疫苗悬浮培养工艺技术和反应器生产线(武汉)
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• • • • 培养方式的选择：批培养、灌流培养、流加培养 生化环境的优化：温度、pH值、 DO溶氧、渗透压、CO2等。 放大技术：全悬浮放大和微载体放大。 基于反应器培养工艺特点的个性化细胞培养基设计和应用： 生长培养基、维持培养基、流加培养基…… • 培养基流加策略：流加速率 • 代谢控制：减少细胞代谢副产物，提高产量。
反应器功能
液位控制功能
– 使用反应器进行灌流培养时，为保持培养体积的恒定，需 控制反应器培养的液位，可使用液位电极或称重模块来实 现。
称重控制优势
– 任意更改培养控制体积，具有更大灵活性。 – 精确检测及控制培养过程中的物料补充。 – 并具有底搅拌电机重量保护功能，当液位低于重量保护设 定值时，底搅拌电机不被开启。
生物反应器应用的发展—国外
生物反应器应用—国内
辽 宁 成 大 金宇保灵 广 州 诺 诚
生物反应器的结构(搅拌式）
罐体 支架管路 控制器
反应器主要功能（搅拌式）
• 清洁功能、无菌性（蒸汽灭菌）及密封性 • 搅拌控制功能 • 温度控制功能
• pH控制功能
• 溶氧（DO）控制功能 • 液位控制功能 • 细胞截留功能………
国外生物制药生产
• 随着流加培养、灌注培养、个性化细胞培养基等动物细胞培 养技术的发展，生物反应器的细胞培养规模也趋向大型化。
–2000年以后，全球生产型动物细胞培养反应器的总规模已超过 200万升，几乎都是机械搅拌式反应器；随着细胞培养基技术 的发展，不再使用不能放大的反应器。 –预计2011年全球生物制药行业的生物反应器使用率将达到 85%。
悬浮培养工艺
• 细胞贴壁与否？可否驯化？可改造否？
– 细胞全悬浮培养（CHO、BHK、杂交瘤细胞等）
– 细胞微载体悬浮培养（VERO、ST、Marc145、MDCK）
BHK21细胞
ST细胞
几种悬浮培养工艺（即生物反应器操作方式）
– 批培养 – 流加（补料）培养 – 灌流培养
灌流培养
流加（补料）培养 批培养
1、工艺接口标准化 2、配件提供的速度 零部件的维修及更换时的期限；例如使用进口反应器， 可能出现维修及零部件更换时间较长等。 3、售后服务 –售后服务响应时间； –维修配件订货周期； –售后产品装置、调试及操作培训； –产品保修期内的维修；
第三部分
悬浮培养工艺过程技术
悬浮培养技术应用的过程技术 目标：提高细胞密度和单位细胞比生产效率，延长高 密度细胞的培养周期，从而提高生物反应器的生产 效率。 过程发展技术：
感、生产线的稳定性及连续性等。
生物反应器的选择 • 满足所生产疫苗品种特征、产能的需求
–反应器规模、放大配置、生产线数量、场地条件
• 满足动物细胞培养和病毒培养工艺的具体要求
–搅拌浆叶、旋转过滤器等细胞截流装置配件的设计和 选择
–与所需要培养的细胞工艺相匹配
生物反应器的选择 • 标准化、配件提供及售后服务
对细胞培养效果的影响
– 接种细胞以及更换培养液等过程需要快速 升温； – 温度稳定性影响细胞生长。
夹套 蒸汽加热 电加热 增压泵 双温度探头
反应器功能
pH控制功能 – 使用pH电极进行检测，由控制程序自动控制酸、碱液的加 入，实现pH控制
对细胞培养效果的影响 – 信号响应延时和控制灵敏性影响pH控制稳定性 – pH电极和控制器质量影响控制效果，引起控制偏差
pH电极 pH控制器 酸碱蠕动泵
反应器功能
溶氧控制功能 – 使用溶氧电极进行检测，由控制程序自动控制各种气体的加入，
实现溶氧的控制。
对细胞培养效果的影响
– 信号响应延时和控制灵敏性影响溶氧控制稳定性 – 溶氧电极和控制器质量影响控制效果，引起控制偏差
溶氧电极 气体流量计������ 电磁阀 气动隔膜阀������ 气体过滤器 微泡分布器
清洁功能、蒸汽灭菌及密封性 • 清洁功能：罐内壁和零部件材质要求，设计无死角 • 密封性 • 在线蒸汽灭菌
支撑管路（水、电、气） 加热系统 气体系统
蒸汽系统
反应器功能
搅拌控制功能
搅拌组件分为顶部机械搅拌和底部磁力 搅拌，底部磁力搅拌的搅拌叶轮与反应器 形成一定夹角，带动料液转动产生涡流， 实现料液充分混合。搅拌电机采用无级变 速，运行平稳。
对细胞培养效果的影响
– 均匀搅拌以使培养液充分混合，保障营养 供给并提高氧传递效果；
– 由于动物细胞对搅拌剪切力敏感，应充分 降低搅拌剪切力；
– 机械搅拌轴应良好密封，避免污染发生。
反应器功能
温度控制功能
– 采用夹套进行温度控制，反应器温度由温 度电极进行检测，夹套的加热或冷却，由 控制程序自动控制。
• 困难
– 较高的技术门槛，缺乏支撑技术。 – 对悬浮培养技术、包括产业化知识了解不足，技术人才缺乏。 – 基本都是转瓶生产的老厂ຫໍສະໝຸດ Baidu需要车间技术改造，一次性资金投入大。
GMP车间运行的疫苗悬浮生产线
动物细胞培养反应器生产线＋疫苗悬浮生产工艺过程技术
1、动物细胞培养反应器生产线－硬件基础 2、疫苗悬浮工艺技术（PROCESS DEVELOPMENT）－软件基础
• 国内人用和兽用疫苗生产企业超过100家，目前应用反应器悬 浮培养技术生产疫苗的仅4家。
–超过95%的疫苗企业生产仍然采用批量小、效率低、劳动 强度大、占用场地多的转瓶机。
–细胞培养基是50年代开发的MEM、DMEM、199、PRMI1640等 基础培养基，血清添加比例10％左右，细胞生产效率低。 • 治疗性抗体研发和生产处于起步阶段，多数采用进口无血清 培养基和生物反应器。
优点：
用于悬浮细胞与微载体贴壁细胞培养 提供均质环境 培养工艺容易放大 产品质量稳定、非常适合工厂化生产
– – – –
缺点：
– 搅拌产生的剪切力
生物反应器分类—根据反应器的几何特征
气升式生物反应器 【Airlift bioreactor 】：
通过气体上升作用带动细胞和养分在培 养液中均匀分布，常分为内循环式、外循环 式、内外循环式。主要用于一些单抗生产。
优点：
–均质的培养环境 –剪切力小 –容易放大
缺点：
–气体上升对动物细胞的损伤大 –泡沫问题严重
生物反应器分类—根据反应器的几何特征 填充床生物反应器
【packed bed】 ：
填充一定材质的填充物，细胞 截留在填充物中生长。固定床和流 化床等。
优点：
–高细胞密度和产率
缺点：
–培养环境不均质 –规模较难放大 –细胞难以计数
主流的悬浮培养生产工艺—发展方向
当前被FDA批准的生物技术产品（重组蛋白和抗体 为主）和公开发表的主流生产工艺
我国悬浮培养的应用
• 人用疫苗： 采用生物反应器生产疫苗的辽宁成大等3家：采用数十台 14L-30L量级进口反应器。 • 兽用疫苗： 金宇集团1200L、650L反应器（国产CLAVORUS®）生产口蹄 疫疫苗。 南京梅里亚（MERIAL） 300L引进技术和进口反应器生产法 氏囊疫苗。 • 治疗性抗体： 1000升生物反应器生产线（进口）：北京百泰 3000升生物反应器生产线（进口）：上海中信国健
CLAVORUS®反应器（位于清大天一工艺实验室）
左为CLAVORUS® 650L反应器，右为CLAVORUS® 120L反应器
采用悬浮培养技术生产疫苗的特点
• 优点
– 自动化程度高，工艺条件稳定、可控，批量大、均一性好。 – 无血清或低血清、无动物成分培养，不良反应小。 – 提高劳动生产效率，减少劳动强度。 – 减少生产场地需求，提高生产规模。 – 节能低碳、降低成本。 – 有利于申报疫苗品种、文号。 – 存在技术门槛、知识产权，有利于市场竞争。
全悬浮细胞培养
贴壁细胞微载体培养
第一部分
悬浮培养技术在生物制药中的应用及特点
悬浮培养技术在生物制药中的应用历史和现状
• 早在1962年，BHK21细胞经驯化实现悬浮培养，1965年已实现 在不锈钢发酵罐中悬浮培养生产口蹄疫疫苗。 • 1967年，开发了微载体并实现在生物反应器中大规模培养贴壁 细胞。 • 20世纪80/90年代，CHO细胞实现悬浮培养，治疗性抗体的发展 极大地推动着生物反应器在生物制药行业中的应用。 • 全球利用动物细胞表达生产的产品——疫苗、抗体、重组蛋白 药物等产品的年销售额占生物制药市场的70％以上。
• 动物细胞培养反应器体积还在不断增大：
–生产规模最大达到20000L以上机械搅拌式反应器，如：Amgen （美国）和Lonza（瑞士）：20000L；Genentech（美国）： 25000L。
国外悬浮培养应用
• 人用疫苗：
20世纪80年代利用1000L的机械搅拌式反应器培养VERO细胞生 产人用狂犬病疫苗和脊灰疫苗（Pasteur，法国）。 应用微载体悬浮培养技术生产流感疫苗的机械搅拌式生物反应 器规模达到6000L（Baxter，美国）。 • 动物疫苗： 20世纪70年代，开始有2000－5000L的机械搅拌式反应器应用 于口蹄疫疫苗生产（Wellcome，英国）。
生物反应器分类—根据反应器的几何特征 一次性反应器： Wave波浪式生物反应器、一次性搅拌生物反应器等。 优点： 能够高密度培养，使用方便。 缺点： 放大较难，适宜于实验室规模。
工业化成本较高。
搅拌式生物反应器是在当前被FDA批准的生物技术产品 以及公开发表的生产用主流设备。
生物反应器应用的发展—国外
• 治疗性抗体：
已进入大规模反应器培养动物细胞的生产阶段，生产规模最大 达到25000L机械搅拌式反应器（Genentech，美国）。
Baxter公司Vero细胞流感疫苗生产线
抗体生产——Lonza、DSM
20000升反应器，Lonza
10000升反应器，DSM
生物反应器在生物制药中的应用历史和现状 —— 我国生物制药生产
来自金宇保灵网站
悬浮培养技术在生物制药中的应用历史和现状 —— 国产动物细胞生物反应器
• 2008年之前，国产动物细胞反应器规模停留在2～30L，为模仿 国外的实验品，未能形成规模化产业。 • 2008年，国产CLAVORUS®120L、650L机械搅拌式动物细胞培养 反应器在疫苗行业中得到成功应用。 • 2009年，CLAVORUS®1200L反应器上市。清大天一大容量反应器 在疫苗生产中的应用，为自主提升我国生物制药产业技术奠定 了基础。 • 未来几年，生物反应器培养动物细胞的方式将逐渐成为我国生 物制药产业的主流。
动物细胞
生物制品生产核心要素
• 细胞和病毒
• 生物反应器
• 细胞培养基
• 细胞培养工艺
生物制药 核心要素
第二部分
核心设备—生物反应器
（分类、结构、功能及选择）
生物反应器分类-根据反应器的几何特征
搅拌式生物反应器: （Stirred tank bioreactor）
通过搅拌器的作用使细胞和养分在培养 液中均匀分布，如笼式通气搅拌器、双层 笼式通气搅拌器、桨式搅拌器等。
批培养
优点 • 操作简单，直观反映细胞在生物反应器中的生长、 代谢变化等特点。 缺点 • 但由于初始营养物比较丰富，造成细胞的过量利用， 积累大量的代谢废产物，细胞的生长随着受到抑制， 生长周期较短，培养基利用率低，细胞密度也不高。
灌注培养 流加培养
特点： 具有操作简单、产率高、 特点：培养体积小，回收体积大，产 容易放大等优点。 品在罐内停留时间短，可及时回收到 低温下保存，利于保持产品的活性等 关键： 特点。 1 培养基的优化 2 流加策略的应用（过程控制） 不足：操作比较繁杂，培养基利用效 率低，工艺放大过程困难。
疫苗悬浮培养工艺和反应器生产线
北京清大天一科技有限公司 2010年10月
主要内容
• • • •
悬浮培养技术的应用及特点 反应器的分类、结构、功能和选择 悬浮培养工艺（分类、关键技术及选择） 悬浮培养生产线的建立
悬浮培养技术
概念： 细胞悬浮培养技术是指细胞在生物反应器中自由悬浮
于培养液内生长增殖的一种培养方法。
称重模块 料液蠕动泵
生物反应器的选择
满足动物细胞反应器培养的基本前提：
– 清洁性、无菌性及密封性：无死角，易清洁，达到灭菌彻
底、无菌要求及密封性要求，能够满足工业化生产需要。 – 混合均匀、剪切力小：满足传质、传热需要，同时对动物 细胞伤害小。 – 控制的可靠性、稳定性：疫苗生产工艺对生化参数非常敏
反应器功能
液位控制功能
– 使用反应器进行灌流培养时，为保持培养体积的恒定，需 控制反应器培养的液位，可使用液位电极或称重模块来实 现。
称重控制优势
– 任意更改培养控制体积，具有更大灵活性。 – 精确检测及控制培养过程中的物料补充。 – 并具有底搅拌电机重量保护功能，当液位低于重量保护设 定值时，底搅拌电机不被开启。
生物反应器应用的发展—国外
生物反应器应用—国内
辽 宁 成 大 金宇保灵 广 州 诺 诚
生物反应器的结构(搅拌式）
罐体 支架管路 控制器
反应器主要功能（搅拌式）
• 清洁功能、无菌性（蒸汽灭菌）及密封性 • 搅拌控制功能 • 温度控制功能
• pH控制功能
• 溶氧（DO）控制功能 • 液位控制功能 • 细胞截留功能………
国外生物制药生产
• 随着流加培养、灌注培养、个性化细胞培养基等动物细胞培 养技术的发展，生物反应器的细胞培养规模也趋向大型化。
–2000年以后，全球生产型动物细胞培养反应器的总规模已超过 200万升，几乎都是机械搅拌式反应器；随着细胞培养基技术 的发展，不再使用不能放大的反应器。 –预计2011年全球生物制药行业的生物反应器使用率将达到 85%。
悬浮培养工艺
• 细胞贴壁与否？可否驯化？可改造否？
– 细胞全悬浮培养（CHO、BHK、杂交瘤细胞等）
– 细胞微载体悬浮培养（VERO、ST、Marc145、MDCK）
BHK21细胞
ST细胞
几种悬浮培养工艺（即生物反应器操作方式）
– 批培养 – 流加（补料）培养 – 灌流培养
灌流培养
流加（补料）培养 批培养
1、工艺接口标准化 2、配件提供的速度 零部件的维修及更换时的期限；例如使用进口反应器， 可能出现维修及零部件更换时间较长等。 3、售后服务 –售后服务响应时间； –维修配件订货周期； –售后产品装置、调试及操作培训； –产品保修期内的维修；
第三部分
悬浮培养工艺过程技术
悬浮培养技术应用的过程技术 目标：提高细胞密度和单位细胞比生产效率，延长高 密度细胞的培养周期，从而提高生物反应器的生产 效率。 过程发展技术：
感、生产线的稳定性及连续性等。
生物反应器的选择 • 满足所生产疫苗品种特征、产能的需求
–反应器规模、放大配置、生产线数量、场地条件
• 满足动物细胞培养和病毒培养工艺的具体要求
–搅拌浆叶、旋转过滤器等细胞截流装置配件的设计和 选择
–与所需要培养的细胞工艺相匹配
生物反应器的选择 • 标准化、配件提供及售后服务
对细胞培养效果的影响
– 接种细胞以及更换培养液等过程需要快速 升温； – 温度稳定性影响细胞生长。
夹套 蒸汽加热 电加热 增压泵 双温度探头
反应器功能
pH控制功能 – 使用pH电极进行检测，由控制程序自动控制酸、碱液的加 入，实现pH控制
对细胞培养效果的影响 – 信号响应延时和控制灵敏性影响pH控制稳定性 – pH电极和控制器质量影响控制效果，引起控制偏差
pH电极 pH控制器 酸碱蠕动泵
反应器功能
溶氧控制功能 – 使用溶氧电极进行检测，由控制程序自动控制各种气体的加入，
实现溶氧的控制。
对细胞培养效果的影响
– 信号响应延时和控制灵敏性影响溶氧控制稳定性 – 溶氧电极和控制器质量影响控制效果，引起控制偏差
溶氧电极 气体流量计������ 电磁阀 气动隔膜阀������ 气体过滤器 微泡分布器
清洁功能、蒸汽灭菌及密封性 • 清洁功能：罐内壁和零部件材质要求，设计无死角 • 密封性 • 在线蒸汽灭菌
支撑管路（水、电、气） 加热系统 气体系统
蒸汽系统
反应器功能
搅拌控制功能
搅拌组件分为顶部机械搅拌和底部磁力 搅拌，底部磁力搅拌的搅拌叶轮与反应器 形成一定夹角，带动料液转动产生涡流， 实现料液充分混合。搅拌电机采用无级变 速，运行平稳。
对细胞培养效果的影响
– 均匀搅拌以使培养液充分混合，保障营养 供给并提高氧传递效果；
– 由于动物细胞对搅拌剪切力敏感，应充分 降低搅拌剪切力；
– 机械搅拌轴应良好密封，避免污染发生。
反应器功能
温度控制功能
– 采用夹套进行温度控制，反应器温度由温 度电极进行检测，夹套的加热或冷却，由 控制程序自动控制。
• 困难
– 较高的技术门槛，缺乏支撑技术。 – 对悬浮培养技术、包括产业化知识了解不足，技术人才缺乏。 – 基本都是转瓶生产的老厂ຫໍສະໝຸດ Baidu需要车间技术改造，一次性资金投入大。
GMP车间运行的疫苗悬浮生产线
动物细胞培养反应器生产线＋疫苗悬浮生产工艺过程技术
1、动物细胞培养反应器生产线－硬件基础 2、疫苗悬浮工艺技术（PROCESS DEVELOPMENT）－软件基础
• 国内人用和兽用疫苗生产企业超过100家，目前应用反应器悬 浮培养技术生产疫苗的仅4家。
–超过95%的疫苗企业生产仍然采用批量小、效率低、劳动 强度大、占用场地多的转瓶机。
–细胞培养基是50年代开发的MEM、DMEM、199、PRMI1640等 基础培养基，血清添加比例10％左右，细胞生产效率低。 • 治疗性抗体研发和生产处于起步阶段，多数采用进口无血清 培养基和生物反应器。
优点：
用于悬浮细胞与微载体贴壁细胞培养 提供均质环境 培养工艺容易放大 产品质量稳定、非常适合工厂化生产
– – – –
缺点：
– 搅拌产生的剪切力
生物反应器分类—根据反应器的几何特征
气升式生物反应器 【Airlift bioreactor 】：
通过气体上升作用带动细胞和养分在培 养液中均匀分布，常分为内循环式、外循环 式、内外循环式。主要用于一些单抗生产。
优点：
–均质的培养环境 –剪切力小 –容易放大
缺点：
–气体上升对动物细胞的损伤大 –泡沫问题严重
生物反应器分类—根据反应器的几何特征 填充床生物反应器
【packed bed】 ：
填充一定材质的填充物，细胞 截留在填充物中生长。固定床和流 化床等。
优点：
–高细胞密度和产率
缺点：
–培养环境不均质 –规模较难放大 –细胞难以计数
主流的悬浮培养生产工艺—发展方向
当前被FDA批准的生物技术产品（重组蛋白和抗体 为主）和公开发表的主流生产工艺
我国悬浮培养的应用
• 人用疫苗： 采用生物反应器生产疫苗的辽宁成大等3家：采用数十台 14L-30L量级进口反应器。 • 兽用疫苗： 金宇集团1200L、650L反应器（国产CLAVORUS®）生产口蹄 疫疫苗。 南京梅里亚（MERIAL） 300L引进技术和进口反应器生产法 氏囊疫苗。 • 治疗性抗体： 1000升生物反应器生产线（进口）：北京百泰 3000升生物反应器生产线（进口）：上海中信国健
CLAVORUS®反应器（位于清大天一工艺实验室）
左为CLAVORUS® 650L反应器，右为CLAVORUS® 120L反应器
采用悬浮培养技术生产疫苗的特点
• 优点
– 自动化程度高，工艺条件稳定、可控，批量大、均一性好。 – 无血清或低血清、无动物成分培养，不良反应小。 – 提高劳动生产效率，减少劳动强度。 – 减少生产场地需求，提高生产规模。 – 节能低碳、降低成本。 – 有利于申报疫苗品种、文号。 – 存在技术门槛、知识产权，有利于市场竞争。
全悬浮细胞培养
贴壁细胞微载体培养
第一部分
悬浮培养技术在生物制药中的应用及特点
悬浮培养技术在生物制药中的应用历史和现状
• 早在1962年，BHK21细胞经驯化实现悬浮培养，1965年已实现 在不锈钢发酵罐中悬浮培养生产口蹄疫疫苗。 • 1967年，开发了微载体并实现在生物反应器中大规模培养贴壁 细胞。 • 20世纪80/90年代，CHO细胞实现悬浮培养，治疗性抗体的发展 极大地推动着生物反应器在生物制药行业中的应用。 • 全球利用动物细胞表达生产的产品——疫苗、抗体、重组蛋白 药物等产品的年销售额占生物制药市场的70％以上。
• 动物细胞培养反应器体积还在不断增大：
–生产规模最大达到20000L以上机械搅拌式反应器，如：Amgen （美国）和Lonza（瑞士）：20000L；Genentech（美国）： 25000L。
国外悬浮培养应用
• 人用疫苗：
20世纪80年代利用1000L的机械搅拌式反应器培养VERO细胞生 产人用狂犬病疫苗和脊灰疫苗（Pasteur，法国）。 应用微载体悬浮培养技术生产流感疫苗的机械搅拌式生物反应 器规模达到6000L（Baxter，美国）。 • 动物疫苗： 20世纪70年代，开始有2000－5000L的机械搅拌式反应器应用 于口蹄疫疫苗生产（Wellcome，英国）。
生物反应器分类—根据反应器的几何特征 一次性反应器： Wave波浪式生物反应器、一次性搅拌生物反应器等。 优点： 能够高密度培养，使用方便。 缺点： 放大较难，适宜于实验室规模。
工业化成本较高。
搅拌式生物反应器是在当前被FDA批准的生物技术产品 以及公开发表的生产用主流设备。
生物反应器应用的发展—国外
• 治疗性抗体：
已进入大规模反应器培养动物细胞的生产阶段，生产规模最大 达到25000L机械搅拌式反应器（Genentech，美国）。
Baxter公司Vero细胞流感疫苗生产线
抗体生产——Lonza、DSM
20000升反应器，Lonza
10000升反应器，DSM
生物反应器在生物制药中的应用历史和现状 —— 我国生物制药生产
来自金宇保灵网站
悬浮培养技术在生物制药中的应用历史和现状 —— 国产动物细胞生物反应器
• 2008年之前，国产动物细胞反应器规模停留在2～30L，为模仿 国外的实验品，未能形成规模化产业。 • 2008年，国产CLAVORUS®120L、650L机械搅拌式动物细胞培养 反应器在疫苗行业中得到成功应用。 • 2009年，CLAVORUS®1200L反应器上市。清大天一大容量反应器 在疫苗生产中的应用，为自主提升我国生物制药产业技术奠定 了基础。 • 未来几年，生物反应器培养动物细胞的方式将逐渐成为我国生 物制药产业的主流。
动物细胞
生物制品生产核心要素
• 细胞和病毒
• 生物反应器
• 细胞培养基
• 细胞培养工艺
生物制药 核心要素
第二部分
核心设备—生物反应器
（分类、结构、功能及选择）
生物反应器分类-根据反应器的几何特征
搅拌式生物反应器: （Stirred tank bioreactor）
通过搅拌器的作用使细胞和养分在培养 液中均匀分布，如笼式通气搅拌器、双层 笼式通气搅拌器、桨式搅拌器等。
批培养
优点 • 操作简单，直观反映细胞在生物反应器中的生长、 代谢变化等特点。 缺点 • 但由于初始营养物比较丰富，造成细胞的过量利用， 积累大量的代谢废产物，细胞的生长随着受到抑制， 生长周期较短，培养基利用率低，细胞密度也不高。
灌注培养 流加培养
特点： 具有操作简单、产率高、 特点：培养体积小，回收体积大，产 容易放大等优点。 品在罐内停留时间短，可及时回收到 低温下保存，利于保持产品的活性等 关键： 特点。 1 培养基的优化 2 流加策略的应用（过程控制） 不足：操作比较繁杂，培养基利用效 率低，工艺放大过程困难。
疫苗悬浮培养工艺和反应器生产线
北京清大天一科技有限公司 2010年10月
主要内容
• • • •
悬浮培养技术的应用及特点 反应器的分类、结构、功能和选择 悬浮培养工艺（分类、关键技术及选择） 悬浮培养生产线的建立
悬浮培养技术
概念： 细胞悬浮培养技术是指细胞在生物反应器中自由悬浮
于培养液内生长增殖的一种培养方法。
称重模块 料液蠕动泵
生物反应器的选择
满足动物细胞反应器培养的基本前提：
– 清洁性、无菌性及密封性：无死角，易清洁，达到灭菌彻
底、无菌要求及密封性要求，能够满足工业化生产需要。 – 混合均匀、剪切力小：满足传质、传热需要，同时对动物 细胞伤害小。 – 控制的可靠性、稳定性：疫苗生产工艺对生化参数非常敏