参考区间验证的实验程序
参考区间及临界值如何验证或建立
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检验报告单：需要关注
1. 我们提供的参考区间、临界值或临床决定值 是否合适？ 2. 最好能提供检验方法、试剂厂商的信息！
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内容
• 参考区间的验证和建立
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• 临界值的验证和建立
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参考区间的验证和建立
参考文献 1. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline-Third Edition CLSI Document EP28-A3c (ISBN 1-56238-682-4). Clinical and Laboratory Standards Institute,940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA, 19087-1898, USA, 2010. 2. 临床实验室检验项目参考区间的制定 WS/T 402-2012.
6. 特殊情况：若通过招募受试者来选择参考个体有困难，则 可从查体人群中选择临床诊断基本正常者作为参考个体。
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
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参考区间的验证和建立
标本采集、运输、检测和存储：按SOP操作。
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
4. 入选受试者：获取临床资料，主要包括：年龄、性别、身 高、体重、血压、心率、性别、吸烟，心电图检查结果， 实验室检测指标等。入选受试者各项相关实验室指标无异 常，保留受试者体检结果。
医学实验室ISO15189认可性能验证实验方案
医学实验室ISO15189认可性能验证实验方案德信诚咨询为了满足目前医学实验室认可的需求保证实验室检测结果的准确性，特制定本方案。
本方案从准确度、精密度、参考范围、线性范围以及方法学比对5个方面对各个试验项目进行评价.一、精密度（Precision）:精密度是指在规定条件下所获得的检测结果的接近程度,表示测定结果中随机误差大小程度的指标.精密度通常用不精密度表示。
可以分别评价连续精密度(批内精密度）、重复性不精密度(中间精密度,包括批间、日间精密度等）和再现性精密度。
本方案采用批内和天间两种方法对各个试验项目的精密度进行评价.全部实验过程使用同批号试剂和质控品，并且保证检测当日质控在控。
1、批内精密度(连续精密度）:方法:在检测患者标本过程中,连续运行高低水平质控品各20次,记录检测结果.计算批内精密度的CV值和SD值。
结果评价（1)厂家评价标准：计算精密度指数=验证SD/厂商SD，精密度指数要求小于等于1,或者实测CV小于等于厂家要求的CV,两者符合其一即可。
具体见《精密度评价》表格。
（2）按照国际推荐标准：批内精密度应在CLIA88允许误差的1/4以内，见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求。
2、天间精密度(中间精密度）：方法:同样使用两个水平的质控品，若需复溶冻干质控品做实验，要注意选择产品的稳定性和瓶间差.要严格控制每次复溶冻干品时的操作手法。
连续测试20天,每天检测1次。
在次过程中不能更换试剂批号及质控品批号,是否需要重新定标则取决于实验室。
测试完成后记录检测结果。
结果评价（1）厂家评价标准：计算天间的SD及CV值，并计算精密度指数=验证SD/厂商SD。
精密度指数要求小于等于1，或者实测CV小于等于厂家要求的CV，两者符合其一即可.具体见《精密度评价》表格。
（2)按照国际推荐标准:批内精密度应在CLIA88允许误差的1/3以内,见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求。
二、准确度准确度(accuracy)指检测结果与被测量物真值之间的接近程度。
最新参考区间及临界值 如何验证或建立教程文件
≤2个结果超出 待验证区间
Pass
≤2个结果超出
待验证区间
Pass
20个结果
3个或4个结果 超出待验证区间
20个结果
≧3个结果 超出待验证区间
≥5个结果超出 待验证区间
检查分析程序，参考 人群差异，自行建立
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
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参考区间及临界值 如何验 证或建立
检验报告单的比较：
A院检验科 B院检验科
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内容
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参考区间的验证和建立
参考文献 1. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline-Third Edition CLSI Document EP28-A3c (ISBN 1-56238-682-4). Clinical and Laboratory Standards Institute,940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA, 19087-1898, USA, 2010. 2. 临床实验室检验项目参考区间的制定 WS/T 402-2012.
差异。 2. 目前国际上使用最多的方法为免疫散射比浊法，使用的试剂
主要为英国的The Binding Site试剂及德国的SIEMENS试 剂。
性能验证方案(仅供参考)
性能验证(仅供参考)1 生化生化室项目需要验证的参数包括批内精密度，批间精密度，正确度，线性范围、参考区间，可报告区间等。
适用时，还要考虑分析灵敏度（仅对那些在接近 0 的低值有临床意义的项目有必要进行确定，必要时，可引用说明书中给出的低值）和干扰试验。
1.1精密度1.1.1标本准备及要求质控品、已经检测过的病人标本或具有血清基质的定值材料。
每个项目均需选择至少正常和病理两个浓度水平的验证材料进行验证。
所用样本一定要稳定，其基体组成应尽可能相似于实际检测的病人标本，样本中的分析物含量应在该项目的医学决定水平附近。
1.1.2方案1.1.2.1方案 1：对验证材料每天分析 1 批次，2 个浓度，每个浓度重复测定 4 次，连续 5 天。
记录结果并计算均值、标准差和批内精密度(%)。
1.1.2.2 方案 2：批内精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的检测方法，同批次内检测混合的新鲜临床标本 20 次。
记录结果并计算均值（X）、标准差（SD）和批内变异系数 CV（%）。
批间精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的检测方法（或将室内质控品按照常规标本的方法一样测定，测定结果在遵照厂商参数不出控的前提下），同批次内检测混合的新鲜临床标本 20 次，同一批号室内质控品某一时间段（至少 20 天）的室内质控数据逐步累积最终得出均值、标准差。
1.1.3结果判断从美国临床实验室室间质量评估允许误差表中查阅评价项目的允许误差范围，由实验数据统计的批内不精密度和批间不精密度小于允许误差范围的 1/4 和 1/3 作为检测系统不精密度性能的的可接受标准（或用卫生部临检中心的允许总误差、卫生标准等），且又小于厂商提供的精密度性能指标，说明由实验室评价的检测系统的不精密度性能可接受，符合要求。
若大于判断限，检测系统的不精密度是否符合要示，应再进一步做统计学处理作出判断。
医院实验室参考范围的确定与调整程序
医院实验室参考范围的确定与调整程序1.目的：规范各检测项目生物参考区间的建立。
2.范围：实验室开展的检测项目。
3.定义3.1参考个体：依据临床对某检验项目的使用要求确定选择原则，以此选择的检测参考值的个体。
所有参考个体的集合为参考总体。
3.2参考抽样组：从统计意义上，一定数量的参考个体是对参考总体的一个抽样。
在现今的参考值建立中，都是对参考抽样组作具体研究，在一定的可信限条件下，成为某项目的参考值和参考区间。
3.3参考值：对一个参考个体进行某项目检测得到的值为该个体的参考值，所有参考抽样组的各个参考值合起来即为参考值范围。
3.4参考区间和参考限：依据所有参考值的分布特性以及临床使用要求，选择合适的统计方法进行归纳分析后，确定参考值范围中的一部分为参考区间，区间的两端为参考区间的限值，分为低参考限和高参考限。
4.权责4.1各专业组组长负责评审本组检验项目的生物参考区间。
4.2技术负责人批准评审后的生物参考区间。
5.制度内容5.1检验科在下列情况下应重新评审生物参考区间。
5.1.1开展新的检验项目。
5.1.2改变当的检测系统。
5.1.3实验室有理由可以相信某一特定参考区间对参考人群不再适用时。
5.2工作程序5.2.1各专业组应为所运行的检验项目确定可靠的生物参考值区间。
5.2.2生物参考区间的设立可直接采用由国家权威机构发布或权威刊物出版的适合实验室的生物参考区间；还可直接引用试剂供应商提供的对应的生物参考区间；也可自行建立生物参考区间。
5.2.3自行建立参考值范围和参考区间计划。
5.2.3.1根据文献和实验研究，总结对该项目检测结果产生的生物变异和分析下扰的因素，供选择参考个体时用。
5，2.3.2确定参考个体的选择原则（或排除非参考个体的原则），编写与之对应调查表。
5.2.3.3依据调查表和其他有关记录，挑选候选的参考个体。
5.2.3.4依据排除原则，剔去不符合要求的候选对象。
5.2.3.5将采集标本前和采集时对受检查的要求，告诉各个受检参考个体，做好准备。
CL-2000i全自动免疫发光分析FT3、FT4、TSH参考区间验证
中国卫生产业CHINA HEALTHINDUSTRY[作者简介]李佐祥(1981-),男,贵州余庆人,本科,主管检验技师,主要从事临床生化与免疫检验研究工作。
生物参考区间是检验结果常用的一项评价指标,为患者疾病的诊断、治疗、预后和筛查提供信息。
游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺激素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)是反映甲状腺功能最常用的检测指标,常称为“甲状腺功能三项”。
FT3、FT4、TSH 以往主要采用放射免疫法和酶联免疫法测定技术。
目前实验室大多采用免疫标记的方法直接测定血清中的激素浓度。
随着免疫测定技术的发展,竞争性荧光免疫分析法、化学发光免疫法和电化学发光免疫法已能灵敏、特异、快速和准确地用于临床血清激素的测定。
许多实验室一般参照试剂说明书或者全国临床检验操作规程设定参考区间,在实际工作中,发现这些参考区间并不适合临床应用,其生物参考区间是解释检验结果分析检验信息是一个基本尺度和依据,实验室只有给临床检验项目提供可靠的生物参考区间,才能使临床医生对患者或健康体检者的诊断治疗有明确的指引[2]。
虽然不同厂家的检测系统提供了各自参考区间,但由于地域、人群等因素的差异,为了更好地服务于临床,提高这些指标对甲状腺疾病符合率,有必要对厂家提供的生物参考区间进行验证或进一步重新设定,这也ISO015189《医学实验室质量和能力认可提准则》及医院等级评审中所要求的内容之一。
按照CLSI 文件C28-P3《医学实验室参考区间的定义、建立和确认》中的推荐方法,参考IS015189:2003(E)《医学实验室一质量和能力的专用要求》条款要求,根据参考区间正确、科学的确定方法,按照建立参考区间的具体操作程序,保证参考区间的可靠、适用。
该研究通过2015—2016年调查该地区3172名体检者,现报道如下。
1资料与方法1.1一般资料选取到该院健康体检者3172名,年龄16~78岁,年龄:(32.02±8.99)岁;其中:男性2273名,年龄:(32.65±8.98)岁;女性899名,年龄:(30.42±8.47)岁。
参考区间及临界值 如何验证或建立
参考区间的验证和建立
数据分析：建立 按性别或年龄分组，进行Z检验，以确定是否需要分组建 立参考区间。以非参数方法确定参考区间如2.5th-97.5th 或0-95th 。
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参考区间验证及定期评审
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参考区间建立案例
血清IgG亚类测定现状：
1. 不同的检测方法，相同的方法不同厂家试剂其参考区间有 差异。
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临界值：CAP认可的要求
在初次运行检验时，应确定区分阳性结果与阴性结果的临 界值，并且此后每六个月验证一次。如果校验品或校准验证材 料的值位于临界值附近，则校准或校准验证的过程符合本核查 表的要求。如果实验室不能从仪器中获得实际数值，则该核查 表要求不适用。 在分析用关键试剂的批次发生更改时也应验证临界值（除 非实验室主任确定这类更改不会影响临界值）；在更换主要仪 器元件、对仪器进行大的保养以及当 QC 出现不寻常的趋势、 偏移或超出实验室允许限，以及采取其他手段评估和纠正失控 还无法识别和纠正问题时应验证临界值。
验证16个结果20个结果2个结果超出待验证区间超出待验证区间5个结果超出待验证区间2个结果超出待验证区间3个结果超出待验证区间个结果20个结果生物参考区间和临床决定值评价程序pkuphl2pf033v2passpasspasspass检查分析程序参考人群差异自行建立检查分析程序参考人群差异自行建立参考区间的验证和建立数据分析
0.181 0.016 0.001 0.864 0.041
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参考区间建立案例
血清IgG亚类：参考区间（2.5th-97.5th）
IgG1 (mg/dL) The Binding Site 厂商提供 SIEMENS 厂商提供 本实验室使用 SIEMENS试剂建立 382-929 405-1011 457-1177 IgG2 (mg/dL) 242-700 169-786 133-736 IgG3 (mg/dL) 22-176 11-85 11-95 IgG4 (mg/dL) 4-87 3-201 8-188
性能验证方案(仅供参考)
性能验证(仅供参考)1 生化生化室项目需要验证的参数包括批内精密度，批间精密度，正确度，线性范围、参考区间，可报告区间等。
适用时，还要考虑分析灵敏度（仅对那些在接近0的低值有临床意义的项目有必要进行确定，必要时，可引用说明书中给出的低值）和干扰试验。
1.1 精密度1.1.1 标本准备及要求质控品、已经检测过的病人标本或具有血清基质的定值材料。
每个项目均需选择至少正常和病理两个浓度水平的验证材料进行验证。
所用样本一定要稳定，其基体组成应尽可能相似于实际检测的病人标本，样本中的分析物含量应在该项目的医学决定水平附近。
1.1.2 方案1.1.2.1 方案1：对验证材料每天分析1批次，2个浓度，每个浓度重复测定4次，连续5天。
记录结果并计算均值、标准差和批内精密度(%)。
1.1.2.2 方案2：批内精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的检测方法，同批次内检测混合的新鲜临床标本20次。
记录结果并计算均值（X）、标准差（SD）和批内变异系数CV（%）。
批间精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的检测方法（或将室内质控品按照常规标本的方法一样测定，测定结果在遵照厂商参数不出控的前提下），同批次内检测混合的新鲜临床标本20次，同一批号室内质控品某一时间段（至少20天）的室内质控数据逐步累积最终得出均值、标准差。
1.1.3结果判断从美国临床实验室室间质量评估允许误差表中查阅评价项目的允许误差范围，由实验数据统计的批内不精密度和批间不精密度小于允许误差范围的1/4和1/3作为检测系统不精密度性能的的可接受标准（或用卫生部临检中心的允许总误差、卫生标准等），且又小于厂商提供的精密度性能指标，说明由实验室评价的检测系统的不精密度性能可接受，符合要求。
若大于判断限，检测系统的不精密度是否符合要示，应再进一步做统计学处理作出判断。
1.2 正确度1.2.1 卫生部临检中心室间质评含盖的项目，则以卫生部临床检验中心室间质评结果为准；成绩在80%者即为验证通过。
临床实验室如何确定和建立生物参考区间
精选文档临床实验室怎样确立和成立生物参照区间（赞同指南――第二版）1内容简介此指南是专为指导临床诊断实验室、诊断仪器试剂制造商和临床检验工作者在定量实验检测中确立参照值和参照区间而拟订的。
它包括在临床医学实验室中成立可靠的参照区间所用的方法步骤和介绍程序。
而该介绍程序的主要内容是怎样用最简单和最务实的方法去成立一个能保证足够可靠性和适用性的参照区间的草案。
此文件不能够能每一种状况都左右逢源，所以有些内容需要经过指南外来充足。
但在特定的地域内，额外的步骤或努力能够提高参照区间的可信度和精确度。
当前的现状是，临床实验室科研人员和仪器试剂制造商缺乏一致的收集数据及操作方法去成立参照区间，故小组委员会希望此文件能为成立可靠的参照区间供应最基本的、一致的实验草案，并为进一步的研究夯实基础。
该程序指南的要点在于决定“相对健康” 集体参照值或参照区间时所选择的样品组可否本源于健康优异的人群，这也是此文件的议论的要点。
自然，关于其他种类诸如生理或病理状况下的参照值的成立，也应该采用相似的方法。
此程序大纲适用于任何种类的参照区间确实定，由于它充足考虑了合适的参照个体的选择及各种剖析方法影响因素等状况。
但是，这份文件没有特意地谈到怎样成立诊断域值（如紧急值或各种医学决定值）。
这些值的决定方法各异，部分还经常要在特定医学条件下由诊断方法的敏感性和特异性来决定。
不同样状况下的参照值研究的各种需求本指南也将涉及，包括：新剖析物的测量用新的或不同样的剖析方法测量开初已明确知道的剖析物或已标准化测定的生理学的数据和参照值。
用同样也许有可比性的方法去测量同一剖析物，并利用其他实验室或试剂生产商供应的参照值作比较研究（参照值的调用）。
被称为“参照值调用”的最后一项议题是比较复杂的。
由于今后所有的临床诊断实验室将会不断地碰到调用参照值的考据和随后的采用它这个问题，而试剂生产商和其他实验室所供应的参照值是不能够够直接应用的。
这一问题的解决方法到此刻依旧不是特别严格。
生物参考区间建立与评审程序
1目的保证各检验项目生物参考区间的适用性。
2范围本程序适用于医学检验实验室须确定生物参考区间的检验项目。
3职责3.1各部门负责人检验项目的生物参考区间的建立，将建立的依据文件化，并通知用户。
3.2实验室负责人组织生物参考区间的评审。
4工作程序4.1生物参考区间建立的原则4.1.1各专业科应为所开展的检验项目根据需要确定生物参考区间，将此规定的依据文件化，并通知用户。
4.1.2在下列情况下，应考虑建立检验项目的生物参考区间：4.1.2.1在开展新的检验项目时；4.1.2.2改变检验程序或检验前程序，经评审确定相关检验项目的生物参考区间不适用时；4.1.2.3在生物参考区间定期评审中发现检验项目的生物参考区间不适用时。
4.1.3定量检验项目生物参考区间的建立方法可采用自行建立生物参考区间、生物参考区间的转移验证等方法。
自建生物参考区间是一项昂贵和艰巨的工作，每个检验项目都自建参考区间是不切实际的。
通过生物参考区间的转移验证方法，可以其他实验室或诊断试剂生产商建立或提供的参考区间转移至本实验室。
4.1.4对定性检验项目，则根据文献设立相应的参考值。
4.1.5新建立的生物参考区间应及时通知临床，可通过企业内部网络发布公告的形式告知。
4.2自行建立生物参考区间4.2.1根据文献及实验研究，总结出引起该项目测定的生物变异和分析干扰的因素，供选择参考个体时使用。
4.2.2确定个体的选择原则（或排除参考个体的原则），编写与之对应的调查表。
4.2.3依据调查表和其他有关记录，挑选参考个体。
4.2.4依据排除原则，剔去不符合要求的个体，确定进行参考区间研究的个体。
4.2.5采集标本前和采集时对受检者的要求详细告诉各个受检参考个体，做好准备。
4.2.6正确采集标本，做好分析前的标本预处理。
4.2.7在良好的控制条件下，用事先指定的分析方法对标本检测，获得参考区间结果。
4.2.8检查有无明显的误差或离群点。
若有，按事先约定原则，剔去不符要求的数据后，再补上必需的数据。
CL—2000i全自动免疫发光分析FT3、FT4、TSH参考区间验证
CL—2000i全自动免疫发光分析FT3、FT4、TSH参考区间验证目的验证厂家提供的FT3、FT4、TSH参考区间是否适用于该地区，建立该地区的甲状腺功能三项指标的生物学参考区间，为该地区筛查及诊断甲状腺疾病提供依据。
方法参照美国临检实验室标准化委员（NccLs）C28-A2文件中涉及到的有关参考定义，调查，验证的描述，采用迈瑞全自动化学发光仪及其配套试剂、校准品、质控品，对3 172名健康人群的甲状腺功能三项指标进行检测，检测结果按性别差异进行统计学分析处理。
所得结果与试剂说明书提供参考区间，《全国临床检验操作规程》第4版提供的FT3、FT4、TSH参考区间比较。
结果该次验证不包括50岁以上人群，留取男性2273例进行数据分析，得出男性TSH：0.64～5.56 μIU/mL，16～30岁，FT3：3.53～5.65 pmol/L、FT4：7.06～15.38 pmol/L，31～50岁，FT3：3.58～5.78 pmol/L、FT4：6.69～14.81 pmol/L，女性899名得出：TSH：0.9～6.74 μIU/mL，16～30岁，FT3：3.14～5.43 pmol/L、FT4：5.72～14.22 pmol/L，31～50岁，FT3：3.03～5.23 pmol/L、FT4：5.51～13.93 pmol/L，研究结果分别与试剂说明书和《全国临床检验操作规程》第4版提供的FT3、FT4、TSH参考区间进行χ2 检验，为差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论试剂说明书和《全国临床检验操作规程》第4版提供的FT3、FT4、TSH参考区间均不适用于该地区该实验室，建议使用该研究结果作为该地区实验室参考区间。
标签：FT3；FT4；TSH；健康；生物参考区间生物参考区间是检验结果常用的一项评价指标，为患者疾病的诊断、治疗、预后和筛查提供信息。
游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺激素（FT4）、促甲状腺激素（TSH）是反映甲状腺功能最常用的检测指标，常称为“甲状腺功能三项”。
生物参考区间评审程序
生物参考区间和临床决定值评审程序1目的规范各检验项目生物参考区间和临床决定值的评审。
2范围本程序适用于检验科检验项目生物参考区间和临床决定值的评审。
3职责3.1 各专业组组长带领本组人员负责评审本组检验项目的生物参考区间；3.2 检验科主任负责组织本检验科人员与临床医生共同进行评审工作；3.3 技术负责人批准评审后的生物参考区间。
4 定义和术语4.1 参考个体（reference individual）根据明确规定的选择(入组)标准，选择出参加实验的个体，通过检验可以得到相应的参考值。
通常情况下，“健康人”的标准是难以制定的，但可以制定不健康因素的排除标准。
4.2 参考人群(reference populations) 是参考个体所代表的群体，为数量未知的假设实体，可以只有一个成员(为自身或其他人做参考)。
4.3 参考标本组(reference sample group) 指选出代表参考人群的、适当数量的参考个体。
统计意义上，一定数量的参考个体是参考人群中的一个抽样组。
参考区间的建立过程是对参考标本组的具体研究。
4.4 参考值(reference value) 是对参考个体的某一特定被测量进行检测而得到的值。
对一个参考个体进行某项目检测得到的值为该个体的参考值，从参考标本组可以得到一组参考值。
参考值反应在健康状态下，人的解剖、生理和生化等机能指标数据的波动状态。
4.5 参考分布(reference distribution) 是指一组参考值的分布状态。
4.6 参考限(reference limit) 是从参考分布得到的界限值，用于描述部分参考值的位置，如小于或等于上限、大于或等于下限。
将参考值由小到大排列，对大多数分析物，可以参考值分布的2.5％为低限，以97.5％为高限。
当只有单侧参考限具临床意义时，可以确定5％或95％为参考限。
4.7 参考区间(reference interval) 是在上、下参考限之间的参考值分布范围。
参考区间及临界值如何验证或建立课件
参考区间及临界值的确定与发布
确定参考区间及临界值
01
根据数据分析结果，结合专业知识和实践经验，确定参考区间
及临界值。
验证参考区间及临界值
02
通过实验或临床实践等方式，对确定的参考区间及临界值进行
验证，确保其准确性和可靠性。
发布与更新
03
将确定的参考区间及临界值进行发布，并根据新的研究和临床
实践结果进行定期更新和维护。
在选择统计方法时，应考虑其适用性、可靠性和准确性，并避免使用那些可能产生偏差或误导的统计方法。同时，应遵循国 际和国内的相关指南和建议，以确保统计方法的合理性和规范性。
06
案例分析
案例一：血糖参考区间的建立
总结词
血糖参考区间的建立需要基于大量健康人群的血糖数据，通过统计分析得出正常范围。
详细描述
05
参考区间及临界值验证与 建立的注意事项
数据来源的可靠性
确保数据来源的可靠性是验证和建立 参考区间及临界值的重要前提。数据 应来自经过严格质量控制和标准化的 检测系统，并且应定期进行校准和质 量控制检验，以确保数据的准确性和 可靠性。
VS
对于临床实验室，应采用经过批准的 试剂和仪器，并遵循相关操作程序， 以确保数据的可靠性和准确性。同时 ，实验室应定期参加外部质量评估计 划，以监测其数据的质量和准确性。
案例三：血常规指标参考区间的验证
总结词
血常规指标参考区间的验证需要基于大量健康人群的 血常规数据，通过统计分析得出正常范围。
详细描述
首先，收集一定数量健康人群的血常规数据，这些数 据应包括红细胞、白细胞、血小板等指标。然后，对 这些数据进行统计分析，如计算均值、标准差等统计 量。根据统计分析结果，确定血常规指标的正常范围 。最后，将建立的参考区间应用于临床实践，不断收 集数据并更新参考区间。同时，应注意不同年龄、性 别和种族的差异对血常规指标的影响。
参考区间及临界值 如何验证或建立 PPT
参考区间： CNAS认可的要求
1. 实验室应规定生物参考区间或临床决定值，将此规定的依据 文件化，并通知用户。
2. 当特定的生物参考区间或决定值不再适用服务的人群时，应 进行适宜的改变并通知用户。
3. 如果改变检验程序或检验前程序，实验室应评审相关的参考 区间和临床决定值（适用时）。
参考区间的验证和建立
数据分析：验证
≤2个结果超出 待验证区间
Pass
≤2个结果超出 待验证区间
Pass
20个结果
3个或4个结果 超出待验证区间
20个结果
≧3个结果 超出待验证区间
≥5个结果超出 待验证区间
检查分析程序，参考 人群差异，自行建立
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
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前期准备工作： 1. 新仪器新项目：仪器校准、人员培训、熟悉仪器操作； 2. 对检验程序进行验证：包括精密度、正确度、定量限、
分析测量范围、干扰等； 3. 制定参考区间验证方案和计划； 4. 提交伦理审查申请。
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
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参考区间的验证和建立
参考区间的验证和建立
数据分析： 首先检查看有无离群值，即最大值和次大值或次小
值和最小值的差值是否超过1/3极差，如有离群值，须先 去除离群值，再选择参考个体，补齐20例（验证）或120 例（建立），且无离群值。
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
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参考区间的验证和建立
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可以询问和交流
参考区间：CAP认可的要求
D-二聚体检测参考区间的验证与分析
D-二聚体检测参考区间的验证与分析周文宾;谢波;陆红;彭明婷;吴际;成斐【期刊名称】《现代检验医学杂志》【年(卷),期】2014(000)005【摘要】目的：对D-二聚体定量检测的参考区间进行验证，并分析年龄和性别因素对参考区间的影响。
方法明确参考个体入组标准，招募参考个体男性60例，女63例，按年龄分为3组：20～39岁组（男女各20名），40～59岁组（男性20名，女性23名），≥60岁组（男女各20名）。
采集参考个体枸橼酸钠抗凝静脉血，分别使用三种不同品牌的血液凝固分析仪及配套试剂检测D-二聚体浓度水平。
参照美国临床和实验室标准协会（clinical and laboratory standards institute，CLSI）C28-A3文件，对试剂厂商提供的D-二聚体参考区间进行验证，并采用非参数统计比较不同年龄和性别组间的差异。
结果对于40岁以下健康人群，三种检测系统的参考区间均验证通过；对于40岁以上健康人群，A检测系统≥60岁组的验证结果未通过，C检测系统40～59岁组的验证结果未通过。
各检测系统不同年龄组的检测结果比较显示D-二聚体浓度随年龄增长呈升高趋势，20～39岁年龄组与40～59岁组、20～39岁年龄组与≥60岁年龄组的 D-二聚体浓度水平的差异均具有统计学意义（P＜0.05）。
各检测系统20～39岁组及40～59岁组男女间 D-二聚体浓度水平的差异具有统计学意义（P＜0.05），而≥60岁年龄组男女间D-二聚体浓度水平差异无统计学意义（P＞0.05）。
结论 D-二聚体浓度水平与年龄和性别有关。
对于40岁以下健康人群，三种检测系统的参考区间均通过验证，可直接采用；而对于40岁以上健康人群，部分检测系统的参考区间未通过验证，实验室应查找原因，必要时单独设置参考区间。
【总页数】4页(P42-45)【作者】周文宾;谢波;陆红;彭明婷;吴际;成斐【作者单位】卫生部北京医院卫生部临床检验中心，北京 100730;卫生部北京医院卫生部临床检验中心，北京 100730;卫生部北京医院卫生部临床检验中心，北京 100730;卫生部北京医院卫生部临床检验中心，北京 100730;卫生部北京医院卫生部临床检验中心，北京 100730;卫生部北京医院卫生部临床检验中心，北京100730【正文语种】中文【中图分类】R446.112【相关文献】1.Sysmex CS5100检测高浓度D-二聚体的稀释验证分析 [J], 颜楠;屈玲;郑善銮;郝晓柯2.STA-R凝血分析仪检测D-二聚体的性能验证 [J], 官燕飞;彭建明;刘树沅;叶贵诚;庄丑菊3.足月妊娠D-二聚体参考区间分析 [J], 王祝荣4.足月妊娠D-二聚体参考区间分析 [J], 王祝荣5.D-二聚体检测抗原过量现象在Sysmex CS5100血凝仪上的识别及验证分析 [J], 覃凤娴;刘小勇;宋柳英;张巧云;梁委军;巢薇;韦维因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
C28实验室如何确信和成立生物参考区间,核准指南――第二版
临床实验室如何确信和成立生物参考区间（核准指南――第二版）1 内容简介此指南是专为指导临床诊断实验室、诊断仪器试剂制造商和临床查验工作者在定量实验检测中确信参考值和参考区间而制定的。
它包括在临床医学实验室中成立靠得住的参考区间所用的方式步骤和推荐程序。
而该推荐程序的要紧内容是如何用最简便和最务实的方式去成立一个能保证足够靠得住性和有效性的参考区间的草案。
此文献不可能每一种情形都面面俱到，因此有些内容需要通过指南外来充实。
但在特定的区域内，额外的步骤或尽力能够提高参考区间的可信度和精准度。
目前的现状是，临床实验室科研人员和仪器试剂制造商缺乏统一的搜集数据及操作方式去成立参考区间，故小组委员会希望此文献能为成立靠得住的参考区间提供最大体的、统一的实验草案，并为进一步的研究夯实基础。
该程序指南的关键在于决定“相对健康”群体参考值或参考区间时所选择的样品组是不是来源于健康良好的人群，这也是此文献的谈论的重点。
固然，关于其他类型诸如生理或病理情形下的参考值的成立，也应该采纳相似的方式。
此程序概要适用于任何类型的参考区间的确信，因为它充分考虑了适合的参考个体的选择及各类分析方式阻碍因素等情形。
但是，这份文献没有专门地谈到如何成立诊断域值（如危急值或各类医学决定值）。
这些值的决定方式各异，部份还常常要在特定医学条件下由诊断方式的灵敏性和特异性来决定。
不同情形下的参考值研究的各类需求本指南也将涉及，包括：新分析物的测量用新的或不同的分析方式测量事前已明确明白的分析物或已标准化测定的生理学的数据和参考值。
用相同或有可比性的方式去测量同一分析物，并利用其他实验室或试剂生产商提供的参考值作比较研究（参考值的挪用）。
被称为“参考值挪用”的最后一项议题是比较复杂的。
因为尔后所有的临床诊断实验室将会不断地碰到挪用参考值的验证和随后的采纳它那个问题，而试剂生产商和其他实验室所提供的参考值是不能直接应用的。
这一问题的解决方式至今仍然不是超级严格。
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参考区间验证的实验程序
1、目的
通过对引用的试剂说明书、参考书或文献中的参考区间进行验证，确保实验室提供的参考区间适合临床医生对病人诊疗的需要。
2、范围
适用于科室内所有定量检测的测试项目的临床可报告范围的评价。
3、职责
各实验小组的组长负责组织各组室相关定量测试项目的参考区间的验证。
4、定义
4.1参考值范围：对一个参考个体进行某项目检测得到的值为该个体的参考值，所有参考抽样组的各个参考值合起来即为参考值范围。
4.2参考区间和参考限：依据所有参考值的分布特性以及临床使用要求，选择合适的统计方法进行归纳分析后，确定参考值范围中的一部分为参考区间，区间的两端为参考区间的限值，分为低参考限和高参考限。
5、参考区间验证的实验要求
5.1选择健康参考个体，不能选择住院或门诊病人；
5.1.1下列内容常作为选择参考个体的排除要素：
* 饮酒、吸烟史；
* 血压不正常者；
* 正在用药者；
* 近期住院、动过手术者及近期输过血者；
* 孕期及哺乳期限
* 有遗传性疾病；
* 曾患有系统性疾病者；
5.1.2参考个体的年龄分布不应集中于大年龄组儿童，应尽可能选用该项目参
考区间相近的年龄分布；
5.1.3参考个体男女比例应相近；
5.1.4如引用的参考区间分年龄组和性别组，应考虑分组进行参考区间的验
证；
5.2严格按照《标本采集手册》规定的标本采集、处理、运送和保存的要求进行
参考个体的标本采集；
5.3对采集的标本进行分析的检验方法应有可靠的方法学评价；
5.4检测过程（包括定标品、质控品的选择）应与检测病人标本完全一致，就有
完整的质量控制措施；
5.5使用不同仪器或方法检测同一测试项目时，应对仪器、方法学间结果是否具
有可比性先作出评价，否则不同仪器或方法应各自有参考区间；
5.6如某一测试项目有多种样本类型，如血清、血浆、尿液标本，应分别对不同
类型的样本进行参考区间的验证；
5.7对于一些测试项目（如血中药物浓度的检测、脑脊液中总蛋白的检测等），
参考个体的样本较难获得，可直接使用引用的参考区间，不做参考区间的验证实验；
5.8进行参考区间验证的条件：
*新的测试项目开展前；
* 测试项目的分析方法学改变； * 病人群改变；
6、参考区间的验证程序
6.1选择至少10名男和10名女参考个体；
6.2统计各参考个体体测值，与引用的参考区间比较，计算比率R; 比率(R)
总的参考个体数
的参考个体数
检测值在引用参考区间
6.3参考区间验证实验的结果判定：
6.3.1 R 大于等于90%，验证结果可以接受，说明可以引用该参考区间； 6.3.2 R 小于90%，分析查找原因后重新进行参考区间的验证； 6.4形成参考区间验证结果报告，报告内容应包括但不限于： * 参考个体来源； * 样本类型；
* 测试项目及单位名称；
* 引用参考个体的检测值列表； * 测试日期
* 操作者签名及日期，审核者签名及日期
的参考区间验证
操作者： 日期：
审核者： 日期
统计计算：
%
100% 100%
=⨯=⨯=
总的参考个体数
的参考个体数
检测值在引用参考区间R 结 论：
R= %
允许值> 90% 允许值< 90%
全国临床检验操作规程或说明书的参考范围可以引用。
全国临床检验操作规程或说明书的参考范围不可以引用。