2011 关于ELISA方法检测HIV抗体的几点体会
关于ELISA方法检测HIV抗体的几点体会
善 睡眠与休息条件 、 减少 并发症发生 、 改善休 闲娱乐活动场 所设施 、 提供 获取知识技能 的机会 、 根据病情情况提供 再就业机会 等有助 于 改善病毒性脑炎伴精神 障碍 患者的生活质量 水平状 况。
关于 E IA方法检测 HI LS V抗体 的几点体会
潘 细 牙 , 玉 琼 , 宜 恒 刘 段
( 西 省 分 宜县 人 民 医 院检 验 科 , 西 分 宜 3 6 0 江 江 3 6 0)
近几 年艾 滋病在我省 、 我市正逐渐进入 快速增长 期 , 2 0 年 从 07 起新发病例不 断上升 , I H V抗体检测标本数量也不断增加 , 如何保证 检测 结果 的准 确性 , 善实验 室质量 管理体 系 , 完 提高 检测能 力和质 量 日 重要。在检测工作 中我们严格贯彻《 国艾滋病检测 技术规 趋 全 范》 …和《 国艾滋病检测 工作管理 办法》 全 的要求 , 规范 H V抗 体 的 I 检测 , 确保工作 质量 , 面就用 E IA方 法做 H V抗 体初筛检 测工 下 LS I
染, 不应与生化实验用同一管标本 , 如果是 同一管标本应先做免疫后
做生化。
3 良好 的 血 清 学 检 测 技 术 是 实 验 获得 成 功 和保 证 生 物 安全 的关 键
H V抗体 的检测结果事关重 大 , 阴性或假 阳性结果都 是极其 I 假
有害 的, 直接影响到实验室 的声 誉和艾滋病 防治 工作的开展甚 至 它 对患者 的心理 产生负面影响 。所 以必 须有好的质量控 制程序 , 影 对
采用ELISA法对艾滋病受检对象进行初筛的结果观察
采用ELISA法对艾滋病受检对象进行初筛的结果观察作者:刘英姿来源:《中外医学研究》2013年第20期【摘要】目的:对采用ELISA法对艾滋病受检对象进行初筛的结果进行观察分析,探讨影响检测结果的相关因素,为今后的临床诊治工作提供可靠的参考依据。
方法:对在2010年1月-2012年12月间接受艾滋病筛查的体检者采取ELISA法进行检查,并对检测结果和相关影响因素进行分析。
结果:共搜集检测标本5168份,其中初筛结果呈阳性者20例,阳性率为0.39%;经实验室进一步检查发现阴性标本6份,并经分析得到检测过程中所用试剂、标本状况以及操作等均会对检查结果产生一定程度的影响。
结论:采取ELISA法对艾滋病受检对象进行初筛时,为了确保检测结果的准确性,应尽量使用质量可靠的试剂与合格的标本,并注意操作,降低假阳性率。
【关键词】 ELISA法;艾滋病;初筛; HIV抗体;影响因素中图分类号 R446 文献标识码 B 文章编号 1674-6805(2013)20-0070-02HIV主要通过性、血液、母婴进行传播。
由于艾滋病在临床上治愈、预防接种的希望十分渺茫,并且仅能够展开对症治疗,因此对HIV展开实验室检测为预防艾滋病的一个重要措施。
目前酶联免疫法(ELISA)检测抗-HIV在国际上的应用十分的广泛,为对艾滋病进行初筛的一种优良方法,目前在实验室中常用的检测方法按照原理可分成间接ELISA法与竞争ELISA法两种,其中以间接ELISA法的应用率最高[1]。
本次研究中出于对采用ELISA法对艾滋病受检对象进行初筛的结果进行观察分析,探讨影响检测结果的相关因素的目的,对5168份艾滋病初筛标本的检测结果进行了回顾性分析,现汇报如下。
1 材料与方法1.1 仪器与试剂仪器:ST-36W型洗衣板机;ST-360型酶标仪; Thermo可调式移液器;DK-600A型水浴恒温箱。
试剂:人类免疫缺陷病毒诊断试剂盒。
检测标本为本地区艾滋病自愿咨询者。
ELISA法检测HIV抗体影响因素分析
ELISA法检测HIV抗体影响因素分析作者:李志明来源:《中外医疗》 2011年第5期李志明(滨州市中心血站山东滨州 256600)【摘要】目的探讨ELISA法在检测HIV抗体中的影响因素,提高实验结果准确性。
方法从试剂的准备、样品的采集和储存以及仪器和操作等方面分析每一环节的质量控制对检验结果的准确性所起到的影响。
结果做好试剂的选择和准备,规范操作,做好每一环节的质量控制,在ELISA法检测HIV抗体中非常重要。
结论选择灵敏度高、特异性好的试剂,严格按照试剂说明书要求,注意操作中的诸多影响因素,能有效保证检测结果的准确性。
【关键词】 ELISA法 HIV抗体影响因素【中图分类号】 R187 【文献标识码】 A 【文章编号】 1674-0742(2011)02(b)-0191-02随着艾滋病流行形势的日趋严峻,新发现的感染者数量不断增加,艾滋病检测也显得越来越重要。
目前国内艾滋病初筛试验室检测HIV抗体的方法主要是酶联免疫法(ELISA)。
ELISA法是敏感性高、特异性强、重复性好的试验诊断方法,其试剂具有稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素,既适用于大规模筛查试验,又可以使用于少量标本的检测等优点。
但ELISA法的实验过程中有很多影响因素,如何消除诸多影响因素,保证检测结果的准确性,笔者在实际工作中经长期观察总结,对ELISA法检测HIV抗体影响因素分析如下。
1 试剂的准备《全国艾滋病检测技术规范》(2009版)规定,HIV抗体检测试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准,在有效期内的试剂,其中酶联免疫试剂应批批检合格,推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。
ELISA多为单纯HIV抗体检测试剂,HIV抗原抗体联合检测试剂可同时检测血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗体。
HIV抗原或抗体被包于固相载体,加入待检样品和酶标记的HIV抗原或抗体,加底物显色,用酶标仪测定结果。
直接ELISA法与间接ELISA法检测HIV抗体的对比分析
直接ELISA法与间接ELISA法检测HIV 抗体的对比分析作者:乔健健来源:《中国实用医药》2012年第21期【摘要】目的合理选择检测试剂,建立一种准确的ELISA检测方法。
方法直接ELISA 法和间接ELISA法对不同血液标本分别进行HIV抗体的检测,并对结果进行比较分析。
结果间接ELISA法检测后会出现不同例数的假阳性结果,而直接ELISA法未出现假阳性结果。
结论直接ELISA法检测结果假阳性率低,作为新一代试剂,可逐步取代间接ELISA法。
【关键词】酶联接免疫吸附剂测定法;直接ELISA法;间接ELISA法;HIV;检测检测人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)抗体的常用实验方法有蛋白印迹法、酶联接免疫吸附剂测定(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay, ELISA)法、胶体金法等。
ELISA法的操作步骤简便,试剂成本较低,检测灵敏度较高,尤其适合于标本的快速批量检测,因而我国血站、卫生防疫部门更常使用ELISA法进行血液筛查和检测[1]。
ELISA法有直接检测法和间接法,间接ELISA法会造成较大的假阳性检测结果,浪费原本紧张的临床血液资源,打击了一部分献血者的参与积极性,甚至会出现不良社会影响和纠纷[2]。
为了合理选择检测试剂,建立一种准确的ELISA检测方法,本文采用直接ELISA法和间接ELISA 法分别进行HIV抗体的检测,并对结果进行比较分析,现报告如下。
1 资料与方法1.1 标本来源随机选取本中心接收的血液标本314例,采用间接ELISA法检测结果HIV阳性8例的血液标本,经过上级确认实验室确认的HIV阳性3例的血液标本。
1.2 仪器ETI-MAX3000型全自动酶免分析仪。
1.3 试剂检测所用的质控血清为卫生部临床检验中心提供。
间接ELISA法试剂盒分别购自国内公司 (A)与公司 (B)。
直接ELISA法为双抗原夹心法,所用国产试剂盒购自国内某公司(C),进口试剂盒购自日本某公司(D)。
ELISA法金标检测法在检测HIV抗体效果观察论文
ELISA法与金标检测法在检测HIV抗体的效果观察摘要:目的:对elisa法和金标法检测hiv抗体的检测效果进行比较,分析两种方法的优缺点。
方法:用elisa法和金标法对1200份待测样本进行hiv抗体初筛出呈阳性的样本,然后用相同的方法对阳性的标本进行复查,最后经过市cdc艾滋病确诊实验室进行确诊。
结果:对送检的1200份待测样本,elisa初筛阳性为8例,金标法阳性为12例,最后确诊为阳性的为7例。
结论:elisa法和金标法都能够进行hiv抗体的初筛检测,金标法敏感性强,假阳性率较高;elisa法敏感性较为理想,其综合准确性高于金标检测法。
关键词:hiv抗体;elisa法;金标法【中图分类号】r446.61【文献标识码】b【文章编号】1672-3783(2012)04-0107-01目前艾滋病已经成为新世纪影响最大的疾病之一,如何准确的检测和筛查出hiv病毒携带者已经成为了当前医学检测工作者的当务之急,而检测hiv抗体是判断患者是否具有hiv感染或者患上aids的重要手段,当前hiv筛查的方法有很多,为了提高检测与筛查的准确性,本文对elisa(酶联免疫分析)法和金标法检测hiv抗体的实验结果进行了比较,现报告如下。
1 资料与方法1.1 研究对象:2010年10月-2011年10月期间我院共收到1200例hiv抗体初筛患者,其中男性435例,女性765例,年龄为20-57岁;均对其抽取静脉血2-5ml,并分离血清待测。
1.2 试剂与仪器:本检测机构使用的试剂均为合格产品,并且所用试剂均在有效期内,elisa法试剂盒和金标法试剂均为上海科华生物工程有限公司提供,其均获得国家卫生部的批准生产文号。
所用仪器为tecan酶标仪、pw-960酶标洗板机,使用前均经过精密校准,且仪器性能稳定,在进行相应的检测操作时均严格按照说明书进行。
1.3 方法:对所有hiv抗体初筛患者的血清标本均采用elisa法和金标法进行初次筛查,在筛查过程中严格按照试剂盒的相应说明书进行操作,对比两种方法的初筛阳性率。
ELISA检测HIV抗体的影响因素及质量控制措施
5 温 度 的 控 制
天检测 , 采集的标本可置室温 中, 如果 5 d内测定应及时分离血 清置 2 8℃冰箱保存 , ~ 超过 1 测定可将分离血清置 于 一 0℃ 周 2 的低 温冰箱保存 。
2 试剂 的选择
温度的控制在整个 检测过程中起着 至关重要 的作用 。 保存 样品和试剂盒 的冰箱应放置 温度 计 , 工作人员应 每 日监测冰箱 内温度指示值 , 并认 真做好记录 。血清样本 和试剂盒 在使 用前
[ 王巍 , 1 】 莫庆森 , E海 , 综合医院病原菌分布及耐药性分析 [. 黎 l 等. J 中 ] 华医院感染学杂志 ,0 l 2 ( 1 :3 6 2 2 . 2 1 ,1 1 )2 2 — 3 8
[ 汪复. 0 年 中国 C I E 2 】 2 9 0 HN T细菌耐药性检 测叨. 中华感 染与化疗 杂
抗菌药 物的广泛应用 , 甚至是无 指征滥 用 , 导致耐 药菌及
多药耐药菌感染遍布全球 , 给临床治疗带来很大 的困难P l -。因 s 此, 建议 临床 医生重视住 院患者病原 菌标本 的及时 培养 , 加强
志 ,0 0 5 1 )3 5 34 2 1 , (0 :2 — 3 .
[ 张映华. 5 8 3 】 5 0 株临床分离病原菌 的分布及耐药分析叫. 医院感 中华
造成溶血 。 由于红 细胞 溶血破 裂可释放 过氧化 物酶等 活性物
示值 的允许误差为 士1℃。水浴箱 内水 的高度要高于试管架少
质 , 辣根 过氧化 物酶作用 相似 , 与 干扰检 测结 果 , 造成假 阳 可
免疫诊断(主要是ELISA)试验操作的几点体会
丝子等。
112 以次充好 主要品种有国产沉香,大多数的沉香为不含或少含树脂的白木香心材,浸出物检查均达不到标准要求。
113 掺假掺杂 蒲黄、海金沙中掺入细沙以至灰分超过标准,山茱萸的杂质(果核、果梗)超过标准规定,细辛含有大量的非药用部位细辛的叶子。
柴胡含有较多的茎和叶,僵蚕灰分超过标准规定。
2 主要原因211 经营者自身素质不高所致21111 法制观念不强,有的经营者受个人利益的驱动,不顾患者的用药安全,利用一些外形相似药材冒充那些价格较高的、市场紧缺的药材出售,达到其多赚钱的目的。
如人参冒充进口西洋参、亚香棒虫草冒充冬虫夏草出售、独活饮片冒充当归饮片出售等等,严重影响人民群众的用药安全。
21112 缺乏中药鉴别和中药的养护的能力,由于自然界物种非常丰富,对于一些外形相似、基原相近的植物没有一定的中药鉴别能力是很难识别的。
同时,药材养护不当,造成药材的虫蛀、霉变等,均可影响药材质量。
212 质量标准不完善所致 一些地方标准由于种种原因或历史条件的限制,收载的品种与现行的国家标准同名异物,造成药材市场上品种的混乱。
主要表现在:①在地方标准的所在地,同一名称的药材有不同的来源。
如广西的流通领域的王不留行,就有地方标准收载的桑科植物薜荔的隐头花序及花托和中国药典收载的石竹科麦蓝菜的种子这两个品种;②局部地区习惯用药无序扩散。
地方标准收载的品种在标准所在地以外的领域流通,由于某些经营者钻地区习惯用药的空子,常可见到地方标准收载的品种在标准所在地以外的领域流通。
广西中药材标准收载的山药、四川省药材标准收载的大菟丝子在全国的许多药材市场都有销售。
213 不执行现行质量标准用药名称所致 随着质量标准的提高,中国药典从1995年版开始,将一些不同来源的同名药材,分别以另一名称、另立标准收载,如麦冬药材分列为麦冬与山麦冬两种药材收载。
但由于种种原因,未能将新修订的质量标准宣传普及到所有中药材的生产、经营、使用单位,加上受长期用药习惯的影响,相关部门很难按新的药品标准修正用药名称,造成中药材市场上的用药名称极为不规范,这也是造成中药材不合格率高的原因之一。
ELISA法与胶体金法检测血液抗-HIV结果对比分析
ELISA法与胶体金法检测血液抗-HIV结果对比分析发表时间:2012-10-22T15:06:53.047Z 来源:《医药前沿》2012年第17期供稿作者:杨坤刘淑燕黄新宝[导读] 了解ELISA法与胶体金法检测血液抗-HIV的灵敏度、特异性以及ELISA法测定的S/CO值的强、弱与胶体金法的符合率。
杨坤刘淑燕黄新宝(贵港市中心血站广西贵港 537100)【摘要】目的了解ELISA法与胶体金法检测血液抗-HIV的灵敏度、特异性以及ELISA法测定的S/CO值的强、弱与胶体金法的符合率。
方法采有用两种ELISA试剂同时检测抗-HIV抗体,对任何一种呈反应性的标本均进行双孔复查,同时用胶体金法进行检测,复查仍为阳性反应的标本,留取同源血袋血浆及填报资料一同送市疾病预防控制中心用WB法进行确认。
结果 ELISA法检测抗-HIV呈阳性反应的156人份血液中有105例WB法确认为阳性,阳性率为67.31%,其中95例为胶体金法阳性,符合率为90.48%(95/105);ELISA法呈强阳性反应与ELISA法呈弱阳性反应的WB法确认阳性率比较χ2=100.30,P<0.01。
结论 ELISA法检测试剂不同的厂家存在技术的差异,都有一定的漏检率及假阳性率,胶体金法因方法学原因,存在漏检和检测假阳性的可能;ELISA法检测抗-HIV呈S/OD值呈强、弱阳性结果确认为阳性中存在显著性差异,S/OD值越高,与WB法试验结果符合率越高。
【关键词】 ELISA法胶体金法 WB法 HIV-Ab 检测为了了解ELISA法与胶体金法的灵敏度、特异性以及ELISA法测定的S/CO值的强、弱与胶体金法的符合率,笔者对本市2005~2011年份检测的无偿献血者份标本的HIV-Ab检测结果进行回顾性分析比较,结果报告如下:1 材料与方法1.1 标本来源2005~2011年贵港市无偿献血者200 603人份血样,其中ELISA法检测抗-HIV呈反应性标本156人份。
elisa实验总结感想
elisa实验总结感想
Elisa实验是一种常用的生物学实验方法,用于检测特定蛋白质或分子在样本中的存在量。
在进行Elisa实验的过程中,我学到了很多实验技巧和实验原理,同时也收获了一些感悟和体会。
一、实验原理
Elisa实验是一种免疫学技术,其原理是利用特异性抗体与抗原结合的特性,来检测样本中特定蛋白质或分子的存在量。
实验分为直接法、间接法、夹心法和竞争法等多种类型,具体实验步骤和条件也会因不同类型而有所不同。
二、实验技巧
在进行Elisa实验时,需要注意实验操作的精细和准确性,以避免实验结果的误差。
例如,样本的处理和稀释、酶标板的涂覆和洗涤、抗体的加入和反应时间等,都需要严格按照实验步骤和要求进行操作。
此外,实验过程中还需要注意卫生和安全,避免交叉污染和误伤。
三、实验感悟
通过进行Elisa实验,我深刻认识到科学研究需要耐心和细心,需要不断尝试和
总结。
在实验过程中,我也体会到了科学合作和团队精神的重要性,只有大家相互配合和支持,才能完成一个完整的实验。
此外,实验结果的准确性和可靠性也需要多方面的验证和确认,不能轻信一次实验结果。
总之,Elisa实验是一种重要的生物学实验方法,通过实验的过程和结果,我不仅学到了实验技巧和实验原理,也体会到了科学研究的艰辛和乐趣。
我相信,在今后的学习和研究中,我会更加努力和认真地进行实验,为科学事业做出自己的贡献。
快速法用于HIV抗体检测的探讨
快速法用于HIV抗体检测的探讨发表时间:2012-01-10T10:41:25.770Z 来源:《医药前沿》2011年第22期供稿作者:张宏宾周品众王亚平[导读] 这样既可提高阳性率,防止漏检,又节省了反复实验的时间,不失为较妥当的方法。
张宏宾周品众王亚平(江苏省江阴市疾病预防控制中心江苏江阴 214431)【中图分类号】R392-33【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2011)22-0207-02【摘要】目的在HIV抗体检测中比较快速法与酶标法的敏感性,观察快速法能否用于HIV抗体的初筛。
方法用酶联免疫法(ELISA)、明胶颗粒凝集试验(PA)和胶体硒法(ICA)对同一阳性标本的不同稀释度作检测,比较这三种方法的敏感性。
结果三种方法的敏感性不同, ELISA敏感性最高,PA次之。
结论快速法不适于HIV抗体的初筛,即使要使用,应以ELISA的结果作为最终报告。
【关键词】快速法 ELISA HIV相关规范明确提出可以用快速检测方法对应急、门诊急诊的HIV抗体作检测,主要有明胶颗粒凝集试验(PA),免疫渗滤试验,免疫层析试验等[1]。
但规范中未明确经快速法检测的阴性结果能否直接发出阴性报告,甚至有某些检测机构用快速法检测的阴性结果直接发出了阴性报告,笔者认为存在较大的漏检可能。
据此,笔者选取日常工作中检测出的一份阳性标本,用酶联免疫法(ELISA)、明胶颗粒凝集试验(PA)和胶体硒法(ICA)对该标本的不同稀释度作检测,比较这三种方法的敏感性,报告如下。
1 材料与方法1.1 标本来源:本实验室日常工作中用ELISA检出的HIV抗体呈阳性反应的血清,经上级单位用免疫印迹试验(WB)确认为阳性;收集经检测为HIV抗体阴性的血清,混合,灭活,经二种以上ELISA试剂确认为阴性。
1.2 试剂:ELISA试剂采用珠海丽珠试剂股份有限公司生产的人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法),批号2011051112;PA试剂采用艾康生物技术(杭州)有限公司生产的人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(乳胶层析法),批号200909129;ICA试剂采用Abbott Japan Co.,Ltd.生产的人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗体诊断试剂盒(胶体硒法),批号10303K100。
HIV抗体ELISA检测质量控制
HIV抗体ELISA检测质量控制摘要】目的:对HIV抗体检测ELISA法的各个环节和影响因素进行质量控制,保证检验结果的准确无误。
方法:采用ELISA法,对2018年1月—2019年6月HIV 抗体检测,用上海科华试剂,设内部和外部质控、洗板和水浴厢、酶标仪,以s/co 计算统计均值,标准差画Levy-Jennings质控图,采用Westbard多规则技术质控规则,1-2S为警告,1-3S为失控限。
以S/CO的变异系数CV来判断控制检验结果的质量。
每月、每季度、半年、1年对结果分析,并对失控进行原因分析、处理和整改。
结果:空白OD值全部小于0.08,阴性全部小于0.04OD,两个阳性1大于0.81OD,阳2大于0.35。
CUT—off在0.085—0.115,实验有效,设置的外部质控5Ncu/mL与标本同时测定,s/co的总CV20内.2018年1月—2019年6月共做28050例,阳性197例送疾控检测完全符合,阴性抽检50例完全符合,参与云南省的HIV质控完全符合达100分。
结论:做好HIV抗体ELISA法的室内室间评是保证HIV抗体检测结果准确无误的唯一保障,是每一个初筛实验室严格操作和执行的行业要求标准。
【关键词】HIV抗体 ELISA S/CO【中图分类号】R446.6 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2020)08-0237-02严格按照标准操作规程S0P文件,做好HIV抗体检测ELISA法的质量控制,是每个初筛实验必须遵循的风险规则要求[1]。
现对我院2018年1月起的HIV抗体检测的ELISA法,室内质控报告如下:1.资料与方法1.1 采用科华试剂外部质控品5Ncu/ML,在试剂2~3倍(Cut-off)左右,加样枪每年自己校准符合要求,水浴厢、洗板机、酶标仪、温湿度计完全按标准正常,在生物安全柜里面加样,加试剂。
1.2 内外部质控血清设置孔1空、孔2为阴,孔3、孔4为阳1,孔5为阳2、孔6为外部质控血清。
2011-关于ELISA方法检测HIV抗体的几点体会
临床医学医学信息2011年8月第24卷第8期MedicalInformation.Aug.2011.Vol.24.No.8善睡眠与休息条件、减少并发症发生、改善休闲娱乐活动场所设施、3讨论提供获取知识技能的机会、根据病情情况提供再就业机会等有助于众所周知,很多病毒性脑炎所致精神障碍患者中年龄较大、文化改善病毒性脑炎伴精神障碍患者的生活质量水平状况。
程度低、有并发症和患病年限长的患者生活质量状况较差,提示了以[4]1.4生活质量评估本文采用的生活质量评估是简化量表,分析指标整体为中心护理模式的重要性。
同时病毒性脑炎所致精神障碍是为量表四个指标的得分,它们是生理、心理、社会关系和环境指标,一种没有医疗终结的疾病,需要政府和社会建立完善的医疗及生活[3]得分越高提示生活质量越好。
保障体系,解除患者后顾之忧。
在此重要前提之下,重视患者的心理[5]1.5统计分析采用SPSS18.0统计软件,计量资料采用(x±s)表示,比辅导和健康教育,切实改善其对生活质量的主观感受。
tP较采用检验,<0.05代表有显著性差异。
参考文献:2[1]刘庆武,肖水源.一般及特殊人群生活质量研究进展[J].郴州医学高等专科结果2004,6(1):49-54.学校学报,经过治疗与护理后,两组患者症状得到不同程度的缓解,但是依[2]WaiKwongTang,C.M.Lum,GaborS,Ungvari.HealthRelatedQualityofLife心理指标、环境指标、生理指据生活质量评分,治疗组的社会指标、2006,73:203-in Community-Dwelling MenwithPneumoconiosis[J].Respiration,P同时各指标得分从高到低依次是:社标都明显好于对照组(<0.05),208.会指标、心理指标、环境指标、生理指标。
具体情况见表1。
[3]中华医学会精神科分会.中国精神障碍分类与诊断标准[M].第3版.济南:山1(n=20,x±s)表两组患者生活质量评分对比2001:164-168.东科学技术出版社,P指标对照组(n=20)治疗组(n=20)[4]周小玲.新入院流浪精神病人的护理特点[J].中国民康医学,2008,10(20):生理指标10.96±2.3714.68±1.58<0.052430.心理指标12.06±2.3213.68±1.72<0.05[5]陈君英.改革治疗组织管理模式的尝试[J].中华护理杂志2003,38(9):705.社会指标12.68±2.4814.95±2.12<0.05编辑/雅兰环境指标11.45±2.0212.10±2.00<0.05关于ELISA方法检测HIV抗体的几点体会潘细牙,刘玉琼,段宜恒336600(江西省分宜县人民医院检验科,江西分宜)近几年艾滋病在我省、我市正逐渐进入快速增长期,从2007年计所示的温度和水中实测温度是否一致,允许有±1℃的误差;洗板HIV抗体检测标本数量也不断增加,如何保证起新发病例不断上升,人工扣板时,垫纸不湿,每次使机:洗板后的残留液一般不超过2μl,检测结果的准确性,完善实验室质量管理体系,提高检测能力和质用完毕用蒸馏水清洗管道,定期检查管孔是否堵塞;酶标仪:做为规量日趋重要。
HIV初筛实验室ELISA试验的注意事项
HIV初筛实验室ELISA试验的注意事项目前实验室作为HIV初筛检测主要是HIV病毒抗体检测。
由于它的灵敏度和特异性高,而且方法相对简单、成熟,更重要的是HIV抗体在病毒感染后,除早期短暂的窗口期外的整个生命期间长期稳定地存在并可被检测到。
在HIV初筛实验室,ELISA是常用的抗体筛查方法。
ELISA是一种免疫测定,通常采用双抗原夹心法。
其原理为预包被高纯度重组HIV(1+2型)抗原,可与样品中抗HIV抗体反应,同时加入HRP标记HIV(1+2型)抗原,然后用TMB底物作用显色。
通过酶标仪检测吸光度(OD值)从而判定样品中HIV抗体的存在与否。
ELISA试验的步骤对检测结果有很大的影响,每个步骤均应认真负责才能充分发挥ELISA灵敏和特异的优点。
如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
现将操作中各个环节中要注意的问题及解决办法总结如下,以期提高试验质量。
标本的采集和保存在ELISA中标本可以是血清或血浆及其他体液,主要是血清和血浆,血清标本应及时检测,应清亮、无溶血、无菌,无过多的脂质,溶血标本会因为红细胞溶解时释放出具有过氧化物酶活性的物质。
抗凝不完全的标本因含有纤维蛋白原而造成假阳性,最好不用抗凝血尤其是用肝素抗凝剂。
以HRP为标记的ELISA 测定和细菌污染也会造成假阳性。
一般来说1周内测定的标本可置于2~8℃(平均4℃),超过1周测定的需-20℃保存。
若在冰箱中保存过久,可使本底加深。
待测血清解冻后,应轻轻充分摇匀,且避免产生气泡,标本应避免反复冻融,其后果会使效价下降,所以待测标本要多次检测,最好少量分装冻存。
ELISA的灵敏度>1ng/ml水平上,标本间要避免交叉污染,要注意同一标本先做免疫后做生化。
试剂的准备主要是第三代ELISA试剂,第四代试剂也已逐步推广,与第三代HIV-1/2试剂相比,检出时间提前3~9.1天,其优点在于可以同时检测抗原抗体,并缩短了窗口期检测时间。
选择试剂不但要考虑灵敏度、特异性和精密度,还要注意稳定性、简便性和安全性。
ELISA 法对比胶体金法检测血液中 HIV 抗体的结果分析
ELISA 法对比胶体金法检测血液中 HIV 抗体的结果分析摘要:目的分析ELISA法对比胶体金法检测血液中HIV抗体的结果。
方法选取2018年9月~2020年1月在我院进行血液HIV抗体检查患者84例作为研究对象,分别采用胶体金法检测和LISA法,并通过免疫印迹法确定,分析比较两组检测方法的特异性。
结果通过ELISA法检测,本次实验84例患者中有49例呈现阳性,假阳性10例,其假阳性率为11.90%。
经过胶体金法检测,本组84例患者血清中有39例呈阳性,7例成假阳性,其假阳性率为8.33%。
两组之间存在明显的差异性,具有统计学意义(P<0.05)。
结论 ELISA法综合准确性相对较高,因此在临床血清HIV抗体检测中,两种方法都可以使用,进而促使检验结果准确率的提升。
关键词:ELISA法胶体金法 HIV抗体Analysis of HIV antibody in blood by ELISA and colloidal gold assayAbstract: Objective To analyze the detection results of HIV antibody in blood by ELISA and colloidal gold.Methods eighty-four patients who underwent blood HIV antibodytest in our hospital from September 2018 to January 2020 were selected as study subjects. Colloidal gold method and LISA method were used respectively, and the specificity of the two detection methods was analyzed and compared by western blotting.Results By ELISA, 49 of the 84 patients were positive and 10 were false positive, with a false positive rate of 11.90%.By colloidal gold method, 39 of the 84 patients in this group were positive and 7 were false positive, with a false positive rate of8.33%.There was a statistically significant difference between the two groups(P<0.05).Conclusion THE comprehensive accuracy of ELISA method is relatively high, so both methods can be used in clinical serum HIV antibody detection, thus promoting the accuracy of test results.Keywords: ELISA, colloidal gold, HIV antibody现阶段,艾滋病已逐渐成为严重威胁人类健康的公共卫生问题之一。
采用ELISA方法检测HIV抗体的相关影响因素分析
采用ELISA方法检测HIV抗体的相关影响因素分析目的分析ELISA方法检测HIV抗体的相关影响因素,寻求提高ELISA方法检测HIV抗体准确性的科学方法。
方法将2012年1月-2013年12月本实验室在初筛检测中发现的初筛阳性标本23份,全部上送到市艾滋病确证实验室进行确证实验,对患者基本情况、使用试剂、标本状况、操作过程等影响检测结果的相关因素进行统计分析。
结果上送到市艾滋病确证实验室的23份初筛阳性标本,经过确证实验证实,有21份标本确证阳性,确证符合率91.30%,其余均为阴性,在采用ELISA方法检测HIV抗体的整个过程中,包括病人的基本情况、标本的采集、标本的保存、试剂的准备、样品的加入、酶标孔的孵育、酶标孔的洗涤、显色、结果判断等因素都会影响到检测结果。
结论要提高ELISA法检测HIV抗体的准确度,必须制定严格的标准操作程序并按照标准操作程序进行操作,每次检测都要加入外部质控品,绘制质量控制图。
标签:HIV抗体;ELISA法;影响因素分析酶联免疫吸附试验(ELISA)作为检测HIV抗体最为常用的一种方法,具有特异性强、灵敏度高、操作方便,血清或者血浆样品都可以检测,操作性非常好[1],不管是批量样品还是单个样品,都可以用该方法进行检测。
本文对ELISA 方法检测HIV抗体的相关影响因素进行分析,希望能够找到提高检测结果准确性的有效方法。
1 资料与方法1.1一般资料本院2012年1月-2013年12月一共检测3148份标本,其中23份标本初筛阳性。
1.2仪器设备酶标仪ST-360;洗板机ST-36W。
1.3试剂厂家北京万泰生物药业股份有限公司,有效期内使用。
1.4方法本实验室发现初筛检测阳性的标本,全部上送到市艾滋病确证实验室进行确证实验,对患者基本情况、试剂厂家、标本采集及保存、操作过程等影响因素进行统计分析。
2 结果上送到市艾滋病确证实验室的23份初筛阳性标本,经过确证实验证实,有21份标本确证阳性,其余均为阴性,确证符合率91.30%。
艾滋病病的抗体检测技术
艾滋病病的抗体检测技术艾滋病的抗体检测技术艾滋病是一种严重的传染病,由人体免疫缺陷病毒(HIV)引起。
为了及早发现和诊断HIV感染,抗体检测技术被广泛应用。
本文将介绍艾滋病的抗体检测技术。
一、ELISA检测技术酶联免疫吸附测定(ELISA)是最常用的艾滋病抗体检测技术之一。
该技术通过检测人体产生的特定抗体来判断是否感染了HIV。
ELISA测试通常包含两个步骤:首先,将被测试的血液样本与HIV抗原结合;然后,通过添加酶标记的抗体来检测是否形成了抗原-抗体复合物。
ELISA技术的优点是简单、快速、灵敏,但结果可能存在假阳性和假阴性的情况。
二、免疫层析试纸检测技术免疫层析试纸是一种简单、便捷的艾滋病抗体检测方法。
该技术通常以尿液或血液为样本,通过试纸上的抗体与被测样本中的HIV特异性抗体相互作用,从而读取结果。
免疫层析试纸检测技术运行时间短,结果易于解读,适用于快速筛查,但其灵敏度和特异性较ELISA技术稍低。
三、核酸检测技术核酸检测技术是一种直接检测HIV核酸的方法,可以早期发现感染者。
PCR(聚合酶链式反应)是最常用的核酸检测技术之一,它能够扩增HIV核酸的特定片段。
PCR方法的灵敏度高,可在感染后的早期阶段检测到HIV,但需要复杂的实验室设备和技术,并且成本较高。
四、抗原检测技术抗原检测技术是一种直接检测HIV抗原的方法。
抗原检测通常结合核酸检测,以提高诊断的准确性。
抗原检测技术通过检测患者体液中的HIV抗原来确定感染情况。
此技术的灵敏度高,且能够捕捉到感染的早期,但需详细的实验室操作和设备。
综上所述,艾滋病的抗体检测技术提供了快速、准确的检测手段,对于早期发现和干预HIV感染具有重要意义。
ELISA、免疫层析试纸、核酸检测和抗原检测等技术的应用不断完善,为我们提供了有效的工具来控制和防治艾滋病。
然而,需要注意的是,不同的技术在灵敏度、特异性和成本等方面存在差异,使用时应根据具体情况选择合适的技术。
艾滋病病毒抗体快速检测技术手册(2011年版)---精品管理资料
(United Nations Joint AIDS Programme)
PT:
能力验证(Proficiency Testing)
第一章人员要求…………………………………………1
第二章检测点的设置、要求与管理……………………3
第三章试剂选择…………………………………………5
否足量,特别应检查受检者信息与样品收集试管表面的标记是
否一致,注明样品采集时间。选择合适的室内(外)采血空
间,受检者坐(卧)于合适的位置,准备采血用具、皮肤消毒
用品、采血管及试管架、废弃物容器等。
4。2样品采集
样品应按试剂盒说明书的要求确定是采集末梢血或静脉
血.采血时要注意安全,应用一次性采血针和一次性真空采血
郝玲)和世界卫生组织驻华代表处(张岚,Connie Osborne,
Nicole Seguy)。
本《手册》编写工作联系人:姚均。
本《手册》自发布之日起实施,《手册》解释权属于中国
疾病预防控制中心。
艾滋病病毒抗体快速检测技术手册工作组
2011年4月20日
AIDS:
HIV:
RT:
ELISA:
STD:
HAART
2。3。6组织本省快速检测能力验证活动。也可分级实施,由
各地、州(市)艾滋病确证实验室负责、县级疾控中心艾滋病
筛查实验室协助,对HIV快速检测点进行培训和质量管理.
2。3.7统筹考虑提供阴阳性外部质控品,开展室内质控。
2。3.8各级卫生行政部门和疾病预防控制中心应制订切实可
行的现场督导计划,确定督导内容(参考附表5).
供艾滋病检测咨询点(PITC)、预防母婴传播(PMTCT)等场所。
ELISA试剂检测抗-HIV反应性结果分析
ELISA试剂检测抗-HIV反应性结果分析摘要】目的目前大多HIV初筛实验室采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行定性检测,当检测标本的吸光度值大于试剂盒设定的临界值时为阳性,反之为阴性。
对于强阳性和明显阴性的标本几乎不会错检,但是在检测临界值附近的弱显色反应的标本时可能出现假阳性结果,ELISA法操作过程中也存在一部分影响因素会导致出现假阳性;同时也要慎重低于临界值的阴性若显色反应标本,即假阴性反应,以免阳性标本漏检。
为此对ELISA测定抗-HIV假阳性和假阴性的发生率和可能导致假阳性影响因素进行了分析,旨在探讨减少假阳性和假阴性的方法,提高检测结果的准确性。
【关键词】人类免疫病毒抗体酶联免疫吸附试验获得性免疫缺陷综合征,又称艾滋病,是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的免疫缺陷性疾病。
HIV抗体的血清学诊断是目前最成熟最有效的和最易行的HIV感染分析方法。
一般在HIV感染后3~8周即可检测出来。
目前临床初筛实验室一般采用第三代ELISA法试剂检测抗-HIV:使用重组或多肽抗原制备的双抗原夹心法试剂盒,这种试剂可检测针对HIV抗原的所有抗体亚类,包括IgG、IgA、IgM、IgE、IgD,具有较高的敏感性。
对于初筛阳性的标本,送HIV筛查中心实验室和HIV确证实验室确证。
1 材料和方法1.1标本来源:从2012年8月至2013 年1月6个月我院门诊和住院患者12124的血液标本中,统计了抗-HIV检测S/CO值大于和接近临界值血清标本15份。
1.2实际与仪器:所用筛查试剂为国产均通过国家批批检,原理均为双抗原夹心法。
筛查试验用试剂(简称试剂A,批号为2012061012),复检试验按2009版技术操作规范要求:第一次复检仍用试剂A,第二次复检用另一厂家试剂(简称试剂B,批号为201206011);酶标仪:anthos2010型;洗板机:MW-12型。
试剂均在有效期内使用,仪器设备定期维护检验,室内质控均在控。
ELISA法检测HIV抗体的质量控制
酶 联 免 疫 法 ( LS 。 作 者通 过 多年 来的 艾 滋 病 实验 室检 测 质 量控 制 工作 , 结 了 E IA检 测 中各 环 节 的 注 意事 项 , 大 家 交 流 。 E IA) 总 LS 与
3加 样 操 作 注 意
6 显色是检测 中的最后 一步温育反应 , . 1 此时酶催化无色的底物生成 有色的产物 。反应 的温度和时间仍对检测结果有影响。O D底物液 P
受光照 会 白行 变色 , 色反应应避光进行 , T 显 而 MB底物液受光照 的 影响不大 , 可在室温中置于操作台上。
时反应板不宜叠放 , 以保证各板的温度都能迅速平衡 。
疾病 。自 18 年我国发现第一例艾滋病人后 , 从 95 艾滋病在我国蔓延 迅速 , 目前 已进入快速增长期。由于该病 目前尚无有效治疗方法 和 预防性疫苗, 因此防治形 势十分严峻 。 I H V感染的诊断是艾 滋病预防
控 制 工 作 的 重 要 组 成 部 分 ,通 过 检 测 HI 的 特 异 性 抗 体 ,可 确 立 V
时, 可再用 手工洗一遍 。洗不同厂家 的酶标板时 , 应注意及时调整吸 液头的下降高度和洗液量 , 以免因高度不适使冲洗针头卡住酶标板
21 . 按所用试剂盒说明书的要求 准备实验中需用的试剂 。从冰箱 中 取 出的试验用试剂应在室温平衡后使用 。有 时开封过试剂因密封不 严 , 出使用 时会 发现酶标板孔 条内凝集有 小水珠 , 等待水珠挥 取 要
HI V感染与否。
ELISA法检测HIV抗体需注意的影响因素
中国卫生检验杂志 2011年 6月 第 21卷 第 6 期
Ch inese Journal of H ealth Laboratory T echnology, Jun 2011; V ol 21 N o 6
经验交流
EL ISA 法检测 H IV 抗体需注意的影响因素
陈云钰
( 海南省三亚市疾病预防控制中心 , 海南 三亚 [ 关键词 ] EL ISA 法 ; 检测 ; 影响因素 R 512 . 91 [ 文献标识码 ] C [ 文章编号 ] 1004- 8685( 2011) 06- 1564- 02 572000)
而出现假阳性 [ 1] ; 浑浊或 有沉 淀的的 血清 样品 应先 离心 沉淀 后取上清液检测 , 避免对结果造成影响。短期 ( 1 周 ) 内进行检 测的样品可存放于 2 ~ 8 , 1 周以 上检 测的 样品 应存 放于 - 20 以下 , 尽量避 免血 清 样品 反复 冻融 使抗 体效 价降 低产 生假阴性结果。 3 加样 加样前应先将所 需微 孔板 条于 板架 上 , 必 须保 证板 条放 平 , 以免影响洗板机 的操 作。未 用完 的微 孔板 条须 放入 有干 燥剂的密封袋中 保存。为 了保 证加 样的 准 确性 , 加 样要 用定 期校正且准确度高的微量移液器 , 加样本 ( 或试剂 ) 时 , 应按规 定的量垂直加入 孔底 ( 吸 液后 , 将加 样枪尖 接触 容器 壁 , 去掉 可能形成的液体滴后再加入孔 中 ), 不要使吸 头碰到酶 标板孔 上的已包被的抗原 , 尽 量慢 吸快 放 , 避免 产 生气 泡 , 以保 证正 确的量值 , 并注意不可溅出 , 避免造成交叉污染。 当使用单通道加 样器 手工 加样 时 , 每 次应 更换 吸头 吸取 样本 , 做到一样一吸头 , 吸取不同 的液体 , 也要更换 吸头 ( 即使 是吸取标准品时 ) 。以免发 生污染 或交叉 污染 ( 假 阳性 ) 。用 滴瓶滴加试剂时 , 应先 将滴 瓶摇 匀并 挤去 第一 滴有 气泡 的试 剂后再滴加。试剂 显 色时 先 加 A 液 , 后加 B 液 , 二者 不 要颠 倒 , 前后加入的间隔时间不要超过 10 m in, 若把 A 液 和 B 液先 混和 , 再加样显色 , 需 要求 二者 等体 积混 合。加 样品 稀释 液、 酶结合物应用液、 底物 应用 液及 终止 液时 可用 定量 多道 加液 器 , 使加液过程迅速完成。为防止其 它杂物 掉入孔 内 , 加样后 要用不干胶或胶带纸封好酶标 板 , 防止水分 的蒸发 , 然 后进行 温育。封板膜不能重复使用 , 使用剩 余的不 干胶或 胶带纸 , 放 入备用塑料自封袋中封好。 4 温育 建议采用能够使反应液温度 迅速达 到平衡 的电热 恒温水 浴箱进行温育操作 , 并 将校 正过 的温 度计 插入 水中 校正 温度 为 37 , 如用恒温 箱温育 , 由于恒温箱的构 造使附设温 度计所 检测温度并非真正 酶标 板温 育的温 度 , 建 议放 温度 计于 酶标 板旁 , 保证受温育酶标 板附 近温 度为 37 。 不论采 用何 种方 法 , 都不可将反应板叠加放置 , 以 保证各 板的温 度都能 迅速平 衡。注意放置温育 的温度 和时 间应 严格 按 说明 书操 作 , 力求 准确。 5 洗涤 洗板在 EL ISA 检测中 是较 重要 的环 节 , 洗 板的 合格 与否
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医学信息2011年8月第24卷第8期Medical Information.Aug.2011.Vol.24.No.8临床医学善睡眠与休息条件、减少并发症发生、改善休闲娱乐活动场所设施、提供获取知识技能的机会、根据病情情况提供再就业机会等有助于改善病毒性脑炎伴精神障碍患者的生活质量水平状况。
1.4生活质量评估本文采用的生活质量评估是简化量表,分析指标为量表四个指标的得分,它们是生理、心理、社会关系和环境指标,得分越高提示生活质量越好[3]。
1.5统计分析采用SPSS18.0统计软件,计量资料采用(x ±s)表示,比较采用t 检验,P <0.05代表有显著性差异。
2结果经过治疗与护理后,两组患者症状得到不同程度的缓解,但是依据生活质量评分,治疗组的社会指标、心理指标、环境指标、生理指标都明显好于对照组(P <0.05),同时各指标得分从高到低依次是:社会指标、心理指标、环境指标、生理指标。
具体情况见表1。
表1两组患者生活质量评分对比(n=20,x ±s)指标对照组(n=20)治疗组(n=20)P生理指标10.96±2.3714.68±1.58<0.05心理指标12.06±2.3213.68±1.72<0.05社会指标12.68±2.4814.95±2.12<0.05环境指标11.45±2.0212.10±2.00<0.053讨论众所周知,很多病毒性脑炎所致精神障碍患者中年龄较大、文化程度低、有并发症和患病年限长的患者生活质量状况较差,提示了以整体为中心护理模式的重要性[4]。
同时病毒性脑炎所致精神障碍是一种没有医疗终结的疾病,需要政府和社会建立完善的医疗及生活保障体系,解除患者后顾之忧。
在此重要前提之下,重视患者的心理辅导和健康教育,切实改善其对生活质量的主观感受[5]。
参考文献:[1]刘庆武,肖水源.一般及特殊人群生活质量研究进展[J].郴州医学高等专科学校学报,2004,6(1):49-54.[2]Wai Kwong Tang ,C .M .Lum ,Gabor S,Ungvari .Health Related Quality of Life in Community-Dwelling Men with Pneumoconiosis[J].Respiration ,2006,73:203-208.[3]中华医学会精神科分会.中国精神障碍分类与诊断标准[M].第3版.济南:山东科学技术出版社,2001:164-168.[4]周小玲.新入院流浪精神病人的护理特点[J].中国民康医学,2008,10(20):2430.[5]陈君英.改革治疗组织管理模式的尝试[J].中华护理杂志2003,38(9):705.编辑/雅兰关于ELISA 方法检测HIV 抗体的几点体会潘细牙,刘玉琼,段宜恒(江西省分宜县人民医院检验科,江西分宜336600)收稿日期:2011-06-20近几年艾滋病在我省、我市正逐渐进入快速增长期,从2007年起新发病例不断上升,HIV 抗体检测标本数量也不断增加,如何保证检测结果的准确性,完善实验室质量管理体系,提高检测能力和质量日趋重要。
在检测工作中我们严格贯彻《全国艾滋病检测技术规范》…和《全国艾滋病检测工作管理办法》的要求,规范HIV 抗体的检测,确保工作质量,下面就用ELISA 方法做HIV 抗体初筛检测工作谈一谈自己的一些体会:1坚持长期的实验室室内质量控制是获得准确结果的基础HIV 抗体的检测结果事关重大,假阴性或假阳性结果都是极其有害的,它直接影响到实验室的声誉和艾滋病防治工作的开展甚至对患者的心理产生负面影响。
所以必须有好的质量控制程序,对影响实验结果的诸多因素进行控制,才能提供准确的检测报告。
经过几年的努力和尝试,我们已经建立了一套较为完整的艾滋病检测质量保证与质量控制体系,采取了有效的室内质控措施,把室内质控当作常规的检测工作来对待,质控品必须用OD 值的低值质控,OD 值范围大约在0.4-0.7之间,这样才不会因失控而使阳性标本漏网。
对质控血清的S /CO 值绘制质量控制图,并对发现的问题进行及时的分析和纠正。
如果一周只做一到三次试验质控可以"用即刻法"质控。
2全面充分的准备工作是开展检测的有力保障2.1艾滋病初筛检测试剂必须是经过国家食品药品监督管理局注册批准、批批检合格,在有效期内的试剂。
单位所选择的试剂为ELISA 试剂,符合要求,且从试剂的灵敏度、特异性、稳定性、简便性、安全性和经济性几个方面综合评价来购买的。
2.2为使操作仪器保持最佳工作状态,建立了仪器维护和校正的标准操作程序(SOP),并定期对仪器设备进行检定。
所要控制的仪器包括移液器,水浴箱,洗板机和酶标仪。
移液器:加样量一般为50μl 或100μl ,加样的准确性直接影响检测结果,可以利用称重法定期自行校准;水浴箱:经常检查水浴箱温度计所示的温度和水中实测温度是否一致,允许有±1℃的误差;洗板机:洗板后的残留液一般不超过2μl ,人工扣板时,垫纸不湿,每次使用完毕用蒸馏水清洗管道,定期检查管孔是否堵塞;酶标仪:做为规定强检的仪器,定期送同级或上级计量认证部门检定2.3标本的采集应尽量避免溶血,因红细胞破裂释放过氧化物酶物质可造成假阳性;加样时不能混入红细胞,否则也可造成弱阳性,尽量不使用抗凝血,抗凝不完全的标本因纤维蛋白原的干扰而造成假阳性;标本在冰箱中保存的时间不能过长,一般血清4℃冰箱5的荇染,不应与生化实验用同一管标本,如果是同一管标本应先做免疫后做生化。
3良好的血清学检测技术是实验获得成功和保证生物安全的关键HIV 抗体ELISA"1法初筛检测包括加样、温育、洗涤、显色、酶标仪读数几个步骤,操作不是十分繁琐,但每一步都需要检验人员认真、仔细,最终才得到准确的检测结果,同时还要保证实验室的生物安全,避免人为事故的发生。
加样:加样用微量移液器,按规定的量加入微孑L 板的1/3处,不要加在孔壁上部,注意千万不可溅出,不可产生气泡;每次加样做到一人一吸头,避免交叉污染,干吸头预先在血清中抽吸3次,使加样量准确。
有的试剂(如北京金豪试剂)需要样品稀释,一定要先加稀释液后加样本,加样后在微量振荡器上振荡30s 。
温育:要用封板膜封板,置37±1℃保证温育时间,可以放在水浴箱的隔板上,注意如果使用温箱一定将微孔板条放在湿盒内。
洗板:洗涤时各孔均需加满洗液,防止孔内有游离酶不能洗净。
使用洗板机应设定30-60s 浸泡时间。
各种试剂盒的洗涤液尽量不要混用,一定将板架放平,使洗板机上的每个放液和吸液纤孔都能一致地插入孑L 底,将孔内液体全部洗干,最后一次尽量扣干。
洗板结束后,必须立即进行下一步,不可使酶标板干燥。
避免长时间的中断实验步骤。
显色:加入显色液也应该使用移液器,保证显色的时间和温度。
5183医学信息2011年8月第24卷第8期Medical Information.Aug.2011.Vol.24.No.8临床医学酶标仪读数:所用TMB 显色系统,测定波长为450nm 、参考波长630am ,最好使用双波长检测,可以消除反应板上划痕手印的干扰。
同时注意反应板应用吸纸吸干后才能置酶标仪中比色,否则吸光度易出现负值或损坏滤光片。
且孔内不能有气泡。
不能触碰孔底部的外壁。
4记录保存是检测工作的重要依据实验原始记录应规范填写,所有实验的原始资料均应存档,并有专人负责妥善保存。
不得擅自修改和销毁。
记录保存期不少于十年。
以上是我近几年来从事H1V 初筛检测工作的一些体会,面对艾滋病疫情的严峻挑战,我认为作为一名基层的检验工作者要加强责任心、苦练基本功,切实提高HIV 抗体检测能力,使本地区HIV 抗体的初筛检测工作走向规范化,为艾滋病的防治提供及时、准确的检测依据。
参考文献:[1]全国艾滋病检测技术规范(2009版)[2]赵红胜.利用Excel 绘制室内质控图的警告线和失控线[J].现代检验医学杂志,2004,19:58.[3]许斌.ELISA 的质量管理.江苏省临床检验中心.编辑/雅兰提高护理质量促进护患信任罗玉梅,张玉琴(宁夏回族自治区人民医院,宁夏银川750021)摘要:患者对护理服务质量满意度是护理质量监控的首要目标。
提高护理服务质量,可有效地改善护患关系,促进护患信任。
我院通过《两书》实施,有效的提高工作效率,减少患者的损失。
进一步规范了质控体系,护患信任度得到明显提高,得到患者及上级管理部门的肯定,取得了一定的实效。
关键词:基础护理;质量监控;护患信任收稿日期:2011-06-20随着社会矛盾日益多元化,护理人员也经历着前所未有的考验,由于种种原因,人民群众对护理人员的信任度不断下降。
尽管卫生系统不断强化卫生队伍的建设和促进护患关系的改善,使护患关系有了一定的好转,但影响患者对护理人员信任的不利因素仍然存在。
因此,为了改善护患关系,提高患者对护理人员的信任度,维护护患双方的合法权益,我院护理部自2004年在原有各项护理质控标准和护理人员工作职责、制度的基础上出台了《护理管理手册》和《护理技能手册》并予以实施,在实施的过程中不断完善。
随着时间的推移,结合卫生部提出新要求,自2007年开始按照内容更细致、可操作性强的护士技术操作、业务能力、与患者沟通能力的要求《护士岗位技能训练50项考评指导》指导评判护理工作。
通过强化基础、提高技术、改善服务,努力做到"政府满意、群众满意、社会满意",取得了一定的实效。
1具体做法1.1制订考核标准和实施方案制度是落实各项工作的保障。
特别是《护理技能手册》第七章介绍了紧急突发事件的应急措施,并在叙述的基础上增加了图示,使广大参阅者能够清楚地了解应对各种突发事件的步骤,有效的提高工作效率,减少患者的损失。
围绕《护理管理手册》和《护士岗位技能训练50项考评指导》中技能操作流程、考核要点和言行规范,医院完善护理质控体系,护理部成立相应质控自查组,制定明确的考核标准,下发活动方案,并通过回访了解患者满意度。
两书全院护理人员人手一本,由各科室护士长负责落实学习,要求人人熟练掌握其内容。
护理部深入科室督导检查落实情况,每年分层次、分批考核的形式验收。
并针对护理工作中遇到的问题,护理部组织专题讨论、学习,完善护理管理制度、操作规程及考核标准。
以《护理管理手册》和《护士岗位技能训练50项考评指导》为指南,护士随时自训、自查、互训、互查。
1.2组织学习培训、严格考核落实护理部首先组织全院护士进行形象培训工程,从仪容仪表、电话礼仪、迎来送往的语言技巧和身体语言等方面规范护理服务行为。