培养基的配方

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营养琼脂(普通琼脂)

成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤)100毫升

琼脂(视天气,琼脂质量而定)

制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。

用途:作普通琼脂平皿。

血琼脂平板(BA)

制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。

用途:1.一般棉拭子均接种此培养基。

2.尿液,脓液

3.分离细菌标本用。

基础培养基(肉膏汤BB)

成份:蛋白胨10克牛肉膏5克

氯化钠5克水1000毫升

制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。

用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。

2 作普通琼脂斜面。

血液培养基(大管肉汤培养基)

成份:1 新鲜牛肉浸液1000毫升

2 PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕)1g% 1毫升

3 MgSO

4 [相当于0.493/100毫升] 49.3% 1毫升

4 枸椽酸钠0.3g

制法:1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。

2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。用途:作血,骨髓培养用。

肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)

成份:蛋白胨10克乳糖10克

氯化钠5克琼脂25(22)克

水1000毫升2%伊红溶液20毫升

0.5%美兰溶液20毫升

制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。(高压以后方可再加乳糖)

用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。

1

罗文斯坦培养基

成份:磷酸二氢钾2.4克硫酸镁0.24克

枸椽酸钠0.6克天门冬素3.6克

纯甘油(丙三醇)12毫升水600毫升

马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升(约3公斤)

2%孔雀绿水溶液20毫升

制法:1 除鸡蛋外(还有孔雀绿)。可将其它物品称好,放入大三角瓶包扎好,高压灭菌。

2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟,灭菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。

3 将各成份按比例配好,分装每管约5毫升。

4 间歇灭菌第一次90℃1小时,第二次80℃半小时,第三次80℃半小时(或放85℃烤箱内连续二次)。

质控标准:1 灭菌试验合格。

2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。

用途:作结核分枝杆菌培养用。

结核半固体培养基

成份:磷酸氢二钠19克硫酸镁0.6克

磷酸二氢钾2.5克天门冬素5克

1%孔雀绿1.5克甘油20毫升

吐温80(10%)5毫升水1000毫升

枸椽酸钠2.5克动物血清100毫升

琼脂1.5克(80小时用甲醇去脂)

1%孔雀绿0.78毫升吐温80(10%)5毫升

加动物血清100毫升

制法:1 除血清外将上述药品均称好,放入煮沸溶解,调PH7。2

2 分管(每管约10毫升)包扎好,高压,121℃半小时灭菌。

3 待冷后无菌法加无菌血清(绵羊血或兔血)每管约1毫升备用。

4 去除琼脂方法:取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封,放37℃温浴80小时,每天摇动一次,冷却后到时取出用滤纸过滤,待琼脂自然冷却后备用。

质控标准:1无菌实验合格。

2琼脂硬度合适而清亮。

3接种标准结核杆菌用,强度合适即可用。

用途:培养结核杆菌用。

亚碲酸钾血琼脂平板

成份:琼脂基础100毫升10%葡萄糖2毫升

1%亚碲酸钾4.5毫升绵羊血10毫升

制法:1将琼脂基础溶解好,加入羊血。

2马上加热使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚碲酸4.5毫升混合后倒入无菌平板,

2

凝固后存冰箱备用。

质控标准:接种白喉杆菌生长良好,其它革兰氏阴性菌均抑制生长。

用途:供培养及鉴别白喉杆菌用。

米培养基

成份:白米20克水1000毫升

琼脂20克吐温80 10毫升

制法:1将20克米加水200毫升煮沸45分钟,煮时将容器盖好。

2用纱布过滤,只要米汤,不要饭,加水至1000毫升。

3加琼脂20克,吐温-80 10毫升煮溶,分装中型管(每管约3毫升),包扎好,高压,121℃半小时,消毒备用。

质控标准:1灭菌。

2要求清亮。

3接种白色念珠菌17-24小时生长良好,并产生厚膜孢子。

用途:培养白色念珠菌用。

蛋白胨水培养基

成份:蛋白胨1克氯化钠0.5克

水加至100毫升PH调至7.8

制法:把以上各物称好溶于水,调节PH7.6分装消毒备用。

质控标准:1 放置37℃无菌生长。

2 接种大肠杆菌24小时生长良好。

3 可作中国兰平板基础液。

可作靛基质基础液(作此试验需要色氨酸蛋白胨)。

血培养基

成份:蛋白胨10克牛肉膏5克

氯化钠5克葡萄糖3克

枸椽酸钠3克MgSO4。7H2O 20毫升

0.5%PABA 10毫升酵母浸液10毫升0.2克(2%过滤)

*酚红0.4% 6毫升水1000毫升

琼脂0.5克

*:作大BB,小BB时,不要加酚红和琼脂。

制法:1。除PABA、硫酸镁、酚红外均称好煮化调PH7.4

2。调好PH后再加酚红。

3。硫酸镁、PABA另外无菌再加入(亚细,小BB)

沙氏培养基

成份:蛋白胨1克水100毫升

琼脂1.5克(琼脂粉1克%)葡萄糖或麦芽糖4克

3

制法:1将上述物质称好,放入水中煮沸溶解(不必调PH即有5左右)分中号试管(约4毫升)包扎,高压115℃20分钟。

2 趁热斜好,凝固备用。

质控标准:1无菌试验合格。

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