浑源黄芪地上部分与地下部分中黄酮类成分比较

浑源黄芪地上部分与地下部分中黄酮类成分比较

徐珍;李倩;刘亮亮;郭爱华

【摘要】目的:通过对山西道地药材浑源黄芪地上与地下部分黄酮类成分比较,为黄芪药材地上部分合理应用提供依据.方法:采取HPLC梯度洗脱技术,对黄芪中6种黄酮类成分同时进行分离、定量分析.结果:浑源黄芪地上部分与地下部分均含有6种黄酮类成分,只是含量上略有差异.地上部分总黄酮含量为0.7450 mg/g,地下部分为0.8859 mg/g,其中7,2′-二羟基-3′,4′-二甲氧基异黄烷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷在地上部分含量高于地下部分.结论:该结果为黄芪地上部分资源的开发利用提供参考依据.

【期刊名称】《山西中医学院学报》

【年(卷),期】2017(018)006

【总页数】4页(P27-30)

【关键词】浑源黄芪;地上部分;黄酮类成分;定性分析;定量分析

【作者】徐珍;李倩;刘亮亮;郭爱华

【作者单位】山西职工医学院,山西晋中030619;山西职工医学院,山西晋中030619;山西职工医学院,山西晋中030619;山西职工医学院,山西晋中030619【正文语种】中文

【中图分类】R285.5

黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根［1］。黄芪中含有多种重要的活性

成分，其中黄酮类成分具有免疫调节、抗损伤、抗突变、抗肿瘤、抑制动脉粥样硬化等活性［2］。

随着对黄芪深入研究，它不仅可供药用，还被开发为保健品、食品及化妆品等广泛使用，使得黄芪市场出现了供不应求的局面。

黄芪种植地域性广，但其中山西黄芪的种植方式和生长年限最接近传统野生资源，商品药材的性状几乎与野生黄芪无区别，但占用土地年限长，因根深采刨困难，提高了生长成本，故产量有限［3］。黄芪根入药时，大量地上部分被丢弃或焚烧，造成很大的药源资源浪费。

山西省浑源县是黄芪道地产品“正北芪”的原产地，素有“中国黄芪之乡”“正北芪之乡”的美誉。

课题组以浑源黄芪地上部分（茎、叶、种、秆）作为研究对象，以地下部分作为对比，对其中黄酮类成分进行定性、定量研究，旨在开发黄芪药材新的药用部位，为浑源黄芪地上部分科学合理的应用提供依据，进一步扩大黄芪药用资源的利用价值。

1 实验材料

1.1 实验仪器

Agilent 1200高效液相色谱系统（Agilent Chemstation色谱工作站、VDW 1314B紫外可见检测器、G1311A四元泵、G1316A柱温箱，美国安捷伦公司）；B-220型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）、XB120A型电子分析天平（上海

精密化学仪器制造厂）、TCQ-250型超声波清洗机（北京医疗设备生产二厂）。1.2 实验试剂

芒柄花素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品（购于上海永恒生物科技有限公司，批号为20120528、20120428）；芒柄花苷、毛蕊异黄酮对照品（购于成都曼斯特生物

科技有限公司，批号为13021808、13021808）；3-羟基-9，10-二甲基紫檀烷、7，2′-二羟基-3′，4′-二甲氧基异黄烷对照品（购于江苏永健医药科技有限公司，

批号为YJ150718、YJ150717），各对照品质量分数均大于98%。乙腈（美国Fisher公司，色谱纯）、纯净水（娃哈哈牌），甲醇等其余试剂均为分析纯。

1.3 实验药材

本实验所用药材由山西省道地药材——浑源黄芪药材种植基地提供，经山西医科

大学药学院白云娥教授鉴定为豆科植物蒙古黄芪的干燥根及地上部分（茎、叶、种、秆）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

流动相为乙腈（A）-水（B），体积流量 1.0 mL/min，Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），紫外检测波长 230 nm，柱温25 ℃，进样量20 μL ［4］。梯度洗脱条件见表1。

表1 梯度洗脱条件时间（m i n）流动相A（%）流动相B（%）0～8 2 0 8 0 8～1 5 2 0→3 0 8 0→7 0 1 5～3 0 3 0→4 3 7 0→5 7 3 0～4 0 4 3→6 0 5

7→4 0 4 0～5 0 6 0→1 0 0 5 7→4 0 5 0～6 0 1 0 0 4 0→0

2.2 配制对照品溶液

本实验采用多指标定量法对黄芪中6种黄酮类成分进行同时测定，故对照品应配

制成混合对照品溶液，即该溶液中含有含量已知的6种黄酮类对照品。具体配制

方法如下：精密称取对照品适量置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，由此，可得

到6种黄酮化合物各自的对照品储备液。然后每种储备液取适量，置于25 mL容量瓶中，甲醇定容，即制得混合对照品溶液（A）。各储备液浓度及混合对照品溶液中各成分浓度见表2。

表2 混合对照品溶液各成分浓度表编号名称对照品浓度（μ g/m L）混合对照品

中浓度（μ g/m L）1 芒柄花素 6 1 0.0 1 2.2 2 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 1 0 3 0.0 2 0 6.0 3 芒柄花苷 6 5 0.0 7 8.0 4 毛蕊异黄酮 6 7 0.0 2 6.8 5 3-羟基-9,1 0-二甲基

紫檀烷9 8 0.0 1 1 7.6 6 7,2′-二羟基-3′,4′-二甲氧基异黄烷 9 9 0.0 5 9.4

2.3 供试品溶液的制备

刘宗彬等［5］通过单因素实验考察黄芪黄酮最佳提取工艺条件为：颗粒细度

0.075～0.25 mm之间，超声20 min，料液比达到1∶15，乙醇浓度为80%。

取黄芪药材，粉碎，过80目筛，备用。精密称取黄芪地上部分、地下部分粉末各

5 g，放入锥形瓶（具塞）中，加15倍量的80%乙醇，超声20 min，提取2次，合并滤液，滤过，置于水浴锅上蒸馏浓缩至干，用甲醇将残渣溶解后定容至10

mL容量瓶中，振摇、混匀，即可。

2.4 标准曲线的制备

以对照品的浓度为横坐标（X），峰面积积分值为纵坐标（Y），绘制标准曲线，

可得线性回归方程。

本实验中作为横坐标的一系列对照品的浓度是将“对照品溶液的配置”中制备的6种对照品的储备液按照原溶液浓度的1倍、1/2倍、1/4倍、1/8倍、1/16倍、

1/32倍、1/64倍稀释，每个对照品制成7种不同浓度的溶液，分别用0.45 μm

的滤膜过滤，进样量20 μL，记录峰面积的积分值。6种对照品的线性回归方程结果见表3。

表3 对照品线性回归方程及其线性范围成分回归方程线性范围（μ g） r 2芒柄

花苷 Y=4 1 2 3 7 0 5 X+2 0 0 8 3 9 0.2 0～1 2.8 0 0.9 9 9 9毛蕊异黄酮葡萄糖苷 Y=2 4 1 6 9 5 6 X+3 0 0 3 1 2 0.6 0～1 9.2 0 0.9 9 9 0毛蕊异黄酮 Y=4 8 2 9 3 3 9 X+5 2 1 9 9 0 0.0 5～1.6 0 0.9 9 9 1芒柄花素 Y=6 2 8 5 8 9 0 X+5 8 1 3 2 2 0.6 0～1 9.2 0 0.9 9 9 3 3-羟基-9,1 0-二甲氧基紫檀烷 Y=1 3 2 9 0 7 2 4

X+1 2 1 5 1 8 4 0.1 0～3.2 0 0.9 9 9 3 7,2′-二羟基-3′,4′-二甲氧基异黄烷 Y=1 1 8 3 5 9 9 3 X+2 4 6 2 0 0 8 0.1 0～3.2 0 0.9 9 9 1

6种对照品在各自的线性范围内都表现出良好的线性关系。