健那绿、吡罗红--甲基绿
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健那绿应该只能染色活细胞。
这个是健那绿染色线粒体的原理:健那绿(Janus green B)染液,原来也曾译为詹纳斯绿B,是专一性染线粒体的活细胞染料,线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原,成为无色状态.。因此可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。线粒体能在健那绿染液中维持活性数小时,通过染色,可以在高倍显微镜下观察到生活状态的线粒体的形态和分布。
有关哺乳动物成熟的红细胞的知识:人等哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核、核糖体等细胞器,不能合成蛋白质,但在未成熟的发育过程中,仍能合成蛋白质(血红蛋白)的。
①无细胞核,
②无细胞器,
③不能进行有氧呼吸,进行无氧呼吸,
④无核糖体,不能合成蛋白质,
⑤含有血红蛋白,还含有其他物质(如酶)
⑥蛙的红细胞进行无丝分裂,
⑦人体和哺乳动物的红细胞中无细胞核,不能进行DNA的提取,鸡等鸟类的红细胞中含有细胞核,可用鸡血细胞液进行DNA的提取。
甲基绿是具有金属光泽的绿色微结晶或亮绿色粉末。溶于水,显蓝绿色。稍溶于乙醇,不溶于戊醇。盐酸中显红黄色,在氢氧化钠中无色,甲基绿—为碱性染料,它分别能与细胞内的DNA、RNA结合呈现不同颜色。
染色原理:
(1)真核细胞的DNA主要分布在细胞核内,RNA主要分布在细胞质中。
(2)甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。
吡罗红,即吡罗红G,又名派洛宁,吡罗红使RNA呈现红色,常用于检测细胞中RNA的分布,与甲基绿一起混用,其混合液为紫红色。
甲基绿—派洛宁(又名吡罗红)(methyl green-pyronin)
为碱性染料,它分别能与细胞内的DNA、RNA结合呈现不同颜色。当甲基绿与派洛宁作为混合染料时,甲基绿与染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色;派洛宁与核仁、细胞质中的RNA选择性结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用,同时两种核酸分子都是多聚体,而其聚合程度有所不同。甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。而派洛宁则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色(但解聚的DNA也能和派洛宁结合呈现红色)。即RNA对派洛宁亲和力大,被染成红色,而DNA对甲基绿亲和力大,被染成绿色。
甲基绿—派洛宁又叫unna试剂。