胆汁酸测定试剂盒(循环酶法)标准化操作规程TBA-SOP

胆汁酸测定试剂盒（循环酶法）标准化操作规程

1 目的

规范实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。

2 授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。

3 适用范围本试剂适用于体外定量检测人血清或血浆中胆汁酸的含量。

4 检验方法

本试剂盒采用循环酶法测定胆汁酸的含量。

5 检验原理

本试剂采用酶分析法测定血清总胆汁酸。3α-羟基类固醇脱氢酶特异性作用于3α-羟甾族化合物，使之转化为相应的酮类固醇，反应中thio-NAD被还原为thio-NADH。通过在405nm波长处测定单位时间内吸光度的变化值，可以计算出样品中总胆汁酸的含量。

6 标本要求

6.1 样本为空腹患者血清。样本应及时离心分离，不得使用溶血或被污染的样本。

6.2 样本应避免微生物污染，在2℃～8℃可稳定数月。

7 试剂及配套品

7.1试剂来源

长春迪瑞医疗科技股份有限公司胆汁酸试剂盒（循环酶法）

7.2

7.3试剂的稳定性与贮存：

7.3.1 试剂在2℃~8℃条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期为12个月。

7.3.2 试剂开封后在2℃~8℃条件下可稳定30天。

8 实验仪器及性能指标

8.1 实验仪器

迪瑞CS系列全自动生化分析仪

8.2试剂性能指标

8.2.1 试剂空白：

试剂空白吸光度：A≤0.800。

试剂空白吸光度变化率：△A/min≤0.040。

8.2.2 分析灵敏度：测试1μmol/L被测物时，吸光度变化率（△A/min）＞0.0002。

8.2.3 线性范围：1μmol/L～180μmol/L；线性相关系数r≥0.9900；[1,36]μmol/L区间内，线性绝对偏差应不超过±7.2µmol/L；（36,180]μmol/L区间内，相对偏差不超过±15％。

8.2.4 准确度：比对试验：r≥0.9900；[1，36]μmol/L区间内，绝对偏差不超过±7.2μmol/L，（36，180]μmol/L区间内，相对偏差不超过±15%。

8.2.5 测量精密度：

重复性：CV≤5.0%。

批间差：R≤6.0%。

9 校准程序

9.1校准品来源

长春迪瑞医疗科技股份有限公司生产的临床化学校准血清

9.2校准品的组成：人血清

9.3校准品使用

9.3.1 小心打开瓶盖，避免内容物的任何损失；

9.3.2在20-25℃的室温下，准确量取5ml蒸馏水复溶1瓶校准血清；

9.3.3拧紧瓶盖，避光放置30分钟，使之完全溶解；

9.3.4轻轻混匀，确保溶液均一性。勿摇晃小瓶，避免泡沫产生；

9.3.5使用时，移取所需的体积后，把校准血清盖紧瓶盖放回冰箱中保存；

9.3.6复溶后的校准血清可用于手工测试，也可用于全自动生化分析仪

9.4校准品使用注意事项

9.4.1 若该复溶血清受细菌污染，将会降低许多成分的稳定性。

9.4.2 不同批号的校准血清不能交叉使用，因为批号于批号之间的赋值不同。9.4.3 请勿用嘴直接吸取试剂，避免接触皮肤、眼睛及粘膜，一旦接触，应立即用大量水冲洗。

9.5 校准程序

建议使用试剂盒配套的校准品，以纯化水和校准品进行2点校准测定。测定后仪器自动拟合成校准曲线。当试剂批号更换或质控失控时，需要重新校准。10 质量控制

10.1质控品来源

长春迪瑞医疗科技股份有限公司生产的临床化学质控血清(水平I和水平II) 10.2质控品组成：人血清

10.3质控品存贮

未复溶的校准血清在避光条件下，2～8℃可稳定至标签失效期。

复溶后校准血清在避光条件下，2～8℃可稳定7天；15～25℃可稳定1天；-20℃可稳定30天。 10.4质控品使用注意事项

10.4.1若该复溶血清受细菌污染，将会降低许多成分的稳定性。

10.4.2请勿用嘴直接吸取试剂，避免接触皮肤、眼睛及粘膜，一旦接触，应立即用大量水冲洗。

10.4.3 因批与批之间的质控血清赋值不同，所以不同批号的质控血清不能当做校准血清使用。 10.5 质量控制

建议使用迪瑞公司的质控品，进行质量控制。实验室应自行建立质控区间和限值。若质控值失控，每个实验室应采取纠正措施。 11操作程序 11.1试剂配制

试剂1和试剂2均为液体试剂，可直接使用。 11.2

11.3 样本测试步骤：

11.4计算方法

）校准液浓度（校准管样本管）＝

总胆汁酸浓度（L A A L /mol min

/min

//mol μμ⨯∆∆

11.5注意事项

11.5.1本品仅用于体外诊断。

11.5.2避免测试中途添加试剂。

11.5.3试剂和样本用量可根据不同仪器的要求按比例改变。

11.5.4测定过程中应保持恒温。

11.5.5试剂使用前需进行校准。

12结果判断

12.1 当样本中胆汁酸含量大于180μmol/L时，样本应用生理盐水稀释后再进行测定，计算结果时乘以稀释倍数。

12.2 人血清中胆汁酸含量的检测只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者的体症、病史以及其它的诊断项目、诊断手段进行综合判断。

13 参考区间

1～12 μmol/L

引用的参考值范围代表本法的期望值，仅供参考，建议各实验室验证这一参考范围或建立自己的参考值范围。

14 临床意义

人体总胆汁酸库日—日间是相对平衡的。每日胆汁酸主要从粪便排出，平衡是通过肝脏以胆固醇为原料进行的胆汁酸净合成实现的。当患有肝脏疾病和胆汁酸吸收作用损害时，随着溢出增加，血清胆汁酸浓度增高，这是肝病加重的反应。血清总胆汁酸测定常用于肝病的检查，在急性肝炎、慢性肝炎等各类病症中总胆汁酸有不同程度的升高。

15复检操作程序

按仪器使用说明书进行复查操作。

16方法局限性

16.1 检验结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

16.2 当样本中黄疸＞855μmol/L、甘油三脂＞2.8mmol/L、血红蛋白＞1.5g/L、抗坏血酸＞5.7mmol/L时可能会影响检测结果。

17 注意事项

样本、废液等有潜在生物传染性，操作者应遵守实验室安全操作规定，并按当地医疗废弃物、感染性废弃物、产业废弃物等规定处理废液。

18 个人防护

18.1 请把标本当作可能感染HIV、HBV、HCV等的危险物质处置。为了避免或减少相关的传染风险，请使用一次性手套。

18.2若本试剂误入眼内或口中、或接触到皮肤时，请迅速用水冲洗，必要时请