安图TORCH抗体亲和力检测
揭开TORCH的真面目,让准妈妈困惑的“TORCH”检查
揭开TORCH的真面目，让准妈妈困惑的“TORCH”检查1 TORCH概述TORCH检查也被称之为优生四项检查，检查的是一组病原体，TORCH最早出现在20世纪70年代，是一项孕期感染会引发幼儿功能障碍和畸形的病原微生物。
主要包括TOX、RV、CMV、HSV等四項内容。
该检查常用于女性孕期。
其一：TOX，该感染是人和动物都会患有的疾病，猫类动物是传染源。
后天接触产生的感染一般轻型患者不会出现临床症状，但是在血清检查中会查出抗体；而重型患者会出现多种临床症状，如：淋巴结重大、发热、关节疼痛、肌肉疼痛等；而针对孕期女性，如果发生胎盘感染会引发早产或者胎死腹中，出生之后也会引发先天性的内脏损伤或者眼部损伤以及中枢神经系统疾病；其二：RV，准妈妈会在怀孕1-6周的时候出现感染了RV症状，除了导致死亡或者流产以外，严重的会导致幼儿出现先天性风疹综合征。
IgM检测如果显示抗体为阳性，表现近期存在感染，必要的需停止妊娠；其三：CMV，检测中IgM抗体显示阳性表示孕妇近期感染了CMV，需要根据临床症状具体分析病情，并采取对症治疗；其四：HSV，严重的会引发疱疹性角膜结膜炎、湿疹性疱疹、疱疹性口腔炎、疱疹性外阴阴道炎、新生儿疱疹等疾病。
大多数感染都是由于单纯疱疹病毒-Ⅰ型引发的，生殖器官感染则是由于单纯疱疹病毒-Ⅱ型引发的。
而TORCH检查无法分型，如果检查结果IgM抗体显示阳性则表明出现HSV。
许多准妈妈都不明白什么是TORCH检查，从别人口中听说表明这个检查很重要，如果不做可能会引发严重的结果；如果做了，如果检查结果显示阳性，面对网络众说纷纭的说法，有的甚至医生也无法作出准确的解读，即使找到了专业能力强、临床经验丰富的专家医生，查看检查结果之后，也只能说出一个大概情况，而无法给出肯定答复。
2 做TORCH检查的重要性各个时间段都可以进行TORCH检查，孕前检查能够评估机体免疫力，并根据检查结果评估是否适合怀孕，同时可以区分高危人群；孕期检查能够判断是否发生感染，并作出产前判断；新生儿检查能够评估先天感染发生的可能性，作出针对性的诊断。
安图TORCH抗体亲及力检测
低亲和力
孕期＞20周 IgG亲和力检测
高亲和力
案例分析 2
高度传染性
回顾性检测前三个月样本
高度传染性
IgG-IgM- 和IgG-IgM+
可
进
一
步 检
复发 低传染性
IgG+ IgM-
Munro SC, et al.
测
高度传染性
IgG+ IgM+ 低亲和力IgG
J Clin microbiol,
2005,43:4713-4718
IgG+ IgM+
无需进一步检测
IgG- IgM+ 让患者3周后再检测
孕期≤20周
IgG亲和力检测
高亲和力
无需进一步检测
母体病毒血症评估： 尿液PCR、血液PCR
胎儿健康度评估： 超声、MRI
侵入性检测：羊膜穿 刺、定量PCR 超声、MRI
低亲和力
孕期＞20周 IgG亲和力检测
高亲和力
案例分析1
高度传染性
2012年以后批准上市
Biomerieux ELISA荧光
/ ELISA荧光
/
国外批准上市的主要厂家及方法
巨细胞病毒亲和力试剂盒检测结果比较
Radim、Euroimmun与临床的符合率优于其他厂家，安图产品 研发以Radim为参比试剂盒。
安 图 标 杆
弓形虫亲和力试剂盒检测结果比较
各厂家检测结果差异不大 低亲和力结果可能不是急性感染 高亲和力结果可以排除急性感染
无需进一步检测IgG+ 来自gM+ 高亲和力IgG
TORCH抗体亲和力检测现状
试剂盒检测原理：解离剂法和抗原中和法，解离剂法是主流方法。 试剂盒检测方法：酶联免疫法、自动化化学发光法，酶联免疫法较多。 国内，对TORCH亲和力研究较少，仅有少量的文献报道了IgG亲和力
Torch检查
Torch检查Torch检查是一种常见的医学检查方法，用于评估和诊断患者是否患有某些感染性疾病。
Torch是由几个英文单词的首字母组成的缩写，分别代表着不同的病原体，包括弓形虫（Toxoplasma）、风疹病毒（Rubella）、巨细胞病毒（Cytomegalovirus）和单纯疱疹病毒（Herpes simplex virus）。
Torch检查主要通过检测患者体液中的抗体来确定是否感染了上述病原体。
这些抗体是人体对抗病原体感染产生的免疫反应产物，通过检测它们的存在和数量，可以了解患者是否曾经感染过这些病原体，或者目前正在感染中。
Torch检查通常包括血清学检测和分子生物学检测两个方面。
血清学检测是通过采集患者的血液样本，利用酶联免疫吸附测定法（ELISA）或荧光免疫分析法（FIA）等技术，检测血液中特定抗体的存在和水平。
例如，对于弓形虫感染，可以检测IgM和IgG抗体，IgM抗体通常在感染初期产生，而IgG 抗体则表示曾经感染过或者已经具备免疫力。
对于风疹病毒、巨细胞病毒和单纯疱疹病毒的检测也是类似的原理。
分子生物学检测是通过采集患者的体液样本，如血液、尿液或唾液等，利用聚合酶链反应（PCR）等技术，检测病原体的核酸存在与否。
这种方法可以更加敏感地检测病原体的存在，尤其是在感染初期或者病原体含量较低的情况下。
例如，对于弓形虫感染，可以通过检测其DNA或RNA的存在来判断是否感染。
Torch检查的结果可以帮助医生评估患者的感染状况，并采取相应的治疗措施。
对于孕妇而言，如果在怀孕期间感染了Torch病原体，可能会对胎儿造成不良影响，如先天性畸形、发育迟缓等。
因此，对于孕妇来说，进行Torch检查尤为重要，可以及早发现感染情况，采取相应的干预措施，以保护胎儿的健康。
除了孕妇外，Torch检查也适用于其他人群，特别是免疫功能较弱或有相关症状的患者。
例如，对于免疫缺陷患者、新生儿、婴儿和儿童，Torch检查可以帮助医生确定感染的类型和严重程度，制定相应的治疗方案。
Torch检查
Torch检查Torch检查是一种常见的临床检查方法，用于评估妇女的生殖健康状况。
该检查主要通过检测一系列病原体抗体来判断是否存在感染，包括弓形虫、巨细胞病毒、风疹病毒和梅毒等。
以下是关于Torch检查的详细介绍。
一、检查目的和适应症Torch检查主要用于评估孕妇或计划怀孕妇女的生殖健康状况，特别是在孕早期进行。
适应症包括但不限于以下情况：1. 孕妇出现不明原因的发热、皮疹、淋巴结肿大等症状；2. 孕妇有病毒感染史，如风疹、巨细胞病毒感染等；3. 孕妇有接触感染源的风险，如动物接触、感染者接触等；4. 孕妇有流产、死胎、胎儿发育异常等病史。
二、检查方法和步骤Torch检查主要通过血清学方法进行，包括IgM和IgG抗体的检测。
具体步骤如下：1. 患者需空腹前来检查，避免摄入食物影响结果准确性。
2. 医务人员会采集一定量的静脉血样本，通常为5-10毫升。
3. 血样会送往实验室进行离心分离，分离后的血清用于后续的抗体检测。
4. 实验室会使用特定的试剂盒进行IgM和IgG抗体的检测，常用的方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）和荧光抗体法等。
5. 检测结果会根据抗体滴度和阳性判定标准进行解读，通常阳性结果表示感染存在或曾经感染过。
三、结果解读和临床意义Torch检查的结果通常分为四种情况：阴性、阳性、可疑阳性和不确定。
具体解读如下：1. 阴性：表示未检测到相应的抗体，说明患者未感染或未曾感染过相关病原体。
2. 阳性：表示检测到相应的抗体，说明患者已感染或曾感染过相关病原体。
阳性结果需要结合临床症状和其他检查结果进行综合分析。
3. 可疑阳性：表示抗体滴度较低，结果不确定，可能需要进行重复检测或其他进一步检查以确认感染情况。
4. 不确定：表示抗体滴度较低，结果不确定，需要进行重复检测或其他进一步检查以确认感染情况。
根据Torch检查结果的不同，临床意义也有所不同：1. 阴性结果通常表示未感染或未曾感染过相关病原体，对于孕妇来说是较好的结果。
TORCH的实验室检查及结果判读
ToRCH的实验室检查
ToRCH的实验室检查
直接指标
病毒抗原 病毒DNA 病毒RNA 病毒培养
检测的病毒本身 适合产前诊断
间接指标
IgG抗体 IgM抗体 IgG抗体亲和力
检测抗体 适合筛查和免疫状态评估
ToRCH检测方法学比较
IgG 1.监测免疫状态
ToRCH的实验室检查及结果判读
湖北省妇幼保健院检验科 郭虹
概述 ToRCH筛查的对象和时间 ToRCH的实验室检查 ToRCH筛查流程及结果判读 ToRCH感染后的处置原则
ToRCH定义
Toxoplasma gondii(Tox) 弓形虫
ToRCH：指导致先 天性宫内感染及 围产期感染而引 起围产儿畸形的 一组病原体。
使用敏感方法检测TORCH IgG/IgM
IgG- IgM孕期卫生教育
IgG+ IgM-
IgG+ IgM+
无需进一步检测
IgG- IgM+ 让患者3周后再检测
孕期≤20周
IgG亲和力检测
高亲和力
无需进一步检测
母体病毒血症评估： 尿液PCR、血液PCR
胎儿健康度评估： 超声、MRI
侵入性检测：羊膜穿 刺、定量PCR 超声、MRI
间接免疫荧光检测原理
荧光复核实验
TOXO-M
RUV-M
CMV-M
HSV1-M
在国外，IFA视为ToRCH筛查的金标准。
HSV2-M
ToRCH筛查流程及结果判读
ToRCH检测及流程规范化
1）实验室确认： 初筛阳性结果的处置，先排除人为操作失误，行 重复试验；送有经验的专业实验室，使用第二种 方法（如：IFA试剂进行复核确认。）
Torch检查
Torch检查Torch检查是一种常见的医学检查方法，用于评估甲状腺功能和诊断相关疾病。
本文将详细介绍Torch检查的标准格式内容，包括检查目的、适应症、检查方法、结果解读以及注意事项等方面。
一、检查目的：Torch检查的主要目的是评估患者体内是否存在某些特定病原体的感染，包括弓形虫（Toxoplasma）、风疹病毒（Rubella）、巨细胞病毒（Cytomegalovirus）和单纯疱疹病毒（Herpes simplex virus）。
通过检测这些病原体的抗体水平，可以确定感染的程度和时间，进而指导临床诊断和治疗。
二、适应症：Torch检查适用于以下情况的患者：1. 孕妇：孕妇感染Torch病原体可能会导致胎儿发育异常，因此进行Torch检查可以评估孕妇是否感染，以及是否需要进一步的治疗和干预措施。
2. 新生儿：新生儿感染Torch病原体可能会引发一系列严重的并发症，包括先天性心脏病、智力发育迟缓等。
Torch检查可以早期发现感染，及时采取治疗措施，以减少并发症的发生。
3. 免疫抑制患者：免疫抑制患者由于免疫功能低下，更容易感染Torch病原体，因此进行Torch检查可以及早发现感染，以便及时治疗和干预。
三、检查方法：Torch检查一般采用血清学检测方法，通过检测患者血液中的特定抗体水平来确定是否感染Torch病原体。
具体步骤如下：1. 血液采集：使用无菌针头和注射器从患者的静脉中采集2-5ml的血液样本，并放入干燥无菌试管中。
2. 血清分离：将采集的血液样本放置在室温下静置20-30分钟，使其凝结，然后进行离心，将血液分离为血清和红细胞。
3. 抗体检测：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法，检测血清中特定抗体的水平。
根据不同病原体的抗体类型和水平，可以判断感染的程度和时间。
四、结果解读：根据Torch检查的结果，可以判断患者是否感染了特定的病原体，并评估感染的程度和时间。
一般情况下，结果解读如下：1. IgM抗体：IgM抗体是早期感染的标志，如果检测到IgM抗体阳性，表示患者最近感染了Torch病原体。
Torch检查
Torch检查Torch检查是一种常见的医学检查方法，用于评估和诊断患者的神经系统功能。
本文将详细介绍Torch检查的定义、目的、操作步骤、结果解读以及注意事项。
一、定义：Torch检查是一种通过血液检测来评估患者是否感染了某些特定的病原体，包括弓形虫（Toxoplasma）、风疹病毒（Rubella）、巨细胞病毒（Cytomegalovirus）和单纯疱疹病毒（Herpes simplex virus）。
二、目的：Torch检查的主要目的是在妊娠期间筛查孕妇是否感染了上述病原体，以及评估感染对胎儿的潜在影响。
此外，Torch检查还可用于评估新生儿或者婴儿是否感染了这些病原体。
三、操作步骤：1. 血液采集：医生或者护士会使用一根细长的针头从患者的静脉中采集血液样本。
2. 实验室检测：采集的血液样本将送往实验室进行检测。
实验室技术人员将使用特定的试剂和设备来检测患者血液中是否存在上述病原体的抗体。
3. 结果解读：实验室将根据检测结果提供一个报告。
报告中会详细说明患者是否感染了某些病原体以及感染的程度。
四、结果解读：Torch检查的结果通常以阳性和阴性来表示。
阳性意味着患者血液中存在特定病原体的抗体，表明感染已经发生。
阴性则表示患者血液中不存在特定病原体的抗体，表明没有感染。
五、注意事项：1. Torch检查通常在特定的临床情况下进行，如妊娠期偶尔婴儿出生后。
请遵循医生的建议进行检查。
2. 检查前请告知医生有关任何过敏史或者特殊情况，以便医生能够更好地评估检查的风险和益处。
3. Torch检查只能作为初步筛查工具，不能用于确诊。
如果检查结果阳性，医生可能会建议进一步的检查和诊断。
4. 如果检查结果显示阳性，医生将与患者讨论进一步的治疗和管理计划，以减少感染对胎儿或者婴儿的潜在影响。
总结：Torch检查是一种用于评估患者是否感染了弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒和单纯疱疹病毒的常见医学检查方法。
通过血液检测，医生可以判断患者是否感染了这些病原体，并评估感染对胎儿或者婴儿的潜在影响。
TORCH的血清学检测及IgG抗体亲和力检测对诊断的辅助作用
TORCH的血清学检测及IgG抗体亲和力检测对诊断的辅助作用TORCH是一组病原微生物英文首字母的缩写，T代表弓形虫（toxoplasma gondii，TOX），R代表风疹病毒（rubella virus，RV），C代表巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV），H代表单纯疱疹病毒（h erpes simplx virus，HSV）I、II型，而O代表其它微生物（others），如细小病毒B19、EB病毒、梅毒螺旋体等。
一、TORCH检测的重要性TORCH病原微生物的共同特征是，当感染发生在孕期时，可通过胎盘或产道引起宫内感染，可能导致胎儿流产、早产、宫内发育迟滞、畸形、死胎和新生儿死亡等。
原发感染与复发感染相比，特别是发生在孕早期（妊娠前三个月内）的原发感染，母婴传播率更高，对胎儿造成危害的几率更大。
所以对于孕妇进行产前筛查和感染监测十分重要，尤其是对原发感染、既往感染和复发感染的有效区分，能够为医生及时作出TORCH感染诊断和采取必要控制感染措施提供有力证据，有助于提高优生优育质量。
二、TORCH的血清学检测目前，国内医院对TORCH的产前筛查主要通过检测血清学特异性IgM是否为阳性来判断近期感染的发生，方法学上以ELISA应用最广泛，主流方法包括间接法和捕获法。
间接法和捕获法在方法学原理上不同，因此在检测性能上存在差别，通常认为在灵敏度方面间接法较捕获法高，在特异性方面较捕获法低。
捕获法对试剂盒原材料要求很高，更易受酶标板、多克隆抗体，抗原和酶联物质量的直接影响，因此好的原材料是捕获法试剂的关键。
间接法会受到特异性IgG抗体和类风湿因子（RF）的影响，通常通过稀释和加入吸附剂的方法可降低干扰。
表1中对这两种方法学进行了比较。
由表1看出，间接法和捕获法在方法学上均可受若干干扰因素影响其特异性和灵敏度，尽管捕获法在原理上可以排除病毒特异性IgG的竞争性抑制，但RF的影响仍然存在。
Champsaur等1证明，以羊抗人IgG分别对2004个血清样本进行前处理，可迅速地消除表1中各种因素对结果的干扰，既简单又高效。
Torch检查
Torch检查Torch检查是一种常见的医学检查方法，用于评估妇科疾病和感染。
本文将详细介绍Torch检查的定义、目的、操作步骤和结果解读。
一、定义：Torch检查是一种通过检测人体血液中的特定抗体或病原体DNA来判断是否感染了某些特定的病原体的检查方法。
Torch是英文单词Toxoplasma（弓形虫）、Others（其他病原体）、Rubella（风疹）、Cytomegalovirus（巨细胞病毒）和Herpes（单纯疱疹病毒）的首字母缩写。
二、目的：Torch检查的主要目的是诊断妇科疾病和感染，特别是在孕妇中进行，以确保胎儿的健康。
通过检测特定的抗体或病原体DNA，可以判断是否感染了弓形虫、风疹、巨细胞病毒和单纯疱疹病毒等病原体，及时采取相应的治疗措施，以减少胎儿的感染风险。
三、操作步骤：1. 采集血样：首先，医务人员会选择合适的采血部位，通常是患者的前臂。
然后，用消毒棉球清洁采血部位，再用一次性采血针抽取适量的血液样本。
2. 样本处理：将采集到的血液样本转移到试管中，并加入适量的抗凝剂，如EDTA。
轻轻摇匀试管，确保血液与抗凝剂充分混合。
3. 实验操作：将处理后的血液样本送往实验室进行Torch检测。
实验室技术人员会使用特定的试剂盒和设备，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）或聚合酶链反应（PCR）等方法，检测血液中是否存在特定的抗体或病原体DNA。
4. 结果解读：实验室将根据检测结果生成报告。
报告中会详细说明每种病原体的检测结果，包括阳性或阴性，以及抗体滴度或病原体DNA的浓度。
阳性结果表示感染，而阴性结果表示未感染。
四、结果解读：1. 弓形虫（Toxoplasma）：阳性结果可能意味着感染了弓形虫，需要进一步的检查和治疗。
阴性结果表示未感染，但不能完全排除感染的可能性。
2. 其他病原体（Others）：这一项通常涵盖了其他一些常见的病原体，如巨细胞病毒、风疹和单纯疱疹病毒等。
阳性结果表示感染了这些病原体之一，需要进一步的检查和治疗。
TORCH检测方法
二、TORCH病原体的检测方法与结果分析
1、检测方法 检测TORCH病原体，临 床 常 用 方 法 是 聚 合 酶 链 反 应 （ PCR ） ， 又 称 体外酶促基因扩增法。
当温度突然降低时由于模板DNA的分子结 构较引物要复杂的多，而且反应体系中引 物DNA的量大大多于模板DNA，使引物和 其互补的模板在局部形成杂交链，而模板 DNA之间互补的机会较少。③ 引物的延伸： 在DNA聚合酶和四种脱氧核糖三磷酸底物 及Mg2存在的条件下，模板-引物结合物， 合成一条新的与模板DNA链互补的半保留 复制链。以上三步为一循环，每一循环的 产物可以作为下一个循环的模板。这样反 复循环以上反应过程就能将待测目的基因 数量呈指数倍数扩增放大几百万倍。
＋ ＋ 原发性感染或再感染
孕妇血清中IgM 阳性是诊断活动性感染重 要而可靠的指标，但由于它实际检测的是人体 对TORCH感染的免疫反应状态，因此对那些处 于潜伏状态不排毒的孕妇，或免疫系统发育不 完善的孕妇，易出现漏检。
随着分子生物学技术的发展，根据检测病 原体DNA 或RNA 的水平对感染进行诊断就更 为直接，并越来越受到围产医学界的关注。
荧光定量基因扩增技术的优点是 特异性强，克服了假阳性的主要来源， 可准确定量出低至1个拷贝/微升的病 原体，真实地反映了病人体内病毒存 在与复制的情况，可减少血清学所致 的假阴性诊断。
2、结果分析 病原体DNA或RNA的 存在是病原体体内复制的直接标志，可 用于确定病原体感染。
阳性定量范围为103 —109 copies/ml， ＜103 copies/ml为阴性。
ToRCH十项 孕前孕期不容错过的检测
ToRCH十项，孕前孕期不容错过的检测！近日，由北京妇产医院牵头的国家重点研发计划生殖重点专项——“建立出生人口队列开展重大出生缺陷风险研究”项目正式启动。
项目拟建立覆盖我国七大区、50万人规模的孕前-孕早期出生人口队列及生物样本库，制定出生缺陷监控方案和实施路径，从而降低出生缺陷的发生率，提高出生人口素质。
项目负责人、北京妇产医院副院长阴赪宏介绍，出生缺陷是导致孕早期流产、死胎、死产、新生儿和婴幼儿夭折的重要原因，可由染色体畸变、基因突变等遗传因素或环境因素引起，也可由这两种因素交互作用或其他不明原因所致。
ToRCH病原体组合（To-弓形虫，Toxo；R-风疹病毒，Rub；C-巨细胞病毒，CMV；H-单纯疱疹病毒I/II，HSV I/II）的感染是明确的可导致宫内感染和出生缺陷的因素。
《国家人口和计划生育委员会关于开展出生缺陷一级预防工作的指导意见》和《国家人口和计划生育委员会优生促进工程实施方案》明确规定把TORCH检测做为孕前优生健康检查的基本必查项目；中华医学会妇产科学分会产科组《孕前和孕期保健指南》（以下称《指南》）将TORCH筛查列为孕前3个月首选备查项目。
《指南》提示强调，筛查实验IgG、IgM 应同时做，原因在于：有部分人发生感染后体内持续多年IgM 表达，往往IgM 水平保持较低的稳定水平，常伴有IgG阳性且亦保持稳定水平，此时若单独只检测IgM 则会造成误判。
此外，由于免疫学检测难免的干扰因素、交叉反应及HAMA效应的存在，也可能会有IgM假阳性的情况发生。
通过同时检测IgG可在很大程度上对这一问题进行纠正。
ToRCH检测的方法ToRCH检测分直接指标的检测和间接指标检测。
直接指标主要对病原体核酸、病毒抗原或通过对病毒培养进行检测，检测的是病毒本身，主要适用于诊断，但其诊断的灵敏度较差。
间接指标主要对病原体的IgG/IgM抗体及IgG抗体的亲和力进行检测，是筛查和免疫状态评估的适用方法。
抗体亲和力检测方法
抗体亲和力检测方法
抗体亲和力检测方法有多种，以下是其中一些常见的：
1. ELISA法：酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,简称ELISA)是一种常用的抗体亲和力检测方法。
该方法利用特异性抗原与待测抗体之间的结合反应来测定抗体的亲和力。
在ELISA中，将待测抗体与已知浓度的抗原混合后加入微孔板中，然后用酶标记的二抗或底物进行反应，最后通过测量吸光度值来确定待测抗体的亲和力。
2. SPR法：表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance,简称SPR)是一种基于光学原理的抗体亲和力检测方法。
该方法利用金属薄膜表面的等离子体共振现象来检测分子间的相互作用。
在SPR中，将待测抗体和已知浓度的抗原分别注入到两个不同的通道中，然后通过测量反射光强度的变化来确定待测抗体的亲和力。
3. Biacore法：Biacore是一种基于表面等离子共振技术的高通量筛选平台，可以同时检测多个样品中的抗体亲和力。
在Biacore中，将待测抗体和已知浓度的抗原分别注入到不同的通道中，然后通过测量反射光强度的变化来确定待测抗体的亲和力。
4. FRET法：荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,简称FRET)是一种基于荧光共振能量转移原理的抗体亲和力检测方法。
该方法利用荧光标记的抗原和待测抗体之间的相互作用来测定抗体的亲和力。
在FRET中，将待测抗体和已知浓度的抗原分别注入到两个不同的通道中，然后通过测量荧光信号的变化来确定待测抗体的亲和力。
Torch检查
Torch检查Torch检查是一种常见的临床检查方法，用于评估神经系统的功能和结构。
本文将详细介绍Torch检查的标准格式，包括背景介绍、检查步骤、结果解读和注意事项等内容。
【背景介绍】Torch检查是一项重要的婴幼儿出生缺陷筛查项目，其名称来源于四种常见的感染病原体，即弓形虫（Toxoplasma）、风疹病毒（Rubella）、巨细胞病毒（Cytomegalovirus）和单纯疱疹病毒（Herpes simplex virus）。
这些感染病原体在孕妇感染后可通过胎盘传播至胎儿，引发各种出生缺陷和神经系统疾病。
【检查步骤】1. 采集样本：通常在婴儿出生后的24小时内采集脐带血样本，或在婴儿出生后1个月内采集口腔黏膜拭子样本。
2. 实验室检测：将采集到的样本送往专业实验室进行检测，常用的方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、聚合酶链反应（PCR）等。
3. 结果解读：根据实验室检测结果，判断是否存在感染病原体的阳性反应。
阳性结果可能需要进一步的确认和诊断。
【结果解读】1. 阳性结果：表示婴儿体内存在感染病原体的抗体或核酸，可能需要进一步的诊断和治疗。
2. 阴性结果：表示婴儿体内未检测到感染病原体的抗体或核酸，一般情况下可以排除感染的可能性。
【注意事项】1. 采样时间：最好在婴儿出生后的24小时内采集脐带血样本，或在婴儿出生后1个月内采集口腔黏膜拭子样本。
2. 采样方法：采集脐带血样本时，需使用无菌的采血针和采血管，避免污染。
采集口腔黏膜拭子样本时，应使用无菌的拭子进行采集。
3. 检测准确性：Torch检查结果的准确性与实验室的设备和技术水平密切相关，选择正规的医疗机构进行检测，以确保结果的准确性。
4. 随访和治疗：阳性结果需要及时就诊，接受进一步的诊断和治疗，以减少或避免婴儿出生缺陷和神经系统疾病的发生。
总结：Torch检查是一项重要的婴幼儿出生缺陷筛查项目，通过检测感染病原体的抗体或核酸，评估婴儿是否存在感染的风险。
TORCH检测结果解读与临床建议
吕时铭，医学博士浙江大学医学院 教授，博士生导师浙江大学医学院附属妇产科医院 主任医师。
浙江省预防医学会出生缺陷预防与控制专业委员会 主任委员； 浙江省医师协会检验医师分会 会长；浙江省抗癌协会肿瘤标志物专业委员会 主任委员 浙江省医学会检验医学分会 前任主任委员； 浙江省抗癌协会第七届理事会 理事 浙江省医学会第八届理事会理事； 浙江省医师协会 第三届理事会理事中国优生科学协会出生缺陷预防专业委员会 副主任委员； 中国妇幼保健协会出生缺陷防治与分子遗传分会 副主任委员。
1982年毕业于浙江大学医学院（原浙江医科大学）医疗系，从事妇产科学教学、科研与临床工作30余年。
1999年到检验科工作，学科领域从妇产科学兼跨检验诊断学，研究方向为出生缺陷的产前诊断，对产前诊断的技术开发与应用有较多的研究。
长期从事妇产科内分泌临床工作，对妇产科内分泌疾病的诊治有丰富的临床经验；对出生缺陷、优生优育、产前筛查、遗传咨询有独到见解与临床解决方案。
TORCH 检测结果解读与临床建议浙江大学医学院附属妇产科医院吕时铭T oxoplasma （弓形虫）o ther infetions ( 细小病毒 B19、沙眼衣原体、柯萨奇病毒、梅毒螺旋体、水痘等) R ubella virus （风疹病毒） C ytomegalovirus （巨细胞病毒） H erpes Simplex virus （单纯疱疹病毒）ToRCH 的含义•“ToRCH ”由Nahmia 于1971年撰造，专指孕期的各种微生物感染 •孕妇为孕妇为易感人群，感染后症状不明显 •原发或继发感染后易通过胎盘或产道传染给胎儿 •可能对胎儿影响重大，导致流产、早产、死胎、畸形等宫内感染产时感染 ToRCH 的含义3124人巨细胞病毒感染胎儿的自然进程大多数情况下，面对外来病原体，胎盘可以起到有效的保护作用。
但是某些病原体可以通过血流传播，也具备穿透胎盘屏障的能力。
Torch检查
Torch检查Torch检查是一种常见的医学检查方法，用于评估甲状腺功能和诊断相关疾病。
本文将详细介绍Torch检查的标准格式文本，包括定义、目的、适应症、检查方法、结果解读和注意事项等方面。
【定义】Torch检查是一种通过检测体内特定抗体和病毒感染的方法，以评估胎儿和新生儿是否受到特定病原体的感染。
Torch是指弓形虫（Toxoplasma）、梅毒（Treponema pallidum）、风疹病毒（Rubella）、巨细胞病毒（Cytomegalovirus）和单纯疱疹病毒（Herpes simplex）的首字母缩写。
【目的】Torch检查的主要目的是早期发现和诊断胎儿和新生儿感染，以便及时采取相应的治疗和干预措施。
通过检测特定抗体和病毒感染，可以评估胎儿是否受到感染，并匡助医生制定合理的治疗方案。
【适应症】Torch检查适合于以下情况：1. 孕妇怀孕期间接触了患有弓形虫、梅毒、风疹病毒、巨细胞病毒或者单纯疱疹病毒的患者；2. 孕妇在怀孕期间浮现了相关病毒感染的症状，如发热、皮疹等；3. 胎儿或者新生儿浮现了相关病毒感染的症状，如发育迟缓、黄疸等。
【检查方法】Torch检查普通包括以下几个方面的检测：1. 弓形虫抗体检测：通过血清学检测方法，检测孕妇体内的弓形虫特异性抗体（IgM和IgG）水平，以评估感染情况。
2. 梅毒血清学试验：通过血清学检测方法，检测孕妇体内的梅毒抗体（如梅毒螺旋体特异性抗体）水平，以评估感染情况。
3. 风疹病毒抗体检测：通过血清学检测方法，检测孕妇体内的风疹病毒特异性抗体（IgM和IgG）水平，以评估感染情况。
4. 巨细胞病毒抗体检测：通过血清学检测方法，检测孕妇体内的巨细胞病毒特异性抗体（IgM和IgG）水平，以评估感染情况。
5. 单纯疱疹病毒抗体检测：通过血清学检测方法，检测孕妇体内的单纯疱疹病毒特异性抗体（IgM和IgG）水平，以评估感染情况。
【结果解读】Torch检查的结果需要由专业医生解读，普通包括以下几个方面的评估：1. 弓形虫抗体检测结果：阳性表示孕妇体内存在弓形虫感染，阴性表示孕妇未感染或者感染已过去。
TORCH的检测
这组病原体感染有着共同的特征，即可造成母婴 感染。孕妇由于内分泌改变和免疫力下降易发生原发 感染，既往感染的孕妇体内潜在的病毒也容易被激活 而发生复发感染。孕妇发生病毒血症时，病毒可通过 胎盘或产道传播感染胎儿，引起早产、流产、死胎或 畸胎等。以及引起新生儿多个系统、多个器官的损害， 造成不同程度的智力障碍等症状。特别在怀孕初的三 个月胚胎处于器官形成期，此时受病毒感染，可破坏 细胞或抑制细胞的分裂和增殖。器官形成期以后感染 病毒，可破坏组织和器官机构，并形成持续感染，出 生后继续排毒，能引起相应的病变。
流行病学
弓形虫人群感染相当普遍，血清学调查国 外人群抗体阳性率为25~50%，少数地区可 达80%以上。我国较大规模调查显示，人 群血清抗体阳性率为0.329%~11.793%，平 均5.3%。家畜阳性率可达10%~50%。
风疹病毒感染
• 风疹病毒主要通过呼吸道感染引起风疹。 • 风疹病毒易发生垂直感染。若孕妇妊娠早 期感染风疹病毒，病毒可通过胎盘感染胎 儿，引起流产或死胎，还可导致胎儿发生 先天性风疹综合征（CRS），引起胎儿畸 形。
酶联免疫吸附试验（ELISA）
HSV-Ⅱ型IgG抗体检测原理： • 采用HSV-Ⅱ型重组抗原包被微孔板 • 加入待测标本，当标本中存在HSV-Ⅱ型IgG抗体 时，该抗体与包被的HSV-Ⅱ型抗原结合 • 加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗人IgG结 合，形成HSVⅡ 抗原—HSVⅡ抗体—HRP-抗人 IgG复合物 • 加入A、B底物显色，显色程度直接反映标本抗体 的量
巨细胞病毒感染
• 巨细胞病毒可由唾液、尿液及子宫颈分泌 物中排出。密切接触、飞沫、经口、输血 等都可以感染。 • 巨细胞病毒是能引起先天性感染（胎儿的 宫内感染）的主要病毒之一。
抗体亲和力binding elisa范围
抗体亲和力binding elisa范围抗体亲和力binding ELISA是一种常用的实验方法，用于测量抗体与其结合物的亲和力。
亲和力是指抗体与其结合物之间的力量，可以定量地描述这种结合的强弱程度。
这种实验方法广泛应用于生物医学研究、药物研发和临床诊断等领域。
本文将介绍抗体亲和力ELISA 的范围及相关应用。
抗体亲和力ELISA是通过将抗体固定在固相载体上，然后加入其相应的结合物（一般是抗原或配体）并测量它们之间的结合强度来进行的。
抗体与结合物结合后，可以用底物或荧光染料等方法来测量结合产物的生成量，从而确定抗体与结合物之间的亲和力。
这种方法可以定量地描述抗体与结合物之间的相互作用，并评估它们之间的结合强度。
抗体亲和力ELISA的范围很广，可以用于测量各种类型的抗体与其结合物之间的亲和力。
例如，可以用于测量单克隆抗体与抗原之间的亲和力，以评估抗体的结合能力和特异性。
此外，抗体亲和力ELISA还可以用于研究受体与配体之间的相互作用，进一步理解细胞信号传导的机制。
在药物研发领域，抗体亲和力ELISA可以用于筛选和评估药物候选物与靶标之间的结合强度。
有时候，药物候选物的亲和力与靶标直接相关，可以作为衡量其效力的指标。
抗体亲和力ELISA可以帮助药物研究人员选择合适的候选物，并评估其与靶标之间的相互作用。
此外，抗体亲和力ELISA还可以用于研究药物与蛋白质结合位点的相互作用，为药物的结构优化提供重要信息。
在临床诊断中，抗体亲和力ELISA可以用于检测特定抗体与其结合物之间的亲和力，以辅助疾病的诊断和监测。
例如，可以通过测量特定抗体与相应抗原之间的亲和力，来检测某些自身免疫性疾病的发生和发展。
此外，抗体亲和力ELISA还可以用于检测感染性疾病中抗体与病原体之间的亲和力，从而判断患者是否感染了某种病原体。
除了以上应用之外，抗体亲和力ELISA还可以用于研究蛋白质相互作用网络和信号传导通路的复杂性。
通过测量不同蛋白质之间的亲和力，可以了解它们在细胞内的相互作用方式和功能调控机制。
抗体亲和力常数测定
抗体亲和力常数测定
抗体亲和力常数的测定是评估抗体结合能力的重要指标之一。
亲和力常数是指抗体与抗原结合的稳定程度，通常用解离常数（Kd）来表示。
以下是一种常用的抗体亲和力常数测定方法：
1. 将抗原固定在固相载体上，如ELISA 板。
2. 将不同浓度的抗体加入到含有固定抗原的微孔中，孵育一段时间，使抗体与抗原结合。
3. 洗涤未结合的抗体。
4. 加入标记有放射性或荧光染料的抗原，孵育一段时间，使标记抗原与结合在抗体上的抗原结合。
5. 洗涤未结合的标记抗原。
6. 测定微孔中的放射性或荧光强度。
7. 以抗体浓度为横坐标，以结合的标记抗原的放射性或荧光强度为纵坐标，绘制剂量反应曲线。
8. 根据剂量反应曲线，计算出抗体的亲和力常数（Kd）。
抗体亲和力常数的测定可以帮助研究人员了解抗体的结合能力和特异性，为抗体的筛选和优化提供重要的参考信息。
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回顾性检测前三个月样本
高度传染性
IgG-IgM- 和IgG-IgM+
可
进
一
步
复发 低传染性
IgG+ IgM-
Munro SC, et al.
检
测
J Clin microbiol,
高度传染性
IgG+ IgM+ 低亲和力IgG
2005,43:4713-4718
无需进一步检测
IgG+ IgM+ 高亲和力IgG
对IgM抗体阳性或可疑的样本，进行IgG抗体亲和力检测很有 价值，如果IgG抗体为低亲和力，再进行羊水穿刺PCR检测是 合适的选择。
对生殖器疱疹患者的单纯疱疹病毒IgG抗体亲和力检测可以区 分原发和复发感染。
使用敏感方法检测TORCH IgG/IgM
IgG- IgM孕期卫生教育
IgG+ IgM-
波长读数。 结果计算：亲和力指数=解离缓冲液孔OD值/对照缓冲液孔 OD值×100%
加样模式
BIOMEX血清转化盘48份样本的亲和力与 感染时间的关系
RV 血 清 转 化 盘
BIOMEX 48份血清转化盘的感染时间小于80天，其中33份样 本为IgG阳性，均为低亲和力，灵敏度为100%。
CMV 血 清 转 化 盘
，雅培，索林和梅里埃等很多厂家的抗体亲和力试剂盒都获得了FDA 或CE认证，用于TORCH感染的辅助诊断。 巨细胞病毒和弓形虫抗体亲和力检测应用普遍。 各厂家试剂盒的检测结果存在差异。
抗体亲和力检测方法
通过解离剂将低亲和 力抗体解离掉。
通过中和抗原将高亲 和力抗体中和掉。
国内获得批准文号的产品及方法
图1：安图试剂盒CMV-IgG抗体亲和力水平随感染时间的变化
亲和力
70 60 50 40 30 20 10
0 0
安图IgG亲和力与感染时间关系
20
40
60
80
100
120
140
感染时间
安图试剂 盒在感染 100天后检 测基本为 高亲和力
图2：Abbott ATCHIT试剂盒CMV-IgG抗体亲和力水平随感染时间的变化
IgG+ IgM+
无需进一步检测
IgG- IgM+ 让患者3周后再检测
孕期≤20周
IgG亲和力检测
高亲和力
无需进一步检测
母体病毒血症评估： 尿液PCR、血液PCR
胎儿健康度评估： 超声、MRI
侵入性检测：羊膜穿 刺、定量PCR 超声、MRI
低亲和力
孕期＞20周 IgG亲和力检测
高亲和力
案例分析1
高度传染性
TORCH-IgG抗体亲和力检测
郑州安图生物工程股份有限公司
提纲
抗体亲和力定义 TORCH抗体亲和力检测的意义 TORCH抗体亲和力检测的现状 安图TORCH抗体亲和力检测试剂盒
抗体亲和力（Avidity）的定义
抗体亲和力是整个抗体分子与抗原表位之间结合
强度，即抗体的结合部位与相应抗原决定簇之间
的非共价引力与斥力之和。
抗体亲和力成熟理论
初次感染产生的抗体为低亲和力抗体，随着时间的推移，体内 抗体逐渐成熟为高亲和力的抗体，一般需要3-6个月时间。
◆ 模板学说 （Template theory） ◆ 克隆选择学说 （Clonal selection theory）
模板学说 （Template theory）
判断原发感染或复发感染 判断原发感染发生的时间 TORCH规范化检测流程的重要环节
对于巨细胞病毒IgM抗体阳性的样本，需要结合IgG抗体 亲和力的结果进行分析。帕洛艾尔托医疗基金会弓形 虫确认实验室，将弓形虫IgG亲和 力抗体检测列为确认方法之一， 用于排除假阳性及非急性感染。
安图TORCH抗体亲和力检测试剂盒
第一个国产TORCH五项抗体亲和力检测试剂盒（2013年获得批准文号） 国家十二五规划 863课题项目之一 产品设计兼顾IgG检测灵敏度和高值样本OD值不超限 产品原理：解离剂法 产品方法：ELISA 样本稀释： 1/100孔外稀释 反应模式：30分钟-10分钟-30分钟-10分钟 加样量： 稀释后样本、对照缓冲液、解离缓冲液、酶结合物均100ul/孔。 波长设置： 450/620nm双波长读数，如果样本OD值>3.0，用405/620nm双
无需进一步检测
IgG+ IgM+ 高亲和力IgG
TORCH抗体亲和力检测现状
试剂盒检测原理：解离剂法和抗原中和法，解离剂法是主流方法。 试剂盒检测方法：酶联免疫法、自动化化学发光法，酶联免疫法较多
。 国内，对TORCH亲和力研究较少，仅有少量的文献报道了IgG亲和力
检测的临床意义，在临床上还没有得以真正运用。 国外，对TORCH IgG亲和力强弱与感染时间的关系做了许多研究工作
免疫系统在按照抗原（模版）来制造更高亲和力的抗体
克隆选择学说 （Clonal selection theory）
免疫系统对高亲和力抗体的筛选过程
原发 感染
体细胞高频突
变
B
Y
YYYYYYYYYY
B
YYYY Y
YY B
B
B
B
TORCH抗体亲和力检测的意义
胎儿出生缺陷的风险与原发感染/复发感染、感染发 生的时间、孕周密切相关
低亲和力
孕期＞20周 IgG亲和力检测
高亲和力
案例分析 2
高度传染性
回顾性检测前三个月样本
高度传染性
IgG-IgM- 和IgG-IgM+
可
进
一
步 检
复发 低传染性
IgG+ IgM-
Munro SC, et al.
测
高度传染性
IgG+ IgM+ 低亲和力IgG
J Clin microbiol,
2005,43:4713-4718
使用敏感方法检测TORCH IgG/IgM
IgG- IgM孕期卫生教育
IgG+ IgM-
IgG+ IgM+
无需进一步检测
IgG- IgM+ 让患者3周后再检测
孕期≤20周
IgG亲和力检测
高亲和力
无需进一步检测
母体病毒血症评估： 尿液PCR、血液PCR
胎儿健康度评估： 超声、MRI
侵入性检测：羊膜穿 刺、定量PCR 超声、MRI
亲和力
50 45 40 35 30 25 20 15 10
5 0
0
Abbott IgG亲和力与感染时间关系
20
40
60
80
100
120
140
感染时间
Abbott ATCHIT试 剂盒在感 染后120天 仍为低亲 和力。
IgG + IgM - 既往感染样本评价
共同推进TORCH检测的规范化
2012年以后批准上市
国外批准上市的主要厂家及方法
巨细胞病毒亲和力试剂盒检测结果比较
Radim、Euroimmun与临床的符合率优于其他厂家，安图产品 研发以Radim为参比试剂盒。
安 图 标 杆
弓形虫亲和力试剂盒检测结果比较
各厂家检测结果差异不大 低亲和力结果可能不是急性感染 高亲和力结果可以排除急性感染