抗体亲和力与亲合力的区别AffinityandAvidityofAntibodies.pdf
临床免疫学检验名词解释
抗原抗体反应：是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力，其中疏水作用力最强，它是在水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。
亲和性（affinity）：是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位（AD）之间的结合强度，取决于两者空间结构的互补程度。
亲合力（avidity）：是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度，它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。
抗原抗体反应的特点：特异性、可逆性、比例性、阶段性。
带现象（zone phenomenon）：一种抗原-抗体反应的现象。
在凝集反应或沉淀反应中，由于抗体过剩或抗原过剩，抗原与抗体结合但不能形成大的复合物，从而不出现肉眼可见的反应现象。
抗体过量称为前带，抗原过量称为后带。
免疫原（immunogen）：是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
免疫佐剂（immuno adjustvant）：简称佐剂，是指某些预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
半抗原（hapten）：又称不完全抗原，是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性)，而单独不能诱导抗体产生（无免疫原性）的物质。
当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。
载体（carrier）：结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。
载体效应：初次免疫与再次免疫时，只有使半抗原结合在同一载体上，才能使机体产生对半抗原的免疫应答，该现象称为~。
单克隆抗体（McAB）：将单个B细胞分离出来，加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，即~。
多克隆抗体（PcAb）：天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位，以该抗原物质刺激机体免疫系统，体内多个B细胞克隆被激活，产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白，即~基因工程抗体（GEAb）：是利用DNA重组及蛋白工程技术，从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。
抗体的亲和力与亲合力
Affinity and Avidity of AntibodiesAntibody AffinityAffinity measures the strength of interaction between an epitope and an antibody’s antigen binding site. It is defined by the same basic thermodynamic principles that govern any reversible biomolecular interaction:o K A= affinity constanto[Ab]= molar concentration of unoccupied binding sites on the antibodyo[Ag]= molar concentration of unoccupied binding sites on the antigeno[Ab-Ag]= molar concentration of the antibody-antigen complexIn other words, K A describes how much antibody-antigen complex exists at the point when equilibrium is reached. The time taken for this to occur depends on rate of diffusion and is similar for every antibody. However, high-affinity antibodies will bind a greater amount of antigen in a shorter period of time than low-affinity antibodies. K A can therefore vary widely for antibodies from below 105mol-1to above 1012mol-1, and can be influenced by factors including pH, temperature and buffer composition.The affinity of monoclonal antibodies can be measured accurately because they are homogeneous and selective for a single epitope. Polyclonal antibodies are heterogeneous and will contain a mixture of antibodies of different affinities recognizing several epitopes – therefore only an average affinity can be determined.Antibody AvidityAvidity gives a measure of the overall strength of an antibody-antigen complex. It is dependent on three major parameters:o Affinity of the antibody for the epitope (see above)o Valency of both the antibody and antigeno Structural arrangement of the parts that interactAll antibodies are multivalent e.g.IgGs are bivalent and and IgMs are decavalent. The greater an immunoglobulin’s valency (number of antigen binding sites), the greater the amount of antigen it can bind. Similarly, antigens can demonstrate multivalency because they can bind to more than one antibody. Multimeric interactions between an antibody and an antigen help their stabilization.A favorable structural arrangement of antibody and antigen can also lead to a more stable antibody-antigen complex as illustrated in Figures 1 and 2.Figure 1.An immobilized antigen (a high local concentration of available epitopes) provides more opportunity for the antibody-antigen complex to form than free antigen in solution over the same time period. Once the first antigen binding arm of an antibody attaches to an antigen on a solid support, the chances of a bivalent interaction are greatly improved. Many immunoassays like Western blotting and ELISA exploit this principle.Figure 2.When an antigen is mixed with a polyclonal antibody, multivalent interactions may lead to large, stable (high avidity) structures being formed. This is because the antigen may be bound by several antibodies, each recognizing a different epitope. Polyclonal antibodies are therefore ideal for immunoprecipitation experiments.Further Useful ReadingHow we improve the affinity of our recombinant monoclonal antibodies generated using HuCAL technology through affinity maturation。
抗原抗体反应及其应用
24
3、酶免疫技术
将待测抗原或抗体吸附于固相表面（聚苯乙烯微量反应板），与酶标 记的抗体或抗原反应后，加入底物反应（显色或发光）的分析方法。
酶标板吸附 抗原或抗体
显色反应
洗涤
加入酶标抗体或抗原
加入酶作用底物
Ag-Ab酶 或
Ab-Ag酶
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方法 （1）直接法（可检测抗原或抗体）：
酶标板吸附 抗原或抗体
Thanks
谢谢聆听பைடு நூலகம்
免疫标记技术是用荧光素、放射性同位素、酶等标记抗体或抗 原等所进行的抗原抗体反应。
特点：敏感度高 特异性强 快速 容易观察 能进行定性、定量、定位检测等
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1、荧光免疫技术
将结合有荧光素的荧光抗体进行抗原抗体反应的技术。 常用的荧光素有异硫氰酸荧光素（FITC)和罗丹明（RB200)等。它们可 与抗体球蛋白中赖氨酸的氨基结合，在蓝紫光激发下，可分别出现鲜明 的黄绿色及玫瑰红色。
内容
一、抗原抗体反应的基本原理 二、抗原抗体反应的类型 三、免疫标记技术的应用
一、抗原抗体反应的基本原理
抗原抗体反应
3
抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗原抗体反应。
Ag
（） 如同钥匙和锁的关系
Ab
（）
5
抗原抗体反应的原理
抗原抗体反应的原理 1、抗原抗体结合力（4种） 2、抗原抗体亲和力和亲合力 3、亲水胶体转化疏水胶体
9
1、抗原抗体结合力 --疏水作用力（hydrophobic interactions）
水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的 排斥而趋向聚集的力。作用力最强，占总结合力的50％。
10
1、抗原抗体结合力
静电引力：异性相吸 （electrostatic forces），离子键 （Ionic bond） 范德华引力: 作用最小 （van der Waals interactions） 氢键: 最具特异性 （hydrogen bond ） 疏水作用力: 作用最大 （hydrophobic interactions）
抗体亲和力与亲合力的区别Affinity and Avidity of Antibodies
Affinity and Avidity of AntibodiesAntibody AffinityAffinity measures the strength of interaction between an epitope and an antibody’s antigen binding site. It is defined by the same basic thermodynamic principles that govern any reversible biomolecular interaction:o K A= affinity constanto[Ab]= molar concentration of unoccupied binding sites on the antibodyo[Ag]= molar concentration of unoccupied binding sites on the antigeno[Ab-Ag]= molar concentration of the antibody-antigen complexIn other words, K A describes how much antibody-antigen complex exists at the point when equilibrium is reached. The time taken for this to occur depends on rate of diffusion and is similar for every antibody. However, high-affinity antibodies will bind a greater amount of antigen in a shorter period of time than low-affinity antibodies. K A can therefore vary widely for antibodies from below 105mol-1to above 1012mol-1, and can be influenced by factors including pH, temperature and buffer composition.The affinity of monoclonal antibodies can be measured accurately because they are homogeneous and selective for a single epitope. Polyclonal antibodies are heterogeneous and will contain a mixture of antibodies of different affinities recognizing several epitopes – therefore only an average affinity can be determined.Antibody AvidityAvidity gives a measure of the overall strength of an antibody-antigen complex. It is dependent on three major parameters:o Affinity of the antibody for the epitope (see above)o Valency of both the antibody and antigeno Structural arrangement of the parts that interactAll antibodies are multivalent e.g.IgGs are bivalent and and IgMs are decavalent. The greater an immunoglobulin’s valency (number of antigen binding sites), the greater the amount of antigen it can bind. Similarly, antigens can demonstrate multivalency because they can bind to more than one antibody. Multimeric interactions between an antibody and an antigen help their stabilization.A favorable structural arrangement of antibody and antigen can also lead to a more stable antibody-antigen complex as illustrated in Figures 1 and 2.Figure 1.An immobilized antigen (a high local concentration of available epitopes) provides more opportunity for the antibody-antigen complex to form than free antigen in solution over the same time period. Once the first antigen binding arm of an antibody attaches to an antigen on a solid support, the chances of a bivalent interaction are greatly improved. Many immunoassays like Western blotting and ELISA exploit this principle.Figure 2.When an antigen is mixed with a polyclonal antibody, multivalent interactions may lead to large, stable (high avidity) structures being formed. This is because the antigen may be bound by several antibodies, each recognizing a different epitope. Polyclonal antibodies are therefore ideal for immunoprecipitation experiments.Further Useful Readingo How we improve the affinity of our recombinant monoclonal antibodies generated using HuCAL® technology through affinity maturation。
亲合力
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尿素处理时间长短可影响AI的高低，尤其是低AI的标本会因为变性时间不足而得出明显高于真实的AI值。国 内的研究在检测抗HCMV-IgG AI时多采用简化的洗脱法，认为取50%为判断近期原发感染的界值。经比较2种方法 分别检测8份血浆的结果，温育法检测的AI低于洗脱法，但无显著性差异，说明温育法(变性孔尿素终浓度4mol/L) 与该洗脱法具有相近的使低亲合力抗体变性的能力。由此本研究采用Hedman对于AI的解释，以AI<30%判断近期原 发感染，以AI>30%排除近期原发感染，判断为既往感染或再发感染。
抗HCMV-IgG浓度过高时包被抗原相对不足，存在过剩的IgG，此时由于高亲合力的IgG在尿素的作用下仍然能 与包被抗原结合，而非变性孔IgG与包被抗原的结合已经饱和，所测得的A值相对恒定，因此影响AI测定，得出较 高的AI值。这与K li-mashevskaya等的报道一致。而Dangel等却认为高浓度的IgG会引起错误的低AI值结果，可 能与实验方法及试剂的不同有关。而在检测血浆抗HC-MV-IgG浓度约100 IU/mL的AI时，AI值随稀释倍数不同出 现一定的波动，但不影响结果的判断。
HSCs是肝纤维化形成过程中合成细胞外基质的最主要细胞，肝纤维化恢复期，凋亡的HSCs明显增多。实验证 明，在CCl4造成大鼠肝纤维化模型后的自动恢复过程中，HSCs凋亡是中心事件。所以，抑制HSCs增殖、诱导其凋 亡是抗肝纤维化的重要策略。Takahashi等报道，NGFR是细胞膜受体，存在于多种细胞表面。
临床免疫学检验名词解释重要知识点上
抗原抗体反应：是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力，其中疏水作用力最强，它是在水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。
亲和性（affinity）：是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位（AD）之间的结合强度，取决于两者空间结构的互补程度。
亲合力（avidity）：是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度，它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。
抗原抗体反应的特点：特异性、可逆性、比例性、阶段性。
带现象（zone phenomenon）：一种抗原-抗体反应的现象。
在凝集反应或沉淀反应中，由于抗体过剩或抗原过剩，抗原与抗体结合但不能形成大的复合物，从而不出现肉眼可见的反应现象。
抗体过量称为前带，抗原过量称为后带。
免疫原（immunogen）：是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
免疫佐剂（immuno adjustvant）：简称佐剂，是指某些预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
半抗原（hapten）：又称不完全抗原，是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性)，而单独不能诱导抗体产生（无免疫原性）的物质。
当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。
载体（carrier）：结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。
载体效应：初次免疫与再次免疫时，只有使半抗原结合在同一载体上，才能使机体产生对半抗原的免疫应答，该现象称为~。
单克隆抗体（McAB）：将单个B细胞分离出来，加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，即~。
多克隆抗体（PcAb）：天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位，以该抗原物质刺激机体免疫系统，体内多个B细胞克隆被激活，产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白，即~基因工程抗体（GEAb）：是利用DNA重组及蛋白工程技术，从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。
免疫检验考试辅导：抗血清的特性鉴定
根据不同目的制备的抗血清，对其中所含抗体的浓度，特异性及免疫球蛋白种类的要求也不一样。
为了获得质量和数量上合符要求的抗血清，在收集动物血清前必须对免疫效果进行检测，对收获后的抗血清也必须对—些参数进行分析，如效价、亲和力及交叉反应等。
根据不同的抗原性质选用合适的检测方法。
最常用的为免疫沉淀，ELISA，放射免疫等。
效价又称滴度（titer），是常用于表达抗血清中特异性抗体相对含量的—个半定量指标，即在给定的条件下，结合—定量抗原的抗血清的稀释度。
抗血清经一系列稀释后（如倍比稀释）与定量的抗原反应，以能检测抗血清最大稀释倍数即为该抗血清的效价。
不同的检测方法测定同一种抗血清的效价，灵敏度不一样，抗血清的效价也不一样，如沉淀反应（琼脂双扩散）与ELISA二者的效价相差甚大，后者远高于前者。
放射免疫分析（RIA）常用于标记小分子抗原来检测抗血清的效价。
亲和力（affinity）表示抗血清与相应抗原的结合强度，是描述抗体持异性的重要指标，常用亲和常数K表示。
亲和常数K与抗原抗体反应的平衡常数有关：
抗体特异性与交叉反应：抗体是特异的。
只与相应抗原反应。
实际制备的抗体却常有非特异性反应，这是因为抗原不纯造成的。
多组分抗原之间存在共同的抗原决定簇，或者两个抗原决定簇结构类似能与同一抗体结合，均可出现抗体与异源抗原的交叉反应。
用琼脂双扩散能简便直观地反映不同抗原与同一抗血清，或不同抗血清与同一抗原的交叉反应。
医学期刊编校中容易混淆的字与词辨析
收稿日期：2012－04－25作者简介：汤代国（1972—），男，编辑，研究方向：医学期刊编辑学。
医学期刊编校中容易混淆的字与词辨析汤代国1，喻俊2（1．《腹部外科》编辑部，湖北武汉430014；2．《中华器官移植杂志》编辑部，湖北武汉430014）摘要：对医学期刊编校中容易混淆的字与词进行文献综述和归纳，对每组词进行辨析，并结合全国科学技术名词审定委员会公布的科技名词，对统一规范标准按规定正确使用，以便尽最大努力减少错别字。
关键词：医学期刊；词语辨析；专业术语中图分类号：G232．2；R-61文献标志码：A文章编号：1673-0143（2012）04-0143-03文字差错主要有易混淆的字与词，名词术语不规范，多字和漏字，数字、简繁字混用等等，许多属同音、近音、形似错用，其中，易混淆的字与词出错概率较高［1］。
不管是作者撰稿还是编辑编校过程中有些词正确区分使用确实很困难，而消灭期刊中的错别字是编辑加工中的一项重要工作，为此，现将医学期刊编辑工作中遇到的易混淆的字与词进行归纳，并结合文献复习综述如下，以供业内同仁参考。
1“分辨率”与“分辨力”医学影像学专业中常用，容易混淆。
“分辨率”定义是指某种设备或材料在单位长度内能够分辨的点或线的数量。
在《物理学名词》（1996年版）中“分辨率”对应的英文为“resolution ”，而没有“分辨力”，只有“分辨本领”一词，对应的英文为“resolving power ”，也可解释为“分辨能力”。
因此，应该用“分辨能力”或“分辨本领”来代替“分辨力”，而要对“分辨能力”进行定量分析时，可根据情况用“分辨率”或“分辨率极限”（指可分辨对象的最小极限）来表示［2］。
2“病死率”和“死亡率”两者的区别在于所用的分子可能相同，但分母不同。
某病病死率=死于某病人数/某病治疗人数ˑ100%；死亡率=某年内死亡总人数/同年平均人口数ˑ1000ɢ。
病死率表示受治病人中死亡的频率，反映疾病的严重程度和预后；而死亡率则提示该病对人群所造成威胁的严重程度，作为评价公众健康状况的一种指标。
免疫检
名解1、抗原抗体反应：抗原与相应抗体发生特异性结合的反应。
2、亲和性（affinity）：是抗体分子上一个抗原结合点与相应的抗原决定簇之间的相适应而结合的强度，是抗原与抗体间固有的结合力。
3、亲合力（avidity）：是指一个抗体分子与整个抗原表位之间结合的强度，与抗体结合价直接相关。
4、免疫原(immunogen)是能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞，并能与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的抗原。
5、免疫佐剂（immunoadjuvant）：预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答的类型的物质称为免疫佐剂,简称佐剂（adjuvant）6、多克隆抗体(polyclonal antibody,pcAb)：天然抗原刺激多种B淋巴细胞克隆产生的多种抗体的混合物7、抗血清：将免疫原按照一定的免疫程序免疫动物，一定时间后，采集动物血液，分离得到含有抗体的血清，称为抗血清。
8、单克隆抗体：通过B细胞杂交瘤技术，获得特异性针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，称为单克隆抗体。
9、基因工程抗体是应用DNA重组及蛋白质工程技术，从基因水平对编码抗体基因按不同需要进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。
10、不完全抗体：是指分子量小，虽能与抗原牢固结合，但不能起桥联作用引起可见凝集现象的抗体。
这种不可见的抗原抗体反应称为不完全反应。
如IgG类抗体。
结果判断：以定性试验为主，也可半定量。
11、凝集反应是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载体与相应抗体（或抗原）特异性结合后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见的凝集现象。
反应中的抗原称为凝集原，抗体称为凝集素。
12、沉淀反应是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现可见的沉淀现象，其特性与经典的抗原抗体反应相同。
形成的沉淀为IC（抗原抗体复合物）。
13、效价(titer)是指反映抗血清中有效抗体含量的相对参数，即抗血清稀释至能与抗原发生有效反应的最大稀释度。
免疫血液学血清学方法
抗原抗体反应影响因素
抗原抗体浓度
抗体的亲和力
抗体的亲和力（affinity）用来表示抗原与抗体结合 的强度，通常指的是抗体的单个结合位点与一个抗 原抗原结合簇相互作用的强度。 一个抗体分子的作用部位是多价的，一个细胞上的 抗原通常有多个相同的抗原决定簇。
ห้องสมุดไป่ตู้
亲和力的计算
其他试管法
４℃增强法 聚凝胺试验(Polybrene法) 经典聚凝胺法 PEG增效法
４℃增强法
• 低温孵育下可以促进IgM(某些IgG)抗体抗体与抗原 结合，以检测抗原结合，以检测弱弱反应反应。。 • 例： » ABO正反定型中反定型A细胞或B细胞不凝集，可进 行4℃增强法。实验中应该加做实验中应该加做O细 胞胞对照，防止冷凝集干扰。 » IgG抗M在4℃反应比37℃反应强
聚凝胺试验(Polybrene法)
特点 简便快速 对Rh抗体敏感 不适合于Kell系统抗体检测 临床应用 抗体筛选和鉴定、配血测定 注意事项 按比例加样 致敏时间 观察非特异性凝集 观察结果 关于冷凝集
聚凝胺试验(Polybrene法)
聚凝胺原理 LIM，降低溶液的离子强度，加速IgG型抗体与红细胞之 间反应速度 聚凝胺作为一种碱性分子可以和红细胞表面的酸性糖分 子结合，在离心力的作用下聚凝胺使红细胞相互靠近， 使得已经结合在红细胞表面的互靠近，使得已经结合在 红细胞表面的IgG抗体分子可以在不同的红细胞之间搭桥。 然后加入重悬液，使得聚凝胺的作用被消除。但已经被 IgG抗体分子搭桥连接起来的红细胞不会立即散开，以此 检测血清或血浆中存在的血型抗体。
实验方法
• 血凝试验---特异性抗体和有相应抗原的红细胞在液 体或固体介质中发生肉眼可见的凝集反应。
临床免疫学：免疫相关内容及习题整理
第二章1．何谓抗原抗体反应？其原理是什么？指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。
（1）空间互补关系：抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性；抗原表位与抗体超变区密切接触；高度互补使抗原抗体之间有足够的结合力；亲水胶体转化为疏水胶体。
（2）相互作用力：1）抗原抗体结合力:①静电引力:是抗原抗体分子中带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力,两个电荷距离越近,静电引力越大。
②范德华引力：抗原和抗体相互接近时,由于分子的极化作用而出现的引力。
（最小）③氢键结合力：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。
④疏水作用力：两个疏水基团在水溶液中相互接触时,由于对水分子排斥而趋向聚集的力。
（最大）2）抗原抗体的亲和力与亲合力：①亲和力(affinity):抗体分子上一个抗原结合部位与对应的抗原表位之间的结合强度，取决于两者空间构型互补的程度，是抗原抗体间固有的结合力。
②亲合力（avidity）：是指一个抗体分子与抗原分子表面数个相应抗原表位之间的结合强度。
（3）水胶体转化为疏水胶体：血清学反应条件下，抗原抗体均带负电荷，使极化的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体；当抗原与抗体结合后，表面电荷减少，水化层变薄；而且由于抗原抗体复合物形成后，与水接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏水胶体；在电解质作用下，各疏水胶体之间靠拢，形成可见的抗原抗体复合物。
2．抗原抗体的结合力有哪些？（1）静电引力(eletrostatic forces):是抗原抗体分子中带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力,两个电荷距离越近,静电引力越大.（2）范德华引力(vander Waals forces):抗原和抗体相互接近时,由于分子的极化作用而出现的引力 .（3）氢键结合力(hydrogen bonding forces)：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力（4）疏水作用力(hydrophobic forces)：两个疏水基团在水溶液中相互接触时,由于对水分子排斥而趋向聚集的力.3．抗原抗体反应有哪些特点？（1）特异性：特异性是指一种抗原通常只能与刺激机体产生的相应抗体结合，即抗原与抗体结合反应的专一特性。
临床免疫学：免疫相关内容及习题整理
第二章1．何谓抗原抗体反应？其原理是什么？指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。
（1）空间互补关系：抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性；抗原表位与抗体超变区密切接触；高度互补使抗原抗体之间有足够的结合力；亲水胶体转化为疏水胶体。
（2）相互作用力：1）抗原抗体结合力:①静电引力:是抗原抗体分子中带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力,两个电荷距离越近,静电引力越大。
②范德华引力：抗原和抗体相互接近时,由于分子的极化作用而出现的引力。
（最小）③氢键结合力：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。
④疏水作用力：两个疏水基团在水溶液中相互接触时,由于对水分子排斥而趋向聚集的力。
（最大）2）抗原抗体的亲和力与亲合力：①亲和力(affinity):抗体分子上一个抗原结合部位与对应的抗原表位之间的结合强度，取决于两者空间构型互补的程度，是抗原抗体间固有的结合力。
②亲合力（avidity）：是指一个抗体分子与抗原分子表面数个相应抗原表位之间的结合强度。
（3）水胶体转化为疏水胶体：血清学反应条件下，抗原抗体均带负电荷，使极化的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体；当抗原与抗体结合后，表面电荷减少，水化层变薄；而且由于抗原抗体复合物形成后，与水接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏水胶体；在电解质作用下，各疏水胶体之间靠拢，形成可见的抗原抗体复合物。
2．抗原抗体的结合力有哪些？（1）静电引力(eletrostatic forces):是抗原抗体分子中带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力,两个电荷距离越近,静电引力越大.（2）范德华引力(vander Waals forces):抗原和抗体相互接近时,由于分子的极化作用而出现的引力 .（3）氢键结合力(hydrogen bonding forces)：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力（4）疏水作用力(hydrophobic forces)：两个疏水基团在水溶液中相互接触时,由于对水分子排斥而趋向聚集的力.3．抗原抗体反应有哪些特点？（1）特异性：特异性是指一种抗原通常只能与刺激机体产生的相应抗体结合，即抗原与抗体结合反应的专一特性。
临床免疫学：抗原抗体反应
• 2.亲合力（avidity） 是指一个抗体分子与 抗原分子表面数个相 应抗原表位之间的结 合强度。
• 亲合力与抗体结合价 相关（多价优势）
Avidity
• The overall strength of binding between an Ag with many determinants and multivalent Abs
Keq = 104 Affinity
106 Avidity
1010 Avidity
三、亲水胶体转化为疏水胶体
• 血清学反应条件下，抗原抗体均带负 电荷，使极化的水分子在其周围形成 水化层，成为亲水胶体
• 当抗原与抗体结合后，表面电荷减少 ，水化层变薄；而且由于抗原抗体复 合物形成后，与水接触的表面积减少 ，由亲水胶体转化为疏水胶体
●范德华引力(vander Waals forces):抗原和抗体相 互接近时,由于分子的极化作用而出现的引力 .
●氢键结合力(hydrogen bonding forces)：供氢体 上的氢原子与受氢体原子间的引力
●疏水作用力(hydrophobic forces)：两个疏水基团 在水溶液中相互接触时,由于对水分子排斥而趋向 聚集的力.
• 在电解质作用下，各疏水胶体之间靠 拢，形成可见的抗原抗体复合物
亲水胶体转化为疏水胶体示意图
转化
NaCl
亲水胶体
疏水胶体
可见反应
• 小结
• 抗原抗体结合反应的重要条件是抗原与抗体分子的空 间构型必须相互吻合，具有互补性；
• 其次，抗原表位与抗体超变区必须紧密接触，才能有 足够的结合力使抗原抗体分子结合在一起。
（serological reaction）
抗原抗体的物质基础
图解抗原抗体反应类型和原理ppt课件
Avidity
• The overall strength of binding between an Ag with many determinants and multivalent Abs
Keq =
104
Affinity
106 Avidity
1010 Avidity
二、抗原抗体的结合力
不形成牢固的共价键，通过非共价键结合 这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力
研究生课程抗原抗体反应类型
(antigen – antibody reaction)
抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间 所发生的特异性结合反应。
体内：体液免疫应答的效应作用 包括
体外：各种免疫学检测技术
本章讲述的抗原抗体反应，主要是指抗 原和抗体在体外结合所表现的反应
教学内容：
第一节 抗原抗体反应的原理 第二节 抗原抗体反应的特点 第三节 影响抗原抗体反应的因素 第四节 免疫学检测技术的类型
第二节 抗原抗体反应的特点
1.特异性 2.比例性 3.可逆性 4.阶段性
一、 特异性（specificity）
1、概念：一种抗原分子通常只能与其刺激机体后
产生的抗体结合，这种抗原与抗体结合 反应的专一性称为特异性。
特 异 性 示 意 图
2、决定因素： 由抗原决定簇和抗体分子超变区之间
空间结构的互补性决定的。
3、应用： 由于抗原抗体反应具有高度特异性，
故可用已知的抗原（抗体）来检测相应未 知的抗体（或抗原）。
4、交叉反应（cross reactions）
概念：两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结 构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应。
B
抗原抗体交叉反应示意图
图解抗原抗体反应类型和原理
浓度比。
等价带(equivalencezone)：形成沉淀物最多的 抗原与抗体分子比例合适的范围。 带现象：在等价带前后，由于抗体和抗原过量， 形成的沉淀物少，上清液中可测出游离的抗体或
抗原的现象。
前带 (prozone) 抗体过量时称为。 带现象包括 后代(postzone）抗原过量时称为。
血清学反应条件下， 当抗原与抗体结合使表面 抗原抗体均带负电荷， 电荷减少，水化层变薄， 使极化的水分子在其 失去亲水性能，抗原抗体 周围形成水化层，成 复合物成为疏水胶体 为亲水胶体。
第二节
抗原抗体反应的特点 1.特异性
2.比例性
3.可逆性 4.阶段性
一、 特异性（specificity）
1、概念：一种抗原分子通常只能与其刺激机体后
于对水分子排斥而趋向聚集的力。
• 抗原决定簇与抗体上 的结合点靠近，互相间 正、负极性消失，亲水 层立即失去。 • 结合力最强，约占总 结合力的50％。
三、亲水胶体转化为疏水胶体
转化
NaCl
亲水胶体
疏水胶体
可见反应
在电解质作用下，中
和胶体粒子表面的电 荷，使各疏水胶体之 间靠拢，形成可见的 抗原抗体复合物
四、阶段性 第一阶段：抗原与抗体发生特异 性结合阶段 特点：反应快 第二阶段：反应可见阶段 特点：反应时间较长
第三节
抗原抗体反应影响因素
一、反应物自身因素
*抗原：理化特性、Ag决定簇数量和种类。
*抗体：
1、来源（如：R型抗体 > H型抗体）
2、特异性与亲和力（如：单克隆抗体）
3、浓度
二、环境因素：
概念：两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结 构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应。
免疫复习总结
临床免疫学检验复习总结名册解释免疫（immunity）：是人体的一种生理功能，人体依靠这种功能识别“自己”和“非己”成分，从而排斥“非己”，以维持人体的健康。
抗原：是指能刺激机会免疫系统启动特异性免疫应答，并能与相应的免疫应答产物发生特异性结合的物质。
抗体（antibody,Ab)：是B细胞识别抗原后增殖分化为桨细胞所产生的一种免疫球蛋白，主要存在于血清等体液中，能与相应抗原特异性地结合。
抗原抗体反应：指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
亲和力（affinity）：是抗体分子上单一抗原结合部位与抗原分子表面一个相应的抗原表位之间的结合强度，是抗原、抗体之间固有的结合力。
亲合力：指一个抗体分子与抗原分子表面数个相应抗原表位之间的结合强度。
特异性（specificity）：一种抗原通常只能与其刺激机体产生的相应抗体结合，这种抗原与抗体结合反应的专一性称为抗原抗体反应的特异性。
交叉反应（cross reaction）：若两种不同的抗原分子表面具有相同或类似的抗原表位，则二者均能与对方抗血清中的相应抗体结合，即发生交叉反应。
可逆性（reversibility）：抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可以解离为游离的抗原与抗体的特性称为抗原抗体反应的可逆性。
免疫原（immunogen）：指能激发机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
半抗原（hapten）：指仅有抗原性而无免疫原性的物质，半抗原不能直接用作免疫原，只有把这些半抗原与蛋白质等大分子物质结合后才能刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞。
佐剂（adjuvant）：指预先或与抗原一起注射与机体，能够增强机体免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
抗血清（antiserum）：将制备好的免疫原按照一定的免疫程序接种给所选择的动物，一定时间后采集动物血液，分离含有抗体的血清，称为抗血清。
单克隆抗体（monoclonal antibody）：由一个仅识别一种抗原表位的B细胞克隆产生的同源抗体，称为单克隆抗体。
生物分子检测名词解释
Affinity：亲和力，抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存在着的引力，是抗原抗体间固有的结合力。
Agglutination：凝集反应，细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后，在一定条件下出现肉眼可见的凝集物的过程。
Avidity：亲和力，抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存在着的引力，是抗原抗体间固有的结合力。
Blocking：封闭，是继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。
Blotting：印迹，就是将电泳分离后的琼脂糖凝胶中核酸片段转移到尼龙膜或硝酸纤维素膜上的过程，转移后核酸片段保持相对位置不变。
Coating：包被，即将抗原或抗体连接到固相载体上的过程。
ELISA：酶联免疫吸附测定是一种抗原（或抗体）固相化后，与待测抗体（或抗原）及酶标记抗体形成复合物，底物被酶催化成有色物质，产物的量与样本中受检物质的量直接相关，由此进行定性或定量分析的免疫测定法。
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay：酶联免疫吸附测定（ELISA）是一种抗原（或抗体）固相化后，与待测抗体（或抗原）及酶标记抗体形成复合物，底物被酶催化成有色物质，产物的量与样本中受检物质的量直接相关，由此进行定性或定量分析的免疫测定法。
Gene Chip：基因芯片又称DNA 芯片、生物芯片，在一张固相支持介质上同时固定成百上千个核酸片段，再将扩增的核酸样品与之杂交，反应结果用同位素法、化学荧光法、化学发光法或酶标法显示，然后用精密的扫描仪或CCD摄像技术记录，通过计算机软件分析，综合成可读的总信息，是集成化的核酸分子杂交技术。
HA：血凝素，是由3 条糖基化多肽分子以非共价形式聚合而成的三聚体，其C 末端有一疏水区插入病毒囊膜的双层脂质膜中，是与病毒囊膜的结合部位。
HI：血凝抑制，先将可溶性抗原与特异性抑制血球凝集的血清(抗体) 混合，隔一定时间后加入“致敏红细胞红”(细胞表面吸附可溶性抗原)，则不再与相应抗体发生凝集现象的过程。
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Affinity and Avidity of Antibodies
Antibody Affinity
antigen Affinity measures the strength of interaction between an epitope and an antibody’s binding site. It is defined by the same basic thermodynamic principles that govern any reversible biomolecular interaction:
o K A = affinity constant
o[Ab] = molar concentration of unoccupied binding sites on the antibody
o[Ag] = molar concentration of unoccupied binding sites on the antigen
o[Ab-Ag] = molar concentration of the antibody-antigen complex
In other words, K A describes how much antibody-antigen complex exists at the point when equilibrium is reached. The time taken for this to occur depends on rate of diffusion and is similar
for every antibody. However, high-affinity antibodies will bind a greater amount of antigen in a shorter period of time than low-affinity antibodies. K A can therefore vary widely for antibodies from below 105 mol-1 to above 1012 mol-1, and can be influenced by factors including pH, temperature and buffer composition.
The affinity of monoclonal antibodies can be measured accurately because they are homogeneous and selective for a single epitope. Polyclonal antibodies are heterogeneous and will contain a mixture of antibodies of different affinities recognizing several epitopes –therefore only an average affinity can be determined.
Antibody Avidity
Avidity gives a measure of the overall strength of an antibody-antigen complex. It is dependent
on three major parameters:
o Affinity of the antibody for the epitope (see above)
o Valency of both the antibody and antigen
o Structural arrangement of the parts that interact
All antibodies are multivalent e.g. IgGs are bivalent and and IgMs are decavalent. The greater an immunoglobulin’s valency (number of antigen binding sites), the greater the amount of antigen it can bind. Similarly, antigens can demonstrate multivalency because they can bind to more than
one antibody. Multimeric interactions between an antibody and an antigen help their stabilization.
A favorable structural arrangement of antibody and antigen can also lead to a more stable antibody-antigen complex as illustrated in Figures 1 and 2.
Figure 1. An immobilized antigen (a high local concentration of available epitopes) provides more opportunity for the antibody-antigen complex to form than free antigen in solution over the same time period. Once the first antigen binding arm of an antibody attaches to an antigen on a solid support, the chances of a bivalent interaction are greatly improved. Many immunoassays like Western blotting and ELISA exploit this principle.
Figure 2. When an antigen is mixed with a polyclonal antibody, multivalent interactions may lead
to large, stable (high avidity) structures being formed. This is because the antigen may be bound
by several antibodies, each recognizing a different epitope. Polyclonal antibodies are therefore ideal for immunoprecipitation experiments.
Further Useful Reading
o How we improve the affinity of our recombinant monoclonal antibodies generated using HuCAL? technology through affinity maturation。