免疫学诊断与防治
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中毒等。
２、人免疫球蛋白制剂：正常人血浆丙种球蛋
白、人特异性免疫球蛋白等
３、细胞因子制剂
４、单克隆抗体制剂
人工被动免疫的注意事项
注意防止超敏反应
动物免疫血清使用前，应询问病史，做皮试，如阳性 可使用脱敏方法。在注射丙种球蛋白时亦应注意观察。
注意早期和足量
只有在毒素尚未结合组织细胞前使用抗毒素，才能发 挥其中和毒素作用；若毒素已与组织细胞结合，抗毒 素就不再发挥中和毒素作用。
化学合成药物： 左旋咪唑 西咪替丁
（2）免疫抑制剂
适应症：移植排斥、自身免疫病等
化学合成药物
烷化剂抗肿瘤药物
抗代谢物类抗肿瘤药物 激素 真菌代谢产物 环孢素 FK-506 传统中药
复习题
名词解释：人工主动免疫；人工被动免疫
简答：
试比较人工主动免疫与人工被动免疫。
3、免疫标记技术（immunolabeling techniques）
为了提高单纯的抗原和抗体检测的灵敏
性，将已知的抗体或抗原标记上示踪物质，
通过检测标记物，间接测定抗原抗体复合物。
常用的标记物有酶、荧光素、放射性核
素、胶体金及化学发光物质等。
荧光素
免疫荧光法 酶免疫测定（EIA)
酶
标记物
放射性核素
免疫学检测与防治
天津医科大学免疫学教研室
张永慈 23542520
免疫学诊断
目的要求 （一）掌握抗原抗体反应的原理；凝集反应、沉淀
反应与免疫标记技术的原理和应用。 （二）熟悉淋巴细胞的分离与类型鉴定的方法；T 细胞功能测定的方法。 （三）了解B细胞功能测定；吞噬细胞功能测定。 二、教学内容 （一）抗原抗体检测的原理及方法 （二）免疫细胞的检测 （三）免疫学检测方法的应用
不滥用丙种球蛋白
二、免疫治疗（immunotherapy） 针对异常的免疫状态，应用免疫 制剂、免疫调节药物或其他措施来 调节或重建免疫功能，以达到治疗 疾病的目的。
１、分子治疗
分子疫苗：化学合成、基因重组；产生肿瘤抗原， 与佐剂混合应用，已具一定疗效。 抗体：
细胞因子
２、细胞治疗 细胞疫苗 过继免疫治疗 造血干细胞移植：骨髓、外周血、脐带血
如牛痘、风疹疫苗、卡介苗等
３、类毒素（toxiod）：用细菌的外毒素（exotoxin）经0.3%-0.4%甲醛处理制成。接种后诱 导机体产生抗毒素（anti-toxin）。如白喉、 破伤风等。
４、新型疫苗 • 亚单位疫苗 • 结合疫苗 • 合成肽疫苗 • 基因工程疫苗 • 等等
理想疫苗应具备的条件
直接免疫荧光法
间接免疫荧光法
二、免疫细胞功能的检测
（一）免疫细胞的分离
根据细胞的密度、粘附性能、表面
标志等，采用不同方法分离外周血单个
核细胞、淋巴细胞及不同亚群。
密度梯度离心法:
用淋巴细胞分层液(葡聚糖-泛影葡胺) 除去红细胞、粒细胞,所获细胞称外周血单 个核细胞(PBMC)的方法，其中淋巴细胞>90%。
展以及疾病的诊断、预后判断、防治和药物
疗效评价提供了重要的方法和手段。
一、抗原或抗体的检测
（一）抗原抗体反应的原理
抗原与抗体反应的物质基础是抗原的抗原表位
与抗体的可变区之间的相互结合。
抗原抗体反应的特点
高度特异性
表面化学基团之间的可逆结合 适宜的浓度和比例
抗原抗体反应的两个阶段
抗原与抗体反应的体系
（3） MTT法
Lymphocyte Transformation Test
mitogens
small T lymphocyte lymphoblast
2、E花环形成试验（ E Rosette Test ）
T细胞
CD2/E受体 SRBC/ 绵羊红细胞
可用于鉴定人外周血中的T细胞并计数。
B细胞功能测定
中，若两者的浓度和比
例适当，则形成的抗原
抗体复合物体积大、数
Ab excess
Ag excess
量多，出现肉眼可见的
反应。
Equivalence – Lattice formation
抗原抗体反应的影响因素
电解质 温度 酸碱度
（二）抗原或抗体的检测方法
1、凝集反应（agglutination reaction） 细菌、细胞等颗粒性抗原或表面包被有 抗原的颗粒状物质（如聚苯乙烯乳胶等）与 相应的抗体在电解质存在的条件下结合，出 现肉眼可见的凝集团现象，称为凝集反应。
３、生物应答调节剂与免疫抑制剂
（1）生物应答调节剂：具有促进或调节免疫功
能的制剂。
适应症：
感染；
免疫缺陷；
肿瘤等
微生物制剂
卡介苗
短小棒状杆菌 中药制剂
香菇、灵芝等的真菌多糖成分
药用植物及其有效成分 中药方剂
免疫因子：
转移因子 免疫核糖核酸
胸腺肽
negative result
No agglutination
agglutination
尿HCG检测
免疫胶体金法。也就是平常的尿试纸条，该方法由于 应用广泛，方法学较成熟，检测迅速，灵敏度高， 一般可达到10-25IU/L.也就是说尿中如果HCG水平达 到10，就可能检测出来。女性妊娠到0.2-1周时血清 中的HCG水平就可达到5-50IU/L，而在尿中清晨尿 的HCG水平最高，可接近血清的水平，因此尿HCG 检测以清晨的尿最佳，阳性率最高。
免疫预防的主要手段，包括： 人工主动免疫 人工被动免疫
（一）人工主动免疫（artificial active
immunization）
概念：用疫苗接种机体，使之产生特异性免疫，
从而预防感染的措施。
疫苗（vaccine）
细菌性制剂、病毒性制剂及类毒素等人工
主动免疫制剂统称为疫苗。
要求：安全、有效、实用
（二）人工被动免疫（artificial passive immunization） 概念：给人体注射含特异性抗体或细胞 因子的制剂，以治疗或紧急预防感染的措 施。
接种后免疫效果维持时间短，一般 约２－３周。
１、抗毒素：可中和外毒素的毒性，主要用于
治疗和紧急预防外毒素所致疾病。如白喉、
破伤风、气性坏疽以及肉毒杆菌引起的食物
1、灭活疫苗：又称死疫苗。选用免疫原性强的 病原体，经人工大量培养后，用理化方法灭 活制成。 缺点：需多次注射，用量大；接种后反应较 大；免疫效果局限 优点：稳定，易保存；无毒力回复危险 如乙脑疫苗、狂犬疫苗等
２、减毒活疫苗：用减毒或无毒力的活病原微 生物制成。 缺点：稳定性较差，不易保存；有毒力回复 可能 优点：一般只需接种一次，用量较小；免疫 效果较好，较持久
1 、抗原应高度纯化，无毒、无副作用
2 、免疫力持久 3 、免疫方法简单 4 、可与其它抗原混合使用
5 、价格便宜
人工主动免疫的注意事项
接种对象：凡是免疫防御能力差、与某些病原生物接触机会多、
疾病及并发症危害大、流行地区易感者均应免疫接种。
接种剂量、次数和时间间隔 接种途径：死疫苗用皮下注射，活疫苗可皮内注射、皮上划痕和
自然感染途径接种，脊髓灰质炎疫苗以口服为佳，麻疹、流感、 腮腺炎疫苗雾化吸入为好。
接种后反应：常在接种后24小时发生,表现为局部红肿、疼痛、淋
巴结肿大；全身发热、头痛、恶心等，数天后即恢复正常。
禁忌症：凡高热、严重心血管疾病、急性传染病、恶性肿瘤、肾
病、活动性结核、活动性风湿病、甲亢、糖尿病和免疫缺陷病等 患者，均不宜接种疫苗，以免引起病情恶化。为防止流产或早产， 孕妇应暂缓接种。
免疫学防治
目的要求 （一）掌握人工主动免疫和被动免疫的概念和特点。 （二）了解疫苗的基本要求及其发展；免疫治疗原
理与方法；常用的生物制品及其应用原则。 二、教学内容 （一）免疫预防 （二）免疫治疗
免疫学诊断
免疫学检测技术已成为当今生命科学主
要的研究手段之一，为基础和临床医学的发
放射免疫测定（RIA)
化学发光物质
化学发光分析
免疫酶测定法（enzyme immunoassay, EIA）
应用最广泛的方法是酶联免疫吸附试验 （enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）
免疫荧光技术
荧光素标记的抗体（抗原）与组织或 细胞中的相应抗原（抗体）结合，借助于 荧光显微镜或流式细胞仪对抗原（抗体） 进行鉴定或定位。
1、抗体形成细胞测定：常用溶血空斑试验
免疫学防治
应用各类生物或非生物制剂来建立、
增强或抑制机体的免疫应答，调节免疫
功能，达到预防或治疗某些疾病的目的，
称为免疫预防和治疗。
一、免疫预防（Immunoprophylaxis）
特异性免疫的获得方式：自然免疫和人工免疫
人工免疫即人为地使机体获得特异性免疫，使
凝集反应可分为：
直接凝集
可分为：玻片法（菌种鉴定、ABO血型鉴定） 试管法 （Widal’s实验、Wright’s实验）
间接凝集
间接凝集抑制反应
妊娠检测（Pregnancy test） -人绒毛膜促性腺激素（HCG）
Pregnancyesult
2、沉淀反应（Precipitation reaction） 毒素、组织浸液及血清中的蛋白等可溶 性抗原与相应抗体反应后，出现肉眼可见的 沉淀物，称为沉淀反应 。沉淀反应可在液体 中进行，也可以在半固体琼脂凝胶中进行。
沉淀反应包括：
单向免疫扩散
双向免疫扩散 免疫电泳 免疫比浊
等
Countercurrent electrophoresis
免疫吸附分离法
磁珠分离法
流式细胞术
等等
（二）免疫细胞功能的测定
T细胞功能测定
1、T细胞增殖试验
T细胞表面含有有丝分裂原受体,能接受植物血 凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA）或美州商陆（PWM） 等有丝分裂原的刺激，转化成为淋巴母细胞。 （1）形态计数法
（2） 3H-TdR或125I-UdR掺入法
２、人免疫球蛋白制剂：正常人血浆丙种球蛋
白、人特异性免疫球蛋白等
３、细胞因子制剂
４、单克隆抗体制剂
人工被动免疫的注意事项
注意防止超敏反应
动物免疫血清使用前，应询问病史，做皮试，如阳性 可使用脱敏方法。在注射丙种球蛋白时亦应注意观察。
注意早期和足量
只有在毒素尚未结合组织细胞前使用抗毒素，才能发 挥其中和毒素作用；若毒素已与组织细胞结合，抗毒 素就不再发挥中和毒素作用。
化学合成药物： 左旋咪唑 西咪替丁
（2）免疫抑制剂
适应症：移植排斥、自身免疫病等
化学合成药物
烷化剂抗肿瘤药物
抗代谢物类抗肿瘤药物 激素 真菌代谢产物 环孢素 FK-506 传统中药
复习题
名词解释：人工主动免疫；人工被动免疫
简答：
试比较人工主动免疫与人工被动免疫。
3、免疫标记技术（immunolabeling techniques）
为了提高单纯的抗原和抗体检测的灵敏
性，将已知的抗体或抗原标记上示踪物质，
通过检测标记物，间接测定抗原抗体复合物。
常用的标记物有酶、荧光素、放射性核
素、胶体金及化学发光物质等。
荧光素
免疫荧光法 酶免疫测定（EIA)
酶
标记物
放射性核素
免疫学检测与防治
天津医科大学免疫学教研室
张永慈 23542520
免疫学诊断
目的要求 （一）掌握抗原抗体反应的原理；凝集反应、沉淀
反应与免疫标记技术的原理和应用。 （二）熟悉淋巴细胞的分离与类型鉴定的方法；T 细胞功能测定的方法。 （三）了解B细胞功能测定；吞噬细胞功能测定。 二、教学内容 （一）抗原抗体检测的原理及方法 （二）免疫细胞的检测 （三）免疫学检测方法的应用
不滥用丙种球蛋白
二、免疫治疗（immunotherapy） 针对异常的免疫状态，应用免疫 制剂、免疫调节药物或其他措施来 调节或重建免疫功能，以达到治疗 疾病的目的。
１、分子治疗
分子疫苗：化学合成、基因重组；产生肿瘤抗原， 与佐剂混合应用，已具一定疗效。 抗体：
细胞因子
２、细胞治疗 细胞疫苗 过继免疫治疗 造血干细胞移植：骨髓、外周血、脐带血
如牛痘、风疹疫苗、卡介苗等
３、类毒素（toxiod）：用细菌的外毒素（exotoxin）经0.3%-0.4%甲醛处理制成。接种后诱 导机体产生抗毒素（anti-toxin）。如白喉、 破伤风等。
４、新型疫苗 • 亚单位疫苗 • 结合疫苗 • 合成肽疫苗 • 基因工程疫苗 • 等等
理想疫苗应具备的条件
直接免疫荧光法
间接免疫荧光法
二、免疫细胞功能的检测
（一）免疫细胞的分离
根据细胞的密度、粘附性能、表面
标志等，采用不同方法分离外周血单个
核细胞、淋巴细胞及不同亚群。
密度梯度离心法:
用淋巴细胞分层液(葡聚糖-泛影葡胺) 除去红细胞、粒细胞,所获细胞称外周血单 个核细胞(PBMC)的方法，其中淋巴细胞>90%。
展以及疾病的诊断、预后判断、防治和药物
疗效评价提供了重要的方法和手段。
一、抗原或抗体的检测
（一）抗原抗体反应的原理
抗原与抗体反应的物质基础是抗原的抗原表位
与抗体的可变区之间的相互结合。
抗原抗体反应的特点
高度特异性
表面化学基团之间的可逆结合 适宜的浓度和比例
抗原抗体反应的两个阶段
抗原与抗体反应的体系
（3） MTT法
Lymphocyte Transformation Test
mitogens
small T lymphocyte lymphoblast
2、E花环形成试验（ E Rosette Test ）
T细胞
CD2/E受体 SRBC/ 绵羊红细胞
可用于鉴定人外周血中的T细胞并计数。
B细胞功能测定
中，若两者的浓度和比
例适当，则形成的抗原
抗体复合物体积大、数
Ab excess
Ag excess
量多，出现肉眼可见的
反应。
Equivalence – Lattice formation
抗原抗体反应的影响因素
电解质 温度 酸碱度
（二）抗原或抗体的检测方法
1、凝集反应（agglutination reaction） 细菌、细胞等颗粒性抗原或表面包被有 抗原的颗粒状物质（如聚苯乙烯乳胶等）与 相应的抗体在电解质存在的条件下结合，出 现肉眼可见的凝集团现象，称为凝集反应。
３、生物应答调节剂与免疫抑制剂
（1）生物应答调节剂：具有促进或调节免疫功
能的制剂。
适应症：
感染；
免疫缺陷；
肿瘤等
微生物制剂
卡介苗
短小棒状杆菌 中药制剂
香菇、灵芝等的真菌多糖成分
药用植物及其有效成分 中药方剂
免疫因子：
转移因子 免疫核糖核酸
胸腺肽
negative result
No agglutination
agglutination
尿HCG检测
免疫胶体金法。也就是平常的尿试纸条，该方法由于 应用广泛，方法学较成熟，检测迅速，灵敏度高， 一般可达到10-25IU/L.也就是说尿中如果HCG水平达 到10，就可能检测出来。女性妊娠到0.2-1周时血清 中的HCG水平就可达到5-50IU/L，而在尿中清晨尿 的HCG水平最高，可接近血清的水平，因此尿HCG 检测以清晨的尿最佳，阳性率最高。
免疫预防的主要手段，包括： 人工主动免疫 人工被动免疫
（一）人工主动免疫（artificial active
immunization）
概念：用疫苗接种机体，使之产生特异性免疫，
从而预防感染的措施。
疫苗（vaccine）
细菌性制剂、病毒性制剂及类毒素等人工
主动免疫制剂统称为疫苗。
要求：安全、有效、实用
（二）人工被动免疫（artificial passive immunization） 概念：给人体注射含特异性抗体或细胞 因子的制剂，以治疗或紧急预防感染的措 施。
接种后免疫效果维持时间短，一般 约２－３周。
１、抗毒素：可中和外毒素的毒性，主要用于
治疗和紧急预防外毒素所致疾病。如白喉、
破伤风、气性坏疽以及肉毒杆菌引起的食物
1、灭活疫苗：又称死疫苗。选用免疫原性强的 病原体，经人工大量培养后，用理化方法灭 活制成。 缺点：需多次注射，用量大；接种后反应较 大；免疫效果局限 优点：稳定，易保存；无毒力回复危险 如乙脑疫苗、狂犬疫苗等
２、减毒活疫苗：用减毒或无毒力的活病原微 生物制成。 缺点：稳定性较差，不易保存；有毒力回复 可能 优点：一般只需接种一次，用量较小；免疫 效果较好，较持久
1 、抗原应高度纯化，无毒、无副作用
2 、免疫力持久 3 、免疫方法简单 4 、可与其它抗原混合使用
5 、价格便宜
人工主动免疫的注意事项
接种对象：凡是免疫防御能力差、与某些病原生物接触机会多、
疾病及并发症危害大、流行地区易感者均应免疫接种。
接种剂量、次数和时间间隔 接种途径：死疫苗用皮下注射，活疫苗可皮内注射、皮上划痕和
自然感染途径接种，脊髓灰质炎疫苗以口服为佳，麻疹、流感、 腮腺炎疫苗雾化吸入为好。
接种后反应：常在接种后24小时发生,表现为局部红肿、疼痛、淋
巴结肿大；全身发热、头痛、恶心等，数天后即恢复正常。
禁忌症：凡高热、严重心血管疾病、急性传染病、恶性肿瘤、肾
病、活动性结核、活动性风湿病、甲亢、糖尿病和免疫缺陷病等 患者，均不宜接种疫苗，以免引起病情恶化。为防止流产或早产， 孕妇应暂缓接种。
免疫学防治
目的要求 （一）掌握人工主动免疫和被动免疫的概念和特点。 （二）了解疫苗的基本要求及其发展；免疫治疗原
理与方法；常用的生物制品及其应用原则。 二、教学内容 （一）免疫预防 （二）免疫治疗
免疫学诊断
免疫学检测技术已成为当今生命科学主
要的研究手段之一，为基础和临床医学的发
放射免疫测定（RIA)
化学发光物质
化学发光分析
免疫酶测定法（enzyme immunoassay, EIA）
应用最广泛的方法是酶联免疫吸附试验 （enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）
免疫荧光技术
荧光素标记的抗体（抗原）与组织或 细胞中的相应抗原（抗体）结合，借助于 荧光显微镜或流式细胞仪对抗原（抗体） 进行鉴定或定位。
1、抗体形成细胞测定：常用溶血空斑试验
免疫学防治
应用各类生物或非生物制剂来建立、
增强或抑制机体的免疫应答，调节免疫
功能，达到预防或治疗某些疾病的目的，
称为免疫预防和治疗。
一、免疫预防（Immunoprophylaxis）
特异性免疫的获得方式：自然免疫和人工免疫
人工免疫即人为地使机体获得特异性免疫，使
凝集反应可分为：
直接凝集
可分为：玻片法（菌种鉴定、ABO血型鉴定） 试管法 （Widal’s实验、Wright’s实验）
间接凝集
间接凝集抑制反应
妊娠检测（Pregnancy test） -人绒毛膜促性腺激素（HCG）
Pregnancyesult
2、沉淀反应（Precipitation reaction） 毒素、组织浸液及血清中的蛋白等可溶 性抗原与相应抗体反应后，出现肉眼可见的 沉淀物，称为沉淀反应 。沉淀反应可在液体 中进行，也可以在半固体琼脂凝胶中进行。
沉淀反应包括：
单向免疫扩散
双向免疫扩散 免疫电泳 免疫比浊
等
Countercurrent electrophoresis
免疫吸附分离法
磁珠分离法
流式细胞术
等等
（二）免疫细胞功能的测定
T细胞功能测定
1、T细胞增殖试验
T细胞表面含有有丝分裂原受体,能接受植物血 凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA）或美州商陆（PWM） 等有丝分裂原的刺激，转化成为淋巴母细胞。 （1）形态计数法
（2） 3H-TdR或125I-UdR掺入法