穿心莲内酯的提取分离及鉴定
穿心莲中穿心莲内酯的提取
穿心莲中穿心莲内酯的提取摘要：从药用植物穿心莲中提取穿心莲内酯。
150克穿心莲粗粉甲醇回流提取，水沉去杂质，二氯甲烷脱酯,活性碳脱色，结晶得穿心莲内酯精品1.5克，收率为1%，其含量为98.5%。
关键词：穿心莲；穿心莲内酯；提取工艺Abstract：Withdraws the Andrographis Paniculta lactone from themedicinal plant Andrographis Paniculta．Uses the methyl alcoholbackflow to withdraw，the water sinks ，the methylenechloride escapes the ester，the activated carbon decolorizes，thecrystallization results in the Andrographis Paniculta lactonehigh-quality goods 1.5 grams，the returns-ratio is 1%, its content is98.5%．Key word：Common Andrographis Herb ，Andrographolide ，Extract method1．前言穿心莲为爵床科穿心莲属植物，药用叶或全草，秋初茎叶盛时采割，晒干。
在中药里归为凉性药物。
穿心莲在亚洲，几个世纪以前就用于治疗胃肠道和呼吸道感染、发热、疱疹、咽喉痛和各种细菌性感染。
在中医里，穿心莲是一种治疗感冒的重要草药，它用于退热、驱毒[1]。
穿心莲不仅能抑HIV-1，还能抑制HIV-1对细胞的毒性和在细胞间的传播，从多途径抑制HIV-1，因而能防止HIV-1抗药性突变的形成。
穿心莲价格低廉，且经过修饰的穿心莲内酯衍生物具有更强的抗HIV-1活性[2]。
因而穿心莲及其衍生物用于艾滋病的治疗具有广阔的前景。
穿心莲内酯的提取分离鉴别与
穿心莲内酯的提取分离鉴别与亚硫酸氢钠加成物的制备穿心莲系爵床科植物穿心莲Andrographis Paniculata （Burm.f.）Ness的全草。
主产于我国南方各省，具清热解毒、抗菌消炎、消肿止痛功能，用于治疗急性菌痢、肠胃炎，感冒发热、咽喉炎、尿路感染等。
穿心莲中含有多种苦味素，属二萜类化合物，主要为穿心莲内酯、新穿心莲内酯、脱氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯等，前二者是穿心莲抗菌消炎的主要有效成分。
据报道，穿心莲内酯能抑制肺炎球菌、甲链球菌及卡那球菌。
对细菌性痢疾，上呼吸道感染、扁桃体炎等有显著疗效。
临床上将穿心莲内酯制成亚硫酸氢钠加成物、丁二酸半酯的钾盐或磺酸钠衍生物，以增加它们在水中的溶解度，用于制备浓度较高的注射剂，提高疗效。
一、实验目的：1．掌握从穿心莲中提取分离穿心莲内酯的原理和操作方法；2．熟悉去除叶绿素的方法；3．熟悉α,β-不饱和内酯类成分的识别反应与薄层鉴定；4．了解穿心莲内酯亚硫酸氢钠加成物的制备。
二、仪器与试药（一）仪器RE-52旋转蒸发仪 SHB-循环水式多用真空泵 HHS型电热恒温水浴锅超声提取器玻璃仪器气流烘干器圆底烧瓶（50mL） ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱移液管（10mL、5mL）（二）试药穿心莲叶粗粉 80％乙醇活性炭氯仿 95％乙醇中性氧化铝柱无水乙醇中性氧化铝色谱柱（1.8 cm×28 cm）蒸发皿硅胶H-CMC-Na板正丁醇穿心莲内酯、脱氧穿心莲内酯及新穿心莲内酯对照品亚硫酸氢钠异羟肟酸铁盐酸羟胺氢氧化钾盐酸三氯化铁试液亚硝酰铁氰化钠氢氧化钠三、穿心莲中主要的有效成分：表8－1 黄芩中主要成分的物理性质此外，穿心莲还含有高穿心莲内酯、穿心莲烷、甾醇类、黄酮类、甾体皂苷、糖类、叶绿素和缩合鞣质等。
穿心莲内酯 新穿心莲内酯 脱氧穿心莲内酯 脱水穿心莲内酯四、实验原理：1．穿心莲中的内酯类成分易溶于甲醇、乙醇、丙酮等溶剂，故利用此性质选用乙醇提取；2．穿心莲中含有大量叶绿素，可用活性炭脱色法除去叶绿素杂质；3．利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯在氯仿中溶解度不同，初步将二者分离；4．利用穿心莲内酯、脱氧穿心莲内酯及新穿心莲内酯结构上的差异，而造成的极性不同，用氧化铝柱分离；5．将穿心莲内酯制成亚硫酸氢钠加成物以增加其在水中的溶解度，用于制备注射剂。
穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定
天然药物化学设计试验题目：穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定学生：学号：院（系）：生命科学与工程学院专业：药物制剂指导教师：2011年12月30日天然药物化学课程实验任务书一、题目：穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定二、实验任务1.查阅文献资料并写出所选药材化学研究进展的文献综述2.设计实验方案并进行可行性分析（方案应包括目的意义，设计原理、流程、实验方法、时间安排、需要的仪器与试剂）3.对实验材料进行性状、显微和理化鉴定4.完成穿心莲内酯单体化合物的分离及结构鉴定，鉴定数据应包括熔点、旋光度、紫外图谱。
5.对所得数据进行分析6.完成实验报告并提交少量穿心莲内酯样品。
三、实验要求1.实验中要求学生不完全依赖现成条件，能在教师指导下自己创造一些条件完成实验。
2.实验方法力求创新。
3.目的物的纯度要求用薄层层析法和熔点的测定数据说明；4.本题目要求2-3名学生配合完成。
四、实验报告内容1.题目2.实验目的3.基本原理4.实验所用试剂、仪器的型号及生产厂家5.分离方法创新之处6.自制或创造了那些实验条件条件7.实验流程及操作方法8.结果与分析9.结论10.在所完成实验的基础上提出一个新的研究课题11.合理化建议穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定一、文献综述1、成分来源：为爵床科植物穿心功Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees的地上部分，主产广东、福建。
结构及化学成分：穿心莲内酯的结构式[中文名称] 穿心莲内酯[别名] 穿心莲乙素、熊耳内酯[分子式] C20H30 O5[分子量] Mw＝350.45[ 熔点 ] 229-232℃[物理性质] 斜方棱形或片状结晶（乙醇或甲醇），无臭, 味极苦,穿心莲内酯在水中的溶解度非常小（几乎不容），易溶于丙酮、甲醇、乙醇。
比旋度[A]2 126. 6? 2b( 冰醋酸)[药理作用] 穿心莲内酯为天然植物穿心莲的主要有效成份，具有祛热解毒，消炎止痛之功效，对细菌性与病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊疗效，被誉为天然抗生素药物。
穿心莲内酯的提取分离及鉴定
穿心莲内酯的提取分离及鉴定2011级16班摘要：穿心莲为解毒消炎类临床常用药，穿心莲内酯是中药穿心莲的主要有效成分，分子式C20H30O5，白色方形或长方形结晶，味极苦，难溶于水易溶于乙醇、甲醇等。
利用乙醇提取方法、超声、回流、旋转蒸发浓缩方法对穿心莲内酯进行提取分离以及纯化，使用TLC法对其鉴别，可得到纯度较高的穿心莲内酯。
关键词：穿心莲、穿心莲内酯、超声提取法、乙醇提取法、TLC鉴别Isolation & Identification of AndrographolideABSTRACT:Clinical commonly used medicines, creat for detoxification counter Andrographolide is the main effective component, Traditional Chinese medicine (TCM) andrographis formula C20H30O5, white square or rectangle crystal, taste bitter, soluble in water, soluble in ethanol，methanol, ing the ethanol extract method, ultrasound, reflux, rotary evaporation enrichment method to extraction separation and purification of Andrographolide, using TLC method for the identification, can get high purity Andrographolide.KEY WORDS:Andrographis paniculata；Ultrasonic extraction；Andrographolide；alcohol extraction；Thin layer chromatography (TLC)穿心莲为常用中药，来源于爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata（Burm. f.）Nees.的干燥地上部分。
高效液相色谱法脱水穿心莲内酯的含量测定
高效液相色谱法脱水穿心莲内酯的含量测定高效液相色谱法脱水穿心莲内酯的含量测定随着科学技术的进步，人们对于天然药物的认识越来越深入。
穿心莲是一种传统中药材，具有良好的保健功效。
其中的有效成分内酯类物质，被广泛应用于中药的制备中。
在穿心莲内酯的提取、制备过程中，更需要准确地测定样品的内酯含量，以保证产品质量和安全性。
为了达到从样品中高效、准确测定内酯含量的目的，常常使用高效液相色谱法（HPLC）进行分析和检测。
下面将对HPLC法进行详细介绍。
HPLC法的基本原理HPLC法是一种高效、高精密度并且具有高灵敏度的分析方法。
在HPLC分析过程中，采用液相色谱柱对样品进行分离、纯化，再通过检测器对样品进行测定。
其中，可选用的柱和检测器是非常多样化的，不同的柱和检测器可适用于不同的样品和检测目的。
在脱水穿心莲内酯的含量测定中，可以选择烷基或芳香基取代的正相和反相柱，这两种柱分别可用于正相和反相分离，用来分离和检测疏水性或亲水性物质。
而检测器可选择紫外-可见光检测器和荧光检测器等。
这些检测器对于内酯类物质具有比较高的检测灵敏度，因此可用于对内酯含量进行测定。
HPLC法的具体操作步骤下面将介绍HPLC法的具体操作步骤：1. 样品准备：取穿心莲提取物5.0 mL置于100 mL烧结瓶中，加入0.2 mol/L氢氧化钠溶液(5 mL)，加入氢氧化钠溶液数字分别为10、20、40、80、120、160，各5毫升。
标准品的准备，将内酯标准品称取精确的10 mg，用甲醇稀释至100 mL，最后得到内酯标准溶液，将其分别稀释5倍、10倍用于检测。
2. 加热：将上述烧结瓶放入加热水浴中，在90℃恒温条件下反应2 h。
冷却，取出；加入冷离心管中。
3. 萃取：用pH=3.5磷酸缓冲液提取，加入萃取液1 0 mL，振荡1 h，离心10 min，取上清液备用。
4. 柱前处理：取上清液4.0 mL加入1 mol/L HCl调节pH到2.0，然后用微孔过滤膜过滤，取2.5 mL待用。
穿心莲内酯提取工艺
穿心莲内酯提取工艺1 设备与仪器I．I 设备多功能提取罐1．2 仪器：Agilent-1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)； Hypersil ODS 色谱柱250×4.6mm，5 7 m ；TV-1221型紫外-可见分光光度计，北京普析制造；Sartorius BS210S电子天平(德国塞多利斯股份公司)；ZF-2型三用紫外仪(上海安亭电子仪器厂)；超声波清洗器 (上海科导超声仪器有限公司)2 提取工艺2．1 工艺：① 粉碎：取穿心莲叶，粉碎机上安装孔径为8ram的筛网粉碎成粗粉。
②提取：穿心莲粗粉用4倍量95 乙醇回流提取两次，第 -次2小时，第二次1．5小时。
合并回流液，滤过，回收乙醇浓缩至每 lml含2g药材．冷却10℃-20℃，静止12小时析出结晶，滤取结晶物。
③ 重结晶：结晶物加入lO-15倍量的95%乙醇(以结晶物重量计)，搅拌溶解，加0.5 活性炭(以结晶物重量计)加热回流3O分钟，过滤，滤液回收乙醇，静止l2小时以上，滤取结晶物。
④ 干燥：结晶物在50-70℃ 减压干燥6-8小时。
⑤ 粉碎：干燥物经100目筛粉成细粉。
⑥ 检测水份，含量合格后包装入库。
2．2 工艺研究：根据穿心莲内酯L2]的化学性质，在沸乙醇中溶解，在甲醇、乙醇中略溶，在水或乙醚中不溶。
我们选择用不同浓度的乙醇做溶媒回流提取穿心莲内酯考察对回流提取时间、提取次数对产品收率的影响。
2．2．1 提取次数的考察：穿心莲粗粉(检测含量)。
称取六份，每份 lkg，分成三组，分别加入4倍量(以药材重量计)95 乙醇，第-组回流提取-次，第二组回流提取两次，第三组回流提取三次。
每次提取时间 2小时，分别合并提取液，回收乙醇，浓缩至500ml，测定体积做为储备液。
① 出膏率的测定精密吸取储备液10ml于恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105℃干燥至恒重，移置干燥器中冷却0.5小时，称重，计算即得。
② 含量测定将上述储备液冷却至l0-20℃ ，静止12小时以上，有结晶析出，滤取结晶物于6O-7O℃ 减压干燥6-8小时，干燥物称重，按照WS-10001-(HD-0971)-2002穿心莲内酯含量测定项下的方法测定含量，并计算药材中穿心莲内酯的转移率。
穿心莲内酯的提取
穿心莲内酯的提取、分离、鉴定及亚硫酸氢钠加成物的制备穿心莲为爵床科植物穿心莲(Andjrographis panicalata (Burmf)Ness)的全草或叶。
具清热解毒，凉血消肿作用，用于治疗急性菌痢、胃肠炎、咽喉炎、尿路感染等。
穿心莲中含有多种苦味素，属二萜类化合物，主要为穿心莲内酯、脱氧穿心莲内酯、高穿心莲内酯、新穿心莲内酯、穿心莲烷、穿心莲酮等。
其中穿心莲内酯、新穿心莲内酯是穿心莲抗菌消炎的主要有效成分。
鉴于穿心莲内酯在水中的难溶性，将穿心莲内酯进行磺化、亚硫酸氢钠加成和琥珀酸酐酯化等水溶性衍生物合成研究，克服了穿心莲内酯不溶于水的特性。
穿心莲中主要成分的结构及其性质1．穿心莲内酯(andrographolide)：C 20H 30O 6，又称穿心莲乙素，为无色方型或长方型结晶，mp 230~232℃，[α]D 20 -126。
味极苦，可溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶，微溶于氯仿、乙醚，难溶于水及石油醚。
2．脱氧穿心莲内酯(14-deoxy-andrographolide)：C 20H 30O 4，又称穿心莲甲素，为无色片状或长方型结晶， mp l75~176.5℃，[α]D -36(1％，氯仿)。
味稍苦，可溶于甲醇、乙醇，丙酮、吡啶、氯仿、乙醚、苯、微溶水。
3．新穿心莲内酯（neo-andrographolide )：C 26H 40O 8，又称穿心莲丙素、穿心莲新苷，为无色柱状结晶，mp l67~168℃。
无苦味，可溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶，微溶于氯仿和水，不溶于石油醚。
O OCH 2OH HOHO O O CH 2OH HOOO CH 2O-Glu穿心莲内酯 脱氧穿心莲内酯 新穿心莲内酯 OOCH 2OH HOHONa一、实验目的1. 掌握穿心莲内酯类二萜化合物的理化性质和提取分离方法。
2. 学习氧化铝柱色谱的原理和操作方法。
3. 通过穿心莲内酯亚硫酸氢钠加成，掌握使脂溶性产物转化为水溶性产物的一种方法。
zuixin版穿心莲内酯的提取分离鉴别工艺
乙醇)，熔点 204℃，易溶于乙醇、丙酮，可溶于氯仿，微溶于苯，几乎不溶于水。 4.去氧穿心莲内酯：可溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶和氯仿，可溶于苯和乙醚的 无色针状结晶（乙醚-轻石油醚），无色片状结晶（丙酮、乙醇或氯仿），属于 萜类物质，分子量为 334.44。 一、实验目的及要求
1.学习二萜类化合物的提取分离方法。 2.学习二萜类化合物的鉴别方法 二、实验原理 1.利用穿心莲内酯易溶于沸乙醇的性质来进行分离提取； 2.穿心莲中含有大量叶绿素，可用活性炭脱色除去叶绿素类杂质； 3.利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯在乙酸乙酯中溶解度不同从而将二者分 离。 三、实验步骤 1.穿心莲叶的前处理 取穿心莲叶药材净选，清洗后进行干燥，粉碎，过 20 目筛，备用。 2.醇提取 称取穿心莲叶粗粉 30g 用 6 倍量 80%乙醇回流提取两次（温度为 80℃），第 一次 2 小时，第二次 1.5 小时。合并回流液，滤过，回收乙醇浓缩至每 ml 含 2g 药材，冷却 10℃-20℃，静置 12 小时析出结晶，滤取结晶物。
穿心莲中主要有效成分的理化性质： 1.穿心莲内酯：分子式 C20H30O5，本品为二萜类内酯化合物，白色方棱形或片状结 晶 （乙醇或甲醇），无臭，味苦，均难溶于水，通常仅能口服给药。在沸乙醇 中溶解，在甲醇或乙醇中略溶，极微溶于氯仿，在水或乙醚中几乎不溶。熔点 230～ 231℃，与碱性 2% 3,5－二硝基苯甲酸试剂，显紫红色，异羟肟酸铁反应呈阳性。 2.新穿心莲内酯：分子式 C26H40O8，无色柱状结晶,无苦味，熔点 167～168℃，沸 点 668.1 °C，密度 1.27 g/cm3，可溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶，微溶于氯仿、 水，不溶于乙醚、石油醚。 3.脱水穿心莲内酯：分子式：C20H28O4，分子量：332.42，无色针状结晶(30%或 50%
穿心莲内酯提取精制理化性质鉴定
无色方形或长方形结晶，味极苦。mp.230～231℃，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶中，微
溶于氯仿、乙醚、难溶于水、石油醚、苯。
2．新穿心莲内酯(neoandrographolide) 又称穿心莲丙素、穿心莲新苷。分子式 C26H40O8，
分子量 480.58。无色柱状结晶，无苦味。mp.167～168℃，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶
醚、苯中，微溶于水。
22.5 D
4．脱水穿心莲内酯(dehydroandrographolide) 分子式 C20H28O4,分子量 332.42。无色针
状结晶（30％或 50％乙醇），mp.204℃。易溶于乙醇、丙酮，可溶于氯仿，微溶于苯，几不
溶于水【2】。
15
HO
O
16
13
O
O O
O O
O O
11 20
2、叶绿素除用活性炭吸附法去除外，还可采用哪些方法去除？3、穿心莲总内酯的分
3、离可采用哪些方法？试比较各种方法的优缺点。
4、根据穿心莲内酯类成分的结构，试判断其极性的强弱，在进行吸附薄层色谱时其 Rf
值大小如何？ 5、Legal 反应和 Kedde 反应的机理是什么？什么样的结构才有阳性反应？
【摘要】目的：探讨穿心连内酯的提取工艺。方法：以穿心莲内酯为检测指标，测定其含量。
0.16
试剂
穿心莲内酯精制品 穿心莲内酯标准品
原点到样品圆心距离 /ml 5.5 5.5
原点到前沿的距离 /ml 4.5 4.4
相对应的 Rf 值
0.82 0.80
穿心莲粗粉提取穿心莲内酯产率为 0.16/30X100%=0.53% 。 5 讨论
5.1 穿心莲内酯类化合物为二萜类内酯，性质极不稳定，易氧化、聚合而化。因此提取 所用的穿心莲应是当年产的新药材，并且要未受潮变质的茎叶部分，否则内酯含量明显下降 至极低，难以提取得到。
穿心莲内酯的提取分离鉴别与
穿心莲内酯的提取分离鉴别与亚硫酸氢钠加成物的制备穿心莲系爵床科植物穿心莲Andrographis Paniculata （Burm.f.）Ness的全草。
主产于我国南方各省，具清热解毒、抗菌消炎、消肿止痛功能，用于治疗急性菌痢、肠胃炎，感冒发热、咽喉炎、尿路感染等。
穿心莲中含有多种苦味素，属二萜类化合物，主要为穿心莲内酯、新穿心莲内酯、脱氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯等，前二者是穿心莲抗菌消炎的主要有效成分。
据报道，穿心莲内酯能抑制肺炎球菌、甲链球菌及卡那球菌。
对细菌性痢疾，上呼吸道感染、扁桃体炎等有显著疗效。
临床上将穿心莲内酯制成亚硫酸氢钠加成物、丁二酸半酯的钾盐或磺酸钠衍生物，以增加它们在水中的溶解度，用于制备浓度较高的注射剂，提高疗效。
一、实验目的：1．掌握从穿心莲中提取分离穿心莲内酯的原理和操作方法；2．熟悉去除叶绿素的方法；3．熟悉α,β-不饱和内酯类成分的识别反应与薄层鉴定；4．了解穿心莲内酯亚硫酸氢钠加成物的制备。
二、仪器与试药（一）仪器RE-52旋转蒸发仪 SHB-循环水式多用真空泵 HHS型电热恒温水浴锅超声提取器玻璃仪器气流烘干器圆底烧瓶（50mL） ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱移液管（10mL、5mL）（二）试药穿心莲叶粗粉 80％乙醇活性炭氯仿 95％乙醇中性氧化铝柱无水乙醇中性氧化铝色谱柱（1.8 cm×28 cm）蒸发皿硅胶H-CMC-Na板正丁醇穿心莲内酯、脱氧穿心莲内酯及新穿心莲内酯对照品亚硫酸氢钠异羟肟酸铁盐酸羟胺氢氧化钾盐酸三氯化铁试液亚硝酰铁氰化钠氢氧化钠三、穿心莲中主要的有效成分：表8－1 黄芩中主要成分的物理性质此外，穿心莲还含有高穿心莲内酯、穿心莲烷、甾醇类、黄酮类、甾体皂苷、糖类、叶绿素和缩合鞣质等。
穿心莲内酯 新穿心莲内酯 脱氧穿心莲内酯 脱水穿心莲内酯四、实验原理：1．穿心莲中的内酯类成分易溶于甲醇、乙醇、丙酮等溶剂，故利用此性质选用乙醇提取；2．穿心莲中含有大量叶绿素，可用活性炭脱色法除去叶绿素杂质；3．利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯在氯仿中溶解度不同，初步将二者分离；4．利用穿心莲内酯、脱氧穿心莲内酯及新穿心莲内酯结构上的差异，而造成的极性不同，用氧化铝柱分离；5．将穿心莲内酯制成亚硫酸氢钠加成物以增加其在水中的溶解度，用于制备注射剂。
穿心莲内酯的提取及其衍生物的制备工艺
穿心莲内酯的提取及其衍生物的制备工艺李玉山【摘要】目的:提取纯化穿心莲内酯及制备其衍生物.方法:通过对川产穿心莲提取工艺的比较研究,以乙醇浓度、提取温度、料液比为影响因素,采用球面对称设计优化了提取工艺,根据穿心莲内酯理化性质,设计出最优纯化工艺路线,得到穿心莲内酯精品;莲必治的制备主要考察了物料比和反应液酸碱度的影响;喜炎平的制备主要对纯化工艺进行了优化;穿琥宁的制备以原料配比、溶剂用量、反应温度和时间为影响因素,采用L9(34)正交设计优化了最佳合成工艺;炎琥宁的制备以穿琥宁为原料,以溶液酸碱度、反应温度和时间为影响因素,采用均匀设计优化了合成工艺.结果:穿心莲最佳提取工艺为:90％的乙醇以4倍(mL·g-1)的料液比,在65℃下提取,在此工艺下穿心莲内酯的得率为21.5％,含量为17.8％;莲必治的制备中,穿心莲内酯与亚硫酸氢钠质量比为1∶1.8为宜,反应液pH值控制在8反应很完全;喜炎平的制备反应中应控制好浓硫酸的加入速度,磺化反应后以无水乙醇除盐;最佳工艺条件下穿琥宁得率为130.6％,含量为99.2％;炎琥宁在最佳工艺条件下得率为98.2％,含量为98.6％.结论:在提取纯化穿心莲内酯的基础上,制备了穿心莲内酯的内酯系列衍生物,工艺稳定可行,为综合利用穿心莲提供依据.【期刊名称】《世界科学技术-中医药现代化》【年(卷),期】2016(018)001【总页数】7页(P94-100)【关键词】穿心莲内酯;提取纯化;莲必治;喜炎平;穿琥宁;炎琥宁【作者】李玉山【作者单位】西安佳德生物工程有限公司西安710075【正文语种】中文【中图分类】TQ351.0穿心莲为爵床科植物穿心莲Andjrographis panicalata （Burmf） Ness的草或叶。
穿心莲中含有多种二萜类化合物，主要包括穿心莲内酯（穿心莲乙素）、脱水穿心莲内酯（穿心莲丁素）、脱氧穿心莲内酯（穿心莲甲素）、新穿心莲内酯（穿心莲丙素）、高穿心莲内酯等多种苦味素成分，其中，抗菌消炎的主要成分为穿心莲内酯和新穿心莲内酯，穿心莲全草可入药，具有清热解毒、消炎凉血止肿的功效[1]，被广泛应用于肠胃炎、肺炎、中耳炎、支气管炎、痢疾、咽喉炎、外伤感染、水火烫伤、蛇毒咬伤、尿路感染、风热感冒、扁桃体炎、阴囊湿症、痛疖疱疡等的治疗[2]，被誉为“天然广谱抗生素药物”，临床应用广泛。
穿心莲内酯提取工艺
穿心莲内酯提取工艺
穿心莲内酯是一种重要的药用成分，具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗氧化等多种生物活性。
下面介绍穿心莲内酯的提取工艺。
1. 原料选择：选用优质穿心莲干燥品，干燥后粉碎成粉末备用。
2. 提取溶剂选择：以乙醇或水为溶剂进行提取。
3. 提取工艺：
（1）以50%乙醇为溶剂，8倍量提取。
在60℃水浴中加热搅
拌4小时，静置2小时，过滤并收集滤液。
收集滤液后加入相同量的50%乙醇，重复该过程2次，将收集的滤液混合，进
行蒸馏浓缩，得到浓缩液。
（2）以水为溶剂，10倍量提取。
在90℃水浴中加热搅拌4小时，静置2小时，过滤并收集滤液。
收集滤液后加入相同量的水，重复该过程2次，将收集的滤液混合，进行蒸馏浓缩，得到浓缩液。
4. 精制工艺：对浓缩液进行再结晶，以乙醇/乙醚作为溶剂，
将浓缩液溶于溶剂中，保持温度在5-10℃，搅拌30分钟，静
置10小时，过滤，收集晶体，重复该过程2次，将收集的晶
体干燥至恒重即可。
以上是穿心莲内酯提取工艺的基本流程，具体操作过程需要根据实际情况进行适当调整。
穿心莲内酯为二萜内酯类化合物
穿心莲中穿心莲内酯的提取与分离方法设计辛艳制药1093班10310509324摘要穿心莲为解毒消炎类临床常用药。
大量的药理研究发现，穿心莲中的脂溶性成分穿心莲内酯不仅具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌、抗心血管疾病。
穿心莲内酯为二萜内酯类化合物,结构复杂,人工合成困难,国内均从植物中提取.提取分离方法有醇提法、水提法、微波和超声波及酶前处理法辅助提取法.分离方法有大孔树脂吸附法超临界流体萃取结晶法。
利用Micllael加成、羟基上的反应、分子内环化、分子内酯环化等反应进行结构修饰取得了新的研究进展。
随着对其药理作用及其机制以及结构修饰的深入研究,将极大地促进穿心莲内酯类新药的研究和开发。
关键词穿心莲内酯超声波纤维素酶大孔树脂The Extraction and purification of Andrographis PanicultaAndrographis detoxification anti-inflammatory commonly used in clinical medicine. Pharmacological study found that the liposoluble constituents Andrographis Andrographolide not only has anti-inflammatory, anti-bacterial, anti-viral, anti-cancer,anti-cardiovascular disease. Andrographolide diterpene esters, complex structure, synthetic difficulties, domestic are extracted from plants. Extraction methods of ethanol extraction, water extraction, microwave and ultrasonic assisted extraction method. Macroporous resin separation method The adsorption of supercritical fluid extraction crystallization. By Micllael addition, hydroxyl reaction, intramolecular cyclization, molecular lactone ring reaction structure modification made new progress. With thein-depth study of its pharmacological effect and its mechanism and structure modification, will greatly contribute to the research and development of new drugs Andrographis lactones.Keywords Andrographolide Ultrasonic wave cellulose macroporous resin穿心莲的性状多年生草本，高50～100厘米，茎立。
穿心莲内酯的提取分离和鉴定精选全文完整版
可编辑修改精选全文完整版穿心莲内酯的提取分离和鉴定一、目的要求学习中药中内酯类成分的提取分离及检识，通过实验要求：1.掌握从穿心莲中提取、分离穿心莲内酯的操作方法。
2.熟悉穿心莲内酯类成分的性质和检识方法。
3.了解去除叶绿素的方法。
二、实验原理穿心莲中的内酯类化合物易溶于甲醇、乙醇、丙酮等溶剂，故利用性质选用乙醇提取之；穿心莲中含有大量叶绿素，可用活性炭脱色除去叶绿素类杂质；利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯在乙酸乙酯中溶解度不同，初步讲两者分离；利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯结构上的差异，用氧化铝柱分离二者。
三、实验仪器与试剂仪器：圆底烧瓶、旋转蒸发仪、冷凝管、烧杯、天平、胶头滴管、试管、量筒、薄层板等试剂：穿心莲粗品、穿心莲对照品、乙醇、乙酸乙酯、活性炭、碳酸钠、水等四、实验过程（一）提取分离流程图穿心莲粗粉20克0.01%、8倍量的碳酸钠煎煮2次，每次2 h合并提取液提取液用25%HCl调节PH至6-710%活性炭脱色，蒸发(1/4-1/5)中性氧化铝柱色谱乙醇洗脱95%乙醇溶解精制穿心莲内酯五、注意事项1、穿心莲内酯类化合物为二萜类内酯，性质极不稳定，易氧化、聚合而树脂化。
因此所提取的穿心莲应是当年产的新药材，并且要未受潮变质的茎叶部分，否则内酯含量明显下降至极低，难以提取得到。
2、水提取一般可将多糖等多种水溶性杂质提取出来，水提取出膏率较高，但穿心莲内酯水溶性较低，不适合穿心莲的提取。
3、穿心莲内酯的析晶宜在含乙醇量稍高的情况下进行，此时晶形与结晶的纯度都较好。
当溶液的含水量较高，或粘稠度太大时，往往不易析出结晶。
4、加入的活性炭不能过多，否则会吸附穿心莲内酯，使产率降低。
六、思考题1、为什么要对提取工艺进行实验研究?答：通过对药材穿心莲提取溶媒、回流提取时间、提取次数及产品收率等方面的实验考察改进了穿心莲内酯的提取工艺，保证了该产品质量．。
穿心莲内酯的提取工艺研究
毕业设计（论文）2012 届题目穿心莲内酯的提取工艺研究专业制药工程学生姓名方梅芬学号08092312指导教师尹莉论文字数10319字完成日期2012年5月湖州师范学院教务处印制穿心莲内酯的提取工艺研究08092312方梅芬(湖州师范学院生命科学学院，湖州313000)摘要：在单因素试验的基础上，采用正交试验法优选穿心莲内酯超声波提取法最佳提取条件。
以穿心莲茎干粉末为原料，改变超声振荡功率、时间、料液比、不同溶剂、反应温度等单因素变量，提取液经配制后测量吸光度值，选定三水平后进行正交试验。
以穿心莲内酯对照品制备标准液，计算回归方程为：Y=13.7828x-0.0074，R2=0.9692。
结果表明，超声波提取的最佳工艺条件为：在60℃下，以乙酸乙酯为溶剂，料液比为1:30，功率为140w，超声提取60min，测得穿心莲提取液的吸光度为0.951。
关键词：穿心莲内酯; 超声波; 提取Extraction Process of Andrographolide08092312FANG Meifen（School of Life Science，Huzhou Teachers College，Huzhou 313000 ）Abstract: On the basis of one-factor experiment, orthogonal experiment method was employed for the optimization of ultrasonic extraction of Andrographis paniculta lactone. To stem powder andrographis as raw materials, change the single factor variables of ultrasonic oscillator power, the oscillator time, the solid-liquid ratio, the different solvent and the reaction temperature, extrat after configuration measuring absorbance, and then selected three levels before orthogonal experiment. With andrographis paniculta lactone reference substance preparation standard fluid, calculate a regression equation for: Y = 13.78281 x -0.0074 R2 = 0.9692. The optimum conditions of ultrasonic extraction of Andrographis paniculta lactone as follows: in 60 ℃, use ethyl acetate, the solid-liquid ratio is 1: 30, ultrasonic oscillator power is 140 w, and ultrasonic extraction 60 min. measuring absorbance Andrographis paniculta extrat is 0.951.Key words: andrographis paniculta lactone; Ultrasonic; Extracted; absorbance目录1 引言 (1)1.1穿心莲简介 (1)1.1.1穿心莲1.1.2穿心莲内酯的药理活性1.2超声提取概述 (1)2 实验材料与仪器 (2)2.1实验材料 (2)2.2实验试剂 (2)2.3实验器材与仪器 (3)2.4试剂的配制 (3)3 实验方法 (4)3.1实验原理 (4)3.1.1单因素试验设计3.1.2正交试验设计3.1.3紫外-可见吸收光谱3.1.4活性炭脱色3.2实验步骤 (5)3.2.1含量测定方法3.2.2 标准曲线的绘制3.2.3单因素试验3.2.4正交试验3.2.5验证实验3.2.6穿心莲内酯的鉴别4 结果与讨论 (8)4.1实验结果 (8)4.1.1标准曲线绘制4.1.2以超声振荡时间为单因素变量的实验结果4.1.3以超声功率为单因素变量的实验结果4.1.4以料液比为单因素变量的实验结果4.1.5以不同溶剂为单因素变量的实验结果4.1.6以反应温度为单因素变量的实验结果4.1.7正交试验结果4.1.8验证实验结果4.2实验结果讨论 (13)4.2.1单因素试验结果讨论4.2.2正交试验结果讨论5 总结与展望 (14)5.1总结 (14)5.2展望 (14)参考文献 (15)致谢 (17)1. 引言1.1穿心莲简介1.1.1穿心莲穿心莲Andrograph is paniculata (B urm. f.) Nees为穿心莲属植物,别名一见喜、斩蛇草、苦草、四方草、印度草[1],主要产于广东、福建等地。
穿心莲内酯的提取及纯化工艺研究进展
穿心莲内酯提取纯化工艺研究进展生命科学与技术学院刘曼丽（2010001320）摘要：穿心莲内酯是中药穿心莲的主要有效成分, 其提取方法除醇提法与水提取法外,超声、微波、酶解等方法的应用, 既提高了收率, 又降低了成本。
穿心莲内酯的纯化方法主要有打孔树脂吸附法、超临界二氧化碳梯度结晶法等。
关键词：穿心莲内醋；提取；纯化；研究进展The Extraetion and Purifieation of Andrographolide Abstract:Andrographolide is the main active ingredients of Andrographis, the extraction methods except ethanol extraction and water extraction, the application of ultrasonic, microwave, hydrolysis and other methods, both improving the yield and reducing costs. The purification methods of andrographolide are macroporous resin adsorption and supercritical carbon dioxide gradient crystallization method.Key words: Andrographolide; Extraction; Purification; Research穿心莲内酯(Andrographolide)为爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata (Burm.f.)Ness的主要活性成分，现代药理研究表明其具有消炎、抗病毒、抗肿瘤、提高免疫力、保肝利胆、抗生育等药理作用。
穿心莲内酯为酯类结构，在水溶液中易水解、开环、异构化，故影响药物稳定性。
穿心莲内酯检验操作规程
四川省宜宾五粮液集团宜宾制药有限责任公司穿心莲内酯检验操作规程1 目的：建立穿心莲内酯检验操作规程。
2 范围：适用于穿心莲内酯的检验，使穿心莲内酯的检验规范化、标准化。
3 引用标准：《中国药典》2010年版一部 P387 穿心莲内酯4 责任：检验员对检验过程及数据负责；复核人对检验结果的复核负责。
5 内容：5.1 性状：本品为无色结晶性粉末，无臭，味苦。
5.2 鉴别：5.2.1 试剂和溶液：乙醇、3,5-二硝基苯甲酸乙醇溶液、5%氢氧化钠溶液、乙醇制氢氧化钾试液、无水乙醇。
5.2.2 仪器与设备：紫外分光光度仪、烧杯、量筒、天平。
5.2.3 分析步骤：a) 取本品约10mg，加乙醇2ml溶解后，加2%的3,5-二硝基苯甲酸的乙醇溶液与5%氢氧化钾的乙醇溶液各2滴，混匀，即显紫红色。
b) 取本品约10mg，加乙醇2ml溶解后，加乙醇制氢氧化钾试液2～3滴，渐显红色，放置后变为黄色。
c) 取本品，加无水乙醇制成每1ml中含10ug的溶液，照《紫外-可见分光光度法》测定，在224nm的波长处有最大吸收。
5.3 检查：5.3.1 熔点：a) 仪器与设备：熔点仪。
b) 分析步骤：取本品，照《熔点测定法》DR.SOP/QC.Ⅸ010测定，熔点应为224～230℃，熔融同时分解。
5.3.2 其他内酯：a) 试剂和溶液：无水乙醇、三氯甲烷、甲醇、2%3,5-二硝基苯甲酸的乙醇溶液、5%氢氧化钾的乙醇溶液。
b) 仪器与设备：硅胶G薄层板。
c) 分析步骤：取本品，加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液作为供试品溶液，照《薄层色谱法》DR.SOP/QC.Ⅸ012试验，吸取上述溶液10ul，点于硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（19：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%3，5-二硝基苯甲酸的乙醇溶液与5%氢氧化钾的乙醇溶液的等量混合液（临用配制）。
供试品色谱中，除主斑点外，不得显其他斑点。
5.3.3 干燥失重：a) 仪器与设备：电子天平、鼓风干燥箱、称量瓶。
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穿心莲内酯的提取
分离及鉴定
2011级16班
摘要：穿心莲为解毒消炎类临床常用药，穿心莲内酯是中药穿心莲的主要有效成分，分子式C20H30O5，白色方形或长方形结晶，味极苦，难溶于水易溶于乙醇、甲醇等。
利用乙醇提取方法、超声、回流、旋转蒸发浓缩方法对穿心莲内酯进行提取分离以及纯化，使用TLC法对其鉴别，可得到纯度较高的穿心莲内酯。
关键词：穿心莲、穿心莲内酯、超声提取法、乙醇提取法、TLC鉴别
Isolation & Identification of Andrographolide
ABSTRACT:Clinical commonly used medicines, creat for detoxification counter Andrographolide is the main effective component, Traditional Chinese medicine (TCM) andrographis formula C20H30O5, white square or rectangle crystal, taste bitter, soluble in water, soluble in ethanol，methanol, ing the ethanol extract method, ultrasound, reflux, rotary evaporation enrichment method to extraction separation and purification of Andrographolide, using TLC method for the identification, can get high purity Andrographolide.
KEY WORDS:Andrographis paniculata；Ultrasonic extraction；Andrographolide；alcohol extraction；Thin layer chromatography (TLC)
穿心莲为常用中药，来源于爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata（Burm. f.）Nees.的干燥地上部分。
收载于《中国药典》2000 年版一部。
具有清热解毒，凉血，消肿的功能，临床用于感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮、顿咳劳嗽、泄泻痢疾、热淋涩痛、痈肿疮疡、毒蛇咬伤等。
其主要活性成分为穿心莲内酯（andrographoiide）、新穿心莲内酯（neoandrographoiide）脱水穿心莲内酯（dehydroandrographoiide）[4]。
穿心莲内酯为天然植物穿心莲的主要有效成份，具有祛热解毒，消炎止痛之功效，对细菌性与病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊疗效，被誉为天然抗生素药物。
本品为二萜类内酯化合物，均难溶于水，通常仅能口服给药。
主要药理作用：抗菌作用、抗病毒作用、利胆保
肝作用、抗心脑血管疾病作用、抗肿瘤作用。
穿心莲内酯(andrographolide)又称穿心莲乙素。
分子式C20H30O5，分子量350.44。
无色方形或长方形结晶，味极苦。
mp.230～231℃，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶中，微溶于氯仿、乙醚、难溶于水、石油醚、苯。
1、材料
1．1实验仪器和试剂
仪器：烧杯，玻璃棒，铁架台，球形冷凝管，研钵，药勺，恒温水浴锅，超声仪，减压抽滤器，滤纸，薄层板，旋转蒸发仪，布氏漏斗，冰箱，毛细管，吹风机，烘箱，试剂：95%乙醇，活性炭，乙酸乙酯，单质碘，CMC-Na溶液,硅胶粉，
1．2实验材料
实验室提供的穿心莲粉末
2、方法和结果
2．1提取和分离
穿心莲内酯粗品的提取：取50g穿心莲粉末于烧杯中，加入适量的95%乙醇溶液，搅拌，静置10min,于50℃恒温水浴锅中超声提取40min,提取时应注意防止乙醇的挥发用保鲜膜封住烧杯口，然后过滤，滤渣再加入10倍量95%乙醇再超声提取40min过滤，提取两次后合并提取液（深绿色液体，含有叶绿素及其他杂质），在提取液中加入6g活性炭，于75℃（温
度不能高于80℃，否则易发生水解）恒温水浴锅中水浴加热30min脱色，趁热抽滤，滤液再加入5g活性炭于75℃恒温水浴锅中水浴加热30min脱色，趁热抽滤，加热浓缩，滤液浓缩至15ml（呈微黄色液体，稍微浑浊），自然冷却，静置48小时析晶，若无晶体析出或是析出晶体较少，可继续静置析晶，过滤取晶体（淡黄色，有较多杂质），得到穿心莲内酯粗品（淡黄色晶体）[5]、[7]。
抽滤液点板结果浓缩液点板结果
浓缩液中粗品的析出抽滤得到的粗品（淡黄色）取少量晶体溶于乙醇中，取少量溶液点板，以乙酸乙酯-95%乙醇（7.5:2）为展开剂，鉴别检查粗品。
穿心莲内酯粗品的精制：取粗品晶体，称量得1.38g,加入约40mL乙酸乙酯溶解，于75℃
恒温水浴锅中回流30min,过滤取滤液，再于75℃恒温水浴锅中回流30min，过滤取滤液，自然冷却，于冰箱中静置48小时析晶（析出白色晶体），过滤得到白色晶体，称量得到精制穿心莲内酯0.34g。
2.2穿心莲内酯的鉴定
取少量晶体溶于适量乙醇中，使用硅胶：G-CMC-Na（1:3）的薄层板（事先铺好，经过活化好的薄层板）用毛细管取吸对照溶液和样品液点板，以乙酸乙酯-95%乙醇（7.5:2）为展开剂，在展开槽中展开完毕立即吹干，用碘单质熏板使显示两个黄色的点，以大致鉴别检查最后得到的穿心莲内酯的纯度。
点板显示得到的穿心莲内酯纯度较高。
穿心莲内酯粗品点板结果精制穿心莲内酯TLC鉴别（左：对照点，右：样品点）
穿心莲内酯精品（0.34g）
实验产率（%）：0.34/50×100%=0.68%
3、讨论
①据文献报道，穿心莲主要有效成分为二萜内酯类成分，具有解热、抗炎、镇静等作用。
其中以穿心莲内酯含量较高，以醇提工艺穿心莲内酯含量较高。
因为穿心莲内酯易水解提取时应注意温度（实验中控制温度不得大于80℃）与溶液pH（穿心莲内酯在碱性坏境中容易水解），以防止穿心莲内酯在提取过程中水解而对产率影响较大。
经过与同实验室其他小组提取方法比较，超声波的介入显著缩短了浸提时间，明显加快了溶出效率，同时也保证了其稳定性。
超声波提取具有高效、节能、降低工艺成本，且安全性大的特点。
②本次实验产品纯度较好但产率较低，可能原因是穿心莲内酯类化合物为二萜类内酯，性质极不稳定，易氧化、聚合。
可也能是在提取时，如用热乙醇加热回流提取穿心莲总内酯，能同时提出大量穿心莲中的叶绿素、树脂以及无机盐等杂质，使析晶和精制较为困难，产率较低。
③穿心莲内酯类化合物为二萜类内酯，性质极不稳定，易氧化、聚合而树脂化。
因此所提取的穿心莲应是当年产的新药材，并且要未受潮变质的茎叶部分，否则内酯含量明显下降至极低，难以提取得到。
④水提取一般可将多糖等多种水溶性杂质提取出来，水提取出膏率较高，但穿心莲内酯水溶性较低，不适合穿心莲的提取。
⑤穿心莲内酯的析晶宜在含乙醇量稍高的情况下进行，此时晶形与结晶的纯度都较好。
当
溶液的含水量较高，或粘稠度太大时，往往不易析出结晶，实验时使用的是95%乙醇。
⑥在活性炭脱色的过程中，要注意控制活性炭的量，加入过多在吸附杂质的同时也是产品损失较大，降低产品产率。
⑦本实验由于考虑到穿心莲内酯热不稳定性，活性炭脱色时采用75℃水浴加热30min脱色（两次），精制回流是也是75℃水浴加热30min（两次），控制温度小于80℃，使穿心莲内酯不被破坏水解。
4、参考文献
[1]徐靓，穿心莲内酯的提取及纯化工艺研究，成都理工大学硕士学位论文[J]．20070501．
[2]赵玉江，李勇，吴修红，孟祥才，不同提取方法对穿心莲内酯含量的影响[J]．黑龙江医药2006，3（19）．
[3]聂凌云，罗兴平，穿心莲提取工艺的研究及热稳定性考察[J]．解放军药学学报，第 2l 卷第 l 期．
[4]李曙光，叶再元，穿心莲内酯的药理活性作用[J]．2 0 08年5月，第26卷第5期．
[5]刘蕾，许笑笑，韩光，均匀设计法优化穿心莲的提取工艺[J]．河南大学学报（医学版），2006 年 11 月，第 25 卷第 4 期．
[6]张建强，张玲，王欢，孙英法，穿心莲提取工艺研究[J]．食品与药品，中华中医药学刊，2 0 08年5月，第26卷第5期．
[7]卓菊，汪小根，正交设计研究穿心莲中脱水穿心莲内酯提取工艺[J]．中南药学，2005年6月第3卷第3期．。