抗体亲和力提高

☻mutD5菌株，它由于遗传缺陷而存在较高的突变率
☻在DNA复制中错配修复功能缺陷 ☻聚合酶缺乏3→5的校正性外切酶活性
使得突变率较正常菌株高1000倍以上，因此将携带有抗体可 变区基因的载体转化到致突变大肠杆菌中培养一段时间，得 到次级突变库 zzplovezzp
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人工合成寡核苷酸
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西部牛仔（West cowboy），是指18至19世纪的美国，在西部广袤的土地， 一群热情无畏的开拓者。在美国历史上，他们是开发西部的先锋，他们富有冒险 和吃苦耐劳精神，因此被美国人称为“马背上的英雄”。 @单击更换文本
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西部牛仔（West cowboy），是指18至19世纪的美国，在西部广袤的土地， 一群热情无畏的开拓者。在美国历史上，他们是开发西部的先锋，他们富有冒险 TEXT 04 和吃苦耐劳精神，因此被美国人称为“马背上的英雄”。 @单击更换文本
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来自百度文库
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西部牛仔（West cowboy），是指18至19世纪的美国，在西部广袤的土地， 一群热情无畏的开拓者。在美国历史上，他们是开发西部的先锋，他们富有冒险 和吃苦耐劳精神，因此被美国人称为“马背上的英雄”。 @单击更换文本
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β
体外抗体亲和成熟 （多策略引入突变）
☻在体外可以用抗体库技术模拟体内的亲和 β
力成熟过程提高抗体的亲和力。
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突变策略
A B
PCR错配 利用致突变株大肠杆菌在细胞内进行突变
C D
人工合成寡核苷酸 链替换
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目录 PCR错配 A contents
☻TaqDNA聚合酶缺乏3→5的外切酶活性，在DNA合成 过程中没有校正功能 ☻改变PCR的条件，比如加入锰离子，减少脱氧三磷酸 腺苷的浓度，使错配率提升 ☻因此，通过高错配倾向PCR扩增，对可变区进行随 机突变，构建次级突变库
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目录 contents B 利用致突变株大肠杆菌在细胞内进行突变
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A
抗体亲和力的提高
对于抗体亲和力的提高，一般针对两个方向
☻体内抗体亲和成熟
☻体外抗体亲和成熟
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α
体内抗体亲和成熟 （点突变）
亲和力成熟：在体内除此反应产生的抗体一般亲 和力较低，在随后的抗原刺激下，抗体可变区基 因发生的体细胞突变，造成亲和力的改变，亲和 力提高的变种具有选择优势，最后形成产生高亲 和力抗体的B细胞克隆。
抗体库技术的应用
——抗体亲和力的提高
小组成员： 李亚 刘苗
雷文丽 张雪艳
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抗体亲和力的提 高
TEXT 02 ☻亲和力是抗体的重要生物参数，在生物技术领域，亲和
力高的抗体有更高的使用价值，因此对抗体亲和力的提
高是备受人们关注的课题
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