物影响等。
此外，还要研究显色化合物符合朗伯－比尔定律的浓度范围、干扰离子的影响及其排除的方法等。
本实验利用分光光度计能连续变换波长的性能，测定邻二氮菲－Fe 2+的吸收光谱，并选择合适的测定波长。
在pH=3～9的溶液中，Fe 2+ 与邻二氮菲（phen ）生成稳定的橙红色络合物，λmax ＝ 508 nm ，ε＝1.1×104 L/（mol·cm ），lg β3 = 21.3(20 ℃)()++→+2323phen Fe phen Fe （橙红色）Fe 3+ 与邻二氮菲生成1：3的淡蓝色络合物（lg β3=14.1），故显色前应先用盐酸羟胺将Fe 3+ 还原为Fe 2+，其反应为-++++++↑+→⋅+Cl H O H N Fe HCl OH NH Fe 24222222223在508 nm 处测定吸光度值，用标准曲线法可求得水样中Fe 2＋的含量。
若用盐酸羟胺等还原剂将水中Fe 3+ 还原为Fe 2+，则可测定水中总铁、Fe 2＋ 和Fe 3＋各自的含量。
三、仪器与试剂仪器：722型分光光度计；具塞磨口比色管50 mL；吸量管1，2，5 mL；洗耳球试剂：1. 铁标准溶液（I）（Fe2+ ＝100 μg/mL）：准确称取0.7022 g分析纯硫酸亚铁铵Fe(SO4)·(NH4)2(SO4)·6H2O，放入烧杯中，加入20 mL（1＋1）HCl，溶解后移入1000 mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，混匀。
仪器分析实验讲义
仪器分析实验讲义高效液相色谱法的应用一、实验目的1.了解高效液相色谱仪的结构以及使用方法。
2.掌握根据保留值、利用标准样品进行定性分析的方法，了解影响保留值的因素。
3.掌握色谱定量分析的原理，练习用标准曲线法定量测定混合物组分的含量。
二、实验原理高效液相色谱仪是利用混合物中各组分在流动相和固定相中具有不同的吸附和脱附能力，当两相做相对运动时，样品中各组分在两相中受到吸附和脱附力的反复作用，从而使混合物中各组分得到分离。
根据各组分的色谱峰高或峰面积，即可求出各组分的含量。
三、仪器与试剂仪器: BFS5100高压液相色谱仪；UV检测器试剂: 咖啡因（分析纯）；三氯甲烷（分析纯）四、色谱条件色谱柱: ZYll04 ；流动相: 甲醇:水 = 40:60 ；流量: 1mL／min进样量：满管进样；检测波长: 275 nm五、实验步骤1.称取0.1000克的纯咖啡因，用分析纯的三氯甲烷定容于100mL 的容量瓶中，分别取2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL于50mL的容量瓶中，用三氯甲烷稀释至刻度，过滤后分别测取各标样的保留时间及色谱峰面积，绘制工作曲线。
2.准确称取0.3克茶叶，用30mL蒸馏水煮沸10min，冷却后，将上层清液移至100mL容量瓶中定容，取25ml此液于分液漏斗中，加入 lmL 1mol L-1的NaOH 溶液，然后用氯仿萃取，并用氯仿定容至25mL（此为未知液）。
3.测取未知液的图谱，计算未知液中咖啡因的含量。
思考题：1.用标准曲线法定量的优缺点是什么？2.若标准曲线用咖啡因浓度对峰高作图，能给出准确结果吗？与本实验的标准曲线相比何者优越？为什么？气相色谱分析的应用一、实验目的1. 了解气相色谱仪的构造及使用方法。
2. 熟悉相对定量校正因子定义及求取方法。
3. 熟悉内标法定量公式及应用。
二、实验原理内标法就是把标准物质和被测混合物放在一起进行分析，在同一张色谱图上得到样品和标准物质的色谱峰，原后根据样品重量（m i ）和内标物重量（m s ）及组分和内标物的峰面积（A i 和A s ）按下式求出组分的含量:)/()/(%i s w s i i m m F A A P ??=式中 P i %是被测物的百分含量; F w 是相对校正因子，是被测物的校正因子与标准物质的校正因子之比。
仪器分析说课稿
仪器分析说课稿一、课程定位仪器分析是高职生物技术类与食品检测类专业的一门专业基础课,也是一门实践性、应用性比较强的课程。
加强学生基本的实验技能培养与训练,提高学生动手能力、观察能力、分析问题与解决问题能力及培养学生的创新能力是现今仪器分析教学的关键之一。
仪器分析先导课程有无机及分析化学，有机及生物化学；后续课程有产品分析检测技术，食品检测技术等。
二、教学资源1、教材及参考资料黄一石主编，高职高专规划教材和实习指导书2、多媒体资源精品课程、图片库、视频库3、实训场所资源分析实验室4、师资队伍三、教学设计与方法在传统的教学中,教师大多采取通堂讲授,即灌输、填鸭式的方法,学生参与的少,学习的主动性、积极性不够,学习效果不理想。
我们经过积极的探索,采用了启发式、直观式、现场教学、讲授与实验相结合、课堂讨论等多种形式,充分突出学生的主体地位,教师积极引导,学生主动参与,使师生在和谐教学环境中完成教学任务。
1、采用现场教学,增强学生感性认识,培养学生观察和分析能力高职仪器分析主要讲解分析检测仪器的结构，原理和使用维护方法等。
其中仪器的工作原理和结构两部分内容看似简单,但处理不好,就会使学生感到非常枯燥,心生厌烦。
为了提高学生的学习兴趣,我们在教学中除利用多媒体课件为学生提供大量图片外,我们还大胆地把课堂搬出教室,走进分析实验室,采用现场教学方法。
如在学习原子吸收分光光度法时，我们走进实验室借助一台淘汰的仪器，拆卸下来认识各大主要部件，学习工作原理。
在教师的引导下,学生不但很快掌握了仪器的结构和工作原理，还加深的仪器使用方法的学习。
总之,现场教学使理论与实际更紧密结合,不但有助学生掌握知识,也培养了学生观察、分析和总结的能力。
2、运用多媒体等现代教育技术, 加强理论与实际的联系, 培养学生应用能力为了使教学更形象、生动, 以往的做法是采用挂图和实物仪器, 但挂图和实物仪器体积较大,存放、携带也不放便。
随着现代教学技术不断发展,教学辅助手段也日趋多样化。
仪器分析实验讲义与指导书新版
仪器分析实验讲义仪器分析课程组嘉兴学院生物与化工学院2010年9月目录实验一火焰原子吸收法测定钙含量 (3)实验二分子荧光法测定罗丹明B的含量 (8)实验三有机化合物的紫外光谱分析 (13)实验四苯甲酸等有机物的红外光谱测定 (15)实验五用氟离子选择性电极测定水中微量F- (22)实验六循环伏安法测定铁氰化钾的电极反应过程 (25)实验七气相色谱法测定苯、甲苯和乙醇含量 (29)实验八苯、萘的高效液相色谱分析及柱效能的测定 (34)实验一火焰原子吸收法测定钙含量一、实验目的1．了解原子吸收分光光度计的主要结构及工作原理。
2．掌握原子吸收分光光度计的操作方法及原子吸收分析方法。
3．了解火焰原子吸收分析条件的选择。
二、实验原理溶液中的钙离子在火焰温度下转变为基态钙原子蒸气，当钙空心阴极灯发射出波长为422.7nm的钙特征谱线通过基态钙原子蒸气时，被基态钙原子吸收，在一定浓度范围和一定火焰宽度的情况下，其吸光度与溶液中钙浓度成正比，符从比尔定律：A=k’c其中c为待测元素钙的含量或浓度，k’在一定实验条件下为一常数，A为吸光度。
这是原子吸收分光光度分析的定量基础。
配制一组合适浓度的钙标准溶液，由低到高浓度，依次喷入火焰，分别测定吸光度。
以测得的吸光度为纵坐标，待测元素的含量或浓度为横坐标，绘制A-c 标准曲线。
在相同条件下，喷入待测试样溶液，根据测得的吸光度，由标准曲线求出试样中待测元素的含量，这种定量方法称为标准曲线法。
标准曲线法定量时，要求所配制的标准溶液的浓度应在吸光度与浓度呈直线关系的范围内，标准溶液与待测溶液都用相同的试剂处理，分析过程中操作条件保持不变，并且扣除空白值。
标准曲线法简便、快速，适用于组成简单的试样分析。
对于组成不确定的较为复杂的样品分析可以采用标准加入法：取相同体积的试样溶液两份，分别移入容量瓶A和B中，另取一定量的标准溶液加入到B中，然后将两份溶液稀释至刻度，测定A和B的吸光度。
《仪器分析》教案讲义-15.doc
《仪器分析》教案讲义-15.doc第⼗五章⽓相⾊谱法%1.教学内容1.⽓相⾊谱分离的基本原理2.⽓相⾊谱仪的组成与⼯作原理3.影响⽓相⾊谱分离的因素和分离条件的选择4.⾊谱柱的性能与选择%1.重点与难点1.常⽤检测器的⼯作原理、结构和性能⽐较2.Van Deemt er⽅程在⾊谱分离条件的优化与选择中的具体应⽤3.碳数规律、沸点规律和保留指数在实际定性分析中的应⽤%1.教学要求1.熟悉⽓相⾊谱仪器的流路、备组成部分的详细结构和⼯作原理2.在⾊谱实验条件优化中灵活应⽤Van Deemter⽅程3.掌握碳数规律、沸点规律、保留指数以及各种定景⽅法%1.学时安排4学时⽤⽓体作为流动相的⾊谱法称为⽓相⾊谱法。
根据固定相的状态不同，⼜可将其分为⽓固⾊谱和⽓液⾊谱。
⽓固⾊谱是⽤多孔性固体为固定相，分离的主要对象是⼀些永久性的⽓体和低沸点的化合物。
但由于⽓固⾊谱可供选择的固定相种类甚少，分离的对象不多，且⾊谱峰容易产⽣拖尾，因此实际应⽤较少。
⽓相⾊谱多⽤⾼沸点的有机化合物涂渍在惰性载体上作为固定相，⼀般只要在450 °C以下有1.5KPa-1 OKPa的蒸汽压且热稳定性好的有机及⽆机化合物都可⽤⽓液⾊谱分离。
由于在⽓液⾊谱中可供选择的固定液种类⼻⾉多，容易得到好的选择性，所以⽓液⾊谱有⼴泛的实⽤价值。
第⼀节⽓相⾊谱仪（-）⽓相⾊谱流程⽓相⾊谱法⽤于分离分析样品的基本过程如下图：⽓相⾊谱过程⽰意图由⾼压钢瓶1供给的流动相载⽓。
经减压阀2、净化器3、流量调节器4和转⼦流速计5后，以稳定的压⼒恒定的流速连续流过⽓化室6、⾊谱柱7、检测器8,最后放空。
⽓化室与进样⼝相接，它的作⽤是把从进样⼝注⼊的液体试样瞬间⽓化为蒸汽，以便随载⽓带⼊⾊谱柱中进⾏分离，分离后的样品随载⽓依次带⼊检测器，检测器将组分的浓度（或质量）变化转化为电信号，电信号经放⼤后，由记录仪记录下来，即得⾊谱图。
（⼆）⽓相⾊谱仪的结构⽓相⾊谱仪由五⼤系统组成：⽓路系统、进样系统、分离系统、控温系统以及检测和记录系统。
仪器分析完整版(详细)上课讲义
仪器分析完整版(详细)第一章绪论1.仪器分析是以物质的物理组成或物理化学性质为基础，探求这些性质在分析过程中所产生分析信号与被分析物质组成的内在关系和规律，进而对其进行定性、定量、进行形态和机构分析的一类测定方法，由于这类方法的测定常用到各种比较贵重、精密的分析仪器，故称为仪器分析。
与化学分析相比，仪器分析具有取样量少、测定是、速度快、灵敏、准确和自动化程度高的显著特点，常用来测定相对含量低于1%的微量、痕量组分，是分析化学的主要发展方向。
2.仪器分析的特点：速度快、灵敏度高、重现性好、样品用量少、选择性高局限性：仪器装置复杂、相对误差较大3.精密度：是指在相同条件下对同一样品进行多次测评，各平行测定结果之间的符合程度。
4、灵敏度：仪器或方法的灵敏度是指被测组分在低浓度区，当浓度改变一个单位时所引起的测定信号的该变量，它受校正曲线的斜率和仪器设备本身精密度的限制。
5.准确度：是多次测定的平均值与真实值相符合的程度，用误差或相对误差来描述，其值越小准确度越高。
6．空白信号：当试样中没有待测组分时，仪器产生的信号。
它是由试样的溶剂、基体材质及共存组分引起的干扰信号，具有恒定性，可以通过空白实验扣除。
7.本底信号：通常将没有试样时，仪器所产生的信号主要是由随机噪声产生的信号。
它是由仪器本身产生的，具有随机性，难以消除，但可以通过增加平行测定次数等方法减小；、8.仪器分析法与化学分析法有何异同：相同点：①都属于分析化学②任务相同：定性和定量分析不同点：①与化学分析相比，仪器分析具有取样量少、测定快速、灵敏、准确和自动化程度高等特点②分析对象不同：化学分析是常量分析，而仪器分析是用来测定相对含量低于1%的微量、衡量组分，是分析化学的主要发展方向9.仪器分析主要有哪些分类：①光分析法：分为非光谱分析法和光谱法两类。
非光谱法：是不涉及物质内部能级跃迁的，通过测量光与物质相互作用时其散射、折射、衍射、干涉和偏振等性质的变化，从而建立起分析方法的一类光学分析法。
仪器分析讲义
目录实验一取代基电效应对芳烃吸收带的影响实验二紫外分光光度法测定苯甲酸钠的含量（标准曲线法）实验三柱色谱法测定氧化铝的活度实验四纸色谱法分离分析有机酸实验五薄层色谱法分离分析混合染料实验六高效液相色谱定性分析实验七气相色谱法定性分析实验八高效液相色谱法定量分析（外标法一点法）实验九固体样品红外透射光谱的测定实验十气相色谱法测定乙酸乙酯中苯的含量（内标两点法）实验十一大黄中大黄素的薄层鉴别及分析实验十二有机化合物的液质联用分析实验一 取代基电效应对芳烃吸收带的影响一、目的要求通过测定几种典型的发色基团取代苯和助色基团取代苯的E 2吸收带及B 吸收带，掌握取代基的共轭效应和诱导效应对吸收带波长影响的规律，及它们在结构分析中的应用。
二、原理取代基对芳烃吸收带的影响与取代基结构、取代基个数、位置有关。
研究取代基对芳烃吸收带的影响规律，对确定有机化合物结构具有重要的作用。
对于发色团取代的苯，由于含有π键的发色团(C C 、C O 、N O 等)与苯相连时，ππ-共轭，产生更大的共轭体系，E2带(ε＞104)红移，在200～250nm 范围出现；同时B 吸收带也产生较大红移。
若取代基是含有n 电子的发色团，分子除了可以发生*ππ→跃迁之外，还可能发生*π→n 跃迁，谱图中还会出现低强度的R 吸收带。
对于助色团取代苯，由于含有未成键电子对的助色团(-OH,-OR,-NH 2,-NR 2，-X等)与苯相连时，产生π-p 共轭，使E 2带、B 带max λ均红移；B 带吸收强度增大，精细结构消失。
三、仪器与试剂（1）仪器：紫外分光光度计。
（2）试剂：浓度为5.0×10-3 mol/L 的苯/乙醇溶液；6.0×10-5 mol/L 的苯甲酸/乙醇溶液；5.0×10-4mol/L 的苯胺/乙醇溶液；1mol/L 的HCl/乙醇溶液；无水乙醇。
四、实验步骤1．用1cm 吸收池，以无水乙醇为参比，分别测定苯、苯甲酸、苯胺的乙醇溶液在波长200~340nm 区域内的紫外吸收光谱。
仪器分析实验讲义(全部)
仪器分析实验实验1 邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验原理邻二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，κ508=1.1 ×104L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。
其吸收曲线如图1-1所示。
显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。
有关反应如下：2Fe3++2NH2OH·HC1＝2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2C1－图1-1 邻二氮菲一铁(Ⅱ)的吸收曲线用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。
二、仪器和试剂1．仪器721或722型分光光度计。
2．试剂(1)0.1 mg·L-1铁标准储备液准确称取0.702 0 g NH4Fe(S04)2·6H20置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H2S04溶液，溶解后，定量转移到1L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
(2)10-3 moL-1铁标准溶液可用铁储备液稀释配制。
(3)100 g·L-1盐酸羟胺水溶液用时现配。
(4)1.5 g·L-1邻二氮菲水溶液避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。
(5)1.0 mol·L-1叫乙酸钠溶液。
(6)0.1 mol·L-1氢氧化钠溶液。
三、实验步骤1．显色标准溶液的配制在序号为1～6的6只50 mL容量瓶中，用吸量管分别加入0，0.20，0.40，0.60，0.80，1.0 mL铁标准溶液(含铁0.1 g·L-1)，分别加入1 mL 100 g·L-1盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min，再各加入2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液、5 mL 1.0 mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
仪器分析实验讲义--已改
仪器分析实验讲义编撰：王军锋聂迎春肖正凤陕西学前师范学院实验一 水样的pH 值测定一、实验目的1.学习pHS-3C 型酸度计的使用方法。
2.了解电位法测定水的pH 值的原理和方法。
二 实验原理在日常生活和工农业生产中，所用水的质量都有一定标准。
在进行水质检验中，水的pH 值是重要检验项目之一，如生活饮用水pH 要求为6.5~8.5。
低压锅炉水要求pH 为10~12。
电子工业、实验试剂配制则需要中性的高纯水。
现在测量水的pH 值比较精确的方法是电位法，该法是将玻璃电极(指示电极)、饱和甘汞电极(参比电极)与待测试液组成原电池，用酸度计（一种精密电位差计）测量其电势。
原电池用下式表示：Ag|AgCl(s)|HCl(0.1mol ·L -1)|玻璃膜|试液溶液(xmol ·L -1)║KCl(饱合)|Hg 2Cl 2(s)|Hg 玻璃电极 被测溶液 甘汞电极玻璃电极为负极，饱和甘汞电极为正极。
在一定条件下，电池的电动势E 与pH 为直线函数关系(推导过程从略)。
试电池pH FRT303.2'K E += 由上式看出，求出E 电池和K ，即可知道试液的pH 值。
E 电池可通过测量求得，而K ’是由内外参比电极及难于计算的不对称电位和液接电位所决定的常数，很难求得。
在实际测量时，选用和待测试液pH 值相似的、已知pH 值的标准缓冲溶液在pH 计上进行校正(这个过程叫定位)，即测量pH 是采用相对方法：pH ()pH 2.303x x s sFE E RT =-+通过以上步骤，可在酸度计上直接读出试液的pH 值。
玻璃电极的响应斜率与温度有关，在一定的温度下应该是定值，25℃时玻璃电极的理论响应斜率为0.0591。
但是玻璃电极由于制作工艺等的差异，每个pH 玻璃电极其斜率可能不同，须用实验方法来测定。
一支电极应使用两种不同pH 值的标准pH 缓冲溶液进行校正，两种缓冲溶液定位的pH 值误差应在0.05之内。
仪器分析实验整理讲义
2016 年 3 月
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实验目录
实验一、核磁共振氢谱确定有机物结构 实验二、X 射线衍射的物相分析 实验三、电感耦合等离子体发射光谱法测定茶叶中的金属元素 火焰原子吸收法测定自来水中的钙、镁硬度 实验四、常规样品的红外光谱分析 实验五、苯丙氨酸和酪氨酸的紫外可见光谱分析 实验六、苯丙氨酸和酪氨酸的分子荧光光谱分析 实验七、内标法测定奶茶中的香兰素含量 实验八、毛细管电泳仪分离测定雪碧、芬达中的苯甲酸钠 实验九、液相色谱仪分离测定奶茶、可乐中的咖啡因 实验十、循环伏安法观察 Fe(CN)6 及抗坏血酸的电极反应过程 实验十一、氟离子选择性电极法测定湖水中 F-含量 实验十二、差热与热重分析研究 Cu2SO4.5H2O 脱水过程
图 2: C9H10O2 的 1HNMR 谱
七、数据处理
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将有关数据填在下表中
峰的代号 化学位移（ppm） 积分面积 质子数 峰形 结构式
实验 2-1 X 射线衍射物相分析
一、实验目的
(1) 熟悉 Philips 射线衍射仪的基本结构和工作原理 (2) 基本学会样品测试过程 (3) 掌握利用衍射图进行物相分析的方法
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此键灯亮。当听到计算机一声鸣叫，弹出原有的样品管（有样品管时） ，若无样品管时，能 听到从孔穴中发出气流向上喷射的呼呼声， 等待探头穴中向上的气流可以托住样品管时， 方 可将样品管放到探头穴口，放入样品管。立即再按一下“Lift ln/of”键，使灯熄灭，样品菅徐 徐落下到位待测。 (2) 样品管外部用天然真丝布擦拭干净后再插入转子中，放在深度规中量好高度（此处 操作失误有可能摔碎样品管损害探头！ ） 。 (3) 更换样品管。按下“Lift on/off”键，此时灯亮。几秒后，探头穴内发出气流声，计 算机一声鸣叫，弹出原有的样品管（有样品管时） ，或者无样品管时从孔穴中发出气流向上 喷射的呼呼声，等待探头穴中向上的气流可以托住样品管时，方可将样品管放到探头穴 口；此时才能放入样品管。立即再按一下“Lift ln/of”键，使灯熄灭，样品管徐徐落到指定位 置待测。 (4) 将仪器调节到可作常规氢谱的工作状态(调入一个成功的氢谱)。 (5) 输入“edc”（建立一个新的实验数据文件） 。 (6) 输入“lock”，点击所选溶剂（氘代试剂） ，即锁场。 (7) 用匀场操作板中的转盘调匀场 （同学们只要调 Z1 和 Z2） ， 调好后， 按一下“STDBY”。 (8) 输入“eda”（设置采样参数） 。 (9) 输入“rga”（自动设置接收机增益） 。 (10) 当字幕上出现 finished 时，输入“zg”（开始采样） 。 (11) 等待采样完毕，输入“ef”（进行傅立叶变换） 。 (12) 输入“apk”（自动调相位） ，如果相位还不理想就要手动调节。 激活“ ” 在出现的窗口处用左键按住 0 上下移动，把最大峰的化学位移调好， 按住 1 上下移动调试其它峰的化学位移，然后保存（手动调相位） 。 (13)激活“ 后确认（定标） 。 (14)激活“ ”后再点击“ ”按住左键从峰的左切点拖到峰的右切点， 然后保存 （积分） 。 ”把出现的红线调到和四甲基峰重合时点下左键，在出现的窗口处输入“0”
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二、基本原理
原子吸收光谱分析是基于从光源中辐射出的待测元素的特征光波通过样品的原子蒸气 时，被蒸气中待测元素的基态原子所吸收，使通过的光波强度减弱，根据光波强度减弱的 程度，可以求出样品中待测元素的含量。 利用锐线光源在低浓度的条件下，基态原子蒸气对共振线的吸收符合朗伯—比尔定律， 即： A=lg(I0/I)=KLN0 (1)
式中，A 为吸光度，I0 为入射光强度，I 为经原子蒸气吸收后的透射光强度，K 为吸光 系数，L 为辐射光穿过原子蒸气的光程长度，N0 为基态原子密度。 试样原子化在固定的实验条件下， 原子总数与试样浓度 c 的比例是恒定的， 则等式 （1） 可记为 A==K’c (2)
式(2)就是原子吸收分光光度法定量分析的基本关系式。常用标准曲线法、标准加入法 进行定量分析。 本实验采用标准曲线法定量分析，在原子吸收分光光度分析中，标准曲线是否呈 线性与许多因素有关，所以必须保持标准溶液和待测溶液的性质及组成相接近，设定消除 干扰，选择最佳测定条件保证测定条件一致，才能得到良好的标准曲线和标准的分析结果。
五、结果处理
根据所测得的结果，计算出茶叶中铅的百分含量。
六、问题讨论
1. 石墨炉原子吸收光谱法具有哪些特点？ 2. 石墨炉法和火焰法的优缺点？
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仪器分析实验讲义
红外光谱法分析未知样结构
一、实验目的
1、学习用红外吸收光谱法进行化合物的定性分析 2、掌握用压片法制作固体试样晶片的方法 3、熟悉红外光谱仪的工作原理及其使用方法
仪器分析实验讲义
火焰原子吸收光度法测定溶液中 Cu 含量
一、实验目的
1. 掌握原子吸收分光光度法的特点及应用； 2. 了解原子吸收分光光度计的主要结构及使用方法 3. 通过对溶液中 Cu 的测定，掌握标准曲线法在原子吸收定量分析中的应用
二、基本原理
原子吸收光谱分析是基于从光源中辐射出的待测元素的特征光波通过样品的原子蒸气 时，被蒸气中待测元素的基态原子所吸收，使通过的光波强度减弱，根据光波强度减弱的 程度，可以求出样品中待测元素的含量。 利用锐线光源在低浓度的条件下，基态原子蒸气对共振线的吸收符合朗伯—比尔定律， 即： A=lg(I0/I)=KLN0 (1)
图1
图2
初始化主要是对氘灯电机、元素灯电机、原子化器电机、燃烧头电机、光谱带宽电机 以及波长电机进行初始化。初始化成功的项目将标记为“ ”，否则标记为“ ”。如果有一项
失败，系统则认为初始化的整个过程失败，会在初始化完成后提示您是否继续，回答 “是” 则继续往下进行，回答“否”则退出系统。注意，此提示只在您选择联机时才会出现，当您 使用菜单【应用】/【初始化】功能时，此提示将不会出现。 ④元素灯的设置 按说明书，装上元素灯，在对应位置选择对应符号，点击图 3 的 3 号，便出现图 4 对 话框，选择元素铜。
图5
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仪器分析实验讲义
图6
图7
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仪器分析实验讲义
图8
图9
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仪器分析实验讲义
图 10
图 11
8仪器分析实验讲义来自图 12图 13
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仪器分析实验讲义
石墨炉原子吸收光度法测定茶叶中 pb 含量
一、 实验目的
1、 掌握原子吸收分光光度法的特点及应用 2、 了解石墨炉原子化器的主要结构及使用方法 3、通过对茶叶中 pb 的测定，掌握标准曲线法在原子吸收定量分析中的应用
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仪器分析实验讲义
如果“寻峰”出现异常， 请检查光路有无火焰通过。 用“光路指示器”检查。 若无火焰通过， 可调节（光路下的白色调杆） 。注意：当火焰出现危险时，按仪器面板右下“红色按扭”，切 断火焰！ ⑦在图 10 界面点击“点火”按钮。 点击“点火”后，软件会弹出提示窗口，达到要求后按“确定”，正常情况下火焰将被 点燃 ⑧检查能量，并自动调节平衡能量；见图 11 ⑨校零 ⑩设置样品项； ⑾设置参数项；见图 12 ⑿开始测试（点“测量”） 。见图 13 ⒀视图（查校正曲线） ⒁输出数据，点“文件→输出文件→转化成 Word 文件” ⒂关机顺序 关乙炔气体→关空气压缩机→退出控制软件→关闭仪器电源→关闭计算机
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仪器分析实验讲义
3) 点击 collect 按钮→ 选择 background 选项 (做背景采集) → 输入谱图名称 → 确定 4) 放入样品片→点击 collect 按钮 → 选择 sample 选项(做样品采集) → 输入测试谱图 名称 → 确定 4、数据处理 1) 找峰：点击 analy 按钮 → 选择 find peak 选项 2) 查看数据：点击 view 按钮 → 选择 show report 选项 5、保存数据：点击 file 按钮 → 选择 save 选项 → 输入保存名 → 确定 6、关机： 测定完毕取出样品 →关上红外光谱仪开关 → 断开光谱仪及电脑电源。
三、仪器与试剂
1、仪器
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仪器分析实验讲义
①TAS-990 原子吸收分光光度计（北京普析通用、原子吸收分光光度计） ②pb 元素空心阴极灯 2、试剂 ①pb 粉 ②去离子水
四、实验步骤
1、溶液配制 ①铅的储存标准溶液。 ②铅的工作标准溶液。 ③系列标准溶液的配制：取 5 支 100 ml 容量瓶，分别配制浓度为 0、20、40、60、80ng/ml 铅标准溶液。 2、测定步骤 开电脑——开仪器电源——打开软件联机初始化——选择工作灯——寻峰——转 换检测方式——开载气——自动平衡能量——参数设置——样品相设置——设置加热程序 ——开循环冷却水——检测 3、铜标准曲线的测量与绘制 仪器工作条件经优化选择，各元素测定的最佳工作条件见表 2。
式(2)就是原子吸收分光光度法定量分析的基本关系式。常用标准曲线法、标准加入法 进行定量分析。 本实验采用标准曲线法定量分析，在原子吸收分光光度分析中，标准曲线是否呈线性 与许多因素有关，所以必须保持标准溶液和待测溶液的性质及组成相接近，设定消除干扰， 选择最佳测定条件保证测定条件一致，才能得到良好的标准曲线和标准的分析结果。
式中，A1a+b、A2a+b 分别为所选两个波长下的测定值；1、2 一般选各组分的最大 吸收波长，以提高测定的灵敏度；a、1b、2a、2b 依次代表组分 a 及 b 分别在 1 及2 处的摩尔吸光系数，可用已知浓度的 a、b 组分溶液分别测定，测定各值时最好 采用标准曲线法，以标准曲线的斜率作为值较准确。
二、基本原理
当试样溶液中含有多种吸光物质时，在一定条件下，分光光度法不经分离即可对混合 物进行多组分分析。这是因为吸光度具有加和性，即在一定波长下，溶液的总吸光度等于 各组分的吸光度之和。 如果混合物中各组分的吸收光谱曲线互有重叠，只要它们能符合朗伯-比耳定律，对 n 个适当波长下进行 n 次吸光度测定，然后解 n 元联立方程，可求出各个组分的含量。 现以简单的二元组分混合物为例，若测定时用 1 cm 比色皿，从下列方程组可求得 a、b 二元组分的浓度 ca 和 cb。
三、仪器与试剂
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仪器分析实验讲义
1、仪器 ①TAS-990 原子吸收分光光度计（北京普析通用、原子吸收分光光度计） ②铜元素空心阴极灯 ③容量瓶 50mL 10 个、100 mL 1 个； 移液管 5 mL、10 mL、25 mL 各 1 支； 烧杯 25 mL 3 个、50 mL、100 mL、500 mL 各 1 个； 量筒 100 mL 1 个。 ④电子天平 2、试剂 ①铜(CuSO4.5H2O ) ②去离子水
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仪器分析实验讲义
图3
图4
⑤选择元素工作灯及预热灯；工作灯选 Cu，预热灯可任选（此选 Zn） （下一步） 如图 5 设置元素测量参数（默认，下一步） ⑥设置测试波长（Cu——324.7nm） ，见图 6 如图 7，利用“寻峰”查找 Cu 的最大吸收波长（约 2-3min） ，得到最大吸收峰图和 λMax 波长 （例如 325.5nm） ， 能量=99.15%。 关闭“寻峰”； 如图 8， 修改最大吸收波长 （将 λMax=324.7nm 改成 λMax=325.5nm） 。 （下一步）按“完成”（见图 9）出现工作界面。
六、结果处理
1. 在测绘的谱图上标出所有吸收峰的波数位置。 2. 列出图谱中的主要吸收峰并指认归属，推测物质的可能结构。
*步骤 1 和 6 由指导老师完成
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仪器分析实验讲义
紫外-可见分光光度计测定双组分样品的含量
一、目的要求
1、掌握紫外-可见分光光度的使用。 2、掌握紫外-可见分光光度法测定双组分的原理和方法。学会用解连立方程组的方法， 定量测定吸收曲线相互重叠的二元混合物。
仪器分析实验 讲义
宜宾学院化学与化工学院
2015 年 V 0.4 版
仪器分析实验讲义
目录
火焰原子吸收光度法测定溶液中 Cu 含量 .......................................................1 石墨炉原子吸收光度法测定茶叶中 pb 含量 ................................................10 红外光谱法分析未知样结构...........................................................................12 紫外-可见分光光度计测定双组分样品的含量 .............................................14 液相色谱法分离混合样品...............................................................................17 荧光分光光度计测定萘...................................................................................20 气相色谱法测定藿香正气水中乙醇的含量 ..................................................25