技术五：MACS(磁珠分选)小鼠细胞分选与分析试剂

美天旎公司磁珠分选产品

附：Miltenyi分离柱技术指标及图片
Miltenyi的柱子回收方法
准备使用回收的柱子时，抗体孵育始，即将柱子置于新鲜的75%酒精中，柱的容器内盛满酒精，自动流下，既消毒，又de-gas，去除气泡十分关键。洗抗体时，即开始洗柱子，将回收柱架于消毒过的长试管口上。换新的酒精自然滴下，换PBS+0.1%FBS冲洗之，最后用MACSBuffer冲洗。柱子准备完毕，准备上柱的细胞也就同时准备好了。
（主要针对Miltenyi产品）
一、标记策略
用MACS进行磁分离，最重要的参数就是高质量的标记。对阳性细胞的标记应尽可能强，而背景要尽可能低，才能获得对磁标记的阳性细胞和未标记的阴性细胞的最好分辨。有多种不同的标记策略可供参考：
1、直接标记
直接标记是最快速和最特异的磁标记方法。
2、间接标记
几乎所有的单克隆抗体或多克隆抗体都可以用于间接标记。用无标记的、生物素化的或FITC、PE或APC结合的一抗标记细胞，再用抗免疫球蛋白、抗生物素、链霉菌亲和素、抗FITC、抗PE、或抗APC的微珠分别进行磁标记。间接标记可以放大磁标记，用于分离表达比较弱的标记很有用。在间接标记中，以使用生物素化的或PE表记的一抗结果特异性最好。
109个标记细胞
SuperMACS
自动分选
AutoMACS分选柱
4X109总细胞2X108个标记细胞
AutoMACS
CliniMACS
6-12X1010总细胞6-12X108个标记细胞
CliniMACS
分子生物学分选
μ分选柱
10μgmRNA
μMACS
M分选柱
50μgmRNA
MiniMACS
Miltenyi磁柱选择及标记问题
回收方法

美天旎公司磁珠分选产品

美天旎公司磁珠分选产品标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]美天旎公司MACS(磁珠分选)相关产品一、MACS微珠（MicroBeads）MACS微珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒，用于目的细胞或者去除细胞的磁性标记。

微珠直径约有50nm，比细胞小200多倍，体积为细胞的百万分之一，光学显微镜下不可见。

微珠由多聚糖和氧化铁组成，无毒性，对细胞无损伤，可以生物降解。

MACS微珠与流式细胞仪兼容，不会影响细胞的光散射特性；磁性标记只占用2 0－30％的结合位点，不影响细胞的荧光抗体标记。

此外，MACS微珠可以最大限度地避免细胞活化；无需解离磁珠，可以直接进行后续实验：如流式细胞仪分析或分选、细胞培养、分子生物学研究、回输给人或者动物。

MACS微珠主要有三种：直标微珠、间标微珠、多选微珠。

其中间标微珠有抗免疫球蛋白微珠、抗生物素微珠或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠。

多选微珠是专门为分选细胞亚群而研制的一种微珠。

这种微珠通过特殊的方式与抗体偶联，在第一次阳性分选完成后，与细胞结合的多选微珠可以被解离试剂剪切下来，阳性分选的细胞可以进行再次阳性分选或者去除分选。

MACS技术分选的CD8阳性T细胞（箭头所示为磁性结合在细胞表面的微珠）二、MACS分选柱（Separation Column）MACS分选柱是一类填充有不同规格铁珠的塑料容器，铁珠表面有亲水包被，因此不会损伤细胞。

在磁场外MACS分选柱不带有磁性，但是当置于一个永久性磁场—MACS分选器中时，分选柱内的铁珠可以使分选器的磁场增强1000倍，足以滞留仅标记有极少量微珠的目的细胞；磁性标记细胞从分选柱中通过时可以受到均匀的磁力作用，从而提高分选纯度和回收率。

手动操作在30分钟内可完成，自动分选仅需分钟，得到的细胞可立即用于后续实验。

此外，大多数MACS分选柱都是无菌包装，一次性使用，可以满足细胞培养所需的无菌条件。

磁珠分选说明书

磁珠分选说明书磁珠分选是一种利用磁性原理进行分选的方法，通常用于分离微小颗粒或细胞等。

下面是一份磁珠分选的简单说明书：一、原理磁珠分选基于磁性原理，通过磁场作用将磁珠与目标颗粒或细胞结合，再利用磁力的差异将磁珠与目标物分离，从而实现分选。

二、操作步骤1. 准备所需试剂和磁珠：根据实验需求准备相应的缓冲液、抗体或特异性配体，以及磁珠。

确保磁珠经过充分混匀。

2. 磁珠与目标物的结合：将磁珠与目标物（如抗体、核酸或其他配体）混合，使其充分结合。

通常需要在适当的缓冲液中进行孵育。

3. 磁力分选：将结合了目标物的磁珠转移到磁场中进行分离。

通常需要将磁珠与目标物混合物加入到特制的分离柱或管中，然后施加磁场。

4. 洗涤：为了去除未结合的目标物和其他杂质，进行洗涤操作。

将磁珠从磁场中取出，用缓冲液冲洗。

5. 洗脱和收集：最后，通过改变磁场或加入特定的洗脱液，将目标物从磁珠上洗脱下来并收集。

三、注意事项1. 确保所有操作在适当的缓冲液中进行，以维持磁珠和目标物的稳定性。

2. 根据实验需求选择合适的磁珠和特异性配体，以确保最佳的结合效果。

3. 注意磁力分选时的操作，避免磁珠吸附到容器壁或其他杂质上。

4. 在进行洗涤和洗脱时，要确保操作步骤准确，避免损失目标物。

5. 保持操作环境的清洁，避免污染。

四、应用领域磁珠分选广泛应用于生物医学研究、药物筛选、基因测序等领域，尤其在单细胞分析、蛋白质组学和核酸研究中发挥着重要作用。

以上是一份简单的磁珠分选说明书，具体操作步骤和细节可能因实验需求和试剂而有所不同。

在进行实验前，建议仔细阅读相关文献和试剂说明书，并遵循实验室安全规范。

MACS如何选择合适的分选器

如何选择合适的分选器？美天旎MACS技术已经成为磁性细胞分选的金标准，其文献引用量一直远超同类其他产品。

MACS磁珠分选所用到的主要组份有：MACS磁珠、MACS分选柱和MACS分选器。

如果您是第一次使用美天旎磁珠，则可以选择合适的起始套装，这样既能满足您的分选要求，又节省成本。

美天旎提供以下套装产品供您选择，针对您的实验，选择最适合您的分选器套装产品。

手动分选产品产品一：MiniMACS Starting Kit （送磁珠）130-090-312 MiniMACS Starting Kit对应使用分选柱：MS适合分选策略：阳性分选最大上样量：2X108最大目的细胞吸附量：107一次上样数量：1个产品二：MidiMACS Starting Kit （送磁珠）130-042-301 MidiMACS Starting Kit（LS）对应使用分选柱：LS适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大上样量：2X109最大目的细胞吸附量：108一次上样数量：1个130-090-329 MidiMACS Starting Kit（LS）对应使用分选柱：LD适合分选策略：阴性分选最大上样量：2X109最大目的细胞吸附量：108一次上样数量：1个产品三：Mini & MidiMACS Starting Kit（送磁珠）130-042-501 Mini & MidiMACS Starting Kit（MS LS）对应使用分选柱：MS LS适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大上样量：2X108+2X109最大目的细胞吸附量：107+108一次上样数量：2个Mini & MidiMACS Starting KitMACS MultiStand 分选架MidiMACS Separation Unit 分选器130-042-501 Mini & MidiMACS Starting Kit （MS LD）对应使用分选柱：MS LD适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大上样量：2X108+2X109最大目的细胞吸附量：107+108一次上样数量：2个产品四：OctoMACS Starting Kit （送磁珠）130-042-108 OctoMACS Starting Kit对应使用分选柱：MS适合分选策略：阳性分选最大上样量：8X2X108最大目的细胞吸附量：8X107一次上样数量：8个产品五：QuadroMACS Starting Kit （送磁珠）130-091-051 QuadroMACS Starting Kit （LS）对应使用分选柱：LS适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大上样量：4X2X109最大目的细胞吸附量：4X108一次上样数量：4个130-092-857 QuadroMACS Starting Kit（LD）对应使用分选柱：LD适合分选策略：阴选最大上样量：4X2X109最大目的细胞吸附量：4X108一次上样数量：4个产品六：VarioMACS Separator（手动细胞分选）130-090-282 VarioMACS Separator（手动细胞分选）对应使用分选柱：MS, LS, LD and CS适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大上样量：4X10E9最大目的细胞吸附量：2X10E8一次上样数量：1个半自动分选产品130-095-346 MultiMACS Cell24 Separator（半自动分选器）对应使用分选柱：LS LD适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大细胞上样量：24X2X10E9最大一次上样量：24个全自动分选产品autoMACS Starting Kit（全自动分选器）对应使用分选柱：自动分选柱（可重复使用）适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大细胞上样量：4x10e9最大目的细胞吸附量：2x10e8最大一次上样量：6个。

德国美天妮磁珠分选

MD0043.02
MACS® 细胞分选策略
• 阳性分选
• 去除分选 • 去除分选后再阳性分选
• 多重分选
MD0044.02
MACS细胞分选策略
1、阳性分选：
• 根据特异性标志分选细胞: 阳性分选是指目的细胞磁性标记
后，作为阳性的标记组分直接分选出来。
• 优点：
》高纯度，尤其是富集稀有的细胞》高回收率》操作简便、迅速
MD0044.02
识别DC和DC亚群 New
DC 亚群特异性标志: Blood Dendritic Cell Antigens
Lineage- (CD3, CD14, CD16, CD19, CD20, CD56) HLA-DR+ CD11c+ CD123low/-
BDCA-2/4+ BDCA-1+ BDCA-3+
MD0044.02
MACS® 技术分选与分析功能性T细胞
T细胞分选
T细胞亚群
T细胞功能亚群
抗原特异性 T细胞
Th细胞（ CD4） Tc细胞（ CD8）调节性 T细胞 (CD4+CD25+) TCRr/d 细胞 (TCRr/d微珠 ) NK/T细胞 (CD56多选微珠＋ CD3微珠 )
NaiveT细胞 (CD45RO阴选 ) 活化 T细胞（ CD69、 CD25、 CD30）效应 T细胞（ CD27）记忆 T细胞（ CD45RA阴选、 CD45RO阳选） Th2细胞 (anti-CRTH2)
IFN-r IL-2 IL-4 IL-10 TNF-a
MD0044.02
MACS® 细胞因子分泌细胞分析与分选 New
Catch Reagent

MACS(磁珠分选)介绍-优宁维

技术一：MACS磁珠分选介绍MACS技术为德国美天旎生物技术有限公司（Miltenyi Biotec GmbH）的专利产品，是一种集合了免疫学、细胞生物学、磁力学等知识于一体的高度特异性细胞分选技术，其高度特异性来自抗体对抗原的特异性识别。

MACS技术已成为细胞分选的标准方法，从实验室到临床，从小规模到大规模，从常见细胞到稀有细胞和复杂的细胞亚群，从人类和小鼠细胞到其它种系的细胞，MACS技术提供了一种可在每一个实验室进行高品质细胞分选的方法。

MACS技术主要组成成分为MACS微珠、MACS分选柱和MACS分选器。

MACS微珠是与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒。

MACS分选柱置于一个永久性磁场—MACS分选器中，可以将磁力增强1000倍，足以滞留仅标记极少量微珠的目的细胞。

用缓冲液冲洗分选柱，所有未标记的细胞被冲洗掉。

分选柱离开磁场，即可获得被标记的细胞组分。

所有的操作在2.5－30分钟内即可完成，得到的细胞可立即用于后继实验。

德国美天旎公司是一个以细胞分选技术为主、拥有多样化产品的生物技术公司。

开发研制并销售世界上最先进的细胞分选、细胞生物学、相关分子生物学产品和技术，尤其在干细胞分选、DC细胞分选与分析、细胞因子分泌细胞分选与分析、免疫治疗、再生医学方面占有极大的优势，CD133、BDCA-2（CD303）、BDCA-4（CD304）单抗为其专利产品。

MACS技术优点1、稳定、高质量的分选使用MACS技术，可获得高纯度（90-99%）、高回收率的分选细胞群。

2、对细胞无损伤50nm微珠和MACS分选柱均无毒性，对细胞无损伤，可以纯化有活力和功能活性的细胞而不影响其活性。

3、操作简便、快速MACS技术操作简单，消毒方便。

磁珠孵育时间很短，仅需15分钟。

手动分选可在30分钟内完成，autoMACS分选可在2.5-10分钟之内完成。

4、从实验室到临床MACS技术可以实现从105到1011个细胞分选。

MACS磁珠分选

MACS磁珠分选免疫磁珠法分离细胞原理免疫磁珠法分离细胞是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中，通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中，无该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性，不在磁场中停留，从而使细胞得以分离。

一、磁性细胞标记方式应用MACS技术进行磁性细胞分选最重要的一点是高质量的标记。

要尽可能地增强阳性细胞的标记，并减弱背景染色。

有两种基本的磁性标记方式：直接标记和间接标记。

1、直接磁性细胞标记（Direct magnetic cell labeling）（磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞）直接标记是最快速、最特异的磁性标记方法。

目前有多种分选人、小鼠、大鼠以及非人类灵长类细胞的MACS直标微珠可供选用。

2、间接磁性细胞标记（Indirect magnetic cell labeling）（磁珠结合不需要的细胞，游离于磁场的细胞为所需细胞）间接磁性细胞标记需要联合使用单克隆或者多克隆抗体和MACS间标微珠。

未结合抗体、生物素化抗体或者荧光素标记抗体均可作为一抗标记细胞，再使用抗免疫球蛋白微珠、抗生物素或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠作为二抗磁性标记细胞。

几乎针对任何种系任何细胞的任何一种单抗或多抗，均可用于间接标记。

间接标记主要在如下情况时选用：当没有直标磁珠时；需要用几种抗体的混合物同时分选或去除多种类型的细胞；间接标记有放大作用，因此可在磁性分选抗原表达弱的目的细胞时使用；使用自备抗体或者配体的磁珠分选中。

（一般而言，阴性分离法的磁珠用量比阳性分离法的大，阳性分离法用行更多。

）二、MACS分选策略有两种基本的分选策略阳性分选和去除分选。

复合分选策略是将两种基本分选策略相结合或者联合使用多选微珠，从而实现细胞亚群的分选。

1、阳性分选策略（Positive selection strategy）阳性分选中，目的细胞被磁性标记后，作为阳性标记组分直接分选出来。

磁珠分选与流式分选该如何选择？

磁珠分选与流式分选该如何选择？目前常见的分选方法有两种，一种是流式分选，一种是磁珠分选，两种方案各有优势，下面我们分别来了解一下。

1、什么是MACS 磁性分选？答：首先使用磁珠偶联的抗体去标记细胞，然后把标记好的细胞过分选柱（分选柱周围会有磁铁），带磁珠的细胞就留在柱子上，不带磁珠的细胞就流走了，从而实现分选，需要搭配分选器。

2、什么是FCS流式分选？答：流式分选一般都是电荷式分选，即对感兴趣的目标细胞所在的液滴充上电荷，液滴经过电极板，通过电场作用发生偏转，从而实现分选，需要搭配流式分选仪。

3、MACS磁性分选的优势？（1）对细胞的刺激。

磁珠分选最大的优势就是对细胞的刺激要小一点。

因为流式分选细胞首先要经过几十微米的喷嘴，然后要被充电，还要经过几千伏的电场，最后以几十米每秒的速度落到收集管里面，有些原代细胞就受不了，分选免疫细胞也要考虑细胞活化的影响；而磁珠分选相对来说就对细胞没什么刺激。

（2）设备要求。

磁珠分选小的实验室就能做，买一些专用的磁铁和柱子就可以了，而流式分选就需要分选型的流式细胞仪，都是几百万以上的。

对操作员的要求来说，流式分选也要高一点，需要专门培训，需要注意的细节也要多很多。

如果你周围有什么流式平台的话，磁珠分选和流式分选的成本应该是差不多的，流式分选一次大约1-2千（各地方不同），磁珠分选的柱子磁珠差不多也要烧这么多钱。

（3）试剂不同。

这个最好理解，流式分选用的是荧光素偶联的抗体，磁珠分选用的是磁珠结合的抗体。

4、FACS流式分选的优势？（4）多参数分选。

流式细胞术很大的优势就是多参数，比如我可以分选CD4+CD25+CD127low的Treg，三色的一次就能分选。

磁珠分选就必须先分CD4，再分CD25，更多参数的就没法进行。

（5）低表达群细胞分选。

比如有些干细胞它的表达比例只有百分之零点几，比例太少磁珠分选无法操作，流式就可以把这些细胞富集起来。

（6）胞内荧光分选。

流式分选在分子生物学中很大一部分应用就是分选GFP、YFP等阳性细胞，还有可以用Hoechst染精子的单倍体进行分选，这些针对胞内成分的分选也是磁珠分选无法实现的。

MACS技术介绍

高功率，水冷
需要调整 488nm、 633nm、 407nm 模拟否 7
数据处理模式脱机补偿最多检测FL
分选速度
300/sec
no
70000/sec
10000/sec
MACS分选与 FACS分选比较 MACS优势1
• 快速》FACS分选时间: 》MACS® 分选时间: （FACS Aria） (autoMACS™ 分选仪) 每秒钟获取70 000 细胞平均每秒钟处理107 细胞 108 cells => 2 3 min 108 cells => 5 min 109 cells => 4 h 109 cells => 5 min （没有包括操作人员调节（无需调节机器）机器时间） • 操作简单、无需专人操作，可随时使用 • 分选后细胞活性好 • 无菌分选：仪器小巧，可以进操净台，耐受紫外线照射，消毒方便，耗材为无菌性包装
• 在没有直接标记微珠可选时
• 使用自备抗体或配体的磁性分选中
• 分选或去除用多个抗体混合物标记的多种细胞
• 分选稀有细胞和抗原弱表达的细胞
• 分选标记蛋白质
MACS分选柱
填充有磁性铁珠，有亲水包被，对细胞柔和。
在分选器中产生高梯度磁场，滞留带有微珠磁性标记的细胞
MACS分选柱
• 能进行完全的清洗 • 单独无菌包装，便于无菌条件使用 • 可用于分选多种细胞及亚细胞物质、细菌、病毒、mRNA 和蛋白质
美天旎中国
• 2001年设立中国代表处，目前美天旎中国总部位于上海，在北京、广州设有办事处。 • 美天旎中国目前有近15名员工，分属销售与产品推广部，市场与技术服务部，客服与物流部。 • 美天旎中国合作伙伴总进口商:中仪英斯泰克进出口公司代理商：上海强智生物技术有限公司上海优宁维生物科技有限公司北京利文商贸有限公司

磁珠分选产品

美天旎公司MACS(磁珠分选)相关产品一、MACS微珠（MicroBeads）MACS微珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒，用于目的细胞或者去除细胞的磁性标记。

微珠直径约有50nm，比细胞小200多倍，体积为细胞的百万分之一，光学显微镜下不可见。

微珠由多聚糖和氧化铁组成，无毒性，对细胞无损伤，可以生物降解。

MACS微珠与流式细胞仪兼容，不会影响细胞的光散射特性；磁性标记只占用20－30％的结合位点，不影响细胞的荧光抗体标记。

此外，MACS微珠可以最大限度地避免细胞活化；无需解离磁珠，可以直接进行后续实验：如流式细胞仪分析或分选、细胞培养、分子生物学研究、回输给人或者动物。

MACS微珠主要有三种：直标微珠、间标微珠、多选微珠。

其中间标微珠有抗免疫球蛋白微珠、抗生物素微珠或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠。

多选微珠是专门为分选细胞亚群而研制的一种微珠。

这种微珠通过特殊的方式与抗体偶联，在第一次阳性分选完成后，与细胞结合的多选微珠可以被解离试剂剪切下来，阳性分选的细胞可以进行再次阳性分选或者去除分选。

MACS技术分选的CD8阳性T细胞（箭头所示为磁性结合在细胞表面的微珠）二、MACS分选柱（Separation Column）MACS分选柱是一类填充有不同规格铁珠的塑料容器，铁珠表面有亲水包被，因此不会损伤细胞。

在磁场外MACS分选柱不带有磁性，但是当置于一个永久性磁场—MACS分选器中时，分选柱内的铁珠可以使分选器的磁场增强1000倍，足以滞留仅标记有极少量微珠的目的细胞；磁性标记细胞从分选柱中通过时可以受到均匀的磁力作用，从而提高分选纯度和回收率。

手动操作在30分钟内可完成，自动分选仅需2.5-10分钟，得到的细胞可立即用于后续实验。

此外，大多数MACS分选柱都是无菌包装，一次性使用，可以满足细胞培养所需的无菌条件。

三、MACS分选器（MACS Separators）MACS分选器由永久性磁铁和支架构成。

CliniMACS介绍

美天旎细胞治疗平台CliniMACS系统简介第一部分、德国美天旎生物技术有限公司及MACS细胞分离技术介绍第二部分、CliniMACS系统在临床细胞治疗中的应用一、CliniMACS细胞分选仪及其配件介绍二、CliniMACS CD34系统的安全性德国美天旎生物技术有限公司上海市仙霞路319号远东国际广场A栋2301室200051电话：（86 21）62351005传真：（86 21）62350953服务热线：800 820 2606北京市东城区朝阳门内大街银河SOHO D座50723室100010电话：（86 10）64107101传真：（86 10）64100990第一部分德国美天旎生物技术有限公司及MACS细胞分离技术介绍德国美天旎生物技术有限公司（Miltenyi Biotec GmbH）是一个以细胞分选技术为主、拥有多样化产品的生物技术公司。

开发研制并销售世界上最先进的细胞分选、细胞生物学、相关分子生物学产品和技术，尤其在干细胞分选、DC细胞分选与分析、细胞因子分泌细胞分选与分析、免疫治疗、再生医学方面占有极大的优势，CD133、BDCA-2（CD303）、BDCA-4（CD304）单抗为我公司专利产品。

我公司总部位于德国科隆，在科隆和德国北部罗斯托克均有cGMP生产机构。

我们的产品有免疫磁珠、特异性细胞及蛋白质或者DNA/RNA分选用的MACS分选设备、单克隆抗体、无菌溶液、基础和特殊培养基、血液/血浆治疗用的生物学吸附剂、LIFE18血浆分离机、流式细胞仪及相关耗材。

MACS技术已成为细胞分选的标准方法，从实验室到临床，从小规模到大规模，从常见细胞到稀有细胞和复杂的细胞亚群，从人类和小鼠细胞到其它种系的细胞，MACS技术提供了可在每个实验室进行高品质细胞分选的方法。

MACS技术原理MACS技术为德国美天旎生物技术有限公司的专利产品，是一种集合了免疫学、细胞生物学、磁力学等知识于一体的高度特异性细胞分选技术，其高度特异性来自抗体对抗原的特异性识别。

磁珠分选细胞

磁珠分选细胞磁珠分选细胞是分离和分选细胞的一种新颖技术，它可以根据细胞表面的特定分子进行分离和分选，从而提高细胞的纯度和活性。

近年来，随着生物医学领域的不断发展和进步，磁珠分选细胞逐渐成为细胞学研究和临床治疗的重要手段之一。

一、磁珠分选细胞的原理磁珠分选细胞的原理是利用特定的抗体或配体将磁珠表面的磁性纳米颗粒与细胞表面的特异性分子结合，形成一个“磁珠-细胞”结合体；然后利用外部磁场的作用，将这些结合体郑重地抽出，从而实现细胞的选择性分离和纯化。

其中，特异性分子既可以是细胞表面的蛋白质，也可以是糖类，核酸等，这些特异性分子对于不同细胞类型具有独特的表达模式。

二、磁珠分选细胞的优点磁珠分选细胞具有许多优点。

首先，该技术具有较高的分选纯度，可以有效地将目标细胞从混合细胞中快速、准确地分选出来。

其次，这种技术适用于各种不同细胞类型，不受细胞形态、大小和生理状态的影响。

此外，磁珠分选细胞的操作简单、实用、安全，不会对细胞造成损伤，也不需要使用化学药剂和放射线等有害因子。

三、磁珠分选细胞的应用磁珠分选细胞的应用之广泛，可以归纳为以下三个方面：（一）、科学研究领域磁珠分选细胞在科学研究领域中的应用主要有两个方面：一方面是用于细胞纯化和鉴定，例如可以从肝脏中提取Kupffer细胞或肝星形细胞；另一方面是用于分选散质DNA或RNA，可以采集单一细胞内的所有DNA或RNA，且不受细胞数量、类型的限制。

另外，磁珠分选细胞还广泛应用于肿瘤分子标靶药物研究、免疫学、干细胞研究等领域。

（二）、临床医学领域在临床医学领域中，磁珠分选细胞主要应用于体内外免疫治疗，可用于治疗各种免疫缺陷、自身免疫疾病和癌症等疾病。

例如，利用磁珠分选细胞可以从患者的体内采集自身免疫细胞，经过增殖、激活、培养等处理后，再重新注入患者体内，以达到治疗目的。

（三）、生物制药领域在生物制药领域中磁珠分选细胞同样具有广泛应用。

首先，磁珠分选技术可以用于蛋白分离和纯化，例如可将可溶性蛋白或酶挂载到磁珠上，从而实现蛋白的高通量分离和纯化。

磁珠分选细胞

磁珠分选细胞
磁珠分选细胞是一种常用的细胞分选技术，它利用磁性珠子的特殊性质，将目标细胞从混合细胞群中分离出来。

这种技术在生物医学研究、临床诊断和治疗等领域都有广泛的应用。

磁珠分选细胞的原理是利用磁性珠子与目标细胞表面的特定抗原结合，然后通过磁场的作用将这些细胞分离出来。

这种技术的优点是选择性强、操作简便、分离效率高、对细胞没有损伤等。

在生物医学研究中，磁珠分选细胞被广泛应用于细胞分析、细胞培养、细胞治疗等方面。

例如，在肿瘤研究中，磁珠分选技术可以用于分离肿瘤细胞，从而研究其生物学特性、筛选治疗药物等。

在干细胞研究中，磁珠分选技术可以用于分离和纯化干细胞，从而研究其分化能力、治疗效果等。

在临床诊断和治疗中，磁珠分选细胞也有广泛的应用。

例如，在癌症诊断中，磁珠分选技术可以用于分离肿瘤细胞，从而进行癌细胞检测和诊断。

在细胞治疗中，磁珠分选技术可以用于分离和纯化治疗细胞，从而提高治疗效果。

磁珠分选细胞是一种重要的细胞分选技术，它在生物医学研究、临床诊断和治疗等领域都有广泛的应用。

随着技术的不断发展和完善，相信磁珠分选技术将会在更多的领域得到应用，并为人类健康事业做出更大的贡献。

磁珠分选原理及应用

MD0044
MACS® 技术分选与分析功能性T细胞
T细胞分选
T细胞亚群
T细胞功能亚群
抗原特异性T细胞
Th细胞（CD4）
No NaiveT细胞(CD45RO阴选)
IFN-r
Tc细胞（CD8）
活化T细胞（CD69、CD25、CD30）
IL-2
Image 调节性T细胞(CD4+CD25+)
效应T细胞（CD27）
MD019
MACS技术设备与试剂
• MACS微珠： MACS 微珠是与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒，可用于目的细胞的磁性标记。
• 特性： 50nm大小对细胞没有毒性可生物降解
MACS技术分选的CD8+ T 细胞
微珠 MD0057
MACS微珠
直标微珠多选微珠
间标微珠
MACS技术设备与试剂
MD042
MACS® 细胞因子分泌细胞分析与分选 New
人类细胞因子分泌细胞分选与检测试剂盒
• IFN-g 分泌细胞 • IL-2分泌细胞 • IL-4分泌细胞 • IL-10分泌细胞 • TNF- 分泌细
胞
小鼠细胞因子分泌细胞分选与检测试剂盒
• IFN-g 分泌细胞 • IL-2分泌细胞 • IL-4分泌细胞 • IL-5分泌细胞 • IL-10分泌细胞
Anti-DC(OX62) 微珠
••15用单0k于克Da从隆）大抗。鼠体O外X周62血识、别淋表巴达和于非大淋部巴分组大织鼠中D分C上选的或整者合去素除αOEX26亚2+单D位C。（分子量 ••S1两该00个抗+）主原细要也胞的表的树达一突于个状表亚细皮群胞T，C亚R但群α在/：β+朗C或D格γ4/罕/δO+氏X的4细T1双细胞阳胞和性亚巨和群噬C和细D垂胞4/体上OX前不4叶表1双星达阴状。性滤亚泡群样。（

免疫磁珠方法分选细胞

免疫磁珠方法分选细胞2007-12-17内容快照：用免疫磁珠做细胞分选(MACS)是高效简捷的免疫细胞及其它细胞的分离纯化方法。

原理是已包被一抗的磁珠与细胞表面相应分子特异性结合，或者已包被二抗(羊抗小鼠或羊抗大鼠)的磁珠与预先已与细胞表面分子特异结合的一抗结合。

磁珠携带与之结合的细胞吸附于分离柱/试管上，实现阳性细胞分离或阴性细胞的分离。

本节介绍超微磁珠间接标记、用分离柱阳性分选细胞的方法。

Protocal：1.离心收集待分离细胞，用少量PBE孵育液(0.5％BSA、0.08％EDTA PH7.2 PBS，真空抽滤除菌及液体内气体)充分混悬细胞(0.5ml/1×108细胞)，加入一抗(10~20μg/ml终浓度)，4° C孵育30分钟。

2.用20倍体积PBE洗细胞一次，再加P BE(0.3ml/1×108细胞)充分混悬细胞后，加入相应二抗包被的超微磁珠，混匀后置8~15° C孵育10~15分钟。

3.将分离柱安装入磁场中，加入0.5ml PBE，在重力作用下自然流尽，以预处理分离柱。

4.将孵育完的细胞悬液加到分离柱中，自然流尽。

5.以0.5ml的PBE加到分离柱中，自然流尽，洗柱两次。

6.从磁场中取下分离柱，插在试管口，加1-2ml的PBE，用针芯推尽液体，冲出阳性结合的细胞，用培养基洗一次，待用。

注：1.如果分离细胞用作培养，全过程在超净台中完成。

2.超微磁珠及微小磁场系统适合于少量细胞分离(如106-107)，通常已适用于大多数实验研究；此外各公司尚有大磁珠及大磁场供应，可用于更大量细胞的分选；除分离柱外，也有试管及其它设备用于分选；根据我们应用的经验，分离柱由于提供了较大的接触面，在细胞分选上具有较多优点。

磁场也可以自制，用一般的磁铁即可做成简易磁场，可提供足够的磁力。

3.磁珠分离系统分离的细胞纯度可以达到80~99％，得率在60~90％左右，仅次或相当于流式细胞仪（FACS）的分选效率，与FACS 相比，MACS设备简单，耗时极短，故而应用广泛。

技术五：MACS(磁珠分选)小鼠细胞分选与分析试剂

CD90-FITC/PE/APC
细胞因子分泌细胞
Mouse IFN-r Secretion Assay Cell Enrichment and Detection Kit(PE)
Mouse IL-2 Secretion Assay Cell Enrichment and Detection Kit(PE)
CD25 MicroBead Kit
CD43(Ly-48) MicroBeads
CD45R(B220) MicroBeads
B Cell Isolation Kit
CD19-FITC/PE/APC
CD25-PE
CD45R(B220)-FITC/PE/APC
CD62L-FITC/PE/APC
DC和DC亚群
CD11c MicroBeads
CD4+ Dendritic Cell Isolation Kit
CD8+ Dendritic Cell Isolation Kit
Plasmacytoid Dendritic Cell IsolationKit
CD11c-FITC/PE/APC
Anti-mPDCA-1-pure/Biotin/FITC/PE/APC
CD8a+ T Cell Isolation Kit
CD25 MicroBead Kit
CD62L(L-selectin) MicroBeads
Anti-MHC class II MicroBeads
CD4-FITC/PE/APC
CD8a-FITC/PE/APC
CD25-PE
CD62L-FITC/PE/APC
技术五：MACS(磁珠分选)小鼠细胞分选与分析试剂

MACS磁珠分选

MACS磁珠分选阳性分选和去除分选。

复合分选策略是将两种基本分选策略相结合或者联合使用多选微珠，从而实现细胞亚群的分选。

1、阳性分选策略（Positive selection strategy）阳性分选中，目的细胞被磁性标记后，作为阳性标记组分直接分选出来。

分选后的细胞不必去除MACS微珠，可立即用于培养或者后续操作。

该方法可以将磁性标记的靶细胞富集10000倍。

阳性分选策略优点：纯度高，回收率高，操作迅速、简便。

2、去除分选策略（Depletion strategy）去除分选是把非目的细胞磁性标记后从细胞混合物中去除的方法，即未磁性标记的细胞为目的细胞。

MACS分选柱技术加上强磁性标记可以去除高达4个对数级的细胞。

去除分选策略适用范围：去除不需要的细胞；缺乏针对目的细胞的特异性抗体（如肿瘤细胞）；不需要抗体和目的细胞结合，即细胞不被激惹（如T细胞、B细胞、NK细胞功能分析）；复合分选的一部分。

3、复合分选策略联合使用两种以上分选策略，主要用于细胞亚群的分选或者得到高纯度非常稀有的细胞。

（1）去除后再阳性分选（Depletion followed by positive selection）细胞亚群的分选，可以先磁性标记非目的细胞，去除分选后对阴性组分再行磁性标记和阳性分选。

适用范围：在细胞悬液中，非目的细胞也表达用来阳性选择目的细胞的抗原，就需要先去除这群非目的细胞；如果要分选非常稀有细胞，先从细胞悬液中去除非目的细胞，在富集细胞的基础上，进行阳性分选，可获得高纯度目的细胞。

（2）多重分选策略（MultiSort Strategy）MACS多重分选是一种根据多种表面标志磁性分选细胞的技术。

多重分选中，首先用MACS多选微珠标记目的细胞，进行第一参数阳性分选。

然后细胞与多选解离试剂共同孵育，后者可以将微珠从抗体上酶性解离下来。

接着使用针对另一细胞表面标志的抗体－微珠复合物磁性标记阳性分选细胞。

二次标记的细胞可以再次进行阳性分选或者去除分选。

(完整word版)MACS磁珠分选

MACS磁珠分选免疫磁珠法分离细胞原理免疫磁珠法分离细胞是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中，通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中，无该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性，不在磁场中停留，从而使细胞得以分离。

一、磁性细胞标记方式应用MACS技术进行磁性细胞分选最重要的一点是高质量的标记。

要尽可能地增强阳性细胞的标记，并减弱背景染色。

有两种基本的磁性标记方式：直接标记和间接标记。

1、直接磁性细胞标记（Direct magnetic cell labeling）（磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞）直接标记是最快速、最特异的磁性标记方法。

目前有多种分选人、小鼠、大鼠以及非人类灵长类细胞的MACS直标微珠可供选用。

2、间接磁性细胞标记（Indirect magnetic cell labeling）（磁珠结合不需要的细胞，游离于磁场的细胞为所需细胞）间接磁性细胞标记需要联合使用单克隆或者多克隆抗体和MACS间标微珠。

未结合抗体、生物素化抗体或者荧光素标记抗体均可作为一抗标记细胞，再使用抗免疫球蛋白微珠、抗生物素或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠作为二抗磁性标记细胞。

几乎针对任何种系任何细胞的任何一种单抗或多抗，均可用于间接标记。

间接标记主要在如下情况时选用：当没有直标磁珠时；需要用几种抗体的混合物同时分选或去除多种类型的细胞；间接标记有放大作用，因此可在磁性分选抗原表达弱的目的细胞时使用；使用自备抗体或者配体的磁珠分选中。

（一般而言，阴性分离法的磁珠用量比阳性分离法的大，阳性分离法用行更多。

）二、MACS分选策略有两种基本的分选策略阳性分选和去除分选。

复合分选策略是将两种基本分选策略相结合或者联合使用多选微珠，从而实现细胞亚群的分选。

1、阳性分选策略（Positive selection strategy）阳性分选中，目的细胞被磁性标记后，作为阳性标记组分直接分选出来。