基因外显子与内含子的查找方法

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编码区和非编码区和内含子外显子

编码区和非编码区和内含子外显子

编码区和非编码区和内含子外显子我们都知道不论真核与原核生物都离不开基因,它储存着生长、发育、凋亡等几乎全部生命过程的信息。

那么基因有着哪些结构呢,接下来从三个层面来讨论基因的构成:一、DNA编码区Coding region基因在结构上,分为编码区和非编码区两部分。

真核生物的编码区是不连续的,分为外显子和内含子,在转录过程中会修剪内含子,并拼合外显子来形成转录产物。

在原核生物中,基因是连续的,也就是说无外显子和内含子之分。

外显子Exon外显子是在preRNA 经过剪切或修饰后,被保留的DNA部分,并最终出现在成熟RNA的基因序列中。

内含子Intron在真核生物中,内含子作为阻断基因的线性表达的一段DNA序列,是在preRNA 经过剪切或修饰后,被切除的DNA序列非编码区Non-coding region非编码区在对基因的表达调控中发挥重要作用,如启动子,增强子,终止子等都位于该区域,有意思的是在人类基因中非编码区的占比超过90%。

它们中的一部分可以转录为功能性RNA,比如tRNA(transfer RNA), rRNA(ribosomal RNA)等;可以作为DNA复制,转录起始来对复制,转录和翻译起到调控作用;也可能是着丝粒与端粒的重要组成部分。

启动子Promoter启动子是特定基因转录的DNA区域,启动子一般位于基因的转录起始位点,5‘端上游,启动子长约100-1000bp。

在转录过程中,RNA聚合酶与转录因子可以识别并特异性结合到启动子特有的DNA序列(一般为保守序列),从而启动转录。

启动子本身并不转录而且也不控制基因活动,而是通过转录因子结合来调控转录过程。

在细胞核中,似乎启动子优先分布在染色体区域的边缘,可能是在不同染色体上共同表达基因。

此外,在人类中,启动子显示出每个染色体特有的某些结构特征。

CAAT Box 与Sextama boxCCAAT box(有时也缩写为CAAT box或CAT box):具有GGCCAATCT 共有序列的不同核苷酸序列,是真核生物基因常有的调节区,位于转录起始点上游约-80bp处,可能也是RNA聚合酶的一个结合处,控制着转录起始的频率。

应用UCSC_Ensembl查找基因启动子(promoter)、内含子、外显子序列-表观遗传学论坛-生物秀论坛

应用UCSC_Ensembl查找基因启动子(promoter)、内含子、外显子序列-表观遗传学论坛-生物秀论坛

在讲述某个基因的启动子查询之间,我们有必要对基础知识进行一下复习和总结。

先看一下中心法则:启动子是在DNA转录为RNA这一步过程中发挥作用的,在此要与顺序数为负(-1,-2,……),向下游(3’端)数的碱基为正(+2,+3,……)区域:启动子的范围非常大,可以包含转录起始位点上游2000bp,有些特定基因的转录区内部也存在着转录因子的结合位点,因此也属于为/。

进入项Genome Browser,进入基因组浏览器入口,如下图在Organism的下拉菜单中选择Rat,在assembly的下拉菜单中选择最新日期Nov. 2004可,如下图所示:然后点击Submit,返回的页面如下:结果显示该基因的已知序列和相关mRNA序列,点击Known Gene中的第一个序列,出现包含这序列的图解概要。

为了获得这个区域更清晰的图像,可以点击紧靠zoom out的1.5X按钮,如下图:对于Known Genes(已知基因)和预测的基因路径来说,一般的惯例是以一个高的垂直线或块状表示每个编码外显子,以短的垂直线或块状表示5′端和3′端非翻译区。

起连接作用的内含子以非常细的线条表示。

翻译的方向由沿着细线的箭头指示。

本例的搜寻目的来说,默认设置不是理想的设置。

按照视图利用页面底部的Track Controls按钮,将一些路径设置为hide模式(即不显示),其他设置为dense模式(所有资料密集在一条直线上);另一些路径设置为full模式(每个特征有一个分开的线条,最多达300)。

在考虑这些路径内究竟存在那些资料之前,对这些路径的内容和表现做一个简要的讨论是必要的,许多这些讨论是由外界提供给UCSC的。

Ensembl Gene Predictions路径由Ensembl提供。

Ensembl基因通过许多方法来预测,包括与已知mRNA和蛋白质进行同源性比较。

若查询启动子区域,我们需要将Ensembl Genes选择为dense 或full模式,点击Refresh,即刷新,出现下图:图中多出了Ensembl Genes的预测路径,我们在红框中圈出。

内含子和外显子

内含子和外显子

我把我的理解和大家讨论,理解错误的地方请大家指正首先要明确不是所有的基因都有内含子和外显子组成。

所谓内含子和外显子指的是一个开放阅读框(ORF)内编码的部分和不编码的部分。

内含子和外显子是间隔排列的,所以真核生物这些具有内含子和外显子的基因(不是所有的真核基因都这样)又叫做镶嵌基因或者断裂基因,更早的概念把具有多个内含子外显子的基因叫做多顺反子。

(很抱歉我当时把这个概念弄错了,多顺反子应该指的是一个转录本中共含有多个ORF,在此像战友们道歉。

)我们所说的UTR,一般值得是一个转录本(transcript)3…和5‟不参与编码的区域(但是不是说他们没有功能,只是说他们不被翻译成功能的蛋白质等等)。

我还没有看到用UTR来指代内含子区域的资料,因此UTR 既不指代intron nor Exon。

如果非要说他属于什么,我认为他属于“non-coding region”。

(这个我也错了,wilipedia 解释的很清楚了,希望大家没有被我的错误误导。

但是我仍然是有疑问的,wikipedia的原话是“Some of the exons will be wholly or part of the 5' untranslated region (5' UTR) or the 3' untranslated region (3' UTR) of each transcript.”,为什么是外显子会“部分的”作为UTR?所以我认为UTR不等同于exon。

)明白了问题1,就应该知道promoter自然不属于intron和Exon的任何一个,他就是属于noncoding sequence。

基因间的序列是基因间的序列,和intron没有关系,概念上可以看的出来。

我也不知道到底应该叫他什么。

但是这些序列相当一部分是有功能的。

下举例说明。

大家都知道,noncoding RNA是现在研究的热点之一。

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF区别详解

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF区别详解

外显子、内含子、m RNA、CDS、ORF区别与联系1、DN A复制:以DN A为模板,在DN A聚合酶的催化作用下,将四种游离的d NTP按照碱基互补配对原则合成新链DNA转录:以DN A为模版,在DN A指导的RNA聚合酶的作用下,将四种游离的NTP按照碱基互补配对的原则合成RNA翻译:以m RNA为模板,在核糖体内合成蛋白质的过程特点:DN A复制:模板为双链DN A,合成的新链与模板链一模一样,原料为四种d NTP,为半保留复制,需要引物转录:模板为双链DN A,为半不连续转录需要引物,原料为四种NTP,合成的新链除了把DN A上的T改为U外,其他一样翻译:模板为m RNA,原料为20中游离的氨基酸,3个碱基决定一个氨基酸2、m RNAm RNA(m e sse n g e r RNA,信使RNA)信使RNA是由DN A经h n RNA剪接而成,携带遗传信息的能指导蛋白合成的一类单链核糖核酸。

3、基因DN A分为编码区和非编码区,编码区包含外显子和内含子,一般非编码区具有基因表达的调控功能,如启动子在非编码区。

编码区则转录为m RNA 并最终翻译成蛋白质。

外显子和内含子都被转录到m RNA前体hnRNA中,当hnRNA进行剪接变为成熟的m RNA时,内含子被切除,而外显子保留。

实际上真正编码蛋白质的是外显子,而内含子则无编码功能,内含子存在于DN A中,在转录的过程中,DN A上的内含子也会被转录到前体RNA中,但前体RNA上的内含子会在RNA离开细胞核进行翻译前被切除。

4、CDS Se q u e n ceco d in gfo r am in oacid s inp ro t e in蛋白质编码区CDS是Co dingse que nce的缩写,是编码一段蛋白产物的序列,是结构基因组学术语。

与开放读码框ORF的区别开放读码框是从一个起始密码子开始到一个终止密码子结束的一段序列;不是所有读码框都能被表达出蛋白产物,或者能表达出占有优势或者能产生生物学功能的蛋白。

内含子和外显子的位置

内含子和外显子的位置

偶最近也在做RT-PCR。

也正在设计跨内含子的引物。

在园子里瞧了些文献,也请教了一些人。

个人感觉主要就是您找到这个基因的具体的内含子与外显子的位置后再设计引物一点也不难。

只要在跨越的引物中选取条件好的就行了。

其中对于如何找到内含子与外显子,偶就是用以下的方法。

一、首先登录Pubmed找到您的基因序列,这个应该很简单。

偶不多说。

二、如下图进入Blastl界面,选取genomes中的相应物种。

三将您的序列拷贝到查询框中,进行查询(Begin search)。

然后点击format,一路点下去,出现下图样的对话框。

点击genome view然后点击其相应的染色体号,我查的就是HIF基因,在14号染色体上。

相应的染色体上会出现红色的标记。

好了,如下图。

您可以瞧到右边的这些方框最后给的序列,就就是外显子的序列。

您可以对着此来设计引物,找到哪些跨过内含子的引物。

首先要明白:RT-PCR的引物之所以要跨内含子设计,主要原因就就是为了避免再PCR过程中基因组DNA的影响。

那么其实只要在提RNA时除去DNA也就没什么关系了。

RNA沉淀之后,在100ul反应体系中用RNAse free的DNAseI37C处理0、5h,然后直接用100ul氯仿抽提,异丙醇(别忘了加1/10体积4M NaAc)再次沉淀后用适量DEPC水溶解即可。

NCBI>GENE>基因名称搜索(Click the picture to see the source) louischenPosts:518Score:432004-07-30 06:57点击基因名称进入左键击NC_000019>GRAPHICSintron,extron的排列,可以点击进入粗划线为外显子,并有对应的protein编码还在也可以,在主页上输入基因的名字,找出该物种的基因序列,在transview与exonview上可以瞧到外显子与内含子,此网页简单,得到不同颜色标记的外显子。

NCBI查基因 编码区 启动子区 外显子

NCBI查基因 编码区 启动子区 外显子

问题:NCBI中怎样查找编码区/非编码区、起始密码子、启动子、外显子/内含子。

启动子
一般定义启动子,都是upstream 1000bp,downstream1000bp的那段序列。

或者根据你的实验。

你去ensemble,输入基因,找到exon,点开,在configuration里面选好flank多少bp 的序列,选好之后自动刷新,就出来了。

在序列里面,ensemble用不同的颜色标出来不同区域,5‘UTR之类的,还有exon,intron,转录起始位点等等,flank的区域就是你选的promoter 了。

开放阅读框
在分子生物学中,开放阅读框(Open Reading Frame, ORF)从起始密码子开始,是DNA序列中具有编码蛋白质潜能,一段无终止密码子打断的碱基序列。

基因外显子与内含子的查找方法

基因外显子与内含子的查找方法

基因外显子与内含子的查找方法一、外显子/内含子的概念1. 外显子(exon) sequence of a gene's DNA that transcribes into protein structures外显子(expressed region) 是真核生物基因的一部分,它在剪接(Splicing)后仍会被保存下来,并可在蛋白质生物合成过程中被表达为蛋白质。

外显子是最后出现在成熟RNA中的基因序列, 又称表达序列。

既存在于最初的转录产物中,也存在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列。

术语外显子也指编码相应RNA外显子的DNA中的区域。

*简言之,外显子就是指真核细胞的基因在表达过程中能编码蛋白质的核苷酸序列。

☆重要特点:①比较不同物种的相关基因,我们发现相应的外显子序列通常是保守的,而内含子序列则很少保守。

②编码蛋白质的序列通常处于选择压力之下,内含子由于没有选择压力,因此比外显子的进化快得多。

③通过确定在多种生物中出现的片段来鉴定编码区域,而外显子的保守性可以作为这种鉴定的基础2. 内含子(introns)内含子是基因内的间隔序列,不出现在成熟的RNA分子中,在转录后通过加工被切除。

大多数真核生物的基因都有内含子。

需注意的是,在古细菌中也有内含子。

在转录后的加工中,从最初的转录产物除去的内部的核苷酸序列。

术语内含子也指编码相应RNA内含子的DNA中的区域。

大多数真核结构基因中的间插序列(intervening sequence)或不编码序列。

它们可以转录,但在基因转录后,由这些间插序列转录的部分(也可用内含子这个术语表示)经加工被从初级转录本中准确除去,才产生有功能的RNA。

基因的编码部分称外显子。

内含子常比外显子长,且占基因的更大比例。

真核基因所含内含子的数目、位置和长度不尽相同,如鸡卵清蛋白基因的外显子被7个内含子隔开,鸡卵伴清蛋白基因有17个内含子,α-珠蛋白基因有2个内含子,卵粘蛋白基因有6个内含子等。

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF区别与联系

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF区别与联系

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF区别与联系1、DNA复制:以DNA为模板,在DNA聚合酶的催化作用下,将四种游离的dNTP按照碱基互补配对原则合成新链DNA转录:以DNA为模版,在DNA指导的RNA聚合酶的作用下,将四种游离的NTP按照碱基互补配对的原则合成RNA翻译:以mRNA为模板,在核糖体内合成蛋白质的过程特点:DNA复制?:? 模板为双链DNA,合成的新链与模板链一模一样,原料为四种dNTP,为半保留复制,需要引物转录:模板为双链DNA,为半不连续转录需要引物,原料为四种NTP,合成的新链除了把DNA上的T改为U外,其他一样?翻译?:模板为mRNA,原料为20中游离的氨基酸,3个碱基决定一个氨基酸2、mRNAmRNA (messenger RNA,信使RNA)信使RNA是由DNA经hnRNA剪接而成,携带遗传信息的能指导蛋白合成的一类单链核糖核酸。

3、基因DNA分为编码区和非编码区,编码区包含外显子和内含子,一般非编码区具有基因表达的调控功能,如启动子在非编码区。

编码区则转录为mRNA 并最终翻译成蛋白质。

外显子和内含子都被转录到mRNA前体hnRNA中,当hnRNA进行剪接变为成熟的mRNA时,内含子被切除,而外显子保留。

实际上真正编码蛋白质的是外显子,而内含子则无编码功能,内含子存在于DNA中,在转录的过程中,DNA上的内含子也会被转录到前体RNA中,但前体RNA上的内含子会在RNA离开细胞核进行翻译前被切除。

4、CDS? Sequence coding for amino acids in protein 蛋白质编码区?? ? CDS是Coding sequence的缩写,是编码一段蛋白产物的序列,是结构基因组学术语。

与开放读码框ORF的区别开放读码框是从一个起始密码子开始到一个终止密码子结束的一段序列;不是所有读码框都能被表达出蛋白产物,或者能表达出占有优势或者能产生生物学功能的蛋白。

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF区别与联系

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF区别与联系

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF区别与联系1、DNA复制:以DNA为模板,在DNA聚合酶的催化作用下,将四种游离的dNTP按照碱基互补配对原则合成新链DNA转录:以DNA为模版,在DNA指导的RNA聚合酶的作用下,将四种游离的NTP按照碱基互补配对的原则合成RNA翻译:以mRNA为模板,在核糖体内合成蛋白质的过程特点:DNA复制?:? 模板为双链DNA,合成的新链与模板链一模一样,原料为四种dNTP,为半保留复制,需要引物转录:模板为双链DNA,为半不连续转录需要引物,原料为四种NTP,合成的新链除了把DNA上的T改为U外,其他一样?翻译?:模板为mRNA,原料为20中游离的氨基酸,3个碱基决定一个氨基酸2、mRNAmRNA (messenger RNA,信使RNA)信使RNA是由DNA经hnRNA剪接而成,携带遗传信息的能指导蛋白合成的一类单链核糖核酸。

3、基因DNA分为编码区和非编码区,编码区包含外显子和内含子,一般非编码区具有基因表达的调控功能,如启动子在非编码区。

编码区则转录为mRNA 并最终翻译成蛋白质。

外显子和内含子都被转录到mRNA前体hnRNA中,当hnRNA进行剪接变为成熟的mRNA时,内含子被切除,而外显子保留。

实际上真正编码蛋白质的是外显子,而内含子则无编码功能,内含子存在于DNA中,在转录的过程中,DNA上的内含子也会被转录到前体RNA中,但前体RNA上的内含子会在RNA离开细胞核进行翻译前被切除。

4、CDS? Sequence coding for amino acids in protein 蛋白质编码区?? ? CDS是Coding sequence的缩写,是编码一段蛋白产物的序列,是结构基因组学术语。

与开放读码框ORF的区别开放读码框是从一个起始密码子开始到一个终止密码子结束的一段序列;不是所有读码框都能被表达出蛋白产物,或者能表达出占有优势或者能产生生物学功能的蛋白。

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF区别与联系之欧阳索引创编

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF区别与联系之欧阳索引创编

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF区别与联系欧阳家百(2021.03.07)1、DNA复制:以DNA为模板,在DNA聚合酶的催化作用下,将四种游离的dNTP按照碱基互补配对原则合成新链DNA转录:以DNA为模版,在DNA指导的RNA聚合酶的作用下,将四种游离的NTP按照碱基互补配对的原则合成RNA翻译:以mRNA为模板,在核糖体内合成蛋白质的过程特点:DNA复制:模板为双链DNA,合成的新链与模板链一模一样,原料为四种dNTP,为半保留复制,需要引物转录:模板为双链DNA,为半不连续转录需要引物,原料为四种NTP,合成的新链除了把DNA上的T改为U外,其他一样翻译:模板为mRNA,原料为20中游离的氨基酸,3个碱基决定一个氨基酸2、mRNAmRNA (messenger RNA,信使RNA)信使RNA是由DNA经hnRNA剪接而成,携带遗传信息的能指导蛋白合成的一类单链核糖核酸。

3、基因DNA分为编码区和非编码区,编码区包含外显子和内含子,一般非编码区具有基因表达的调控功能,如启动子在非编码区。

编码区则转录为mRNA并最终翻译成蛋白质。

外显子和内含子都被转录到mRNA前体hnRNA中,当hnRNA 进行剪接变为成熟的mRNA时,内含子被切除,而外显子保留。

实际上真正编码蛋白质的是外显子,而内含子则无编码功能,内含子存在于DNA中,在转录的过程中,DNA上的内含子也会被转录到前体RNA中,但前体RNA上的内含子会在RNA离开细胞核进行翻译前被切除。

4、CDS Sequence coding for amino acids in protein 蛋白质编码区 CDS是Coding sequence的缩写,是编码一段蛋白产物的序列,是结构基因组学术语。

与开放读码框ORF的区别开放读码框是从一个起始密码子开始到一个终止密码子结束的一段序列;不是所有读码框都能被表达出蛋白产物,或者能表达出占有优势或者能产生生物学功能的蛋白。

寻找基因外显子内含子的几种方法

寻找基因外显子内含子的几种方法

寻找基因外显子内含子的几种方法1.基于基因组序列的预测方法:基因组预测是寻找基因外显子和内含子的常用方法。

这种方法基于一系列计算模型和算法,分析基因组序列的物理特性和编码信息,通过寻找开放阅读框(ORFs)和间隔序列来预测基因的位置。

常用的基因组预测软件包括Glimmer、GeneMark、FgeneSH等。

2.基于转录本信息的实验方法:转录本是基因表达时的中间产物,包含了编码区域的外显子以及非编码区域的内含子。

转录组学技术如全长转录组测序(full-length transcriptome sequencing)和转录组组装(transcriptome assembly)可以利用高通量测序技术直接检测和组装转录本,从而获得基因的外显子和内含子的信息。

3.基于剪接的分析方法:剪接是在基因表达过程中原始mRNA分子中排除内含子,并将外显子连接在一起的过程。

通过利用剪接位点上的保守序列和转录组学测序数据,可以推测基因的外显子和内含子的位置和组成。

常用的剪接分析软件包括Tophat、Cufflinks等。

4.基于保守序列的比较基因组学方法:比较基因组学方法是通过比较不同物种的基因组序列,找出其保守区域以预测基因的外显子和内含子。

保守序列通常指具有功能约束的序列区域,如编码区域和剪接位点。

这种方法可以通过多序列比对和保守区域预测软件来实现。

5.基于基因组特征的机器学习方法:机器学习方法是一种基于已知标注数据训练模型,然后利用该模型来预测新的数据或未标注数据。

在基因组学中,可以利用已知的基因和非基因区域的数据来训练模型,然后使用这些模型来预测新的区域是否为基因的外显子或内含子。

这种方法通常结合了基因组序列特征、保守序列和转录组学数据。

综上所述,寻找基因外显子和内含子的方法可以基于基因组序列的预测、转录本信息的实验、剪接的分析、比较基因组学和机器学习等方法。

这些方法可以相互结合,共同提供对基因组序列的准确和全面的理解,进而推动对基因功能以及相关疾病的研究。

基因外显子与内含子的查找方法

基因外显子与内含子的查找方法

基因外显子与内含子的查找方法基因是遗传信息的基本单位,它们含有编码蛋白质所需的信息。

基因由外显子(exons)和内含子(introns)组成。

外显子是具有转录和翻译功能的区域,它们编码蛋白质序列;而内含子则是非编码区域,它们在转录过程中被剪切掉。

查找基因的外显子和内含子是基因组研究的重要一步,它能够帮助我们了解基因的结构和功能。

现代分子生物学技术的进步,尤其是基因组测序技术的发展,使得基因外显子和内含子的查找变得更加准确和高效。

下面将介绍一些常见的查找基因外显子和内含子的方法。

1.基于实验的方法:-准确分离基因组DNA:通过DNA提取实验,我们可以从细胞中准确分离出基因组DNA。

-cDNA合成:将基因组DNA反转录为互补DNA(cDNA),这可以消除内含子的干扰,使得外显子更容易被检测。

-基于PCR的方法:利用多聚酶链反应(PCR),我们可以特异性扩增外显子和内含子的DNA序列,并通过电泳进行分离和检测。

- 基于Southern印迹方法:Southern印迹是一种从DNA样品中分离具有特定DNA序列的方法,它能够定量测量基因外显子的存在和数量。

- 基于Northern印迹方法:Northern印迹是一种从RNA样品中分离具有特定RNA序列的方法,它能够帮助我们检测基因的转录情况,进而确定外显子的位置。

2.基于计算和生物信息学的方法:-基因组注释:通过分析已知基因组的注释信息,如转录组、蛋白质结构和功能等,可以预测基因的外显子和内含子的位置。

-基于比对的方法:将已知蛋白质或cDNA序列与未知基因组序列进行比对,通过寻找序列相似性和保守性来预测外显子的位置。

- 基于开放源代码软件的分析工具:如NCBI的BLAST、Ensembl、UCSC Genome Browser等在线工具,提供了基因组一站式注释和查找外显子和内含子的功能。

无论是基于实验还是基于计算和生物信息学的方法,都允许我们准确地查找基因的外显子和内含子。

内含子-外显子边界预测方法__解释说明以及概述

内含子-外显子边界预测方法__解释说明以及概述

内含子-外显子边界预测方法解释说明以及概述1. 引言1.1 概述本文将介绍内含子-外显子边界预测方法的定义、原理以及应用。

内含子和外显子是基因进行转录和剪接过程中的关键元素,准确预测其边界位置对于理解基因结构和功能具有重要意义。

内含子-外显子边界预测方法是通过分析DNA或RNA序列和结构特征来推断内含子和外显子之间的连接点。

1.2 文章结构本文主要包括以下几个部分:- 引言:介绍文章的背景、目的和结构;- 内含子-外显子边界预测方法:阐述定义、背景以及两种常见的预测方法;- 解释说明内含子-外显子边界预测方法的原理和步骤:详细说明基于序列标记和RNA结构的预测方法;- 相关研究进展与应用案例分析:概述最新研究成果,并通过应用案例分析说明内含子-外显子边界在遗传疾病中的重要性;- 结论与展望:总结文章内容,回顾贡献点,并展望未来该领域的发展方向。

1.3 目的本文旨在介绍内含子-外显子边界预测方法的原理和步骤,并探讨该方法在遗传疾病研究中的应用。

通过深入了解这些预测方法,读者可以更好地理解基因结构和功能,为相关领域的进一步研究提供参考依据。

同时,本文也将总结目前的研究进展,探讨未来该领域的发展趋势和挑战。

2. 内含子-外显子边界预测方法2.1 定义和背景内含子-外显子边界预测方法是一种用于预测基因组中内含子和外显子之间的边界位置的技术。

在基因表达调控中,内含子和外显子的区别对于正确识别基因以及产生不同转录本具有重要意义。

准确预测内含子-外显子边界位置可以帮助我们了解基因的结构与功能,并在遗传疾病诊断和治疗等领域具有潜在应用价值。

2.2 方法一:基于序列标记的预测方法基于序列标记的预测方法是通过分析DNA或RNA序列中相对保守的模式、特征或信号来推断内含子-外显子边界位置。

这些标记可能涉及剪接位点、蛋白质结合位点、启动子区域等。

该方法通常包括以下步骤:(1) 收集训练数据集:从已知基因组中提取已注释的内含子-外显子边界序列,作为训练样本。

寻找真核生物基因有无内含子及cDNA序列

寻找真核生物基因有无内含子及cDNA序列

寻找真核生物基因有无内含子及cDNA 序列By :xiaoji (1510073316-qq )真核生物基因组上存在内含子和外显子,在表达时,一般在提取RNA 后,反转录为Cdna ,之后以此为模板扩增目的基因序列,可以实现在原核生物中表达(暂不考虑糖基化等蛋白修饰过程)。

但是,并不是所有的基因内部都存在内含子,因此也就不需要进行RNA 提取及反转录操作,那该怎样判断一个真核基因内部有无内含子呢,在确定有内含子的条件下,cDNA 是获得目的基因的关键,那么又该如何确定cDNA 序列呢。

步骤1-你需要确定要扩增的基因,然后进入NCBI 网站,选“Gene ”选项进行查找。

步骤2-输入想要获取的基因(示例中为cel61a ),点击确定获取搜索结果。

步骤3-获得搜索结果。

查找自己的目的基因,点击序列号(Name/GneneID)“Gene”模式下搜索基因进入详细目录。

步骤4-获得目的基因详细信息。

进入“Genomic regions, transcripts, and products”初步查看在基因组上该基因是否有内含子;外显子个数内含子在基因组上的位置步骤5-初步确定是否存在内含子。

在左上角的文字说明里可以看到“Exon count 2”可知有两段外显子,则确定存在一个内含子;Graphics中可以看到,基因中存在间隔,中间一部分没有加粗显示,说明是内含子,之后要确定内含子的确定位置及找到cDNA序列,点击Genebank进入基因序列界面;基因在基因组上的位置步骤6-基因详细信息界面;mRNA序列位置(间隔序列,说明存在内含子)进入蛋白氨基酸序列界面步骤7-将页面向下浏览,在mRNA序列部分会显示内含子位置,mRNA序列位置1-218bp,273-1351bp,则中间间隔部分为内含子。

下方CDS序列显示cDNA在基因组上的位置,比mRNA位置略短。

之后点击CDS区protein_id链接,进入氨基酸序列界面;步骤8-氨基酸序列界面,点击CDS右下角会出现提示信息;步骤9-点击CDS后出现的提示信息(右下角),点击下方“Display”部分的GenBank进入cDNA序列界面;cDNA序列步骤10-获得cDNA序列;cDNA序列位置(从ATG开始)点击可以进入引物设计界面步骤11-在右边操作界面,可以选择要显示的序列信息,也可以在此设计引物用于目的基因扩增。

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF区别与联系.doc

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF区别与联系.doc

外显子、内含子、 mRNA 、CDS、ORF 区别与联系1、DNA 复制:以DNA 为模板,在DNA 聚合酶的催化作用下,将四种游离的dNTP 按照碱基互补配对原则合成新链DNA转录:以DNA 为模版,在DNA 指导的RNA 聚合酶的作用下,将四种游离的NTP 按照碱基互补配对的原则合成RNA翻译:以mRNA 为模板,在核糖体内合成蛋白质的过程特点:DNA 复制:模板为双链DNA ,合成的新链与模板链一模一样,原料为四种dNTP ,为半保留复制,需要引物转录:模板为双链DNA , 为半不连续转录需要引物,原料为四种NTP,合成的新链除了把DNA 上的T 改为U 外,其他一样翻译:模板为mRNA ,原料为20 中游离的氨基酸, 3 个碱基决定一个氨基酸2、mRNAmRNA (messenger RNA , 信使RNA )信使RNA 是由DNA 经hnRNA 剪接而成,携带遗传信息的能指导蛋白合成的一类单链核糖核酸。

3、基因DNA 分为编码区和非编码区,编码区包含外显子和内含子,一般非编码区具有基因表达的调控效用,如启动子在非编码区。

编码区则转录为mRNA 并最终翻译成蛋白质。

外显子和内含子都被转录到mRNA 前体hnRNA 中,当hnRNA 进行剪接变为成熟的mRNA 时,内含子被切除,而外显子保留。

实际上真正编码蛋白质的是外显子,而内含子则无编码效用,内含子存在于DNA 中,在转录的过程中, DNA 上的内含子也会被转录到前体RNA 中,但前体RNA 上的内含子会在RNA 离开细胞核进行翻译前被切除。

4、CDS Sequence coding for amino acids in protein 蛋白质编码区CDS 是Coding sequence 的缩写, 是编码一段蛋白产物的序列, 是结构基因组学术语。

与开放读码框ORF 的区别开放读码框是从一个起始密码子开始到一个终止密码子结束的一段序列;不是所有读码框都能被表达出蛋白产物, 或者能表达出占有优势或者能产生生物学效用的蛋白。

基因外显子与内含子的查找方法

基因外显子与内含子的查找方法

基因外显子与内含子的查找方法
基因的内含子和外显子的序列
在NCBI找到基因序列之后,要确定其内含子和外显子的序列是比较简单的。

如果是RefSeq 序列的话,那就更加容易了。

简单的思路就是跟基因组序列比对就行了。

% 用NCBI的Splign工具,详见:图解:如何在NCBI上找到HNF-4基因第4个外显子的序列。

% 但由于猪KIT(FJ938289)基因不是Refseq序列。

这就比较难了,由该序列的注释可知(/chromosome="8),该序列是属于第8号染色体。

% 所以先确定猪(Pig,Sus scrofa)的第8号染色体是否已经测完序了。

先在Taxonomy数据库搜索,得到Taxonomy ID: 9823。

直接用关键词 txid9823[Organism:noexp] 搜索Genome数据库。

猪有19条染色体,结果为11。

看图:
% 但其中并没有第8号染色体的。

所以要确定猪KIT(FJ938289)基因的内含子和外显子的序列,好像就不大可能了。

反正我是没办法了。

基因结构图
1,NCBI提供的Graphics工具
在NCBI搜索FJ938289之后,接下来用NCBI提供的Graphics工具来查看,就能知道基因的内含子和外显子的序列了(同时也是一个基因结构图哦)。

看图:。

基因外显子与内含子的查找方法

基因外显子与内含子的查找方法

基因外显子与内含子的查找方法一、外显子/内含子的概念1. 外显子(exon) sequence of a gene's DNA that transcribes into protein structures外显子(expressed region) 是真核生物基因的一部分,它在剪接(Splicing)后仍会被保存下来,并可在蛋白质生物合成过程中被表达为蛋白质。

外显子是最后出现在成熟RNA中的基因序列, 又称表达序列。

既存在于最初的转录产物中,也存在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列。

术语外显子也指编码相应RNA外显子的DNA中的区域。

*简言之,外显子就是指真核细胞的基因在表达过程中能编码蛋白质的核苷酸序列。

☆重要特点:①比较不同物种的相关基因,我们发现相应的外显子序列通常是保守的,而内含子序列则很少保守。

②编码蛋白质的序列通常处于选择压力之下,内含子由于没有选择压力,因此比外显子的进化快得多。

③通过确定在多种生物中出现的片段来鉴定编码区域,而外显子的保守性可以作为这种鉴定的基础2. 内含子(introns)内含子是基因内的间隔序列,不出现在成熟的RNA分子中,在转录后通过加工被切除。

大多数真核生物的基因都有内含子。

需注意的是,在古细菌中也有内含子。

在转录后的加工中,从最初的转录产物除去的内部的核苷酸序列。

术语内含子也指编码相应RNA内含子的DNA中的区域。

大多数真核结构基因中的间插序列(intervening sequence)或不编码序列。

它们可以转录,但在基因转录后,由这些间插序列转录的部分(也可用内含子这个术语表示)经加工被从初级转录本中准确除去,才产生有功能的RNA。

基因的编码部分称外显子。

内含子常比外显子长,且占基因的更大比例。

真核基因所含内含子的数目、位置和长度不尽相同,如鸡卵清蛋白基因的外显子被7个内含子隔开,鸡卵伴清蛋白基因有17个内含子,α-珠蛋白基因有2个内含子,卵粘蛋白基因有6个内含子等。

如何查询基因结构

如何查询基因结构

作为科研新手,菜鸟入门,研究一个目标基因怎么办?真核细胞基因结构包括4个部分:①编码区,包括外显子与内含子;②前导区,位于编码区上游,相当于RNA的5’末端非编码区(非翻译区);③尾部区,位于RNA的3’编码区下游,相当于末端非编码区(非翻译区);④调控区,包括启动子和增强子等。

真核细胞基因结构示意图调控区,编码区,到底是“什么鬼”?基因结构怎么查?今天,小编以人类的β-Actin基因为例,与大家分享一下NCBI数据库上的查询方法吧。

β-Actin是PCR常用的内参基因,β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数。

内参在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。

1.登录NCBI主页,选择Gene,输入基因以及对应的种属名并进行搜索:2.找到需要查询的目标基因,点击链接:在搜索结果中,找到Name/Gene ID为ACTB即为我们需要查询的目标基因!此外,还可以看到该基因对应的描述(Descxxxxription):actin beta [Homo sapiens (human)];基因位置(Location):位于7号染色体上5527148-553060bp处,序列号为NC_000007.14 ;别称(Aliases)有BRWS1,PS1TP5BP1等信息。

3.查询目标基因的信息点击ACTB的链接后,即可查询β-Actin基因的信息了!在这个界面下,包括总结(Summary)、该基因在基因组上下游的基因位置信息(Genomic context)、各组织器官的表达谱(exxxxxpression)和生物学功能(Bibliography)等等,信息十分齐全!4. 查询目标基因的基因结构重点来了!在Genomic regions transcxxxxripts and products项目栏里,即可直观的看到β-Actin 的基因结构。

从该图中可以看出,β-Actin基因包含6个编码区包喊了6个外显子和5个内含子。

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基因外显子与内含子的查找方法
基因的内含子和外显子的序列
在NCBI找到基因序列之后,要确定其内含子和外显子的序列是比较简单的。

如果是RefSeq 序列的话,那就更加容易了。

简单的思路就是跟基因组序列比对就行了。

% 用NCBI的Splign工具,详见:图解:如何在NCBI上找到HNF-4基因第4个外显子的序列。

% 但由于猪KIT(FJ938289)基因不是Refseq序列。

这就比较难了,由该序列的注释可知(/chromosome="8),该序列是属于第8号染色体。

% 所以先确定猪(Pig,Sus scrofa)的第8号染色体是否已经测完序了。

先在Taxonomy 数据库搜索,得到Taxonomy ID: 9823。

直接用关键词txid9823[Organism:noexp] 搜索Genome数据库。

猪有19条染色体,结果为11。

看图:
% 但其中并没有第8号染色体的。

所以要确定猪KIT(FJ938289)基因的内含子和外显子的序列,好像就不大可能了。

反正我是没办法了。

基因结构图
1,NCBI提供的Graphics工具
在NCBI搜索FJ938289之后,接下来用NCBI提供的Graphics工具来查看,就能知道基因的内含子和外显子的序列了(同时也是一个基因结构图哦)。

看图:。

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