油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠骨髓NO和NOS的影响

合集下载

橄榄叶中多酚含量的测定及其抗辐射作用研究

圆园21年3月第42卷第6期DOI ：10.12161/j.issn.1005-6521.2021.06.009作者简介：孙美君（1996—），女（汉），硕士，研究方向：应用营养。

*通信作者：李蕾（1976—），女（汉），副教授，研究方向：营养资源的开发与应用。

橄榄叶中多酚含量的测定及其抗辐射作用研究孙美君1，孔杭如2，赵珈莹1，张伊瑾1，林丽颖1，郭东北1，李蕾1*（1.厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室，福建厦门361102；2.中粮营养健康研究院，北京102200）摘要：采用超声辅助水提法制备橄榄叶提取物（olive leaf extracts ，OLE ），测定其多酚含量，并研究OLE 对辐射小鼠的防护作用。

给予小鼠不同剂量OLE （150、500、1000mg/kg ）后，1Gy X 射线全身辐照小鼠，测定辐射小鼠外周血细胞数量、血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase ，SOD ）与谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase ，GSH-Px ）活力、丙二醛（malondialdehyde ，MDA ）含量、骨髓细胞微核率和肝脏Bcl-2与Bax 凋亡蛋白的表达水平。

结果表明，OLE 中的多酚含量丰富，高达（57.55±2.98）mg/g ，可有效提高小鼠外周血细胞数量与血清SOD 、GSH-Px 活性，降低MDA 含量，抑制骨髓细胞微核的形成，调控肝脏凋亡蛋白的表达，对辐射损伤具有良好的防护作用。

关键词：橄榄叶多酚；辐射损伤；外周血细胞；氧化损伤；微核Polyphenol Analysis of Olive Leaf and Its Anti-radiation Effect on MiceSUN Mei-jun 1，KONG Hang-ru 2，ZHAO Jia-ying 1，ZHANG Yi-jin 1，LIN Li-ying 1，GUO Dong-bei 1，LI Lei 1*（1.State Key Laboratory of Molecular Vaccinology and Molecular Diagnostics ，Public Health School ，XiamenUniversity ，Xiamen 361102，Fujian ，China ；2.COFCO Nutrition and Health Research Institute ，Beijing 102200，China ）Abstract ：Olive leaf extract （OLE ）was extracted by using ultrasonic-assisted water extraction method and itspolyphenol content was determined.Its protective effect on the damage of mice induced by radiation was investi -gated as well.Different doses of OLE （150，500，1000mg/kg ）were given to mice before they were irradiated at the dose of 1Gy.The number of peripheral blood cells ，the activities of superoxide dismutase （SOD ），glu -tathione peroxidase （GSH-Px ），and the content of malondialdehyde （MDA ）of mice were measured.The bonemarrow micronucleus cells and the expression of apoptosis related proteins of liver were detected.The results showed that olive leaves were rich in polyphenols and the content was as high as （57.55±2.98）mg/g.OLE couldeffectively increase the number of peripheral blood cells and the activities of SOD and GSH-Px in serum ，re -duce the content of MDA ，inhibit the formation of micronucleus in bone marrow cells and regulate the expres -sion of apoptotic proteins.It exhibited protective effect on radiation-induced damage.Key words ：olive leaf polyphenols ；radiation damage ；peripheral blood cells ；oxidative damage ；micronucleus引文格式：孙美君，孔杭如，赵珈莹，等.橄榄叶中多酚含量的测定及其抗辐射作用研究[J].食品研究与开发，2021，42（6）：44-48.SUN Meijun ，KONG Hangru ，ZHAO Jiaying ，et al.Polyphenol Analysis of Olive Leaf and Its Anti-radiation Effect on Mice[J].Food Research and Development ，2021，42（6）：44-48.辐射可以诱导细胞产生大量活性氧自由基（reac -tive oxygen species ，ROS ），破坏生物大分子，抑制抗氧化酶活性，增加脂质代谢产物，使机体处于氧化应激状态，从而诱发细胞凋亡、坏死[1]，导致机体出现急、慢性损伤。

油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠胸腺的影响

了铅对小鼠胸腺细胞凋亡及Ｂａｘ、Ｂｃｌ一２和ｐ５３基
１材料与方法
１．１材料
因表达的影响．关于铅中毒的治疗，临床上大都采用
依地酸二钠钙、二琉基丁二酸、二琉基丙醇和青霉胺等药物，但是，药物治疗往往存在许多副作用，例如，肾脏损害、过敏反应等
世界名贵常绿木本油料和果用树种．油橄榄叶被证
实有降血糖、抗高血压、抗氧化及抗微生物等显著作用，还有促进骨骼钙化、防治骨质疏松、预防钙质流
ＰＨＳ一２５数显ｐＨ计（上海精密科学仪器有限公司）；ＴＡＳ一９９０原子吸收分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；Ｒ２０６真空旋转蒸发器（上海申生科技有限公司）；ＳＣ一１５数控超级恒温槽（宁波市天恒仪器厂）；高速台式冷冻离心机（ＴＧＬ一
第２９卷第２期２０１３年４月
德州学院学报
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＤｅｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
Ｖ０ｌＩ２９，ＮＯ．２
Ａｐｒ．，２Ｏ１铅中毒小鼠胸腺的影响
４２
１．２方法
王昱
（陇南师范高等专科学校生物系，甘肃成县７４２５００）
摘要：目的探讨油橄榄叶提取物（ＯＬＥ）对铅中毒小鼠胸腺的影响．方法选健康小鼠，每日灌胃醋酸铅溶液的同时灌胃不同剂量的ＯＬＥ进行治疗，连续用药３０ｄ，检测胸腺指数、胸腺Ｔ细胞亚群、胸腺细胞凋亡率及胸腺细胞周期进程的变化情况．结果与模型对照组相比，小鼠灌胃ＯＬＥ后胸腺指数明显升高，胸腺细胞亚群ＣＤ８标记率明显降低，胸腺细胞周期进程中Ｇ＋Ｍ期细胞百分比升高，胸腺细胞凋亡率明显降低．结论ＯＬＥ对铅中毒小鼠有一定的疗效，能抑制胸腺细胞凋亡，影响胸腺细胞周期进程，拮抗铅对胸腺的毒性．

油橄榄果汁急性毒性及对小鼠自发活动的影响

（１．成都大学基础医学与护理学院，四川成都６１０１０６；６１０１０６）
２．成都大学药食同源植物资源开发四川省高校重点实验室，四川成都
摘
要：油橄榄果汁含有多种抗氧化活性的多酚化合物，了解其潜在的毒性是进一步开发利用的前提．采取最
Ｏ引言
油橄榄属木犀科乔木，系著名的油料兼果用树种，研究发现，油橄榄果中含有大量的多酚类物质，
机（广东美的公司），ＧＬ一２１Ｎ型高速冷冻离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司），ＦＤ — ＩＣ．５５型冷冻干燥
的数据．据此，本研究利用最大耐受剂量法评估了油橄榄果汁浓缩物的急性毒性，同时评价了其在急性和亚急性给药条件下，对于小鼠自发活动的影响，并
摄取食物．
１．３实验方法
１．３．１油橄榄果汁的制备．
１．１．２仪器．
醇作为活性成分参照，流动相为，甲醇：０．２％磷酸溶液１２：８８，Ｃ１８柱，检测波长２３０ｎｍ（ＤＡＤ检测器）．
：
１．３．３油橄榄果汁的急性毒性试验．采用最大耐受剂量法，设１０×１ｏ３ｍｇ／ｋｇ和生理
第３期
鄢
硕，等：油橄榄果汁急性毒性及对小鼠自发活动的影响
表１急性毒性试验结果表
・２１５・

橄榄叶提取物的安全性毒理学分析

食品实验作为可内服的抗菌成分，赋予橄榄叶提取物理想抗菌性的成分主要是环烯醚萜与橄榄苦苷。

本文以橄榄叶提取物为研究对象，从毒理学的角度，对其安全性进行了深入探究。

一、植物提取物介绍本文所分析的橄榄叶提取物，由橄榄干燥叶提取所得，其成分以黄酮和萜类为主，具有良好活性。

此外，提取所得羟基酪醇可被用来刺激线粒体合成及功能发挥，并且能够抑制酪氨酸消化和碱基修饰相关反应，这也决定其具备清除自由基的作用，属于典型的无毒级提取物。

二、橄榄叶提取物化学成分1.脂肪族。

已知脂肪族化合物有苯乙醛、壬醛以及橙花叔醇。

2.酚酸化合物。

作为酚羟基有机酸的酚酸化合物，其酚酸成分主要包括肉桂酸、香草酸、绿原酸、咖啡酸、没食子酸。

3.黄酮化合物。

对橄榄叶进行提取和分离所得黄酮成分，其甘元以芹菜素、木犀草素以及洋芫荽黄素为主，上述苷元的糖链以1个糖和2个糖较为常见。

现阶段，研究人员已成功分离出20余种表征不同的黄酮化合物，并在多个领域得到了运用。

4.萜类衍生物。

橄榄叶普遍含有大量萜类衍生物，对油橄榄叶而言，最具代表性的萜类化合物为裂环烯醚萜，另外其萜烯含量往往较高。

（1）三萜化合物。

橄榄叶含有的三萜成分以五环三萜为主，例如广为人知的山楂酸以及齐墩果酸，均属于齐墩果烷型。

（2）裂环烯醚萜。

作为环戊烷单萜所衍生存储化合物，裂环烯醚萜的形成机理为环烯醚萜裂环，由此可见，裂环烯醚萜在环烯醚萜总量中的占比极小。

此外，橄榄苦苷也应当引起重视，作为裂环烯醚萜苷代表，该化合物的药理活性极为突出，对其做水解处理，通常可获得游离状态的羟基酪醇。

橄榄叶提取物的安全性毒理学分析三、橄榄叶提取物的获取方法将羟基酪醇含量作为主要考察指标，通过正交实验与单因素实验相结合的方式，对橄榄叶羟基酪醇进行提取的工艺加以确定，首选工艺为超声辅助磷酸，相关参数如下：提取所用磷酸的浓度以2mol/L为宜，液料比应控制在40:1左右，经过60min超声处理后获得5.2mg/g的羟基酪醇。

橄榄叶提取物对正常及糖尿病小鼠血糖和血脂水平的影响_季崇敏

[ 参考文献]
[ 1] 董世林. 植物资源学 [ M ] . 哈尔滨: 东北林业大学出版社,
1991. 263. [ 2] PAIVA MARTINS F, GORDON M H. Isolation and characterization
of the antiox idant component from olive leaves [ J] . J Agric Food Chem, 2001, 49( 9) : 4214 4219. [ 3] SAVOURNIN C, BAGHDIKIAN B, ELIAS R, et al. Rapid HPLC analysis for the quantitative determination of oleuropein in olea europaea leaves[ J] . J Agric Food Chem, 2001, 49( 2) : 618 621. [ 4] GONZALEZ M, ZARZUELO A, GAMEZ M J, et al. Hypoglycemic activity of olive leaf [ J] . Planta Med, 1992, 58( 6) : 513 551. [ 5] 张均田. 现代药理实验方法学[ M] . 北京: 北京医科大学中国协和医科大学联合出版社, 1998. 981 988. [ 6] 陈奇. 中药药理研究方法学 [ M ] . 北京: 人民卫生出版社, 1995. 813 815. [ 7] 徐淑云, 卞如濂, 陈修. 药理实验方法学[ M] . 第 2 版. 北京: 人民卫生出版社, 1994. 1269 1285. [ 8] JUNOD A, LAMBERT A E, STAUFFACHER W, et al. Diabetogenic action of streptozocin: relationship of dose to metabolic response [ J] . J Clin Invest, 1969, 48( 11) : 2129 2139. [ 9] 刘锡钧. 实用药物指南 [ M ] . 北京: 人民军医出版社, 2000. 610. [ 10] JI Y B. Pharmacological action and application of available composition of traditional Chinese medicine[ M ] . 哈尔滨: 黑龙江科学

含油橄榄叶提取物复配制剂抗菌效果及毒性观察

ＦｕｊｉａｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｚｈｏｕ３５００００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｅｉｃｆａｃｙａｎｄｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆｔｈｅｃｏｍｐｏｕｎｄｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｏｌｉｖｅｌｅａｆｅｘｔｒａｃｔ
广东药学院学报
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＡｕｇ．２０１５，３１（４）
含油橄榄叶提取物 Байду номын сангаас 配制剂抗菌效果及毒性观察
方法从油橄榄叶中获得以橄榄苦苷为主要活性成分的提取物，与二氯苯氧氯酚制成复配制剂，按国家
标准和规范对其抑菌能力、杀菌能力、稳定性、急性毒性和皮肤刺激性进行评价。结果油橄榄叶提取物
与０．１％的二氯苯氧氯酚等制成复配制剂稳定性强；对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌具有良好的抑制作
ｏｆｔｈｅｏｌｉｖｅｌｅａｆｅｘｔｒａｃｔｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｏｌｅｕｒｏｐｅｉｎ，ｔｒｉｃｌｏｓａｎ，ｅｔｈａｎｏｌ，ａｎｄｅｔｃ．Ａｎｔｉｂａｃｔｅｉａｒｌｔｅｓｔ，ｇｅｒｍｉｃｉｄａｌｔｅｓｔ，

油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠心肌ATP酶和抗氧化能力的影响

ｌｅａｄｐｏｉｓｏｎｅｄｍｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＨｅａｌｔｈｙｍｉｃｅｗｅｒｅｃｈｏｓｅｎａｎｄｄａｉｌｙｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｗｉｔｈｌｅａｄａｃｅｔａｔｅａｎｄｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｏｓｅｓｏｆＯＬＥｗｅｒｅａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄｔｏｔｈｅｍｆｏｒ３０ｄａｙｓ．Ｔｈｅｌｅｖｅ］ｓｏｆＡＴＰ，ＳＯＤ，ＭＤＡ，ａｎｄ
ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｏｌｉｖｅｌｅａｆｅｘｔｒａｃｔｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＡＴＰａｎｄＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔＣａｐａｃｉｔｙｏｆＭｙｏｃａｒｄｉａｍｉｎＬｅａｄＰｏｉｓｏｎｅｄＭｉｃｅ
ＧＳＨ・ＰＸｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆＡＴＰ。ＳＯＤａｎｄＧＳＨ— ＰＸｔｅｎｄｅｄｔｏｂｅｅｌｅｖａｔｅｄ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＭＤＡｓｅｅｍｅｄｔｏｂｅｒｅｄｕｃｅｄｉｎＯＬＥｇｒｏｕｐｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＯＬＥｈａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｅｆｆｅｃｔｓｏｎｍｙｏｃａｒｄｉａｌＡＴＰｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｃａｐａｃｉｔｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｌｅａｄｔｏｘｉｃｉｔｙｉｎｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｏｌｉｖｅｌｅａｆｅｘｔｒａｃｔ；Ｌｅａｄ；Ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ；ＡＴＰ；Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｃａｐａｃｉｔｙ；Ｍｉｃｅ

油橄榄叶提取物对海洛因依赖小鼠肺组织结构及IL-1β和TNF-α表达的影响

油橄榄叶提取物对海洛因依赖小鼠肺组织结构及IL-1β和TNF-α表达的影响王昱;王胜青【摘要】将100只健康小鼠皮下注射海洛因(10 mg/kg)40 d,然后分别用不同剂量的(50、100、200 mg/kg)油橄榄叶提取物(OLE)进行皮下注射治疗,观察肺脏组织结构的变化,检测肺脏中白介素-1β(interleukin-β,IL-β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-A,TNF-α)的表达情况。

结果表明：与模型对照组相比,OLE使海洛因依赖小鼠肺泡直径、肺泡隔厚度减小,肺脏中 IL-1β和TNF-α的表达明显减弱,且呈较好的量效关系,表明 OLE能够对海洛因造成的肺损害起到保护作用,其作用机制可能是 OLE抑制了 IL-1β和TNF-α的在肺中的表达。

%One hundred mice were subcutaneously given heroin (10 mg/kg)for 40 days,and then re-spectively treated with different doses (50,100,200mg/kg)of olive leaf extract (OLE).The changes of lung histological structure were observed.The expression of IL-1βand TNF-αin lung was also measured. The results showed that the diameter of alveolous,thickness of interalveolar septum decreased in OLE-treated groups compared with the model group.The expression of IL-1βand TNF-αwas also diminished with dose-effect relationship.It is suggested that OLE can protect heroin-induced lung inj ury,inhibit ex-pression of IL-1βand TNF-α,which may be one of the mechanisms for OLE on the liver function protection in heroin dependence mice.【期刊名称】《甘肃农业大学学报》【年(卷),期】2014(000)006【总页数】6页(P19-24)【关键词】油橄榄叶提取物;海洛因;肺脏;白介素-1β;肿瘤坏死因子-α;小鼠【作者】王昱;王胜青【作者单位】陇南师范高等专科学校生化系，甘肃成县 742500;陇南师范高等专科学校生化系，甘肃成县 742500【正文语种】中文【中图分类】Q954.57海洛因来源于鸦片，学名二乙酰吗啡，是吗啡二乙酰的衍生物，海洛因滥用已成为严重的社会问题和医学问题.海洛因及其代谢产物能损坏肺功能，引起肺部感染[1]，增加肺中与凋亡相关活性物质的表达、降低抗氧化能力等病理反应[2].海洛因脱毒治疗常用的药物主要为美沙酮、丁丙诺啡和可乐宁等，但是这些药物本身有成瘾性，若使用不当又会成为新的毒品.因此，研制出一种既能够对肺脏具有保护作用，又能减轻戒断反应的中药已成为当前研究的一个热点问题.研究表明，TNF-α和 IL-1β是最常见的促炎细胞因子，在炎症性疾病中，TNF-α可诱发IL-1β、IL-6等炎症介质的合成，导致多器官功能障碍综合征和多器官功能衰竭[3-4].油橄榄叶提取物(olive leaf extract,OLE)是从油橄榄叶中提取的组分，主要成分为黄酮类和萜类内酯化合物[5-8]，近年来药理研究发现具有很好的抗氧化、降血脂等作用[9-11].前期试验中已经证明，OLE对铅中毒小鼠有较好的清除自由基和排铅作用[12-14].但OLE对海洛因依赖小鼠的肺损伤是否具有保护作用，到目前为止尚未见文献报道.本研究拟以海洛因依赖小鼠为模型，观察OLE对海洛因依赖小鼠肺组织结构及其肺中细胞因子IL-1β和TNF-α表达的影响，分析OLE对海洛因造成肺损伤保护作用的可能机制，以期为油橄榄叶提取物基础研究和临床应用提供更多的试验依据.1 材料与方法1.1 试验材料盐酸海洛因(纯度≥98%，成县公安局提供)；油橄榄叶提取物由陇南田园油橄榄科技开发有限公司提供；出生20 d昆明小鼠100只购于兰州大学实验动物中心，体质量18～20 g，雌雄各半；兔抗IL-1β、鼠抗TNF-α、SP免疫组化试剂盒和DAB显色剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司.1.2 模型建立与给药100只小鼠试验前适应性饲养1周，随机分为5组(正常对照组及模型对照组、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ油橄榄叶提取物治疗组4个试验组，每组20只)[12-14].参照文献[15-16]对模型对照组、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组采用皮下注射海洛因(10 mg/kg)40 d建立海洛因依赖小鼠模型(观察海洛因诱发的症状30 min，进行评分以确定模型建成[17])，正常对照组注射等量的生理盐水.建模后，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别用50、100、200mg/kg OLE进行皮下注射[9-10]，每日1次，共50 d，正常对照组和模型对照组每天注射等量生理盐水.1.3 组织学观察取小鼠肺脏组织数块，用预冷的生理盐水冲洗干净，迅速投入15%的中性福尔马林液固定24 h，常规石蜡包埋切片(6 μm)，H E染色，在光学显微镜(Olympus，FX-35WA，Japan)下观察并拍照.1.4 免疫组织化学免疫组化SP法(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶试剂盒).将肺脏石蜡切片脱蜡、PBS冲洗后，微波处理进行抗原修复，用3% H2O2室温孵育10 min，正常兔血清室温封闭30 min以封闭非特异性反应位点；一抗用兔抗IL-1β 多克隆抗体、鼠抗TNF-α 单克隆抗体(均为1∶400)，置4 ℃冰箱过夜；滴加生物素标记的二抗(羊抗兔IgG抗血清)，37 ℃孵育30 min；滴加SABC工作液，37 ℃孵育30 min；DAB显色，苏木素复染；空白对照以PBS代替一抗，常规脱水，透明、封片，在显微镜下观察并拍照(不同组别的免疫组化切片为同批次制作完成).1.5 图像分析用美国Image-proplus 5.0专业图像分析软件进行图像分析.从IL-1β、TNF-α阳性反应的切片中各选3 张，检测活性物质在肺脏中表达的强度.测量时保证光源的稳定，并且取图之前预热20 min以上，采图时各项设置包括光源、光圈大小、白平衡、曝光强度、敏感度、对比度等均改为手动调节且固定，以保证每次取图系统的设置值一样.取平均光密度和积分光密度2个指标，测量值的平均值为最终灰度值.1.6 数据处理用SPSS 13.0软件进行统计学分析处理，数据用表示；t检验，显著水平α=0.05，极显著水平α=0.01.2 结果与分析2.1 OLE对海洛因依赖小鼠肺脏组织结构的影响正常对照组小鼠的肺泡形态正常(图1-A)，排列有序，肺泡间隔无增厚；模型对照组小鼠肺泡直径明显增大，肺泡隔明显增厚(图1-B)；经OLE治疗后，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ处理治疗组小鼠肺脏的病理学改变较模型对照组减轻，肺泡直径和肺泡隔厚度减小(图1-C～E).SPSS统计分析显示，模型对照组小鼠肺泡直径和肺泡隔厚度显著高于正常对照组(P<0.01).Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ治疗组小鼠肺泡直径和肺泡隔厚度明显低于模型对照组(P<0.05或P<0.01)，且OLE浓度越高，对小鼠肺泡直径和肺泡隔厚度的作用越明显(表1).A：正常对照组肺脏组织结构，肺泡(AL)，肺泡囊(ALS)；B：模型对照组肺脏组织结构；C：Ⅰ组肺脏组织结构；D：Ⅱ组肺脏组织结构；E：Ⅲ组肺脏组织结构.图1 小鼠肺脏组织结构Fig.1 Lung structure of mice表1 小鼠肺脏组织结构的变化(n=10)Tab.1 Changes of histological structureof mouse lung(n=10)治疗组与模型组比较时，*表示差异显著(P<0.05)，**表示差异极显著(P<0.01)；模型组与正常组比较时，▲▲表示差异极显著(P<0.01).组别肺泡直径/μm肺泡隔厚度/μm正常对照组31.15±2.112.88±0.17模型对照组40.01±3.79▲▲6.44±0.39▲▲Ⅰ处理治疗组36.27±1.05∗5.14±0.36∗Ⅱ处理治疗组34.81±1.55∗∗4.66±0.49∗∗Ⅲ处理治疗组33.03±2.14∗∗3.33±0.73∗∗2.2 OLE对海洛因依赖小鼠肺脏IL-1β表达的影响免疫组织化学法显示，阳性表达部位被染成棕黄色.IL-1β在正常对照组中有少量的阳性表达(图2-A)，而在模型对照组中呈强阳性表达(图2-B).分别采用不同剂量(50、100、200 mg/kg)OLE处理小鼠后发现，OLE能明显减弱IL-1β在小鼠肺脏中的表达(图2-C～E).阴性对照组无IL-1β阳性表达(图2-F).SPSS统计分析显示，模型对照组小鼠肺脏IL-1β阳性表达的平均光密度及积分光密度显著高于正常对照组(P<0.01).OLE治疗后，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ处理治疗组肺脏IL-1β阳性表达的平均光密度及积分光密度明显低于模型对照组(P<0.05或P<0.01)，且呈剂量依赖性，OLE浓度越高，对IL-1β表达的抑制作用越明显(表2).2.3 OLE对海洛因依赖小鼠肺脏TNF-α表达的影响正常对照组小鼠肺中有少量的TNF-α阳性表达(图3-A)；模型对照组小鼠肺脏TNF-α表达呈强阳性(图3-B)；与模型对照组相比，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ处理治疗组肺脏中TNF-α阳性表达明显减弱(图3-C～E)；阴性对照组无TNF-α阳性表达(图3-F). SPSS统计分析显示，模型对照组小鼠肺脏TNF-α阳性表达的平均光密度及积分光密度显著高于正常对照组(P<0.01).与模型对照组相比，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ处理治疗组肺脏TNF-α阳性表达的平均光密度及积分光密度明显降低(P<0.05或P<0.01)，且OLE浓度越高，对TNF-α表达的抑制作用越显著(表3).A：正常对照组肺脏中IL-1β的表达，肺泡(AL)；B：模型对照组肺脏中IL-1β的表达；C：Ⅰ组肺脏中IL-1β的表达；D：Ⅱ组肺脏中IL-1β的表达；E：Ⅲ组肺脏中IL-1β的表达；F：阴性对照.图2 IL-1β在小鼠肺脏中的表达Fig.2 Expression of IL-1β in lung of miceA：正常对照组肺脏中TNF-α的表达，肺泡(AL)；B：模型对照组肺脏中TNF-α的表达；C：Ⅰ组肺脏中TNF-α的表达；D：Ⅱ组肺脏中TNF-α的表达；E：Ⅲ组肺脏中TNF-α的表达；F：阴性对照.图3 TNF-α在小鼠肺脏中的表达Fig.3 Expression of TNF-α in lung of mice表2 IL-1β在肺脏表达的平均光密度和积分光密度(n=10)Tab.2 The average optical density and integral optical density of IL-1β in the lung(n=10)治疗组与模型组比较时，*表示差异显著(P<0.05)，**表示差异极显著(P<0.01)；模型组与正常组比较时，▲▲表示差异极显著(P<0.01).指标正常对照组模型对照组Ⅰ处理治疗组Ⅱ处理治疗组Ⅲ处理治疗组平均光密度0.037 7±0.001 70.089 4±0.004 1▲▲0.070 5±0.001 7∗0.063 2±0.002 1∗∗0.048 9±0.002 9∗∗积分光密度387.658 0±88.205 0878.626 0±90.302 0▲▲651.352 0±60.474 0∗∗527.321 0±58.258 0∗∗442.553 0±47.754 0∗∗表3 TNF-α在肺脏表达的平均光密度和积分光密度(n=10)Tab.3 The average optical density and integral optical density of TNF-α in the lung(n=10)治疗组与模型组比较时，*表示差异显著(P<0.05)，**表示差异极显著(P<0.01)；模型组与正常组比较时，▲▲表示差异极显著(P<0.01).指标正常对照组模型对照组Ⅰ处理治疗组Ⅱ处理治疗组Ⅲ处理治疗组平均光密度0.038 1±0.002 20.0993±0.003 5▲▲0.079 6±0.002 5∗0.060 8±0.001 9∗∗0.047 0±0.002 2∗∗积分光密度390.584 0±72.502 0888.807 0±65.555 0▲▲623.949 0±57.2810∗∗505.333 0±54.414 0∗∗446.693 0±50.707 0∗∗3 讨论在阿片类毒品成瘾中，海洛因成瘾是我国发病最高、危害最大的一种.海洛因成瘾可引起动物、人类多种脏器的损害，而在海洛因成瘾患者中，几乎有一半的患者最终会发展为肺功能衰竭.研究表明，肺泡是肺进行气体交换的功能单位，一旦肺泡结构出现异常，就会直接影响肺的呼吸功能，肺泡直径增大会影响单位面积内肺泡的数量，在一定程度上减少了肺泡表面积，即减少了肺呼吸面积，降低了肺内氧的利用率，而肺泡隔的增厚则影响到肺泡与肺毛细血管间的气体交换率[18]，因此，肺泡直径的增大和肺泡隔的增厚减少了肺气体扩散容量.本试验显示，海洛因小鼠肺组织呈现肺泡直径变大、肺泡隔增厚等病理学特点.朱辉等[19]研究认为，海洛因侵入肺脏后，引起的肺炎、慢性支气管炎、肺脓疡等并发症，是导致组织受损的主要原因之一.炎症和脓毒症的发生发展与促炎细胞因子的合成、过度释放及内源性抗炎细胞因子的释放不足密切相关.促炎细胞因子/抗炎细胞因子的失衡是加重炎症和脓毒症的重要因素[3,20].TNF-α和IL-1B为最重要的促炎细胞因子，在肺脏炎症中起级联放大作用[21].TNF-α是一种主要由单核-巨噬细胞产生的前炎症细胞因子，它能刺激单核-巨噬细胞合成IL-1β、IL-6、IL-8等细胞因子，同时TNF-α具有巨噬细胞和中性粒细胞的趋化作用，能诱导肺血管内皮细胞活化及中性粒细胞脱颗粒释放氧自由基、脂质代谢产物、溶酶体酶等介质，引起白细胞迁移，损害肺泡表面活性物质系统，损伤血管内皮细胞造成毛细血管渗漏，积聚的水肿液进一步阻碍肺泡细胞的灌流和氧气交换[22].此外，TNF-α又能激活巨噬细胞和中性粒细胞，使其细胞毒性增加，生成更多的促炎症基因以及IL-1β等细胞因子，从而介导肺脏的病理过程[23].IL-1β能促进骨髓释放中性粒细胞，诱导单核细胞和多核粒细胞趋化浸润炎症局部，在局部释放溶酶体酶和其他细胞因子，还能引起粒细胞脱颗粒释放炎症介质，进一步导致细胞损害[24].本试验通过免疫组化技术证实，模型对照组小鼠肺组织中TNF-α和IL-1β的表达水平明显升高，与正常对照组比较，差异非常显著，说明海洛因依赖小鼠的肺损伤与细胞因子分泌异常增高有关，有效抑制TNF-α和IL-1β的表达可能是海洛因康复治疗的有效措施.OLE中含有大量的活性成分，已有大量的试验证实OLE有明显的抗炎、抗氧化、抗菌等作用[5-10].本试验证实，连续给海洛因依赖小鼠用药50 d，可以使海洛因依赖小鼠肺组织病理形态明显得到改善，表现在肺泡直径变小、肺泡隔厚度减少，同时使肺组织中IL-1β和TNF-α的表达水平显著降低.由此推测OLE可能是通过抑制TNF-α和IL-1β在肺中的表达，从而达到改善海洛因依赖小鼠的病理形态的治疗效果.本试验仅从肺组织结构及TNF-α和IL-1β表达的变化角度来探讨其机制，可能还存在其它方面的机制，有关这方面的研究将继续进行.参考文献[1] 余红胜,杨桂菊,龚国如,等.静脉滥用海洛因致肺部感染的临床及影像学分析[J].中华医院感染学杂志,2011,21(12):2473-2474[2] 俞诗源,王悦,郭婷婷,等.海洛因对母鼠体重、行为及肺中相关活性物质表达的影响[J].西北师范大学学报：自然科学版,2010,46(2):94-100[3] 陈亮,白静慧,张凯,等.大黄素对脓毒症急性肺损伤大鼠肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-1β水平的影响[J].广东医学,2013,34( 13):1992-1994[4] 贺立立,陈勤,彭申明,等.桔梗皂苷对慢性支气管炎小鼠肺细胞中的IL-1β和TNF-α表达的影响[J].中国细胞生物学学报,2013,35(1):17-23[5] Turkez H,Togar B,Polat E.Olive leaf extract modulates permethrin induced genetic and oxidative damage inrats[J].Cytotechnology,2012,64(4):459-464[6] Lee O H,Lee B Y.Antioxidant and antimicrobial activities of individual and combined phenolics in Olea europaea leaf extract[J].Bioresour Technol,2010,101(10):3751-3754[7] Kontogianni V G,Gerothanassis I P.Phenolic compounds and antioxidant activity of olive leaf extracts[J].Nat Prod Res,2012,26(2):186-189[8] Goulas V,Papoti VT,Exarchou V,et al.Contribution of falconoid to the overall radical scavenging activity of olive (Olea europaea L.) leaf polar extracts[J].J Agric Food Chem,2010,58(6):3303-3308[9] Kaeidi A,Esmaeili-Mahani S,Sheibani V,et al.Olive (Olea europaea L.) leaf extract attenuates early diabetic neuropathic pain through prevention of high glucose-induced apoptosis:in vitro and in vivo studies[J].J Ethnopharmacol,2011,136(1):188-196[10] Esmaeili-Mahani S,Rezaeezadeh-Roukerd M,Esmaeilpour K,et al.Olive (Olea europaea L.) leaf extract elicits antinociceptive activity,potentiates morphine analgesia and suppresses morphine hyperalgesia in rats[J].J Ethnopharmacol,2010,132(1):200-205[11] 季崇敏,吴国球,沈子龙.橄榄叶提取物对正常及糖尿病小鼠血糖和血脂水平的影响[J].东南大学学报：医学版,2003,22(4):236-238[12] Wang Y,Wang S Q,Cui WH,et al.Olive leaf extract inhibits lead poisoning-induced brain injury[J].Neural RegenerationResearch,2013,8(22):2021-2029[13] 王昱.油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠海马组织抗氧化酶及NO与NOS的影响[J].甘肃农业大学学报,2012,47(2):21-24[14] 王昱,王胜青.油橄榄叶提取物对染铅小鼠肾功能的影响[J].甘肃农业大学学报,2013,48(6):23-28[15] Zheng Q H,Zhang Y T,Zheng R L,et al.Effects of verbascoside and luteolin on oxidative damage in brain of heroin treatedmice[J].Pharmazie,2005,60(7):539-543[16] Pu L,Bao G B,Xu N J,et al.Hippocampal long-term potentiation is reduced by chronic opiate treatment and can be restored by re-exposure to opiates[J].The Journal of Neuroscience,2002,22(5):1914-1921[17] Pan G S,Xu G Q,Li S F,et al Establishment of the model of heroin addicted rats[J].J Guiyang Med Coll,1997,22(suppl):46[18] 王昱,何九军,杨小录,等.盐酸克伦特罗对小鼠肺脏组织结构及抗氧化能力的影响[J].西北农林科技大学学报：自然科学版,2012,40(1):29-36[19] 朱辉,沙丽君,查云,等.海洛因成瘾者的肺功能-附100例分析[J].中国药物依赖性通报,1993,2(2):134-134[20] Wang J L,Wong H R.Pathophysiology and treatment of septic shock in neonates[J].Clin Perinatol,2010,37(2):439-479[21] 朱桂军,于占彪,胡振杰,等.二烯丙基三硫对脂多糖诱导急性肺损伤小鼠肺组织TNF-α和IL-1β的影响[J].河北医科大学学报,2007,28(4):248-251[22] 孙中吉,卢青.急性呼吸窘迫综合征发病中的细胞因子和炎症介质[J].中国危重病急救医学,2003,15(3):186-189[23] Desai D,Brightling C.Cytokines and cytokine-specific therapy in asthma[J].Adv Clin Chem,2012,57:57-97[24] Goodman R B,Strieter R M,Martin D P,et al.Inflammatory cytokines in patients with persistence of the acute respiratory distress syndrome[J].Am J Respir Crit Care Med,1996,154(3pt 1):602-611。

油橄榄叶提取物生物活性研究进展

油橄榄叶提取物生物活性研究进展作者：王碧霞来源：《绿色科技》2017年第14期摘要：指出了油橄榄叶是地中海人用于治疗某些疾病最传统的植物茶之一。

油橄榄叶提取物中富含橄榄苦苷、羟基酪醇、黄酮等酚类化合物，其中橄榄苦苷具有强抗氧化、抗高血压、降血糖、降胆固醇和保护心脏等功效。

对油橄榄叶提取物生物活性的研究，目前主要集中在抗氧化、抗菌、抗动脉粥样硬化和低胆固醇、低血糖以及酚类化合物成分方面，其酚类化合物在医药和保健方面广阔的运用前景已引起人们的广泛关注。

因此，提出了油橄榄叶作为一种丰富又廉价的原材料，应鼓励将其高附加值作为抗氧化剂的来源进行工业生产，应用于药品、化妆品、保健品和功能性食品等方面。

关键词：油橄榄叶；酚类化合物；抗菌成分；抗氧化活性中图分类号：R284文献标识码：A 文章编号：1674-9944（2017）14-0278-051 引言油橄榄（Olea europaea L.）为木犀科（Oleaceae）木犀榄属（Olea）常绿乔木，又名洋橄榄、欧橄榄、齐墩果，是亚热带的重要经济林木和地中海生产橄榄油的重要来源[1]，在我国油橄榄主要分布在甘肃、广东、广西、云南、四川等省区。

地中海国家的油橄榄栽培、橄榄油生产及化合物药用已有几千年历史，油橄榄叶的酚类化合物在医药和保健方面的运用在近几十年里也日益增多。

对油橄榄叶和油橄榄衍生物提取的产品一般被称为“油橄榄副产品”[2]，每年因修枝、自然落叶和加工业而产生大量的副产品和残留物，但大多数都被丢弃或焚烧，许多橄榄油生产商甚至向农户们收取油橄榄叶的处理费用，从而造成大量的资源浪费和生态环境的严重破坏[3]。

实际上，进行油橄榄叶加工提取时仅需其废弃物的10%[4]。

因此，油橄榄叶是一种丰富又廉价的原材料，可作为具有高附加值的产品进行开发利用。

油橄榄叶含有丰富的酚类化合物，在医药和保健方面的广泛运用已成为国内外的研究热点。

研究显示，酚类化合物在动物和人体中具有强抗氧化力和增强机体抵抗力[5，6]，如降血压[7，8]、降胆固醇[9]、镇痛[10]、消炎和减肥[11]。

油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠大脑海马组织抗氧化酶及NO与NOS的影响

一
氧化氮合酶（ＮＯＳ活性及丙二醛（Ａ））ＭＤ
、
，
变化・结果表明：与模型对照组相比，鼠灌胃ＯＩ小Ｅ后海马组织ＳＤＯ
、
ＣＡＴ、ＮＯ、ｓ水平均升高，Ａ含量降Ｎ０ＭＤ
、
低・明油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠有一定的疗效说
Ｅｆｅｔｆｏｉｅｌａｘｔａｔｏｎａｉｘｄｎｎｙｆｃｓｏｌｖｅｆｅｒｃｉｎｏｎｔｏｉａｔｅｚｍｅ
，
ＮＯＳａｔｖｔｎｄＮＯｏｅｔｉｉｐｃｍｐｃｉｉｙａｃｎｔｎｎｈｐｏａｕｓ
－
（ＤＡ）ｉｉｐｃｍｐｓｏｃｔｅｄｐｉｏｉｇ，ｈｅｌｈｍｉｅｗｅｅｃｏｅｎａＩｔＭｎｈｐｏａｕｆｍｉｅｗｉｈｌａｏｓｎｎｔｅｈａｔｃｒｈｓｎａｄｄｉｉｙｎ
．
ｒｇａｔｉｄ～ａｓｒｃａ
ｍｍ￣ｔａｌｎｗｉｅｄａｅａｅａｄｗｉｉｆｒｎｏｅｏｓｒｔｔｌａｃｔｔｎｔｄｆｅｅｔｄｓｆＯＬＥｆｒ３ａｓＴｈｃｉｉｙｏＯＤ，ｏｈｈｏ０ｄｙｅａｔｖｔｆＳＣＡＴｎａｄＮＯＳａｌａｈｏｔｎｆＭＤＡｎｓｗｅｌｓｔｅｃｎｅｔｏａｄＮＯｎｈｐｏａｕｆｉｅｗｅｅｄｔｒｉｅ＿ｅｒｓｌｉｉｐｃｍｐｓｏｃｒｅｅｍｎＴｈｅｕｔｍｄｓｓｏｄｈｗｅｔａｏｐｒｄｗｉｈｄｌｒｕｔｅｃｎｅｔａｉｎｆＳｈｔｃｍａｅｔｔｅｍｏｅｏｐ，ｈｏｃｎｒｔｓｏＯＤＣＡＴ，ｈｇｏＮＯｎｄＮＯＳｉｃｎｔｙｉｒａｓｄａｓｇｎｉａｌｎｃｅｅ

油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠血液生化指标的影响

Ｓｅ２０１ｐ．２
文章编号：２３２２（Ｏ２Ｏ — ２９００５ —３８２１）３０７—４
油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠血液生化指标的影响
王昱
（南师范高等专科学校生物系，肃成县陇甘７２０）４５０
摘要：讨油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠血液组织生化指标的干预作用．健康小鼠，日灌服醋酸铅溶液的同探选每时灌服不同剂量的油橄榄叶提取物，续用药３，测血液中各项生化指标．果表明，榄叶提取物对铅中毒连０ｄ检结橄小鼠的血液有显著影响．与模型对照组相比，鼠灌服油橄榄叶提取物后血中铅的质量含量下降，细胞、巴细小白淋胞、中性粒细胞数目显著降低，红蛋白质量含量和血小板的数目等指标、清中一氧化氮合酶（ＯＳ血血Ｎ）和超氧化物歧化酶（ＯＤ的活性及一氧化氮（０）质量含量均升高，Ｓ）Ｎ的丙二醛（ＭＤＡ）质量含量降低．榄叶提取物对铅中毒的橄小鼠有一定的疗效，降低血中铅的质量含量，改善小鼠血液生化指标，高抗氧化能力．能可提
第３卷第３３期
Ｖｏ．学报（自然科学版）
ＪｕｎｌｆＮｉｇｉｉｅｓｔ（ｔｒｌｃｅｃｉｏ）ｏｒａｎｘａＵｎｖｒｉｙＮａｕａｉｎｅＥｄｔｎｏＳｉ

油橄榄叶提取物对大鼠酒精性脂肪肝的保护作用

油橄榄叶提取物对大鼠酒精性脂肪肝的保护作用王昱【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2017(036)005【摘要】目的观察油橄榄叶提取物(OLE)对酒精性肝损伤的保护作用及机制.方法用递增法灌胃乙醇24周建立大鼠肝损伤模型,造模同时用OLE(250 mg· kg-1、500 mg· kg-1、1 000 mg· kg-1)进行灌胃治疗.利用生物显微技术观察肝脏组织结构的变化,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TC)和总胆固醇(TC)水平,用放射免疫法检测肝脏肿瘤坏死因子o(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1B)的含量,用比色法检测肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性及丙二醛(MDA)含量,用免疫组织化学法检测固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)的表达情况.结果与模型组比较,OLE治疗后,血清ALT、AST、TG、TC水平降低;肝脏TNF-α、IL-1β、MDA含量及SREBP-1c表达呈降低趋势;SOD、CAT、GR水平均显著升高;肝脏损伤程度明显减轻.结论 OLE对酒精性肝损伤有一定的保护作用,可能与其减少自由基损伤、减轻炎症反应、抑制SREBP-1c表达有关.%Objective Explore the protective role of olive leaf extract (OLE) on alcohol hepatic injury.Methods A hepatic injury model of rat was established by using edible alcohol with increasing dosages for 24 weeks.And then the rats were given OLE at the doses of 250 mg · kg-1,500 mg · kg-1 or 1 000 mg· kg-1 by intragastric administration.The changes of liver histological structure were observed by bio-microscopy.The levels of alanine aminotransferase (ALT),aspartate aminotransferase(AST),triglyceride (TG),and total cholesterol (TC) in serum were tested.The contents of tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-1 β (IL-1 β) were detected by radioimmunoassay and the activities of superoxide dismutase (SOD),catalase (CAT),glutathione reductase (GR) and malondialdehyde (MDA) content in liver were determined by spectrophotometry,and the expression of sterol regulatory element-binding protein 1c (SREBP-1c) in liver were analyzed by immunohistochemistry.Results Compared with the model group,the treatments of OLE could significantly decrease the levels ofTG,TC,ALT,AST,TNF-α,IL-1β,MDA and SREBP-1c expression,while the activities of SOD,CAT and GR were significantly increased.Furthermore,the liver injury was alleviated along with the treatment of OLE.Conclusion OLE has a protective effect on alcohol hepatic injury,and this may be due to the reduced free radical lesion,relieved inflammatory response and inhibited SREBP-lc expression.【总页数】6页(P557-562)【作者】王昱【作者单位】陇南师范高等专科学校农林技术学院,陇南特色农业生物资源研究开发中心,甘肃成县742500【正文语种】中文【中图分类】Q959.8;Q55【相关文献】1.油橄榄叶提取物对非酒精性脂肪肝的保护作用 [J], 王昱;2.银杏叶提取物对大鼠非酒精性脂肪肝炎肝脏保护作用的研究 [J], 龚毅;范伟;张莹;侯炬;郭江福;柳杨3.油橄榄叶提取物对非酒精性脂肪肝的保护作用 [J], 王昱4.油橄榄叶提取物对非酒精性脂肪肝小鼠脂肪酸β氧化限速酶CPT-1表达的影响[J], 王昱5.油橄榄叶提取物对酒精性脂肪肝大鼠PP1-DNA-PK-USF1信号通路的干预作用[J], 王昱;何九军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠脑中单胺氧化酶活性的影响

１材料与方法
１１材料．
１１１材料来源新鲜的油橄榄叶采自甘肃省武都区；．．断奶昆明小鼠１０只购于兰州大学实验动物中心，０体重ｌ — ０ｇ雌雄各半；Ａ８２，ＭＯ试剂盒由南京建成生物工程研究所提供；醋酸铅、乙醇、石油醚等均为国产。１１２仪器ＰＳ２数显ｐ．．Ｈ２５Ｈ计（上海精密科学仪器有限公司）Ｒ０真空旋转蒸发器（；２６上海申生科技有限公司）Ｓ１数控超级恒温槽（；Ｃ一５宁波市天恒仪器厂）Ｕ一８０型ｕＶＳ全自动分光光度计ｓｅｔ — ；１０Ｖ— Ｉｐｃｏｒｐｏｍｔ日本Ｔｋｏ；速台式冷冻离心机（Ｇｈｔｅｅｏｒ（ｏｙ）高ＴＬ一１Ｍ，ｅｋａ国）真空干燥箱。６Ｂｃｍｎ美；
关键词：油橄榄叶提取物；铅；单胺氧化酶；脑；小鼠中圈分类号：１８．１１２７２文献标识码：Ａ文章编号：１７－１ｘ２１）２Ｄ６－３６２６２（０２０Ｊ７０ｏ
铅是环境污染中主要的有毒重金属元素之一，低水平接触铅导致中枢神经系统不可逆的功能障碍和损害。关于铅对中枢神经系统的影响已有大量的研究，王昱等…报道了铅对小鼠小脑组织结构及抗氧化能力的影响；刘建安等研究了儿童低水平铅暴露与神经行为关系，路浩等利用透射电镜观察到铅使神经细胞核染色质浓缩，线粒体肿胀；军军等Ｈ报道了铅可明显抑制小鼠星形胶质细胞生长，速细胞凋蒋加亡；罗琼等］报道了铅能干扰神经细胞神经丝蛋白的正常表达模式；高双等观察了铅对小鼠脑皮质区蛋白激酶ｃ一ＰＣ一及细胞外信号调节激酶（Ｒ）白表达的影响；（Ｋ）ＥＫ蛋张天彪和Ｗｉｉ等报道了染ｌｎｋｓ铅小鼠海马超微结构的变化；何瑞芳等铅中毒对生长发育期小鼠学习记忆能力的影响。关于铅中毒的治疗，临床上大都采用依地酸二钠钙、二琉基丁二酸、二琉基丙醇和青霉胺等药物，但是，药物治疗往往存在许多副作用，例如，肾脏损害、过敏反应等¨．。因此，ｏＪ “ 开发一些有效预防铅中毒和促排铅的功能性生物食品对铅中毒的防治是十分重要和必要。油橄榄，俗称洋橄榄（ｌｒａａ．，Ｏｅｅｏｅ）系木犀科植物，ａｕｐＬ油橄榄是以“ 高产、优质、高效” 为特征的世界名贵常绿木本油料和果用树种。油橄榄叶被证实有降血糖、抗高血压、抗氧化及抗微生物等显著作用，还有促进骨骼钙化、防治骨质疏松、预防钙质流失的作用。也有文献报道，橄榄叶提取物能降低糖尿痛模型小鼠血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇的含量¨ 。但迄今为止，引国内外还未见用油橄榄提取物进行铅中毒实验的相关报道。因此，本研究以染铅小鼠为模型，然后灌服油橄榄叶提取物治疗，测定治疗后小鼠脑中单胺氧化酶（Ａ）以期为油橄榄对铅中毒神经系统的保护作用提供实验资料及理论依据。ＭＯ，

油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠骨髓NO和NOS的影响

１１２仪器．．
ＰＳ一５Ｈ２数显ｐＨ计（上海精密科学仪器有限公司）ＴＳ９０原子吸收分光光度计（；Ａ一９北京普析通用仪器有限责任公司）Ｒ０真空旋转蒸发器（；２６上海申生科技有限公司）Ｓ１；Ｃ一５数控超级恒温槽（宁波市天恒仪器厂）Ｕ一１０型ｕＶＳ自动分光光度计ｓｅｔｐｏｍｔ１Ｔｋｏ；；８０Ｖ— Ｉ全ｐｃｏｈｔｅｒ（３ｒｏｅ本ｏｙ）高速台式冷冻离心机（Ｇ１Ｍ，ｅｋａＴＬ一６Ｂｃｍｎ美国）真空干燥箱。；
２１８月０２年
３１卷第８
绵阳师范学院学报
ＪｕｎｌｏｏｒａｆＭｉａｇＮｒｌｌ哪ｎｏｍａｉＵＩ
Ａ．２１１，２０
ｖ０．１Ｎ．１３ｏ８
油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠骨髓ＮＯ和ＮＳ的影响Ｏ
王昱，崔文辉，王振福，小录，杨何九军
（Ｏ）量及一氧化氮合酶（Ｏ）Ｎ含ＮＳ活性的变化。结果
性。
与模型对照组相比，小鼠灌胃ＯＥ后血铅水平下降，Ｌ骨髓
ＮＯ含量及ＮＳ活性明显降低。结论ＯＥ对铅中毒小鼠有一定的疗效，ＯＬ能改善骨髓生化指标，抗铅对骨髓的毒拮
通讯作者：昱Ｅ— ａ：ｓａｇｕ１６ｃｒ王ｍｉｇｎｙ＠２．ｏ．ｌｗｎ
第３卷ｌ
绵阳师范学院学报浓缩，层上大孔树脂柱（＜２ｍ × ０ｃ进行柱层析，集、水．０ｃ５ｍ）收浓缩洗脱液，油橄榄叶提取物精得制产品。用水稀释配成相应浓度，置于冰箱（ｃ）４【中保存备用。＝

油橄榄叶粗提取物对油脂氧化稳定性的影响

2021·02油橄榄叶粗提取物对油脂氧化稳定性的影响*阮梅兰1，邓艳1，王操1，2，邱霞1，皮汶灵1，王强1，2，古小露1，2*1.重庆第二师范学院生物与化学工程学院，重庆南岸400067；2.重庆第二师范学院脂质资源与儿童日化品协同创新中心摘要：通过测定加入不同浓度油橄榄叶粗提取物的油脂在储存期的过氧化值、酸价、颜色、气味和透明度的变化，判断油脂的酸败程度，为延长油脂的保质期提供数据支持和理论依据。

结果表明，随着油脂中加入的油橄榄叶粗提取物浓度的提高，油脂过氧化值和酸价增加较慢，油脂的氧化稳定性相比对照组有明显提高。

其中，加入15%油橄榄叶粗提取物的样品，由于油橄榄叶粗提取物中有抗氧化活性物质与油脂反应使过氧化值和酸价增长速度减慢，第30天其酸价增长为0.02%，酸价值增长为0.03mg/g ，油橄榄叶粗提取物可以有效提高油脂的氧化稳定性。

关键词：油橄榄叶粗提取物；酸价；过氧化值；氧化稳定性目前市面上的食用油大多是通过加入人工合成抗氧化剂来提高油脂的氧化稳定性[1]，主要包括没食子酸丙酯（PG ）、丁基羟基茴香醚（BHA ）、二丁基羟基甲苯（BHT ）和特丁基对苯二酚（TBHQ ），这些抗氧化剂均为酚型抗氧化剂[2-3]，具有高效、价廉、耐高温、性能稳定等特点。

但人工合成的抗氧化剂有一定的毒性或潜在的致癌性，随着人们食品安全意识的加强，食品产业的转型升级，天然抗氧化剂因其毒性较低而逐渐引起关注，并且从活性上看，有些天然抗氧化剂甚至优于人工合成的抗氧化剂，天然抗氧化剂[4]不仅抗氧化活性强，其自身的风味也贡献了调味品或食品特别的风味，同时兼备了调香和调味的作用。

因此，天然抗氧化剂逐渐取代人工合成抗氧化剂将是未来发展趋势。

研究表明,油橄榄叶具有抗氧化功效[5]，Marino [6]等测定了油橄榄叶，发现油橄榄叶含有的橄榄苦苷、酪醇等单一酚类物质有显著的抗氧化能力。

油橄榄叶粗提取物可提高油脂的氧化稳定性，并且油橄榄叶粗提取物成本[7]相对人工抗氧化剂来说也比较低，因此，油橄榄叶粗提取物这一天然氧化剂必然冲击食品行业。

油橄榄叶提取物联合美沙酮对海洛因成瘾大鼠肾功能及活性物质的影响

油橄榄叶提取物联合美沙酮对海洛因成瘾大鼠肾功能及活性物质的影响王昱【摘要】目的观察油橄榄叶提取物(olive leaf extract,OLE)联合美沙酮对海洛因依赖大鼠肾功能及活性物质的影响.方法将40只健康大鼠随机分成正常组、模型组、OLE+美沙酮处理组、美沙酮处理组.按递增法采用皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,造模后药物处理30 d,自动生化分析仪分析血浆尿酸(UA)、尿素氮(UN)、肌酐(Cr)含量,比色法检测肾脏组织一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性,免疫组织化学法检测肾脏组织中环氧化酶-2(COX-2)的表达情况.结果与正常组相比,模型组海洛因依赖大鼠血浆UA、UN、Cr含量明显增高,肾脏组织中NO含量和NOS活性明显降低,COX-2的表达则显著升高;与模型组相比,OLE+美沙酮处理组和美沙酮处理组大鼠血浆UA、UN、Cr含量明显降低,肾脏组织中NO含量和NOS活性升高,COX-2表达明显减少.OLE联合美沙酮对海洛因依赖大鼠肾脏的治疗效果比美沙酮处理组更明显.结论 OLE联合美沙酮对海洛因依赖大鼠肾功能损害有明显的治疗作用,机制可能与其降低血尿酸、减少尿酸盐在肾小管沉积、升高肾组织NO含量和NOS活性、抑制COX-2的表达有关.【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2014(033)006【总页数】6页(P912-917)【关键词】油橄榄叶提取物;海洛因;美沙酮;肾功能;环氧化酶-2;大鼠【作者】王昱【作者单位】陇南师范高等专科学校生化系,甘肃成县742500【正文语种】中文【中图分类】Q959.837;Q955阿片类物质滥用已成为当今世界严重的社会问题和医学问题，其中海洛因滥用最为突出。

海洛因成瘾可引起动物、人类多种脏器的损害。

美沙酮维持治疗是海洛因等阿片类物质依赖者治疗的重要措施之一，但是，这些药物本身有成瘾性，具有长期或终生服药的特点，若使用不当又会成为新的毒品。

油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠脾脏的保护作用

油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠脾脏的保护作用王昱【摘要】选健康小鼠,每日灌胃醋酸铅溶液的同时灌胃不同剂量的OLE进行治疗,连续用药30 d,检测脾脏指数、组织结构及脾脏细胞周期进程的变化情况.与模型对照组相比,小鼠灌胃OLE后白髓与红髓分界变清,动脉周围淋巴鞘增厚,脾小结数量、白髓的面积及脾脏指数明显增大,脾脏细胞周期进程中G2+M期细胞百分比升高.发现OLE对铅中毒小鼠有一定的疗效,能影响脾脏细胞周期进程和组织结构,拮抗铅对脾脏的毒性.【期刊名称】《甘肃高师学报》【年(卷),期】2014(019)002【总页数】3页(P34-36)【关键词】油橄榄叶提取物;铅;脾脏;组织结构;细胞周期;小鼠【作者】王昱【作者单位】陇南师范高等专科学校生化系,甘肃成县742500【正文语种】中文【中图分类】Q502铅对神经系统、免疫系统、生殖系统、肝、肾、脾等全身各系统和器官均有毒性作用.已有大量研究表明，慢性铅中毒会导致动物机体免疫器官和免疫功能受损[1-7]，抑制脑、肝抗氧化能力[8-10].关于铅中毒的治疗，临床上大都采用依地酸二钠钙、二琉基丁二酸、二琉基丙醇和青霉胺等药物，但是，药物治疗往往存在许多副作用，如肾脏损害、过敏反应等[11，12].因此，开发一些有效预防铅中毒和促排铅的功能性生物食品对铅中毒的防治是十分重要和必要的.油橄榄叶被证实有降血糖、抗高血压及抗微生物等显著作用，有促进骨骼钙化、防治骨质疏松、预防钙质流失的作用[13-15]，有很强的抗氧化能力[16-18].也有文献报道，橄榄叶提取物能降低糖尿痛模型小鼠血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇的含量[19]，王昱等[20，21]研究了油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠海马组织抗氧化酶及脑中单胺氧化酶活性的影响.本研究以铅中毒小鼠为模型，然后灌服OLE治疗，测定治疗后小鼠脾脏指数、组织结构及脾脏细胞周期进程的变化情况，以期为油橄榄的开发利用提供依据.1 材料与方法1.1 材料1.1.1 材料来源新鲜的油橄榄叶采自甘肃省武都区；断奶昆明小鼠100只购于兰州大学实验动物中心，体重18～20g，雌雄各半；醋酸铅、乙醇、石油醚等均为国产.1.1.2 仪器PHS-25数显pH计（上海精密科学仪器有限公司）；TAS-990原子吸收分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；R206真空旋转蒸发器（上海申生科技有限公司）；SC-15数控超级恒温槽（宁波市天恒仪器厂）；高速台式冷冻离心机（TGL-16M，Beckman美国）；真空干燥箱；FACS420型流式细胞仪（美国B-D公司生产）.1.2 方法1.2.1 油橄榄水溶性提取物的制备以阴干小树叶为原料，乙醇为溶剂，加热提取，滤液浓缩后样品加水稀释，用石油醚等体积萃取，石油醚层浓缩，水层上大孔树脂柱（＜2.0cm×50cm）进行柱层析，收集、浓缩洗脱液，得油橄榄叶提取物精制产品.用水稀释配成相应浓度，置于冰箱（4℃）中保存备用.1.2.2 油橄榄叶提取物对小白鼠的排铅试验100只小鼠随机分成5组（正常对照组，模型对照组及I、II、III油橄榄叶提取物治疗组），每组20只.模型对照组每日灌胃10 mg/kg的醋酸铅溶液；I、II、III油橄榄叶提取物治疗组每日灌胃10 mg/kg的醋酸铅溶液，2 h后分别灌胃250,500,and 1000 mg/kg 的油橄榄叶提取物[21]，每次0.5ml，每天灌胃1次，连续处理30 d.正常对照组每天以等量生理盐水灌胃.末次灌胃后3 h后处死小鼠取出脾脏，用分析天平称量脾脏重量（脾脏指数=小鼠脾脏的重量/小鼠体重）.然后用流式细胞术分析脾脏细胞周期进程，用组织学方法观察脾脏组织结构的变化.1.2.3 数据处理用SPSS13.0软件进行统计学分析处理，数据用x±s表示，两组间均数比较（实验组与对照组）采用t检验，P＜0.05表示具有有显著差异，P＜0.01为差异极显著.2 结果2.1 油橄榄叶提取物（OLE）对小鼠脾脏指数的影响给药30 d后，不同剂量OLE影响了小鼠的脾脏指数（表1）.由表 1 可知，与模型对照组相比，I、II、III治疗组小鼠的脾脏指数均有不同程度的升高，差异显著或极显著（P＜0.05，P＜0.01）.模型对照组小鼠脾脏指数低于正常对照组，差异极显著（P ＜ 0.01）.表1 给予OLE后铅中毒小鼠脾脏指数的变化注：治疗组与模型组比较（Comparison between the OLE treated group and modelgroup）*P＜0.05，**P＜0.01模型组与正常组比较（Comparison between the modelgroup andcontrolgroup）▲▲P＜0.01.下同组别Groups体重（g）Body weight脾脏重量（mg）Spleen weight脾脏指数Spleen index正常对照组Control group 34.89±2.73 217.25±15.72 6.23±0.58模型对照组Modelgroup23.52±1.37▲▲ 122.05±10.16▲▲ 5.19±0.81▲▲I 25.01±3.08* 136.82±9.23* 5.47±0.70*II 26.75±1.86** 147.54±11.64** 5.52±0.42**III 28.33±2.50** 166.86±12.27** 5.89±0.63**2.2 油橄榄叶提取物（OLE）对小鼠脾脏细胞周期进程的影响不同剂量OLE影响了小鼠脾脏细胞周期进程（表2）.由表2可知，与模型对照组相比，I、II、III治疗组小鼠脾脏G2+M期细胞百分比明显升高，G0/G1期细胞百分比降低，S期细胞百分比升高，差异显著或极显著（P＜0.05，P＜0.01）.模型对照组小鼠脾脏G2+M期细胞百分比和S期细胞百分比明显低于正常对照组，而G0/G1期细胞百分比高于正常对照组，差异极显著（P＜0.01）.表2 给予OLE后铅中毒小鼠脾脏细胞周期进程的变化组别Groups G0/G1期（%） S期（%） G2+M期（%）正常对照组Control group 81.41±2.52 12.35±1.12 15.90±1.56模型对照组Model group 103.54±5.07▲▲8.13±1.28▲▲ 9.26±1.14▲▲I 94.91±2.48* 9.08±1.21* 11.19±1.21*II 90.75±3.56** 90.75±3.56** 13.39±1.77**III 86.55±2.85** 11.69±1.48** 14.27±1.80**2.3 油橄榄叶提取物（OLE）对小鼠脾脏组织结构的影响不同剂量OLE影响了小鼠脾脏的组织结构（图1～5）.由图1～5可知，与模型对照组相比，I、II、III治疗组小鼠脾脏白髓与红髓分界变清，动脉周围淋巴鞘增厚，脾小结数量和白髓的面积增大.与正常对照组相比，模型对照组小鼠脾脏白髓与红髓分界不清，动脉周围淋巴鞘变薄，脾小结数量和白髓的面积减少.3.讨论脾脏是机体最大的免疫器官，参与体液免疫及细胞免疫，也是铅损害的主要靶区.因此，建立铅中毒小鼠模型，检测铅对小鼠脾脏生理功能的影响对于研究排铅药物的作用机制具有临床价值.橄榄叶中含有的橄榄苦苷和黄酮等多酚类化合物较果子和树皮更为突出.大量实验表明，橄榄多酚有抗氧化能力，能减轻低密度脂蛋白的氧化程度，预防冠心病，动脉粥样硬化的发生；有舒缓血管平滑肌、降血压和降血糖的药理作用[16-18].研究认为，铅对免疫功能的影响与铅对抑制培养脾细胞的增生反应有关[1].张启先等[2]研究发现铅暴露导致小鼠脾脏淋巴细胞数及DNA合成均明显下降.鲍红丹等[3]研究表明，铅染毒小鼠脾脏白髓发育不良，淋巴小结个数减少，无明显的生发中心，动脉周围淋巴鞘内淋巴细胞稀疏，白髓与红髓分界不清.刘倩琦等[4]研究还发现长期低水平铅暴露大鼠脾脏免疫细胞线粒体空泡化、嵴断裂、肿胀、凝集，内质网扩张、脱颗粒，染色体疏松.Diamond等[22]研究发现处于增殖期的细胞是按照DNA合成前期（G1）→DNA合成期（S）→合成后期（G2）→有丝分裂期（M）完成一次分裂，而处于休止状态的细胞遇到适当信息刺激后再进入增殖周期（G0）.G0/G期、S期及G2+M期细胞的比例可以反映细胞的增殖情况.如果S期和G2+M期细胞百分比降低，G0/G1期细胞百分比增高，说明DNA复制障碍，积滞于合成前期，进入有丝分裂期的细胞就减少[23].图1 正常对照组脾脏，标尺=50μm，图2,3,4,5同.图2.治疗III组脾脏；图3.治疗Ⅱ组脾脏；图4.治疗Ⅰ组脾脏；图5.模型对照组脾脏.Fig1.The spleen of control group,Bar=50μm,the figures 2,3,4,5 are the same.Fig 2.The spleenof OLE treatedⅢgroup.Fig 3.The spleen of OLE treatedⅡgroup.F ig 4.The spleen of OLE treatedⅠgroup.Fig 5.The spleen of model group.本实验研究发现，与正常对照组相比，铅中毒小鼠的脾脏白髓与红髓分界不清，动脉周围淋巴鞘变薄，脾小结数量、白髓的面积、脾脏指数、细胞周期进程中S期和G2+M期细胞百分比均降低，而G0/G期细胞百分比升高.与不治疗的模型对照组相比，I、II、III治疗组小鼠的脾脏白髓与红髓分界变清，动脉周围淋巴鞘增厚，脾脏指数、脾小结数量、白髓的面积、细胞周期进程中S期及G2+M期细胞百分比均有不同程度的升高，而G0/G期细胞百分比降低.这可能与油橄榄叶中含有丰富的活性成分（橄榄苦苷）有关，体外试验和动物试验均证明其有很强的生物抗氧化剂，具有清除铅引起的氧自由基的能力[16-19].另外，油橄榄叶中含有丰富的多酚、黄酮等活性物质[17-19]，可与重金属铅离子形成稳定的络合物，进而排出体外.因此OLE能延缓和减少重金属等有害物质的吸收，减少和预防有害化学物质对机体的毒害作用.参考文献：[1]McMurry ST,Lochmiller RL,Chandra SAM,et a1.Sensitivity of selected immunological,hematological,and reproductive parameters in the cottonrat to subchronic lead exposure[J].Journal of WildlifeDiseases,1995,31(2):193-204.[2]张启先.饮水中不同浓度对小鼠免疫功能的影响[J].白求恩医科大学学报,1995,2(6):577-579.[3]鲍红丹,孙鹂.低水平铅染毒对小鼠脾脏显微结构的影响[J].杭州师范学院学报（自然科学版），2005，4（6）：431-432.[4]刘倩琦，陈荣华，秦锐等.长期低铅染毒大鼠脾脏超微结构的观察[J].电子显微学报，2000，19（6）：824-828.[5]王世鑫，周蔚，魏茂提等.染铅对大鼠脾脏NOS、NO、SOD、MDA的影响[J].工业卫生与职业病,2002,28(4):218-221.[6]胡锦东，高秋华，余灯广等.牛磺酸对铅中毒大鼠脾的保护作用[J].卫生毒理学杂志，2004，18（2）：110-111.[7]Heo Y,Parsons PJ,Laurence DA,et al.Lead differentialIy modifies cytokine production in vitro and in vivo[J].Toxicol App Pharmacol,1996,138(1):149-157.[8]徐进，徐立红，郑一凡等.铅暴露引起的小鼠肝脏抗氧化系统损伤[J].环境科学学报，2004，24（06）：1142-1144.[9]Wang Y,Wang SQ.Effects of lead exposure on histological structure and antioxidant capacity in the cerebellum of 30-day-old mice[J].Neural regeneration research,2011,6(14):1077-1081.[10]张敬旭，符绍莲，江河等.孕鼠铅暴露对仔鼠肝、脑组织氧化损伤的影响[J].中国职业医学，2003，30（3）：14-16.[11]尹华，包其富.大蒜提取物排铅效果的研究[J].中国安全科学学报，1999，9（4）：27-31.[12]张梅，唐慧，刘梅等.番茄纤维对铅中毒小鼠（脑、心脏、血液）促排铅的作用[J].毒理学杂志，2008，22（6）：464-466.[13]Briante R,Patumi M,Terenziani S,et al.Olea europaea L.leaf extract and derivatives:antioxidant properties[J].J Agric Food Chem,2002,50（17）：4934-4940.[14]Papoti VT,Tsimidou MZ.Impact of sampling parameters on the radical scavenging potential of olive (olea europaea L.)Leaves[J].J Agric Food Chem,2009,57(9):3470-3477.[15]Briante R,La Cara F,Febbraio F,et al.Bioactive derivatives from oleuropein by a biotransformation on olea europaea leaf extracts[J].J Biotechnol,2002,93(2):109-119.[16]Jemai H,Feki AE,Sayadi S.Antidiabetic and antioxidant effects ofhydroxytyrosol and oleuropein from olive leaves in alloxan-diabetic rats[J].J Agric Food Chem,2009,57(19):8798-8804.[17]Benavente-García O,Casti llo J,Lorente J,et al.Antioxidant activity of phenolics extracted from olea europaea L.leaves[J].FoodChemistry,2000,68(4):457-462.[18]Goulas V,Papoti VT,Exarchou V,et al.Contribution of flavonoids to the overall radical scavenging activity of olive(olea europaea L.)leaf polar extracts[J].J Agric Food Chem,2010,58(6):3303-3308.[19]季崇敏,吴国球,沈子龙.橄榄叶提取物对正常及糖尿病小鼠血糖和血脂水平的影响[J].东南大学学报(医学版),2003,22(4):236-238.[20]王昱.油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠脑中单胺氧化酶活性的影响.绵阳师范学院学报,2012,32（2）：67-69.[21]王昱.油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠海马组织抗氧化酶及 NO 与 NOS 的影响[J].甘肃农业大学学报，2012，47（2）：21-24.[22]Diamond LW,Braylan RC.Flow analysis of DNA content and cell size in non-Hodgkin’s lymphoma[J].Cancer Res,1980，40（3）：703-712. [23]孙侠，张文辉，牛玉杰等.不同强度微波辐射对小鼠胸腺的影响[J].中华劳动卫生职业病杂志，2004，22（2）：108-111.。

多种营养素对染铅大鼠海马NOS和NO影响

多种营养素对染铅大鼠海马NOS和NO影响范广勤;冯昶;黎玉;高云【期刊名称】《中国公共卫生》【年(卷),期】2007(23)10【摘要】目的探讨多种营养素联合拮抗铅对海马一氧化氮合成酶(NOS)活性和一氧化氮(NO)的作用,并寻找最佳具有拮抗作用的营养素组合。

方法采用正交设计以染铅大鼠海马NOS和NO为检测指标,对酪氨酸、甘氨酸、蛋氨酸、牛磺酸、维生素C、维生素B1和锌等7种已知对铅毒性有拮抗作用和改善学习记忆功能的营养素进行筛选、配伍。

结果给予营养素各组的血铅明显低于不给营养素的对照组(P<0.01),给予营养素各组的海马NOS活性和NO含量明显高于不给营养素的对照组(P<0.01)。

正交实验设计结果为蛋氨酸、锌和维生素B1降低血铅作用明显,给与不给的血铅值极差差异有统计学意义;锌增强大鼠海马NO含量作用明显,其极差差异有统计学意义(P<0.01);维生素B1不具有增强大鼠海马NOS活性和增加大鼠海马NO含量作用,给予维生素的各组均值小于不给予各组,其极差差异有统计学意义(P<0.05)。

结论多种营养素联合可改善铅对海马NOS和NO的作用,蛋氨酸、锌可降低血铅,提高海马中NOS活性,增加海马中NO含量的较好组合。

【总页数】3页(P1180-1182)【关键词】铅;营养素;一氧化氮合成酶;一氧化氮【作者】范广勤;冯昶;黎玉;高云【作者单位】南昌大学公共卫生学院;南昌大学生命科学院生物基础实验中心;南昌大学医学院实验动物科学部【正文语种】中文【中图分类】R995【相关文献】1.神经节苷脂GM1对染铅大鼠学习记忆能力及海马细胞NoS表达的影响 [J], 魏慈;吕佩源;郭宗成;李玲2.急性染铅对大鼠海马CREB、c-FOS蛋白表达的影响 [J], 包翠芬;赵艳;宋慧娟;张尤新3.维生素C和E对染铅大鼠海马抗氧化酶及NO与NOS的影响 [J], 李向荣;龙宇红;方晓;刘晓光4.刺芹侧耳多肽对染铅大鼠脑海马组织形态及海马组织中camk2a、erk2和homer1基因mRNA表达量的影响 [J], 郝正祺;刘伟;冯翠萍;常明昌;孟俊龙;刘靖宇5.急、慢性染铅对大鼠海马细胞外信号调节激酶2影响 [J], 张尤新;孙黎光;文涛;刘萍;叶丽平;张莹;曹师承;朱艳凌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

外源性泛素对小鼠CLP术后早期血清NO、NOS及肺部损伤的影响的开题报告

外源性泛素对小鼠CLP术后早期血清NO、NOS及肺部损伤的影响的开题报告摘要：本文旨在研究外源性泛素对小鼠CLP术后早期血清NO、NOS及肺部损伤的影响。

选择50只雄性BALB/c小鼠，随机分为五组：假手术组（Sham组）、CLP组、CLP+PBS组、CLP+低剂量泛素组（1mg/kg）、CLP+高剂量泛素组（10mg/kg）。

实验采用腹腔感染致腹腔炎模型，术后2h随机注射泛素或PBS。

结果发现，泛素组的肺部病理损害得到了明显改善，并且血清NOS、NO的含量也有所降低。

本研究显示，外源性泛素对小鼠CLP术后早期肺部保护作用可能与抑制NOS、NO产生有关。

未来需进一步探究泛素对肺部保护作用的机制及其在临床护理中的应用。

关键词：泛素；CLP术后；血清NO；血清NOS；肺部损伤Abstract:The purpose of this study is to investigate the effect of exogenous ubiquitin on serum NO, NOS, and lung injury in the early stage of CLP surgery in mice. Fifty male BALB/c mice were randomly divided into five groups: sham group, CLP group, CLP+PBS group, CLP+low-doseubiquitin group (1mg/kg), and CLP+high-dose ubiquitin group(10mg/kg). The abdominal infection induced peritonitis model was used, and ubiquitin or PBS was randomly injected 2 hours after surgery. The results showed that the lung pathological damage in the ubiquitin group was significantly improved, and the content of serum NOS and NO was also reduced. This study shows that the protective effect of exogenous ubiquitin on the lungs in the early stage after CLP surgery in mice may be related to the inhibition of NOS and NO production. In the future, the mechanism of the protective effect of ubiquitin on the lungs and its application in clinical nursing should be further explored.Keywords: ubiquitin; CLP surgery; serum NO; serum NOS; lung injury。

油橄榄叶提取物对酒精性肝损伤大鼠肝组织转化生长因子-β1水平的影响

油橄榄叶提取物对酒精性肝损伤大鼠肝组织转化生长因子-β1水平的影响王昱【期刊名称】《首都师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2018(039)005【摘要】目的:探讨油橄榄叶提取物对酒精性肝损伤大鼠肝组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平的影响.方法:用递增法灌胃食用乙醇24周建立大鼠肝损伤模型,造模同时用OLE(250 mg/kg、500 mg/kg、1000 mg/kg)进行灌胃治疗.利用免疫组织化学法和酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝组织TGF-β1水平.结果:与正常组相比,模型组大鼠肝组织TGF-β1水平极显著升高(P＜0.01).与模型组比较,OLE干预后,肝脏TGF-β1水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01).结论:OLE对酒精性肝损伤具有一定的预防作用,其机制可能是通过调控TGF-β1信号通路来缓解酒精性肝损伤的进展.【总页数】5页(P45-49)【作者】王昱【作者单位】陇南师范高等专科学校农林技术学院,陇南特色农业生物资源研究开发中心,甘肃成县742500【正文语种】中文【中图分类】R28【相关文献】1.美他多辛对酒精性肝病大鼠肝损伤的保护作用与抑制肝组织内炎性细胞因子水平有关 [J], 温博;徐贝贝;王炳元2.蒙药德都红花-7味散及优化方对酒精性脂肪肝大鼠肝组织Toll样受体、核因子-κB、转化生长因子-β1蛋白表达的影响 [J], 巴图德力根;洪金凤;安达;韩志强;徐艳华;娜日苏3.帕珠丸对慢性酒精性肝损伤大鼠肝组织SOD、CAT活性及MDA含量的影响[J], 韵海霞;穆志龙;俞科贤;任世存4.绞股蓝皂苷联合银杏叶提取物对2型糖尿病并非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织和血浆H_2S的影响 [J], 赵琴;李刚;李芳;李金科;谭华炳5.蓝莓对酒精性肝损伤大鼠肝组织TLR4表达的影响 [J], 黄超;任婷婷;王豫萍;程明亮因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠骨髓NO和NOS的影响王昱;崔文辉;王振福;杨小录;何九军【摘要】目的探讨油橄榄叶提取物（OLE）对铅中毒小鼠骨髓NO含量和NOS活性的影响。

方法选健康小鼠，每日灌胃醋酸铅溶液的同时灌胃不同剂量的OLE进行治疗，连续用药30d，检测血铅含量、骨髓一氧化氮（NO）含量及一氧化氮合酶（NOS）活性的变化。

结果与模型对照组相比，小鼠灌胃OLE后血铅水平下降，骨髓NO含量及NOS活性明显降低。

结论OLE对铅中毒小鼠有一定的疗效，能改善骨髓生化指标，拮抗铅对骨髓的毒性。

%Objective: To study the effects of olive leaf extract (OLE) on content of nitric oxide(NO) and ac- tivity of nitrite oxide synthase (NOS) in bone marrow in lead poisoned mice. Methods: The healthy mice were chosen and daily intragastric administration with lead acetate and with different dose of OLE for 30 days. Blood lead level, NO content and NOS activity in bone marrow were daily determined. Results: Compared with model group, blood lead level as well as NO content and NOS activity in bone marrow significantly decreased in OLE groups. Conclusion: OLE has significant effects on improving the biochemical indexes of bone marrow to protect lead toxicity in bone marrow.【期刊名称】《绵阳师范学院学报》【年(卷),期】2012(031)008【总页数】4页(P55-57,62)【关键词】油橄榄叶提取物;铅;骨髓;一氧化氮;一氧化氮合酶;小鼠【作者】王昱;崔文辉;王振福;杨小录;何九军【作者单位】陇南师范高等专科学校生物系,甘肃成县742500;陇南师范高等专科学校生物系,甘肃成县742500;陇南师范高等专科学校生物系,甘肃成县742500;陇南师范高等专科学校生物系,甘肃成县742500;陇南师范高等专科学校生物系,甘肃成县742500【正文语种】中文【中图分类】R151铅是环境污染中主要的有毒重金属元素之一，其对机体的损害是全身性的，如神经系统、造血系统、生殖系统、肝、肾、脑等器官［1，2］。

关于铅对骨髓的影响已有研究，韩春姬和Jagetia等［3，4］报道，不同剂量的铅可使鼠骨髓微核率显著增加，shelton等［5］在分子水平上研究了铅引起血液系统损害的机制，王世鑫等［6］报道了铅中毒大鼠骨髓NOS和NO的变化。

关于铅中毒的治疗，临床上大都采用依地酸二钠钙、二琉基丁二酸、二琉基丙醇和青霉胺等药物，但是，药物治疗往往存在许多副作用，例如，肾脏损害、过敏反应等［7，8］。

因此，开发一些有效预防铅中毒和促排铅的功能性生物食品对铅中毒的防治是十分重要和必要的。

油橄榄，俗称洋橄榄(Olea europaea L.)，系木犀科植物，油橄榄是以“高产、优质、高效”为特征的世界名贵常绿木本油料和果用树种。

油橄榄叶被证实有降血糖、抗高血压、抗氧化及抗微生物等显著作用，还有促进骨骼钙化、防治骨质疏松、预防钙质流失的作用［9－14］。

也有文献报道，橄榄叶提取物能降低糖尿痛模型小鼠血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇的含量［15］。

但迄今为止，国内外还未见用油橄榄提取物进行铅中毒实验的相关报道。

因此，本研究以铅中毒小鼠为模型，然后灌服OLE治疗，测定治疗后小鼠血铅含量、骨髓一氧化氮合酶(NOS)活性及NO含量，以期为油橄榄的开发利用提供依据。

1.1 材料1.1.1 材料来源新鲜的油橄榄叶采自甘肃省武都区;断奶昆明小鼠100只购于兰州大学实验动物中心，体重18－20 g，雌雄各半;NO、NOS试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供;醋酸铅、乙醇、石油醚等均为国产。

1.1.2 仪器PHS－25数显pH计(上海精密科学仪器有限公司);TAS－990原子吸收分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);R206真空旋转蒸发器(上海申生科技有限公司);SC－15数控超级恒温槽(宁波市天恒仪器厂);U－1800型UV－VIS全自动分光光度计spectrophotometer(日本Tokyo);高速台式冷冻离心机(TGL－16M，Beckman美国);真空干燥箱。

1.2 方法1.2.1 油橄榄水溶性提取物的制备以阴干小树叶为原料，乙醇为溶剂，加热提取，滤液浓缩后样品加水稀释，用石油醚等体积萃取，石油醚层浓缩，水层上大孔树脂柱(＜2.0 cm×50 cm)进行柱层析，收集、浓缩洗脱液，得油橄榄叶提取物精制产品。

用水稀释配成相应浓度，置于冰箱(4℃)中保存备用。

1.2.2 油橄榄叶提取物对小白鼠的排铅试验100只小鼠随机分成5组(正常对照组，模型对照组及I、II、III油橄榄叶提取物治疗组)，每组20只。

模型对照组每日灌胃10 mg/kg的醋酸铅溶液;I、II、III油橄榄叶提取物治疗组每日灌胃10 mg/kg的醋酸铅溶液，2 h后分别灌胃250，500，and 1000 mg/kg的油橄榄叶提取物［15］，每次0.5ml，每天灌胃1次，连续处理30 d。

正常对照组每天以等量生理盐水灌胃。

末次灌胃后3 h眼眶采集血液，采用石墨炉原子吸收光谱法快速测定鼠铅含量。

然后处死小鼠，取出其两侧股骨，截取长骨约2.0 cm，用冰冷的Hepes液1.5 ml (50 mmol/L)反复冲洗骨髓腔，匀浆后冷冻离心15 min，吸取上清液按试剂盒的操作要求用全自动分光光度计分别测定小鼠骨髓匀浆中NO含量及NOS活性。

1.2.3 数据处理用SPSS13.0软件进行统计学分析处理，数据用X—±s表示，两组间均数比较(实验组与对照组)采用t检验，P＜0.05表示具有有显著差异，P＜0.01为差异极显著。

2.1 油橄榄叶提取物(OLE)对小鼠血铅含量的影响给药30 d后，不同剂量OLE影响了小鼠的血铅含量(图1)。

由图1可知，与模型对照组相比，I、II、III治疗组小鼠的血铅含量均有不同程度的下降，具统计学意义(P＜0.05，P＜0.01)。

模型对照组小鼠血铅含量高于正常对照组，差异极显著(P ＜0.01)。

2.2 油橄榄叶提取物(OLE)对小鼠骨髓NO、NOS的影响不同剂量OLE影响了小鼠骨髓NO、NOS的水平(表1)。

由表1可知，与模型对照组相比，I、II、III治疗组小鼠骨髓NO含量、NOS活性均有不同程度的降低，具统计学意义(P＜0.05，P＜0.01)。

模型对照组小鼠骨髓NO含量、NOS活性高于正常对照组，差异极显著(P＜0.01)。

骨髓是动物体的造血和免疫器官，也是造成铅中毒多种病变发生的原因之一。

因此，建立铅中毒小鼠模型，检测铅对小鼠骨髓生化指标的影响对于研究排铅药物的作用机制具有临床价值。

油橄榄树浑身都是宝，但橄榄叶中含有的橄榄苦苷和黄酮等多酚类化合物较果子和树皮更为突出。

大量实验表明，橄榄多酚有抗氧化能力，能减轻低密度脂蛋白的氧化程度，预防冠心病，动脉粥样硬化的发生;有舒缓血管平滑肌、降血压和降血糖的药理作用［15］。

研究认为，铅中毒小鼠的血液中铅蓄积，血铅含量显著升高，因此，血铅水平是反映铅毒性水平的指标之一［1］。

NO是一种气体自由基，由NOS催化精氨酸生成。

NOS活性升高，使过度释放的NO与超氧阴离子等活性氧直接反应形成有毒性的羟自由基，破坏细胞的氧化还原状态，导致细胞的损害［16，17］。

本实验研究发现，与正常对照组相比，铅中毒小鼠骨血铅含量升高，骨髓NOS活性及NO含量均升高。

王世鑫和李秋莲等［6，18］对铅中毒30 d大鼠血铅含量、骨髓NOS活性及NO含量检测时也得出同样的结论。

与不治疗的模型对照组相比，I、II、III治疗组小鼠血铅含量降低，骨髓NOS活性、NO含量明显降低。

这可能与油橄榄叶中含有丰富的活性成分(橄榄苦苷)有关，体外试验和动物试验均证明其有很强的生物抗氧化剂，具有清除铅引起的氧自由基的能力［12－14］。

另外，油橄榄叶中含有丰富的多酚、黄酮等活性物质［13－15］，可与重金属铅离子形成稳定的络合物，进而排出体外。

因此OLE能延缓和减少重金属等有害物质的吸收，减少和预防有害化学物质对机体的毒害作用。

【相关文献】［1］张梅，唐慧，刘梅，等.番茄纤维对铅中毒小鼠(脑、心脏、血液)促排铅的作用［J］.毒理学杂志，2008，22(6):464－466.［2］Wang Y，Wang SQ.Effects of lead exposure on histological structure and antioxidant capacity in the cerebel－lum of 30－day－old mice［J］.Neural regeneration research，2011，6(14):1077－1081.［3］韩春姬，崔山田，李红莲，等.亚硒酸钠对醋酸铅所致小鼠骨髓多染红细胞微核增加的影响［J］.延边医学院学报，1996，19(3):135－137.［4］Jagetia GC，Aruna R.Effects of various concentrations of lead on the induction of micronuclei in mouse bone marrow［J］.Mutation Research，1998，415(1－2):131－137. ［5］Shelton KR，Todd，JM，Egle PM.The induction of stress－related protein by lead ［J］.J Biol Chem，1986，261(4):1935－1940.［6］王世鑫，周蔚，蔚茂提，等.染铅大鼠骨髓NOS和NO的变化［J］.工业卫生与职业病，2002，28(4):225－227.［7］尹华，包其富.大蒜提取物排铅效果的研究［J］.中国安全科学学报，1999，9(4):27－31. ［8］张梅，唐慧，刘梅，等.番茄纤维对铅中毒小鼠(脑、心脏、血液)促排铅的作用［J］.毒理学杂志，2008，22(6):464－466.［9］Briante R，Patumi M，Terenziani S，et al.Olea europaea L.leaf extract and derivatives:antioxidant properties［J］.J Agric Food Chem，2002，50(17):4934－4940. ［10］Jemai H，Feki AE，Sayadi S.Antidiabetic and antioxidant effects of hydroxytyrosol and oleuropein from olive leaves in alloxan－diabetic rats［J］.J Agric Food Chem，2009，57(19):8798－8804.［11］Benavente－García O，Castillo J，Lorente J，et al.Antioxidant activity of phenolics extracted from olea europaea L.leaves［J］.Food Chemistry，2000，68(4):457－462. ［12］Goulas V，Papoti VT，Exarchou V，et al.Contribution of flavonoids to the overall radical scavenging activity of olive(olea europaea L.)leaf polar extracts［J］.J Agric Food Chem，2010，58(6):3303－3308.［13］Papoti VT，Tsimidou MZ.Impact of sampling parameters on the radical scavenging potential of olive(olea europaea L.)Leaves［J］.J Agric Food Chem，2009，57(9):3470－3477.［14］Briante R，La Cara F，Febbraio F，et al.Bioactive derivatives from oleuropein by a biotransformation on olea europaea leaf extracts［J］.J Biotechnol，2002，93(2):109－119.［15］季崇敏，吴国球，沈子龙.橄榄叶提取物对正常及糖尿病小鼠血糖和血脂水平的影响［J］.东南大学学报(医学版)，2003，22(4):236－238.［16］Wink DA，Vodovotz Y，Laval J，et a1.The nmltifaceted roles of nitric oxide in cancer［J］.Carcinogenesis，1998，19(5): 711－721.［17］Machelska H，Ziolkowska B，Mika J，et al.Chronic morphine increases biosyntheses of nitric oxide synthase in the rat spinal cord［J］.Neuo Report，1997，8(12):2743－2747.［18］李秋莲，高秋华，薛承斌，等.牛磺酸对染铅大鼠骨髓生化指标的影响［J］.中国公共卫生，2005，21(2):189－190.。