现代食品检测技术的主要特点
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●现代食品检测技术的主要特点:一、食品检测技术更注重实用性和精确性二、食品检测技术中大量应用生物技术领域研究成果三、食品检测技术与计算机技术结合越来越紧密四、食品检测中不断应用其他领域新技术五、大力发展实时在线、无损检测技术●色谱的分类:安两相的物理状态分:气相色谱、液相色谱、超临界流体色谱、化学键合相色谱、化学键合相色谱。按分离机理分:吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、尺寸排阻色谱、亲和色谱。按固定相外形分类:柱色谱、平板色谱●色谱的特点:分离效率高、灵敏度高、分析速度快、应用范围广
●区域宽度:用来衡量色谱柱峰宽度的参数。有●色三种表示方法:1.标准偏差
2.半峰宽
3.峰底宽●色谱理论:塔板理论(热力学)、速率理论(动力学)。
●色谱定性分析:1.利用纯物质对照定性2.利用文献保留值定性3.加入已知物增加峰高法4.保留指数定性法5.与其它仪器联用进行定性●定量计算方法:外标法、内标法、归一化法●高效液相色谱仪结构:1.高压输液系统 2.进样系统3.分离系统—色谱柱4.检测系统5流动相脱气装置●流动相脱气方法:惰性气体脱气法、加热流回法、超声波脱气法、抽真空脱气法、在线脱气法●分离过程物理化学原理:吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、空间排阻色谱、亲合色谱●正相色谱:固定相得极性大于流动相得极性。适于分离油溶性或水溶性的极性和强极性化合物●反相色谱:固定相的极性小于流动相得极性,适于分离非极性、极性或离子型化合物
●气相色谱主要部件:1载气系统2进样系统3分离系统4温度控制系统5检测系统●检测器:检测元件、放大器、显示记录●载体类型:硅藻土:红色载体、白色载体。非硅藻土:有机玻璃微球、高分子多孔微球、氟载体●检测器类型:浓度型检测器、质量型检测器●检测性能评价指标:灵敏度、检出限、线性范围、响应时间。●气相色谱检测器主要有:热导检测器、火焰离子化检测器、氢焰检测器、电子捕获检测器、火焰光度检测器●GC与HPLC区别:流动相不同、进样方式不同、被测化合物在系统中的状态不同、被测化合物不同、运行费用不同
●紫外-可见分光光度法特点:入射光接近于单色光、分析对象广、灵敏度及准确度高、选择性好,操作简便●分子吸收光谱的产生:E总=E电子+E振动+E转动●吸光系数的物理意义:表示物质对单色光吸收能力●紫外-可见分光光度计基本构造:光源→单色器→样品室→检测器→显示●分光光度计类型:单光束风光光度计、双光束、双波长、多通道●原子吸收法特点:灵敏度高、准确性高、选择性好、用途广、样品量少●原子吸收分光光度计结构:光源、原子化系统、单色器、检测器。特点:采用锐线光源、单色器在火焰与检测器之间、原子化系统。类型:单光束原子吸收分光光度计、双光束●原子化方法:火焰法、无火焰法-电热高温石墨管●干扰及其抑制:物理干扰、化学干扰、电离干扰、光谱干扰
▲色谱流出曲线:试样中各组分经色谱柱分离后,按先后次序经过检测器时,检测器就将流动相中各组分浓度变化转变为相应的电信号,由记录仪得到的信号-时间曲或信号-流动相体积曲线,也成色谱图▲保留时间(tR):组分从进样到柱后出现浓度极大值时所需的时间▲保留体积(VR):从进样开始到被测组分在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相体积▲分配系数K:组分在固定相和流动相间发生的吸附、脱附或溶解、挥发的过程叫做分配过程▲分配比k:又称容量因子,它是指在一定温度和压力下,组分在两相间分配达平衡时,分配在固定相和流动相中的质量比▲分离度(R):总分离效能指标,又称分辨率,它定义为相邻两组分色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽总和之半的比值▲塔板理论:将色谱分离过程比拟作蒸馏过程,将连续的色谱分离过程分割成多次的平衡过程的重复▲灵敏度:当一定浓度或一定质量的组分进入检测器,产生一定的响应信号R。以进样量C对响应信号R作图得到一条通过原点的直线。直线的斜率就是检测器的灵敏度S。▲检出限(敏感度):当检测器输出信号放大时,电子线路中固有的噪声同时也被放大,使基线波动,取基线起伏的平均值为噪声的平均值,用符号RN表示●吸收光谱(吸收曲线):不同波长光对样品作用不同,吸收强度不同●生色团(发生团):能吸收紫外=可见光的基团●助色团:本身无紫外吸收,但可以使生色团吸收峰加强同时使吸收峰长移的基团
●朗伯比尔定律:吸收光谱法基本定律,描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系●共振吸收线:当原子收到外界能量激发时,其能态发生跃迁,使电子从基态跃迁到第一激发态所产生的吸收谱线●分配系数K小结:1.分配系数与分配比都是与组分及固定相得热力学性质有关的常数,随分离柱温度、柱压的改变而变化 2.分配系数与分配比都是衡量色谱柱对组分保留能力的参数,数值越大,该组分的保留时间越长3.两个组分的K或k值相等,则两个组分的色谱峰必将重合4.两个组分的K或k值差别越大,则相应的两色谱峰相距离就越远5.分配比可以由实验测得●塔板理论的假设要点:1.在理论板高H 内,组分在气液相内快速平衡2.将载气看作成脉动(间歇)过程3.试样沿色谱柱方向的扩散可忽略 4.每次分配的分配系数相同●空间排阻色谱基本原理:按分子大小分离。小分子可以扩散到凝胶空隙,由其中通过,出峰最慢;中等分子只能通过部分凝胶空隙,中速通过;而大分子被排斥在外,出峰最快;溶剂分子小,故在最后出峰●亲合色谱基本原理:利用生物大分子和固定相表面存在的某种特异性亲和力,进行选择性分离●吸附色谱基本原理:组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸●分配色谱基本原理:固定相与流动相均为液体(互不相溶),组分在固定相和流动相上的分配●离子交换色谱基本原理:组分在固定相上发生的反复离子交换反应;组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存在形式等有关
●分离过程实际应用:正相色谱与反相色谱、离子对色谱、离子交换色谱和离子色谱、空间排阻色谱、手性色谱、电色谱●液相色谱的固定相和流动相:固定相分类:液-液分配及离子对分离固定相(1.全多孔型担体 2.表面多孔型担体 3.化学键合固定相)、液-固吸附分离固定相、离子交换色谱分离固定相、空间排阻分离固定相、反相色谱分离固定相●气相色谱和液相色谱的区别:1流动相不同2进样方式不同3所分析的化合物不同4被测化合物不同5运行费用不同6所检测器不同●对固定液的要求:1.操作柱温下固定液呈液态 2.操作条件下固定液热稳定性和化学稳定性好3.固定液的蒸汽压要低4.固定液对样品应有较好的溶解度及选择性●固定液的选择:一、按相似相容原则1按极性相似原则选择:分离非极性物质、分离极性物质、分离非极性和极性混合物、分离能形成氢键的试样、复杂的难分离物质2按化学官能团相似选择:酯类:选酯或聚酯固定液、醇类:选醇类或聚乙二醇固定液。二、按组分性质的主要差别选择:1组分的沸点差别为主:选非极性固定液、按沸点顺序出柱、沸点低的先出柱2组分的极性差别为主●热导检测器检测原理:平衡电桥:钨丝通电,加热与散热达到平衡后,两臂电阻值、进样后R参≠R测,R参﹒R2=R测﹒R
●速率方程:H=A+B/u+ C﹒u●影响柱校的因素A:涡流扩散项、B/u:分子扩散项、C﹒u:传质阻力项