医院空气细菌培养常规知识讲解
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空气培养采集操作1
室内面积＞30 ㎡，设两条对角线， 东、西、南、北、 中取五点，西、南、 北距离墙均1米。 （图2）
5.采样高度:距地面0.8-1.5m 6.采样方法：采样时，将平板盖打开，暴露 5min或者10min，盖好平板。在平皿上注明 采自的科室或者科室的房间，用胶布把平 皿和平皿盖子固定好，以免在送检途中平 皿和平皿盖子分离而造成污染。
（3）采样后的培养皿，应立即置于37度条件 下的培养48h。 （4）然后计数生长的菌落数，菌落数的平均 值均四舍五入进位到小数点后1位。
（5）放置培养皿的示意图如下： 盖面朝下斜扣到底盘A上面
盖面
底盘
6.洁净室空气细菌菌落总数标准
谢谢大家！
4.三十万级：面积≥30㎡布放4点，面积≤30 ㎡布放2点。
5.要求
（1）送风口集中布置时，应对手术区和周边 区分别检测，如送风口分散布置时，全室 统一监测，测点可均布，不应布置在送风 门正下方。 （2）采样点可布置在地面上或不高于地面 0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角 的平皿应高手术区边缘0.12m，培养皿放置 30min。
区域分类说明： Ⅰ类区域：层流洁净手术室，层流洁净病房。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早 产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌 区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射 室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊 室、化验室、各类普通病房和房间。
二、洁净室空气细菌培养监测布点 与标准
1.局部百级，周围千级： 共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8 点。采样布置点示意图如下：
；
2.局部千级，周围万级： 共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6 点，采样布置点示意图如下：
3.局部万级，周围十万级： 共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区 域4点，采样布置点示意图如下：
医院常规空气细菌培养PPT课件
• （10）收取平皿；
• （11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
医院常规空气细菌培养
10
• 物体表面采样
医院常规空气细菌培养
11
• 1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。
•
2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。
7
• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分
别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东
南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、
试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放
相应高度的凳子或治疗车、桌，采样高度与地面垂
直高度80一150cm;
医院常规空气细菌培养
9
• (6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
• (7）暴露5分钟；
• (8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
• (9）看表、5分钟；
4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
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• 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一 点，两端各距墙1米处各取一点（图1)
医院常规空气细菌培养
拭子放人装l0ml采样液的试管中； • （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）
• （11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
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10
• 物体表面采样
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11
• 1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。
•
2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。
7
• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分
别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东
南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、
试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放
相应高度的凳子或治疗车、桌，采样高度与地面垂
直高度80一150cm;
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• (6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
• (7）暴露5分钟；
• (8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
• (9）看表、5分钟；
4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
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• 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一 点，两端各距墙1米处各取一点（图1)
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拭子放人装l0ml采样液的试管中； • （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）
医院常规空气细菌培养课件
相应高度的凳子或治疗车、桌，采样高度与地面垂
直高度80一150cm;
2/18/2021
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• (6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
• (7）暴露5分钟；
• (8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
• (9）看表、5分钟；
• （10）收取平皿；
的方法采样。
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• 4、细菌菌落总数检查，
•
物体表面细菌菌落总数（cfu / c㎡）=
平皿上菌落的平均数x采样液稀释倍数
•
采样面积（c㎡)
•
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• 5、操作步骤与质量标准 • 面≥100cm²，取100cm²； • (5)将5 cm² x 5 cm²的灭菌规格板，放在被检
空气培养
1，采样及检查原则，采样后必须尽快对样品进行相应指 标的检测；送检时间不得超过6h,样品保存于0一4℃条件 时。送样时间不得超过24h。
2、采样时间，选择消毒处理后与进行医疗活动之前期 间采样。
3、采样高度，与地面垂直高度80一150cm.
4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
• （11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
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• 物体表面采样
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手术室
编辑版ppt
1
空气培养方法及标准
程序要求：在做空气培养前1小时，关闭室 内门窗，打开层流，减少室内人员走动，使 空气静止。从检验科取培养皿，途中应用包 布包裹，做培养者戴好口罩帽子，将培养皿 放于需做培养的房间内，打开5分钟。在采 样时禁止有人走动，采样结束后，盖好玻璃 培养皿，填写培养单，贴好标记，用包布包 裹后送细菌室培养。培养结果报告，由专人 保存，除霉雨季节每月做两次空气培养，其 余时间每月做一次
布点方法：如图
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2
①面积≤30平米，设一条对角线取三点， 即中间一点，两端各距墙1米处各取一点 (手术室层流手术室面积27平米）
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3
②室内面积>30平米，设两条对角线，东，
西，南，北，中取五点，其中东，西， 南北距墙均1米（飞秒手术室面积为32平 米）
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4
采样方法：用9cm直径普通培养皿放在 采样点暴露5 分钟后送检培养
编辑版ppt
10
医护人员手采样 采样时间：在接触病人、从事医疗活 动前进行采样。 结果计算：手细菌菌落总数=平皿上菌 落的平均数×采样液稀释倍数
编辑版ppt
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采样方法
剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管 盖严试管 嘱被检人五指并拢 将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指 曲面从指根到指端来回涂擦各两次，并随之转动采 样棉试子,五指分开,涂擦指缝、指尖
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6
看表、5分钟；
取平皿
注意事项:放平皿时先放最里边（内边 ），收取时先收最外边点上的平皿
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手术室
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1
空气培养方法及标准
程序要求：在做空气培养前1小时，关闭室 内门窗，打开层流，减少室内人员走动，使 空气静止。从检验科取培养皿，途中应用包 布包裹，做培养者戴好口罩帽子，将培养皿 放于需做培养的房间内，打开5分钟。在采 样时禁止有人走动，采样结束后，盖好玻璃 培养皿，填写培养单，贴好标记，用包布包 裹后送细菌室培养。培养结果报告，由专人 保存，除霉雨季节每月做两次空气培养，其 余时间每月做一次
布点方法：如图
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2
①面积≤30平米，设一条对角线取三点， 即中间一点，两端各距墙1米处各取一点 (手术室层流手术室面积27平米）
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3
②室内面积>30平米，设两条对角线，东，
西，南，北，中取五点，其中东，西， 南北距墙均1米（飞秒手术室面积为32平 米）
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4
采样方法：用9cm直径普通培养皿放在 采样点暴露5 分钟后送检培养
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10
医护人员手采样 采样时间：在接触病人、从事医疗活 动前进行采样。 结果计算：手细菌菌落总数=平皿上菌 落的平均数×采样液稀释倍数
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采样方法
剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管 盖严试管 嘱被检人五指并拢 将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指 曲面从指根到指端来回涂擦各两次，并随之转动采 样棉试子,五指分开,涂擦指缝、指尖
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6
看表、5分钟；
取平皿
注意事项:放平皿时先放最里边（内边 ），收取时先收最外边点上的平皿
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空气细菌培养操作规程
病房空气细菌培养操作规程1.定义：空气细菌培养的采样方法是一种检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法。
2.基本原理：是空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降，降落在室内各采样点处放好的营养琼脂平板上。
最后，将平板置于37℃恒温箱培养48h计算菌落数。
3.采样时间：在消毒处理后，进行医疗操作前采样，静止10min采样。
4.布点方法：室内面积≤30m2，对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处；室内面积＞30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m 处。
5.采样高度：距地面0.8～1.5m。
6.采样方法：采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。
在平皿上注明采自的科室或科室的房间，用胶布把平皿和平皿盖子固定好以免在送检途中平皿和平皿盖子分离而造成污染。
7.标本保存：采样后必须尽快送检，并保存于2~8℃，送检时间不超过12小时。
8.注意事项：1)培养皿盖子要反扣于培养皿边上，禁止内面向上的放于桌面。
2)培养期间禁止人员走动。
9.消毒合格标准：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。
10.说明：Ⅰ类环境包括层流洁净手术室和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。
Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房、采用循环风紫外线空气消毒器或静电吸附式空气消毒器，这类均为有人房间，必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。
Ⅲ类环境包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房室和房间，采用紫外线消毒，化学消毒剂熏蒸或喷雾消毒。
参考文献：中华人民共和国国家标准GB 15982-2010血液层流病房2010.4制定1M-血液层流-001。
(精编课件)医院常规空气细菌培养
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7、操作步骤与质量标
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1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； (2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9c、北、中；或东 南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、 试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
(6)点燃酒精灯； (7）取一支灭菌棉拭子，取标记“物体表面” 的试管，打开试管塞； (8)火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液； (9）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （10）用棉拭子在规格板空心处
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（11)横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子； （12）连续采样4个规格板面积； （13）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； （14）用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉 拭子放人装l0ml采样液的试管中； （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等） 采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样； （16）纪录采样面积、时间、物体名称、采样人。
医院感染管理操作规范 环境卫生学标本采集操作规范
医院感染管理操作规范
急诊 班丽萍 2014-8-15
Excellent courseware
空气培养
1，采样及检查原则，采样后必须尽快对样品进行相应指 标的检测；送检时间不得超过6h,样品保存于0一4℃条件 时。送样时间不得超过24h。
2、采样时间，选择消毒处理后与进行医疗活动之前期 间采样。
3、采样高度，与地面垂直高度80一150cm. 4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
7、操作步骤与质量标
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1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； (2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9c、北、中；或东 南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、 试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
(6)点燃酒精灯； (7）取一支灭菌棉拭子，取标记“物体表面” 的试管，打开试管塞； (8)火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液； (9）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （10）用棉拭子在规格板空心处
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（11)横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子； （12）连续采样4个规格板面积； （13）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； （14）用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉 拭子放人装l0ml采样液的试管中； （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等） 采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样； （16）纪录采样面积、时间、物体名称、采样人。
医院感染管理操作规范 环境卫生学标本采集操作规范
医院感染管理操作规范
急诊 班丽萍 2014-8-15
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空气培养
1，采样及检查原则，采样后必须尽快对样品进行相应指 标的检测；送检时间不得超过6h,样品保存于0一4℃条件 时。送样时间不得超过24h。
2、采样时间，选择消毒处理后与进行医疗活动之前期 间采样。
3、采样高度，与地面垂直高度80一150cm. 4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
空气细菌培养操作规程
病房空气细菌培养操作规程1.定义：空气细菌培养的采样方法是一种检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法。
2.基本原理：是空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降，降落在室内各采样点处放好的营养琼脂平板上。
最后，将平板置于37℃恒温箱培养48h计算菌落数。
3.采样时间：在消毒处理后，进行医疗操作前采样，静止10min采样。
4.布点方法：室内面积≤30m2，对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处；室内面积＞30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m 处。
5.采样高度：距地面0.8～1.5m。
6.采样方法：采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。
在平皿上注明采自的科室或科室的房间，用胶布把平皿和平皿盖子固定好以免在送检途中平皿和平皿盖子分离而造成污染。
7.标本保存：采样后必须尽快送检，并保存于2~8℃，送检时间不超过12小时。
8.注意事项：1)培养皿盖子要反扣于培养皿边上，禁止内面向上的放于桌面。
2)培养期间禁止人员走动。
9.消毒合格标准：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。
10.说明：Ⅰ类环境包括层流洁净手术室和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。
Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房、采用循环风紫外线空气消毒器或静电吸附式空气消毒器，这类均为有人房间，必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。
Ⅲ类环境包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房室和房间，采用紫外线消毒，化学消毒剂熏蒸或喷雾消毒。
参考文献：中华人民共和国国家标准GB 15982-2010血液层流病房2010.4制定1M-血液层流-001。
医院空气细菌培养常规PPT课件
4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
医院空气细菌培养常规
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• 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一 点，两端各距墙1米处各取一点（图1)
医院空气细菌培养常规
的试管，打开试管塞； • (8)火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液； • (9）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； • （10）用棉拭子在规格板空心处
医院空气细菌培养常规
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• （11)横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子； • （12）连续采样4个规格板面积； • （13）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； • （14）用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉
•
(4）选择消毒处理后与进行医疗活动之前的期
间采集空气样本；
医院空气细菌培养常规
8
•
(5）室内面积＜30m2设一条对角线上取3点，
即中心一点，两端各距离墙1 m。取出3个培养皿，
将培养皿翻转放在采样点上；室内面积＞30m2设东、
西、南、北、中；或东南、西南、东北、西北、中
5点，其中东南、西南、东北、西北点均距墙1 m，
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• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分
别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东
南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、
试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放
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• 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一 点，两端各距墙1米处各取一点（图1)
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的试管，打开试管塞； • (8)火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液； • (9）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； • （10）用棉拭子在规格板空心处
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• （11)横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子； • （12）连续采样4个规格板面积； • （13）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； • （14）用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉
•
(4）选择消毒处理后与进行医疗活动之前的期
间采集空气样本；
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8
•
(5）室内面积＜30m2设一条对角线上取3点，
即中心一点，两端各距离墙1 m。取出3个培养皿，
将培养皿翻转放在采样点上；室内面积＞30m2设东、
西、南、北、中；或东南、西南、东北、西北、中
5点，其中东南、西南、东北、西北点均距墙1 m，
7
• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分
别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东
南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、
试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放
医院常规空气细菌培养
•
(11)用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭
子投人装l0ml采样液的试管中；
•
(12）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管；
•
（13)将酒精灯盖严，整理用物；
•
(14）纪录采样时间、对象、采样人；
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• 2．室内面积>30m2，设两条对角线，东， 西，南，北，中取五点，其中东，西，南 北距墙均1米（图2）
•
实用文档
五、结果分析
I类区域：<10 cfu/m3 II类区域：<200 cfu/m3 III类区域：<500 cfu/m3
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六、附录
• Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病 房（参照洁净室空气培养方法与标准）。
面物体表面； • (6)点燃酒精灯； • (7）取一支灭菌棉拭子，取标记“物体表面”
的试管，打开试管塞； • (8)火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液； • (9）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； • （10）用棉拭子在规格板空心处
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• （11)横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子； • （12）连续采样4个规格板面积； • （13）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； • （14）用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分
别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东
南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、
试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
•
(4）选择消毒处理后与进行医疗活动之前的期
间采集空气样本；
医院常规空气细菌培养ppt
流洁净病 房（参照洁净室空气培养方法与标准）。
Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、 早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无 菌区、烧伤病房、重症监护病房。
Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注 射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急 诊室、化验室、各类普通病房和房间。
4、细菌菌落总数检查，
物体表面细菌菌落总数（cfu /
c㎡）=平皿上菌落的平均数x采样液稀释倍
数
采样面积（c㎡)
5、操作步骤与质量标准
面≥100cm²，取100cm²；
(5)将5 cm² x 5 cm²的灭菌规格板，放 在被检平面物体表面；
(6)点燃酒精灯；
(7）取一支灭菌棉拭子，取标记“物体 表面”的试管，打开试管塞；
（15)对于曲线物体、小型物体等则（门 把手等）采用棉拭子直接涂抹物体的方法 采样；
6、采集标本要无菌观念强、操作熟练、 标记清楚明确。
医护人员手采样
1、采样时间，在接触病人、从事医疗活 动前进行采样。
2、采样面积及方法，被检人五指并拢， 将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支 在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两 次（一只手涂擦面积30cm² )，并随之转动 采样棉试子，剪去手接触部位，将棉试子 放人装有l0ml采样液的试管内送检。采样 面积按平方厘米（cm ²）计算。
(3)剪指甲、洗手；
(4）选择消毒处理后与进行医疗活动
(5）室内面积＜30m2设一条对角线上 取3点，即中心一点，两端各距离墙1 m。 取出3个培养皿，将培养皿翻转放在采样点 上；室内面积＞30m2设东、西、南、北、 中；或东南、西南、东北、西北、中5点， 其中东南、西南、东北、西北点均距墙1 m， 取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。 摆放相应高度的凳子或治疗车、桌，采样 高度与地面垂直高度80一150cm;
Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、 早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无 菌区、烧伤病房、重症监护病房。
Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注 射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急 诊室、化验室、各类普通病房和房间。
4、细菌菌落总数检查，
物体表面细菌菌落总数（cfu /
c㎡）=平皿上菌落的平均数x采样液稀释倍
数
采样面积（c㎡)
5、操作步骤与质量标准
面≥100cm²，取100cm²；
(5)将5 cm² x 5 cm²的灭菌规格板，放 在被检平面物体表面；
(6)点燃酒精灯；
(7）取一支灭菌棉拭子，取标记“物体 表面”的试管，打开试管塞；
（15)对于曲线物体、小型物体等则（门 把手等）采用棉拭子直接涂抹物体的方法 采样；
6、采集标本要无菌观念强、操作熟练、 标记清楚明确。
医护人员手采样
1、采样时间，在接触病人、从事医疗活 动前进行采样。
2、采样面积及方法，被检人五指并拢， 将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支 在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两 次（一只手涂擦面积30cm² )，并随之转动 采样棉试子，剪去手接触部位，将棉试子 放人装有l0ml采样液的试管内送检。采样 面积按平方厘米（cm ²）计算。
(3)剪指甲、洗手；
(4）选择消毒处理后与进行医疗活动
(5）室内面积＜30m2设一条对角线上 取3点，即中心一点，两端各距离墙1 m。 取出3个培养皿，将培养皿翻转放在采样点 上；室内面积＞30m2设东、西、南、北、 中；或东南、西南、东北、西北、中5点， 其中东南、西南、东北、西北点均距墙1 m， 取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。 摆放相应高度的凳子或治疗车、桌，采样 高度与地面垂直高度80一150cm;
空气培养的操作流程及注意事项
空气培养的操作流程及注意事项
内容:
空气培养是利用空气中的氧气作为微生物的氧化剂,在一定温度条件下培养微生物的方法。
空气培养的操作流程及注意事项如下:
1. 准备培养基:选择适合微生物生长的培养基,常用的有肉汤培养基、琼脂培养基等。
准备好后灭菌,灭菌条件为121°灭菌20分钟。
2. 接种:使用无菌操作技术,将微生物接种到固化的培养基表面。
接种量不要太多,以免菌落互相汇合。
3. 培养:将接种的培养皿或试管置于培养箱中,保持在微生物适宜的温度下培养。
如37°培养细菌,25°培养真菌。
4. 观察结果:在培养期间观察菌落的大小、颜色、形态等特征。
根据菌落形态初步判断微生物的类型。
5. 计数和分离纯化:培养结束后,可以进行菌落计数,也可以挑取单个菌落进行分离纯化。
注意事项:
1. 培养基的选择要合适,并严格灭菌。
2. 接种时要保证接种量适中,使用无菌技术防止污染。
3. 培养条件要控制好,如温度、湿度等。
4. 观察时要仔细,分析不同微生物的区别。
5. 培养结束后要立即操作,避免菌落融合污染。
6. 分离纯化时要小心谨慎,确保获得单一菌落。
7. 培养过程中要定期观察记录,不要让培养基干燥。
医院常规空气细菌培养(自然沉降法)采样方法ppt课件
医院常规空气细菌培养 （自然沉降法）采样方法
1
一、采样时间
选择消毒处理后与进行医疗活动之前采 样
。 二、采样高度
与地面垂直高度80-150厘米。
2
三、布点方法
1.面积≤30 m2，设一条对角线取三 点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一 点。
3
2．室内面积>30m2，设两条对角线，东， 西，南，北，中取五点，其中东，西，南， 北距墙均1
4
四、采样方法
用9厘米直径普通琼脂平皿，打开盖 后面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5 分钟后，送检培养。
5
9厘米直径普通琼脂平皿
6
放置方法
7
五、结果分析
I类区域： ≦4.0cfu/(30min)·90mm II类区域： ≦4.0cfu/(15min)·90mm III类区域： ≦4.0cfu/(5min)·90mm
传染病Байду номын сангаас及病房。
10
8
六、附录
Ⅰ类区域： 层流洁净手术室、层流洁净病房（参
照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：
普通手术室、产房、婴儿室、早产儿 室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、 烧伤病房、重症监护病房。
9
Ⅲ类区域： 儿科病房、妇产科检查室、注射室、换
药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化 验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：
1
一、采样时间
选择消毒处理后与进行医疗活动之前采 样
。 二、采样高度
与地面垂直高度80-150厘米。
2
三、布点方法
1.面积≤30 m2，设一条对角线取三 点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一 点。
3
2．室内面积>30m2，设两条对角线，东， 西，南，北，中取五点，其中东，西，南， 北距墙均1
4
四、采样方法
用9厘米直径普通琼脂平皿，打开盖 后面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5 分钟后，送检培养。
5
9厘米直径普通琼脂平皿
6
放置方法
7
五、结果分析
I类区域： ≦4.0cfu/(30min)·90mm II类区域： ≦4.0cfu/(15min)·90mm III类区域： ≦4.0cfu/(5min)·90mm
传染病Байду номын сангаас及病房。
10
8
六、附录
Ⅰ类区域： 层流洁净手术室、层流洁净病房（参
照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：
普通手术室、产房、婴儿室、早产儿 室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、 烧伤病房、重症监护病房。
9
Ⅲ类区域： 儿科病房、妇产科检查室、注射室、换
药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化 验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：
空气细菌培养的操作方法
Your company slogan
2、所需设备
9cm普通琼脂平皿 37℃恒温培养箱 记号笔 手套 口罩
吉林市中心医院第二ICU
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3、采样及采样原则
采样后必须对样品进行相应 指标的检测;送检时源自不超过 6h,样品保存在0~4℃条件
时不得超过24h。
吉林市中心医院第二ICU
细菌总数 （cfu/m3=4500N/A×T） 式中A=平 板面积（cm2）
T——平板暴露时间（min） N——平均菌落数 （cfu） 这个计算公式是根据在面积100cm3的培养基表 面，5min内能落下的细菌相当于10L中含的细菌 数而推算出来的。
吉林市中心医院第二ICU
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（3）记录采样房面积、时间、地点、位置、采样 人及采样时环境条件（温度、湿度）。 （4）看表5min，收取平皿。室内面积<30㎡， 一条对角线上取三点，放平皿时先放最里边，收取 时先收最外边点上的平皿。在平皿上注明采自的科 室房间，用胶布把平皿及平皿盖子固定好，以免在 送检途中平皿及平皿盖子分离造成污染。
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4、采样时间：选择消毒处理后 与医疗活动之前期间采样。
5、采样高度：与地面垂直高度 0.8~1.5m。
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6、布点方法 室内面积<30㎡,对角线内、中、外 处设三点，内外点布位距墙壁1m处。
吉林市中心医院第二ICU
11、消毒合格标准
Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致 病菌为消毒合格； Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致 病菌为消毒合格； Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致 病菌为消毒合格。
2、所需设备
9cm普通琼脂平皿 37℃恒温培养箱 记号笔 手套 口罩
吉林市中心医院第二ICU
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3、采样及采样原则
采样后必须对样品进行相应 指标的检测;送检时源自不超过 6h,样品保存在0~4℃条件
时不得超过24h。
吉林市中心医院第二ICU
细菌总数 （cfu/m3=4500N/A×T） 式中A=平 板面积（cm2）
T——平板暴露时间（min） N——平均菌落数 （cfu） 这个计算公式是根据在面积100cm3的培养基表 面，5min内能落下的细菌相当于10L中含的细菌 数而推算出来的。
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（3）记录采样房面积、时间、地点、位置、采样 人及采样时环境条件（温度、湿度）。 （4）看表5min，收取平皿。室内面积<30㎡， 一条对角线上取三点，放平皿时先放最里边，收取 时先收最外边点上的平皿。在平皿上注明采自的科 室房间，用胶布把平皿及平皿盖子固定好，以免在 送检途中平皿及平皿盖子分离造成污染。
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4、采样时间：选择消毒处理后 与医疗活动之前期间采样。
5、采样高度：与地面垂直高度 0.8~1.5m。
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6、布点方法 室内面积<30㎡,对角线内、中、外 处设三点，内外点布位距墙壁1m处。
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11、消毒合格标准
Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致 病菌为消毒合格； Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致 病菌为消毒合格； Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致 病菌为消毒合格。
手术室空气及物品培养相关知识
二、空气培养：
布点：
Ⅰ级洁净手术室（共计13个） Ⅱ、Ⅲ级洁净手术室（共计9个）
Ⅳ级洁净手术室（5-6个） Ⅴ洁净手术间、辅助间布点图（3个）
3：皿碟打开顺序应先 内后外，手臂及头不
可越过培养皿上方。
4：行走、放置动作要轻， 尽量减少对空气流动状
态的影响，皿盖应倒放，
防污染。
2：采样人员做 好手卫生，戴帽 子口罩，穿洗手 衣裤。
标准
cfu/cm3 空气 ≤10 ≤200 ≤500
—
cfu/cm3 物品表面
≤5 ≤5 ≤10 ≤15
注意事项 8、
每月第一周做培养，专门负责人电话 通知细菌室（3256）请领培养管、皿 碟。请领后，冰箱保存，夜班取用。 空气培养皿碟数详见对照卡(多备2个)； 物品培养：干燥管2个（多备1个）， 脱洗液管19个（多备2个）。
目的： 检测手术部空 气在静态下是 否达到空气卫 生学标准。
二、空气培养：
采样时间： 术间进行消毒处理后，进行医 疗活动之前。在无人走动的情 况下，夜班确保洁净系统正常 工作30分钟以上。
二、空气培养：
方法： 清洁术间，在空态或静态条件下， 中央区移开无影灯，根据房间的不 同级别进行布点，平板暴露法，9cm 直径普通营养琼脂卡板，采样点暴 露30min后送检培养。
1：采样高度： 距地面垂直高 度80-150cm。
注意事 项
5：采样结束后， 由外向内合上皿 盖。标注在皿碟 底部。
6：采样完毕 的培养应在 6h内送检培 养
注
Ⅰ级：自净时间≥15min
意
事
项
Ⅱ级：自净时间≥25min
7
自
Ⅲ级：自净时间≥30min
净
医院空气细菌培养常规知识讲解
3、结果计算 手细菌菌落总数（cfu/cm² )=平皿上菌落的 平均数×采样液稀释倍数
30×2
4、操作步骤与质量标准
(1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖 口鼻；
(2）备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、 灭菌棉拭子、试管、试管架、笔、纪录单、湿度、 温度计；
(3)剪指甲、洗手；
(4）在接触病人、从事医疗活动前进行采样； (5）取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管； (6）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞，
1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。 2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。 3、采样方法，用5 x5cm2的标准灭菌规格板；
放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的 棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随 之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，剪去手 接触部分，将棉拭子放人装l0ml采样液的试管中送 检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体 的方法采样。
浸取灭菌采样液； (7）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （8)嘱被检人五指并拢； (9)将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支
在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两 次（一只手涂擦面积30 cm² )，并随之转动采样棉 试子；
(10）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； (11)用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭 子投人装l0ml采样液的试管中； (12）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （13)将酒精灯盖严，整理用物； (14）纪录采样时间、对象、采样人； (15)立即将标本送验、培养。
医院感染管理操作规范
环境卫生学标本采集操作规范
医院感染管理操作规范
院感管理
2014-12-23
30×2
4、操作步骤与质量标准
(1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖 口鼻；
(2）备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、 灭菌棉拭子、试管、试管架、笔、纪录单、湿度、 温度计；
(3)剪指甲、洗手；
(4）在接触病人、从事医疗活动前进行采样； (5）取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管； (6）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞，
1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。 2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。 3、采样方法，用5 x5cm2的标准灭菌规格板；
放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的 棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随 之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，剪去手 接触部分，将棉拭子放人装l0ml采样液的试管中送 检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体 的方法采样。
浸取灭菌采样液； (7）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （8)嘱被检人五指并拢； (9)将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支
在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两 次（一只手涂擦面积30 cm² )，并随之转动采样棉 试子；
(10）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； (11)用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭 子投人装l0ml采样液的试管中； (12）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （13)将酒精灯盖严，整理用物； (14）纪录采样时间、对象、采样人； (15)立即将标本送验、培养。
医院感染管理操作规范
环境卫生学标本采集操作规范
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六、附录
Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病 房（参照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、 早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无 菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注 射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急 诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。
1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。 2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。 3、采样方法，用5 x5cm2的标准灭菌规格板；
放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的 棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随 之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，剪去手 接触部分，将棉拭子放人装l0ml采样液的试管中送 检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体 的方法采样。
Байду номын сангаас 6、采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记 清楚明确。
医护人员手采样
1、采样时间，在接触病人、从事医疗活动前进行 采样。
2、采样面积及方法，被检人五指并拢，将浸 有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面 从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积 30cm² )，并随之转动采样棉试子，剪去手接触部 位，将棉试子放人装有l0ml采样液的试管内送检。 采样面积按平方厘米（cm ²）计算。
(6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
(7）暴露5分钟；
(8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
(9）看表、5分钟；
（10）收取平皿；
（11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
物体表面采样
浸取灭菌采样液； (7）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （8)嘱被检人五指并拢； (9)将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支
在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两 次（一只手涂擦面积30 cm² )，并随之转动采样棉 试子；
(10）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； (11)用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭 子投人装l0ml采样液的试管中； (12）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （13)将酒精灯盖严，整理用物； (14）纪录采样时间、对象、采样人； (15)立即将标本送验、培养。
4、细菌菌落总数检查， 物体表面细菌菌落总数（cfu / c㎡）=
平皿上菌落的平均数x采样液稀释倍数
采样面积（c㎡)
5、操作步骤与质量标准 面≥100cm²，取100cm²；
(5)将5 cm² x 5 cm²的灭菌规格板，放在被检 平面物体表面；
(6)点燃酒精灯； (7）取一支灭菌棉拭子，取标记“物体表面” 的试管，打开试管塞； (8)火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液； (9）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （10）用棉拭子在规格板空心处
1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一 点，两端各距墙1米处各取一点（图1)
2．室内面积>30m2，设两条对角线，东， 西，南，北，中取五点，其中东，西，南 北距墙均1米（图2）
五、结果分析
I类区域：<10 cfu/m3
II类区域：<200 cfu/m3
III类区域：<500 cfu/m3
5、采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚 明
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（11)横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子； （12）连续采样4个规格板面积； （13）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； （14）用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉 拭子放人装l0ml采样液的试管中； （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等） 采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样； （16）纪录采样面积、时间、物体名称、采样人。
3、结果计算 手细菌菌落总数（cfu/cm² )=平皿上菌落的 平均数×采样液稀释倍数
30×2
4、操作步骤与质量标准
(1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖 口鼻；
(2）备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、 灭菌棉拭子、试管、试管架、笔、纪录单、湿度、 温度计；
(3)剪指甲、洗手；
(4）在接触病人、从事医疗活动前进行采样； (5）取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管； (6）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞，
7、操作步骤与质量标
1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、 直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分 别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东 南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、 试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
(3)剪指甲、洗手；
(4）选择消毒处理后与进行医疗活动之前的期 间采集空气样本；
(5）室内面积＜30m2设一条对角线上取3点， 即中心一点，两端各距离墙1 m。取出3个培养皿， 将培养皿翻转放在采样点上；室内面积＞30m2设东、 西、南、北、中；或东南、西南、东北、西北、中 5点，其中东南、西南、东北、西北点均距墙1 m， 取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放 相应高度的凳子或治疗车、桌，采样高度与地面垂 直高度80一150cm;
医院感染管理操作规范
环境卫生学标本采集操作规范
医院感染管理操作规范
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2014-12-23
空气培养
1，采样及检查原则，采样后必须尽快对样品进行相应指 标的检测；送检时间不得超过6h,样品保存于0一4℃条件 时。送样时间不得超过24h。
2、采样时间，选择消毒处理后与进行医疗活动之前期 间采样。
3、采样高度，与地面垂直高度80一150cm. 4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.