氯霉素眼药水的高效液相色谱分析法.ppt
高效液相色谱法单波长切换测定复方氯霉素醇溶液中水杨酸、氯霉素的含量
[ A b s t r a c t ] Ob j e c t i v e T o e s t a b l i s h a h i g h p e r f o r ma n c e l i q u i d c h r o m a t o g r a p h y( HP L C)m e t h o d w i t h s i n g l e
wa v e l e n g t h s wi t c h i n g i n d e t e r mi n a t i o n o f c o n t e n t s o f s a l i c y l i c a c i d a n d c h l o r a mp h e n i c 0 l i n c o mp o u n d c h l o r a mp h e n i c 0 l a l —
[ 关键 词 】 复方氯霉素醇 ; 高 效 液 相色 谱 法 ; 单波长切换 ; 含量 测 定 [ 中国图书资料分类号] R 9 4 3 . 3 [ 文献 标 志 码 ] A [ 文章编 号] 2 0 9 5 - 1 4 0 X( 2 0 1 3 ) 0 8 - 0 0 8 8 - 0 3
B e i j i n g 1 0 0 7 0 0, C h i n a ; 4 . Me d i c a l C o r p , 7 3 0 8 9 T r o o p s ,X u z h o u , J i a n g s u 2 2 1 0 0 4 , C h i n a )
氯霉素眼药水的高效液相色谱分析PPT学习教案
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实验报告
1、实验目的 2、原理 3、步骤 4、数据处理 5、结果讨论
实验结束后原始报告单要签字。 同一组的同学交实验报告的时候放在一起,原始报告 单附在末尾。
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11
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常用的高效液相色谱仪
LC-15C
美国Agilent
美国Waters
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日本岛津
4.2.2 高效液相色谱主要部
(1) 泵输液系统
件
主要部件之一,压力:15~35MPa。提供高压流动相
应具有压力平稳,脉冲小,流量稳定可调,耐腐蚀等特性。
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(2) 进样装置
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氯霉素
外标一点法
样品 20uL
成份 A
眼药水稀 释液
峰面积A样品
色谱定量: 峰面积与样品浓度 成正比。
对照品 20ul
已峰面积A对照
A样品 A对照 C样品 C对照
条件:需要已知浓度的标准样品 待测成分与杂质间分离良好
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氯霉素含量的测定
流动相 固定相
固体(solid,S) 液体(liguid,L) 化学键合相 (bonded phase,BP)
气体 (gas,G)
GSC GLC
GBPC
液体
超临界流体
(推荐课件)常见眼药水知识PPT幻灯片
10
抗病毒类———更昔洛韦滴眼液
适应症:
广谱抗疱疹病毒药,单纯疱疹病毒性角膜炎。
注意事项:
禁忌:严重中性粒细胞减少或严重血小板减少的患者禁用。 贮藏:10℃以上密闭保存。
11
抗病毒类———更昔洛韦眼用凝胶
细菌性结膜炎、角膜炎、角膜溃疡、泪囊炎、术后感染等外眼感染。
注意事项:
本品不宜长期使用。使用中出现过敏症状,应立即停止使用。 当药品性状发生改变时禁止使用。 启用最多可使用4周。
4
抗生素类———加替沙星滴眼液
适应症:泪囊炎、结膜炎、角膜炎、角膜溃疡等症。 不良反应:偶有一过性的刺激症状。 禁忌:对加替沙星及其他喹诺酮类药物过敏者禁用,糖尿病患者禁用。
适应症:
单纯疱疹病毒性角膜炎。
注意事项:
不良反应:治疗中可能发生短暂的眼痒、灼热感,针刺感及轻微视 力模糊,但很快消失,不影响治疗。
禁忌症:同更昔洛韦滴眼液。 贮藏: 10℃以上密闭保存。打开药 管后其保存期不得超过4周。
12
抗病毒类———阿昔洛韦滴眼液
适应症:
抗病毒药。用于单纯疱疹性角膜炎。
以及青光眼滤过术后促进滤过泡形成等。
8
激素类———复方妥布霉素滴眼液(典舒)
适应症:
主要用于传染性结膜炎,可以减轻水肿和炎症, 同时也适用于慢性前葡萄膜炎、化学性、放射性、灼伤性及穿透性角 膜损伤及白内障等眼科手术后的炎症。
注意事项:
长期应用可引起眼压升高及白内障 。 戴接触镜者禁用本品,但角膜屈光术后暂时配戴治疗
性亲水软镜者除外。 开启后最多可使用4周。
液相色谱串联质谱法检测乳制品中氯霉素的方法研究
乙酸 乙酯对样 品进行提取 ,再对3 种 固相萃取柱净化效
( 以上实际均为色谱纯 ,科密欧 );超纯水。
果进 行 比较 ,最终 确 定 适合 奶 制 品中氯 霉 素测 定 的最 佳 1 . 2 色谱 务件
净化方式。该方法样品处理简单 、准确度高 ,在针对奶 粉、婴幼儿配方奶粉 、液态奶等奶制品中氯霉素的检测
固相 萃 取 仪 ;分 析 天 平 ;旋 转 蒸 发 仪 ;氮 吹 仪 ;碎 裂 电压 :1 2 5 V;氯 霉 素定 性 离 子对 :m/ z 3 2 1 / 2 5 7( 碰 撞 电压 5 V ),m/ z
国 9 卞 圈 t J 奶 A 斗 I 1 2 … 0 I 1 Y 3 ・ 1 A 0 N D S A F T g
口口 液相色谱 串联质 谱法检测乳制
口
厂 + 1
氯霉 素 的方法研 究
邢宇 ,郭丽娜 ,孙伟
( 黑龙江省质量监督检测研 究院,哈尔滨 1 5 0 0 5 0 )
中图分类号 :T S 2 5 2 . 7 文献标识码 :A 文章编号 :1 0 0 4 — 4 2 6 4( 2 0 1 3)1 0 — 0 0 4 6 — 0 3
摘
要 :本研 究建立 了液 态奶 、全脂奶粉 、婴 幼儿配方奶粉 中氯霉素 的液相 色谱 串联 质谱分析 法 ,采 用C1 8
分 离柱 ( 1 5 ( ) X 4 . 6 0 mm ×5 1 " 1 " 1 )、 乙腈 : 0 . 1 %甲酸 ( 3 5: 6 5 )作为 流动相 ,对不 同的提取 方式 、不 同的净化
效 果 良好 ,可 用于乳 制 品 中氯霉 素 的检验 。
液 相条 件 : 色 谱 柱 :分 离 柱 C1 8( 1 5 0×4 . 6 0 mm x 5 u m,
HPLC法测定氯霉素滴眼液中氯霉素及其氯霉素二醇物含量
药 品鉴 定 ・
2t 9 第 卷 2 0年 月 8 第6 1 期
H L 法测 定 氯霉 素 滴 眼液 中氯霉 素 PC 及 其 氯霉 素 二 醇 物 含 量
倪 晓 霞 . 绍 忠 郑
解放 军第 一七 五 医院 药剂 科 , 建漳 州 3 3 0 福 60 0 【 要】目的 : 立 反 相 高效 液 相 色 谱 ( L 法 测 定 氯 霉素 滴 眼液 中氯霉 素及 其 分 解 产物 氯 霉 素 二 醇物 含 量 的 方 摘 建 HP C) 法 。 法 : 用 E l s D — 1柱 ( m,. mx 5 方 采 ci eX B Cg 5I 46m l 0mm)流 动相 : p x ; 乙腈一 一 醋酸 (006 .:5 ; 水 冰 4 .:000 ) 流速 :. ml n; . 1 / 0 mi
基 一 ,一 13 丙二 醇 ( 简称 氯霉 素二 醇 物 )致 使 抗 菌 活 性 降 低 。 ,
2 1 版《 0 0年 中国药 典》 采用 HP C法 测定 氯霉 素含 量 , 方法 L 但 复杂 , 重现 性不 理 想 。笔 者 根据 文献 【— 】采 用 R — L 13, P HP C法
09 9 5 .Co cu in:T e meh d i g o n te a p c frs lto , e r d cbl y a d sn ivt.I s rc mme d d .9 1 n l so h t o s o d i h s e to e ou in r p o u i it n e st i i i y ti e o n e ta h t o a eu e od tr iet ec n e to lrmp e io n lc l n Choa h nc le edo s h ttemeh d c n b sd t ee n h o tn fChoa h nc la d gy osi lrmp e io y r p . m
氯霉素的药物分析PPT课件
● 本品分子中的硝基经锌粉还原成羟胺衍生物,在乙酸钠存在下 与苯甲酰氯进行苯甲酰化,再在弱酸性溶液中与高铁离子生成 紫红色的络合物。
例:ChP(2010) 取本品10mg,加稀乙醇1ml溶解后加1%氯化钙溶液 3ml与锌粉50mg置水浴上加热10分钟,倾取上清液,加苯甲酰
● 取氯霉素1ml,加氢氧化钠的乙醇溶液2ml, 再加硝酸2ml,加硝酸银3滴,生成白色沉 淀,沉淀加氨试液溶解,再加硝酸银5滴, 沉淀复生(氯离子的鉴别)。
分离度应符合要求,取对照品溶液顶空进样,计
算数次连续进样结果,相对标准偏差不得过 5.0%。取供试品溶液与对照溶液分别顶空进样, 记录色谱图,用标准加入法以峰面积计算,均应 符合规定。
四 含量测定
氯霉素的含量测定主要 用的是HPLC,除此之外还可 以用UV、TLC、LC/MS等方法
高效液相色谱
• 色谱条件
三 检查
• 结晶性
取本品少许,依法检查(附录IX D),应
符 合规定。
• 酸碱度
取本品,加水制成每1ml中含25mg的混悬
液,依法测定(附录 VI H),pH值应为4.5—7.5。
• 比旋度
取本品精密称定,加无水乙醇溶解并定
量稀释制成每1ml中约含50mg的溶液,依法测定(附
录 VI E),比旋度为+18.5◦至+21.5◦。
• 有关物质
目前各国药典均采用HPLC法检测 精密称取本品适量,加甲醇适量(每10mg氯霉素
加甲醇1ml)使溶解后,用流动相定量稀释制成每1ml 中含0.5mg的溶液,摇匀,作为供试品溶液;另精密 称取氯霉素二醇对照品与对硝基苯甲醛对照品适量, 加甲醇适量(每10mg氯霉素二醇物加甲醇1ml)使溶 解,用流动相定量稀释制成每1ml中含氯霉素二醇物 5µg与对硝基苯甲醛3µg的混合溶液,作为杂质对照品 溶液。
氯霉素眼药水的含量测定实验报告思考题
氯霉素眼药水的含量测定实验报告思考题【摘要】参考中国药典2010年版氯霉素滴眼液含量测定方法,对 HPLC梯度洗脱时间程序进行调整并进行方法验证,结果表明该方法分离度好、准确度高。
【关键词】氯霉素滴眼液;高效液相色谱法:含量1材料与方法1.1仪器液相色谱仪:SHIMADZU LC-20A;色谱工作站: Lcsolution:检测器:SPD-20A紫外检测器。
1.2试剂庚烷磺酸钠、磷酸二氢钾、三乙胺、磷酸等均为分析纯:甲醇为色谱纯:氯霉素对照品(批号:130555-200602)、氯霉素二醇物对照品(批号:130436-200704)、对硝基苯甲醛对照品(批号:130562-200902)、羟苯乙酯对照品(批号:100847-200501)均由中国药品生物制品检定所提供;氯霉素滴眼液由本公司车间提供。
1.3色谱条件色谱柱:SHIMADZUvP-ODs ( 250mm*4.6mm. 5um):流动相A: 0.01molL庚烷磺酸钠缓冲溶液(取磷酸二氢钾6.8g,用0.0lmolL庚烷磺酸钠溶液溶解并稀释至1000ml,再加三乙胺 5ml,混匀,用磷酸调节pH值至2.5),流动相B为甲醉;检测波长为277nm,按下表进行线性洗脱。
结果2.1专属性试验取除氯霉素外的其他各辅料,按处方比例称取,加水溶解后摇匀,作为空白溶液,按“1.6”项下方法制备空白供试品溶液,进样20pul,结果表明:辅料对氯霉素含量测得无干扰。
2.2线性关系考察精密称取25.0mg氯霉素对照品置50ml量瓶中,加流动相A-B(62:38)浴解并稀释至刻度,摇匀,作为对照储备液,精密量取0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml、1.4ml对照储备液至10ml量瓶中,用上述流动相稀释至刻度,摇匀,各精密量取20ul,注入液相色谱仪,记录色谱图。
以峰面积积分值(Y)与进样浓度(X: ugml)进行线性回归,回归方程为Y-50356.91X-9470.5,r-0.9998 (n-5)。
氯霉素眼药水的高效液相色谱分析
通过高效液相色谱分析,可 以建立氯霉素眼药水产品的 质量标准和控制方法,为产 品的注册和上市提供科学依 据和技术支持。
THANKS
感谢观看
氯霉素眼药水一般采用滴眼的方式给药,使用时需遵医嘱,避免长期使用或滥用 ,以免产生耐药性和副作用。
高效液相色谱分析简介
高效液相色谱分析是一种常用的分离和检测方法,具有分离效果好、灵敏度高、应用范围广等优点。 它通过高压泵将不同成分的混合物注入色谱柱,利用不同成分在固定相和流动相之间的分配系数差异 进行分离,再通过检测器进行检测和定量分析。
氯霉素眼药水的高效液相 色谱分析
• 引言 • 氯霉素眼药水的制备 • 高效液相色谱分析方法 • 氯霉素眼药水的HPLC图谱分析 • 结果与讨论 • 结论
01
引言
氯霉素眼药水简介
氯霉素眼、 角膜炎等。氯霉素具有抗菌谱广、作用强等特点,对于革兰氏阳性菌和革兰氏阴 性菌都有较好的抑制作用。
回收率和线性范围
通过添加不同浓度的氯霉素标准品到 氯霉素眼药水中,可以测定方法的回 收率和线性范围,从而评估该方法在 实际应用中的适用性和可靠性。
与其他方法的比较
与微生物学方法的比较
将高效液相色谱法与微生物学方法进行比较,可以评估两种方法在测定氯霉素眼药水中的氯霉素含量时的准确性 和可靠性。
与其他色谱方法的比较
通过不断优化制备工艺,可以提高氯霉素眼药水的生产效率和产品质量, 降低生产成本,提升市场竞争力。
对质量控制的意义
高效液相色谱分析为氯霉素 眼药水提供了有效的质量控 制手段,可以确保产品的质
量和安全性。
分析结果可以用于监控生产 过程中的质量控制情况,及 时发现并解决潜在的质量问 题,保证产品的稳定性和可
氯霉素眼药水的高效液相色谱分析法.ppt
AR
甲醇
GR
氯霉素眼药水
普通市售
用量 200 mg 100 mg 适量
1支
三实验原理
1. 内标法 其方法是精密称取一定量的样品和内标物,制成适当溶液后进样分析,根据样品和
内标物的重量及其相应的峰面积(或峰高),求出某组分的含量。原理如下: 根据物质的重量与其峰面积(或峰高)成正比,有
在绝对校正因子法( )中:
在相对校正因子( )法中:
当峰形对称,峰窄时还可以用峰高代替峰面积来定量。 内标法可以消除仪器与操作或制备样本时带来的误差。
三 实验原理
2. 外标法 又称校正法或定量进样法。该法要求能准确地定量进样。其方法
是配制一系列已知浓度的标准液,在同一操作条件下,取相同量注入 色谱仪,测量其峰面积(或峰高),作峰面积(或峰高)与浓度的标准曲 线。然后在相同条件下,注入同量样品溶液,测量待测组分的峰面积( 或峰高),根据标准曲线,计算样品中待测组分的浓度。
分别吸取氯霉素标准贮备液1、2、3、4、5 mL,置5个l0 mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,各进样20 μL,以峰面 积或峰高对浓度作图,得标准曲线。
三 操作方法
(四) 外标法测定氯霉素的含量 2. 样品的测定
精密吸取眼药水适量(约相当于氯霉素2.5 mg),置l0 mL容量瓶中,用 甲醇稀释至刻度,摇匀,进样20 μL,得色谱图,根据峰面积或峰高从标准
氯霉素眼药水 高效液相色谱分析法
课程:药品检验技术
一 实验目的
1.学习掌握内标法测定组分含量的原理与操作方法; 2.熟悉外标法在测定组分的含量中的应用; 3.学习高效液相色谱仪的结构及正确使用方法; 4.了解氯霉素眼药水的含量测定方法。
二仪器与试药
超高效液相色谱法-串联质谱法测定牛奶中的氯霉素残留
摘
要: 应用超 高效液相 色谱 一串联 质谱 法建立 了牛 奶 中的 氯霉素 的检 测方 法。样 品经 乙酸 乙酯提取后 , 用正 已烷
除脂 , C 8固相 萃取 小柱 富集纯化后 , C 8反 相柱 为分析柱 , 经 1 以 1 乙腈 一 . mm lL乙酸铵溶 液为流 动相 , 05 o / 采用 电喷 雾 负电离源( S 一) 多反应监测模式( R , EI , S M) 用内标法 定量检 测。该方 法提 高 了检 测灵敏性 和分析 结果的 可靠性 ,
能 够适 应 大规 模 样 品 的分 析 要 求。
关键词 : 高效液相 色谱 一串联质谱 ; 超 氯霉素 ; 残留
中 图分 类号 0 4 66 文献 标 识 码 A 文 章 编 号 10 7 3 (0 2 l 07— 7 1 2 l )9…15 O 7 2
De e m i a i n o l r mp e io s u s i i y UILC —M s M S t r n to f Ch o a h n c lRe i e M l b . d n k /
W u Xuan e 1 t a.
( hnqn nm l i aeC n o etr C ogig 0 0, In ) C og i A ia Ds s ot l ne, h nqn 12 Cl a g e r C 4 1 i
Ab ta t A to o e d t mf ain o h o a h nc l n mi a e e o e y Ul aP r ma n e“ql r mao — s r c : meh d frt e e i t f l rmp e io l w sd v l p d b t e f a c h n o c i k r o l d Ch o tg i
氯霉素滴眼液的稳定性研究
•药剂.氯霉素滴眼液的稳定性研究阮艺静鲁方圆谢峻2,韩晓东3,汪强姜泽慧14(1-马鞍山市食品药品检验中心,安徽马鞍山243302;2.马鞍山市师范高等专科学校食品工程系,安徽马鞍山233300;.内蒙古自治区植物逆境生理与分子生物学重点实验室,内蒙古呼和浩特010018)摘要:目的研究氯霉素滴眼液稳定性的影响因素。
方法设置不同的光照时间、温度和氧化剂浓度,对氯霉素滴眼液进行处理后按法定方法检测。
结果光照使氯霉素含量下降,对硝基苯甲醛含量升高,pH值下降,溶液颜色改变;温度升高使氯霉素含量下降,氯霉素二醇物含量升高;过氧化氢溶液使氯霉素含量下降。
结论光照、高温及氧化均会使氯霉素滴眼液含量下降,有关物质改变。
关键词:氯霉素滴眼液;稳定性;高效液相色谱法中图分类号:R94文献标识码:A文章编号:1006-3765(2021)-00-0000-04Research on Stability of Chloramphenicol Eye DropsRUAN Yi-jing1,LU Fang-yuan1,XIE Jun2,HAN Xico-dong3,WANG Qicng1,JIANG Ze-hul1*(0Ma'anshan Food and Drag Aspectlon CenteaMa'anshan233300,Chlna;2.Department of Food Engineeclng,Ma'ans-han Teacher's College,Ma'anshan243000,China;3.I nner Mongolic Key Laboratoc of Plont Stress PhysC ology and Moloculot Biology,Hohhot010010,China)ABSTRACT:OBJECTIVE To study factora affectina thu stdbility of caioramppeuicol eyu daps.METHODS Stirs staniarn methoPs were rseU to evalraic cOlorampPeuicol eyu yaps aftun beina treuteU with differeui light time, temperatrra ani oxiCaat coaceutatioa.RESULTS Sanlight decreuseU thu couteut of cOlorampPeuicol and pH,ia・creuseU thu cooteut of nitroUeuzaldeUyUe ant cOanaeU thu coloa of solutioa.Thu cooteut of caloramppeuicol decreuseU ant thu couteut of cOloramppeuicol glycol iacreuseU with thu incadso of temperatnrUi Thu couteut of cOloramppeuicol decreuseU with UyUrooeu peroxine solution.CONCLUSION Snnlight,Uigh temperatnre ant oxicatioo lean I o thu droppini of couteut of cOloramppeuicol ant cOanae relateU sunstaaceSlKEY WORDS:Chlorampheaicci Eye Droos;Stanility;HPLC氯霉素滴眼液为眼用处方药,主要用于治疗由大肠杆菌、流感嗜血杆菌、克雷伯菌属、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和其他敏感菌所致眼部感染,比如沙眼、结膜炎、角膜炎、眼睑缘炎等。
高效液相色谱法测定氯霉素滴眼液的含量
高效液相色谱法测定氯霉素滴眼液的含量氯霉素滴眼液是一种常见的眼科用药,主要用于治疗由敏感细菌引起的眼部感染。
为了确保其质量和疗效,准确测定氯霉素滴眼液中氯霉素的含量至关重要。
高效液相色谱法(HPLC)作为一种高效、准确、灵敏的分析方法,在药物含量测定中得到了广泛的应用。
一、氯霉素滴眼液简介氯霉素滴眼液中的氯霉素是一种广谱抗生素,对多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有抑制作用。
然而,氯霉素的使用需要严格控制剂量,因为过量使用可能会导致一些不良反应,如骨髓抑制等。
因此,准确测定氯霉素滴眼液中氯霉素的含量对于保障药物的安全性和有效性具有重要意义。
二、高效液相色谱法的原理和优势高效液相色谱法是在经典液相色谱法的基础上发展起来的一种色谱分析技术。
它基于混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同,从而实现分离。
与其他分析方法相比,高效液相色谱法具有许多优势。
首先,它具有很高的分离效率,能够在短时间内将复杂混合物中的各组分分离出来。
其次,它的灵敏度高,可以检测到微量的物质。
此外,该方法的重复性好,准确度高,适用于各种类型的化合物分析。
三、实验部分(一)仪器与试剂1、高效液相色谱仪:配备紫外检测器、输液泵、进样器等。
2、色谱柱:选用适合氯霉素分离的反相色谱柱。
3、试剂:氯霉素标准品、甲醇(色谱纯)、水(超纯水)等。
(二)色谱条件1、流动相:通常采用甲醇水或乙腈水的混合溶液,通过优化比例以获得最佳分离效果。
2、流速:根据色谱柱的规格和实验要求,设定合适的流速。
3、检测波长:根据氯霉素的紫外吸收特性,选择合适的检测波长。
(三)标准溶液的制备精密称取适量的氯霉素标准品,用流动相溶解并定容,配制成一系列不同浓度的标准溶液。
(四)样品溶液的制备准确吸取一定量的氯霉素滴眼液,用流动相稀释至适当浓度。
(五)进样与测定将标准溶液和样品溶液分别注入高效液相色谱仪,记录色谱图。
根据标准溶液的浓度和峰面积,绘制标准曲线。
通过样品溶液的峰面积,在标准曲线上查得样品中氯霉素的浓度,并计算其含量。
氯霉素方法
附件3消毒产品中氯霉素(chloromycetin )测定-液相色谱-串联质谱法Method for determination of chloromycetinin disinfestion product-LC-MS-MS method1 范围本方法规定了膏霜类消毒产品中氯霉素残留量液相色谱-串联质谱测定方法。
本方法适用于膏霜类消毒产品中氯霉素残留量的测定。
取样量为0.2g时,本方法氯霉素的检出限0.03mg/kg。
2 规范性引用文件3 原理试样中氯霉素用甲醇提取,提取液经0.45μm滤膜过滤,用C8柱分离后,用液相色谱-串联质谱仪测定,负离子扫描,离子对定性,峰面积定量。
4 试剂和材料除另有说明外,所用试剂均为分析纯,水为不含有机物的纯水,纯水中干扰物的浓度需低于方法中待测物的检出限。
4.1甲醇:农药残留级。
4.2标准品:氯霉素标准品购自北京利科生化科贸有限公司,纯度≥99%。
4.3标准溶液:准确称取适量的氯霉素标准品,用甲醇(4.1)配制成10.0mg/mL 标准贮备溶液。
准确量取上述标准贮备溶液适量,用甲醇稀释配制成浓度为500µg/mL的标准中间溶液,将标准中间溶液转移到安瓿瓶中于4 C保存。
临用前,再根据需要用甲醇配制成不同浓度的标准使用溶液。
4.3 0.45μm滤膜。
5 仪器5.1 液相色谱一串联质谱联用仪:HP1100高效液相色谱仪(Agilent) - API 4000质谱仪(Applied Biosystems) ,电喷雾离子化源(ESIMS,NI/PI模式)。
5.2 分析天平:感量0.1mg和0.001g。
5.3实验室纯水机:Barnstead纯水机。
5.4涡旋振荡器:Scientific Industries 涡流振荡器。
5.5 具塞试管:10mL。
6 试样的制备与保存6.1 试样的制备取有代表性样品5g,搅拌均匀,制成实验室样品。
6.2 试样保存制备好的试样置于室温保存。
氯霉素及分析方法
氯霉素及分析方法氯霉素(Chloramphenicol)是一种广谱抗生素,对多种细菌有抑制作用。
它属于静菌抑制剂,能够使细菌停止生长和繁殖,从而起到杀菌的作用。
氯霉素主要用于治疗感染性疾病,如肺炎、泌尿系统感染等。
然而,由于其潜在的副作用和耐药性问题,目前在许多国家已经不再作为一线药物使用。
氯霉素的化学结构为4-(4-氨丁氧基)-2-二氯乙酰氨基苯酚,其分子式为C11H12Cl2N2O5,结构如下所示:ClClH3C—CH2—C—CH2—C—CH2—N(CH2)2—OH氯霉素分析方法主要包括物理化学法和生化法两大类。
物理化学方法主要包括高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、红外光谱法(IR)等。
其中HPLC是一种常用的分离和定量氯霉素的方法。
该方法利用样品中氯霉素与固定相发生相互作用,通过控制流动相以及柱温等参数的变化,通过检测吸收峰的强度或峰面积,可以定量测定样品中的氯霉素浓度。
相比其他方法,HPLC方法具有操作简便、准确度高、灵敏度高的优点。
气相色谱法(GC)可以通过样品中氯霉素的升华或蒸发,使其从液相转移到气相进行分析。
通过不同的柱温和流动相的条件,可以分离和测定氯霉素的含量。
GC方法在氯霉素的分析中灵敏度较高,但需要样品预处理和分离,操作要求较高。
红外光谱法(IR)可以通过测量样品吸收红外光的能力,分析样品中的氯霉素含量。
该方法由于无需溶解或其他复杂的样品处理步骤,因此操作简单、快速,但灵敏度相对较低。
生化方法主要是基于氯霉素在生物体内所存在的特殊生物学活性。
其中包括聚合酶链式反应(PCR)、免疫荧光法、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。
聚合酶链式反应(PCR)是一种在体外扩增DNA片段的方法,通过特定引物选择性扩增目标DNA序列,包括携带了氯霉素耐药基因的细菌等。
该方法特异度高、灵敏度高,但需要特定实验条件和较长时间。
免疫荧光法是一种利用荧光染料标记的抗氯霉素抗体识别和检测氯霉素的方法。
高效液相色谱法测定甲硝唑氯霉素栓中两种成分的含量
21 0 2年 6月 第 9卷 第 1 6期
药 品检验 ・
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性 方 程 : 硝 唑 : = 2 7 X一1 9 ( 09 9 1 , 明 甲 甲 y 67 4 6 5 8 r= .9 ) 表
硝 唑 在 4 .8 2 56 gmL浓 度 范 围 内具 有 良好 的 线 性 关 92 ~ 9 .8 /
・
药品检验 ・
22 6第 卷 l 0年 月 9第6 1 删
高效液相色谱法测定甲硝唑氯霉素栓 中两种成分的
含量
罗 飞 贺 美 渡 罗巧 林
川北 医学 院附属 医 院药 剂科 , 四川 南充
6 70 300
【 要】 摘 目的 建立高效液相 色谱法测定 甲硝唑氯霉素栓 中两种 主成分 含量的方法。 方法 采用 H pr l D 柱 ( 0 i yes S 1 .m X iO 50 n
适 量 , 声 溶 解 , 流 动 相 稀 释 至 刻 度 ; 用 滤 纸 滤 过 , 液 超 用 先 滤
实验 旨在 建 立高 效 液相 色 谱 法 同时 测 定栓 剂 中两种 成分 的
含 量
1仪器 与试药
岛津 L 一 0 C 1 A高 效 液 相 色谱 仪 , u 1 0 T 一 9 1紫外 可 见分 光 光 度计 , P 1D赛 多利 斯 电子 天平 。 甲硝 唑对 照 品 ( 国药 B 21 巾
氯霉素的药物分析
● 本品分子中的硝基经锌粉还原成羟胺衍生物,在乙酸钠存在下 与苯甲酰氯进行苯甲酰化,再在弱酸性溶液中与高铁离子生成 紫红色的络合物。
例:ChP(2010) 取本品10mg,加稀乙醇1ml溶解后加1%氯化钙溶液 3ml与锌粉50mg置水浴上加热10分钟,倾取上清液,加苯甲酰
● 取氯霉素1ml,加氢氧化钠的乙醇溶液2ml, 再加硝酸2ml,加硝酸银3滴,生成白色沉 淀,沉淀加氨试液溶解,再加硝酸银5滴, 沉淀复生(氯离子的鉴别)。
• 残留溶剂 乙醇与氯苯 取本品0.5g,精密
称定,置10ml量瓶中,加二甲基亚砜溶解并稀释 至刻度,摇匀,作为供试品贮备液,精密量取2ml 置顶空瓶中,再精密加二甲基亚砜1ml,摇匀,作 为供试品溶液;精密称取氯苯约36mg、乙醇约 500mg,置100ml量瓶中,加二甲基亚砜稀释至刻
度,摇匀,作为对照品贮备液;精密量取对照品 贮备液1ml置顶空瓶中,再精密加二甲基亚砜2ml,
分离度应符合要求,取对照品溶液顶空进样,计
算数次连续进样结果,相对标准偏差不得过 5.0%。取供试品溶液与对照溶液分别顶空进样, 记录色谱图,用标准加入法以峰面积计算,均应 符合规定。
四 含量测定
氯霉素的含量测定主要 用的是HPLC,除此之外还可 以用UV、TLC、LC/MS等方法
高效液相色谱
• 色谱条件
填充剂:十八烷基硅烷键合硅胶 流动相:0.01mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液(磷酸 二氢钾6.8g 0.01mol/L庚烷磺酸钠溶液溶解并稀 释,加三乙胺5ml,磷酸调节pH值至2.5) 检测波长:277nm 对照品:氯霉素
• 测定法
精密称取本品适量,加甲醇适量(每10mg氯 霉素加甲醇1ml)使溶解,用流动相定量稀释制成 每1ml中约含0.1mg的溶液,摇匀,精密量取10µl 注入液相色谱仪,记录色谱图;另外再精密称取 氯霉素对照品适量,同法测定。按外标法以峰面 积计算,即得。
氯霉素方法
附件3消毒产品中氯霉素(Chloromycetin )测定-液相色谱-串联质谱法Method for determ in ati on of chloromycet inin dis in festi on product-LC-MS-MS method1范围本方法规定了膏霜类消毒产品中氯霉素残留量液相色谱-串联质谱测定方法本方法适用于膏霜类消毒产品中氯霉素残留量的测定。
取样量为0.2g时,本方法氯霉素的检出限0.03mg/kg。
2规范性引用文件3原理试样中氯霉素用甲醇提取,提取液经0.45 yrn滤膜过滤,用C8柱分离后,用液相色谱-串联质谱仪测定,负离子扫描,离子对定性,峰面积定量。
4试剂和材料除另有说明外,所用试剂均为分析纯,水为不含有机物的纯水,纯水中干扰物的浓度需低于方法中待测物的检出限。
4.1甲醇:农药残留级。
4.2标准品:氯霉素标准品购自北京利科生化科贸有限公司,纯度》99%。
4.3标准溶液:准确称取适量的氯霉素标准品,用甲醇( 4.1)配制成10.0mg/mL标准贮备溶液。
准确量取上述标准贮备溶液适量,用甲醇稀释配制成浓度为500 pg/mL的标准中间溶液,将标准中间溶液转移到安瓿瓶中于4C保存。
临用前,再根据需要用甲醇配制成不同浓度的标准使用溶液。
4.3 0.45 p m 滤膜。
5 仪器5.1液相色谱一串联质谱联用仪:HP1100高效液相色谱仪(Agilent) - API 4000质谱仪(Applied Biosystems),电喷雾离子化源(ESIMS , NI/PI 模式)。
5.2分析天平:感量0.1mg和0.001g。
5.3实验室纯水机:Barnstead纯水机。
5.4涡旋振荡器:Scientific Industries 涡流振荡器。
5.5 具塞试管:10mL。
6 试样的制备与保存6.1 试样的制备取有代表性样品5g,搅拌均匀,制成实验室样品6.2 试样保存制备好的试样置于室温保存。
氯霉素方法
附件3消毒产品中氯霉素(chloromycetin )测定-液相色谱-串联质谱法Method for determination of chloromycetinin disinfestion product-LC-MS-MS method1 范围本方法规定了膏霜类消毒产品中氯霉素残留量液相色谱-串联质谱测定方法。
本方法适用于膏霜类消毒产品中氯霉素残留量的测定。
取样量为0.2g时,本方法氯霉素的检出限0.03mg/kg。
2 规范性引用文件3 原理试样中氯霉素用甲醇提取,提取液经0.45μm滤膜过滤,用C8柱分离后,用液相色谱-串联质谱仪测定,负离子扫描,离子对定性,峰面积定量。
4 试剂和材料除另有说明外,所用试剂均为分析纯,水为不含有机物的纯水,纯水中干扰物的浓度需低于方法中待测物的检出限。
4.1甲醇:农药残留级。
4.2标准品:氯霉素标准品购自北京利科生化科贸有限公司,纯度≥99%。
4.3标准溶液:准确称取适量的氯霉素标准品,用甲醇(4.1)配制成10.0mg/mL 标准贮备溶液。
准确量取上述标准贮备溶液适量,用甲醇稀释配制成浓度为500µg/mL的标准中间溶液,将标准中间溶液转移到安瓿瓶中于4 C保存。
临用前,再根据需要用甲醇配制成不同浓度的标准使用溶液。
4.3 0.45μm滤膜。
5 仪器5.1 液相色谱一串联质谱联用仪:HP1100高效液相色谱仪(Agilent) - API 4000质谱仪(Applied Biosystems) ,电喷雾离子化源(ESIMS,NI/PI模式)。
5.2 分析天平:感量0.1mg和0.001g。
5.3实验室纯水机:Barnstead纯水机。
5.4涡旋振荡器:Scientific Industries 涡流振荡器。
5.5 具塞试管:10mL。
6 试样的制备与保存6.1 试样的制备取有代表性样品5g,搅拌均匀,制成实验室样品。
6.2 试样保存制备好的试样置于室温保存。
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三 操作方法
(三) 内标法测定氯霉素的含量
2. 样品含量测定 精密吸取眼药水适量 (约相当于氯霉素500 mg,标示量为2.5 mg/ mL),
置l0 mL容量瓶中,并加入对硝基苯酚的贮备液2.5 mL,用甲醇稀释至刻度, 摇匀,进样20 μL,得色谱图。按下式计算标示量的百分含量
三 操作方法
(四) 外标法测定氯霉素的含量 1. 标准曲线的绘制
原料名称
规格
对硝基苯酚
AR
氯霉素
AR
甲醇
GR
氯霉素眼药水
普通市售
用量 200 mg 100 mg 适量
1支
三实验原理
1. 内标法 其方法是精密称取一定量的样品和内标物,制成适当溶液后进样分析,根据样品和
内标物的重量及其相应的峰面积(或峰高),求出某组分的含量。原理如下: 根据物质的重量与其峰面积(或峰高)成正比,有
分别吸取氯霉素标准贮备液1、2、3、4、5 mL,置5个l0 mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,各进样20 μL,以峰面 积或峰高对浓度作图,得标准曲线。
三 操作方法
(四) 外标法测定氯霉素的含量 2. 样品的测定
精密吸取眼药水适量(约相当于氯霉素2.5 mg),置l0 mL容量瓶中,用 甲醇稀释至刻度,摇匀,进样20 μL,得色谱图,根据峰面积或峰高从标准
四 操作方法
(一)实验条件 色谱仪 高效液相色谱仪 色谱柱 反相C18柱 温度 室温 流动相 内标法 甲醇: 水(60: 40)
外标法 甲醇: 水(80: 20) 流速 0.7 mL/min 检测器 UV检测器
三 操作方法
(二)标准贮备液的制备 1. 1mg / mL氯霉素标准贮备液的配制
精密称取氯霉素约100 mg置100 mL容量瓶中,以甲醇溶解,并稀释至刻 度,摇匀,即得。 2. 2mg/ mL对硝基苯酚 (内标)标准贮备液的配制
在绝对校正因子法( )中:
在相对校正因子( )法中:
当峰形对称,峰窄时还可以用峰高代替峰面积来定量。 内标法可以消除仪器与操作或制备样本时带来的误差。
三 实验原理
2. 外标法 又称校正法或定量进样法。该法要求能准确地定量进样。其方法
是配制一系列已知浓度的标准液,在同一操作条件下,取相同量注入 色谱仪,测量其峰面积(或峰高),作峰面积(或峰高)与浓度的标准曲 线。然后在相同条件下,注入同量样品溶液,测量待测组分的峰面积( 或峰高),根据标准曲线,计算样品中待测组分的浓度。
曲线上查得相应的浓度,并计算标示量的百分含量。
四 注意事项
1. HPLC使用的流动相必须经滤膜过滤及脱气处理。 2. 严格防止气泡进入色谱系统。 3. 色谱分析完成后,必须马上清洗柱子。本实验的流动相中含有醋酸盐缓冲液, 故测定完毕后,要先用水冲洗柱子至基线平稳(约0~60min以上),再用含水的 甲醇溶液或纯甲醇溶液冲洗30~60min。 4. 标准贮备液的配制应精密称定重量,先用少量甲醇溶解后,再用甲醇稀释至刻 度,否则因部分未溶导致浓度不准确。
五 思考题
1. 怎样选择流动相? 2. 内标物应具备哪些条件? 3. 变换溶剂时,直接将一种互不相溶的溶剂替换前一种溶剂,对色谱行为有 何影响?如何消除这种影响?
谢 谢!
氯霉素眼药水 高效液相色谱分析法
课程:药品检验技术
一 实验目的
1.学习掌握内标法测定组分含量的原理与操作方法; 2.熟悉外标法在测定组分的含量中的应用; 3.学习高效液相色谱仪的结构及正确使用方法; 4.了解氯霉素眼药水的含量测定方法。
二仪器与试药
1.仪器
容量瓶,移液管,高效液相色谱仪。
2. 试药
精密称取对硝基苯酚约200mg置l00 mL量ห้องสมุดไป่ตู้中,以甲醇溶解,并稀释至 刻度,摇匀,即得。
三 操作方法
(三) 内标法测定氯霉素的含量 1. 相对校正因子的测定
分别精密加入氯霉素标准贮备液1,2,3,4,5 mL,置5个l0 mL容量 瓶中,再分别精密吸取对硝基苯酚标准贮备液各2.5 mL用甲醇稀释至刻度, 摇匀。待色谱仪基线平稳后,分别进样20 μL,得色谱图。测量对硝基苯酚 及氯霉素峰面积或峰高,按公式计算相对校正因子,本实验中,由于峰形较 窄,可采用峰高法。