培养基促生长实验操作0001
培养基促生长实验操作
培养基促生长实验操作 Prepared on 22 November 20201目的制订培养基灵敏度实验操作，是为了规范、统一培养基灵敏度检测，确保微生物检测准确、安全进行。
2 范围适用于所有配制好并灭菌的培养基。
3 编写依据4 术语无5 职责QC卫检组人员负责培养基的配制、灭菌、灵敏度实验。
6 内容使用的设备、器具生物安全柜、无菌培养皿、无菌刻度吸管或无菌注射器、无菌玻璃涂布器、酒精灯等使用的菌株EP检测用ATCC的菌株:金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus ATCC 6538大肠埃希菌Escherichia coli ATCC 8739铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027枯草芽孢杆菌 Bacilllus subtilis ATCC 6633沙门氏菌Salmonella enterica subsp ATCC 14028白色念珠菌Candida albicans ATCC 10231黑曲霉Aspergillus niger ATCC 16404培养基灵敏度检测所用的菌株传代次数不得超过5代, 并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验用菌株的生物学特性。
检测频率每批配制、灭菌后的培养基均应做灵敏度测试。
操作方法6.4.1 对照标准培养基用已经过实验证明合格的培养基或购买的有质量证书的成品平皿培养基作为对照标准培养基.6.4.2 实验培养基将琼脂类的实验培养基加热融化后，冷却至45℃左右，以无菌的方式在无菌培养皿中注入15～20ml，备用。
液体类的培养基直接使用。
6.4.3 菌悬液的制备6.4.3.1 细菌菌悬液的制备方法一：取细菌的斜面培养物1耳匙接种在酪蛋白大豆消化肉汤培养基中30～35℃培养18～24h，取上述培养物用无菌水按10倍系列稀释，分别制成10-7～10-8的菌悬液备用。
6.4.3.2 霉菌菌悬液的制备取白色念珠菌的斜面培养物1耳匙接种在沙氏琼脂斜面上于20～25℃培养24～48h，加入无菌水4ml制成原液，取上述原液按10倍系列稀释，分别制成10-6～10-7的菌悬液备用。
细胞生长曲线实验步骤
细胞生长曲线实验步骤一、准备细胞与培养基1.选择适宜于实验的细胞系，并确保细胞状态良好，无污染。
2.准备所需的培养基，按照说明书进行配制，并在使用前进行无菌过滤处理。
3.准备所需的无菌器械、吸管、离心管等。
二、接种细胞至培养板1.在无菌操作台上，用无菌吸管吸取适量的细胞悬液。
2.将细胞悬液均匀接种至培养板中，每个孔内的细胞数量应保持一致。
3.将接种好的培养板放入培养箱中，设置适宜的温度、湿度和二氧化碳浓度。
三、定时观察与计数1.在接种后的不同时间点（如每天或每24小时）观察细胞的生长情况。
2.使用倒置显微镜观察细胞的贴壁生长和形态变化，以及细胞数量的变化。
3.在特定时间点，使用血细胞计数板或自动细胞计数器对细胞进行计数。
四、记录数据1.将每次观察和计数的结果详细记录下来，包括细胞数量、形态变化等。
2.记录实验过程中的温度、湿度、二氧化碳浓度等环境参数。
五、绘制生长曲线1.根据记录的数据，以时间为横轴，细胞数量为纵轴，绘制细胞生长曲线图。
2.生长曲线应反映出细胞数量随时间的变化趋势。
六、数据分析1.分析生长曲线，计算细胞的倍增时间、生长速率等参数。
2.比较不同条件下的细胞生长情况，分析影响细胞生长的因素。
七、清洗与消毒1.实验结束后，将使用过的器械、培养板等进行清洗和消毒处理。
2.清洗可使用去离子水或清洗剂，消毒可使用75%酒精或紫外线照射等方法。
八、实验总结1.总结实验过程中的经验教训，分析可能存在的误差来源。
2.根据实验结果，提出改进实验方法的建议或对未来研究方向的展望。
请注意，以上步骤仅为一般性的细胞生长曲线实验步骤，具体实验过程可能因细胞类型、实验条件等因素而有所不同。
在实际操作中，请遵循实验室的安全规定和操作规程，确保实验结果的准确性和可靠性。
ms 培养基促进生根的方法
ms 培养基促进生根的方法以MS培养基促进生根的方法引言：生根是植物生长过程中重要的阶段，对于繁殖植物来说尤为关键。
MS培养基是一种被广泛应用于植物组织培养的基础培养基，其成分和浓度的合理调配对于生根的促进起到重要作用。
本文将介绍利用MS培养基促进生根的方法。
一、调整植物激素浓度MS培养基中含有多种植物激素，其中包括生长素和细胞分裂素。
这些激素对于植物的生根起到重要的调控作用。
为了促进生根，可以根据不同植物的需要调整激素浓度。
一般情况下，增加生长素的浓度可以促进生根的形成，而增加细胞分裂素的浓度则可以促进生根的生长。
因此，我们可以在MS培养基中适量调整这些激素的浓度，以达到促进生根的效果。
二、添加生长因子除了植物激素外，MS培养基中还可以添加一些生长因子，如维生素、矿物质等。
这些物质对于植物的生长和发育起到重要的调控作用。
在促进生根方面，适量添加维生素B1、B6和菸酸等可以增强植物的生根能力。
此外，添加一些矿质元素，如钙、镁、铁等，也可以促进生根的形成和生长。
三、调整培养基pH值pH值是影响培养基中养分吸收和植物生理代谢的重要因素。
对于促进生根来说，适宜的pH值范围是5.5-6.5。
如果pH值偏高或偏低，都会对植物的生根产生不利影响。
因此，在制备MS培养基时，应注意调整pH值，以保持适宜的生根环境。
四、光照和温度控制光照和温度是植物生长过程中必不可少的环境因素。
对于促进生根来说，适宜的光照和温度条件可以提高生根的成功率。
一般来说，光照强度为3000-5000勒克斯，温度为20-25摄氏度是较为适宜的生根条件。
此外，光周期也会对生根产生影响。
对于大部分植物来说，16小时的光照和8小时的黑暗是较为适宜的光周期。
五、培养基的配制和处理制备MS培养基时，应注意材料的选择和配比。
一般来说，MS培养基中的盐类成分是固定的，但可以根据植物的需要适当调整某些成分的浓度。
此外，培养基的pH值应调整到适宜的范围。
制备好的培养基应经过高压灭菌处理，以确保无菌状态。
培养基管理制度
微生物实验室培养基管理制度1、目的：本标准操作规程描述了微生物实验室检验过程中所需要用到的各种培养基的接收、配制、储存以及性能验证（促生长试验）的基本要求和操作过程。
1.2 本标准操作规程确保所有实验室使用的培养基符合微生物实验的要求，并确保在有效期内使用。
2. 范围本标准操作规程适用于微生物实验室外购的培养基。
3. 职责3.1 微生物实验室主管负责监督和确保实验室在接收、配制、储存和验证培养基时均按照本标准操作规程的要求进行。
3.2 微生物室检验员应熟悉本标准操作规程并严格按照要求进行操作。
4. 程序4.1 培养基接收4.1.1 微生物实验室应购买被批准的商品化脱水合成培养基用于各项微生物检验。
4.1.2 培养基接收时，试剂管理员应对照采购计划仔细核查相关信息，并由实验室主管组织检测人员按照本制度4.8条款对购买的培养基进行验证，每批培养基抽取一瓶进行验证。
如果培养基出现下列情况：包装破损、培养基泄露、超出有效期或接近最后期限6个月、经性能测试不合格、培养基性状发生改变等，实验室有权拒收此批培养基，并及时与采购部门联系向供应商反馈这些情况。
4.1.3 核对无误后，试剂管理员应当将接收日期、编号、批号、有效期等详细信息登记在《试剂保管帐》上，同时在每瓶/盒试剂上贴上“接收标签”，对接收的培养基进行实验室内部编号。
4.1.3. 1 原则上每瓶培养基需赋予实验室内部唯一编号。
编号规则如下：例如：CM101-140101-01CM101--------CM是培养基的英文缩写，101是平板计数琼脂的代号。
（由于目前实验室采购的多为陆桥的产品，故沿用陆桥对培养基的编号。
对于个别其它厂家的培养基重新编号）140101--------表示试剂接收日期001-------------流水号（从001开始）4.1.3.2 培养基瓶体上应标有如下信息，便于清楚地表明培养基的状态：实验室内部编号开瓶日期/开瓶人开瓶失效日期4.1.4 所有的培养基应有相关的COA，试剂管理员应检查和确保COA有效可用。
植物生长发育实验技巧总结
植物生长发育实验技巧总结植物生长发育实验是研究植物生物学、生态学等领域的重要实验手段之一。
正确的实验技巧能够确保实验结果的准确性和可靠性。
本文将总结植物生长发育实验的一些常用的技巧，供科研工作者和实验室人员参考。
1.实验前准备在进行植物生长发育实验之前，我们需要先进行一些必要的准备工作，以确保实验的成功进行。
首先，选择合适的植物材料，并进行必要的处理，例如种子消毒、浸泡等。
同时，确定实验所需的环境条件，如温度、光照、湿度等，并合理安排实验的时间计划。
2.选择合适的培养基培养基在植物生长发育实验中起到关键作用。
根据实验目的和所研究的植物，选择合适的培养基对实验结果具有重要影响。
常见的培养基有MS培养基、Murashige和Skoog培养基等。
选择合适的培养基可以提供植物所需的养分和生长因子，促进植物生长发育的研究。
3.控制环境条件在植物生长发育实验中，环境条件的控制尤为重要。
温度、光照和湿度等环境因素对植物的生长发育起着至关重要的作用。
控制环境条件可以通过恒温箱、光照设备和加湿机等进行调控。
在实验过程中，要密切关注和记录环境参数的变化，确保实验结果的准确性和可靠性。
4.正确的实验操作在进行植物生长发育实验时，合理的实验操作能够确保实验结果的准确性。
例如，种子的播种要均匀密集，避免过于稀疏或过于密集；培养基的添加要准确无误，避免浓度过高或过低；对植物的处理要谨慎，避免人为因素对实验结果产生干扰等。
同时，要注意卫生和消毒，避免细菌和病原体的污染。
5.数据的收集与分析在植物生长发育实验中，收集和分析实验数据是科研工作的关键环节。
在实验过程中，要准确记录观察数据，如植物生长的高度、根系的长度等。
同时，利用适当的统计方法对实验数据进行分析，以得出科学准确的结论。
要注意数据的可重复性和统计学意义，确保实验结果的可信度。
总结：植物生长发育实验是研究植物生物学、生态学等领域的重要手段。
正确的实验技巧能够确保实验结果的准确性和可靠性。
诱导生根的培养基
诱导生根的培养基
诱导生根是植物生长中的重要步骤。
这一过程可以帮助植物在有限的时间内更快地生长出许多根系，从而提高植物的产量和品质。
要想成功地诱导植物生根，就需要使用适当的培养基。
本文将介绍几种常用的诱导生根的培养基及其制备方法。
一、MS培养基
MS培养基是一种广泛应用于植物生物学领域的培养基。
它由Murashige和Skoog在1962年开发，成分非常全面，可以用来培养各种植物。
在诱导生根方面，MS培养基的成分可适度调整，使其更适合诱导不同植物的生根。
准备MS培养基的材料：
- 1L水
- MS盐
- 蔗糖
- 植物激素（如IAA或NAA）
制备方法：
1.将适量的MS盐加到1L水中，并进行搅拌；
2.加入适量的蔗糖，并搅拌至溶解；
3.根据需要，加入植物激素，并再次充分搅拌；
4.将培养基灭菌，并等待冷却后即可使用。
二、NAA培养基
NAA（萘乙酸）是一种常用的植物生长调节剂，能够诱导植物产生更多的根系。
因此，NAA培养基成为了一个非常有效的诱导生根的培养基。
NAA培养基含有的营养成分较少，只需要加入简单的有机物即可。
半固体MS培养基是一种在诱导植物生根方面非常有效的培养基。
它与普通的液体培养基不同，因为它可以形成一层坚硬的凝胶，从而提供更好的支撑力，使植物更容易生根。
半固体MS培养基可用于多种植物的生根。
ms 培养基促进生根的方法
ms 培养基促进生根的方法
在植物组织培养中，生根是一个重要的步骤。
MS培养基是一种经典的组织培养基，也是促进生根的主要培养基之一。
以下是使用MS培养基促进生根的方法：
1. 准备MS培养基：将MS培养基粉末加入蒸馏水中，搅拌均匀，然后加热至溶解。
调整pH值至5.8，并加入植物生长素（如IBA或NAA）以促进生根。
2. 准备植物材料：收集植物茎段、叶片或愈伤组织，进行消毒处理。
3. 制备生长环境：将准备好的MS培养基倒入无菌培养瓶中，然后将植物材料插入培养基中。
4. 培养条件：将培养瓶置于适宜的光照条件下（如光照强度为50-100μmol/m2s），温度保持在适宜范围内（如20-25℃）。
5. 观察和处理：观察植物材料的生长情况，将生长健壮的组织转移到新的MS培养基中，继续培养。
以上是使用MS培养基促进生根的基本方法。
不同植物材料和生长条件可能需要调整培养基配方和培养条件。
- 1 -。
培养基实验实训报告模板
一、实验目的1. 了解培养基的配制原理和重要性。
2. 掌握培养基的配制方法和步骤。
3. 学习并实践高压蒸汽灭菌操作方法。
4. 熟悉培养基的接种技术和菌落观察。
二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。
根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。
本实验以牛肉膏蛋白胨培养基的配制为例，学习培养基的配制原理和方法。
三、实验材料与仪器1. 材料：牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠、蒸馏水、pH试纸、无菌水、微生物菌种等。
2. 仪器：高压蒸汽灭菌锅、电子天平、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、接种环、培养皿、显微镜等。
四、实验步骤1. 培养基的配制- 称取牛肉膏、蛋白胨、氯化钠，加入适量的蒸馏水。
- 将牛肉膏、蛋白胨溶解后，加入琼脂，继续加热至完全溶解。
- 调整pH值至7.2-7.4，可用pH试纸检测。
- 将培养基倒入培养皿中，待凝固后备用。
2. 高压蒸汽灭菌- 将配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅中。
- 加盖，设定灭菌温度和时间（一般121℃，15-20分钟）。
- 灭菌结束后，自然冷却至室温。
3. 接种与培养- 将灭菌后的培养基倒入培养皿中，待凝固后，用接种环取少量菌种，接种于培养基表面。
- 将培养皿放入培养箱中，设定合适的温度（一般为37℃）进行培养。
4. 菌落观察- 培养一定时间后，观察菌落生长情况，记录菌落特征。
五、实验结果与分析1. 培养基的配制- 观察培养基是否凝固，是否有气泡等异常现象。
- 检测培养基的pH值，是否符合要求。
2. 高压蒸汽灭菌- 观察灭菌后的培养基是否有微生物生长。
- 检测培养基的菌落计数，判断灭菌效果。
3. 接种与培养- 观察菌落生长情况，记录菌落特征。
- 比较不同菌种在相同培养基上的生长情况。
六、实验讨论1. 培养基的配制过程中，应注意哪些事项？2. 高压蒸汽灭菌的效果如何判断？3. 不同菌种在相同培养基上的生长情况有何差异？七、实验结论1. 成功配制了牛肉膏蛋白胨培养基。
控制菌检查用培养基的促生长能力
控制菌检查用培养基的促生长能力、抑制能力及指示能力检查记录1、培养基名称、批号及数量：被检培养基批号数量标准对照培养基批号数量被检培养基批号数量标准对照培养基批号数量被检培养基批号数量标准对照培养基批号数量2、设备：电热培养箱型号：HG303-4编号：130501-07-0793、菌液制备：试液批号配制日期；0.9%氯化钠溶液：批号配制日期接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌于营养肉汤培养基中，30~35℃培养18h~24h，用0.9%的无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为10-100cfu的菌悬液。
4、接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的培养物于被检营养肉汤培养基中，30~35℃培养18h~24h，同时用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述实验。
两管试验菌生长情况一致，判定营养肉汤培养基适用性。
4.1液体培养基促生长能力检查：分别接种不大于100cfu的大肠埃希菌于被检培养基（胆盐乳糖培养基）和对照标准培养基中培养18h~24h，必要时可延长48h。
比较两瓶培养物浑浊度一致，判定培养基适用性。
4.2再分别取上述培养物0.2ml接种至5ml被检MUG和对照MUG试管中，分别于5h、24h在366nm 紫外光下观察，同时用未接种的MUG培养基作本底对照，两管比较生长状态一致，判定MUG培养基适用性。
4.3若管内培养物呈现荧光，为MUG阳性；不呈现荧光，为MUG阴性。
观察后，沿培养管加入数滴靛基质试液，试液呈玫瑰红色，为靛基质阳性，本底对照应为MUG阴性和靛基质阴性。
被检培养基和对照培养基加入靛基质试剂，被检培养基管和对照培养基管试验菌生长情况，指示剂反应一致，判定培养基指示能力检查。
5、抑制能力检查：接种100cfu金黄色葡萄球菌于被检培养基中，30~35℃培养18h~24h，澄清，无浑浊现象，延时培养至48h，仍澄清，无浑浊现象，无试液菌生长。
判定抑制能力。
检验人：时间：复核人：时间：。
培养基促生长实验操作
培养基促生长实验操作实验目的：本实验旨在通过合适的培养基制备和培养条件，促进植物的生长与发育过程。
实验材料：1.植物种子（建议选择常见的植物种子，如油菜、小麦等）；2.种子培养基（可购买或自制，如MS培养基）；3.培养皿或培养瓶；4.移液器和移液枪；5.纯净水；6.实验室常用器材（试管、量筒、移液枪等）；7.光照设备或恒温培养箱。
实验步骤：1.种子表面消毒：将收集到的植物种子放入消毒瓶中，添加适量的70%乙醇，摇动均匀，浸泡15-30秒，然后倒出乙醇，用纯净水冲洗种子表面，重复上述操作3次。
在无菌条件下，将种子转移到含0.1%次氯酸钠溶液中，浸泡10-15分钟，然后用纯净水冲洗3次，以去除表面的次氯酸盐。
最后，将种子浸泡在含0.1%地奥霉素（或其他抗生素）的纯净水中，边缘动摇，边充分混合，浸泡20-30分钟以杀灭或抑制种子表面的细菌和真菌。
最后，用纯净水冲洗3次，将种子转移到无菌条件下的培养皿或培养瓶中备用。
2.培养基制备：根据所选用的培养基配方（如MS培养基），准确称量培养基粉末，加入适量的纯净水中，搅拌至粉末完全溶解。
将培养基溶液倒入洁净的容器中（如试管、烧杯等），并使用自制培养基滤经0.22μm的滤器进行无菌过滤，以去除悬浮物和微生物。
倒出无菌培养基液体，避免把培养基接触到非无菌物品，如手指、桌面等，以免污染。
3.培养基接种：将处理后的种子分别均匀撒播在含有培养基的培养皿或瓶子上。
对于小种子，可以利用移液器或移液枪将种子移植到固体培养基或带有培养基的琼脂瓶中。
要避免种子之间的粘连和聚集，使得它们能够充分生长和发育。
4.培养条件：根据所培养的植物的要求，为其提供适宜的培养条件。
一般来说，光照条件下的培养需要提供适量的光照，可以采用日光灯或人工光源来模拟自然光照。
此外，温度和湿度也是生长过程中需关注的因素，可以使用恒温培养箱或温室条件来控制。
5.培养过程监测：在培养过程中，每隔一段时间检查培养皿中植物的生长情况，包括根的生长、叶片的形成、茎的延伸等。
培养基配制使用操作规程0
培养基配制使用操作规程0一、实验前准备1.确定所需的培养基种类和配制量。
2.准备所需的实验材料和设备，如试剂、培养基成分、量筒、称量器具等。
3.检查所使用的设备和容器，确保其干净无污染。
二、配制培养基1.根据培养基配方，按照比例准确称取所需的培养基成分。
不同的培养基成分可能有不同的配比，应根据具体要求进行配制。
2.准确称取培养基成分后，将其放入一个干净的容器中。
如果配制的培养基成分较多，可以选择使用一个混合容器，将不同的成分分批加入。
3.加入一定量的去离子水，使培养基成分溶解均匀。
注意搅拌培养基溶液，以确保成分充分溶解。
4.根据培养基配方需要，调整培养基的pH值。
可以使用酸碱溶液进行调节，pH值应根据具体要求控制在适宜范围内。
5.根据培养基配方需求，加入一定量的琼脂或琼脂糖，使培养基凝胶化。
注意在加热溶化琼脂时要确保充分溶解，并避免过热。
6.将配制好的培养基溶液均匀地倒入培养皿或试管中，封装好，并在密封处涂抹石蜡或添加适量的抗生素用于防止污染。
三、消毒和灭菌处理1.培养基配制完成后，应进行标本消毒处理，以确保培养基无菌。
可以使用自主炉、高压灭菌器或紫外线灯进行消毒处理，处理时间和方法应根据具体要求进行。
2.检查消毒后的培养基容器，确保无菌。
如果发现有污染或者其他异常情况，需要重新消毒处理。
四、记录1.培养基配制完后，需要记录相关信息，如培养基种类、配制日期、配制人员等。
这些记录有助于追溯和分析培养基的质量问题，也方便后续使用和管理。
以上是培养基配制的操作规程，这些规程主要是为了确保培养基质量的可靠性和可重复性。
执行这些规程可以减少操作失误和污染的风险，保证实验结果的准确性和可靠性，同时也有助于规范实验室管理和操作流程。
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告实验目的，通过制备培养基，培养微生物，观察微生物的生长情况，了解培养基对微生物生长的影响。
实验原理，培养基是为了提供微生物生长所需的营养物质而制备的一种特定的生长环境。
培养基的制备包括选择合适的基础成分、添加适当的营养物质和调节pH值等步骤。
实验步骤：1. 准备所需材料和设备，蒸馏水、琼脂、培养基粉、试管、培养皿、pH试纸、称量器等。
2. 精确称量培养基粉，并加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀。
3. 将培养基溶液加热至沸腾，使琼脂完全溶解。
4. 调节培养基的pH值，使其达到微生物生长所需的最适pH。
5. 将培养基倒入培养皿中，待其凝固后，即可用于培养微生物。
实验结果与分析：经过制备的培养基，观察到微生物在培养基上生长良好，形成了典型的菌落。
通过不同培养基的制备，我们发现不同的微生物对培养基的要求也有所不同，有些微生物对酸性培养基更适应，有些对碱性培养基更适应。
因此，制备不同类型的培养基对于不同微生物的培养具有重要意义。
实验总结：通过本次实验，我们深入了解了培养基的制备过程和对微生物生长的影响。
制备培养基是微生物学实验中的重要环节，合理的培养基制备可以为微生物的培养提供良好的生长环境，有利于我们对微生物的研究和应用。
同时，我们也意识到不同微生物对培养基的要求不同，因此在实际应用中需要根据具体微生物的特性来选择合适的培养基。
通过本次实验，我们不仅掌握了培养基的制备方法，还加深了对微生物生长环境的理解，为今后的微生物学研究奠定了坚实的基础。
参考文献：1. 李华. 微生物学实验教程. 北京，高等教育出版社，2008.2. 微生物学实验指导. 北京，科学出版社，2015.3. 培养基制备与应用. 北京，化学工业出版社，2012.。
培养基制备实验实训报告
一、实验目的1. 理解培养基制备的基本原理和方法。
2. 掌握牛肉膏蛋白胨培养基的配制过程。
3. 学习培养基消毒和灭菌的操作技术。
4. 熟悉实验室无菌操作规范。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的必需物质，它为微生物提供碳源、氮源、水、无机盐和生长因子等营养物质。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的通用培养基，适用于多种微生物的培养。
三、实验材料与仪器材料：- 牛肉膏- 蛋白胨- 氯化钠- 琼脂- 蒸馏水- pH试纸- 灭菌剂仪器：- 电子天平- 烧杯- 玻璃棒- 锥形瓶- 高压灭菌锅- 无菌操作台- 移液管- 研钵- 玻璃珠四、实验步骤1. 称量：称取牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g，放入烧杯中。
2. 溶解：加入适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌至完全溶解。
3. 调节pH：使用pH试纸测定溶液的pH值，调节至7.4-7.6。
4. 加琼脂：称取琼脂15g，加入锥形瓶中，加入适量蒸馏水，加热溶解。
5. 混合：将溶解好的琼脂溶液倒入含有牛肉膏蛋白胨溶液的烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀。
6. 分装：将混合好的培养基分装到锥形瓶中，每瓶约100mL。
7. 灭菌：将锥形瓶放入高压灭菌锅中，121℃灭菌15分钟。
8. 冷却：将灭菌后的培养基取出，待冷却至50-60℃。
9. 倒平板：将冷却后的培养基倒入无菌平皿中，用玻璃棒轻轻搅拌，使培养基均匀铺平。
10. 凝固：待培养基凝固后，进行无菌试验。
五、实验结果与分析实验过程中，成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基，并进行了无菌试验。
结果表明，培养基制备过程符合无菌操作规范，无污染现象。
六、实验讨论1. 在培养基制备过程中，应注意称量准确，避免误差。
2. 溶解过程中，应充分搅拌，确保各成分均匀分布。
3. 调节pH值时，应使用pH试纸，避免使用pH计。
4. 灭菌过程中，应严格控制时间，避免过度灭菌或灭菌不足。
5. 倒平板过程中，应避免产生气泡，影响平板质量。
七、实验总结本次实验成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基，并掌握了培养基制备的基本原理和方法。
培养基促生长实验操作
制订培养基灵敏度实验操作，是为了规范、统一培养基灵敏度检测，确保微生物检测准确、安全进行。
2 范围适用于所有配制好并灭菌的培养基。
3 编写依据EP6.54 术语无5 职责QC卫检组人员负责培养基的配制、灭菌、灵敏度实验。
6 内容6.1 使用的设备、器具生物安全柜、无菌培养皿、无菌刻度吸管或无菌注射器、无菌玻璃涂布器、酒精灯等6.2 使用的菌株EP检测用ATCC的菌株:金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus ATCC 6538大肠埃希菌Escherichia coli ATCC 8739铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027枯草芽孢杆菌 Bacilllus subtilis ATCC 6633沙门氏菌Salmonella enterica subsp ATCC 14028白色念珠菌Candida albicans ATCC 10231黑曲霉Aspergillus niger ATCC 16404培养基灵敏度检测所用的菌株传代次数不得超过5代, 并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验用菌株的生物学特性。
6.3 检测频率每批配制、灭菌后的培养基均应做灵敏度测试。
6.4 操作方法6.4.1 对照标准培养基用已经过实验证明合格的培养基或购买的有质量证书的成品平皿培养基作为对照标准培6.4.2 实验培养基将琼脂类的实验培养基加热融化后，冷却至45℃左右，以无菌的方式在无菌培养皿中注入15～20ml，备用。
液体类的培养基直接使用。
6.4.3 菌悬液的制备6.4.3.1 细菌菌悬液的制备方法一：取细菌的斜面培养物1耳匙接种在酪蛋白大豆消化肉汤培养基中30～35℃培养18～24h，取上述培养物用无菌水按10倍系列稀释，分别制成10-7～10-8的菌悬液备用。
6.4.3.2 霉菌菌悬液的制备取白色念珠菌的斜面培养物1耳匙接种在沙氏琼脂斜面上于20～25℃培养24～48h，加入无菌水4ml制成原液，取上述原液按10倍系列稀释，分别制成10-6～10-7的菌悬液备用。
制作培养基的实验报告
制作培养基的实验报告制作培养基的实验报告引言：培养基是微生物学研究中的重要工具，它提供了微生物生长所需的营养物质和环境条件。
本实验旨在制作一种适用于细菌生长的通用培养基，并通过实验验证其有效性。
实验材料和方法：1. 实验材料：- 葡萄糖：提供碳源，促进细菌生长。
- 蛋白胨：提供氮源，支持细菌蛋白质合成。
- 酵母提取物：提供维生素和微量元素，满足细菌的生长需求。
- 磷酸二氢钾：提供磷源，参与细菌代谢过程。
- 氯化钠：提供适宜的渗透压，维持细菌细胞内外的平衡。
- 琼脂：用于固化培养基。
2. 实验方法：- 步骤一：将适量的蛋白胨、葡萄糖、酵母提取物、磷酸二氢钾和氯化钠加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀。
- 步骤二：将混合液加热至沸腾，持续搅拌，直至所有成分完全溶解。
- 步骤三：将溶液倒入培养瓶中，待其冷却至室温。
- 步骤四：在培养基中加入适量的琼脂，搅拌均匀。
- 步骤五：将培养基倒入培养皿中，待其凝固。
实验结果：经过制作和固化，我们成功制备了一种适用于细菌生长的通用培养基。
在实验中，我们使用了该培养基分别培养了大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。
1. 大肠杆菌培养结果：- 观察到在培养基上形成了一片均匀的、乳白色的菌落。
- 菌落大小均匀，直径约为2-3毫米。
- 菌落边缘光滑，无明显凹陷或突起。
2. 金黄色葡萄球菌培养结果：- 观察到在培养基上形成了一片黄色的、凸起的菌落。
- 菌落大小不均，直径约为1-2毫米。
- 菌落边缘不规则，有时呈波浪状。
讨论与分析：通过本实验，我们成功制备了一种适用于细菌生长的通用培养基，并验证了其有效性。
大肠杆菌和金黄色葡萄球菌是两种常见的细菌，它们在该培养基上都能够良好地生长。
在培养基制备过程中，我们选择了葡萄糖、蛋白胨、酵母提取物、磷酸二氢钾和氯化钠作为主要成分。
葡萄糖提供了碳源，促进细菌生长和代谢活动。
蛋白胨提供了氮源，支持细菌蛋白质合成。
酵母提取物提供了维生素和微量元素，满足细菌的生长需求。
细菌增菌实验报告
一、实验目的1. 掌握细菌增菌实验的基本原理和方法。
2. 学习细菌在不同培养基中的生长情况，观察细菌的生长特点。
3. 提高无菌操作技能，为后续实验奠定基础。
二、实验原理细菌增菌实验是利用培养基的营养成分，为细菌提供生长繁殖所需的条件，使细菌数量在短时间内迅速增加。
实验过程中，通过观察细菌在不同培养基上的生长情况，了解细菌的生长特点，为后续实验提供充足的菌种。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基、营养琼脂平板、无菌试管、无菌棉签、接种环、酒精灯、高压蒸汽灭菌器等。
2. 试剂：无菌生理盐水、无菌水、孔雀绿染液、番红染液等。
四、实验步骤1. 准备培养基：按照实验要求，配制牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基，并进行高压蒸汽灭菌。
2. 制备菌种：从菌种库中取出待增菌的细菌，用无菌生理盐水进行洗涤，制成菌悬液。
3. 接种：将菌悬液分别接种到牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基中，接种环需经过火焰灭菌。
4. 增菌培养：将接种好的培养基放入恒温培养箱中，37℃培养24小时。
5. 观察结果：观察牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基上的细菌生长情况，记录生长特点。
6. 染色观察：对牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落进行孔雀绿染色，观察细菌的形态和颜色变化。
7. 统计分析：根据菌落数量和生长特点，对实验结果进行统计分析。
五、实验结果与分析1. 牛肉膏蛋白胨培养基上的细菌生长情况：在牛肉膏蛋白胨培养基上，细菌呈现出明显的生长现象，菌落较大，表面光滑，呈现白色或淡黄色。
2. 营养肉汤培养基上的细菌生长情况：在营养肉汤培养基上，细菌呈现出均匀分布的生长现象，菌液呈浑浊状，无明显的菌落。
3. 孔雀绿染色观察结果：经孔雀绿染色后，牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落呈现出绿色，表明细菌对孔雀绿有较强的亲和力。
六、实验结论1. 细菌增菌实验成功，为后续实验提供了充足的菌种。
2. 牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基均能满足细菌的生长需求，但牛肉膏蛋白胨培养基更适合观察细菌的菌落形态。
细胞培养实验步骤
细胞培养实验步骤细胞培养是一种常用的实验技术，用于研究和培养人类及动物细胞以及微生物细胞，以便进行细胞生物学、免疫学、生物药剂学等领域的研究。
下面是细胞培养的一般步骤，供参考：1.预备培养物品：包括培养基、生长因子、惰性气体（例如二氧化碳、乙烷等）等。
2.消毒操作：将培养器皿、培养板、培养液等较小的物品放入70%乙醇中浸泡，或用高温高压灭菌。
3.培养基配制：根据需要的培养细胞类型选择相应的基础培养基（例如DMEM、RPMI-1640等），根据实验要求添加适当的补充物质（如胎牛血清、抗生素等），调节pH值。
4.细胞分离和传代：a）将需要培养的细胞从体内或体外取出；b）用消化酶（如胰蛋白酶）或化学脱附剂（如牛血清白蛋白）处理细胞；c）通过离心等操作，去除胶原颗粒、纤维素等杂质；d）将细胞悬浮于培养基中，数量适量；e）将细胞装入培养皿中，加入适量的培养基。
5.细胞观察：使用显微镜观察细胞的生长状态、数量、形态特征等。
6.细胞培养环境控制：a）保持恒定的温度：多数细胞培养在37℃下进行；b）提供合适的湿度：使用培养器内的水槽或加入水来增加湿度；c）提供适度的无菌环境：在洁净工作台或无菌箱内进行，注意操作无菌技术，避免细菌等污染细胞。
7.细胞培养的传代：细胞的生长速度快，细胞排列紧密，细胞密度太高会使细胞分泌代谢产物过多，阻碍细胞增殖，因此需要定期传代。
传代前要先将细胞分散（用胰蛋白酶或牛胰酶等处理），将培养皿中的细胞悬液分装到新的培养皿内。
8.细胞培养的净化：细胞培养过程中，细胞环境容易被菌落污染，因此需要进行细胞净化。
方法有：检测培养液的菌落数目，观察培养皿内是否有细菌、真菌等的生长，如发现污染现象，立即停止使用被污染的培养皿和培养液。
9.细胞培养的冻存：细胞培养过程中，保留一部分细胞进行冻存，以备后续的实验使用。
常用方法是将细胞悬液和DMSO混合后，存放在液氮中保存。
以上是细胞培养的一般步骤。
但不同类型的细胞具有不同的培养要求，实验者还需根据实际情况进行具体调整和处理。
细菌生长现象实验报告
一、实验目的1. 观察细菌在不同培养基上的生长现象。
2. 掌握培养基的配置原则和方法。
3. 熟悉细菌在液体培养基中的生长特点。
二、实验材料1. 实验器材：无菌培养皿、无菌棉签、无菌镊子、酒精灯、显微镜、恒温培养箱、液体培养基、固体培养基、半固体培养基。
2. 实验试剂：蛋白胨、牛肉膏、琼脂、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾等。
三、实验步骤1. 配制培养基：（1）液体培养基：称取蛋白胨10g、牛肉膏5g、葡萄糖5g、氯化钠5g，加入1000ml蒸馏水，加热溶解，调整pH值至7.2-7.6，分装于无菌试管中，高压灭菌。
（2）固体培养基：在液体培养基中加入2%琼脂，分装于无菌培养皿中，待凝固后备用。
（3）半固体培养基：在液体培养基中加入0.5%琼脂，分装于无菌试管中，待凝固后备用。
2. 接种：（1）取适量细菌样品，用无菌棉签涂布于固体培养基表面。
（2）取适量细菌样品，用无菌棉签涂布于液体培养基中。
3. 观察与记录：（1）将接种好的培养基放入恒温培养箱中，分别于24小时、48小时、72小时观察细菌的生长现象。
（2）观察液体培养基中的细菌生长现象，记录混浊度、沉淀、菌膜等。
（3）观察固体培养基上的菌落特征，记录菌落形态、大小、颜色等。
四、实验结果与分析1. 液体培养基中的细菌生长现象：（1）混浊生长：大多数细菌在液体培养基中生长繁殖后均匀浑浊，如大肠埃希菌、志贺菌等。
（2）沉淀生长：少数链状排列的细菌如链球菌、炭疽芽孢杆菌等则呈沉淀生长。
（3）菌膜生长（表面生长）：专性需氧菌如枯草芽孢杆菌、结核分枝杆菌和铜绿假单胞菌等一般呈表面生长，常形成菌膜。
2. 固体培养基上的细菌生长现象：（1）菌落形态：细菌在固体培养基上形成菌落，菌落大小、形状、颜色等特征有助于细菌的鉴定。
（2）菌落大小：细菌在固体培养基上的菌落大小与其生长速度有关，生长速度快的菌落较大。
（3）菌落颜色：某些细菌在固体培养基上产生色素，有助于细菌的鉴定。
细胞培养操作步骤
细胞培养操作步骤细胞培养是生物学实验中常用的一项技术。
通过细胞培养，可以研究细胞的生理活动、疾病发生机制以及药物的毒性和疗效等。
本文将为大家介绍细胞培养的基本操作步骤，帮助读者更好地进行细胞培养实验。
一、实验前准备1.1 材料准备首先，准备好所需的实验材料和试剂。
主要包括细胞培养基、培养皿、移液器、离心管、冰桶、显微镜和相应的培养器具等。
1.2 密切关注无菌操作细胞培养需要在严格无菌条件下进行，以避免细胞受到污染而影响实验结果。
实验前要正确佩戴防护服和洗手，确保操作台面、培养皿和使用的器械都经过高温高压消毒。
二、细胞的处理2.1 细胞种植将培养基加热至37摄氏度，并取出暖培养皿备用。
从细胞库中取出所需细胞的冻存管，在冰上迅速解冻，并将细胞转移到暖培养皿中。
注意，细胞数量应适量，不宜过多，否则会影响细胞的生长和适应。
2.2 细胞传代当细胞在培养皿中达到一定的密度后，需要进行传代操作，以保证细胞的健康和活力。
传代前，首先用生理盐水或PBS洗净细胞，并加入胰蛋白酶等消化酶将细胞从培养皿表面脱落。
然后，将细胞转移到新的培养皿中，并加入新鲜的培养基。
三、细胞培养条件的控制3.1 细胞培养环境将细胞培养皿置于37摄氏度的培养箱内，以提供适宜的温度和湿度。
此外，还要保持适当的氧气和二氧化碳浓度，可以通过培养箱上的气体调节装置进行控制。
3.2 培养基的更新培养基中含有丰富的营养物质，但随着时间的推移，这些营养物质会逐渐降解消耗，影响细胞的生长。
因此，需要按照一定的时间间隔进行培养基的更新，保持细胞在新鲜和富有营养的环境中。
四、细胞观察与处理4.1 细胞观察使用相差显微镜或荧光显微镜观察细胞的形态、数量和状态。
可以观察细胞的生长情况、染色效果以及细胞内特定蛋白的表达等。
4.2 细胞处理根据实验需求，可以对培养的细胞进行不同的处理。
例如，给细胞添加特定的药物、激素或化合物，刺激细胞产生某种反应或模拟特定的生理环境等。
培养基的制作实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的配制原理和方法。
2. 了解培养基在微生物培养中的应用。
3. 熟悉灭菌和消毒的方法及注意事项。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖所必需的营养物质混合物。
根据微生物种类和实验目的，培养基的配方和种类有所不同。
本实验以牛肉膏蛋白胨培养基为例，介绍培养基的配制、灭菌和消毒方法。
三、实验材料与试剂1. 材料：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水、pH试纸等。
2. 试剂：1M HCl、1M NaOH、无菌水等。
四、实验步骤1. 培养基配制（1）称取牛肉膏10g、蛋白胨10g、氯化钠5g，加入1000ml蒸馏水；（2）加入琼脂15g，搅拌均匀；（3）将混合液煮沸，溶解琼脂；（4）用pH试纸检测培养基pH值，调节至7.0-7.2；（5）将培养基冷却至50-60℃，过滤去除杂质；（6）分装至灭菌试管中，每管10ml。
2. 灭菌（1）将装有培养基的试管放入高压蒸汽灭菌锅中；（2）关闭锅盖，加热至压力达到0.1MPa，维持15-20分钟；（3）待压力降至0时，打开锅盖，取出灭菌试管。
3. 消毒（1）将灭菌后的试管置于超净工作台；（2）用无菌镊子取出试管，放入无菌培养皿中；（3）用酒精灯对试管进行消毒；（4）将培养皿放入培养箱中，待培养基凝固。
五、实验结果与分析1. 培养基配制：按照实验步骤，成功配制了牛肉膏蛋白胨培养基。
2. 灭菌：高压蒸汽灭菌法能够有效杀死培养基中的微生物，保证培养基的无菌状态。
3. 消毒：酒精灯消毒可以进一步降低培养基的污染风险。
六、实验讨论1. 在培养基配制过程中，应注意控制pH值，以保证微生物的正常生长。
2. 灭菌和消毒是保证培养基无菌的关键环节，应严格按照操作规程进行。
3. 实验过程中，应注重无菌操作，避免外界微生物的污染。
七、实验结论通过本次实验，掌握了培养基的配制、灭菌和消毒方法，为微生物培养提供了基础条件。
在实验过程中，应严格遵守无菌操作规程，确保实验结果的准确性。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
制订培养基灵敏度实验操作，是为了规范、统一培养基灵敏度检测，确保微生物检测准确、安全 进行。
范围
适用于所有配制好并灭菌的培养基。
编写依据
EP6.5
术语
职责
QC 卫检组人员负责培养基的配制、灭菌、灵敏度实验。
内容
生物安全柜、无菌培养皿、无菌刻度吸管或无菌注射器、无菌玻璃涂布器、酒精灯等
EP 检测用ATCC 勺菌株:
金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus ATCC 6538
培养基灵敏度检测所用勺菌株传代次数不得超过
5 代 , 并采用适宜勺菌种保藏技术，以保证试验用
菌株勺生物学特性。
6.3 检测频率
每批配制、灭菌后勺培养基均应做灵敏度测试。
6.4 操作方法
6.4.1 对照标准培养基
大肠埃希菌 Escherichia
coli
ATCC 8739
铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 枯草芽孢杆菌 Bacilllus subtilis ATCC 6633 沙门氏菌 Salmonella enterica subsp ATCC 14028 白色念珠菌 Candida albicans
ATCC 10231
黑曲霉 Aspergillus
niger ATCC 16404
6.1 使用的设备、器具
6.2 使用的菌株
15〜
用已经过实验证明合格的培养基或购买的有质量证书的成品平皿培养基作为对照标准培养基
6.4.2 实验培养基
20ml ，备用。
液体类的培养基直接使用。
6.4.3 菌悬液的制备 6.4.3.1 细菌菌悬液的制备
24h ，取上述培养物用无菌水按 10倍系列稀释，分别制成
10-7〜10-8的菌悬液备用。
6.4.3.2 霉菌菌悬液的制备
取白色念珠菌的斜面培养物
1耳匙接种在沙氏琼脂斜面上于 20〜25 C 培养24〜48h ，加入无菌水
4ml 制成原液，取上述原液按
10倍系列稀释，分别制成 10-6〜10-7的菌悬液备用。
取黑曲霉的斜面培养物加入无菌水 4ml 制成孢子悬液，取上述孢子悬液按 10倍系列稀释，分别制
成 10-6
〜10-7
的菌悬液备用。
每株菌用 2管（或瓶）实验培养基，接种 0.1 〜 0.5ml 的菌悬液（约 10〜100CFU 试验菌），同时用
2 个对照标准的培养基或用已知合格的酪蛋白大豆消化琼脂平皿做对照，接种相同量的菌悬液试验，在 规定温度下培养 ,对比或计
数，在规定时间内能生长菌落为合格。
6.4.5 培养基的生长促进和抑制特性试验 6.4.5.1 液体培养基的生长促进特性试验
将琼脂类的实验培养基加热融化后，冷却至
45 C 左右，以无菌的方式在无菌培养皿中注入
方法一：取细菌的斜面培养物
1 耳匙接种在酪蛋白大豆消化肉汤培养基中
30〜35 C 培养 18〜
方法二：直接用杭州微球生物技术有限公司的产品 -培养基灵敏度指示剂，该产品已经帮我们精确
控制了细菌数量，只要直接拿稀释液稀释下就可以直接取到 10〜100CFU 试验菌。
使用方便，数量精
确。
推荐用此方法操作。
6.4.4
培养基的生长促进实验
6.4.4.1 琼脂类培养基的生长促进实验
每株菌用 2 个实验培养基平皿，用表面涂布法在每个平皿表面接种
0.1 〜 0.5ml 的菌悬液（约 10〜
100CFU 试验菌），同时用 2 个对照标准的培养基平皿做对照，接种相同量的菌悬液试验，在规定温度
下培养 ,取出平皿点计菌落数。
实验培养基上的微生物数量应为对照培养基上微生物生长数量的
70%-150%范围内。
（注：每种培养基生长促进实验的具体菌株见附录 1）
6.4.4.2 液体类培养基的生长促进实验
接种0.1〜0.5ml 的菌悬液（约10〜100CFU 试验菌）于一定量适合的培养基。
在特定温度下培养, 培养时间不超过试验中规定的最短期限。
与对照标准的培养基获得的微生物生长相比，接种微生物的 生长应明显。
采用表面涂布法，在每一块平皿上接种 0.1〜0.5ml 的菌悬液（约10〜100CFU 试验菌）适宜微生物。
在特定温度下培养，培养时间不长于试验中规定的最短期限。
接种微生物的生长与对照标准的培养基 获得的微生物生长相当。
用适当培养基接种至少
100 CFU 适宜微生物。
在特定温度下培养，培养时间至少为试验中规定的
最长期限。
无受试微生物生长。
（注：每种培养基生长促进和抑制特性试验的具体菌株见附录
7附录
附录1 培养基生长促进和抑制特性表 附录1：
培养基的生长促进、抑制特性表
645.2
固体培养基的生长促进特性试验
6.4.5.3
液体或固体培养基的抑制特性试验
1）。