中高压层析系统
层析的概念和分类
层析的概念和分类
层析（chromatography）是一种利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术，用于分离混合物中的各个组分。
层析系统由两个相组成：固定相和流动相。
当待分离的混合物随流动相通过固定相时，由于各组分的理化性质存在差异，与两相发生相互作用（吸附、溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含量比）不同。
随流动相向前移动，各组分不断地在两相中进行再分配。
分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组分，从而达到将各组分分离的目的。
根据不同的分类标准，层析可以分为多种类型：
1. 根据固定相的形式，层析可以分为柱层析和平板层析。
柱层析是待分离物质在柱状固定相中进行的层析分离技术，而平板层析则是在平板型固定相中进行的分离技术。
2. 根据流动相的组成，层析可以分为有机层析和无机层析。
有机层析是利用有机溶剂作为流动相的层析技术，而无机层析则是利用无机溶剂或无机盐溶液作为流动相的层析技术。
3. 根据分离原理，层析可以分为吸附层析、分配层析、凝胶过滤层析、离子交换层析和亲和层析等。
以上信息仅供参考，如有需要，建议查阅化学书籍或咨询化学专家。
层析系统介绍
蛋白质纯化系统概况蛋白质纯化系统是我们开发的具有自主知识产权的产品，主要包括高压梯度层析泵、进样阀、多波长紫外检测器、电导、pH、温度检测器等硬件，以及用于仪器控制、方法编辑、数据及用户管理的多界面智能化计算机软件。
可进行离子交换层析、疏水作用层析、反相层析、亲和层析等不同层析模式操作，用于各类疫苗、抗体药物、酶、天然产物有效成分等的分离纯化。
Protein purification system, the product with independent enzyme and the active ingredients in natural product. intellectual property rights, is developed by ourselves. It consists of high-pressure gradient pump, sample valve, multi-wavelength UV detector, sensors (conductivity, pH and temperature) and other hardware, as well as the intelligent software for instruments control, method edit, data and user management. The system could be operated with various chromatography mode, including ion-exchange, hydrophobic interaction, affinity, reversed phase, etc., for the separation and purification of vaccine, antibody,产品优势•生物兼容性高压梯度泵•3波长同时在线紫外检测•网络化数据通讯模块•全流路参数在线显示,计算机在线操作•High pressure gradient pump with biological compatibility•Three wavelengths UV detectionsimultaneously•Networked data communication module•Parameters of the whole flow-pathdisplayed on-line•On-line operation with computer技术规格。
层析系统操作方法
层析系统操作方法
层析系统是一种高效的分离、纯化、分析化合物的方法。
其操作方法如下：
1. 样品的制备：将待分析的化合物或混合物溶解或悬浮于适当的溶剂中，以备注入样品进样口。
2. 进样：将样品注入样品进样口。
通常，进样口位于柱子的顶部或侧面，具体位置根据不同型号的层析柱而定。
3. 选择移动相：选择适当的移动相。
通常有两种移动相，一种是常规液相，另一种是气相。
4. 开始层析：开启泵，让移动相流经层析柱，分离化合物。
移动相会使得不同化合物在柱子内产生不同的扩散速度，从而分离。
5. 收集分离后的化合物：化合物随着移动相流出层析柱，通过检测器进行检测并记录。
对于需要进一步分析的化合物，可以通过收集样品进行后续的调查研究。
6. 停止层析：关闭泵，停止层析操作，清洗设备。
需要注意的是，在进行层析操作之前，需要根据不同的化合物选择不同的适宜移动相，从而实现更好的分离效果。
NGC下一代中高压层析系统
真正意义的模块化设计 - 即插即用型的模块设计，轻松定义模块 位置和系统配置 - 根据纯化实验的需要，可随时拓展或变 更系统和模块的功能
Life Science Group I Chromatography
一脉相承的设计思路——直观的软件操作
指向探索(Point to PlumbTM )
一目了然的批次表达量纯度分析与比较lifesciencegroupchromatographychromlab软件系统控制手动运行可在手动运行过程种进行操作校准指向探索电脑可实现控制电脑与主机的空间分隔在位进行方法设置可手动添加队列运行并实现显示在手动运行状态栏中可实现控制电脑与主机的空间分隔在位实现方法运行数据分析远程控制可通过免费的vnc程序实现ipad系统或安卓系统的远程操控与实时监视lifesciencegroupchromatographychromlab软件特征和客户受益软件特征客户受益基于不同的层析步骤逐步建立运行方法对于初学者更直观易上手自动检测模块使修改或定制系统更容易软件能够手动运行方法手动运行结果能够被保存pointplumb指向探索功能软件实时指示流路辅助模块安装自动峰积分一键点击实现峰和积分方法模板预制的模板能够适用于大部分常规技术和层析柱october2012系统简介lifesciencegroupchromatographyngc的关键特征以及客户受益关键特征客户受益即插即用根据实验需要随时更改系统配置可扩展平台从实验研究到小规模生产大流速样品泵样品泵直接进样避免对系统泵污染360旋转魔方层架tm实现最小或最适样品流路减少死体积高精度系统泵10mlmin和100mlmin满足不同应用需要磁力柱夹使层析柱的更替变得更轻松led实时状态指示灯实时检测模块运行状态和实验参数lifesciencegroupchromatographylifesciencegroupchromatography满足您任何纯化需求的下一代层析系统家族questquestplus可用于蛋白多肽以及核酸的纯化型号基本性能quest10最大流速10ml单波长检测quest100最大流速100ml单波长检测quest10plus最大流速10ml多波长检测quest100plus最大流速100ml多波长检测lifesciencegroupchromatography满足您任何纯化需求的下一代层析系统家族scoutscoutplus具有缓冲液在线配制功能满足当前大部分蛋白纯化需求型号基本性能scout1020ml流速单波长检测scout100200ml流速单波长检测scout10plus20ml流速多波长检测scout100plus200ml流速多波长检测october2012全面的支持lifesciencegroupch
omnifit层析柱
omnifit层析柱
Omnifit层析柱是一种进口玻璃中压层析色谱柱，由英国豪迈集团子公司迪贝流体控制有限公司收购的豪迈旗下另一子公司百柯流体公司下属的Omnifit品牌研发生产。
Omnifit层析柱装填的层析填料粒径≤50 µm，具有一个可调终端片，可快速方便地进行高度调整。
该层析柱具有耐用性和简易性，可用于大多数低压及中压液相层析，对于蛋白纯化层析系统、中低压液相色谱或连续流化学应用等有良好的性能。
Omnifit层析柱的尺寸范围广泛，包括从小于1毫升到940毫升、内径从5mm到50mm、高端从50mm到500mm等。
该层析柱的适用压力范围广，化学兼容性好，额定温度高，可以和GE AKTA系列蛋白纯化系统、Sanotac Biolot 蛋白纯化系统、Biorad NGC高压层析系统等蛋白分离纯化系统和制备液相色谱系统配套使用。
浅谈低压、中压、高压液相色谱
浅谈低压、中压、高压液相色谱制备型加压液相色谱，按照色谱柱和样品量的大小，分为：（1）低压液相色谱；（2）中压液相色谱；（3）高压液相色谱；（4）快速色谱。
低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠，没有统一、明确的标准。
1. 快速色谱柱压通常为2bar（或30psi）左右，对于那些容易分离的简单混合物，由于快速色谱具有操作简便、经济等优点，常常是实验室的首选。
但快速色谱不同于一般的层析分离，这种分离没有压力，而快速分离通常使用瓶装氮气加压，使流动相具有一定的流速，从而缩短了分离时间。
Still等人率先于1978年详细研究了快速色谱，并于1981年获得了专利保护(美国专利4，293，422)。
快速色谱使用的柱子一般是玻璃柱，柱直径为3～10cm．长度为7～15cm。
快速色谱中使用最广泛的固定相为硅胶。
采用的粒径通常为：25～40um，40～63um或63～200um的球形固定相。
其它如键合相、氧化铝、聚酰胺吸附剂也常用作快速色谱的固定相使用。
2. 低压色谱（LPLC）柱压一般低于5bar（或75psi）。
低压色谱一般是由蠕动泵、进样阀和检测器组成，可以连续化，实现自动的梯度淋洗和馏分收集等操作。
色谱柱管一般是玻璃或聚合物材料的，长度一般为240-440mm，内径为10-40mm。
对于大多数在紫外区有吸收的物质，光学检测器很常用。
填料一般使用软质的葡聚糖、琼脂糖、纤维素、合成高聚物或离子交换剂，粒径一般为40-60um。
3. 中压液相色谱（MPLC）柱压在5-20bar（或75-300psi）之间，广泛用于实验室和工业规模的生物制品(如动物脏器提取液、浓缩液、体液、植物提取液、生物技术发酵液等——往往需要经过滤膜作初级净化)的处理，以提取或纯化所需的产品。
中压液相制备色谱的主要部件为输液泵、进样阀、检测器、馏分收集器等，比如瑞士公司的早期的中压液相制备色谱，其输液泵最大流速可达156mL/min，并配有阻尼器，以保证液流的稳定；进样器配有0.5-50mL的不同体积的定量管；检测器有紫外和示差折光检测器，流通池体积比较大，允许大流量流动相通过而无需分流；馏分收集器有原盘式和排式两种，原盘式的接收管最多达80个，而后者则更多；色谱柱内径9-105mm，长度250-1760mm 不等。
低压层析系统
4/28/2021
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层析法
4/28/2021
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层析法
吸附层析 是以吸附剂为固定相，根据待分离物与吸附剂之间吸附力不同 而达到分离目的的一种层析技术。
e) 单击工具栏
按钮，可计算所选收集峰的相
关数据。方法如下：
用纵向两根棕色线确定收集范围：
点击左边一根棕色线，移至收集起始点，点击；
点击右边一根棕色线，移至收集结束点，点击。
用纵向两根绿色线确定收集峰峰宽：
点击左边一根绿色线，移至收集峰的起始点，点击；
点击右边一根绿色线，移至收集峰的结束点，点击。
用横坐标上一根紫色线确定收集峰的基线：
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HHDD-5-电5电脑脑紫紫外外检监测测仪仪-5
使用方法：
一、 校对仪器工作状态 1. 选定检测波长： 从有机玻璃盒中取出干涉滤光片（250nm或 280nm），插入仪器正面“滤光片”下方小长方孔内，并使其插入到 底部位置（插入时应注意使干涉滤光片侧面有一直径为3mm的半球形 凹槽朝上）。 2．按下“电源开关”（在仪器后背板上），仪器预热20分钟，以便 得到较好的稳定性。 3. 校对T﹪～A a）. 按下按键开关“Ｔ”键，“透过率T”指示灯亮。调节“调T” 旋钮（顺时针调节透过率增大），使数字显示100，此时 透过率T为100% 。 b). 按下按键开关“1A”键，“吸光度A”指示灯亮，调节 “A调零”旋钮，使数字显示000，此时吸光度A为零。
4/28/2021
NGC下一代中高压层析系统
Life Science Group I Chromatography
技术概览
• 兼容中高压层析柱/色谱柱的开放平台
• 0.001-10 ml/min 或 0.01-100 ml/min 的系统泵
• 缓冲液进口模块和缓冲液自动配制模块可用于自动摸索层析条件和缓冲液制备 • 灵活的样品上样选择，通过上样环（静态或动态），和专用的样品泵，而无需重新连接系统，C96 自动上 样系统也可直接连接到进样阀进行高通量上样 • 层析柱柱位切换模块可进行5柱切换，内置旁路经过和反向流动切换功能，用于亲和层析柱的洗脱和清洗 • 单波长检测器 (255/280nm),或多波长检测器可进行同步多达4波长（紫外和可见）的监控，两种检测器均 整合了电导检测器。
NGC软件：ChromLab
October 4, 2012
直观的ChromLab 软件主页
Life Science Group I Chromatography
远程控制与扩展
Life Science Group I Chromatography
高度友好的手动控制界面
Life Science Group I Chromatography
Future Technology for Purification
October 4, 2012
变化
CHANGES
NGC 改变的不仅仅是纯化，还有我们的生活！
October 4, 2012
NGC ‘3A’ 价值主张
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支持：独特的可放大的解决方
案 满足您的通量需求
适应：灵活的系统可以轻松定
制以满足您的应用
9种层析分离纯化方法详解
9种层析分离纯化方法详解层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。
所有的层析系统都由两个相组成：一是固定相，它或者是固体物质或者是固定于固体物质上的成分；另一是流动相，即可以流动的物质，如水和各种溶媒。
当待分离的混合物随溶媒（流动相）通过固定相时，由于各组份的理化性质存在差异，与两相发生相互作用（吸附、溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含量对比）不同，而且随溶媒向前移动，各组份不断地在两相中进行再分配。
与固定相相互作用力越弱的组份，随流动相移动时受到的阻滞作用小，向前移动的速度快。
反之，与固定相相互作用越强的组份，向前移动速度越慢。
分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组份，从而达到将各组份分离的目的。
按层析原理可将层析分为以下9种：1、亲和层析利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力，从而达到分离的目的。
将可亲和的一对分子中的一方以共价键形式与不溶性载体相连作为固定相吸附剂，当含混合组分的样品通过此固定相时，只有和固定相分子有特异亲和力的物质，才能被固定相吸附结合，性无关组分随流动相流出。
改变流动相组分，可将结合的亲和物洗脱下来。
亲和层析中所用的载体称为基质，与基质共价连接的化合物称配基。
具有专一亲和力的生物分子对主要有：抗原与抗体，DNA与互补DNA或RNA，酶与底物、激素与受体、维生素与特异结合蛋白、糖蛋白与植物凝集素等。
亲和层析可用于纯化生物大分子、稀释液的浓缩、不稳定蛋白质的贮藏、分离核酸等。
亲和层析纯化的分离原理特点：亲和层析具有高选择性、高纯度、快速、浓缩等特点，在重组蛋白的分离中多作为第一步的粗纯，实现对绝大部分杂质蛋白的去除。
2、离子交换层析采用具有离子交换性能的物质作固定相，利用它与流动相中的离子能进行可逆交换的性质来分离离子型化合物的方法。
主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质，也可用于分离核酸、核苷酸及其他带电荷的生物分子。
不同蛋白质的等电点（pI，isoelectric point）特性，使在不同pH缓冲液条件下所带正/负净电荷不同，选择不同的离子交换柱实现分离。
什么是色谱分析系统-浅析色谱分析系统
什么是色谱分析系统?浅析色谱分析系统许多人都会对蛋白质纯化技术中的色谱分析系统比较感兴趣，但相对色谱分析系统了解多少呢？了解色谱分析系统前，我们先了解下色谱分析。
根据色谱分析法分离原理，有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。
而色谱分析是个繁杂的活，需要投入大量的时间与精力。
市场上生产出的色谱分析仪也多种多样，但是能够掌握核心技术要点的并不多。
如伯乐生命()色谱分析系统操作简单，功能性也强，但能做到这样的毕竟不多。
如果您是初入行业，选取时候要多看看。
色谱分析系统是指专门进行色谱分析的系统。
色谱分析又称色谱法、色谱分析法、层析法，是一种常见的分离、分析的方法，常常运用在分析化学、有机化学、生物化学等诸多领域。
色谱分析系统的原理其实很简单，就是利用不同物质在不同相态中的选择性分配，对流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终就能够达到分离的效果。
其实色谱分析法源于20世纪初，并在1950年代发展出一个独立的三级学科-色谱学，色谱分析法还在12项获得诺贝尔化学奖的研究工作中起到关键作用，其重要性由此可见。
当前随着对生物大分子研究的日益深入，对蛋白质纯化技术中的核心设备--色谱分析系统的功能要求也逐渐增加，比如伯乐公司推出的最新一代中高压层析系统NGC()，就能实现诸多功能，譬如自定义色谱，选择要分析、检测的图形，自定义图形的颜色以及层析图的大小等。
用来记录UV值的Y轴也可自由独立或合并，并且放大感兴趣的地方，也可以对图形进行叠加及比较。
需要进行图形比较时，可通过自动布局，同时比较十次运行的数据。
如果需要进行图形叠加，只要把不同运行过程中的层析图进行叠加即可，色谱分析系统操作十分简单。
相信伯乐生命推出的NGC系列中高压层析系统会将整个生物大分子纯化工作带入全新的3.0时代。
加压层析柱
加压层析柱
加压层析柱（Preparative HPLC）是一种用于纯化化合物的分离技术，它通过高效液相色谱技术（HPLC）将混合物中的化合物分离开来。
加压层析柱通常用于分离和纯化实验室中的化合物，尤其在制药、生物技术和化工行业中得到广泛应用。
加压层析柱的工作原理是利用高压将混合物溶解在流动相中，然后通过柱子内填充的固定相进行分离。
在经过柱子后，不同化合物会因其在固定相上的亲和力差异而分离开来。
这种技术可以分离出高纯度的目标化合物，通常用于从天然产物中提取有机化合物、合成化合物的纯化和分离。
加压层析柱的优势在于其分离效率高，分离速度快，且对样品的需求量较小。
此外，加压层析柱还可以通过改变流动相、柱子填充物和操作条件来适应不同化合物的分离要求。
因此，它被广泛应用于各种类型的化合物分离和纯化过程中。
在制药行业中，加压层析柱被用于分离和纯化药物的原料药，以确保药物的纯度和质量。
在生物技术领域，加压层析柱可以用于分离和纯化蛋白质和多肽等生物大分子。
在化工行业中，加压层析柱则被用于从复杂混合物中纯化出特定化合物，以满足工业生产的需求。
总之，加压层析柱作为一种高效的分离技术，在化学、生物和制药领域中扮演着重要的角色。
随着技术的不断进步，相信加压层析柱在纯化领域中会有更广泛的应用和发展。
生物大分子分离纯化-原理与技术
35精品课件
2020/8/16
凝胶过滤层析
凝胶过滤层析的特点：
1. 层析柱规模很大，实验室1.0-2.5×30-100cm，工艺10－20×200cm，从 而设备成本很高；
2. 上样体积少，必须少于柱床体积的3％才能达到较好的分离效果，如果 大体积样品必须浓缩，从而造成样品的损失和增大工艺的复杂性；
2020/8/16
凝胶过滤层析
凝胶的选择
Bio-Gel P4(800-4,000) for separation digested products from IgG
27精品课件
2020/8/16
凝胶的选择
Bio-Gel P6(1000-6000)
凝胶过滤层析
28精品课件
2020/8/16
凝胶的选择
largemoleculesleavethecolumnfirstfollowedbysmallermoleculesinorderofsizemoleculeslargerthanthematrixporespassstraightthroughdiffusionbufferdiffusionintotheporesdiffusionoutoftheporesbuffer凝胶过滤2320171128凝胶过滤层析分离纯化原理2420171128agoodgelforgelfiltrationcontainsabout95water凝胶结构2520171128stericexclusionleadstoearlyelution?按照分子量大小洗脱?大分子首先洗脱最小的分子在最后面洗脱2620171128100100010000100000biogelp2biogelp4biogelp6biogelp10biogelp30biogelp60biogelp1001800800400010006000用于脱盐1500200002500400003000600005000100000100凝胶过滤层析凝胶的选择2720171128biogelp48004000forseparationdigestedproductsfromigg凝胶过滤层析凝胶的选择2820171128凝胶过滤层析biogelp610006000凝胶的选择2920171128凝胶过滤层析biogelp10150020000凝胶的选择3020171128凝胶过滤层析bioscaleminibiogelp6脱盐预装柱?操作方便可连接在duoflowlpprofinia和econo泵上3120171128biobeadssx介质多孔的聚苯乙烯二乙烯微球体biobeadssx1biobeadssx3600biobeadssx81000biobeadssx12400高分辨率亲脂性分子排阻色谱200014000中草药和天然产物活性成分分离纯化高分辨率快速纯化酯类芳香族多环杂环化合物高分辨率快速纯化酯类芳香族多环杂环化合物介质可兼容苯甲苯二甲苯四氯化碳二甲基甲酰胺酮二氯甲烷二氯代苯全氯乙烯等有机溶剂介质可兼容苯甲苯二甲苯四氯化碳二甲基甲酰胺酮二氯甲烷二氯代苯全氯乙烯等有机溶剂凝胶过滤层析32201711281三硬脂酸甘油酯8912三肉豆蔻酸甘油酯7293三月桂酸甘油酯
NGC系统维护指南
冷凝水。若仪器至于室温环境，则可根据您的使用需要决定是否关闭 若您的控制电脑也处于室温条件，则可关闭主机与显示器以节约能源（只要没有程序 在运行） 若因为工作需要，仪器可能长期不用，可按下列步骤操作 根据层析柱或介质的生产商建议，对柱或介质进行清洁和保存 若您的系统配置有柱切换阀（column switch valve，CSV），在执行 System CIP/Storage 程序前请确认当前的阀位处于“Bypass”状态 若您不使用柱切换阀，则可将柱拆下，然后进行下部操作 用去离子水对整个系统包括所有浸润部件进行一轮清洗，以去除可能残留的杂质。
擦拭电源开关、信号连接模块的借口以及仪器后部的接口处。 清洁缓冲液层架。可用清水对缓冲液层架进行冲洗擦拭，污水可从层架的排液口经废
液管排出 注意：请确认排液口后部是否连接有废液管
清洁 NGC 液流系统 小贴士：您可使用 ChromLabTM 软件中的 System CIP/Storage 命令进行系统的液流通路 清洗。欲了解更多关于 CIP 相关的信息，请参考“NGC Chromatography System and ChromLab Software User Guide” 用经 0.45μm 滤膜过滤的 1N NaOH 溶液清洗所有的液流管路 用大量经 0.45μm 滤膜过滤的去离子水冲洗所有的液流管路，去除管路内的 NaOH 将所有溶液进口及外露部分用洁净的去离子水冲洗后至入干净的去离子水或溶液中
注意：不要用水或清洗剂直接冲刷仪器表面
液流系统
1N NaOH，随后用大量已过滤的去离子水冲洗
生物药物的提取纯化技术
按照膜的结构分为对称性膜、不对称膜和复合 膜。
用于生物制药工业中的膜材料要求耐温性能 要好、耐酸碱处理、有较好的生物相容性（即要 求膜对蛋白质和酶等生物大分子不产生变性，无 抗原性）。
按照膜的材料可分为合成聚合物膜、 无机材料膜和不锈钢膜。如常用的微滤膜 材料有醋酸纤维酯和硝酸纤维酯、再生纤 维素和聚四氟乙烯等，超滤膜材料有聚砜、 聚醚砜、聚偏二氟乙烯、硝酸纤维酯(或 醋酸纤维酯)、尼龙、丙烯腈-氯乙烯共聚 物膜。此外还有不锈钢膜。
以上各个部分都要有验证材料或试验数据，根 据这些材料和数据写出验证报告。当工艺的某一 部分有较大变动 (大修、工艺条件变化)时，要进 行重新验证（再验证）。再验证是针对某一部分 的行动，而不是整个工艺过程的验证，因此比较 简单、快速、易行。验证的实施过程包括以下步 骤：提出验证要求、组织验证小组、制定验证方 案、实施验证试验、写出验证报告和再验证。
五、生物药物生产的屏蔽防护技术 (Containment technology)
一些药物(如抗癌药)往往对生物活细胞具有毒 性，因此必须对中试或大生产的全过程设置屏蔽 防护装置。其基本要求是：人员进出口要加以控 制；在工作场所保持负压(一级、二级或三级生物 密封室)；空气的排放必须通过HEPA过滤器；对 有烟雾产生的设备要有附加的屏蔽防护装置；有 适当的个人防护措施；生产过程中所排放的废物 要有生物学或化学的除污方法；对工作人员进的单元操作和基本工艺流程
生物药物的提取和纯化可分为5个主要步 骤：预处理、固液分离、浓缩、纯化和产 品定型(干燥，制丸，挤压，造粒，制片)。 每一步骤都可采用各种单元操作。在提取 纯化过程中，要尽可能减少操作步骤，因 为每一操作步骤都不可避免带来损失。生 物药物提取工艺流程的基本模式如图7-1所 示。
中高压层析系统
测量探头1000个，数据处理器2000个
显示器
点阵式带背景光液晶显示器
可单机存储，统计数据及打印，也可连接电脑进行数据处理
(3)制冰机
要求
产出的冰为规则立方形颗粒状结构，不易结块,更有利于碎冰抱紧容器,冰浴效果更佳
无氟制冷符合最新环保标准
不锈钢机身,四个支角高度，水平可调
储冰室的门与机身同宽，便于用户取冰
进行实验组之间的统计学分析，t test，聚类分析等，鉴别有显著性差异的点并将凝胶分类
2、气相色谱、嗅味检测器(进口)
要求气相色谱和嗅味检测器能联机使用
（1）气相色谱
仪器包括
毛细管柱及手动进样器,氢火焰检测器，化学工作站控制及色谱数据处理系统，闻香器专用接口
柱箱
程序升温
20阶21平台
降温速率
从450˚C降至50˚C〈240秒（22℃室温下）
通过软件校准，可设定发酵参数，微处理控制及LED显示过程参数
空气系统
包括转子流量计、空气除菌过滤器
搅拌系统
机械搅拌
配件要求
pH电极、 pO电极:均可反复高温灭菌。
智能化消泡电极
蠕动泵：两台，每台最大进样量3.7ml/min,可0~100％精密控制。
全套取样设备，进样瓶,耗材包。
软件要求
可通过软件系统分析、处理、比较过程数据，并可导出保存分析;带电脑（19寸液晶显示器)
3、发酵罐、手持色差仪、制冰机（进口）
（1)发酵罐
基本要求
罐体系统
罐体容积:（总体积/工作体积/直径）5L/3。5/140NW
材料:硼硅酸盐玻璃罐体，封头为316L不锈钢材料
标准接口,适用于各种探头，一个接种口,多个补料接口
蛋白层析系统
蛋白层析系统
蛋白层析系统是一种常用的蛋白质分离和纯化技术。
它基于蛋白质在化学或物理条件下的差异而实现分离纯化的目的。
蛋白质层析系统通常包含以下几个主要组成部分：
1. 高效层析柱：蛋白质样品通过柱状填料进行分离。
填料通常是多孔性固体材料，如海洛因、DEAE、Octyl-Sepharose等。
填料的选择和操作条件是根据目标蛋白质的性质和纯化要求来确定的。
2. 缓冲液系统：用于保持适宜的pH值和离子强度，以确保蛋白质在层析柱中具有最佳的亲和性和分离度。
缓冲液系统通常包括运行缓冲液、平衡缓冲液和洗脱缓冲液，其配方也需要根据具体需要进行调整。
3. 层析设备：用于控制流速、压力和温度等操作参数。
常见的层析设备包括高压液相层析仪（HPLC）、低压液相层析系统（FPLC）和手动操作的层析设备。
4. 蛋白检测系统：用于检测和监测层析柱流出液中的蛋白质含量。
常见的检测方法包括紫外光谱、荧光标记和蛋白质浓度测定等。
蛋白层析系统的操作步骤通常包括样品预处理、层析柱平衡、样品加载、洗脱和回收等。
不同的层析技术还可以结合其他分离方法，如亲和层析、离子交换层析、尺寸排除层析等，来实现更精确的纯化目标。
蛋白层析系统广泛应用于生物医药研究和生产中，可以从复杂的混合物中高效地纯化目标蛋白质，满足药物研发、蛋白质结构分析和生物学功能研究等领域的需求。
中压层析的知识点
关于中压柱的知识点★中压制备柱色谱经典柱色谱与低压柱色谱的分辨率一般还是有限的，因为它们所用的分离材料的颗粒一般比较大。
如果要进一步提高制备色谱的分辨率，通常只有进一步减小材料的颗粒或者增加色谱柱的长度，这样无疑会增大色谱柱的阻力及降低流动相的流速。
另外，不同的冲洗溶剂所造成的流动相流速也有很大差别，如采用正相，以环己烷作为流动相时，流动相的流速较快；而采用反相，以水作为流动相时，则流速较慢，使用一些黏度较大的有机溶剂，如正丁醇也有同样的结果。
为进一步提高制备色谱的分辨率又能保证有较快的分离速度，使用中压制备色谱是行之有效的办法。
中压柱色谱与经典柱色谱或低压柱色谱相比需要更多的组件，最简单的配置是除色谱柱外，再加上一台能够提供几十公斤压力的恒流泵。
中压柱色谱的工作原理是由恒流泵输送移动相，通过进样阀上样，在色谱柱对样品进行分离后，利用检测器检测，记录仪记录，并同时收集各个馏分。
在实际工作中，往往并不一定需要购置成套的装置，而是根据自己的研究需要和经费状况，分别购置适宜的组件自己组装。
中压制备柱色谱一般由下面最主要的几个部件组成。
恒流泵中压制备柱色谱除色谱柱外，唯一不能省掉的就是恒流泵。
恒流泵的类型很多，从高效液相常规使用的泵到蠕动泵，都是恒流泵，也即都能以恒定的流量输出液体。
所不同的是高效液相使用的泵通常要求最高压力能达到40MPa，最大流量达到10mL/min,流量的精确度和准确度也要求很高。
低压柱色谱恒流泵压力为0.3-0.5MPa，中压柱色谱对泵的要求则介于二者之间。
一个恒流泵能达到的压力越高，输出流量的精确度和准确度要求也越高，在实验室购买恒流泵时，主要考虑的是其能达到的最大压力最大流量，其次才是精确度和准确度。
目前使用的恒流泵多数是柱塞式往复泵。
色谱柱多数情况下中压制备色谱的色谱柱都是由耐压的强化玻璃制成，并且都是由自己装填柱子，最常用的分离材料颗粒的大小为15-25微米和25-40微米。
NGC下一代中高压层析系统模块选择指南
Bulletin 6326 Rev A
DESIGNED BY YOU. BUILT BY BIO-RAD.
NGC 系统性能原理图
水 盐 碱 酸
x8
x8
x5
进液阀、缓冲液自动配制和系统泵
上样
层析柱切换和反向流动
样品监控
组分收集
泵进液与缓冲液自动配制
F10 往复柱塞泵
系统泵 一套多用户、多应用和多种纯化要求的层析系统经常使用各种类型和大小的层析 柱。NGC 层析系统可使您通过更换泵模块以满足您的特定要求。 NGC 家族层析系统含有多达三种高精度泵：2 套系统泵 ( 梯度 ) 和 1 套样品泵， 都整合在仪器中。 系统泵模块含有 LED 灯，可实时显示泵状态、流速和压力。
伯乐生命医学产品 上海
地址 上海市浦东东方路 18 号 保利广场 E 栋 3 楼 电话 021 - 6169 8500 传真 021 - 6169 8599 邮编 200120
有限公司
北京办事处
地址 北京朝阳区曙光西里 5 号 A 栋凤凰置地广场 22 楼 电话 010 - 5939 0088 传真 010 - 5939 0160 邮编 100028
磁力柱夹使您可以将层析柱精确的安置在您想要的任何位置，以最小化所需的实验台 空间，同时减少管路连接。 泵、检测器和 pH 在位监控都配有 LED 灯，实时显示系统状态和模块性能。
© 2013 Bio-Rad Laboratories, Inc.
PEEK is a trademark of Victrex PLC.
梯度混合精度
pH 8.5
F10 泵：±0.5％ ( 3 － 97％ B，0.25 － 10 ml / min，3,650 psi 压力下 ) F100 泵：±0.5％ ( 3 － 97％ B，0.25 － 100 ml / min，1,450 psi 压力下 )
各类层析色谱分析技术完全讲解
层析介质与生物大分子的关系
大孔径的，亲水性好的球形材料。 多糖类凝胶层析介质最常用
Sephadex
Sepharose Bio-Gel
缺点：刚性差，不耐压，分离时间长
层析介质的性能
层析介质的形状：球形，不定形 技术指标
粒度大小：粒度小，分离效果好，但流速慢
均匀度：均匀，流速快，峰值集中 机械强度：强度高，流速快，保留值小，柱效高 理化性质：稳定，非特异性吸附少，亲水性好，耐酸碱和有机溶剂 吸附容量：单位质量或体积的层析介质吸附流动相中溶质的质量。
流动相
流动相
缓冲溶液：根据待分离物质的性质（等电点、极
无机化合物：无机盐类、无机酸类、络合物类等 有机化合物：烷烃类、有机酸和有机胺类、杂环类 生物大分子：核酸和核苷酸类、蛋白质、酶及肽类、多 活体生物：
糖及寡糖类、激素类 病毒、细菌、细胞器等
分析的参数
常见的层析分离法分析技术，是以混合物中分离 单一成分，制备一定量的产品为主，以分析鉴定 化合物的性质，获得分析参数为辅。
原理
根据物料中各组分对固定相(吸附剂) 的吸附程度不 同，以及其在相应的流动相(溶剂)中溶解度的差异 来实现。经反复的吸附—解吸—再吸附—再解吸的 过程，达到分离目的。 无化学键引入，只存在相对较弱的氢键力、范德华 力和偶极力相互作用。
吸附力的产生
吸 附
吸附：任何两相都可以形成界面，其中一相的 物质或溶解在其中的溶质在另一相表面上发生 密集行为。
薄层层析法
纸层析法
薄膜层析法
高压层析柱
高压层析柱
高压层析柱是一种特殊的层析柱，它使用高压来促进分离组分的速度和效率。
它也可以用来测定各种化学物质，从而获得更准确的结果。
高压层析柱属于结构相似的仪器，仅是外部形式上略有差异。
它由一系列金属管、填料和控制阀组成，以满足流体的不同压力需求。
高压层析柱的内部结构是由一系列细小的孔组成的，当流体从层析柱的一端传输到另一端时，不同的组分会在不同的孔中分开，从而实现层析。
高压层析柱的应用非常广泛，在分析有机物质和小分子物质时，它甚至可以用来调节组分的运动，利用组分之间的化学反应来进行尺寸分离，从而节省时间、空间和费用。
此外，高压层析柱也可以用于像水质分析、药物检测、化学物质分析等研究领域，这些应用场景无不依赖于高压层析柱所提供的敏感性和准确性。
高压层析柱的使用还需要遵守一定的安全规则，例如：当关闭压力时，必须确保压力完全放出，以确保安全。
此外，压力调节阀和其他部件也需要经常检查，以确保它们在正常工作状态下。
总之，高压层析柱是一种重要的仪器，它不仅有助于将复杂的组分分离和测量，还可以用来测定各种有机物质、药物和化学物质的组成。
由于其准确性和敏感性，高压层析柱在各种分析技术中有着重要的应用，目前已经成为许多科学家和工程师研究领域的标准设备之一。
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对图像进行操作，包括旋转，镜像，裁切
可以将不同文件夹中的图像文件在一组实验中分析
单一文件包括图像、点、数据结果各种信息,实验被压缩备份,节省磁盘空间和操作时间
全部操作过程都可以撤销/重作操作，每一步骤都附有说明
全自动、半自动和人工找点模式，用可调的高效能参数，并有蛋白点的三维立体显示功能
方式
时间,体积,峰收集(时间),峰收集(体积)
控制
所有部件通过软件控制
缓冲液配制功能
自动缓冲溶液制备–母液不需调pH
流路
PEEK惰性材料，以保持蛋白质活性
其他要求
可选购气泡感应器；从进样，纯化，收集到打印报告全程自动化；自动数据处理、定量功能；自动报告功能；符合GMP/GLP，系统安全，用户权限设定，跟踪记录，运行记录，验证支援文件等；层析柱资料库；可修改报告模式；带电脑（19寸液晶显示器）
（2）双向电泳仪
系统组成
第一向等电聚焦电泳系统、第二向高等通量高分辨率垂直电泳系统、扫描仪、2D图象分析软件、带电脑（19寸液晶显示器）
第一向等电聚焦电泳系统
组成
由等电聚焦仪（内置电源）、干胶条溶胀盘、聚焦盘、平衡管、第一向控制软件等组成
等电聚焦仪
电极区
铜镀金表面
胶条槽容量
最多12个相同长度的胶条槽
通过软件校准，可设定发酵参数，微处理控制及LED显示过程参数
空气系统
包括转子流量计、空气除菌过滤器
搅拌系统
机械搅拌
配件要求
pH电极、pO电极：均可反复高温灭菌。
智能化消泡电极
蠕动泵：两台，每台最大进样量3.7ml/min,可0～100%精密控制。
全套取样设备，进样瓶，耗材包。
软件要求
可通过软件系统分析、处理、比较过程数据，并可导出保存分析；带电脑（19寸液晶显示器）
样品量
0.5～3.0克
测量范围
0～100%
仪器测定时间
=<100分钟/次
重现性
优于+/-1%
每个样品可分别独立操作
带报警计时器
可随意调节水解沸腾量
配2位试剂预热器，6个石英玻璃坩埚
5、在线气体监控系统（进口）
组成
由气体检测仪和气体混和仪组成
气体检测仪
要求
可测O2和CO2
O2传感器
传感器寿命＞５年；检测范围：10PPM-100%；重复精度：0.001-0.1%；检测精度：0-1%，绝对值的±0.01%，
1、中高压层析系统、双向电泳仪（进口）
（1）中高压层析系统:
工作温度
4～40℃
溶剂兼容
所有层析常用缓冲溶液
系统泵
数目
2
流速
0.01～100 ml/min (梯度模式)ຫໍສະໝຸດ 间隔0.01 ml/min
压力范围
0～10 MPa (1450 psi)
粘稠度
最大5cP
自动根据压力调节输出使流速保持稳定
混合器
数目
1
玻璃板
26 x 20cm，厚1.0mm，6套
空白板
26 x 20cm，厚1.0mm，5套
扫描仪
扫描模式
透射，反射
光学密度范围宽
>3.7OD
数据输出
灰度：14 bits/pixel彩色：42 bits/pixel
分辨率
10微米
其他
具有多种扫描速率、高速扫描、多种波长可选；密封环境，可直接扫描湿胶；透射方式适合更厚的样品分析；
第一向控制软件
可开始、暂停和终止主机运行
实时监控电泳时的电压、电流、伏小时，以图形方式显示，可存储或输出到其它应用程序如Excel中
输出、存储和打印专业的报告
通过网络远程监控仪器
聚焦盘
材料
表面涂有疏水涂层的氧化铝陶瓷材料，散热性能好，不易变形
长度
五种固定长度：24,18,13,11,7cm及可调长度：7 - 24cm范围内任何长度
嗅味闻香口是直径为30cm玻璃管口，可以任意调节倾斜角度
主机传输线在分离柱末端进行加湿处理，加湿气体压力：0—300kPa，流速：0—50ml/min
手持式控制单元可设置接口温度为：50℃—350℃，使用模拟信号发生器指针转轮可以调节最大输出信号为：(1V, 5V和10V)，调节到100%读数刻度，在最大量程处会发出警告
技术要求
温度控制
高于制冷介质5℃～60℃，精度0.1℃
搅拌转速
100～1250rmp
pH控制
1～14，精度0.1
DO控制
0～100%，精度0.1%
泡沫控制
智能化消泡电极，自动判别意外泡沫
空气流量
转子流量计控制
（2）手持色差仪
配置
主机，数据处理器，保护盖，手带，变压器，白色校准板，软件
技术指标
照明/观察系统
内存
测量探头1000个，数据处理器2000个
显示器
点阵式带背景光液晶显示器
可单机存储，统计数据及打印，也可连接电脑进行数据处理
（3）制冰机
要求
产出的冰为规则立方形颗粒状结构,不易结块,更有利于碎冰抱紧容器,冰浴效果更佳
无氟制冷符合最新环保标准
不锈钢机身,四个支角高度,水平可调
储冰室的门与机身同宽,便于用户取冰
可调节的参数可以区分蛋白点和噪音点
全自动蛋白定量，不受背景影响
图像对比度调节，多幅图像的线性和非线性调节
可同时在屏幕上显示的凝胶图像数量不限，可以任意重排和隐藏图像
多种强度校准方法，灰度尺校准或者两块胶之间的散点图校准
全自动凝胶匹配，一个蛋白点可以与其它胶上的多个点相匹配
创建合成凝胶图像，取多块胶上点的位置，形状和强度的平均值
全自动控制,接通电源,水源即可使用，主机有
①电源显示
②自动满水指示,冰满时机器自动停机以节省电力,冰被取出后非满冰状态机器自动启动制冰
③缺水指示,显示是否缺水,缺水状态自动停机,水源恢复后自动制冰.
④3分钟延时,超温报警显示,防止压缩机温度过高,保护主机
⑤蒸发器、碎冰系统报警指示，自动报警，防止蒸发器、碎冰系统温度过高，保护主机
＞1%，优于读书的±1%；取样量少于2ml；反应时间少于3秒
可回收有用的溶剂，降低空气污染、提取时间和分析费用
样品处理量
0.5---15克(通常为3克)，溶剂量：30 ~ 100 ml
浸提时间:
=<60分钟/3克样
内部控制浸提、淋洗和溶剂回收
重现性
优于+/-1%
每个样品位可分别独立控制操作
带报警计时器
抽提滤纸筒可重复使用40次以上
符合安全保护标准，安全等级为IP55，Pt 100探头
电泳平台温度
18～25℃±1℃
控制面板
液晶显示器(LCD)
程序参数
溶胀时间,电泳平台温度,每根胶条最大电流极限,升压设定,电压上升模式和电压持续时间
方法存储
主机可生成10个,每个方法可以多达9步；通过电脑可以生成、存储和编辑任何数目的方法
电源
内置
电压
0～10000 V，分辨率: 10V
电流
0～1.5 mA,分辨率：0.01 mA
进口样品烘干处理装置，50个滤纸筒
（2）纤维素测定仪
要求
专用于检测食品和饲料的粗纤维、酸性和中性洗涤纤维、半纤维素、木质素等
酸碱热抽提器
酸碱热抽提器6组，带冷却水系统
水解时间和温度可调
独立的试剂电磁预热器，温度控制范围在室温到370度，加热盘直径155mm
内置真空泵和反吹压力泵，可进行排空和气体反吹
3、发酵罐、手持色差仪、制冰机（进口）
（1）发酵罐
基本要求
罐体系统
罐体容积：（总体积/工作体积/直径）5L/3.5/140NW
材料：硼硅酸盐玻璃罐体，封头为316L不锈钢材料
标准接口，适用于各种探头，一个接种口，多个补料接口
控制系统
主机模块化设计，整合系统，占地面积小，可放在试验台上操作。
精确稳定地控制搅拌速度、温度、pH值、DO、消泡、液位控制。
混合腔体积
2,5,12ml
混合模式
电动搅拌混合
紫外/可见光检测器
波长范围
190～700nm
间隔
1nm
同时检测波长数目
3
灯不需预热
电导检测器
范围
1mS/cm – 999.9mS/cm
pH检测器
范围
0～14
进样阀
数目
1
模式
上样,进样,冲洗
缓冲溶液切换阀
数目
1
方式
8通道切换
收集阀
数目
1
方式
8通道切换
组分收集器
其他
可提供固相pH梯度干胶条
可供选的干胶条，宽pH范围,碱性端可达到pH11
中等pH范围：pH3-7NL,pH4-7,pH6--9,pH6-11和pH7-11NL
可以提供选择从7到24cm长度，间隔都为1个pH范围的胶条
干胶条溶胀盘
溶胀盘容量
最多12个相同或者不同长度的胶条
长度
7-24cm均可
平衡管
3级
可编程电子参数设定压力、流速、分流比；电子压力控制(EPC)；自动海拔高度压力及室温补偿；具有恒流，恒压，程序增加流速，程序升压及压力脉冲等操作模式的电子气路控制
氢火焰检测器（FID）
最高使用温度
450˚C
最低检测限
<1.8pg碳/秒(十三烷)
线性动态范围
≥107
数据采样速率
500Hz
自动点火装置，自动调节点火气流;具有自动灭火检测功能
保留时间重现性
<0.008%或<0.0008min