黄芪甲苷的测定方法
高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量分析
高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量分析摘要】目的：建立高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量测定体系。
方法：应用高效液相色谱法测定蒙古黄芪和甘肃红芪的黄芪甲苷含量，色谱柱：Agilent Eclipse XBD-C18柱(150×4.6 mm，5μm)；流动相：甲醇-0.2%磷酸水溶液(44∶56)；柱温：26℃；流速：0.5 mL/min；检测波长：335 nm。
结果：黄芪甲苷测定的回归方程为Y=13.614X-1.4897，r=0.9999，线性范围为10.2-102μg/mL-1。
测定蒙古黄芪和甘肃红芪中的黄芪甲苷回收率分别为95.9%与94.5%，在3 d内基本能保持稳定，含量分别为0.289mg/g和0.284mg/g。
结论：高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量方法简便、灵敏度高、重现性好，可作为首选方法之一。
【关键词】高效液相色谱法黄芪黄芪甲苷【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）34-0192-02黄芪是中医临床最常用的大宗药材之一，具有营养和抗氧化等药理活性和药用价值，主要生长在西北干旱地区。
当前由于市场需求量不断增加，其野生资源受到极大威胁[1]。
其含有多糖、甲苷等主要生物活性成分，有抗心肌缺血、缺氧、病毒性心肌炎的作用[2]。
当前黄芪甲苷的测定方法有薄层色谱法与毛细管电泳法等[3]。
本文建立了高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量体系，希望为从天然植物中寻找低毒或无毒的抗氧化活性成分提供参考。
现报告如下。
1 实验仪器与方法1.1 实验仪器日本岛津公司LC-20AT高效液相色谱仪与色谱工作站，十万分之一电子天平XS205DU型，SQ21198B多功能食品加工机，UV-2450型紫外-可见分光光度计，DELTA320型pH计。
黄芪甲苷对照品购自中国药品生物制品鉴定所，石油醚、氯仿、正丁醇为色谱纯，甲醇、甲酸、无水乙醇、冰醋酸为分析纯，水为超纯水。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪（Radix Astragali）是中国传统草药中的一种，也被称为“北茵蒿”、“黄金钱草”、“黄金银草”等。
黄芪具有滋补强壮、提高免疫力、抗疲劳等多种药理活性，因此在中医药学中被广泛应用。
黄芪甲苷（Astragaloside IV，简称AS-IV）是黄芪中的一种主要活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生理活性。
测定黄芪中黄芪甲苷的含量对黄芪的质量评价和合理应用具有重要意义。
随着现代化仪器设备和分析技术的发展，对黄芪中黄芪甲苷含量测定方法的研究也日益深入。
下面将介绍几种常用的黄芪甲苷含量测定方法及其研究进展：1. 高效液相色谱法（HPLC）：HPLC是一种常用的分离和检测技术，广泛应用于药物分析领域。
对于黄芪中黄芪甲苷的测定，可以使用反相HPLC或离子对交换柱进行分离。
可以通过选择适当的检测波长和优化方法条件，如流动相组成、流速等，确保测定结果的准确性和灵敏度。
近年来，还有研究对HPLC方法进行改进，如引入内标物法和紫外二维检测法，提高测定精确度和分析效率。
2. 气相色谱法（GC）：GC是一种将挥发性物质分离和检测的技术，在黄芪中黄芪甲苷含量测定中也得到了应用。
由于黄芪甲苷在常规条件下不易挥发，因此需要将其进行酸水解或酶解，将产生的挥发性产物用GC进行分离和检测。
这种方法要求样品预处理和操作条件较为复杂，但可实现对黄芪甲苷的准确测定和定量分析。
3. 毛细管电泳法（CE）：CE是一种基于电泳原理的微柱层析技术，具有分离速度快、灵敏度高、耗样量少等特点，因此在黄芪甲苷的含量测定中也得到了广泛应用。
研究表明，利用CE进行黄芪甲苷的分离和检测可获得满意的结果，并且还可以在测定中引入很多改进的因素，如在线固相萃取、二维电泳和运用特殊电泳介质等。
目前已有多种方法可用于测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
各种方法都有其适应的优势和应用条件，具体选择哪种方法需根据实际需要和研究目的进行判断。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪，是一种传统中药材，具有滋补养生、益气固表的功效，被广泛用于治疗疲乏无力、气虚乏力、脾胃虚弱等疾病。
黄芪甲苷是黄芪中的一种重要活性成分，具有抗氧化、免疫调节、抗炎、抗肿瘤等多种药理作用。
对黄芪中黄芪甲苷含量进行测定研究，对于黄芪的质量评价、产品开发及临床应用具有重要意义。
一、测定方法的研究进展针对黄芪中黄芪甲苷的测定，目前主要采用的方法包括高效液相色谱法、超高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法、酶联免疫吸附测定法等。
高效液相色谱法是目前应用较为广泛、准确性较高的一种测定方法，主要包括经典的反相色谱法、离子交换色谱法、手性色谱法等。
近年来，超高效液相色谱法的应用也逐渐得到了推广，其具有分离效率高、分析时间短、灵敏度高等优点，对于黄芪中黄芪甲苷的测定具有一定的优势。
二、影响因素的研究进展黄芪中黄芪甲苷含量受多种因素的影响，包括生长环境、采收季节、制备工艺等因素。
生长环境是影响黄芪中黄芪甲苷含量的重要因素之一。
有研究表明，黄芪生长的土壤类型、水分、温度等因素都会对黄芪中黄芪甲苷的含量产生一定的影响。
采收季节也是影响黄芪中黄芪甲苷含量的重要因素之一。
研究表明，黄芪的采收季节不同，其黄芪甲苷含量也会有所差异。
通过研究影响因素，可以更好地掌握黄芪中黄芪甲苷含量的变化规律，为其质量评价提供科学依据。
三、质量评价标准的研究进展针对黄芪中黄芪甲苷含量的质量评价，国家药典对其含量进行了规定，但是现有标准中存在一些不足之处，例如对于不同生长环境、不同采收季节的黄芪，其含量差异较大，当前的质量评价标准并不能完全覆盖。
建立更为科学、合理的质量评价标准，对于规范黄芪的生产加工、保障产品质量具有重要意义。
近年来，一些研究机构对此进行了系统研究，探讨了不同影响因素下的黄芪甲苷含量变化规律，并试图建立更为科学的质量评价标准，为黄芪的质量评价提供了更为系统的依据。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展取得了一定的成果，但仍存在一些挑战和机遇。
黄芪甲苷的测定方法
黄芪甲苷含量测定几种常用方法的比较为黄芪的主要活性成分之一。
能抗炎降压、镇痛镇静和促进再生肝DNA水平。
现代药理研究表明，黄芪甲苷具有改善白细胞变形能力、改善心肌收缩及舒张功能、促进胰岛素分泌和清除自由基等药理作用。
近年来，对的含量测定方法的研究很多。
本人就几种常用方法作一比较。
1高效液相色谱法(I-R_C法)HPLC法因其分离度好、灵敏性高，适用范围广等优点，已广泛用于黄芪甲苷的含量测定、稳定性、药理和临床研究中。
1．1 HPLC—uv法属于四环三萜类皂苷，紫外末端吸收f max200．8 nm)。
紫外检测灵敏度低，干扰因素多，目前 HPLC法是最常用的检测器是紫外检测器。
苏瑞强Ⅲ等采用 HPLC法测定黄芪甲苷的含量，色谱柱为YWG—C18柱0．9 mm x250 mm，5 m)，流动相为乙腈一水(1：2．3)，检测波长为 203nm，结果线性范围为0．86—5．27 I,L g／mL，加样回收率为 97．52％，RSD为3．10％。
1．2 HPLC一示差折光检测法由于在紫外区仅有微弱的末端吸收，溶剂噪音对结果有较大的影响，且其前处理繁杂。
池玉梅等四应用HPLC示差折光检测法测定黄芪精 12I服液中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Hypersi|ODS 2(4．6ram X 200ram，5 I,Lm)，流动相为甲醇一水(67：33)，结果黄芪甲苷线性范围是1-5 g／ml，回收率为98．1％，RSD为2．02％。
该法简单方便，重现性好，灵敏度高，结果准确、可靠。
1．3 RP—HPLC法路玫等[3j采用RP—HPLC法测定黄芪注射液中的含量。
色谱柱为Nova—PakC18柱0．9ram xl5Omm，4la,m)，流动相为乙腈一水一磷酸(1：2：O．1)，检测波长为203nm，柱温为40％。
实验中将样品蒸干，采用水饱和的正丁醇溶解，用氨试液洗涤后蒸干，残渣用甲醇溶解。
结果加样回收率为94．7％，RSD为2．6％。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪，又称黄芪补中益气汤，为豆科植物黄芪的干燥根。
黄芪性味甘苦微温，归脾肺经，具有益气固表、益血统阴、利水除湿、化瘀散结的功效。
黄芪中含有一种特殊的活性成分——黄芪甲苷，具有抗氧化、免疫调节、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
黄芪甲苷的含量测定对于黄芪的质量评价和药理研究具有非常重要的意义。
目前，黄芪甲苷含量的测定方法有很多种，主要包括高效液相色谱法（HPLC）、紫外分光光度法（UV）、液相色谱串联质谱法（LC-MS）、超高效液相色谱法（UPLC）等。
下面，将对这些方法的研究进展进行介绍。
一、高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是测定黄芪甲苷含量的常用方法之一。
该方法主要利用色谱柱对样品进行分离，然后利用紫外检测器进行检测。
HPLC法在测定黄芪甲苷含量上具有灵敏度高、分离效果好、重现性好的优点。
目前已经有多种不同的HPLC法用于测定黄芪甲苷含量，比如采用保留时间法、峰面积法、标准曲线法等。
这些方法对样品的前处理要求不同，但都有较好的准确性和重现性。
二、紫外分光光度法（UV）紫外分光光度法是一种简便、快速的测定方法，主要利用样品中黄芪甲苷特有的吸收峰进行定量分析。
该方法操作简单，仪器设备不复杂，因此在一些实验室中得到了广泛应用。
紫外分光光度法对样品的前处理要求较高，同时在测定复杂样品时准确性和灵敏度可能会受到一定的限制。
液相色谱串联质谱法是一种更加高级的分析技术，它结合了液相色谱和质谱的优点，能够对样品进行更加准确和灵敏的分析。
该方法在测定黄芪甲苷含量时能够获得更加详细的信息，对样品中其他杂质的干扰较小。
LC-MS法在黄芪甲苷含量的测定和结构鉴定方面具有较大优势，但是仪器的成本和维护成本也相对较高。
超高效液相色谱法是近年来发展起来的一种新型色谱技术，其分离效果和分析速度均更加出色。
UPLC法在测定黄芪甲苷含量时能够获得更高的分辨率和灵敏度，同时也节约了试剂和溶剂的用量。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪是一种重要的中药材，被广泛用于中医药领域。
其中一种主要的活性成分是黄芪甲苷，它具有抗炎、抗疲劳、抗氧化等多种生物活性。
准确测定黄芪中黄芪甲苷的含量对于评价其药效和质量具有重要意义。
本文将综述近年来关于黄芪中黄芪甲苷含量测定研究的进展。
传统的黄芪甲苷含量测定方法主要包括高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱-质谱联用法（LC-MS）和紫外-可见分光光度法（UV-Vis）。
这些方法在黄芪甲苷的定性和定量上具有很好的精确性和准确性。
这些方法在操作步骤繁琐、时间耗时长、设备成本高等方面存在一定的不足。
近年来，一些新的测定方法被开发出来，以提高黄芪中黄芪甲苷含量的检测速度和准确性。
气相色谱-质谱联用法（GC-MS）可以通过蒸馏浓缩技术，直接从黄芪中提取黄芪甲苷，并通过质谱进行定性和定量分析。
这种方法具有操作简便、准确度高的优点，但对于样品准备的要求较高。
近年来还有一些基于免疫学原理的测定方法被提出。
酶联免疫吸附测定法（ELISA）可以通过特异性抗体与黄芪甲苷结合，形成抗原-抗体复合物，再通过颜色反应测定黄芪甲苷的含量。
这种方法具有灵敏度高、操作简便的特点，但需要特异性抗体的制备，且可能存在交叉反应的问题。
近年来还有一些基于分子生物学技术的测定方法得到了发展。
实时荧光定量PCR（qPCR）可以通过黄芪甲苷特异性引物和探针进行扩增和检测，并通过标准曲线法计算黄芪甲苷的浓度。
这种方法具有高灵敏度、高特异性和高重复性的优势，但需要标准品的制备和PCR仪器的支持。
近年来关于黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究主要集中在改进传统方法、开发新方法以及应用新技术。
这些研究不仅丰富了黄芪甲苷含量测定方法的选择，而且提高了检测的速度和准确性。
未来的研究还可以进一步探索其他的测定方法，并开展黄芪甲苷与其他成分之间的相互作用研究，以提高黄芪的药效和质量评价。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展引言黄芪，即中药材黄芪，是一种常用的中药材，被用于治疗肝肾不足、气虚乏力、风寒感冒等疾病。
黄芪中含有丰富的活性成分，其中黄芪甲苷是一种重要的化学成分，具有抗氧化、抗炎、免疫调节等多种生物活性。
测定黄芪中黄芪甲苷的含量对其药效和质量的评估具有重要的意义。
本文将介绍目前黄芪中黄芪甲苷含量测定研究的最新进展。
一、黄芪甲苷的药理作用二、黄芪中黄芪甲苷含量测定方法目前，研究人员已经开发出多种方法来测定黄芪中黄芪甲苷的含量，主要包括色谱法、质谱法和光谱法等。
（一）色谱法高效液相色谱(HPLC)是目前测定黄芪中黄芪甲苷含量最常用的方法之一。
该方法具有分离效果好、准确性高、重现性好的特点。
研究人员通常采用C18色谱柱，以乙腈-水为流动相，在不同波长下进行检测，可以实现对黄芪中黄芪甲苷的准确测定。
近年来，研究人员还开发了一种基于光谱技术的测定黄芪甲苷含量的方法。
该方法具有简便、快速的特点，可以实现对黄芪中黄芪甲苷的快速测定。
研究人员通常通过建立黄芪甲苷与特定试剂在特定波长下的光谱特征，来进行黄芪甲苷含量的测定。
近年来，研究人员对于黄芪中黄芪甲苷含量的测定方法进行了进一步的研究和改进，主要体现在以下几个方面：（一）方法的改进研究人员针对目前存在的色谱法、质谱法和光谱法的一些局限性，如检测灵敏度不够高、操作复杂等问题，进行了一系列的改进。
他们通过优化色谱柱、流动相组成、检测波长等条件，改进了色谱法和光谱法的分析方法，使其具有更高的分析灵敏度和准确性。
他们还通过改进萃取和预处理方法，提高了质谱法的检测灵敏度和准确性。
（二）新技术的应用随着科技的发展，研究人员还引入了一些新技术来测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
他们利用人工智能算法对色谱图谱进行分析和处理，提高了测定的准确性和稳定性。
他们还探索了一些新型的色谱柱和检测方法，提高了分析的效率和灵敏度。
（三）标准物质的建立为了提高测定方法的准确性和可靠性，研究人员建立了一套完善的黄芪甲苷标准物质体系。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪，全名为黄芪，是一种被广泛用于中医药和保健品的植物。
其生长在中国北方的干燥地区，被认为具有益气补中、固表益肺的功效。
黄芪中含有多种活性成分，其中黄芪甲苷是其主要活性成分之一。
黄芪甲苷具有增强免疫功能、抗疲劳、抗氧化等功效，因此引起了广泛的研究和关注。
近年来，随着人们对中药药理学研究的深入，黄芪甲苷作为黄芪的主要活性成分，其含量测定研究也成为了研究的热点之一。
本文将对黄芪甲苷含量测定研究的进展进行综述，以期为相关研究提供参考和指导。
一、传统测定方法传统的黄芪甲苷含量测定方法主要包括高效液相色谱法、紫外分光光度法和高效液相色谱-质谱联用法等。
这些方法虽然在一定程度上能够准确测定黄芪甲苷的含量，但是存在操作复杂、耗时耗力、需要昂贵仪器等缺点，限制了其在实际生产中的应用。
二、近年来的研究进展为了解决传统测定方法存在的不足，近年来，研究人员提出了各种新的测定方法，使得黄芪甲苷含量测定变得更加简便、快捷、准确。
气相色谱-质谱联用法是一种新兴的测定方法，其具有操作简便、分析速度快、准确度高的优点，已经被广泛应用于黄芪甲苷含量的测定中。
近年来还出现了一些基于生物技术的新方法，如基于免疫学原理的黄芪甲苷ELISA检测法和基于生物传感技术的快速检测方法等，这些方法将黄芪甲苷的含量测定与生物技术相结合，不仅提高了测定的灵敏度和准确度，而且能够实现对大样本的高通量检测。
三、存在的问题和展望尽管近年来取得了一些进展，但是黄芪甲苷含量测定研究仍然面临一些问题。
目前的测定方法中仍然存在一定程度的操作复杂性和仪器昂贵的问题，限制了其在实际生产中的应用。
对于复杂的黄芪样品，测定方法的选择和优化仍然存在一定困难。
需要进一步提出新的测定方法，以解决现有方法存在的不足。
展望未来，随着科学技术的不断发展，相信黄芪甲苷含量测定研究将取得更大的突破。
可以预见的是，基于生物技术的新方法将会得到更多的应用，对于传统测定方法的改进和优化也将成为研究的重点之一。
黄芪甲苷的测定方法
黄芪甲苷含量测定几种常用方法的比较黄芪甲苷为黄芪的主要活性成分之一。
能抗炎降压、镇痛镇静和促进再生肝DNA水平。
现代药理研究表明，黄芪甲苷具有改善白细胞变形能力、改善心肌收缩及舒张功能、促进胰岛素分泌和清除自由基等药理作用。
近年来，对黄芪甲苷的含量测定方法的研究很多。
本人就几种常用方法作一比较。
1高效液相色谱法(I-R_C法)HPLC法因其分离度好、灵敏性高，适用范围广等优点，已广泛用于黄芪甲苷的含量测定、稳定性、药理和临床研究中。
1．1 HPLC—uv法黄芪甲苷属于四环三萜类皂苷，紫外末端吸收f max200．8 nm)。
紫外检测灵敏度低，干扰因素多，目前HPLC法是最常用的检测器是紫外检测器。
苏瑞强Ⅲ等采用HPLC法测定黄芪甲苷的含量，色谱柱为YWG—C18柱0．9 mm x250 mm，5 m)，流动相为乙腈一水(1：2．3)，检测波长为203nm，结果线性范围为0．86—5．27 I,L g／mL，加样回收率为97．52％，RSD为3．10％。
1．2 HPLC一示差折光检测法由于黄芪甲苷在紫外区仅有微弱的末端吸收，溶剂噪音对结果有较大的影响，且其前处理繁杂。
池玉梅等四应用HPLC示差折光检测法测定黄芪精12I服液中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Hypersi|ODS 2(4．6ram X 200ram，5 I,Lm)，流动相为甲醇一水(67：33)，结果黄芪甲苷线性范围是1-5 g／ml，回收率为98．1％，RSD为2．02％。
该法简单方便，重现性好，灵敏度高，结果准确、可靠。
1．3 RP—HPLC法路玫等[3j采用RP—HPLC法测定黄芪注射液中黄芪甲苷的含量。
色谱柱为Nova—PakC18柱0．9ram xl5Omm，4la,m)，流动相为乙腈一水一磷酸(1：2：O．1)，检测波长为203nm，柱温为40％。
实验中将样品蒸干，采用水饱和的正丁醇溶解，用氨试液洗涤后蒸干，残渣用甲醇溶解。
结果加样回收率为94．7％，RSD为2．6％。
HPLC测定黄芪甲苷概况
HPLC测定黄芪甲苷概况黄芪甲苷(AstragalosideⅣ)是中药黄芪中的特征性成分,目前黄芪药材以及含黄芪的单方及复方中药制剂大多以黄芪甲苷为质量评价指标,由于黄芪甲苷只在紫外末端有吸收,以往文献报道以薄层扫描方法居多,近年来,通过HPLC方法测定黄芪甲苷以其在准确性、重现性、灵敏度等方面的优势而逐渐为人们广泛使用,本文对近五年来HPLC法测定黄芪药材及制剂中黄芪甲苷的前处理方法及色谱条件两方面综述如下。
1前处理1.1提取纯化黄芪本身含有多种成分,复方中药成分更加复杂,而黄芪甲苷的含量相对较低,在药材中最高含量不到0.2%[1],因此在HPLC测定前进行适当有效的前处理对于保护色谱柱和提高供试液中黄芪甲苷含量都非常必要。
1.1.1样品[2](合剂)置分液漏斗中,乙醚提取,弃去乙醚液(乙醚脱脂),水层用水饱和正丁醇提取,合并正丁醇提取液(正丁醇提取),1%氢氧化钠溶液洗涤正丁醇液,再用正丁醇饱和的水洗至中性(1%氢氧化钠处理),蒸干,残渣用甲醇溶解定容。
1.1.2样品[3](黄芪口服液)正丁醇提取,1%氢氧化钠处理,蒸干,残渣加水溶解后上D101大孔吸附树脂柱,先后用水和30%乙醇洗脱,弃去洗脱液,用70%乙醇洗脱,收集洗脱液,蒸干,甲醇定容。
1.1.3样品[4](黄芪注射液)加氢氧化钾,振摇使溶解,正丁醇提取,1%磷酸二氢钠水溶液洗涤,蒸干,甲醇定容。
1.1.4样品[5](复方口服液)正丁醇提取,1%氢氧化钠处理,蒸干,残渣用水溶解,上大孔树脂柱,先用水洗,再以75%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,蒸干,甲醇定容。
1.1.5样品[6](黄芪药材)粉碎,乙醚脱脂。
将药材置索氏提取器中,加甲醇提取,回收甲醇,提取液蒸干(甲醇索氏提取),残渣用水饱和正丁醇溶解,转入分液漏斗中,1%氢氧化钠处理,蒸干,甲醇定容。
1.1.6样品[7](颗粒剂)研细,甲醇索氏提取,残渣加水溶解,乙醚脱脂,水层正丁醇提取,加1%磷酸二氢钾水溶液洗涤,正丁醇层减压浓缩至干。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪（Astragalus membranaceus）是一种常见的药用植物，被广泛用于中医药以及现代药物的制备中。
其中的化合物黄芪甲苷，也称为天然黄嘌呤核苷，是人体内的重要成份之一，具有显著的生物学活性和药理作用。
在研究过程中，黄芪甲苷的含量检测是必不可少的关键环节，本文将综述黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展。
1. 色谱法色谱法是检测化合物含量的常见方法之一，特别是高效液相色谱法（HPLC）在该领域中被广泛应用。
当前，许多研究已经试图使用色谱法来测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
例如，Wu等人[1]通过HPLC法分离了黄芪甲苷，并进一步定量，结果表明黄芪的含量可以达到0.015-0.153%。
此外，还有其他一些研究者使用不同的方法，如超高效液相色谱法（UHPLC）等改进方法来测定黄芪甲苷的含量[2]。
比色法是另一种可靠的测定化合物含量的方法。
以黄芪甲苷为例，目前已经发现这种化合物可以与P-dimethylamino phenyl azo benzoic acid（DBP）形成一种的物质，并且这种物质可以通过紫外光谱分析进行检测[3]。
据此，一些研究者已经使用该方法成功地测定了黄芪中黄芪甲苷的含量[4]。
3. 免疫学方法免疫学方法是一种测定化合物含量的新方法，该方法基于化合物与特定的免疫试剂的结合强度来检测。
在黄芪甲苷的检测中，一些研究者已经采用竞争ELISA法，并成功地测定了黄芪中黄芪甲苷的含量[5]。
这种方法可以在非常低的浓度下检测到黄芪甲苷，而且可以同时测定多个样本，具有一定的优势。
尽管以上三种方法在测定黄芪甲苷的含量方面，都取得了一定的成功，然而这些方法也存在各自的局限性。
例如，色谱法通常需要昂贵的实验仪器和复杂的实验操作；而比色法需要使用特殊的试剂，且用于多种化合物的测定可能存在相互干扰的问题。
因此，在日常实验中，研究者需要根据实际需要，选择最合适的方法来测定黄芪甲苷的含量。
HPLC法测定黄芪中的黄芪甲苷含量
HPLC法测定黄芪中的黄芪甲苷含量摘要：用HPLC法测定了黄芪甲苷含量.样品从东北黄芪中提取，用色谱纯甲醇溶解并稀释，采用YWG-C18柱，流动相为甲醇，在205 nm下检测，灵敏度为0.1 AUFS,测定了黄芪甲苷的含量.平均回收率为96.1%，RSD为2.15%，结果表明，样品浓度在0.01～0.2 mg/mL之间与峰面积成良好的线性关系.High-performance Liquid Chromatographic Determination ofAstragaloside in Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge.Tian Feng，Deng Yingjie（Department of Pharmacy,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015）Abstract：A sensitive method was developed to determine astragaloside by high-performance liquid chromatography with the C18column.The mobile phase was methanol and the UV absorbency was monitored at 205 nm.This assay demonstrated that astragaloside had adequate sensitivity and selectivity to measure the concentrations of astragaloside in Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge.Key words：high performance liquid chromatography；astragaloside;Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bunge.▲黄芪为常用中药，素有“补药之长”之称，具有益气固表，利尿托毒等功效.黄芪药用价值很高，临床上常用来治疗非特异性免疫功能低下、乙肝和心血管系统疾病.黄芪甲苷作为黄芪成分之一，其化学结构如图1所示，它具有降压、抗炎、稳定红细胞膜、提高血浆cAMP含量，促进小鼠再生肝DNA合成和增强免疫功能等多种作用〔1〕.因此在研究黄芪过程中，我们对其成分黄芪甲苷进行了含量测定方法研究.已有的测定方法多为薄层扫描法〔2〕和香草醛-硫酸比色法〔3〕，前者操作繁琐，背景干扰多，误差较大；后者空白吸收值高，受时间因素干扰大，均难以准确测定.本文试用HPLC法测定黄芪甲苷的含量.其样品浓度的范围在0.01～0.2 mg.mL之间与峰面积呈线性，该法灵敏度高，重现性好，可准确地测定东北黄芪甲苷的含量.Fig.1 The formulation of astragaloside1 仪器与方法仪器：Waters高效液相色谱仪，510型泵，490E紫外检测仪.对照品黄芪甲苷购自中国药品生物制品检定所.样品黄芪饮片(生品)，购自沈阳京盛药店，本校许春泉教授鉴定为东北黄芪.试剂乙腈(色谱纯，天津四友生物医学公司)、甲醇(色谱纯，天津四友)、正丁醇(分析纯)、乙醚(分析纯)、水、重蒸馏水、去离子水、中性氧化铝(层析用)、轻质氧化镁(AR).2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：YWG18柱250 4.6 mm 10μL，大连依利特科学仪器XXX；流动相：甲醇(色谱纯)；流速：0.8 ml/min；检测波长：205 nm；灵敏度：0.1AUFS.2.2 标准曲线的绘制精密称取10.03 mg黄芪甲苷标准品，置于50 mL容量瓶中，加入色谱纯甲醇溶解并定容，分别精密吸取0.5、1.5、2.5、5、10 mL用甲醇稀释并定容于10 mL容量瓶中，用0.45 μ微孔滤膜过滤，进样20 μL，按上述色谱条件测定.在t R=3.375左右有唯一吸收峰，以峰面积为纵坐标，进样浓度为横坐标，得一工作曲线.回归方程为A=0.171 7C+0.465 7，r=0.999 6，线性范围0.01～0.2 mg/mL-1，如表1所示.Tab.1The concentration and peak area of the standard sample2.3 精密度实验精密称取黄芪甲苷对照品4.50 mg，用甲醇溶解并定容于10 mL容量瓶中，精密吸取20 μL进样，连续5次，测定峰面积，其RSD为2.14%.2.4 回收率试验取5 g已测定黄芪甲苷含量的生药提取水煎液平均分成10份，取5份，再分别准确加入1.447 mg/mL的黄芪甲苷对照品溶液0.5 mL，按“样品测定”项下方法操作，结果见表2.Tab.2 The results of recoveryx=96.1%，RSD=2.15%2.5 稳定性实验样品溶液在室温下放置，每隔3h测定1次，12h内共测5次，含量分别是1.350、1.347、1.352、1.349 mg/g，RSD为2.45%，证明黄芪甲苷含量至少12h内稳定.2.6 样品测定将黄芪水提取液50mL(相当于含生药50g)加热浓缩至30mL，加大量甲醇至上清液再加甲醇无浑浊，醇沉多糖，抽滤，滤液用真空旋转薄膜蒸发器回收甲醇至干，残渣加少量H2O制成水溶液，用100mL乙醚振摇萃取脱脂3次，取水层加水饱和正丁醇的上层液萃取数次，合并正丁醇液，减压旋转蒸发正丁醇至干，残渣加少量95%乙醇溶解，然后均匀滩洒在装有干燥Al2O3∶MgO(36 g∶9g)混合物的G3漏斗中，并用75%洗脱3h，洗脱液回收乙醇后得残渣用95%乙醇溶解，得乙醇液加大量乙醚，抽滤，弃去滤液，滤渣附于滤纸上使其自然挥干乙醚，将滤纸浸于甲醇中使滤渣充分溶解，弃去滤纸，定容至50mL，备用，精密吸取1mL置50mL 容量瓶中，用色谱纯甲醇定容至刻度，振摇，过微孔滤膜，进样20μL，按上述色谱条件测定，并由回收方程计算含量，得图谱(图2、3)，结果如表3.Fig.2 The chromatogram of the sampleFig.3 The chromatogram of controlTab.3 The measuremental results of the sample contentn=5，RSD=0.694%，Ai=0.511 682×106，Ci=0.027 mg.mL-1则50 g药中黄芪甲苷为67.5 mg,相当于每克生药中含黄芪甲苷1.35 mg.3 讨论a.本实验考察了黄芪水提取液醇沉除多糖和蛋白质，乙醚除脂类物质，过Al2O3∶MgO滤层除黄酮，最后制得甲醇浸液的工艺，结果表明，此方法提取完全，损失少，分离度良好.b.日本的原田正敏〔4〕报道了用乙腈-水(1∶2)作为流动相测定黄芪皂苷(即黄芪甲苷〔1〕),我们经实验发现在此流动相下出现倒峰，峰形不好，且受流动相影响大，不易把握保留时间，我们也考察了(甲醇：水)不同比例作为流动相的实验结果，最终选择甲醇为流动相能得到最佳效果.c.鉴于黄芪皂苷种类较多，结构相近，紫外扫描只在200 nm有末端吸收〔1〕，原田正敏因此定在200 nm处检测〔4〕.我们实验表明，波长越长，噪音越小，但灵敏度越低；越靠近200 nm，灵敏度越高，但噪音越大.综合考察这两个因素，本实验选择205 nm为测定波长.d.黄芪中甲苷的含量很低，而且受产地、生长时间、采收季节等因素影响，具体差异有待于进一步研究.■整理单位：田丰（沈阳药科大学药学系，沈阳110015）邓英杰（沈阳药科大学药学系，沈阳110015）参考文献：［1］余灏，杨胜华.黄芪皂苷分析方法研究近况.华西药学杂志，1993，8(3)：163～166［2］鲁静，王宝琴.黄芪甲苷的薄层扫描法测定.中成药，1992，14(6)：34～35［3］俞家华,曹正中，张勤.膜荚黄芪中黄芪甲苷的含量测定.中药通报，1986，11(9)：38～39［4］原田正敏.日本常用生药的定量方法.国外医药.植物药分册，1990，5(5)：201～202收稿日期：1999-01-16[文档可能无法思考全面，请浏览后下载，另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意!]。
黄芪甲苷的含量测定研究进展
黄芪甲苷的含量测定研究进展黄芪甲苷的含量测定研究进展摘要黄芪甲苷是中药黄芪的主要有效成分，含量测定方法较多，其测定方法主要有高效液相色谱法、薄层扫描法、荧光法等。
关键词黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪为常用中药,性温,味甘,具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌之功能,用于气虚乏力、食少便溏、中气下陷、久泄脱肛、便血崩漏、表虚自汗、气虚水肿、久溃不敛、慢性肾炎、蛋白尿、糖尿病等症[1]。
现代药理研究表明,黄芪具有器官保护、免疫调节、强心、降糖、抗衰老、抗炎抗病毒等作用[2]。
近年来，对黄芪甲苷的含量测定方法的研究很多，本文就几种常用方法进行介绍。
1.高效液相色谱法(HPLC法)HPLC法因其分离度好、灵敏性高，适用范围广等优点，已广泛用于黄芪甲苷所产生的的含量测定、稳定性、药理和临床研究中。
1.1HPLC-UV法：黄芪甲苷属于四环三萜类皂苷，紫外末端吸收λmax=200.08nm,紫外检测灵敏度低，干扰因素多[3]，目前HPLC法是最常用的检测器是紫外检测器,闵庆璐等[4]采用HPLC-UV法测定丹黄祛瘀片中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Kromasil C18 柱（250mm×4.6mm）,流动相乙腈-水(32:68)，流速1.0ml/min,检测波长203nm。
结果线性范围0.066~0.330mg/ml(r=0.9993)回收率为95.0%~105.0%,平均回收率100.1%（RSD=2.0%，n=9）。
1.2HPLC-示差折光检测法：由于黄芪甲苷在紫外区仅有微弱的末端吸收，溶剂噪音对结果有较大的影响，且其前处理繁杂。
池玉梅等[5]应用HPLC-示差折光检测法测定黄芪精口服液中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Hypersil ODS 2（4.6mm×200mm,5μm）,流动相为甲醇-水（67:33），结果线性范围1~5μg/ml,回收率为98.1%，RSD为2.02%。
该方法简单方便，重现性好，灵敏度高，结果准确可靠。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪是中药中常用的一种药材，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种药理作用。
其中黄芪甲苷是其主要活性成分之一，具有调节免疫系统、抗炎抗菌等作用。
准确测定黄芪中黄芪甲苷的含量对于评价黄芪的质量和疗效具有重要意义。
本文将综述黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展。
目前，常用的测定黄芪中黄芪甲苷含量的方法主要有色谱法、质谱法和光谱法等。
色谱法包括高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC），在测定黄芪甲苷含量方面应用较广。
HPLC法是目前最常用的分析方法之一。
该方法具有准确、灵敏、重复性好等优点。
研究者通常采用反向相色谱法，以C18柱作为固定相，甲醇和水作为流动相，在一定的温度下进行梯度洗脱。
通过测定黄芪甲苷的峰面积与标准品进行比较，可以定量测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
质谱法在测定黄芪甲苷含量方面也具有重要应用价值。
质谱法可以提供更准确的分子质量信息，对于复杂样品的分析具有优势。
研究者通常采用LC-MS/MS和GC-MS等方法进行黄芪甲苷的检测。
LC-MS/MS是目前应用最广的方法之一，通过在质谱分析仪上联结液相色谱仪，可以实现对黄芪甲苷的定性和定量测定。
GC-MS则是通过将样品进行气相色谱分离，再在质谱仪中进行检测，具有高分辨率和高灵敏度的优点。
光谱法主要包括紫外-可见光谱法和荧光光谱法。
紫外-可见光谱法是通过测量样品在特定波长下的吸光度来定量目标物质的含量。
研究者通常选择在300-340nm波长范围内进行测定。
荧光光谱法则是通过测量样品在激发波长下的荧光强度来定量目标物质的含量。
采用不同的激发波长和发射波长，可以实现对黄芪甲苷的灵敏测定。
还有一些其他方法也被应用于测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
比如高效毛细管电泳法（CE）可以通过在带荧光标记的铢离子束胶（PVA-COOH）基质中进行分析。
核磁共振（NMR）也被用于测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
测定黄芪中黄芪甲苷含量的研究进展丰富多样，不同的方法在不同的实验条件下具有各自的优势和适用范围。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪（Astragalus membranaceus）是中药传统名贵药材之一，广泛应用于中医药治疗和保健。
黄芪中有大量的有效成分，其中最为重要和广泛研究的成分之一是黄芪甲苷（Astragaloside IV）。
黄芪甲苷具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性，被认为是黄芪的主要药效成分之一。
黄芪甲苷的含量测定对于研究黄芪的药效活性、质量控制和合理应用具有重要意义。
近年来，关于黄芪甲苷含量测定的研究进展主要体现在以下几个方面。
1. 提取、分离和纯化技术的改进黄芪甲苷的含量测定需要进行有效的提取、分离和纯化才能保证测定结果的准确性和可靠性。
目前常用的提取方法包括超声波法、微波法、超临界流体萃取法等。
分离和纯化方法主要包括薄层色谱、高效液相色谱、逆流色谱等。
近年来，研究者对提取、分离和纯化技术进行了改进和优化，提高了黄芪甲苷的提取效率和纯度，为后续的含量测定提供了良好的基础。
2. 含量测定方法的建立和优化黄芪甲苷的含量测定方法主要包括高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法等。
高效液相色谱法是最常用的测定方法之一，可以通过优化色谱条件和检测参数，实现对黄芪甲苷的准确测定。
液相色谱-串联质谱法在测定黄芪甲苷的同时还可以鉴别其他成分，提高测定的选择性和灵敏度。
近年来，研究者对测定方法进行了改进和优化，提高了测定的准确性和精密度。
3. 影响因素的研究测定黄芪甲苷含量的准确性和可靠性受到多种因素的影响，包括黄芪的品种、产地、贮藏条件等。
研究者通过比较不同品种、产地和贮藏条件下的黄芪甲苷含量，揭示了这些因素对含量测定的影响规律，为合理选择黄芪药材和优化贮藏条件提供了科学依据。
4. 质量控制标准的建立黄芪甲苷的含量是评价黄芪药材质量的重要指标之一，建立合理和科学的质量控制标准对于保障黄芪药材的质量和有效成分的稳定性具有重要意义。
研究者通过大量的样品分析和统计学处理，建立了黄芪甲苷的质量控制标准，为黄芪药材的质量评价提供了参考依据。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪，即黄芩，是一种传统中药材，被广泛用于治疗风寒感冒、脱肛、水肿等疾病。
其中的有效成分黄芪甲苷具有抗炎、免疫调节、抗氧化等多种药理活性。
对黄芪甲苷含量的测定研究具有重要意义。
本文将对黄芪甲苷含量测定的研究进展进行概述。
目前，黄芪甲苷含量的测定方法主要包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、质谱法（MS）等。
HPLC法是最常用的方法之一。
研究者通常使用反相色谱柱和紫外检测器进行测定，同时使用特定的流动相进行梯度洗脱。
近年来，也有研究者使用超高效液相色谱法（UPLC）进行测定，其优势在于提高了分离效果和分析速度。
一些研究者采用GC或GC-MS方法进行黄芪甲苷含量的测定。
GC法首先将样品提取得到的黄芪甲苷转化为易于挥发的衍生化物，然后使用柱温程序升高进行分离和检测。
对于含量较低的样品，可以使用MS进行灵敏度更高的定量分析。
除了上述的色谱方法，还有一些研究者尝试使用其他分析技术进行黄芪甲苷的含量测定。
有研究者使用荧光法和紫外可见光谱法进行定性和定量分析。
荧光法利用黄芪甲苷特征的荧光发射信号与内标物进行比较，从而实现对黄芪甲苷含量的测定。
紫外可见光谱法则利用黄芪甲苷在特定波长下的吸光度来定量测定。
在样品处理方面，黄芪甲苷含量的测定通常需要对样品进行提取和纯化。
提取常用的方法有超声波提取、温液提取和微波提取等。
而纯化则可以使用固相萃取和柱层析等技术来去除样品中的干扰物质。
黄芪甲苷含量的测定研究已经取得了一定的进展。
各种不同的分析方法被用于测定黄芪甲苷含量，其中HPLC法是最常用的方法。
在样品处理方面也有各种不同的方法可供选择。
目前对黄芪甲苷含量测定的研究还存在一些问题，如测定方法的灵敏度和准确性需要进一步提高，样品处理方法的优化也需要进一步研究。
对于黄芪甲苷含量测定的研究仍然有可以深入探索的空间。
黄芪甲苷含量测定的研究进展已经取得了一定的成果，但仍然需要进一步完善和改进。
脉络通颗粒中黄芪甲苷的含量测定
脉络通颗粒中黄芪甲苷的含量测定目的：建立脉络通颗粒中黄芪甲苷的测定方法。
方法：在λS=530 nm，λR=700 nm用薄层色谱扫描法测定黄芪甲苷的含量。
结果：黄芪甲苷在1.02～5.10 μg范围内线性关系良好（r=0.9995），平均回收率为96.1%，RSD=1.9%(n=5)。
结论：该法准确、可靠、灵敏度高、重现性好，可用于该制剂中黄芪甲苷的含量测定及质量控制。
标签：脉络通颗粒；黄芪甲苷；含量脉络通颗粒是纯中药制剂，由黄芪、元参、西洋参、葛根等十几味中药经科学组方，结合传统工艺，用现代中药提取技术精制而成。
具有滋阴补气，健脾益胃，生津止渴，润燥除烦，调整上、中、下三焦阴阳平衡之功效，对于非胰岛素依赖型糖尿病有良好的疗效。
黄芪为方中的主要成分之一，本文参考有关资料[1,2]建立了薄层扫描法测定其黄芪甲苷的含量，方法准确、可靠、灵敏度高、重现性好，为保证其制剂质量提供了可靠的依倨。
1 材料与方法1.1 仪器与试药CS-9301PC薄层扫描仪（日本岛津CS－9301PC）；定量毛细管（美国Drum-mond厂出品）；硅胶G（青岛海洋化工厂）；黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所）；甲醇、氯仿、正丁醇等试剂均为分析纯；脉络通络颗粒为市售，批号：030417，030521，030829。
1.2 方法1.2.1 对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品10.2 mg置10 ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。
1.2.2 供试品溶液的制备取装量差异项下的脉络通颗粒1 g精密称定，加水20 ml微热使溶解，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20 ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次15 ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水使溶解，放冷，通过D101大孔树脂柱（内径1 cm,长15 cm），以水50 ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30 ml洗脱，弃去40%的乙醇液，继续用70%的乙醇80 ml洗脱，收集洗脱液，挥干溶剂，残渣用甲醇溶解并转移至1 ml容量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
黄芪甲苷含量测定方法
黄芪甲苷含量测定方法
本方法用于检测黄芪提取物中黄芪甲苷的含量检测，照高效液相色谱法（2010版《中国药典》附录ⅥD测定）。
色谱条件
色谱柱： C18柱（Shodex, 4.6×250mm,）
流动相：乙腈-水=40-60
柱温：30℃
流速：1.0ml/min
检测器：ELSD检测器（75℃，2.5L/min）
对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定后加入25ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，超声10min后静置待用。
供试品溶液的制备取供试样品适量，精密称定，加入25ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，超声10min后静置待用。
测定法分别精密吸取经微孔滤膜过滤的对照品溶液和供试品溶液各
20μl，注入液相色谱仪，测定后根据外标法计算即得。
黄芪甲苷检测
迪信泰检测平台
黄芪甲苷检测
黄芪甲苷即黄芪皂苷IV（astragaloside IV），是黄芪中的一种皂苷类代表性成分。
具有强心、增强免疫功能等多种药理作用。
黄芪甲苷也被用作评价黄芪药材质量优劣的标准。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱（HPLC）和液质联用（LC-MS）技术，可高效、
精准的检测黄芪甲苷的含量变化。
此外，迪信泰检测平台还提供其他多种中药成分检测服务，方法成熟，可高效处理大批量样本。
HPLC和LC-MS测定黄芪甲苷样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关质谱参数（中英文）。
3. 质谱图片。
4. 原始数据。
5. 黄芪甲苷含量信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
三种方法测定黄芪粉针剂中黄芪甲苷的含量
三种方法测定黄芪粉针剂中黄芪甲苷的含量
庄书蓓;杨帅才;李敏
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2004(017)003
【摘要】目的:测定黄芪甲苷的含量.方法:本实验采用了三种方法--比色法、薄层扫描法和高效液相法.结果:比色法用香草醛-硫酸试剂为显色剂,该显色剂本身具有空白吸收,对分析样品有干扰,且A值随加热温度、时间及旋转时间均有变化;薄层扫描法操作较繁,且显色后不宜长时间放置.结论:HPLC法操作简单,干扰小,重现性好.【总页数】3页(P168-170)
【作者】庄书蓓;杨帅才;李敏
【作者单位】哈尔滨医药药材公司,150006;哈尔滨医药药材公司,150006;哈尔滨医药药材公司,150006
【正文语种】中文
【中图分类】R2
【相关文献】
1.近红外光谱法测定不同产地黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和黄芪甲苷含量 [J], 战皓;方婧;付梅红;吴宏伟;张东;柳梦婷;唐力英;李化;王祝举;杨滨;杨岚
2.黄芪养生饮中总黄酮与黄芪甲苷含量测定 [J], 刘利萍;高健;李宝园;解谦
3.高效液相色谱法测定黄芪注射液中的黄芪甲苷含量 [J], 金昕;姚令
4.高效液相色谱法测定黄芪注射液中的黄芪甲苷含量 [J], 金昕; 姚令
5.薄层色谱-分光光度法测定黄芪粉针剂中黄芪甲苷的含量 [J], 杨春欣;孙丽霞;许根英
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黄芪甲苷含量测定几种常用方法的比较
黄芪甲苷为黄芪的主要活性成分之一。
能抗炎降压、镇痛镇静和促进再生肝DNA水平。
现代药理研究表明，黄芪甲苷具有改善白细胞变形能力、改善心肌收缩及舒张功能、促进胰岛素分泌和清除自由基等药理作用。
近年来，对黄芪甲苷的含量测定方法的研究很多。
本人就几种常用方法作一比较。
1高效液相色谱法(I-R_C法)
HPLC法因其分离度好、灵敏性高，适用范围广等优点，已广泛用于黄芪甲苷的含量测定、稳定性、药理和临床研究中。
1．1 HPLC—uv法黄芪甲苷属于四环三萜类皂苷，紫外末端吸收f max200．8 nm)。
紫外检测灵敏度低，干扰因素多，目前HPLC法是最常用的检测器是紫外检测器。
苏瑞强Ⅲ等采用HPLC法测定黄芪甲苷的含量，色谱柱为YWG—C18柱0．9 mm x250 mm，5 m)，流动相为乙腈一水(1：2．3)，检测波长为203nm，结果线性范围为0．86—5．27 I,L g／mL，加样回收率为97．52％，RSD为3．10％。
1．2 HPLC一示差折光检测法由于黄芪甲苷在紫外区仅有微弱的末端吸收，溶剂噪音对结果有较大的影响，且其前处理繁杂。
池玉梅等四应用HPLC示差折光检测法测定黄芪精12I服液中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Hypersi|ODS 2(4．6ram X 200ram，5 I,Lm)，流动相为甲醇一水(67：33)，结果黄芪甲苷线性范围是1-5 g／ml，回收率为98．1％，RSD为2．02％。
该法简单方便，重现性好，灵敏度高，结果准确、可靠。
1．3 RP—HPLC法路玫等[3j采用RP—HPLC法测定黄芪注射液中黄芪甲苷的含量。
色谱柱为Nova—PakC18柱0．9ram xl5Omm，4la,m)，流动相为乙腈一水一磷酸(1：2：O．1)，检测波长为203nm，柱温为40％。
实验中将样品蒸干，采用水饱和的正丁醇溶解，用氨试液洗涤后蒸干，残渣用甲醇溶解。
结果加样回收率为94．7％，RSD为2．6％。
该法简便、稳定性好、重珊陆好、灵敏度高，且由于在流动相中加入磷酸，可使基线平稳，样品峰与其他峰达到基线分离。
郑志仁等H将药材置索氏提取器提取1 h后采用RP—HPLC法测定提取液中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Nueleosil c 18柱，流动相为乙腈一水(1：2)，检测波长为205rim。
结果黄芪甲苷线性范围是l0．64～53．20I．L g／mL，加样回收率为92．66％。
1．4 HPLC—ELSD法蒸发光散射检测原理是使流动相溶剂喷雾汽化，进入加热管后溶剂挥发；被分析检测的物质颗粒经镭射光产生散射，散射光由光电倍增管收集得到响应，光散射检测器的响应大小决定由被分析物质的颗粒的数量和大小，而不受流动相溶剂的干扰；不要求被检测组分有特定的化学结构。
赵灵芝等15]采用HPLC—ELSD法测定黄芪中黄芪甲苷的含量，以Blite—ODS柱为色谱柱，乙腈一水(36：64)为流动相，流速为0．8ml／rain；ELSD参数中漂移管温度为100℃，N 流速为2．74ml／min。
结果黄芪甲苷线性范围是2．016～12．096g，加样回收率为97．43％，RSD为1．57％。
该法灵敏度高，分离度好，干扰少，前处理简便，回收率高，重现性好。
周春玲等对甲醇一水(4o：6o)、四氢呋喃一水(25：75)及乙腈一水(1：21等不同流动相进行了试验，并考察了黄芪甲苷的分离情况及检测灵敏度，同时通过观察峰面积、基线噪音和信噪比，研究了漂移管温度和气体流速等ELSD参数条件。
结果表明，采用乙腈一水(1：2)为流动相时，分离情况最好；最佳的测定参数是漂移管温度为105 oC，气体流速为2．96L／rain；样品加样回收率为100．5％，RSD为3．23％。
该法分离度好，精密度和重珊性俱佳，回收率高。
1．5 HPLC—MS法高效液相一质谱(HPLC—Ms)联用仪是当前天然药物的成分、药理与临床研究中最重要的联用仪器，能解决复杂成分样品的定性、定量问题。
顾泳川等[61建立HPLC—MS法测定大鼠尿中黄芪甲苷的含量，并对其尿药动力学进行研究。
采用Diamonsil TMC18柱为色谱柱；乙腈一水(40：60)为流动相；电喷雾离子化接口的四级质谱检测器，内标为地高辛，选择性离子检测(sIM1。
实验中尿样加入地高辛混匀离心后，上清液通过已活化的固相萃取小柱，用3ml水淋洗，残渣用2ml甲醇洗脱，N：吹干后用流动相溶解。
该法专属性好，方法灵敏度高，最低检测限为lOng／ml，杂质干扰小，操作简便，是检测体内黄芪甲苷的一种新型有效的分析方法。
2 薄层扫描法fLcs法)
TLCS法多采用双波长扫描法，能消除有机成分的干扰及操作误差，使测定的灵敏度和准确度提高，一般有内标法和外标法。
2．1普通TLCS法实验中样品用氢氧化钾液提取除去酸性成分，以正丁醇萃取使背景干扰少，用大孔树脂分离皂苷除去样品中糖类等水溶性杂质，并在层析缸中放一小杯氨水，使斑点分离明显；采用硅胶G板，以氯仿一甲醇一水(65：35：lO) 为展开剂，在氨饱和蒸气环境下展开，喷以10％硫酸乙醇溶液后加热显色。
加样回收率为97．39％，RSD为1．4％。
将样品超声提取后，在硅胶GF254板上以氯仿一醋酸乙酯一甲醇(8：
6：0．8)展开，254 BITI紫外光灯下定位，双波长( s=228 nm，It=370 nm)反射式锯齿扫描测定，平均加样回收率为99．5％，RSD为2．5％。
该法能准确快速地测定提取液中的黄芪甲苷含量，取样量少，提取过程简单，可不经显色直接扫描测定，且方法重现性好，操作简单易行。
2．2高效TLCS法普通TLCS法的稳定性、重现性相对较差，灵敏度较低。
将样品置索氏提取器中加甲醇回流提取，乙醚脱脂，无水正丁醇提取后蒸干，残渣用甲醇溶解，在高效硅胶G板上以三氯甲烷一甲醇一水(65：35：10)为展开剂展开，硫酸乙醇显色定位。
结果加样回收率为98．9％，RSD为2．0o％。
该法简便、可靠，重现性和稳定性均较好，且采用索氏提取分层明显，薄层展开斑点清晰。
2．3薄层光密度法将样品用水饱和正丁醇萃取，用1％氢氧化钠液洗涤后挥干，残渣用甲醇溶解，在硅胶G板上以三氯甲烷一甲醇一水(7：3：9)为展开剂展开，反射法单波长(525nm) 锯齿扫描，狭缝1．2mrnx1．2mm，背景补偿，线性校正CH=9，SX=3。
结果黄芪甲苷线性范围为1．58～7．9 g，加样回收率为97．28％，RSD为1．o6％。
该法重现陆好，斑点颜色在2h内稳定。
3比色法
比色法利用了黄芪甲苷与显色剂发生显色反应生成有色物质，使之能用可见分光光度法测定的原理，常见显色剂有香草醛一硫酸、香草醛一高氯酸、香草醛一冰醋酸等。
3．1采用香草醛一硫酸比色法测定黄芪甲苷的含量。
该法利用在浓硫酸介质中，黄芪甲苷的酚羟基与香草醛醛基进行羟醛缩合反应的原理，将样品用乙醇溶解后，加入香草醛液和硫酸液，加热15rain，于578nm处测定吸收度，操作简单，反应灵敏度高，重现陛好，且无使用仪器的限制。
3．2采用香草醛一冰醋酸比色法对黄芪甲苷的含量进行了测定，将样品用乙醇溶解后，加入香草醛液和冰醋酸液，加热15rain，于578nm处测定吸收度。
该法具有试剂的空白吸收值较小、对分析样品干扰小等优点。
4荧光法
4．1茴香酸一硫酸体系荧光法杜呜等【7】利用黄芪甲苷在浓硫酸介质中能与茴香酸反应，其反应产物有强烈荧光的特点，对血清中黄芪甲苷的含量进行测定。
结果黄芪甲苷与茴香酸的反应产物的最大激发波长为Ex=320nm，最大发射波长为Em=387nm，线性范围为0．2～40．Omg／L，最低检测限为0．02rag／L。
该法具有灵敏度高、选择性好、检出限度低、线性范围宽、操作简便、无干扰等优点。
游文玮等【蚓采用荧光分光光度法，针对大鼠血清中内源性杂质干扰严重的特点，用固相萃取净化和富集血样，再用化学衍生荧光分光光度法测定黄芪甲苷的含量。
最大激发波长为Ex=3lOnm，最大发射波长为Em=376nm，平均回收率为97．1％，RSD为2．6％。
该法采用固相萃取技术，有效地富集和净化样品，并利用了荧光光度法灵敏度高的优点。
4．2香草醛一磷酸体系荧光法杜鸣等利用黄芪甲苷在磷酸条件下与香草醛反应的产物具有荧光的特性，建立了香草醛一磷酸体系荧光分光光度法测定黄芪甲苷的含量。
结果黄芪甲苷与香草醛的反应产物的最大激发波长为Ex=365nm，最大发射波长为Em=430nm，线性范围为O．20—20．0mg ／L，最低检测限为0．106mg／L。
该法具有操作简便、专属性强、重现性好、空白值较低等优点，且样品不必经过薄层分离即可直接测定。
综上所述，对黄芪甲苷的分析方法很多，但大多数制剂由于成分复杂，干扰严重，HPLC法和TLCS法因操作简单、快速、灵敏度高、重现性好而优于其他方法。
近年来，随着新型检测器如ELSD等的不断出现，使原本无紫外吸收的黄芪甲苷也得以很好的分离；而将色谱与质谱联用(如HPLC—MS)，化学衍生化与荧光相结合，则各取所长，能同时对成分复杂的样品进行定性定量分析，尤其在药理、临床研究中是新型有效的方法。