脂类酸水解法
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酸水解法
适用于各类食品中总脂肪含量的测定,但对含磷脂较多的一类食品,如鱼类、蛋类及其制品,在盐酸溶液中加热时,磷脂几乎完全分解为脂肪酸和碱,使测定结果偏低,多糖类遇强酸易炭化,影响测定结果。测定时间短,在一定程度上可防止之类物质的氧化。
一、实验原理
将试样与盐酸溶液一起加热进行水解,使结合或包埋在组织内的脂肪游离出来,再用有机溶剂提取脂肪,回收溶剂,干燥后称量,提取物的质量即为样品中脂类的含量。
二、仪器和试剂
100ml具塞刻度量筒、95%乙醇、乙醚、石油醚、盐酸。
三、操作步骤
1、样品处理。
固体样品,称取2g样品于50ml大试管中,加8ml水,混匀后加10ml盐酸。
液体样品,称取10g样品于50ml大试管中,加入10ml盐酸。
2、水解。将试管放入70~80℃水浴中,至脂肪游离完全为止,需40~50min。
3、提取。取出试管,加入10ml乙醇,混合,冷却后将混合物移入100ml具塞量筒中,用25ml乙醚分两次洗涤试管,一并倒入具塞量筒中,加塞振摇1min,静置15min,用乙醚-石油醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪,静置10~20min,吸出上清液于已恒重的锥形瓶内,再加5ml乙醚于具塞量筒内,振摇,静置后,仍将上层乙醚吸出,放入锥形瓶内。
4、回收溶剂、烘干、称重。将锥形瓶水浴蒸干,于100~105℃烘箱中干燥2h,取出放入干燥器内冷却后称量,反复以上操作至恒重。
5、计算结果
W湿基=(m2-m1)/m*100%
W干基=[(m2-m1)/m(100%-M)]*100%
W为脂类质量分数,m1为空锥形瓶的质量,m2锥形瓶和脂肪的质量,m为样品的质量,M为试样水分含量。
四、注意事项